基础医学与临床杂志
Basic & Clinical Medicine 기초의학여림상
- 主管单位： 北京市科学技术协会
- 主办单位： 北京生理科学会
- 影响因子： 0.66
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 82-358
- 国内刊号： 1001-6325
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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外源EGFP表达对肿瘤细胞体外生物学行为的影响
目的 探讨常用的可视化细胞标记技术-外源EGFP表达对肿瘤细胞生物学行为的影响.方法 选择不同的携带EGFP的载体,利用脂质体转染或慢病毒感染技术,在不同肿瘤细胞系中表达外源EGFP,筛选稳定表达外源EGFP的细胞系,MTT法检测细胞体外增殖能力；细胞分析计数仪(CasyTT型)检测细胞大小；Transwell体外迁移实验检测细胞体外侵袭能力.结果 成功建立了稳定表达外源EGFP的人结肠癌细胞系HCT116-GFP、HCT116-EGFP、COLO320DM-EGFP和小鼠树突状细胞肉瘤细胞系DG6-EGFP.HCT116-EGFP细胞、COLO320DM-EGFP细胞和DG6-EGFP细胞的体外增殖能力明显降低；HCT116-EGFP细胞体积增大:平均直径分别为(14.53±0.07) μm( HCT116)和(18.28±0.16) μm (HCT116-EGFP) (P＜0.01)；HCT116-EGFP细胞的体外侵袭能力明显降低(P＜0.01).结论 外源EGFP可视化标记细胞后,可能会影响肿瘤细胞的生物特性,利用这些模型进行科研时,需注意对相关指标的影响.
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CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞抑制肺结核患者特异细胞免疫
目的 了解结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞在抑制结核患者结核特异细胞免疫反应中的作用.方法 使用细胞分离、流式细胞分析、细胞增殖和细胞因子测定等方法,比较结核患者及健康正常人群外周血中CI4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞的量及功能特征的差异.结果 结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞数占CD4+细胞总数的比例显著高于健康正常人群；在BCG及ESAT-6的刺激下,结核患者外周血单个核细胞增殖能力和产生γ-干扰素的能力比健康正常人群明显增强.在BCG刺激下,结核患者外周血CI4-细胞产生γ-干扰素[(1 289.62 +519.01)μg/L]及白介素-10[(1 045.40±534.12) μg/L]的能力比结核患者外周血PBMCs细胞产生γ-干扰素[ (624.50 +261.13) μg/L]及白介素-10[ (377.00±249.56) μg/L]的能力显著增强(P＜0.05)；在BCG及ESAT-6的刺激下,结核患者外周血CI4+ CD25+调节T细胞显著抑制结核患者外周血CD4+ CD25 -细胞产生γ-干扰素及白介素-10.结论 结核患者CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞数量增多,抑制结核患者结核特异细胞免疫反应功能增强,可能与结核的发生、发展及转归有密切关系.
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脓毒症患者血浆sCD14的动态变化及其临床意义
目的 研究脓毒症患者血浆可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)的动态变化及其临床意义.方法 选择北京朝阳医院急诊重症监护病房2009年8月-2010年3月脓毒症患者60例,另选20名健康正常人为对照组.脓毒症组根据多脏器功能不全综合征(MODS)临床诊断标准分为MODS(33例)和非MODS(27例)两个亚组.脓毒症组在明确诊断后第1、3、7天检测血浆sCD14的水平并且计算患者当天的APACHEⅡ评分.结果 与正常对照组相比,脓毒症组血sCD14浓度显著升高(P＜0.01)；MODS组血sCD14浓度[(5.3±2.4) mg/L]与非MODS组sCD14浓度[(3.8±2.8) mg/L]比较明显升高(P ＜0.05)；MODS组APACHEⅡ评分较非MODS组升高(P＜0.05)；血sCD14浓度与APACHEⅡ评分具有正相关(P＜0.05).结论 脓毒症患者血浆中sCD14升高,sCD14浓度较高的患者APACHEⅡ评分较高,病情危重.
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遗传性弥漫型胃癌家系上皮型钙黏素基因的分析
目的 研究在遗传性弥漫型胃癌家系中是否存在上皮型钙黏素基因(CDH1)以及基因表达的异常.方法 收集符合遗传性弥漫型胃癌(HDGC)诊断标准的1个家系中15例成员的外周血和组织标本.用免疫组化和Westernblot法检测组织CDH1蛋白表达；提取基因组DNA,通过PCR扩增DNA直接测序检测CDH1基因16个外显子突变.用克隆测序法,鉴定CDH1基因启动子区CpG位点甲基化状况.结果 先证者和另一胃癌患者(家系2号成员)的癌旁胃黏膜上皮细胞CDH1蛋白表达较正常胃黏膜减弱,两者肿瘤组织的蛋白表达几乎为阴性.包括先证者在内的11例家系成员第14外显子mRNA水平2 377位点存在一个C→T的单核苷酸多态性(SNP),但未检测到16个外显子的胚系突变.相对于正常胃黏膜,先证者和家系2号成员的胃癌组织均有CDH1基因启动子的高甲基化,其瘤旁黏膜也有高甲基化.结论 此HDGC家系中,CDH1基因外显子胚系突变不是其致病原因,基因启动子区的甲基化可能是导致基因失活的原因之一.
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既往肝外恶性肿瘤病史患者的肝移植
目的 探讨既往有肝外恶性肿瘤病史患者的肝移植手术适应症和疗效.方法 2例术前分别因直肠癌和乳腺癌接受过根治性外科手术的患者,因肝癌或肝硬化接受同种异体原位肝移植术,术后采用个体化免疫抑制和化疗方案.结果 2例患者术后恢复顺利,分别随访79个月及34个月,肝功能良好,既往肝外肿瘤均未见复发.结论 对既往有肝外恶性肿瘤的患者肝移植手术并非禁忌,选择合适的受者并采取个体化免疫抑制方案,可以取得满意疗效.
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宫颈癌患者血清相关蛋白的初步分离及鉴定
目的 寻找宫颈癌患者和对照组血清之间的蛋白差异,并以质谱技术进行鉴定.方法 表面增强激光解析电离化飞行时间质谱( SELDI-TOF-MS)分析两组血清得到差异蛋白(或肽段),进一步分离纯化差异蛋白,后以液相色谱-电喷雾-串联质谱(LC-ESI-MS/MS)进行鉴定.结果 宫颈癌患者和对照组血清之间差异蛋白12个(P＜0.05),其中质荷比M/Z 15.96 ku的差异蛋白进行分离纯化鉴定,转甲状腺素蛋白前体(TTR)的分子质量为接近,转录中介因子1-β(TIF1-β)的蛋白生物学行为与肿瘤相关,它的表达可能引起肿瘤相关基因的失活或活化,导致肿瘤发生发展.结论 SELDI-TOF-MS寻找差异蛋白并辅助蛋白分离纯化,LC-ESI-MS/MS鉴定蛋白为可行技术路线.鉴定M/Z 15.96 ku的差异蛋白,TTR分子质量与之接近,而TIF1-β与肿瘤发生发展更相关.
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用慢病毒载体介导的RNAi感染CB3细胞后抑制FLI-1的表达
目的 观察慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)方法 对小鼠红白血病细胞(CBa)中FLI-1基因表达的抑制作用.方法 设计制备针对目的基因FLI-1的小干扰RNA( siRNA),构建制备目的基因的siRNA慢病毒载体,PCR阳性菌落进行测序鉴定,对慢病毒包装与滴度测定后感染CB3细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况.RT-PCR和Western blot检测病毒感染CB3细胞后FLI-1的表达.结果 成功构建了针对FLI-1基因的siRNA慢病毒载体,并包装成慢病毒颗粒,病毒滴度为1.5E+9TU/mL,并可将其高效感染CB3细胞,病毒感染后FLI-1在转录水平和翻译水平的表达量显著低于对照组和未感染病毒组(P＜0.001).结论 成功构建了针对FLI-1基因的siRNA慢病毒载体,并可有效抑制CB3细胞中FLI-1基因的表达.
关键词： FLI-1:RNA干扰 慢病毒载体 -
RNA干扰沉默BAX基因抑制大鼠软骨细胞凋亡及其可能机制
目的 研究RNA干扰沉默BAX基因表达对经线粒体途径大鼠软骨细胞凋亡的影响.方法 体外分离培养SD大鼠软骨细胞；BAX siRNA干扰沉默BAX基因表达.RT-PCR检测BAX mRNA；MTT法检测细胞活力；Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率；Western blot检测BAX、BCL-2、细胞色素C蛋白的表达.结果BAX siRNA干扰24h后,BAXmRNA表达为1.030±0.153,对照组为1.836±0.164；蛋白质的表达为0.359±0.089,对照组为0.766±0.082,实验组较对照组明显下调(P＜0.01).细胞凋亡受到明显抑制,对照组、model组、model+ BAXgiRNA组和model+ control siRNA组细胞凋亡率分别为2.87％、20.07％、9.21％和21.19％,并且在BAX基因沉默的细胞中,细胞色素C蛋白表达水平降低,同时BCL-2蛋白表达水平升高.结论RNA干扰沉默BAX基因可抑制大鼠软骨细胞凋亡并且促进其存活,其机制可能与线粒体途径相关.
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43例中国人眼部恶性黑色素瘤cKit和BRAF基因突变分析
目的 分析中国人眼部恶性黑色素瘤中cKit和BRAF基因突变情况.方法 收集43例中国眼部恶性黑色素瘤患者组织标本(脉络膜恶性黑色素瘤30例,结膜恶性黑色素瘤13例),采用巢式PCR扩增和基因测序的方法检测cKit基因第9、11、13、17和18外显子以及BRAF基因第15外显子突变情况.结果 cKit基因在脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率达16.7％ (5/30),而在结膜恶性黑色素瘤中突变率仅为7.7％ (1/13)；在结膜恶性黑色素瘤中检测到1例BRAF基因突变(1/13),在脉络膜恶性黑色素瘤中未检测到BRAF基因突变.结论 cKit基因在中国脉络膜恶性黑色素瘤患者中突变率较高,提示以cKit为靶标的靶向药物未来有可能为中国脉络膜恶性黑色素瘤患者带来新的希望.
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转化生长因子β1对乳鼠心肌细胞转化生长因子结合蛋白2表达的影响
目的 探讨转化生长因子β1 (TGF-β1)在诱导心肌细胞表达转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)中的作用及信号传导通路.方法 培养乳鼠心肌细胞；实时定量聚合酶链式反应、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测不同时间和不同浓度的TGF-β1对大鼠乳鼠心肌细胞LTBP2基因及蛋白表达的影响；用TGF-β1相关信号通路阻断剂探讨TGF-β1调节LTBP2表达改变的信号传导机制.结果 LTBP2基因表达随着TGF-β1浓度增加(0、2、5及10 μg/L)而明显升高,在5μg/L时刺激强(P＜0.05);5μg/L的TGF-β1刺激下心肌细胞内LTBP2基因和蛋白表达的升高呈时间依赖性,均在12 h高,24 h开始呈下降趋势(P＜0.05或P＜0.01)；免疫细胞化学结果显示TGF-β1明显升高LTBP2的表达.信号传导通路研究显示TGF-β1在心肌细胞内主要通过ERK信号通路和PI3K信号通路诱导LTBP2的表达.结论TGF-β1在乳鼠心肌细胞内通过ERK信号通路和PI3K信号通路上调LTBP2的表达.
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海马NDMA受体与胃肌间神经丛NOS阳性神经元在慢性应激性胃运动变化中的关系
目的 探讨慢性应激对大鼠胃功能和胃肠神经系统的影响,并分析其海马谷氨酸(Glu)离子型受体机制.方法 通过建造慢性应激性抑郁模型大鼠,结合脑立体定位及微量注射Glu和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体阻断剂MK-801,对实验鼠进行糖水偏爱等行为学检测、胃内压记录及胃内在神经丛的一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元表达的组织化学检测.结果 慢性不可预见性温和应激(CUMS)动物表现出抑郁样行为,且胃运动减弱；海马注射NMDA受体阻断剂MK-801,可以反转CUMS的效应；海马注射Glu,能增加游泳不动时间,但对胃运动无影响.CUMS使胃肌间神经丛NOS阳性神经元数量减少[(73.74±16.38 )/LPF,P＜0.05],神经节数量减少[(4.25±1.34)/LPF,P＜0.05],但每个神经节内神经元数量明显增加(6.55±2.37,P＜0.05)；海马注射MK-801能改善CUMS引起的神经节数量减少的现象.结论 慢性应激诱发的抑郁样行为与海马Glu及其NMDA受体有关,而胃活动的减弱可能与海马NMDA受体变化影响胃肌间神经丛NOS神经元分布格局有关.
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阻断PLCE基因对膀胱癌细胞侵袭能力的影响
目的 构建PLCE基因的shRNA表达载体转染膀胱癌细胞T24株,观察其对T24细胞转移侵袭等恶性行为的影响.方法 设计合成PLCE基因mRNA的寡核苷酸序列,插入绿色荧光蛋白质粒真核表达载体pGenesil中,构建重组载体pGenesil-PLCε.重组载体转染T24细胞后,RT-PCR和Western blot检测PLCE基因和蛋白表达；以侵袭小室、明胶酶谱分析及免疫组化检测细胞侵袭能力.结果 成功构建了针对PLCE基因的shRNA表达载体.两个阳性重组质粒P1和P2转染膀胱癌细胞T24,P1和P2组目的基因/内参照吸光度比值较空载HK-A组明显降低(P＜0.01)；P1和P2组目的蛋白/内参照吸光度比值较空载HK-A组明显降低(P＜0.01).细胞侵袭实验中阳性质粒P1和P2转染组穿膜细胞数也明显低于空白对照组和阴性质粒HK-A转染组(P＜0.01)；转染P1、P2均使细胞分泌MMP-2、MMP-9明显低于空白对照和HK-A转染组(P＜0.01).结论 阻断PLCE基因能有效抑制膀胱癌T24细胞系中PLCE基因和蛋白表达,并对T24细胞的侵袭转移能力具有一定的抑制作用.
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三七总皂甙降低兔肺缺血再灌注损伤和抑制细胞凋亡
目的 探讨细胞凋亡与肺缺血再灌注损伤的关系以及三七总皂甙的作用及机制.方法 健康日本大耳白兔84只,随机分为对照组、肺缺血再灌注1、3、5h组和相应三七总皂甙干预组.复制肺缺血再灌注损伤模型.用原位缺口末端标记(TUNEL)法、聚丙烯酰胺凝胶电泳观测肺组织细胞凋亡,原位杂交技术检测肺组织细胞Fas/FasL系统和caspase-3基因表达.结果肺缺血再灌注组肺组织细胞凋亡指数(肺缺血再灌注5h组:22.08±1.93；对照组:2.04±0.67)、Fas/FasL和aspase 基因表达(肺缺血再灌注5h组:0.241 *0.029;对照组:0.121 ±0.015)均显著高于对照组(P＜0.01),并出现电泳梯形条带结构；三七总皂甙干预组Fas/FasL mRNA及其caspase-3的表达(三七总皂甙干预5 h组:0.199 ±0.020;肺缺血再灌注5h组:0.241 ±0.029)显著低于缺血再灌注组(P＜0.01),肺组织细胞凋亡指数(三七总皂甙干预5h组:12.58±1.82;肺缺血再灌注5h组:22.08±1.93)也显著低于缺血再灌注组(P＜0.01),梯形条带结构基本消失.肺组织细胞凋亡指数分别与caspace mRNA及Fas/FasL mRNA之间均呈显著正相关(P＜0.01).结论 三七总皂甙可能通过抑制Fas/FasL系统的激活,阻遏肺组织细胞凋亡,从而减轻肺缺血再灌注损伤.
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低氧对食管癌Eca109细胞体外迁移及侵袭的影响
目的 探讨低氧对食管癌迁移及侵袭能力的影响及其作用机制.方法 采用CoCl2化学低氧法模拟肿瘤低氧微环境,半定量RT-PCR和免疫细胞化学分别检测不同低氧时相时食管癌Eca109细胞中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、E-钙黏蛋白及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA及蛋白的表达.Western印迹法检测雷帕霉素联合低氧处理Eca109细胞后,HIF-1α、E-钙黏蛋白及MMP-2的变化.细胞划痕试验和Transwell实验检测雷帕霉素联合低氧对Eca109细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 Eca109细胞在低氧状态下,HIF-1α mRNA无明显变化,仅蛋白表达增多；E-钙黏蛋白的mRNA表达明显降低(P＜0.05),蛋白表达减少；MMP-2 mRNA表达明显升高(P＜0.05),蛋白表达增多.雷帕霉素在低氧状态下可显著抑制HIF-1α及MMP-2表达,促进E-钙黏蛋白高表达.经雷帕霉素处理后,Eca109细胞在低氧状态下,迁移速度减慢,侵袭穿膜细胞数减少(P＜0.05).结论 低氧使Eca109细胞中HIF-1α蛋白表达增多,后者可能通过下调E-钙黏蛋白、上调MMP-2表达促进食管癌在低氧状态下的迁移及侵袭.
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Slug减轻照射鼠肠上皮细胞损伤及作用机制
目的 研究Slug过表达对照射鼠肠上皮细胞的保护作用及机制.方法 以体外培养的小肠隐窝上皮细胞IEC6和转染了Slug cDNA的IEC6为研究对象,对细胞进行6 Gy剂量γ射线照射,在照射48 h后观察细胞凋亡指数,免疫组化和Weatem blot法检测PUMA蛋白表达.结果 6Gy射线照射IEC6细胞48 h后的细胞凋亡指数为15.60±1.54,明显高于照射联合pcDNA3-Slug cDNA转染组的5.10±1.70(P ＜0.01)和单独pcDNA3-Slug cDNA转染组的2.21±0.36(P ＜0.01).6Gy射线照射IEC6细胞48 h后的PUMA相对表达为0.79±0.12,明显高于照射联合pcDNA3-Slug cDNA转染组的0.16±0.01(P ＜0.01),免疫组化和Weatem blot法检测结果一致.结论 上调Slug抑制射线诱导的细胞PUMA表达上调,抑制IEC6细胞凋亡.
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9-顺式维甲酸对甲状腺鳞癌SW579细胞周期及CYCLIND1、CDK4表达的影响
目的 探讨9-顺式维甲酸(9-cisRA)对甲状腺鳞癌细胞系SW579细胞周期及周期因子表达的影响.方法 分别以不同浓度的9 -cisRA处理SW579细胞系,采用MTT比色法测定细胞增殖活性；用流式细胞仪检测细胞周期；用RT-PCR方法检测SW579细胞CDK4、CYCLIND1 mRNA的表达水平；用Western blot法检测SW579细胞CDK4、CYCLIND1的蛋白表达.结果 9-cisRA作用后,各组细胞均出现显著的生长抑制作用,生长抑制率明显升高,并呈剂量依赖性.流式细胞仪分析,各组细胞均随着药物浓度的升高,S期细胞在细胞周期中所占比例逐渐减少,G1期细胞则明显增加(P＜0.01),细胞滞留在G1期.经不同浓度9-cisRA处理的细胞CDK4 mRNA和蛋白表达水平没有明显变化；CYCLIND1的mRNA和蛋白表达水平明显下调(P＜0.01).结论 9-cisRA显著抑制SW579细胞生长,可能与抑制CYCLIND1的表达并将细胞阻滞于G1期有关.
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电针对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑皮质eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响
目的 探讨电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内缺血皮质区eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响.方法 采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型.将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组.缺血2h后把模型组和电针组分为再灌注1、3和7d3个时间点.取双侧“合谷”穴(LI4)为电针刺激穴位.免疫组化法检测eNOS蛋白的表达；反转录聚合酶链法检测eNOS mRNA的表达；Western blot法检测eNOS、MMP-9蛋白的表达.结果与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区eNOS蛋白及mRNA表达显著增加(P＜0.01)；与模型组比较,电针组各时间点eNOS蛋白及mRNA明显增加(P＜0.01).eNOS蛋白表达于再灌注3d达高峰,假手术组表达为0.4291±0.0173,模型组再灌注3 d表达为0.7374 *0.0252,电针组表达为0.8536±0.0212,各组比较有显著差异(P＜0.01).与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区MMP-9蛋白的表达显著增加(P＜0.01)；与模型组比较,电针组MMP-9蛋白的表达于再灌注1d显著低于模型组(P＜0.01),再灌注3、7d电针组MMP-9蛋白的表达明显高于模型组(P＜0.01).结论 电针可上调局灶脑缺血/再灌注大鼠缺血皮质区eNOS蛋白及mRNA、MMP-9蛋白的表达.
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四环素基因调控系统的研究进展
四环素基因调控系统(Tet系统)是迄今为止基因治疗研究中使用广泛的系统,该系统通过改变培养基、体内四环素或其衍生物(如强力霉素)的浓度,诱导或抑制目标基因的表达.
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前列腺癌近距离治疗后勃起功能障碍相关的研究进展
前列腺癌近距离治疗与前列腺癌根治行切除术都能对早期前列腺癌患者起到根治的疗效,但前者发生勃起功能障碍的发生率较低.勃起功能障碍(ED)的定义为持续或反复不能达到并维持阴茎勃起状态而影响性生活,常使用国际勃起功能评分.其发生的原因可分为血管源性及非血管源性.前列腺癌近距离治疗后勃起功能障碍的治疗,是药物治疗、物理治疗及心理咨询相结合的综合性治疗.5型磷酸二酯酶抑制剂( PDE5)抑制剂和前列地尔是目前治疗前列腺近距离治疗后ED的一线用药.
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利用腺病毒载体介导的RNA干扰技术在悬浮细胞中获得基因沉默效应
目的 利用重组腺病毒载体携带短发夹RNA (shRNA),使难于转染的悬浮细胞达到较高的目的基因沉默效率.方法 分别将含有人胎盘生长因子(PLGF)的干扰序列及阴性对照序列(scramble)连入pRNAT-H1.1/Adeno载体,获得重组穿梭质粒；将线性化的重组穿梭质粒与腺病毒骨架重组；将重组子转染HEK 293细胞,经过3轮病毒包装,收获病毒颗粒并测定滴度.病毒颗粒感染悬浮细胞——人小细胞肺癌细胞(NCI-H 250和NCI-H 209),通过实时定量PCR方法鉴定靶基因沉默效应,并利用肿瘤细胞重建基质膜侵袭实验进行功能鉴定.结果 成功构建带有靶基因干扰序列及scramble、空载体的3种腺病毒重组子(AD-shuttle-shPLGF、AD-shuttlescramble和AD-shuttle).经过HEK 293细胞包装,终获得3株病毒颗粒,病毒滴度分别为1.5×1011、1.6×1011和1.6×1011.NCI-H 250和NCI-H 209细胞感染腺病毒颗粒48 h后,大部分细胞表达GFP,感染率接近100％；且两株细胞感染AD-shuttle-shPLGF病毒48 h后,PLGF mRNA表达水平降低(P＜0.01),肿瘤细胞侵袭能力明显下降(P＜0.01).结论 携带shRNA的腺病毒表达载体可以代替电转、脂质体介导等方法,使难于转染细胞的目的基因达到有效沉默.
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骨髓和脂肪来源的间充质干细胞免疫调节作用的比较
目的 比较脂肪源间充质干细胞(AMSCs)和骨髓来源间充质干细胞(BMSCs)的免疫调节能力的差异.方法 用流式细胞仪分析AMSCs和BMSCs的表型.通过MSCs和淋巴细胞共培养体系,检测MSCs对T细胞增殖、周期、活化、凋亡以及Th细胞分化的影响.结果 表型分析结果显示AMSCs和BMSCs的表型基本一致.AMSCs和BMSCs都能抑制T细胞的增殖和早期活化,并在调节辅助性T细胞亚群的分化上作用类似.但在MSC对活化后T细胞的凋亡影响方面,BMSCs能够抑制活化T细胞的凋亡,而AMSC没有这种作用.结论 AMSCs和BMSCs对T淋巴细胞的影响基本类似,其对活化T细胞凋亡影响的差异还有待进一步的机制研究.
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骨髓Sca-1+间充质干细胞移植减轻小鼠迟发型超敏反应
目的 探讨骨髓Sca-1+间充质干细胞(BMSCs)在迟发型超敏反应(DTH)小鼠中的免疫调控作用.方法 BALB/c小鼠随机分为对照组及MSCs注射组.注射组于0、2及6d腹腔注射Sca-1+ BMSCs,对照组注射0.9％氯化钠注射液.所有小鼠在7和14 d时分别于背部皮下与足跖注射C57BL/6小鼠脾细胞.24h后用千分尺测量小鼠足跖的肿胀,ELISA法测外周血细胞因子及FACS法测脾脏免疫细胞比例.结果 注射组小鼠足跖的肿胀程度[ (0.368 *0.126) mm]显著轻于对照组[(0.731±0.111) mm,P＜0.01].注射组外周血中IL-10和TGF-β含量显著高于对照组(P＜0.05)；而IL-12和TNF-α水平显著低于对照组(P＜0.05).注射组小鼠脾脏调节型T细胞和树突细胞的比例均明显高于对照组(P＜0.05).结论 BMSC通过上调抑炎因子和调节型免疫细胞的数量而减轻DTH小鼠的免疫反应.
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miR-424负向调节人脂肪源间充质干细胞向成脂细胞分化
目的 研究miR-424对人脂肪源间充质干细胞(hAMSCs)向成脂分化的影响.方法 用real-time PCR检测hAMSCs成脂分化前后细胞内miR-424水平的变化.在脂质体介导下,用人工合成的miR-424模拟物转染hAMSCs提高细胞内miR-424的含量,随后对其进行成脂诱导.用油红O染色法观察细胞内脂滴形成情况,用real-time PCR和Western blot检测成脂关键转录因子PPARγ及相关标记物mRNA的表达.结果 hAMSCs成脂分化后,miR-424表达下调.与对照组细胞相比,转染miR-424模拟物的实验组细胞中miR-424含量明显升高.成脂诱导第8天油红O染色结果显示,实验组脂滴形成显著少于对照组.PPARγ和成脂相关标记物的表达量也出现下调.结论 miR-424可负向调节hAMSCs向脂肪细胞分化.
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间充质干细胞分化潜力与免疫调节的研究
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是存在于成体间质组织中的一类多能干细胞群体,早是从骨髓组织中分离得到的,随后的研究发现从其他多种组织中也能分离得到,例如脂肪组织、脐带、胎盘等.它具有两个重要的生物学特征,即多能性和免疫调节能力.多年的研究显示,间充质干细胞在体外适当条件下可以大量扩增,并保持它向多种组织类型细胞分化的潜能,例如成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、血管内皮细胞、肝细胞、肠道上皮细胞、以及神经组织细胞.对间充质干细胞免疫调节能力的研究显示,间充质干细胞可以对免疫系统的多种类型功能细胞的增殖、功能等产生影响,研究多的是对免疫系统的核心抗原提呈细胞树突状细胞和淋巴细胞产生影响.
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microRNA-373参与调控人脂肪来源间充质干细胞成骨分化
目的 用microRNA-373(miR-373)的模拟物转染人脂肪来源Flk1+间充质干细胞(MSC),探讨microRNA-373对Flk1+ MSC成骨分化的影响.方法 利用脂质体作为载体,用miR-373模拟物瞬时转染Flk1+ MSCs,然后对其进行成骨诱导,碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色观察成骨情况,real-time PCR技术检测成骨标志性基因的表达.结果ALP染色和茜素红可见明显差异；real-time PCR检测结果显示,实验组(miR-373组)成骨标志基因runt相关转录因子2(RUNX2)(0.543±0.021)、ALP(0.556 ±0.024)和骨钙蛋白(OC) (0.499±0.017)的表达都明显低于对照组(NC组)(P＜0.05).结论 miR-373参与调控Flk1+ MSC向骨细胞分化.
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体外诱导脂肪来源间充质干细胞间质-上皮转换
目的 探讨在体外诱导人脂肪来源间充质干细胞(hAD-MSCs)发生间质-上皮转换(MET)的可行性.方法 从人脂肪中分离、培养间充质干细胞,流式细胞术鉴定其细胞表面标志.在体外添加激活素A( activin A)、维甲酸(RA)和骨形态发生蛋白7(BMP7)培养后,倒置显微镜下观察hAD-MSCs诱导后的形态变化,采用RT-PCR方法检测间质和上皮细胞相关基因vimentin,E-cadherin,ZO-1和β-catenin在诱导分化过程中表达水平改变.Western blot 检测诱导前后间质标记vimentin和上皮标记β-catenin的表达.结果 诱导后细胞形态发生改变,由长梭形变为卵圆形,上皮标记基因E-cadherin,ZO-1和β-catenin的mRNA表达显著上调(P＜0.05),同时间质标志基因vimentin 的mRNA表达显著下降(P＜0.05).Western blot结果显示,与未诱导组相比,诱导后细胞开始表达β-catenin,而vimentin的表达明显下降(P＜0.05).结论 Activin A、RA和BMP7联合使用可诱导hAD-MSCs发生MET的过程.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 03 04 05 06 Z1 |
