基础医学与临床杂志
Basic & Clinical Medicine 기초의학여림상
- 主管单位: 北京市科学技术协会
- 主办单位: 北京生理科学会
- 影响因子: 0.66
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 82-358
- 国内刊号: 1001-6325
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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应用非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测人巨细胞病毒UL97基因H520Q突变
目的 建立非标记探针高分辨率熔解曲线分析技术(HRMA)检测人巨细胞病毒(HCMV) UL97基因H520Q突变.方法 构建HCMV UL97野生型以及H520Q突变质粒,非标记探针HRMA分型技术检测H520Q突变.结果 直接从PCR产物得到的熔解曲线峰形无法区分野生型及H520Q突变型,应用非标记探针HRMA技术可以明显增加实验的敏感性及准确性,可成功区分从野生型到含有不同量的H520Q突变的基因型.结论 非标记探针HRMA技术是一个敏感、经济的检测H520Q突变的基因分型方法.
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BHLHB2参与人胰腺癌细胞的迁徙、凋亡及EMT
目的 进一步研究前期实验结果证明的人胰腺癌新颖的独立预后因子BHLHB2在人胰腺癌细胞中的相关分子生物学功能.方法 应用siRNA干扰技术,在人胰腺癌细胞株SU86.86中使BHLHB2表达沉寂,应用迁徙实验研究BHLHB2与细胞迁徙的关系;应用更生霉素(ACT-D)诱导细胞凋亡,研究BHLHB2与细胞凋亡的关系;应用Western blot方法研究BHLHB2与EMT的相关性.结果 人胰腺癌细胞BHLHB2表达沉寂后,细胞的迁徙明显增快.应用ACT-D进行凋亡诱导,BHLHB2表达沉寂后与对照组相比,发生凋亡的细胞数目显著增加(10μg/L,P <0.05;100 μg/L,P<0.05).Western blot结果表明,BHLHB2表达沉寂后可显著降低E-cadherin的表达(P<0.01).结论 BHLHB2与人胰腺癌细胞的迁徙、细胞凋亡及EMT密切相关.
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抑制性受体LAIR-1对巨核谱系分化的调节作用
目的 研究抑制性受体LAIR-1在巨核谱系细胞的表达及其对巨核细胞分化的调节作用.方法 采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测LAIR-1在巨核谱系细胞的表达;免疫磁珠法纯化脐血CD34+细胞,体外无血清培养系统诱导CD34+细胞向巨核细胞分化,观察LAIR-1被抗体或配体交联激活后对巨核细胞分化的影响.结果 LAIR-1表达于人骨髓CD34+ CD41a+和CD41a+ CD42b+细胞以及脐血CD34+ CD41a -和CD34+ CD41a+细胞;脐血CD34+细胞向巨核细胞分化过程中,LAIR-1表达在倍性为2N和4N的不成熟CD41a+细胞上;交联激活LAIR-1分子能够抑制脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化.结论 LAIR-1可能是参与巨核细胞早期分化发育的一种新的负调控分子.
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低氧无血清对乳鼠心肌细胞皮肤桥蛋白表达的影响
目的 在体外用低氧无血清条件模拟缺血心肌微环境,探讨心肌细胞皮肤桥蛋白(DPT)表达的变化.方法 以低氧无血清处理乳鼠心肌细胞0、6、12和24h,用实时反转录聚合酶链式反应检测DPT mRNA的表达变化,用Western blot检测DPT的蛋白表达变化.用酶联免疫吸附实验(ELISA)证实低氧无血清处理乳鼠心肌细胞24hDPT蛋白的表达变化.结果 与0h组相比,低氧无血清处理心肌细胞6、12、24 h DPT的mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05).用ELISA法也检测到低氧无血清处理心肌细胞24h DPT的表达水平高于正常对照组(P<0.05).结论 低氧无血清可促进乳鼠心肌细胞DPT的表达,DPT可能在缺血缺氧引起的心室重构中发挥一定的作用.
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LDLR启动子区DNA甲基化调控同型半胱氨酸致平滑肌细胞增殖的作用机制
目的 探讨低密度脂蛋白受体(LDLR)在同型半胱氨酸(Hcy)致血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的作用机制.方法 原代培养VSMCs,用50、100、200及500 μmol/L Hcy干预72 h;MTT法观察VSMCs增殖的活性,ELSIA法和同位素法分别检测VSMCs中ox-LDL含量和DNA甲基转移酶活性;实时定量PCR和巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测LDLR的表达和启动子区DNA甲基化的状态.结果 随着Hcy浓度的增加,VSMCs中ox-LDL含量和DNA甲基转移酶活性明显增加,而VSMCs增殖活性下降,同时LDLR mRNA表达增高,且LDLR基因启动子区呈低甲基化状态,与对照组比较有显著性差异(P <0.05,P<0.01).结论 LDLR基因启动子区DNA低甲基化致LDLR表达增高可能是Hcy引起VSMCs损伤的重要机制之一.
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1例罕见β地中海贫血基因突变及其家系分析
目的 鉴定1种罕见的β地中海贫血突变类型.方法 血液学分析采用血细胞分析仪及全自动快速电泳分析系统;α珠蛋白常规突变检测采用Gap-PCR;β珠蛋白常规突变检测采用反向点杂交法;样品的基因突变及基因型用β珠蛋白基因全长测序技术确定.结果 先证者具有典型的β地中海贫血临床特点和血液学特性,HbF为5.8%,其父母各项指标均正常.未发现先证者及其家庭成员有已知的α-/β-地中海贫血基因突变,测序发现先证者及其母亲均为CD2 (CAT-CAC)杂合子,父亲为CAC纯合子;先证者有β珠蛋白exon1 CD27 (GCC-GAC)突变,编码的氨基酸由丙氨酸变为天冬氨酸,未发现其父母有CD27突变.结论 CD27 (GCC-GAC)突变是罕见的β珠蛋白基因点突变,有助于指导人群筛查、遗传咨询和临床诊断.
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Ghrelin抑制棕榈酸诱导的大鼠内皮细胞凋亡及机制
目的 探讨ghrelin对棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡的作用及其与PI3K/Akt通路的关系.方法 大鼠主动脉内皮细胞在含0.3 mmol/L棕榈酸的DMEM培养基中孵育,培养基中加ghrelin及PI3K/Akt的阻断剂LY294002,流式细胞仪Annexin V/PI法检测凋亡,分光光度计检测caspase-3活性,Western blot检测总Akt及磷酸化Akt.结果 棕榈酸作用下大鼠主动脉内皮细胞凋亡率为30.30%±1.98%,显著高于对照组(5.01%±0.52%)(P<0.01);Ghrelin及棕榈酸共同作用下内皮细胞凋亡率为10.03% ±0.90%,显著低予棕榈酸组(P<0.01).Ghrelin引起Akt活化,PI3K/Akt阻断剂LY294002能阻断Akt活化并减轻ghrelin对内皮细胞凋亡的抑制作用.结论 Ghrelin能够抑制棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡,可能部分是通过PI3K/Akt通路起作用.
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氯化钴致低氧诱导肺癌细胞系A549DLL4表达上调并分泌促HUVEC迁移物
目的 探讨氯化钴( CoCl2)化学模拟低氧对肺癌细胞(A549) DLL4表达的影响及其与内皮细胞迁移的关系,为寻找抗肿瘤血管新生的潜在靶点提供理论依据.方法 A549分为对照组和CoCl2干预低氧组,EdU掺入法测定细胞增殖;用免疫荧光细胞染色和Western blot测定DLL4和低氧诱导因子HIF-1α在A549细胞中的表达;细胞划痕实验检测脐静脉内皮细胞(HUVEC)的迁移变化.结果 低浓度氯化钴(200 μmol/L)干预12 h后,A549细胞增殖没有明显抑制,DLL4和HIF-1α的表达均明显上调,低氧组DLL4蛋白表达为0.194 ±0.028显著高于对照组的0.098 ±0.015(P <0.05).培养上清液促进HUVEC迁移.结论 低氧明显上调A549细胞DLL4的表达,其对内皮细胞的迁移趋化作用提示其为抗肿瘤血管新生治疗的潜在靶点.
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CD44RNAi对EJ细胞增殖、迁移及其与特异性单抗结合力的影响
目的 研究EJ细胞中CD44小RNA干扰后细胞增殖、迁移功能以及其与特异性单抗KMP1结合力的改变.方法 小RNA干扰的方法抑制EJ细胞中CD44表达,Western blot和流式细胞仪检测EJ细胞与CD44特异性单抗KMP1的结合功能变化,细胞划痕实验和Boyden小室检测shCD44-EJ细胞的迁移功能,[3H]掺入法检测shCD44-EJ细胞的增殖能力.结果 shCD44-EJ细胞与KMP1的结合能力下降,CD44的表达量也降低,Wide type组和shCD44-EJ组的迁移到划痕中央的细胞数分别为257 ±32个和132±29个,shCD44-EJ组和Vector组细胞迁移到膜中和下室中的平均细胞数为356±13和672±17个,显示shCD44-EJ细胞的迁移能力较Wide type组和Vector组分别降低52%和53%,shCD44-EJ细胞的增殖活性是Vector组的73%.结论 特异性沉默CD44可降低EJ细胞与其特异性单抗KMP1的结合功能,并抑制EJ细胞的迁移和增殖能力.
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SELDI蛋白质芯片筛选差异蛋白分子的二级鉴定
目的 探讨以SELDI蛋白质芯片筛选后的细胞差异表达蛋白的分离和鉴定方法及其意义.方法 以经体外培养及10 μmol/L褪黑素药物干预的内皮祖细胞差异表达蛋白质为研究对象,分别采用Tricine-SDS-PAGE和双向凝胶电泳方法进行差异蛋白分离及结果比较,以FT-MS二级质谱鉴定.结果 经Tricine-SDS-PAGE分离后,选取分子量为53 ku左右的趋势性差异表达蛋白进行FT-MS分析,质谱鉴定为微管蛋白-α3(吻合度评分为87).经双向凝胶电泳分离后,于凝胶近酸性端、分子质量在72 ~95 ku之间区域,选取蛋白表达量较高的一点,质谱鉴定其为人热休克蛋白90-α(吻合度评分为91).结论 Tricine-SDS-PAGE对于大致35~62 ku范围的蛋白分离较清晰、重复性好且样品用量少,2-DE对低上样量有较严格要求,但它能提供分子质量、等电点双重参数来更准确定位所感兴趣蛋白点,且对大分子质量蛋白的分离效果更佳,经质谱鉴定结果理想.
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过表达突变的NPM1基因对THP-1白血病细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨核仁磷酸蛋白基因(NPM1)突变对白血病细胞增殖和凋亡的影响.方法 将携带NPM1 A型突变(NPM1 mA)的重组质粒载体pEGFPC1-NPMI mA转染白血病THP-1细胞系,构建稳定表达NPM1mA蛋白的细胞株(THP-1mA),同时设立空载体转染组(THP-1C1)和未处理组(THP-1)为对照.MTT实验观察细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期和凋亡;RT-PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白(BAX和BCL-2)mRNA及蛋白表达水平.结果 与对照组相比较,实验组THP-1mA细胞体外增殖能力明显增强(P<0.05),S期细胞比例明显增高(P<0.05),G1期细胞比例显著减低(P<0.05);而3组细胞凋亡率无显著差异,BAX,BCL-2的mRNA和蛋白表达以及BAX/BCL-2比值亦未见明显改变.结论 NPMI突变基因能够促进白血病细胞的体外增殖能力,而对白血病细胞凋亡无显著影响.
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钙激活性中电导钾离子通道在宫颈癌组织中的表达及其在细胞凋亡中的作用
目的 观察钙激活性中电导钾离子通道( IKCa1)在宫颈癌组织中的表达变化及其在宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用.方法 用RT-PCR检测18例正常宫颈组织及15例宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的表达;用IKCa1通道的阻断剂克霉唑处理宫颈癌HeLa细胞,用RT-PCR检测细胞IKCa1 mRNA的表达变化,MTT法观察细胞增殖抑制的变化.结果 宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的阳性表达率(73.33%)及表达水平(1.14±0.45)明显高于正常宫颈组织(11.11%和0.86±0.23)(P<0.05).克霉唑以浓度和时间依赖的方式抑制HeLa细胞的增殖,下调IKCa1 mRNA的表达水平,诱导细胞凋亡.结论 IKCa1的异常表达可能与宫颈癌相关,降低其表达可能通过诱导细胞凋亡而抑制宫颈癌细胞的增殖.
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不同脂肪含量的高脂纯化配方饲料对大、小鼠代谢综合征发生的影响
目的 探讨不同脂肪含量的高脂纯化配方饲料对大、小鼠体重、血糖、血胰岛素、血脂、脂肪肝及白蛋白尿的影响.方法 雄性SD大鼠及C57BL/6小鼠随机分为MD10%、MD45%和MD60%脂肪含量饲料组,喂养3个月,检测动物体重、血糖、血胰岛素水平、血脂和蛋白尿水平,以及主要脏器重量及肝脏脂质含量.结果 与正常组(MD10%脂肪含量)相比,高脂组(MD45%和MD60%脂肪含量)动物体重显著增加,出现明显的糖耐量异常、胰岛素抵抗和血脂水平升高,同时伴有肝脏脂质含量和蛋白尿水平的增加,并且以MD45%高脂组体重增加及胰岛素抵抗更加显著.结论 MD45%和MD60%高脂配方饲料均可在大、小鼠较好地诱导代谢综合征的发生,而且前者优于后者.
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小鼠骨髓间充质干细胞与脑胶质细胞及基底膜细胞共培养后向毛细胞样细胞分化
目的 探讨体外建立诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向毛细胞分化的方法.方法 分离培养小鼠骨髓间充质干细胞、脑胶质细胞(ASTs)与基底膜细胞(BAMCs)至第3代.取MSCs与ASTs共培养于DMEM/F12/RA+10% FBS培养基中.7d后免疫荧光法检测Nestin的表达.所得细胞再与BAMCs共培养于DMEM/F12+10%FBS中.14 d后免疫荧光法检测诱导后细胞中毛细胞的标志物(Math1与MyosinⅦa)的表达.RT-PCR检测毛细胞的标志物(Math1与MyosinⅦa)mRNA的表达.结果 经ASTs共培养后的MSCs表达Nestin.Nestin阳性细胞与BAMCs共培养后部分细胞表达Math1和MyosinⅦa的蛋白与mRNA.结论 MSCs经与ASTs及BAMCs共培养后,部分细胞被诱导分化为毛细胞样细胞.
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REG3α基因促进胰岛内皮细胞分泌胰岛素
目的 探讨小鼠胰岛再生衍生因子3α( REG3α)对胰岛β细胞功能代偿作用.方法 建立小鼠部分(90%)胰腺切除模型,分别于术前、术后12和24h检测血糖,术后48 h收集小鼠剩余胰腺组织,经全基因组芯片分析、q-PCR验证REG3α表达;然后构建REG3α过表达质粒,转染MS1细胞系,48 h后ELISA检测细胞上清培养液胰岛素分泌量的变化,并通过q-PCR检测转染后MS1中PDX1、INSULIN2 mRNA表达水平.结果 小鼠部分胰腺切除后REG3α发生高表达.转染REG3α过表达质粒组胰岛素分泌量显著高于未转染组(转染REG3α组879±2 ng/L,未转染组686±5 ng/L,P<0.01);转染REG3α过表达质粒组胰岛素分泌量显著高于转染空载体pcDNA3.1组(转染REG3α组879±2 ng/L,转染空载体组671±5 ng/L,P<0.01).转染REG3α过表达质粒后MS1中的PDX1、INSULIN2mRNA表达水平明显高于未转染组及转染空载体pcDNA3.1组(P<0.01).结论 REG3α促进内皮细胞表达和分泌胰岛素可能具有对胰岛β细胞功能代偿作用.
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Livin在白血病耐药细胞系THP-1R的表达
Livin是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族新成员,在正常组织极少表达,而在多数恶性肿瘤组织细胞中高表达,与肿瘤抗凋亡和耐药性有关[1].为探讨Livin与白血病细胞耐药的相关性,本实验主要从分子水平研究Livin在人急性白血病细胞系THP-1与耐药细胞系THP-1R中的差异表达情况,为Livin在白血病多药耐药( multi-drug resistance,MDR)方面的意义提供实验依据.1材料与方法1.1材料主要试剂:RPMI 1640培养液(Promega公司);兔抗Livin抗体(博奥森生物技术有限公司);引物(上海生工生物工程公司);RT-PCR试剂盒(MBIFermentas公司);双链siRNA和RNAi-Mate转染试剂(上海吉玛生物技术公司).1.2方法1.2.1细胞培养:THP-1细胞为本室冻存,用含10%小牛血清的RPMI 1640培养液在37℃、5% CO2条件下培养,2~3d传代1次.采用逐渐增加药物浓度的方法[2]建立THP-1耐Ara-C的耐药系THP-1R,实验前2周撤去药物,以正常的RPM1640培养液培养,然后取对数生长期细胞用于后继实验.1.2.2 siRNA转染:参考文献[1],针对人Livin基因2个异构体的共同部分合成siRNA序列,正义链5’-GACAGUGCC AAGUGCCUGCdTdT-3’,反义链5'-GCAGGCACUUGGCACUG UCdTdT-3’.按照说明书所述比例配制siRNA/RNA-Mate复合物和完全培养基的混合液,用此混合液稀释细胞至所需浓度,再分配到培养板各孔.非转染对照组用生理盐水代替siRNA.同时转染有荧光标记的阴性对照siRNA,在荧光显微镜下观察和判断转染效果.
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抑制IGF-1R可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖
Ⅰ型胰岛素样生长因子受体(type Ⅰ insulin-like growth factor receptor,IGF-IR)是细胞生长分化的重要调节因子,可介导丝裂信号、防御各种凋亡损伤,并为一些细胞类型转化所必需.IGF-1R在多种肿瘤包括神经母细胞瘤中被发现异常表达,并被认为是潜在的肿瘤治疗靶点.软琼脂克隆形成实验是体外检测细胞成瘤性的常规方法,可用于分离和纯化肿瘤细胞及抗肿瘤药物体外抑制肿瘤生长能力的评价,随着肿瘤干细胞研究的兴起,亦被用来检测具有干细胞性质的细胞.本实验拟构建非锚着依赖性细胞立体生长模型,使用IGF-1R抑制剂检测特异性抑制IGF-IR对细胞增殖和克隆形成的影响.
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关于基因分子生物学实验教学培养学生创新思维的初步探讨
目的 提高教师培养意识和培养手段,促进学生创新思维的形成.方法 在开展基因分子生物学实验教学的过程中,通过课程建设,对授课内容以及课堂实践各个环节进行了改革,从而对学生思维进行启迪.结果 在实验指导的编写上体现了创新性较强的原则;将以合作学习为主的实验讨论课贯穿课程始终.对讨论课的实施条件和方法进行了全面总结,并根据学生对课堂的意见反馈,提出了解决对策.结论 在实验课上引入讨论式教学法,有助于增进学生对学习的积极性、合作精神、口头表达能力和创新思维.
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磁性纳米粒子-抗体复合物分离肝癌线粒体
目的 利用人肝癌组织,研究磁性纳米粒子-抗体复合物与传统线粒体分离方法之间的差异.方法 取人肝癌组织,分别采用磁性纳米粒子-抗体复合物和密度梯度离心方法分离线粒体.扫描电镜观察线粒体形态,Western blot检测线粒体蛋白标志物,流式细胞仪分析线粒体膜电位变化.结果 采用磁性纳米粒子-抗体复合物方法分离得到的肝癌组织线粒体结构完整,无胞核、胞膜等组分的污染,几乎没有过氧化物酶体和溶酶体的污染.经流式细胞仪检测,线粒体膜电位稳定.结论 与传统方法相比,磁性纳米粒子-抗体复合物分离方法具备简便易行,分离得到的线粒体结构完整、纯度及活性较高,并且不需要大型设备等优点.
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南极大陆冰穹A地区急性高山病1例
1病例摘要2010-12-29下午,冰盖队登顶到达南极海拔4 087 m的昆仑站,2011-01-01日下午-02日,1名居住和工作地在海拔2200m西宁的45岁的藏族男队员出现高原反应,既往吸烟史20年,无任何肺部疾病,出发前无合并肺部感染,出发前曾在海拔4 000多米的西藏高原进行过适应性训练,发病前的工作量和活动量不强于之前的训练量.
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核酸适配体在肿瘤学中的应用研究进展
核酸适配体是一类通过指数级富集的配体进化技术(SELEX)获得的能以较高的亲和力与各类生物靶标特异性相结合的单链DNA或RNA.利用细胞-SELEX (Cell-SELEX)技术筛选出来的核酸适配体越来越多的作为靶向分子应用在肿瘤细胞检测、靶向药物载体和siRNA的研究中.体内外研究证明,核酸适配体作为靶向分子能用于肿瘤细胞的体外检测和肿瘤组织的体内成像,并能显著提高药物或siRNA对肿瘤细胞的杀伤作用.
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蜕膜间充质干细胞免疫调节作用及临床应用研究进展
蜕膜间充质干细胞除了具有间充质干细胞一般表型及分化潜能外,还具有低免疫原性等独特性质,是一种多能基质细胞.蜕膜间充质干细胞不但为妊娠期间胚胎植入提供适宜环境,而且通过表达免疫调控因子与多种免疫细胞相互作用,如T细胞、NK细胞及DC等,发挥其在胚胎植入、免疫耐受建立及正常妊娠维持中的重要作用.目前蜕膜间充质干细胞已经应用于造血干细胞移植、再生治疗等,具有较高的临床应用价值.本文就蜕膜间充质干细胞的来源、特征、功能及临床应用前景等进行综述.
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CXCL12-CXCR4/CXCR7轴信号传导通路与肿瘤细胞生物学特性的关系
越来越多的研究表明CXCR4与CXCR7在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用,CXCR4与CXCR7作为G蛋白藕联受体介导的信号传导通路及其在胞内激化级联信号通路与肿瘤发生发展的分子机制有密切关系.本文将对它们各自介导的信号通路及其在胞内的级联信号通路与肿瘤细胞的生长、增殖、黏附和迁移等生物学特性的关系进行综述.
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甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎的新思考
甲氨蝶呤(MTX)为目前治疗类风湿关节炎(RA)首选的改善病情抗风湿药(DMARDs).MTX在减轻症状和体征、减少致残及延缓影像学结构破坏等方面优于其他DMARDs.在生物制剂和MTX等传统DMARDs之间进行选择时,需充分考虑成本效益因素以保障患者的依从性和病情缓解.预测MTX治疗反应性或安全性的生物或基因标记物可指导临床医生制定佳的RA治疗方案.
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中枢神经系统真菌感染诊断治疗进展
中枢神经系统真菌感染发生率近年有逐渐增高之趋势,颅内真菌感染可分为弥漫性感染和局灶性感染,临床表现多为脑膜炎、脑膜脑炎引起的发热和颅高压症状,以及由颅内占位性病变所致的局灶性神经缺损症状.中枢神经系统真菌感染的诊断需将病史、流行病学、基础疾病、临床表现、影像学表现和各项实验室检查结果等综合分析,脑组织或脑脊液标本中找到真菌是诊断的金标准.中枢神经系统真菌感染的治疗原则是有效控制致病危险因素,使用有效抗真菌药物,对真菌脓肿、肉芽肿等进行积极手术干预.同时应积极探索新的诊断、治疗方法,以期改善患者预后.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 03 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 03 04 05 06 Z1 |