中国病理生理杂志
Chinese Journal of Pathophysiology 중국병리생리잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国病理生理学会
- 影响因子： 1.06
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-4718
- 国内刊号： 44-1187/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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二氢杨梅素联合顺铂显著诱导PC3细胞中Noxa和Bim过表达
目的:探讨二氢杨梅素对前列腺癌顺铂化疗的辅助作用并研究其机制.方法:MTT法检测前列腺癌细胞系LNCaP和PC3在不同浓度二氢杨梅素和顺铂处理下的细胞活力.Western blot实验检测顺铂和二氢杨梅素联用对PC3细胞FOXO1、Noxa和Bim表达水平、细胞色素C从线粒体中的释放及caspase-9和caspase-3活化水平的影响.免疫共沉淀实验检测PC3细胞中凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)和caspase-9的相互作用.流式细胞术检测PC3细胞的凋亡率.结果:二氢杨梅素辅助治疗可明显提高顺铂对前列腺癌的体外抗肿瘤活性(P<0.05).二氢杨梅素处理能显著促进PC3细胞FOXO1的表达,转染FOXO1小干扰RNA(siRNA)后,二氢杨梅素对顺铂的辅助治疗效果受到明显抑制.二氢杨梅素联合顺铂能显著诱导PC3细胞中Noxa和Bim的过表达,细胞色素C的释放,Apaf-1和caspase-9的相互作用,caspase-9和caspase-3的活化及凋亡的发生.转染FOXO1 siRNA后,二氢杨梅素联合顺铂对PC3细胞的凋亡诱导途径受到显著抑制.结论:二氢杨梅素可能通过FOXO1-Bim/Noxa途径增强顺铂对前列腺癌细胞的体外杀伤活性.
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氯胺酮对帕金森病小鼠模型α-突触核蛋白表达的影响
目的:观察氯胺酮(ketamine,Ket)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型黑质-纹状体区α-突触核蛋白(α-synu-clein,α-Syn)异常表达的影响.方法:选取48只健康雄性小鼠随机分为3组:对照组(NaCl组)、模型组(MPTP组)和治疗组(MPTP+Ket组).采用rotarod实验和gait analysis system评价3组小鼠行为学差异;免疫组化染色观察黑质区酪氨酸羟化酶阳性神经元数目变化;免疫荧光染色和Western blot检测小鼠脑黑质-纹状体区α-Syn的表达.结果:(1)Rotarod实验及gait analysis system结果显示,MPTP组较NaCl组转棒仪圈数减少,步距减小(P<0.05),MPTP+Ket组较MPTP组转棒仪圈数增加,步距增宽(P<0.05);(2)免疫组化及免疫荧光实验结果表明,MPTP组较NaCl组多巴胺能神经元数目减少,黑质-纹状体区荧光强度增加(P<0.05),MPTP+Ket组较MPTP组多巴胺能神经元数目增多,荧光强度减少(P<0.05);(3)Western blot实验结果显示,MPTP组较NaCl组黑质-纹状体区的α-Syn表达增多(P<0.05),而MPTP+Ket组较MPTP组的α-Syn表达量减少(P<0.05).结论:氯胺酮对PD小鼠黑质-纹状体区α-Syn异常表达具有抑制作用.
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沙利度胺对TGF-β1诱导HELF细胞CTGF基因启动子结合蛋白变化的干预作用
目的:探讨沙利度胺(thalidomide,THD)和转化生长因子β1(transformation growth factor-β1,TGF-β1)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblasts,HELF)中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)基因启动子的作用及其分子机制.方法:利用CTGF 基因启动子驱动的萤光素酶报告基因系统观察TGF-β1 和THD 对HELF 细胞CTGF 基因启动子活性的影响;同时以带有生物素标记的CTGF 基因启动子序列作为探针,采用DNA pull-down 技术分析TGF-β1 和THD 对CTGF 基因启动子结合蛋白的影响.结果:TGF-β1 能显著增强HELF 细胞中报告基因的活性(P <0.01),而THD 以剂量依赖方式显著抑制TGF-β1 上调报告基因活性的效应(P <0.01).同时,TGF-β1 引起的CTGF 基因启动子结合蛋白变化也能被THD 所抑制(P <0.05).结论:CTGF 基因启动子结合蛋白调节可能参与TGF-β1 对HELF 细胞中CTGF 基因启动子的激活过程,而THD 能有效拮抗此过程.
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千金藤素通过调节eIF4E相关miR-215促进RL-952细胞凋亡
目的:研究千金藤素对人子宫内膜癌RL-952细胞活力和凋亡的影响,并探讨其机制.方法:不同浓度的千金藤素作用于RL-952细胞后,MTT法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡,筛选佳药物浓度;real-time PCR检测千金藤素作用后细胞内微小RNA-215(miR-215)表达的变化;Western blot检测千金藤素作用后真核起始因子4E(eIF4E)及p-eIF4E表达水平的变化;生物信息学软件预测miR-215的下游靶基因;荧光显微镜、流式细胞术及Western blot检测miR-215对eIF4E及p-eIF4E的抑制作用.结果:随作用浓度的增大,千金藤素对RL-952细胞活力的抑制率逐渐上升,细胞凋亡率逐渐增加,其中30μmol/L为佳有效浓度;该浓度的千金藤素作用后,miR-215的表达水平较之对照组显著升高(P<0.01);生物信息学软件预测提示,eIF4E的3'UTR存在miR-215的结合位点;千金藤素作用后,eIF4E及p-eIF4E的蛋白水平均较对照组降低(P<0.05);将miR-215和pcDNA-GFP-eIF4E-3'UTR共转染至RL-952细胞后,GFP的表达水平降低(P<0.05);将miR-215转染RL-952细胞后,eIF4E及p-eIF4E的蛋白水平均较对照组降低(P<0.05).结论:千金藤素可有效抑制RL-952细胞的生长,并促进其凋亡,其机制可能与上调eIF4E相关miR-215的表达,进而调控eIF4E及其活性形式p-eIF4E的蛋白水平有关.
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不同分子亚型乳腺癌细胞系中RUNX3蛋白表达及定位研究
目的:检测人类Runt相关转录因子3(RUNX3)在不同分子亚型乳腺癌细胞系中的表达及其亚细胞定位情况,为进一步揭示RUNX3的失活机制和发现新的治疗靶点提供理论依据.方法:在5种乳腺癌细胞(MCF-7、T47D、SKBR-3、MDA-MB-231和BT-549)及正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中,通过Western blot和免疫荧光实验检测RUNX3的蛋白表达和亚细胞定位情况;采用来普霉素B(Leptomycin B)抑制RUNX3的出核,利用CCK-8法检测细胞活力的改变,EdU染色检测细胞增殖情况,Western blot和免疫荧光实验检测RUNX3的蛋白表达和亚细胞定位的改变.结果:与MCF-10A细胞相比,5种乳腺癌细胞系中RUNX3的核定位减少、胞浆定位增多.经Leptomycin B处理后,CCK-8实验结果显示5种乳腺癌细胞的活力明显减弱,EdU染色显示5种乳腺癌细胞增殖能力明显降低,Western blot和免疫荧光实验显示5种乳腺癌细胞胞浆中的RUNX3蛋白表达量明显降低、胞核中的RUNX3蛋白表达量明显增多(P<0.05).结论:不同分子亚型乳腺癌细胞中均存在RUNX3的胞浆转位失活现象,针对性地逆转RUNX3的出核过程可以明显降低肿瘤细胞的活力和增殖能力,可能成为乳腺癌潜在的治疗靶点.
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p38 MAPK在顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用
目的:探讨p38 MAPK在顺铂诱导大鼠近端肾小管上皮细胞(RPTC)凋亡中的作用.方法:首先采用Western blot实验检测0、5、10和20μmol/L顺铂处理24 h对细胞凋亡的影响,确定佳处理剂量;而后采用20μmol/L顺铂联合50 mg/L p38 MAPK抑制剂SB203580刺激RPTC,实验分为对照组、顺铂组及顺铂+SB203580(加入SB203580处理RPTC 1 h后再给予顺铂处理24 h).采用相差荧光显微镜观察和流式细胞术分析顺铂处理后RPTC的凋亡情况;采用Ac-DEVD-AFC试剂盒检测RPTC裂解液中的caspase活性;Western blot实验检测p38、磷酸化p38、cleaved PARP和cleaved caspase-3等的蛋白水平;pH计检测顺铂处理后RPTC外环境pH值改变.结果:20μmol/L顺铂处理RPTC 24 h,可以明显诱导细胞凋亡;顺铂处理15 min后RPTC中p38 MAPK开始磷酸化并达到高峰.顺铂处理后12.08％的RPTC呈凋亡形态,具有增强的caspase活性,并且cleaved PARP和cleaved caspase-3水平明显升高(P<0.05);p38 MAPK抑制剂SB203580可抑制p38的磷酸化,降低RPTC的凋亡率和caspase活性,并减少cleaved PARP和cleaved caspase-3的蛋白水平.同时,SB203580可逆转顺铂诱导的RPTC培养基pH值的改变.结论:p38 MAPK的磷酸化在顺铂诱导的RPTC凋亡中发挥作用.顺铂诱导RPTC凋亡后,可改变细胞外酸性环境,并可被p38 MAPK抑制剂SB203580所抑制.
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紫草素对HGF诱导的人肺癌细胞上皮-间充质转化的逆转作用
目的:探讨紫草素(shikonin)对肝细胞生长因子(HGF)诱导的人非小细胞肺癌PC9细胞迁移、侵袭及上皮-间充质转化(EMT)的影响.方法:用HGF诱导PC9细胞建立EMT模型,采用不同剂量的shikonin干预24 h后,MTT法检测细胞活力;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力;Wes-tern blot法检测细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的蛋白表达水平.结果:Shikonin可显著抑制PC9细胞的活力(P<0.01),随着给药剂量的增加,shikonin对细胞的生长抑制率显著上升,并呈一定的剂量依赖关系,IC50为9.364μmol/L.HGF可诱导PC9细胞发生迁移和侵袭;划痕愈合实验和Transwell小室实验显示,shikonin能明显抑制由HGF诱导的肺癌PC9细胞迁移和侵袭(P<0.01).Western blot检测结果显示HGF可诱导PC9细胞的EMT标志物E-cadherin蛋白表达下调,N-cadherin和vimentin蛋白表达上调,使其发生EMT;shikonin则可逆转由HGF诱导的PC9细胞E-cadherin蛋白表达下调及N-cadherin和vimentin蛋白表达上调(P<0.01).结论:Shikonin能逆转由HGF诱导的肺癌PC9细胞EMT,同时抑制其迁移和侵袭.
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丙戊酸钠对AML1-ETO转染细胞中CEBPA基因表达及表观遗传修饰的影响
目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对AML1-ETO转染细胞中CCAAT/增强子结合蛋白α(CEBPA)基因表达的影响及诱导沉默基因重新表达的机制.方法:不同浓度VPA处理AML1-ETO转染的急性髓系白血病细胞U937后,CCK-8法和台盼蓝染色活细胞计数检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞表面抗原,RT-qPCR检测CEBPA mRNA的表达,ChIP-qPCR检测组蛋白H3和H4的乙酰化状态.结果:VPA对U937及AML1-ETO转染细胞有明显的生长抑制作用,呈现浓度依赖性和时间依赖性,VPA诱导U937及AML1-ETO转染细胞CD11b和CD14表达升高,VPA明显上调CEBPA mRNA的表达水平,VPA处理组CEBPA基因启动子区核染色质的组蛋白H3和H4乙酰化水平升高(P<0.05).结论:VPA对U937及其AML1-ETO转染细胞均有生长抑制和促分化的作用.VPA可能通过特异性调节CEBPA基因组蛋白乙酰化水平,改变其表观遗传修饰特征,从而诱导CEBPA基因重新表达.
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胚鼠腭裂形成过程中腭胚组织全基因组DNA甲基化的研究
目的:分析胚鼠腭裂形成过程中腭胚组织全基因组DNA差异甲基化位点相关基因及基因组差异甲基化水平.方法:使用高效低成本全基因组DNA甲基化检测技术——甲基化修饰依赖性内切酶测序法(Methyl-RAD-Seq法)对妊娠第13.5天(GD13.5)、GD14.5和GD16.5(n=18)的胚鼠腭裂模型组和对照组腭胚组织进行全基因组DNA甲基化测序,比较基因组不同功能元件(3'端非翻译区、5'端非翻译区、TSS2000、内含子、外显子和基因间区)中甲基化位点的差异分布及甲基化水平差异基因,并对相关基因进行GO和KEGG通路分析.结果:(1)DNA不同元件的甲基化位点的峰值个数和峰值,对照组无明显变化,实验组甲基化整体水平随着时间推移逐渐降低;(2)GO功能富集和KEGG通路富集分析差异甲基化位点的基因及甲基化水平有差异的相关基因,其中与腭裂形成相关的基因为Fgf16、Jarid2、Kdm6a、Nr3c1、Tbx22和Trp53;(3)与腭裂形成相关的信号通路主要有MAPK、Wnt和TGF-β信号通路.结论:DNA甲基化在腭裂形成过程中可能起重要的调控作用.
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毛蕊花糖苷通过调控BDNF-TrkB信号通路改善CUMS大鼠的抑郁样行为
目的:观察毛蕊花糖苷(acteoside)对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠抑郁样行为的影响,并探讨脑源性神经营养因子-原肌球蛋白受体激酶B(brain-derived neurotrophic fac-tor-tropomyosin receptor kinase B,BDNF-TrkB)信号通路在其中的作用机制.方法:采用CUMS结合孤养的方式制备抑郁模型大鼠,成模后随机分为模型组、盐酸氟西汀(20 mg/kg)组和毛蕊花糖苷(30 mg/kg、60 mg/kg和120 mg/kg)组,每组18只,另取18只正常大鼠作为对照组,连续灌胃给药3周.采用强迫游泳实验和糖水偏好实验检测大鼠抑郁样行为的变化;免疫荧光和Western blot法检测大鼠海马BDNF-TrkB信号通路相关蛋白的表达情况;ELISA法检测脑组织中单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)的含量.结果:与对照组比较,模型组大鼠强迫游泳不动时间明显延长,糖水偏好量明显下降,海马BDNF和TrkB的表达均明显降低,脑组织中5-HT、DA和NE含量均显著减少;与模型组比较,盐酸氟西汀组和毛蕊花糖苷各剂量组以上各检测指标均得到显著逆转(P<0.05).结论:毛蕊花糖苷可能通过上调海马BDNF-TrkB信号通路、增加脑内单胺类神经递质含量而改善CUMS大鼠的抑郁样行为.
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室旁核内花生四烯酰乙醇胺对心衰大鼠的心脏功能和交感神经活动的影响
目的:探究慢性心衰大鼠下丘脑室旁核(PVN)内花生四烯酰乙醇胺(AEA)对心脏功能和交感神经活动的影响.方法:采用冠状动脉结扎法构建大鼠心衰模型,超声心动图检测心功能;PVN内连续4周分别灌注AEA、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)选择性抑制剂KN-93、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)通道特异性阻断剂辣椒平(CPZ)、Ca2+螯合剂BAPTA-AM和小电导钙激活钾通道(SK通道)阻断剂apamin后,检测交感驱动及心功能指标;同时采用不同浓度AEA孵育NG108细胞,荧光测定法检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i);Western blot检测CaMKII、SK2及磷酸化TRPV1蛋白水平.结果:与假手术组相比,心衰组左心室舒张末期压(LV-EDP)明显升高,左室压力大上升、下降速率(±dp/dtmax)和射血分数(EF)明显下降;PVN内AEA含量、[Ca2+]i及CaMKII、SK2和磷酸化TRPV1蛋白水平均显著降低;与溶剂组相比,心衰组PVN内灌注AEA可显著降低心衰大鼠死亡率和交感驱动指标,并改善心功能;然而,PVN内分别灌注KN-93、CPZ、BAPTA-AM和apamin均显著增强交感驱动指标并恶化心功能;AEA可剂量依赖性增加NG108细胞内[Ca2+]i及CaMKII、SK2和磷酸化TRPV1蛋白水平.结论:室旁核内CaMKII/TRPV1/Ca2+/SK2信号通路可能参与了AEA对心衰大鼠心脏功能和交感神经活动的影响.
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肌肽对1型糖尿病大鼠心脏的保护作用
目的:探讨肌肽(CAR)对1型糖尿病(T1DM)大鼠心功能的影响及保护机制.方法:采用链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射的方法制作大鼠1型糖尿病模型.将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照(C)组,肌肽对照(C+CAR)组,糖尿病模型(DM)组和糖尿病CAR治疗(DM+CAR)组,每组10只.12周后处死大鼠,颈总动脉插管测定心功能;酶联免疫吸附法测定左心室肌超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;real-time PCR法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的mRNA表达;免疫荧光法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的分布;Western blot法检测Cx43及蛋白激酶C(PKC)各亚型的蛋白表达.结果:与C组相比,DM组大鼠左心室舒张末压(LVEDP)升高,左心室内压大上升和下降速率(±dp/dtmax)降低(P<0.01);左心室肌组织SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.01);TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平升高(P<0.01);Cx43分布紊乱;磷酸化Cx43和PKCε蛋白水平升高(P<0.01).与DM组相比,DM+CAR组的LVEDP降低,±dp/dt升高(P<0.01);左心室肌组织的SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05);TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平降低(P<0.01);Cx43分布好转;磷酸化的Cx43及PKCε蛋白水平降低(P<0.01).结论:肌肽治疗能改善1型糖尿病大鼠心功能障碍,其机制可能与降低左心室氧化应激和炎症反应,通过PKCε抑制Cx43磷酸化,并改善其分布有关.
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糖皮质激素对体外中央记忆性CD8+T淋巴细胞的诱导分化作用
目的:以糖皮质激素对人CD8+T淋巴细胞的诱导作用为线索,探究其对体外CD8+中央记忆性T淋巴细胞(central memory T cells,TCM)的诱导分化作用,以期为CD8+TCM过继性免疫疗法提供新的扩增方案.方法:通过密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,经磁珠和流式细胞术分选出初始CD8+T细胞,将细胞使用细胞因子激活之后分为对照组和实验组,在实验组中加入不同浓度的2种糖皮质激素(醋酸可的松和氢化可的松),进行体外培养,后通过流式细胞术检测2组细胞中CD8+TCM的诱导分化情况,并通过CFSE染色判断细胞增殖情况,通过早期凋亡试剂Annexin V染色判断药物本身对CD8+T细胞的毒性作用.结果:浓度梯度实验发现,1μmol/L醋酸可的松对CD8+TCM表现出良好的诱导效果,氢化可的松在0.5μmol/L的诱导效果较好.分别在体外培养的第3天和第6天,CFSE染色法检测细胞的增殖情况,经统计学分析发现实验组和对照组之间的差异无统计学显著性,表明糖皮质激素不影响细胞的自然增殖.Annexin V染色法表明,这2种药物无显著的促进凋亡作用,对淋巴细胞毒性小.结论:糖皮质激素在体外对人CD8+TCM具有良好的诱导作用.这为改善过继免疫治疗中TCM的体外扩增提供新的参考方法,并且在理论上加深对糖皮质激素生物学功能的理解.
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紫草素对卵巢癌细胞SKOV3/DDP顺铂耐药的逆转作用
目的:探讨紫草素是否逆转卵巢癌细胞SKOV3/DDP的顺铂耐药效应及其作用机制.方法:采用CCK-8法确定紫草素和顺铂的佳作用条件,流式细胞术检测细胞的周期分布及凋亡率;Western blot检测周期及凋亡相关调控因子细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、P18、p-Rb、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平.结果:CCK-8实验结果显示,相较于单用顺铂,联合使用紫草素对顺铂耐药卵巢癌细胞SK-OV3/DDP的生长抑制作用较为显著.此外,联用紫草素和顺铂可显著抑制细胞周期G1/S转化,并增加细胞早期凋亡率.Western blot结果显示,相较于顺铂处理组,紫草素和顺铂联用组的cyclin D1、CDK2、p-Rb及Bcl-2的蛋白水平显著降低,而P18、Bax及cleaved caspase-3的蛋白表达显著增加.结论:紫草素可逆转卵巢癌SKOV3/DDP细胞的顺铂耐药效应,其作用机制可能与影响细胞周期及凋亡相关因子的表达,进而抑制细胞活力促进细胞凋亡相关.
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SATB1高表达通过促进上皮-间充质转化而介导鼻咽癌细胞侵袭和转移
目的:探讨鼻咽癌(NPC)中特殊富含AT序列结合蛋白1(SATB1)的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系.方法:免疫组化检测76例临床NPC及61例对照鼻咽黏膜慢性炎症(NPI)组织样本中SATB1、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达,并分析NPC中SATB1与患者临床参数、E-cadherin和vimentin表达的相关性.体外培养不同分化状态的NPC细胞系CNE1、CNE2Z及C666-1,筛选出SATB1高表达细胞系,采用小干扰RNA(siRNA)沉默SATB1表达后,分析上皮-间充质转化(EMT)相关分子的表达及细胞侵袭能力的改变.结果:临床鼻咽组织中SATB1表达定位于胞质和胞核,NPC组中SATB1阳性表达率显著高于对照NPI组(P<0.01);E-cadherin在NPI黏膜上皮中呈膜阳性表达,NPC中膜表达水平下降,但出现胞质阳性.NPI中E-cadherin膜阳性率为100％,显著高于NPC的32.89％(P<0.01).Vimentin呈胞质阳性,NPI上皮细胞中均阴性,但NPC中阳性率为51.32％(P<0.01).NPC中SATB1高表达与患者性别、年龄及N分期无关,但与T分期和M分期均呈正相关(P<0.05);SATB1高表达与vimentin呈正相关(r=0.358,P=0.009).NPC细胞系中SATB1表达与细胞分化水平呈负相关.采用siRNA敲减C666-1细胞中SATB1表达后,E-cadherin表达上升,vimentin表达下降,且细胞侵袭能力下降.结论:SATB1高表达通过促进EMT而介导NPC临床进展.
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IgE-FcεRI交联促进过敏性哮喘小鼠动脉粥样硬化的发生发展
目的:观察过敏性哮喘加速小鼠动脉粥样硬化(AS)的发生和发展是否与Th2细胞及白细胞介素4(IL-4)有关,以及免疫球蛋白E(IgE)-Fcε受体I(FcεRI)交联激活巨噬细胞途径在其中发挥的作用.方法:取6周龄的ApoE-/-小鼠,以卵清蛋白致敏和激发建立过敏性哮喘模型,并分为对照组、哮喘安慰剂组和哮喘IL-4单克隆抗体干预组,分别干预8周,干预结束后处死小鼠,油红O染色检测主动脉根部斑块面积,流式细胞术检测脾脏Th2细胞比例,real-time PCR检测IL-4、IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)和巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP1α)的mRNA表达水平,ELISA法检测血清IL-4和IgE的含量.结果:与对照组相比,过敏性哮喘ApoE-/-小鼠主动脉根部AS病变显著加重,并伴有体内Th2细胞和IL-4水平的增高,同时斑块处IgE和FcεRIα的表达显著增高,MCP-1、MIP-1α和IL-6的mRNA表达也显著增加;IL-4单克隆抗体干预8周后,主动脉根部AS病变缓解的同时,增高的IgE和FcεRIα表达被显著抑制,巨噬细胞相关炎性因子的表达水平也显著降低.结论:过敏性哮喘显著加速ApoE-/-小鼠AS病变进展,此作用与体内Th2细胞和IL-4水平增加,以及IgE-FcεRI交联激活巨噬细胞途径有关.
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Mito-cpYFP cDNA转基因小鼠的建立及其自由基分布规律的初步探讨
目的:利用可实时动态测量超氧阴离子自由基的环状排列黄色荧光蛋白(circularly permuted yellow fluorescent protein,cpYFP)构建可实时动态监测活体动物体内自由基的转基因动物模型.方法:应用转基因技术将载有可定位于线粒体内的cpYFP(mitochondria-targeted cpYFP,mito-cpYFP)的载体pRP(Exp)-CAGG>mito-cpYFP注射到C57BL/6小鼠的受精卵中,采用PCR及RT-PCR的方法鉴定阳性小鼠,通过荧光观察自由基的分布并辅助鉴定阳性小鼠.结果:PCR、RT-PCR及荧光观察结果表明mito-cpYFP cDNA转基因小鼠构建成功.通过与野生型C57BL/6小鼠交配,得到F1、F2和F3代的新生幼鼠共计494只,其中,阳性幼鼠为255只,阳性率为51.6％.转基因阳性鼠体内出现了绿色荧光,其解剖伤口、肠道、脑部及口腔黏膜等荧光明显,而肾脏、肝脏及胸腺等荧光则较弱,耻骨联合部和膀胱出现绿色荧光,但约0.5 h后消失.结论:我们成功制备了可稳定表达并遗传mito-cpYFP的转基因小鼠品系.在活体动物体内,自由基在黏膜层含量较多.此模型可研究自由基在生物体内的含量及分布规律,为后续生物自由基作为信号分子在机体内传导途径的研究提供有效的工具.
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黄芩苷通过影响miR-141上调Sirt1表达而抑制高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞凋亡
目的:探讨黄芩苷在高糖环境下对小鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响,并从微小RNA-141(miR-141)/沉默信息调节因子1(Sirt1)通路深入阐释黄芩苷对糖尿病肾病的治疗机制.方法:高糖(25 mmol/L葡萄糖)培养小鼠肾小球系膜细胞系SV40-MES-13模拟构建糖尿病肾病细胞模型,并分为正常对照组、高糖组、黄芩苷组和高糖+黄芩苷组.qPCR检测miR-141的表达水平,Western blot检测Sirt1的表达水平.双萤光素酶实验检测Sirt1与miR-141的调控关系.流式细胞术检测细胞凋亡.结果:与正常对照组相比,高糖条件下培养的系膜细胞内miR-141表达水平明显上调,Sirt1蛋白表达水平明显下调,细胞凋亡水平显著增加(P<0.01);与高糖组比,高糖+黄芩苷组的细胞凋亡和miR-141表达水平明显降低,Sirt1蛋白表达水平明显升高(P<0.01).敲减Sirt1表达可以逆转下调miR-141对系膜细胞细胞凋亡和细胞内Sirt1蛋白水平的作用.过表达miR-141可以逆转黄芩苷抑制高糖对Sirt1蛋白水平和细胞凋亡的作用;过表达miR-141对系膜细胞的作用可以进一步被Sirt1的过表达所逆转.结论:黄芩苷可以通过抑制miR-141过表达,促进Sirt1表达水平上升,终缓解高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞凋亡,达到治疗糖尿病肾病的作用.
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miR-7敲减CD4+T细胞过继转输对小鼠急性肝损伤模型的影响
目的:观察过继转输微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(knockdown,KD)CD4+T细胞对小鼠急性肝损伤模型的影响,并探讨其意义.方法:利用磁珠分选技术分别获得正常野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠脾脏中CD4+CD62L+T细胞;CFSE染色标记后,按每只小鼠2×106个细胞,经尾部静脉注射给同系WT小鼠,并利用伴刀豆球蛋白A建立急性肝损伤模型;观察过继转输后2组小鼠肝脏的形态、重量及其重量指数的变化;HE染色观察小鼠肝脏组织的病理学变化;real-time PCR检测小鼠肝脏组织中凋亡相关分子Bax和P53的表达;流式细胞术检测小鼠肝脏组织中CFSE标记的CD4+T细胞活化相关膜分子CD62L表达水平以及细胞因子白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达变化.结果:与对照组相比,过继转输miR-7KD小鼠CD4+CD62L+T细胞组(miR-7KD转输组)小鼠的肝脏重量明显减轻(P<0.01),但重量指数显著增加(P<0.05);HE染色显示miR-7KD转输组的肝脏细胞损伤增加;real-time PCR结果显示miR-7KD转输组肝脏组织中凋亡相关细胞分子Bax和P53的相对表达水平均明显升高(P<0.05);流式细胞术检测结果进一步显示肝脏组织中的CFSE+细胞活化相关分子CD62L的表达水平明显降低(P<0.01),细胞因子IFN-γ的表达水平明显增加(P<0.05),而IL-4的表达水平显著降低(P<0.01).结论:过继转输miR-7敲减CD4+T细胞可显著加重急性肝损伤模型小鼠的肝组织损伤.这为后续深入探讨急性肝损伤的发生机制提供了重要的实验基础.
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Rip2诱导人胰腺癌细胞自噬及其机制研究
目的:研究受体相互作用蛋白2(Rip2)是否诱导人胰腺癌细胞株Panc-1发生自噬及其作用机制.方法:用jetPRIME转染试剂将空质粒pEGFP-C2和重组质粒pEGFP-Rip2分别转染入Panc-1细胞,不做处理的细胞为对照组.转染后培养细胞48 h,采用Western blot检测Rip2、自噬相关蛋白[beclin-1和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)]及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白的表达;透射电子显微镜观察自噬体的数量.结果:转染pEGFP-Rip2的细胞Rip2蛋白表达显著增加.与对照组和pEGFP-C2组相比,pEGFP-Rip2组细胞的beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(均P<0.01);在透射电子显微镜下观察发现,pEGFP-Rip2组细胞内自噬体的数量明显多于对照组和pEGFP-C2组.pEGFP-Rip2组细胞的p-Akt和p-mTOR蛋白水平明显低于对照组和pEGFP-C2组(均P<0.01),而总Akt和mTOR的蛋白水平变化不明显.结论:过表达Rip2可诱导Panc-1细胞发生自噬,其作用机制可能与Rip2抑制PI3K/Akt/mTOR通路的活化有关.
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蝮蛇毒血小板抑制因子减轻LPS诱导的内皮细胞损伤
目的:探讨蝮蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)对体外脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及其作用机制.方法:体外培养HUVECs,运用LPS(1 mg/L)诱导HUVECs炎症损伤模型,实验分为空白对照组、LPS组、AHV-PI组和AHV-PI+LPS组.MTT比色法检测HUVECs的活力,倒置显微镜观察HUVECs的形态变化,筛选出AHV-PI适浓度为5 mg/L.流式细胞术检测细胞凋亡;免疫组化法观察胞内组织型纤溶酶原激活物(t-PA)以及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达情况;ELISA法检测HUVECs上清液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和组织因子(TF)含量;免疫荧光染色检测胞核内NF-κB亚基p65激活转位情况.结果:LPS组细胞明显梭形化,长宽比增大,呈成纤维细胞状,胞浆出现颗粒样物质.AHV-PI浓度低于5 mg/L时对HUVECs的活性和形态没有明显影响,但可减轻LPS引起的HUVECs的活力抑制和形态改变.与对照组比较,LPS组上清液中TF和ICAM-1含量升高,胞内t-PA和PAI-1表达减少;与LPS组相比,AHV-PI+LPS组上清液中TF和ICAM-1的含量显著降低,细胞内t-PA和PAI-1表达增多,细胞核内NF-κB p65表达减少.结论:AHV-PI能减轻HUVECs损伤,其保护机制与抑制细胞因子分泌及NF-κB活化有关.
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LPS联合z-VAD-FMK介导IFN-γ预处理巨噬细胞发生程序性坏死
目的:探讨脂多糖(LPS)联合z-VAD-FMK介导M1亚型巨噬细胞程序性坏死的机制.方法:使用佛波酯(PMA)和干扰素γ(IFN-γ)诱导THP-1细胞系分化得到M0和M1亚型巨噬细胞.以LPS(100μg/L)分别处理M0和M1巨噬细胞,检测不同时点的乳酸脱氢酶释放和DNA断裂情况,并观察不同抑制剂的影响.采用Western blot法检测受体相互作用蛋白(RIP)1、RIP3、细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、P38和NOD样受体蛋白3(NLRP3)的蛋白水平.结果:LPS能够诱导M1亚型巨噬细胞发生死亡,联合z-VAD-FMK可特异性介导M1亚型巨噬细胞发生程序性坏死,而对M0亚型巨噬细胞无此作用.IFN-γ能够上调RIP3表达,并增强LPS介导的JNK磷酸化,RIP3和JNK抑制剂可部分阻断LPS联合z-VAD-FMK介导的M1亚型巨噬细胞程序性坏死.结论:IFN-γ上调RIP3和增强LPS介导的JNK磷酸化,使得LPS联合z-VAD-FMK能特异性诱导经过IFN-γ预处理的巨噬细胞发生程序性坏死.
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不同β-肾上腺素能受体对低氧应激大鼠心脏舒缩功能的影响
目的:探讨不同β-肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR)在急性低氧应激中对大鼠左、右心室舒缩功能的影响.方法:健康雄性SD大鼠随机分为4组(n=7):对照组(control group)、非选择性β-肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔组(propranolol group)、选择性β1-肾上腺素能受体阻断剂阿替洛尔组(atenolol group)和选择性β2-肾上腺素能受体阻断剂ICI 118,551组(ICI 118,551 group),各组大鼠分别在常氧(西宁,海拔2260 m,20.9％O2,79.1％N2)和急性低氧(15.0％O2,85.0％N2)通气的状态下进行实验,监测各组大鼠心率(heart rate,HR)、左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)及左、右心室内压大上升和下降速率(±dp/dtmax)等心功能指标变化;同时,比较低氧通气前后动脉血气的变化.结果:常氧下,propranolol组、atenolol组与ICI 118,551组LVSP和左心室±dp/dtmax较给药前降低,同时propranolol组与atenolol组RVSP和右心室±dp/dtmax较给药前明显降低(P<0.05).低氧通气5 min后,各组大鼠与常氧组相比动脉血氧分压(PaO2)、LVSP和左心室±dp/dtmax均降低(P<0.05);但右心室±dp/dtmax明显升高(P<0.05);且低氧条件下control组心功能指标的变化程度均比propranolol组和atenolol组明显.结论:低氧应激时心脏β1-AR的激活可能是心脏发挥代偿调节的重要方式,但右心室通过紧张源性扩张代偿表现出的右心舒缩功能增强对低氧下机体循环血流量的维持更为重要.
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黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠JAK2/STAT3信号通路的影响
目的:研究黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠JAK2/STAT3信号通路的影响.方法:采用线栓法构建大鼠脑缺血再灌注损伤模型,取30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和黄角颗粒组,并按分组给予相应处理.采用ZeaLonga评分法对各组大鼠进行神经功能评分,TTC染色检测各组大鼠脑梗死体积百分比,HE染色观察各组大鼠脑组织病理形态,TUNEL染色法检测各组大鼠脑细胞凋亡率,Western blot检测各组大鼠脑组织中p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平.结果:与假手术组相比,模型组大鼠的神经功能缺损程度和神经细胞损伤程度明显加重(P<0.05);脑梗死体积百分比和脑细胞凋亡率显著上升(P<0.05);脑组织中p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平显著上调(P<0.05).与模型组相比,黄角颗粒组大鼠的神经功能缺损程度和神经细胞损伤程度明显减轻(P<0.05);脑梗死体积百分比和脑细胞凋亡率显著下降(P<0.05);脑组织中p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平显著下调(P<0.05).结论:黄角颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用可能与抑制JAK2/STAT3信号通路的激活相关.
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miR-146a在大鼠缺血再灌注肝损伤中的表达及作用
目的:评价肝组织微小RNA-146a(miR-146a)表达变化与大鼠缺血再灌注(I/R)炎性肝损伤的关系.方法:72只SD大鼠随机分为非手术组(N组)、假手术组(S组)及I/R组,按分组处理后分别检测各组大鼠0、2、12和24 h(每组各时点n=6)血浆丙氨酸转氨酶(ALT)活性及白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,real-time PCR检测肝组织Toll样受体4(TLR4)、IL-6、TNF-α和miR-146a表达,Western blot分析肝组织中TLR4、IL-6和TNF-α表达.结果:N组大鼠各时点血浆ALT活性及IL-6和TNF-α含量与肝组织中TLR4、IL-6和TNF-α表达量无显著差异.S组大鼠血浆IL-6和TNF-α含量升高(P<0.01),但血浆ALT活性与肝组织TLR4、IL-6和TNF-αmRNA及蛋白的表达量却无明显变化.I/R后,大鼠血浆ALT活性及IL-6和TNF-α含量明显升高(P<0.01),肝组织TLR4、IL-6和TNF-αmRNA及蛋白的表达量亦显著升高(P<0.01),且随着时间延长,各指标仍持续升高;肝组织miR-146a表达量显著下降,其中在缺血12 h时下降为明显,到24 h表达量再次升高,但始终低于I/R前(P<0.01).N组及S组大鼠各时点肝组织miR-146a表达量显著高于I/R组I/R后相应时点的表达(P<0.01).结论:I/R大鼠肝组织miR-146a表达下降的同时存在TLR4信号通路的激活及炎性肝损伤的发生.
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HBV PC区和BCP区变异与Peg-IFNα-2b疗效的关系及治疗前后的变化
目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前核心区(PC区)G1896A和基本核心启动子区(BCP区)A1762T/G1764A突变与聚乙二醇化干扰素α-2b(Peg-IFNα-2b)治疗应答的关系及相关变异在治疗前后的变化.方法:69例HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者,接受48周Peg-IFNα-2b治疗并随访24周.PCR扩增每位患者第0周和第72周HBV PC和BCP区并测序分析突变情况,同时监测患者第0、4、8、12、24、36、48、60和72周HBsAg、HBeAg、丙氨酸转氨酶(ALT)和HBV的DNA水平.结果:共14例患者检测为野生型(20.29％),55例患者检测为突变型(79.71％).野生型较突变型HBeAg基线水平更高(P=0.024).患者基线和72周时野生型、PC突变型、BCP突变型和PC+BCP突变型所占构成比发生明显变化(P=0.004).野生型、PC突变型、BCP突变型和PC+BCP突变型患者在72周的HBeAg血清转换率和联合应答率差异均无统计学意义.结论:PC区和BCP区突变对HBeAg阳性B/C基因型CHB患者Peg-IFNα-2b治疗应答无明显影响,但治疗前后各突变所占构成比发生明显变化.
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AGR2对毒胡萝卜素作用下人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响
目的:观察anterior gradient 2(AGR2)基因在内质网应激诱导剂毒胡萝卜素作用下对人肺癌NCI-H460细胞增殖能力及凋亡的影响.方法:通过慢病毒介导的shRNA建立AGR2基因沉默的稳定细胞系;采用集落形成实验检测AGR2在毒胡萝卜素作用下对细胞增殖能力的影响;流式细胞术分析在毒胡萝卜素作用下AGR2对细胞凋亡的影响.结果:成功构建AGR2基因沉默的稳定细胞系,Western blot结果显示AGR2的蛋白表达水平显著降低(P<0.01);在未经药物处理条件下,AGR2基因缺失对NCI-H460细胞集落形成率及凋亡无显著影响;毒胡萝卜素作用24 h后,AGR2基因沉默的细胞集落形成率远低于对照组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示AGR2基因缺失提高了毒胡萝卜素诱导的细胞凋亡率(P<0.05).结论:AGR2基因缺失不影响正常条件下NCI-H460细胞的存活及凋亡能力,但可使毒胡萝卜素作用下细胞的增殖能力显著下降,细胞凋亡率显著提高.本研究揭示了AGR2在内质网应激状态下促进肺癌细胞增殖和减轻细胞凋亡的作用,为进一步探讨AGR2在肺癌发生发展及耐药性中的作用提供了理论依据.
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内皮素-1对COPD炎症和氧化应激反应的影响
目的:研究内皮素-1对慢性阻塞性肺疾病(COPD)炎症和氧化应激反应的影响.方法:收集健康不吸烟者(30例)、健康吸烟者(30例)和COPD患者(29例)并诱导其产生痰液,检测内皮素-1在诱导痰中的浓度.采用香烟烟雾提取物刺激SD大鼠,构建肺气肿模型,采用内皮素A受体拮抗剂BQ123和非选择性内皮素受体拮抗剂波生坦进行干预,实验分为对照组、香烟烟雾干预组、选择性内皮素受体拮抗组和非选择性内皮素受体拮抗组.采用Western blot法测定肺组织中cleaved caspase-3的蛋白水平;明胶酶谱法检测肺组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性;ELISA法检测肺组织上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的浓度;采用生物抗氧化能力(BAP)检测试剂盒检测血清中BAP.结果:内皮素-1在健康吸烟者和COPD患者诱导痰中的浓度显著高于健康不吸烟者(P<0.05);COPD患者诱导痰中内皮素-1的浓度高于健康吸烟者(P<0.05).香烟烟雾干预组肺组织中cleaved caspase-3蛋白水平、MMP-2和MMP-9的活性及上清液中TNF-α和IL-1β的含量显著高于对照组(P<0.05);内皮素A受体拮抗剂能显著抑制肺组织中cleaved caspase-3蛋白水平、MMP-2和MMP-9的活性及上清液中TNF-α和IL-1β的含量(P<0.05).香烟烟雾干预组血清中的BAP较对照组显著降低(P<0.05);内皮素A受体拮抗剂能显著增加血清中的BAP(P<0.05).结论:内皮素-1可能通过调节细胞凋亡、基质金属蛋白酶活性、炎症以及氧化应激反应在COPD发生发展中发挥重要作用.
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谷氨酰胺对高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肥胖和胰岛素抵抗的影响
目的:探讨谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)对高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导小鼠肥胖和胰岛素抵抗的影响.方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照(normal control,NC)组、HFD组、HFD+丙氨酸(L-alanine,Ala)组和HFD+Gln组,每组15只.每周记录小鼠体重,给药16周后禁食不禁水12 h测定空腹血糖(fast-ing blood glucose,FBG),处死后剖腹取附睾脂肪垫并称重.采用酶联免疫法检测小鼠胰岛素(insulin,INS)、瘦素(leptin,LEP)、脂联素(adiponectin,APN)和胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)的水平,并计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)和胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI).结果:与NC组比较,HFD组小鼠体重和附睾脂肪垫重量明显升高,FBG、INS、IRI和LEP水平均明显升高,ISI和APN水平明显降低(P<0.05);与HFD组比较,HFD+Gln组小鼠体重明显下降,FBG和LEP水平明显降低,IRI明显减小(P<0.05).4组小鼠血清的GLP-1水平差异无统计学显著性.结论:谷氨酰胺减轻高脂饮食诱导的肥胖小鼠体重和胰岛素抵抗.
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晚期糖基化终末产物诱导人卵巢颗粒细胞株COV434凋亡并上调促炎因子HMGB1自分泌
目的:探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)是否诱导人卵巢颗粒细胞株COV434凋亡,并探究其可能的机制.方法:采用不同浓度AGEs牛血清白蛋白与人卵巢颗粒细胞株COV434共同孵育,流式细胞术观察细胞凋亡率,Western blot观察caspase-3和cleaved caspase-3的蛋白水平,ELISA检测细胞培养液上清中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)的含量.结果:与对照组比较,100 mg/L AGEs组和200 mg/L AGEs组早、晚期凋亡率显著增加,各组caspase-3蛋白水平的差异无统计学显著性,但与对照组比较,100 mg/L AGEs组和200 mg/L AGEs组cleaved caspase-3的蛋白水平显著增加(P<0.05).此外,与对照组比较,100 mg/L AGEs组和200 mg/L AGEs组细胞培养液上清中HMGB1促炎介质的水平显著上升(P<0.05).结论:晚期糖基化终末产物诱导人卵巢颗粒细胞株COV434凋亡可能与促炎反应有关.
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MEG3和腺苷对HepG2细胞自噬和增殖的影响
目的:研究母系表达基因3(MEG3)过表达和腺苷对人肝细胞癌HepG2细胞自噬和增殖的影响,并探讨MEG3和腺苷影响HepG2细胞自噬的可能机制和抑制细胞增殖的效果.方法:常规培养HepG2细胞,分为对照组、MEG3组(MEG3慢病毒转染)、腺苷组(1 mmol/L腺苷处理)和MEG3+腺苷组(腺苷组中加入MEG3慢病毒转染).Western blot检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)等蛋白的表达,MDC染色观察自噬体数量,CCK-8法观察细胞的活力,细胞计数仪检测活细胞数量.结果:与对照组比较,MEG3组和腺苷组中HepG2细胞内LC3-Ⅱ减少,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低,mTOR表达增加,HepG2细胞的活力降低(P<0.05),自噬体减少.与MEG3组和腺苷组比较,MEG3+腺苷组中HepG2细胞内LC3-Ⅱ和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值进一步降低,mTOR表达进一步增加,HepG2细胞的活力进一步降低,自噬体减少更加显著(P<0.05或P<0.01).MEG3组和腺苷组中HepG2活细胞数在24～72 h较对照组均明显降低(P<0.01),在MEG3+腺苷组中降低更为明显(P<0.01).结论:MEG3过表达和低浓度腺苷可激活mTOR通路,抑制HepG2细胞自噬和增殖.MEG3增强了腺苷对HepG2细胞的作用.
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内皮-间充质转化在肺动脉高压发病机制中的研究进展
肺动脉高压( pulmonary hypertension ,PH)是由多种已知和未知原因引起的肺循环血压异常升高的一种病理生理综合症,主要累及心血管及呼吸系统[1-2]. 根据2015年新PH的临床分型,PH分为动脉型肺动脉高压( pulmonary arterial hypertension , PAH)、左心疾病所致PH、肺部疾病或缺氧所致PH、慢性血栓栓塞性PH ( chronic thromboembolic pulmo-nary hypertension ,CTEPH)和其它不明原因或多种机制导致的PH[3].
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1985 | 01 02 03 04 z1 |
