中国病理生理杂志
Chinese Journal of Pathophysiology 중국병리생리잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国病理生理学会
- 影响因子： 1.06
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-4718
- 国内刊号： 44-1187/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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黄芪多糖通过活化 AMPK-eNOS 信号通路减轻游离脂肪酸对人血管内皮细胞的损伤
目的：研究黄芪多糖对游离脂肪酸所诱导的血管内皮细胞损伤的作用及机制。方法：培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），实验分为正常对照组、黄芪多糖组[黄芪多糖（200 mg／L）处理24 h]、游离脂肪酸组[游离脂肪酸（0.25 mmol／L）共同处理24 h]、游离脂肪酸加黄芪多糖组[游离脂肪酸（0.25 mmol／L）和黄芪多糖（200 mg／L）共同处理24 h]和compound C组[游离脂肪酸（0.25 mmol／L）、黄芪多糖（200 mg／L）及AMPK阻断剂compound C （10μmol／L）处理24 h]。采用MTT法检测细胞活性，硝酸还原酶法测定培养液中一氧化氮（ NO）含量，Western blot法测细胞总腺苷酸活化蛋白激酶（ AMPK ）、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（ p-AMPK ）、内皮型一氧化氮合酶（ eNOS）及磷酸化内皮型一氧化氮合酶（ p-eNOS）的蛋白水平。结果：黄芪多糖组各项指标较正常对照组无显著差异。 MTT结果显示游离脂肪酸组的细胞活性较正常对照组明显下降，游离脂肪酸加黄芪多糖组的细胞活性较游离脂肪酸组明显好转，compound C组的细胞活性与游离脂肪酸组无显著差异。游离脂肪酸组的NO含量及p-AMPK、p-eNOS水平较对照组明显减少，黄芪多糖能显著抑制游离脂肪酸所致的NO含量及p-AMPK、p-eNOS水平的减少， compound C则可阻断黄芪多糖的作用。各组AMPK及eNOS表达均无明显差异。结论：黄芪多糖可以减轻游离脂肪酸诱导的血管内皮细胞损伤，其机制与AMPK-eNOS信号通路有关。
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同源不同辐射抗拒 NPC 细胞间总甲基化水平及基因甲基化表达差异的探讨
目的：比较同源不同辐射抗拒能力的鼻咽癌细胞CNE2R／CNE2间总甲基化水平及其区域的差异。方法：采用赵存友博士改良的基于甲基化敏感酶全基因组甲基化法检测CNE2R／CNE2细胞全基因组甲基化水平；同时采用MeDIP-Seq测序法对CNE2R／CNE2细胞进行测序，分析比较DNA甲基化区域（主要包括6个基因功能元件即CDS、intron、downstream2k、upstream2k、3’UTR及5’UTR）的差异。结果： CNE2R细胞全基因组甲基化水平比CNE2细胞低约30％；在CNE2R和CNE2细胞中，虽然分布在6个基因功能元件上的峰值个数和峰值在各基因元件上的覆盖度均无明显差异，但2种细胞的6个基因功能元件上基因甲基化存在差异。结论：同源不同辐射抗拒能力的鼻咽癌细胞间总甲基化水平及基因甲基化存在差异，推测DNA甲基化的差异可能与鼻咽癌辐射抗拒相关。
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左卡尼汀抑制尿毒症血清诱导的红细胞衰亡
目的：探讨左卡尼汀对尿毒症患者红细胞的保护作用及机制。方法：将2％健康人红细胞悬液在以下3组不同的体外培养液中孵育：对照组（C组）、尿毒症血清组（U组）和尿毒症血清＋左卡尼汀组（L组）。分别在孵育24和48 h时，留取红细胞，使用流式细胞术检测红细胞衰亡（用磷脂酰丝氨酸表达率代表红细胞衰亡）和红细胞活性氧簇（ ROS）的含量，并采用酶联免疫法检测红细胞谷胱甘肽（ GSH）的含量。结果：红细胞衰亡随孵育时间延长而增加，U组较C组明显增加，L组较U组明显降低。 U组的红细胞ROS生成较C组明显增加，而红细胞GSH生成明显减少。 L组的红细胞ROS生成较U组明显减少，而GSH生成明显增加。结论：尿毒症血清诱导正常红细胞加速衰亡，且衰亡率具有时间依赖性。而左卡尼汀可以抑制尿毒症血清诱导的红细胞衰亡，其机制可能与抗氧化有关。
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醒脑静注射液对全脑缺血再灌注大鼠血脑屏障 ZO-1表达的影响
目的：探讨醒脑静（XNJ）注射液对大鼠全脑缺血再灌注后血脑屏障通透性及紧密连接蛋白1（ZO-1）表达的影响。方法：采用改良Pulsinelli四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。将雄性Wistar大鼠随机分为4组，即假手术组、全脑缺血再灌注模型组、溶剂对照组和XNJ组。每组均在缺血再灌注后24 h、48 h和72 h处理。用干湿重法测定脑组织中水含量，分光光度计法检测脑组织伊文思蓝（ EB）含量，Western blot检测大脑皮层的ZO-1蛋白含量。结果：缺血再灌注后24 h，模型组、溶剂对照组和XNJ组的脑组织含水量均显著高于假手术组（P＜0．05），但在缺血再灌注后48 h和72 h，模型组和溶剂对照组脑组织含水量显著高于XNJ组和假手术组（P＜0．05）。缺血再灌注后24 h，模型组、溶剂对照组和XNJ组大鼠脑组织内EB含量均高于假手术组（P＜0．05），缺血再灌注后48 h和72 h，假手术组和XNJ组的EB含量显著低于模型组和溶剂对照组（P＜0．05）。缺血再灌注后24 h，模型组、溶剂对照组和XNJ组大鼠脑皮层中的ZO-1蛋白表达水平显著低于假手术组（P＜0．05），同样缺血再灌注后48 h和72 h，假手术组和XNJ组皮层中ZO-1蛋白含量显著高于模型组和溶剂对照组（P＜0．05）。结论：在缺血再灌注后的48 h和72 h，醒脑静注射液对血脑屏障具有保护作用，可能与醒脑静注射液上调ZO-1蛋白的表达有关。
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miR-363下调 HepG2细胞 Mcl-1蛋白的表达并诱导其凋亡
目的：探讨微小RNA-363（microRNA-363，miR-363）的作用靶点及其对HepG2细胞的抑制作用。方法：通过生物信息学分析预测Mcl-1基因是否受microRNA调控。实时荧光定量PCR检测正常肝细胞系LO2及肝癌细胞系HepG2、Huh7、PLC的miR-363和Mcl-1的表达水平。将miR-363转染人HepG2细胞，检测miR-363对Mcl-1表达水平的影响。 MTT法检测HepG2细胞在转染miR-363后的相对细胞活力， Annexin V／PI染色法检测miR-363转染对HepG2细胞凋亡的影响。结果：Mcl-1 mRNA 3’-非翻译区（3’-UTR）存在miR-363的假定结合位点，在肝癌细胞中转染miR-363后Mcl-1的表达下降。转染miR-363可抑制HepG2细胞的活力并诱导其发生凋亡。结论：miR-363过表达可显著抑制HepG2细胞的活力并诱导其发生凋亡，其机制可能与miR-363能下调HepG2细胞Mcl-1蛋白的表达有关。
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肿瘤抗原 PIWIL2的 HLA-A2限制性 CTL 表位鉴定
目的：鉴定肿瘤抗原PIWIL2的人类白细胞抗原A2（HLA-A2）限制性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位。方法：首先运用RT-PCR、Western blot方法检测PIWIL2在肿瘤细胞系MCF-7、SW480和HT-29中的表达情况，然后通过BIMAS、RankPep、NetMHC、NetCTL1.2及IEDB软件预测打分来选取PIWIL2的HLA-A2限制性的表位。候选表位肽通过标准的Fmoc化学合成法合成，结合力实验用于检测候选表位与T2A2细胞表面HLA-A2分子的结合能力，ELISPOT实验检测候选表位肽诱导CTL分泌IFN-γ的能力，体外细胞毒性实验检测候选肽诱导CTL的能力。结果：PIWIL2在肿瘤细胞系MCF-7、SW480和HT-29中均有表达。候选肽P485、P493、P965具有中等结合力。 ELISPOT实验结果显示表位肽P485和P965诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。细胞毒性实验结果显示表位肽P485和P965对MCF-7细胞均有一定的杀伤作用。结论：表位肽P485和P965是优秀的PIWIL2抗原HLA-A2限制性CTL候选表位，可能成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位。
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酪酸梭菌预防小鼠幽门结扎型胃溃疡的机制研究
目的：建立小鼠幽门结扎型胃溃疡（ gastric ulcer， GU）模型，观测酪酸梭菌（ C．butyricum）对GU的预防作用并探讨其机制。方法：将40只ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、奥美拉唑预防给药组和C．butyricum预防给药组。采用小鼠胃幽门结扎的方法建立GU模型，测量各组胃游离黏液量、胃液的pH、胃蛋白酶活性，并做常规HE染色观察胃组织的病理形态学变化，糖原（ PAS）染色法观察胃组织糖原含量的变化，采用免疫组化检测胃黏膜组织中Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果：HE及PAS染色结果表明，C．butyricum预防能够显著减轻胃粘膜的损伤，其效果与奥美拉唑相当。与模型组相比，C．butyricum组胃液的pH显著升高（ P＜0．01）；胃蛋白酶活性下降（P＜0．05），但其效果不如奥美拉唑组（P＜0．01）；胃游离黏液量升高（P＜0．01），糖原染色加深，与奥美拉唑组相比明显增多；Bax蛋白表达量降低（P＜0．01）但Bcl-2蛋白表达水平显著上调（P＜0．01）。结论：C．butyricum对小鼠幽门结扎型GU具有较好的预防作用，其机制可能与抑制胃酸分泌、胃蛋白酶活化，尤其是增加胃游离黏液的产生以及诱导bcl-2、抑制bax基因表达有关。
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自噬减轻模拟缺血／再灌注微环境中肺微血管内皮细胞损伤
目的：观察体外模拟缺血／再灌注（ ischemia／reperfusion，I／R）微环境下人肺微血管内皮细胞（ hu-man pulmonary microvascular endothelial cells，HPMVECs）的自噬变化，研究自噬在维持I／R条件下HPMVECs细胞存活及内皮屏障完整性中的作用。方法：用雷帕霉素（ rapamycin，RAP）预处理HPMVECs，在缺糖缺氧／恢复糖和氧供（ oxygen-glucose deprivation／oxygen-glucose restoration，OGD）模拟的I／R微环境中孵育细胞。应用Western blot及透射电镜法检测细胞自噬变化，用流式细胞术检测细胞凋亡，通透性小室法检测HPMVECs通透性。结果：OGD条件下HPMVECs的自噬水平明显升高，RAP预处理进一步上调了OGD条件下的细胞自噬。 OGD组细胞凋亡率明显增高，细胞通透性增加。 RAP预处理不仅降低了OGD引起的细胞凋亡率，而且减轻了OGD条件下细胞通透性。结论：自噬在I／R诱发的肺微血管内皮细胞损伤中发挥保护性作用，提高自噬水平有助于减少I／R条件下细胞凋亡并维持内皮屏障完整性。
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一例罕见的新的TCIRG1基因杂合性突变引起的婴儿恶性石骨症
目的：研究1例婴儿恶性石骨症患者的致病基因及其突变。 TCIRG1和CLCN7是婴儿恶性石骨症常见的致病基因。前者被认为是纯合性致病基因，国外只有6例其杂合性改变也致本病的报导，而我国无杂合性突变导致本病的报道。方法：通过骨组织X线检查结合临床症状及体征确诊1例散发性婴儿恶性石骨症患者。提取患者及其父母的外周血基因组DNA，PCR扩增TCIRG1和CLCN7基因外显子及其剪切位点序列，对PCR产物直接测序。用TCRIG1基因附近的微卫星标记和SNP构建患者及其父母的单倍型。用染色体微阵列分析技术对患者及其母亲进行TCIRG1基因拷贝数目变异的检测。结果：患者TCIRG1基因第5号外显子内发现一个4个碱基的缺失突变c．449＿452delAGAG（ p．Gln149Glnfs16），该突变使得基因3’端编码的666个氨基酸被截断，失去了整个ATP酶V0复合结构域。患儿双亲TCIRG1和CLCN7基因的突变检测及单倍体构建证实该突变来源于患者父亲。染色体微阵列分析未发现患儿及其母亲携带有任何累及TCIRG1及CLCN7基因的拷贝数目变异。结论：本研究发现了1例TCIRG1基因新的杂合性突变所致的婴儿恶性石骨症。这是我国TCIRG1基因杂合性突变引起婴儿恶性石骨症的首例报道。这个发现可用于婴儿恶性石骨症的分子诊断。
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肥大细胞转化生长因子β在人慢性根尖周病组织中的表达
目的：本研究旨在观察不同类型慢性根尖周病组织中肥大细胞（ mast cells， MCs）的分布，分析转化生长因子β（ transforming growth factor-β，TGF-β）在MCs上的表达情况，探讨类胰蛋白酶（ tryptase）-TGF-β双阳性MCs在慢性根尖周病免疫病理中的作用。方法：共收集78例样本，分为3组：（1）根尖肉芽肿组25例；（2）根尖囊肿组25例；（3）正常对照组28例。组织标本经4％甲醛固定48 h以上。石蜡包埋、制备组织连续切片。 HE染色，观察其组织学改变；采用甲苯胺蓝染色法观察各组标本组织中MCs的数量及MCs脱颗粒情况；采用免疫荧光双染色法，在荧光显微镜下观察各组标本组织中tryptase-TGF-β双阳性MCs的数量。结果：（1）与正常对照组相比，两组慢性根尖周病组织中tryptase-TGF-β双阳性MCs密度显著增多（ P＜0.01）；（2）根尖囊肿组tryptase-TGF-β双阳性MCs密度明显高于根尖肉芽肿组（P＜0.01）；（3）与甲苯胺蓝染色法相比，tryptase-TGF-β免疫荧光双染色法结果中各组标本组织的MCs密度显著增多（ P＜0.01）。结论：慢性根尖周病组织，尤其是根尖囊肿组织中tryptase-TGF-β双阳性细胞明显增多，提示tryptase-TGF-β双阳性MCs可能在慢性根尖周病中的致病过程，尤其在根尖周囊肿纤维组织形成中发挥作用。 Tryptase免疫荧光染色法比传统鉴别肥大细胞的甲苯胺蓝染色法更灵敏。
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硫化氢保护被 ATP 损伤的 PC12细胞
目的：观察硫化氢的供体硫氢化钠（ NaHS）对三磷酸腺苷（ ATP）诱导的PC12细胞活力、胞内Ca2＋浓度（[Ca2＋]i）及膜通透性的变化，探讨硫化氢神经保护作用的嘌呤信号机制。方法：将对数生长期高分化的PC12细胞，随机分为4组，分别为（1）正常对照组：常规培养，不进行ATP处理；（2）ATP组：接种细胞24 h后ATP处理；（3）NaHS＋ATP组：NaHS预先孵育30 min后再用ATP处理，并且NaHS始终存在于反应体系中；（4）KN-62（P2X7受体阻断剂）＋ATP组：KN-62预先孵育30 min，其余同NaHS＋ATP组。 MTT检测各组细胞活力，Fura-2／AM荧光染料检测各组[ Ca2＋] i ，检测荧光染料YO-PRO-1的相对荧光单位以反映膜的通透性。结果：（1）0.3 mmol／L ATP对细胞活力无影响，但1、3、5、10 mmol／L ATP则呈浓度依赖式明显降低细胞活力，200μmol／L NaHS干预可明显逆转ATP引起的细胞活力下降（ P＜0.05），而800μmol／L NaHS预处理则加剧ATP对PC12细胞的损伤（P＜0.05）。（2）ATP处理PC12细胞会引起[Ca2＋]i 迅速升高并且呈浓度依赖性，NaHS预处理能对抗ATP引起的[Ca2＋]i 升高（P＜0.05）。（3）随着ATP浓度的增加及作用时间的延长，PC12细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加，NaHS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取（ P＜0.05）。结论：硫化氢可保护ATP损伤的PC12细胞，可能与其抑制[ Ca2＋] i升高和YO-PRO-1荧光增强有关。
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脂多糖结合蛋白在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用
目的：探讨脂多糖结合蛋白（ LBP）在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用。方法：挑选ICU的患者共80名，患者分为全身炎症反应综合征（ SIRS）组（阴性对照组）、脓毒症存活组和脓毒症死亡组；所有患者均于进入ICU后24 h内采集血清样本并进行APACHEⅡ评分分析；另挑选10名健康志愿者血清作为正常对照组；ELISA检测各组样本血清LBP、C反应蛋白（ CRP）和降钙素原（ PCT）浓度；并以APACHEⅡ评分、血清LBP、CRP和PCT浓度对脓毒症诊断和预后预测做ROC曲线，评价LBP在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用。结果：与SIRS组相比，脓毒症组的APACHEⅡ评分、血清LBP、CRP、PCT浓度均升高（ P＜0.05）；与脓毒症存活组相比，死亡组的APACHEⅡ评分和血清LBP浓度升高（ P＜0.05），而血清CRP和PCT浓度在脓毒症存活组与死亡组之间的差异无统计学意义；LBP血清浓度高于26.84 mg／L时诊断脓毒症的敏感性和特异性分别为97.1％和95.9％；LBP血清浓度高于54.16 mg／L时预测脓毒症预后的敏感性和特异性分别为85.2％和80.0％。结论：与传统的脓毒症生物标志物CRP、PCT相比，LBP在脓毒症的诊断和预测方面都具有更好的效果。
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miR-134调控人肺腺癌细胞顺铂耐药
目的：探讨微小RNA-134（miR-134）在人肺腺癌细胞顺铂耐药中的作用及机制。方法：采用miR-NA芯片筛选A549／CDDP和A549细胞差异表达miRNA，应用real-time PCR验证miR-134的表达。将miR-134模拟物和抑制物分别转染A549／CDDP和A549细胞，应用MTT法检测肺癌细胞对顺铂的敏感性。 Western blot技术检测miR-134对叉头框蛋白M1（FOXM1）和多药耐药相关蛋白1（MRP1）表达的影响。结果：miRNA芯片显示，13种miRNAs在A549／CDDP和A549细胞中呈显著表达；其中，miR-134下调显著。 miR-134模拟物转染组A549／CDDP细胞对顺铂的敏感性较阴性对照组显著提高（P＜0.01），而miR-134抑制物转染组A549细胞对顺铂的敏感性较阴性对照组显著降低（ P＜0.01）。 FOXM1 siRNA能够有效抑制FOXM1蛋白表达，si-FOXM1转染组A549／CD-DP细胞对顺铂的敏感性较阴性对照组显著提高（P＜0.01）。此外，Western blot结果显示miR-134能够抑制MRP1蛋白表达。结论：miR-134能够增加肺腺癌细胞对顺铂的敏感性，其机制可能与调控FOXM1和MRP1表达有关。
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梓醇对 OB-OC 共育体系中 OB、OC 活性及 OB ERα、βmRNA 表达的影响
目的：观察中药单体梓醇在成骨-破骨共育体系中对成骨细胞（OB）增殖、OB碱性磷酸酶（ALP）活性、破骨细胞（ OC）活性及OB雌激素受体（ ER）α及βmRNA表达的影响，从细胞水平阐释其防治骨质疏松症的作用机制。方法：分别选取1 d和5 d SD大鼠分离培养OB和OC，并建立OB-OC共育体系；在共育体系中，用MTT法检测低浓度（0.05、0.1、0.5、1 mg／L）、中浓度（2、5、10 mg／L）和高浓度（20、50和100 mg／L）梓醇干预下的OB增殖率，并以梓醇佳促OB增殖浓度进行后续实验，实验分为对照组和梓醇组。 pNPP法检测各组OB的ALP活性；光镜观察OC骨吸收陷窝数目；重氮盐法检测OC抗酒石酸酸性磷酸酶（ TRAP）的活性；RT-PCR方法检测OB ERα及ERβmRNA的表达。结果：在OB-OC共育体系中，0.05～2 mg／L梓醇各组中OB的增殖率显著高于对照组（P＜0.01），且0.05 mg／L梓醇组促进OB增殖的能力明显高于其它浓度组（P＜0.01），5～100 mg／L梓醇各组OB的增殖率与对照组比较无显著差异（ P＞0.05）。0.05 mg／L梓醇组的ALP水平高于对照组（ P＜0.05），并在作用48、72和96 h后均对OC骨吸收陷窝数及TRAP有明显抑制作用（ P＜0.01）；0.05 mg／L梓醇组OB中ERαmRNA的表达与对照组相比差异无统计学意义（ P＞0.05），而ERβmRNA的表达显著高于对照组（ P＜0.05）。结论：梓醇在共育体系中可提高OB增殖和成骨活性，抑制OC活性并上调OB中ERβmRNA的表达。
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CXCR4启动子的条件复制型腺病毒对肺癌细胞的靶向杀伤作用
目的：构建CXCR4启动子的条件复制型腺病毒载体CRAd-CXCR4-GFP，探究CRAd-CXCR4-GFP对肺癌细胞的靶向杀伤效应。方法：PCR法扩增人CXCR4-E1A基因并克隆至穿梭质粒pDC316-GFP，将骨架质粒pBHG-lox-E1，3Cre和重组质粒pDC316-CXCR4-GFP共转染293细胞，产生重组腺病毒CRAd-CXCR4-GFP并扩增，扩增后进行PCR鉴定和腺病毒滴度测定；real-time PCR检测5种肺癌细胞株CXCR4的mRNA表达，筛选出表达高的A549细胞；将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞，检测两者转染后CXCR4启动子活性和腺病毒复制数；将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞和16HBE细胞，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，CCK-8检测各组细胞活性。结果：成功构建重组质粒pDC316-CXCR4-GFP，与骨架质粒pBHG-lox-E1，3Cre共转染293细胞后第11天可见片状绿色荧光；PCR表明目的基因CXCR4-E1A已成功整合在重组腺病毒基因组中；测定重组腺病毒滴度为1×1013 PFU／L；CRAd-CXCR4-GFP转染A549细胞后E1A的mRNA和E4表达较Ad-NULL组明显上升；与Ad-NULL组和空白对照组相比，CRAd-CXCR4-GFP组前4 d A549细胞凋亡率和活性无明显差异，第5天细胞凋亡率明显增加，细胞活性明显降低，各组间5 d内16 HBE细胞的细胞凋亡率和细胞活性均无明显变化。结论：成功构建条件复制型腺病毒表达载体CRAd-CXCR4-GFP，该载体对肺癌细胞具有靶向杀伤作用。
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VEGF／bFGF 复合多肽疫苗对雌性小鼠的毒性及其生殖的影响
目的：初步探究血管内皮生长因子（ VEGF ）／碱性成纤维细胞生长因子（ bFGF ）复合多肽疫苗（ VEGF／bFGF complex peptide vaccine，VBP3）对雌性小鼠的毒性及其生殖的影响。方法：通过镍离子亲和层析柱纯化VBP3蛋白，将纯化获得的VBP3免疫雌性BALB／c小鼠，酶联免疫吸附实验（ ELISA）方法检测小鼠血清抗体效价和特异性，监测亲本小鼠体重，测定亲本小鼠脏器重量并对小鼠脏器进行HE染色观察；将免疫小鼠与未免疫雄性小鼠交配后，测定F1代小鼠存活率、体重、相关脏器重量，并对相关脏器进行HE染色观察。结果：间接ELISA检测结果显示免疫小鼠血清中抗VEGF、抗bFGF抗体滴度分别为1∶3000、1∶20000，且免疫组F1代小鼠能检测出低滴度的抗bFGF抗体，但抗VEGF抗体不能检出。在小鼠生产率实验中，免疫组与对照组崽鼠数目未见明显差异，但免疫组F1代小鼠存活率较对照组降低（ P＜0．05）。在亲本小鼠中，免疫组小鼠各脏器重量与对照组比较均未有差异，而在F1代小鼠中，2个组别的小鼠肝脏重量存在差异，但其它脏器重量未有差异；HE染色显示，在亲本小鼠中，2个组别小鼠的各脏器形态未有明显差异；在F1代小鼠中，免疫组F1代小鼠的肝脏与对照组相比存在形态差异。结论：VEGF／bFGF复合多肽疫苗未对亲本小鼠主要脏器造成直接损伤，但对亲本小鼠的生殖及F1代小鼠健康具有一定的影响。
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应用噬菌体展示肽库技术淘选大鼠 CCR5膜外第一、二胞外环特异性结合的活性拮抗肽与初步鉴定
目的：利用噬菌体展示肽库技术淘选与大鼠CC趋化因子受体5（ CCR5）膜外第一、二胞外环特异性结合的短肽，并鉴定其与CCR5的结合能力。方法：在蛋白质数据库中查得大鼠CCR5第一、二胞外环的氨基酸序列，合成相应的线性短肽作为淘选的靶分子，利用噬菌体展示7肽文库进行3～4轮淘选，用ELISA法鉴定所选肽与靶分子的结合，并测定其与浓度的关系。结果：与CCR5第一、二胞外环特异性结合的噬菌体展示的短肽序列分别为GHWKVWL和HYIDFRW，ELISA鉴定呈阳性反应，且短肽与靶分子的结合具有浓度依赖性和可饱和性。结论：利用噬菌体展示技术成功获得了2条CCR5特异性结合的短肽，并在体外证明其可与CCR5第一、二胞外环具有结合能力。
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MADPH 氧化酶抑制剂对晚期氧化蛋白产物诱导内皮细胞高通透性的影响及机制
目的：探讨NADPH氧化酶（ Nox）抑制剂对晚期氧化蛋白产物（ AOPP）刺激下血管内皮的保护作用。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞进行实验，人血清白蛋白（ HSA）作为阴性对照，用不同浓度（50、100和200 mg／L） AOPP-HSA共同孵育8 h后，利用5-氯甲基二乙酸荧光素标记人急性单核细胞白血病细胞株THP-1的细胞渗出数量反映内皮细胞的通透性，研究不同浓度AOPP-HSA对单层细胞通透性的影响。此外，另将细胞分为HSA组、AOPP-HSA组和AOPP-HSA＋二联苯碘（ DPI）组，进而探讨AOPP-HSA对Nox活化水平的影响以及DPI对内皮细胞骨架重构和细胞通透性改变的作用。结果： AOPP-HSA 可使血管内皮细胞通透性明显增加（ P ＜0.05）。AOPP-HSA可导致Nox磷酸化水平上升，并呈剂量依赖性。 Nox抑制剂DPI预处理组可抑制AOPP-HSA刺激下Nox磷酸化水平的上升，从而抑制血管内皮细胞通透性增加及细胞骨架重构。结论：AOPP-HSA可通过激活Nox导致血管内皮细胞通透性受损，Nox抑制剂DPI可以降低其通透性及细胞骨架重构，起到一定的保护作用。
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清胰汤Ⅱ号冲剂对急性胰腺炎小鼠的保护作用及机制
目的：探讨清胰汤Ⅱ号冲剂（ QYT）对急性胰腺炎（ acute pancreatitis，AP）小鼠的保护作用及机制。方法：成年C57BL／6小鼠24只，雌雄各半，随机均分为3组。 AP组和AP＋QYT组首先经腹腔注射雨蛙肽（50μg／kg）及脂多糖（10 mg／kg）复制重症AP模型，AP组小鼠给予饮用水灌胃，AP＋QYT组给予QYT灌胃；正常对照组小鼠给予等量生理盐水注射及饮用水灌胃。于末次注药后3h麻醉处死动物。检测和分析胰腺组织的病理改变、肠道细菌总数和分类、Peyer’s结T淋巴细胞亚群的变化、血浆淀粉酶、白细胞介素6（IL-6）、单核细胞趋化蛋白1（ MCP-1）水平以及胰腺和肺脏组织髓过氧化物酶（ MPO）活性等。结果：与对照组相比，AP小鼠的胰腺组织病理学评分、肠道细菌数量、血浆淀粉酶活性、IL-6及MCP-1水平、胰和肺组织的MPO活性都有明显升高（ P＜0.05）；QYT可在一定程度上逆转AP时相关指标的变化（P＜0.05）。小肠Peyer’s结数量在各组无明显差异，但AP组的CD3＋T淋巴细胞百分比较对照组明显降低（P＜0.05），而且，AP组和AP＋QYT组，尤其是后者CD4＋T淋巴细胞百分比和CD4＋／CD8＋比值较对照组明显升高（ P＜0.05）。结论：清胰汤II号冲剂对雨蛙肽和脂多糖诱导的小鼠急性胰腺炎具有明显的拮抗作用，其机制可能与其抑制炎症反应、促进肠内细菌的清除和调节肠道T淋巴细胞功能有关。
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氧化应激激活 JNK-MAPK 参与波动性高血糖诱导的大鼠肝细胞损伤
目的：探讨波动性高血糖引起糖尿病大鼠肝细胞凋亡的机制。方法：SD大鼠随机均分为4组：正常对照组、稳定高血糖组、波动高血糖组和胰岛素组。采用链脲佐菌素65 mg／kg 腹腔注射诱发糖尿病，波动高血糖组每天定时腹腔注射速效胰岛素，并错时给予葡萄糖，造成1 d中血糖浓度大幅度波动，12周内波动高血糖组每天血糖波动模式相似，且HbA1c与稳定高血糖组无显著差异。12周后取血和肝脏组织，采用比色法检测超氧化物歧化酶（ SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH-Px）活性以及丙二醛（ MDA）和一氧化氮（ NO）含量，RT-PCR和West-ern blot检测JNK、p-JNK、Bax和Bcl-2的含量。结果：与正常对照组比较，稳定高血糖组、胰岛素组和波动高血糖组的食物量、饮水量和尿量增加，肝功能异常；MDA含量增多，SOD和GSH-Px活性降低，NO含量减少（P＜0.05）；JNK mRNA、p-JNK蛋白及Bax蛋白水平上调（P ＜0.05），Bcl-2表达减少（P＜0.01）；且波动高血糖组的以上变化均较稳定高血糖和胰岛素组更加明显（ P＜0.05）。结论：波动性高血糖较稳定性高血糖更促进糖尿病肝细胞的凋亡，其机制与JNK-MAPK信号转导通路激活有关。
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慢性乙型肝炎和原发性肝癌患者体内人腺病毒5型、26型及黑猩猩腺病毒68型中和抗体的流行率
目的：调查慢性乙型病毒性肝炎（CHB）和原发性肝癌（PLC）患者体内人腺病毒5型（AdHu5）、26型（AdHu26）和黑猩猩腺病毒68型（AdC68）中和抗体的流行率，为这2种疾病开发安全有效的生物治疗载体提供依据。方法：我们收集196份CHB 患者的血清和193份PLC 患者的血清，通过腺病毒中和实验检测血清中AdHu5、AdHu26和AdC68的中和抗体。结果：在CHB患者中AdHu5、AdHu26和AdC68中和抗体的阳性率分别为84.7％、58.2％及39.8％；在PLC患者中AdHu5、AdHu26和AdC68中和抗体的阳性率分别为75.1％、66.8％及32.1％。结论：本次实验显示3种腺病毒中和抗体的流行率和抗体滴度都以AdC68的低，故其作为CHB和PLC的生物治疗载体较AdHu5与AdHu26具有优势。
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中国病理生理学会第十届全国代表大会暨学术会议第二轮通知
中国病理生理学会第十届全国代表大会暨学术会议将于2015年11月6日至11月9日在天津万丽天津宾馆举行。本次大会由中国病理生理学会主办，天津医科大学承办，天津辛伯达商务会展服务有限公司协办。
2015年，我们迎来了我国病理生理学学科成立60周年、中国病理生理学会成立30周年的重要时刻。在中国病理生理学会第十届全国代表大会上，我们将审议中国病理生理学会第十届理事会工作报告和章程修改报告，进行换届选举。 -
Notch信号可调节人脐带间充质干细胞CD105表达、成骨分化和免疫活性
间充质干细胞（ MSCs）是一种具有多向分化特性的多能干细胞，有一整套相对特异的膜表面标志物，且具备独特免疫调节功能。 IDO1，一种色氨酸分解酶，是介导MSCs免疫调节功能的关键分子。为探讨MSCs关键特性的调节作用涉及Notch信号及其它潜在信号通路，Na等使用γ-分泌酶抑制剂I（ GSI-I；不仅能够抑制Notch信号，同时可降低泛素蛋白酶的活性）对人脐带间充质干细胞（ hUC-MSCs）进行处理，结果表明，GSI-I可引起细胞凋亡，减少膜表面标志物CD73、CD90和CD105的表达，抑制成骨细胞分化，减弱人脐带间充质干细胞对Th1淋巴细胞增殖的抑制作用和IFN-γ对IDO1表达的抑制作用。通过对GSI-I在Notch信号及蛋白酶体的抑制作用所致结果进行辨识，可以进一步观察到CD105表达下降及成骨细胞分化抑制导致Notch信号及蛋白酶体受到抑制，却不会因此诱发细胞凋亡。然而，Notch信号的抑制（而不是蛋白酶体的抑制）使得GSI-I在Th1淋巴细胞增殖中发挥重要作用，这可能是通过降低IDO1启动子活性来实现的。综上所述，Notch信号可以代表一种十分重要的细胞信号，它能够对MSCs的多项关键特性，尤其是免疫调节活性进行调节。
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Decorin对僵直膝关节滑膜B型细胞增殖及I型胶原蛋白表达的影响
目的：探讨重组核心蛋白聚糖（ decorin）对人僵直膝关节滑膜B型细胞的增殖和Ⅰ型前胶原蛋白（ PcⅠ） mRNA表达及Ⅰ型胶原蛋白（ ColⅠ）合成的影响，为decorin 治疗人膝关节僵直提供理论依据。方法：分离培养人僵直膝关节滑膜B型细胞，分别加入不同浓度（0．1、5和10 mg／L）的decorin；培养24 h、48 h和72 h后用MTT法测定关节滑膜B型细胞的活力；用流式细胞术检测滑膜B型细胞的周期和凋亡；RT-PCR法检测滑膜B型细胞的PcⅠmRNA表达；Western blot检测Col Ⅰ的合成。结果：5和10 mg／L的decorin可有效降低滑膜B型细胞的活力（P＜0．05），明显增加处于G0／G1期细胞的百分比（P＜0．05），并下调PcⅠmRNA的表达，抑制ColⅠ的合成；同时实验组和对照组均未检测到终末期凋亡细胞。结论： Decorin可抑制人僵直膝关节滑膜B型细胞的增殖、PcⅠmRNA的表达和ColⅠ的合成，在防治膝关节僵直中可能起一定的作用。
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全反式维甲酸通过DOK1／PPARγ信号通路抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖
目的：探讨全反式维甲酸（ ATRA）对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响及可能机制。方法： MCF-7细胞培养于含10％胎牛血清、1％青霉素／链霉素的DMEM培养液，蛋白免疫印迹检测蛋白质的表达，MTT法和溴脱氧尿嘧啶核苷（ BrdU）掺入法测定细胞增殖，TUNEL法测定细胞凋亡，携带目标基因shRNA的慢病毒用于沉默目标基因，过氧化物酶体增殖物激活受体γ（ PPARγ）的活性采用商品化的试剂盒测定。结果： ATRA处理可抑制MCF-7细胞的增殖，促进其凋亡；同时，ATRA以时间依赖方式刺激停靠蛋白1（ DOK1）的表达。沉默DOK1可降低ATRA对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。此外，DOK1基因沉默可抑制PPARγ的表达和活性。而PPARγ选择性抑制剂GW9662可减轻ATRA对MCF-7细胞增殖的抑制和对细胞凋亡的促进作用。结论： ATRA通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡而抑制MCF-7细胞的生存，这一作用经DOK1激活的PPARγ介导。
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藻蓝蛋白诱导喉癌 HEP-2细胞凋亡的实验研究
目的：探讨藻蓝蛋白对人喉癌HEP-2细胞凋亡的影响，并初步探讨其机制。方法：不同浓度藻蓝蛋白处理HEP-2细胞，分别以MTT、倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞术检测藻蓝蛋白对HEP-2细胞活力及凋亡的影响；DCFH-DA标记的流式细胞术检测细胞内的活性氧水平；分光光度法检测细胞内caspase-3、-8、-9的活性；RT-PCR、Western blot检测细胞凋亡相关基因的表达。结果：MTT结果显示藻蓝蛋白能够抑制喉癌HEP-2的细胞活力，且呈时间和剂量依赖性；倒置显微镜、电镜、流式细胞术的一系列定性化和定量化实验证实藻蓝蛋白可显著诱导HEP-2细胞的凋亡；藻蓝蛋白处理后细胞内ROS水平升高，caspase-3、-8、-9被激活；RT-PCR结果表明，藻蓝蛋白作用后Bax、Fas、P53、caspase-3和caspase-9表达显著上调（P＜0.05），Bcl-2表达显著下调（P＜0.05）；West-ern blot结果和RT-PCR结果一致。结论：藻蓝蛋白能够诱导HEP-2细胞的凋亡，其机制可能与细胞内ROS水平升高，上调Bax、Fas和P53 mRNA，下调Bcl-2 mRNA的表达，从而促进凋亡信号的转导终导致细胞凋亡有关。
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糖尿病胃轻瘫大鼠胃平滑肌细胞BKCa通道的变化
目的：探讨糖尿病胃轻瘫（ DGP）的发病机制与胃平滑肌细胞大电导钙激活钾通道（ BKCa ）变化之间的关系。方法：将大鼠分为对照组和糖尿病胃轻瘫模型组。应用木瓜蛋白酶液急性酶分离大鼠胃平滑肌细胞，采用单通道膜片钳技术记录大鼠胃平滑肌细胞BKCa电流，免疫组织化学技术测定BKCa蛋白KCNMA和KCNMB1的表达。结果：大鼠胃平滑肌细胞BKCa电流的开放具有电压依赖性和胞内钙离子浓度依赖性，可被钾离子通道阻滞剂IbTX阻断；模型组大鼠胃平滑肌细胞BKCa开放概率及开放幅度增加（P＜0．05），平均开放时间及平均关闭时间减少（P＜0．01）；模型组大鼠胃平滑肌细胞KCNMB1蛋白表达增加（P＜0．01），KCNMA蛋白表达无明显变化。结论：DGP发病与胃平滑肌细胞BKCaβ1亚基蛋白表达上调及通道功能活动增强有关，β1亚基蛋白可能通过调节BKCa功能活动参与DGP的发生。
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PPARα／PGC-1α在阿霉素扩张型心肌病小鼠心肌组织中的表达及作用
目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（ peroxisome proliferator-activated receptors α，PPARα）及过氧化物酶体增殖物活化受体协同刺激因子1α（ peroxisome proliferator activated receptor coactivator 1 alpha， PGC-1α）在阿霉素（ doxorubicin，DOX）诱导扩张型心肌病小鼠心肌中的变化及其对心肌能量代谢及心功能的影响。方法：选取小鼠40只，分为正常对照组、单纯阿霉素模型组、PPARα抑制剂组和PPARα激动剂组。除正常对照组外，其余小鼠采用阿霉素诱导建立扩张型心肌病模型，检测其中PPARα及PGC-1α蛋白的表达，PPARα抑制剂组和PPARα激动剂组在造模前分别采用PPARα抑制剂及激动剂对小鼠预处理2周，高效液相层析法（ high-perfor-mance liquid chromatography，HPLC）测量线粒体内腺苷酸含量，[3H]-ADP（氚标记二磷酸腺苷）掺入法检测线粒体膜腺苷酸转运体（ adenine nucleotide translocator，ANT）转运活性，并利用超声心动图检测各组心脏结构及心功能。结果：成功建立阿霉素诱导的扩张型心肌病模型， PPARα及PGC-1α蛋白在模型组中表达明显低于正常组（ P＜0.05），线粒体内高能磷酸盐含量和线粒体转运活性明显降低（P＜0.05），心功能显著下降，血流动力学指标紊乱（P＜0.05）；与模型组比较，PPARα抑制剂预处理2周后，可显著降低PPARα／PGC-1α表达，线粒体内高能磷酸盐含量及线粒体ANT转运活性显著降低（ P＜0.05），心功能恶化；而予PPARα激动剂预处理干预2周，上调PPARα／PGC-1α蛋白表达同时，虽然线粒体内高能磷酸盐含量未发现有显著变化，但其可改善阿霉素心肌病大鼠线粒体ANT转运活性，超声心动图显示对心腔大小及心功能有改善作用（ P＜0.05）。结论：在阿霉素诱导扩张性心肌病中，PPARα／PGC-1α对ANT的活性起重要调控作用，激活PPARα／PGC-1α可减轻阿霉素心肌损伤。
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miR-205通过靶向调控 TBX18抑制神经胶质瘤细胞的侵袭能力
目的：探讨微小RNA-205（miR-205）在神经胶质瘤组织中的表达模式及其在胶质瘤细胞侵袭中的作用及可能机制。方法：用real-time PCR检测配对神经胶质瘤组织中miR-205的表达，同时用免疫组化方法检测配对组织中TBX18蛋白的表达量；用脂质体将miR-205模拟物（ miR-205 mimics）、miR-205抑制物（ miR-205 in-hibitor）以及相应对照（ control）导入U251胶质瘤细胞后， Transwell实验检测细胞的侵袭能力变化；生物信息学分析结合萤光素酶报告基因实验观察miR-205对TBX18的靶向调控作用；采用RNA干扰技术下调U251细胞中TBX18的表达，用Transwell实验检测细胞侵袭能力变化。结果： miR-205在82.6％所检测的神经胶质瘤组织中表达下调，而TBX18在神经胶质瘤组织中表达上调，两者表达呈负相关；过表达miR-205使U251细胞的侵袭细胞数下降（P＜0.01），抑制miR-205表达后U251侵袭细胞数增加（P＜0.01）；miR-205在U251胶质瘤细胞中能直接靶向抑制TBX18的表达，干扰TBX18的表达亦使U251细胞的侵袭细胞数下降（ P＜0.01）。结论：miR-205在神经胶质瘤中表达下调，miR-205可能通过靶向调控TBX18影响胶质瘤细胞的侵袭能力，这将为完善胶质瘤侵袭的分子机制及开发新治疗策略以提高胶质瘤治疗效果提供有力的理论依据。
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细胞外半胱氨酸／胱氨酸氧化还原电位对 NAFLD 肝细胞线粒体功能的影响
目的：研究细胞外半胱氨酸／胱氨酸氧化还原电位（EhCys／CySS）对非酒精性脂肪肝（NAFLD）肝细胞线粒体功能的影响。方法：用Eh Cys／CySS分别为0 mV（氧化）、－80 mV（正常）和－150 mV（还原）的氧化还原培养基培养肝细胞株LO2并采用油酸诱导细胞建立NAFLD模型。荧光探针DCFH-DA和MitoSOX分别检测细胞整体水平和线粒体活性氧簇（ROS）生成，使用apocynin（NADPH氧化酶抑制剂）和MitoQ10（靶向线粒体抗氧化剂）、rotenone（线粒体呼吸链复合体I抑制剂）和antimycin A（线粒体呼吸链复合体Ⅲ抑制剂）作用细胞检测线粒体复合体活性从而探究ROS的来源，JC-1检测细胞线粒体膜电位。结果：油酸诱导的NAFLD细胞模型使肝细胞内ROS增多，线粒体膜电位下降；氧化的Eh Cys／CySS加剧了NAFLD肝细胞ROS的生成以及线粒体膜电位的下降，而还原的Eh Cys／CySS能清除ROS并逆转线粒体膜电位的下降。线粒体ROS清除剂MitoQ10能显著地减少氧化的Eh Cys／CySS所增加的ROS，而apocynin效果不明显。 Rotenone作用于细胞后，ROS的增长率与细胞外Eh Cys／CySS有关，氧化状态下ROS增长率小且复合体I活性减弱，即氧化的Eh Cys／CySS能通过抑制线粒体复合体I增加ROS的生成。结论：氧化的Eh Cys／CySS能通过抑制线粒体复合体I，从而加剧NAFLD肝细胞ROS的生成，并使线粒体膜电位进一步下降，而还原的Eh Cys／CySS能减少高脂所致ROS生成并减轻线粒体损伤。
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SIRT2在浆液性卵巢癌细胞系中的表达及其对增殖、迁移和侵袭的影响
目的：研究SIRT2在卵巢表层上皮（ ovarian surface epithelium，OSE）及浆液性卵巢癌（ serous ovarian carcinoma，SOC）细胞系中的表达情况并从细胞增殖、迁移和侵袭这3个方面探讨SIRT2对SOC恶性生物学行为的影响。方法：运用Western blot技术检测OSE和SOC细胞系中SIRT2蛋白的表达水平；设计靶向SIRT2的siRNA，构建SIRT2过表达载体，分别瞬时转染OSE细胞系HOSEpiC和SOC细胞系HO8910，平板克隆形成实验和CCK-8实验研究SIRT2对细胞生长的影响；细胞划痕实验考察SIRT2在SOC细胞迁移中的作用；Transwell实验研究SIRT2对SOC细胞侵袭能力的影响。结果：5株SOC细胞系中SIRT2的表达水平显著低于OSE细胞系。在HOSEpiC细胞中沉默SIRT2，细胞克隆形成数增多，细胞活力增强。相反，在HO8910细胞中过表达SIRT2，细胞克隆形成数减少，细胞活力降低。沉默SIRT2促进HOSEpiC细胞的迁移，而过表达SIRT2则抑制HO8910细胞的迁移。沉默SIRT2的HOSEpiC细胞侵袭能力明显增加，而过表达SIRT2的HO8910细胞侵袭能力则显著降低。结论：SIRT2在SOC细胞中表达显著下调。 SIRT2在OSE细胞中是肿瘤抑制蛋白，抑制细胞增殖、迁移和侵袭。
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PARP-2在大鼠心肌肥大中的作用
目的：在细胞和整体水平研究多聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶2（PARP-2）在心肌肥大过程中表达的变化规律以及PARP-2对心肌肥大的调控作用。方法：健康雄性SD大鼠采用腹主动脉缩窄法（ AAC）建立心肌肥大动物模型，采用real-time PCR和Western blot检测PARP-2的mRNA和蛋白表达变化；使用PARP-2特异性的siRNA干扰序列来处理细胞后，通过检测心肌细胞表面积及ANF、BNP和β-MHC的mRNA表达变化来作为评判心肌细胞肥大状况。结果：AAC大鼠心脏组织中PARP-2的蛋白和mRNA表达均显著上调；在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大模型中，AngⅡ能时间和剂量依赖性地上调PARP-2的 mRNA和蛋白表达；用siRNA干扰序列沉默PARP-2能够逆转AngⅡ所诱导心肌细胞的肥大。结论：在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大的体外模型和腹主动脉缩窄诱导的心肌肥大动物的体内模型中，PARP-2的mRNA和蛋白水平均显著上调；特异性沉默PARP-2能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。
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一氧化氮对缺血再灌注豚鼠左心室流出道自律性电活动的影响
目的：研究一氧化氮（ NO）对豚鼠左心室流出道自发电活动的影响及其对缺血／再灌注（ I／R）时自发电活动改变的影响。方法：采用标准玻璃微电极细胞内电位记录技术观测外源性NO供体硝普钠（ SNP）对豚鼠左心室流出道自发慢反应电位的影响及其对I／R时该电位改变的影响。结果：1、10、100μmol／L SNP呈浓度依赖性地导致4相自动除极速度（ VDD）和自发放电频率（ RPF）明显增加，但1000μmol／L SNP的效应不明显。 SNP呈浓度依赖性地导致大舒张电位（ MDP）绝对值和动作电位幅度（ APA）增大，0相大除极速度（ Vmax ）加快，复极50％和90％时间（APD50和APD90）缩短。缺血10 min组VDD和RPF明显减慢，APA和Vmax明显增大，APD50和APD90明显延长。与缺血10 min组相比，再灌注10 min组VDD和RPF明显加快，且常出现节律不齐，MDP绝对值和APA明显减小，APD50和APD90明显缩短。1、10、100μmol／L SNP再灌注时可明显改善缺血造成的VDD和RPF减慢以及再灌注造成的节律不齐，1000μmol／L SNP的上述效应不明显。各浓度SNP再灌注时均可使缺血造成的APA和APD的改变恢复至对照组水平。结论：SNP可呈浓度依赖性地增加左心室流出道的自律性，并可明显改善I／R导致的自发慢反应电位的改变。
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DEK 表达下调通过抑制胃癌 SGC-7901细胞中NF-κB 信号途径诱导细胞凋亡
目的：研究DEK表达下调对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响，并分析其与NF-κB信号途径及凋亡相关蛋白表达的关系。方法：将DEK siRNA和对照siRNA转染胃癌SGC-7901细胞，并将SGC-7901细胞分为未处理组、对照siRNA组及DEK siRNA组。采用实时荧光定量PCR和Western blot检测3组胃癌SGC-7901细胞中DEK mRNA和蛋白的表达；流式细胞术检测3组SGC-7901细胞凋亡的变化；Caspase-Glo?-3／9试剂盒检测3组SGC-7901细胞中caspase-3和caspase-9的活性；Western blot技术检测3组SGC-7901细胞中NF-κB信号途径关键调控蛋白p65及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果：与未处理组和对照siRNA组相比，DEK siRNA组SGC-7901细胞中DEK的mRNA和蛋白表达水平显著下调（P＜0．05）。 DEK siRNA组SGC-7901细胞的早期凋亡率和总凋亡率均显著高于未处理组和对照siRNA组（ P＜0．05）。为显著的是，DEK siRNA转染细胞后，p65和Bcl-2蛋白表达下调，Bax蛋白表达上调，并伴随caspase-3和caspase-9活性上升。结论：DEK表达下调介导的SGC-7901细胞凋亡可能与NF-κB信号途径密切相关。
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CIK 细胞免疫联合 TACE 微创治疗原发性肝癌的研究进展
原发性肝癌（即肝细胞癌，hepatocellular carcino-ma， HCC）是临床常见的消化系统恶性肿瘤，近年来发病率呈现上升趋势。因其发病隐匿，早期症状不明显，绝大多数患者在确诊时已是晚期，手术切除率低，治疗主要依赖局部射频消融、动脉栓塞治疗、生物治疗及分子靶向治疗等非手术治疗。其中经导管动脉化疗栓塞（ transcatheter arterial chemoemboliza-tion，TACE）、经皮冷循环微波凝固等微创治疗已成为晚期HCC患者的首选方法，但Kim等［1］研究发现TACE常常难以使其滋养血管完全栓塞，且TACE治疗后患者免疫功能下降，易导致残留的肿瘤组组织复发和转移。因此就如何巩固 TACE 术后治疗效果，抑制肿瘤复发、减少转移，延长患者生存期和提高患者生活质量是肝癌治疗的难点。细胞因子诱导的杀伤细胞（ cytokine-induced killer cell，CIK cell）疗法已成为晚期肿瘤治疗的手段之一，对肿瘤细胞具有高效的杀伤作用，并能清除患者体内残留的肿瘤细胞、减少复发，已成为治疗恶性肿瘤的手段之一。而TACE等微创治疗联合CIK细胞治疗即可提高微创治疗后的治疗效率、有效延长患者的生存时间，又可提高患者的生活质量。本文就HCC 中CIK细胞免疫治疗联合TACE等微创治疗的现状及新进展加以综述。
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受体型蛋白酪氨酸磷酸酶Q的研究进展
研究表明，从基础代谢到细胞生长、分化、增殖等几乎每一细胞事件都与蛋白质酪氨酸磷酸化过程密切相关［1-4］。这一过程分别受蛋白酪氨酸激酶（ protein tyrosine kinases，PTKs）和蛋白酪氨酸磷酸酶（ protein tyrosine phosphatases，PTPs）共同调控。 PTKs能特异地使蛋白质上的酪氨酸残基磷酸化，而PTPs能使磷酸化的酪氨酸残基去磷酸化，两者相互协调，共同调节蛋白质的磷酸化水平（图1）。一旦PTPs与PTKs之间正常的平衡被打破，必将引起蛋白质酪氨酸磷酸化的异常，该异常可导致包括癌症在内的多种疾病发生。例如，表皮生长因子之类的受体酪氨酸蛋白激酶（receptor tyrosine kinases，RTKs）的激活和过量表达［5］、非RTKs（如Src、Bcr-Abl）的激活和过表达［6-7］都是细胞癌变的重要发病机制。
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1985 | 01 02 03 04 z1 |
