卵巢癌血清标志物的临床应用

卵巢癌死亡率在女性所有肿瘤死亡率中居第5位，妇科肿瘤中居首位。与乳腺癌不同，卵巢癌早期缺乏明显症状和有效筛查，生存率低。目前，美国食品药品管理局（ FDA）只批准了少数卵巢癌的肿瘤标志物检测项目。卵巢癌的肿瘤标志物在疾病诊断、疗效监测和预后判断中被广泛应用。文章综述了现有卵巢癌的肿瘤标志物及其临床应用。

呼吸道病毒实验室检测技术的研究进展

呼吸道病毒是威胁人类健康的主要因素之一，因此快速准确地鉴别病原微生物具有重要的临床意义。文章介绍了目前应用于呼吸道病毒检测的一些经典或新兴实验室技术，包括病毒分离培养技术、免疫学技术、核酸扩增技术、芯片技术、下一代测序技术、质谱（ MS）技术等。这些技术以其各自的特点应用于呼吸道病毒的临床诊断、疗效观察以及科学研究与探索。

多发性骨髓瘤实验室检查特点

多发性骨髓瘤（ MM）是一种浆细胞单克隆恶性增生性疾病。其骨髓瘤细胞浸润骨骼和软组织，产生M蛋白，引起骨质破坏、贫血、肾功能不全、反复感染等。经统计，在所有恶性肿瘤中MM的发病率占到约1％，而在血液系统恶性肿瘤中其发病率超过10％。其发病机制尚不完全清楚，临床症状复杂多样，极易误诊或漏诊。同时实验室检查指标差别也较大，导致MM的诊断和鉴别诊断困难。因此，探讨MM的临床、实验室诊断特点对MM的早期发现、早期诊断和早期治疗具有很大的临床意义。文章就MM的临床和实验室诊断特点做一综述。

色谱法在花生四烯酸代谢产物检测中的应用

花生四烯酸（ AA）代谢产物是AA经脂质过氧化产生的一系列物质，参与多种生理及病理生理过程，也是多种疾病的生物标志物，准确的定性、定量分析在研究相关疾病的发生、发展机制，诊断和预测中具有重要价值。在目前已经发现的近70种AA代谢产物中，均为小分子化合物，部分化合物分子结构相似，常规检测技术无法分辨。随着色谱、质谱技术的发展，为AA代谢产物的测定提供了较为可靠的技术手段。文章简要综述了相关进展。

抗氨甲酰化蛋白抗体的研究进展

类风湿性关节炎（ RA）诊治的关键是早期诊断、早期治疗，因而找寻敏感而又特异的生物学标志物成为RA早期实验诊断的迫切需要。近年来，抗氨甲酰化蛋白（ CarP）抗体受到关注。抗Carp抗体可提高抗瓜氨酸蛋白抗体（ ACPA）阴性RA患者的敏感性，约30％ACPA阴性RA患者能检测到该抗体。与ACPA一样，抗CarP抗体有望成为RA早期诊断的指标之一。文章就相关研究进展作一综述。

新生儿血清乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性结果分析

目的：分析新生儿血清乙型肝炎表面抗原（ HBsAg）弱反应性的原因。方法将35例父母HBsAg均为非反应性而新生儿单独出现HBsAg弱反应性的病例设为观察组，进行乙型肝炎病毒（ HBV） DNA检测，于1周后进行HBV感染血清标志物和HBV DNA复检，并与100例HBsAg为非反应性的对照组进行比较。结果观察组2次HBV DNA检测均＜5．0×102拷贝／mL。观察组初检HBsAg水平显著高于1周后复检水平（P＜0．01），1周后HBsAg均＜0．05 IU／mL，呈非反应性；乙型肝炎表面抗体（抗HBs）水平显著低于1周后复检水平（ P＜0．05）。而乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎e抗体（抗HBe）、乙型肝炎核心抗体（抗HBc）水平差异无统计学意义（P＞0．05）。初检时观察组与对照组新生儿HBV感染血清标志物的2种常见模式进行比较，同样发现抗HBs水平差异具有统计学意义（P＜0．05），而HBeAg、抗HBe、抗HBc差异无统计学意义（P＞0．05）。结论35例新生儿HBsAg弱反应性是由于乙型肝炎疫苗注射产生的干扰现象，且干扰时间较短，随着抗体水平的升高， HBsAg含量随即下降直至为非反应性。

尿沉渣检测在男性淋菌性尿道炎中的诊断价值

目的：研究尿沉渣白细胞计数和细菌计数对诊断男性淋菌性尿道炎的价值。方法采用UF-1000i全自动尿液分析仪对140例临床诊断男性尿道炎患者的尿液样本进行尿沉渣白细胞计数和细菌计数，同时将尿液样本浓缩涂片，行革兰染色镜检，查见革兰阴性双球菌为淋菌性尿道炎确诊病例。计算尿沉渣白细胞计数和细菌计数对诊断男性淋菌性尿道炎的敏感性、特异性等评估参数。结果尿白细胞计数≥300个／μL、细菌计数≤300个／μL时诊断淋菌性尿道炎的敏感性为92．0％，特异性为80．0％，阳性预测值为71．9％，阴性预测值为94．7％，受试者工作特征（ROC）曲线下面积为0．824。结论尿沉渣白细胞计数和细菌计数对诊断男性淋菌性尿道炎有一定价值。

急性心肌梗死后急性心力衰竭 BNP检测的临床意义

目的：探讨急性心肌梗死（ AMI）后急性心力衰竭（简称急性心衰）患者不同killip分级B型尿钠肽（ BNP）的变化情况。方法检测50例AMI后急性心衰患者发病24 h之内的BNP水平，并按killip分级标准进行分组。以30名健康体检者作为正常对照组。结果急性心衰组BNP水平明显高于正常对照组（P＜0．01）。急性心衰组中各killip分级间BNP水平差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论 BNP可以客观评价心功能，对无症状心力衰竭的早期诊断具有重要意义。

福建沿海地区部分人群 BMI与血清 PGⅠ及PGⅠ／PGⅡ比值的相关性研究

目的：探讨体重指数（ BMI）对血清胃蛋白酶原Ⅰ（ PGⅠ）水平和PGⅠ／胃蛋白酶原Ⅱ（ PGⅡ）比值的影响。方法回顾性分析2849名表观健康体检者的临床资料，根据《中国成人超重和肥胖症预防控制指南》将BMI划分为4个级别：体重过低（＜18．5 kg／m2）、体重正常（18．5～23．9 kg／m2）、超重（24．0～27．9 kg／m2）及肥胖（≥28．0 kg／m2）。比较各组间临床资料、PGⅠ水平及PGⅠ／PGⅡ比值的差异，探论BMI变化与PGⅠ、PGⅠ／PGⅡ比值的关系。结果单因素分析显示体重过低组、超重组和肥胖组血清PGⅠ水平明显低于体重正常组（ P值分别为0．022、0．024和0．008），而PGⅠ／PGⅡ比值在BMI各组间差异无统计学意义（P＞0．05）。调整性别、年龄、血脂等混杂变量后，PGⅠ与BMI呈明显负相关（β＝－1．232，P＜0．001）。二分类Logistic回归分析显示肥胖是低PGⅠ水平（＜70μg／L）的相对独立危险因素之一（OR＝1．682，P＝0．001）。结论福建沿海地区部分人群血清低PGⅠ水平可能与肥胖有关。

红细胞体积分布宽度、高敏 C反应蛋白、Apgar评分在新生儿重症监护病房的临床应用价值

目的：探讨红细胞体积分布宽度（ RDW）、高敏C反应蛋白（ hs-CRP）、Apgar评分在新生儿重症监护病房（ NICU）中的应用价值。方法选取NICU患儿100例。采用Sysmex XE-5000全自动血液分析仪测定RDW，免疫比浊法测定hs-CRP，记录新生儿Apgar评分、病情转归和住院天数。采用逐步多元变量进行相关分析，采用受试者工作特征（ ROC）曲线评价Apgar评分、RDW、hs-CRP预测患儿病情恶化的性能。结果不同病情转归组间Apgar评分、RDW、hs-CRP差异均有统计学意义（P＝0．000）；RDW越高，患儿病情预后越差，住院天数越多；RDW与住院时间相关性强，呈正相关（ R2＝0．711，P＜0．01）。 ROC曲线分析显示RDW及hs-CRP预测患儿病情恶化的曲线下面积分别为88．9％、81．7％，佳临界值分别为15．6％、4 mg／L，此时敏感性分别为0．964、0．714，特异性分别为0．625、0．806，约登指数分别为0．589、0．520，阳性似然比分别为2．57、3．68；而Apgar评分的ROC曲线下面积仅为21．1％。结论 RDW可作为判断NICU患儿病情转归和预后指标，其结合Apgar评分能更好地预测住院时间长短，结合hs-CRP能更准确地判断患儿病情是否发生恶化。

新“血细胞分析参考区间”红细胞系参数在南京地区11627名健康成人适用性调查

目的：调查新颁布的“血细胞分析参考区间”红细胞系参数在南京地区健康成人中的适用情况。方法按照卫生部2012年12月发布的WS／T 405-2012行业标准条款，筛选南京地区11627名20～79岁健康成人静脉血，在Sysmex XE-2100全自动血液分析仪上进行血细胞分析检测。统计行业标准中列举的6个红细胞系参数[红细胞（ RBC）、血红蛋白（ Hb）、红细胞比容（ HCT）、平均RBC体积（ MCV）、平均RBC Hb含量（ MCH）和平均RBC Hb浓度（ MCHC）]在性别和年龄之间的差异，分析超出参考区间的个体分布情况。结果所有参数在男女间差异有统计学意义（P＜0．05）。所有参数在不同年龄段组间不完全相同。＞95％的参考个体落在6个参数新参考区间内，但男性HCT只有94．21％的个体在新参考区间内。结论绝大部分新修订的红细胞系参数的参考区间适用于本地区。男性HCT的参考区间还需与临床沟通或完善验证方案后进一步评价。

血浆脂多糖浓度检测对器官移植患者革兰阴性细菌感染的诊断价值

目的：探讨血浆脂多糖（ LPS）浓度检测对器官移植患者革兰阴性细菌（ GNB）感染的诊断价值。方法回顾性分析160例疑似感染的器官移植患者的病史，根据细菌分离培养的结果将患者分为GNB感染组和对照组。采用动态比浊法检测患者就诊时外周血LPS浓度。以受试者工作特征（ ROC）曲线评价LPS浓度检测对GNB感染的诊断价值。结果 GNB 感染组和对照组 LPS 浓度的中位数（四分位数）分别为33．58（22．12，73．59）和5．00（5．00，9．78）pg／mL，两者差异有统计学意义（P＜0．05）。 LPS浓度检测诊断GNB感染的ROC曲线下面积为0．834（95％可信区间0．764～0．903）。当诊断界值设定为20 pg／mL时，LPS浓度检测诊断GNB感染的敏感性为81．01％，特异性为88．89％。结论在器官移植患者中，LPS是诊断GNB感染的有效生物标志物。

（1，3）-β-D葡聚糖检测联合 CD4＋T 淋巴细胞计数对A ID S合并侵袭性真菌病的诊断价值

目的：探讨（1，3）-β-D葡聚糖（ BDG）检测（简称G试验）联合CD4＋T淋巴细胞计数对获得性免疫缺陷综合征（ AIDS）合并侵袭性真菌病（ IFD）诊断的价值。方法选择2013年1月至2014年5月在广西医科大学第十附属医院感染科住院怀疑合并IFD的AIDS患者297例，治疗前同时行G试验和CD4＋T淋巴细胞计数。根据IFD的诊断标准将患者分为IFD组（拟诊、临床诊断和确诊）和非IFD组。分析G试验作为IFD诊断方法的敏感性、特异性和G试验联合CD4＋T淋巴细胞计数的敏感性、特异性。结果 G试验诊断AIDS合并IFD的敏感性为75．3％，特异性为87．4％。根据G试验结果绘制受试者工作特征（ ROC）曲线，曲线下面积为0．861（95％可信区间0．720～0．865）。 G试验和CD4＋T淋巴细胞联合检测的敏感性为92．9％，特异性为88．8％。结论 G试验对AIDS合并IFD有较好的诊断价值，G试验联合CD4＋T淋巴细胞计数可明显提高AIDS合并IFD的临床诊断价值。

响应曲面法验证淀粉酶检测程序适 pH 值、Cl－和 EPS浓度

目的：证明响应曲面法（ RSM）是确认淀粉酶（ AMY）参考测量程序佳测量条件的方法。方法采用单因素方差分析研究pH值、氯离子（ Cl－）、亚乙基-P-硝基苯-D-麦芽七糖苷（ EPS）浓度对AMY活性的影响是否具有统计学意义。采用Box-Behnken试验设计，在实验室条件下研究pH值（6．9～7．1）、Cl－（50～90 mmol／L）和EPS浓度（4．5～5．5 mmol／L）对AMY活性的联合效应，建立pH值、Cl－和EPS对AMY活性影响的定量关系模型，优化得出pH值、Cl－和EPS的佳组合。结果 pH值、Cl－和EPS对AMY活性影响有统计学意义（ P＜0．05）；pH值、Cl－和EPS对AMY活性影响的一次、二次效应均有统计学意义（ P＜0．01），Cl－和EPS交互作用有统计学意义（P＜0．05）。 AMY优条件：pH值7．02、Cl－72．79 mmol／L、EPS 5．07 mmol／L。结论所得pH值、Cl－和EPS的佳测量条件与国际临床化学和检验医学联合会（ IFCC）推荐条件无差异，RSM可以作为确认参考测量程序佳测量条件的方法。

尿 hepcidin-25检测在儿童铁缺乏症早期诊断中的应用

目的：初步研究尿hepcidin-25水平在儿童铁缺乏症（ IDS）早期诊断中的诊断性能。方法采用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测25例贮存铁耗尽（ ID）阶段患儿、25例缺铁性红细胞生成（ IDE）阶段患儿、25例缺铁性贫血（ IDA）患儿和25名健康儿童（正常对照组）尿hepcidin-25浓度。采用受试者工作特征（ ROC）曲线确定尿hepcidin-25诊断ID、IDE、IDA的临界值及其相应的诊断性能。结果 ID组、IDE组、IDA组及正常对照组两两之间尿hepcidin-25水平差异均有统计学意义（ P均＜0．05）。尿hepcidin-25对鉴别正常对照组与ID组、IDE组、IDA组的ROC曲线下面积分别为0．865、0．974、0．998；鉴别IDE组与IDA组、ID组、正常对照和ID混合组的ROC曲线下面积分别为0．872、0．870、0．922。结论尿hepcidin-25检测是一项简单而没有创伤的试验，在儿童IDS的早期诊断中具有一定的应用价值。

铜陵市2014年细菌耐药性监测分析

目的：了解铜陵市人民医院临床样本分离细菌菌株对抗菌药物的敏感性和耐药状况。方法2014年共收集临床分离菌株3912株（排除重复菌株），采用纸片扩散法进行药物敏感性试验，按美国临床实验室标准化协会（CLSI）2013年版标准判读药物敏感性试验结果，并用WHONET 5．6软件进行数据统计分析。结果在分离的菌株中革兰阴性菌占74．5％，革兰阳性菌占24．6％，真菌占0．9％。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为39．0％和65．1％。甲氧西林耐药株对β-内酰胺类抗菌药物和其它抗菌药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感株；未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌；粪肠球菌对氨苄西林、青霉素、呋喃妥因的耐药率较低，屎肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌。大肠埃希菌和克雷伯菌属中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检出率分别为49．1％和50．8％，产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。对碳青霉烯类抗菌药物耐药的克雷伯菌属和大肠埃希菌的检出率分别为27．5％和2．3％。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为76．7％和77．0％；铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为28．4％和27．7％，对阿米卡星的敏感率高，为93．6％。结论临床分离的细菌对抗菌药物的耐药性仍呈一定的增长趋势，以耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌为优，应引起高度关注，监管部门应加强抗菌药物的合理使用和医院感染控制的监督。

《检验医学》举办2015年“检验医学新技术”国家级继续教育项目的通知

《检验医学》将于2015年度举办“检验医学新技术”［Ⅰ类10分，项目编号：2015-11-00-281（国），由上海市临床检验中心主办］国家级继续教育项目。具体实施方案如下：
　　1．学员对象从事医学检验或其他相关专业技术工作的卫生技术人员。
　　2．继续教育内容临床检验与血液学检验、免疫学检验、微生物学检验、生物化学检验、分子生物学检验、实验室管理等检验医学领域的新技术、新进展，均出自期刊发表的文章。

Taqman-MGB法检测 CYP3 A5基因 rs776746位点单核苷酸多态性及该位点对他克莫司代谢的影响

目的：建立检测CYP3A5基因rs776746位点单核苷酸多态性（ SNP）的Taqman-MGB实时荧光聚合酶链反应（PCR），并分析该位点对他克莫司药物代谢的影响。方法针对CYP3A5基因rs776746位点设计相应引物及双标记探针，建立并评价检测该位点SNP的Taqman-MGB实时荧光PCR；收集170例服用他克莫司患者的全血DNA样本，用建立的Taqman-MGB实时荧光PCR检测CYP3A5基因型，并分析不同CYP3A5基因型与他克莫司血药浓度剂量比的相关性。结果建立的Taqman-MGB基因分析法能够对CYP3A5 rs776746位点基因型进行高效区分，可检测低含量为0．01 ng水平的DNA样本，并且具有较好的重复性和特异性，其检测结果与测序结果完全一致。170例患者中 CYP3A5倡1／倡1型18例（10．59％）、CYP3A5倡1／倡3型65例（38．24％）、CYP3A5倡3／倡3型87例（51．18％）；其中104例异体肾移植患者3种基因型的血药浓度剂量比分别为（52．47±35．96）、（77．79±33．80）、（134．80±79．35）（ng／mL）／（mg· kg－1· d－1），各组之间差异有统计学意义（P＜0．05）。结论建立了一种敏感性高、特异性好、重复性佳、适用于临床快速检测CYP3A5 rs776746 SNP位点的Taqman-MGB方法。初步分析显示CYP3A5倡3基因型的存在会减弱患者对他克莫司的代谢能力。

ICP-AES分析高脂饮食兔肾脏组织的微量元素含量

目的：探讨实验性动脉粥样硬化（ AS）兔肾脏组织中铁、锰、铜、锌、硒、铅和镉元素含量的变化。方法采用高脂饮食复制兔AS模型，获取肾脏，用硝酸-过氧化氢混合液微波消解样本，用电感耦合等离子体原子发射光谱法（ ICP-AES）分析肾脏组织中铁、锰、铜、锌、硒、铅和镉的含量。结果正常对照组和高脂饮食组血清总胆固醇（ TC）和肾脏组织中锌、铁、硒、镉含量差异均有统计学意义（ P＜0．05）。两组肾脏组织镉元素含量均明显高于饲料样本（ P＜0．05）。结论高脂饮食兔肾脏锰、铜、锌、硒元素含量降低可能与食物摄取和脂蛋白代谢异常有关。镉元素容易在肾脏中蓄积。

参加《检验医学》“检验医学新技术”继续教育回执（复印有效）

胰高血糖素样肽1定量 ELISA方法的建立及初步临床应用

目的：建立定量检测血清中胰高血糖素样肽1（GLP-1）酶联免疫吸附试验（ELISA），并探讨其在2型糖尿病（ T2DM）患者个体化治疗中的应用。方法以多克隆抗体作为捕获抗体，另一单克隆抗体作为标记抗体和系列稀释的标准液，建立能够定量检测血清中GLP-1总含量的ELISA，并初步确立生物参考区间。将研究对象根据糖代谢情况分为正常糖耐量（NGT）组（50例）、糖耐量受损（IGT）组（52例）和T2DM组（68例），分别测定空腹、服糖后1 h、服糖后2 h血清中GLP-1含量的动态变化，结合其它常规生化指标，评价GLP-1检测在T2DM患者治疗中的临床应用价值。结果所建立的方法在23．5～1490 nmol／L范围内具有良好的定量关系（R2＝0．999， P＜0．05）；初步建立成人生物参考区间为（79．5±15．6）nmol／L。 T2DM组GLP-1浓度明显高于NGT组和IGT组（P＜0．05）。动态监测研究对象糖耐量试验中血清GLP-1浓度变化，在IGT组和T2DM组出现服糖后GLP-1分泌异常不足的情况。结论成功建立了定量检测血清GLP-1的ELISA，可以动态监测IGT、T2MD患者体内GLP-1的分泌状况以指导临床个体化治疗。

用液相色谱串联质谱法检测脐带血血清25-羟基维生素 D2和25-羟基维生素 D3浓度

目的：建立一种测定脐带血25-羟基维生素D2[25（OH）D2]和25-羟基维生素D3[25（OH）D3]浓度的方法。方法脐带血血清样本前处理采用饱和硫酸锌和乙腈的蛋白沉淀法。采用液相色谱串联质谱法（LC-MS／MS）测定25（OH）D2和25（OH）D3浓度。固定相为 Poroshell?120 EC-C18正向柱；电喷雾离子源（ESI）；多反应监测模式（MRM）；喷雾电压35．0 psi；喷雾温度180℃；鞘气温度350℃；鞘气流速11．0 L／min。以甲醇（80％）、超纯水（20％）为流动相进行梯度洗脱，流速为0．5 mL／min，柱温为50℃；质谱采用高温ESI，以选择反应监测模式进行定量分析。结果25（OH）D2和25（OH）D3在3．125～100μg／L范围内呈良好的线性关系（R2＝0．9987、0．9991）。血样冻融3次进行检测，日内、日间相对标准偏差（RSD）均＜15％。对血清25-（ OH） D2和25（ OH） D3质控品进行检测，结果均符合要求。结论 LC-MS／MS敏感性高，分析时间短，适用于脐带血25（OH）D2和25（OH）D3浓度检测。

液相色谱串联质谱法测定血清中25-羟基维生素 D2及25-羟基维生素 D3含量

目的：建立液相色谱串联质谱法（LC-MS／MS）测定血清25-羟基维生素D2[25（OH）D2]及25-羟基维生素D3[25（OH）D3]含量的方法。方法采用乙醇沉淀蛋白，正己烷液液萃取目标组分，乙腈复溶。采用LC-MS／MS[正离子电喷雾离子化（ESI＋）的多反应监测模式（MRM）]氘代同位素内标法检测血清25（OH）D2及25（OH）D3含量并进行相关方法学验证。结果 LC-MS／MS检测血清25（OH）D2及25（OH）D3的批内精密度为0．88％～7．69％，批间精密度为1．56％～9．90％；25（OH）D2在0．5～10．0 ng／mL、25（OH）D3在5～100 ng／mL范围内线性良好，线性相关系数分别为0．9991、0．9999，校准品测试结果正确度为95．5％～101．2％。281名志愿者男、女之间25（OH）D2含量差异无统计学意义（P＞0．05），25（OH）D3含量差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 LC-MS／MS检测血清25（OH）D2及25（OH）D3的敏感性高，结果准确、稳定，可应用于临床分析。

室内质量控制失控后患者生化检测结果有效性的评估

无论是临床实验室管理部门，还是ISO15189，均提出了对室内质量控制（简称室内质控）失控后需对前批次患者样本检测结果进行评估的要求，但都没有提供评估的具体方法。文章以临床化学组的常规生化项目为例，从质控品、质控规则、项目的临床意义等几个方面考虑，以卫生部室间质量评价（简称室间质评）允许总误差的1／2作为终的评判标准，对室内质控失控后前批次患者生化检测结果有效性的评估进行了初步探讨。通过对2013年全年本实验室临床化学组常规生化共计33个项目进行统计，室内质控失控共计661项次。经过评估，终需要回收前批次样本检测结果9项次，占全部失控项次的1．3％。由此可见，怎样根据实验室的实际情况合理设置质控规则，节约资源，值得实验室管理者思考。