B7转染人肝癌细胞株的建立及生物学特性的实验研究

研究共刺激信号在肿瘤免疫中的作用.脂质体介导DNA转移法将人B7基因转入人肝癌细胞株Smmc7721,建立新的细胞株B7+Smmc7721,PCR及逆转录PCR(RT-PCR)法鉴定.四唑盐(MTT)比色试验体外检测白细胞介素-2(IL-2)激活的LAK细胞(LAK-C)对两种肝癌细胞的杀伤活性.PCR,RT PCR法证实B7+Smmc7721细胞稳定表达B7基因,LAK细胞对B7+Smmc7721细胞的杀伤活性明显高于Smmc7721,结果有统计学意义.B7基因可以体外转染人肝癌细胞,并表达有活性的B7分子,并可明显增强IL-2激活的LAK细胞的肿瘤杀伤作用,为进一步开展临床应用奠定基础.

IL-18表达水平与HBV感染相关性的临床研究

为了探讨白细胞介素18(IL-18)在乙型肝炎病毒感染中的作用,应用流式细胞免疫学方法,对58例HBV感染者及10名正常对照外周血单个核细胞(PBMC)IL-18的诱生活性进行检测.结果表明:各临床类型之间IL-18诱生活性均有显著差异,病情愈重,活性愈高(P＜0.01).肝组织炎症活动度不同的慢性乙型肝炎患者诱生活性有显著差异(P＜0.05),随炎症程度的加重而上升.慢性乙型肝炎组中诱生活性与血清ALT水平呈正相关(r=0.63,P＜0.01).

肝性脑病的病因和防治探讨

肝性脑病至今仍以血液检查所见的生化代谢异常来解释,因不能圆满解释全面情况,需进一步探讨.不加选择收集70例肝硬化死亡者脑组织,分别作HE和免疫组化检查,观察病理改变和HBsAg、HBcAg表达.在70例脑组织标本中免疫组化染色HBsAg、HBcAg阳性者计30例,阳性率42.3%,临床上有肝性脑病表现者阳性率明显高于无表现者,脑组织病理改变较明显者,阳性率亦明显高于较轻者.肝硬化脑组织内出现HBsAg和HBBcAg表达,而且阳性率与脑组织病理改变和是否出现临床表现密切相关,提示HBV侵及脑组织,导致病理形态改变可能是肝性脑病的病理基础,生化代谢异常可能仅是肝衰的表现.

肝癌细胞的诱导分化及凋亡的研究

本文把肝癌细胞(SMMC-7721)作为靶细胞采用TRAP银染法、Westernblot法、电镜等方法,分别检测对肝癌细胞的全反式维甲酸(ATRA)的诱导凋亡及奥曲肽的诱导分化作用.ATRA在TRAP银染中未见梯状条带,然而在Westernblot分别于32KD、20KD处显示较强的Caspase-3的表达.提示,ATRA有较强的诱导凋亡的作用.在奥曲肽的刺激下可见肝细胞核浓缩、微绒毛减少、线粒体空泡化等变化,而且促进Caspase-3的表达并使其激活,从而诱导肝癌细胞的分化及凋亡.结果显示,上述两种制剂分别对肝癌细胞具有较强的诱导分化及促进凋亡的作用.

肝硬化患者红细胞免疫功能与脂质过氧化关系的研究

探讨肝硬化患者红细胞免疫功能的变化及其与脂质过氧化的关系.应用红细胞酵母菌花环法测定红细胞免疫功能,并采用化学比色法测定血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)含量.其中肝硬化患者31例,健康对照30例.肝硬化组RBC-IC花环率明显提高,P＜0.05;而RBC-C3b受体花环率与正常人无显著性差异(P＞0.05).肝硬化组SOD、GSH-Px、SOD/MDA低于正常(P＜0.01);而MDA明显高于正常(P＜0.01).线性相关分析显示,RBC-C3b花环率与MDA呈显著负相关(r=-0.423,P＜0.05).RBC-ICR与MDA明显正相关(r=0.523,P＜0.05).肝硬化患者红细胞免疫粘附功能降低,与活性氧代谢紊乱密切相关.

氧化苦参碱对肿瘤坏死因子诱导的人L02肝细胞凋亡的影响

观察氧化苦参碱(Oxy)对rhTNF-α诱导的L02肝细胞凋亡的影响.体外培养人L02肝细胞,采用H3-TdR法、台盼蓝染色及流式细胞仪观察Oxy对rhTNF-α引起的L02肝细胞的毒性作用影响.以rhTNF-α15ng/ml作用于细胞24h,细胞出现细胞核固缩,染色体凝集等凋亡样改变,台盼蓝染色阴性率在95%以上,应用流式细胞仪检测分析细胞周期,出现亚G1期峰(凋亡AP峰),G2-M期细胞明显减少.同时加入Oxy时,细胞生长率明显高于rhTNF-α处理组,并呈剂量相关性,在细胞周期图上未出现明显亚G1期峰.Oxy对rhTFN-α诱导的细胞凋亡有抑制作用.

白介素1和肿瘤坏死因子α在肝硬化中的临床研究

对白介素1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在肝硬化中的临床研究,以探索能够更早诊断肝硬化的方法.我们选择1997年11月～1998年11月住院患者92例,分三组即肝硬化组30例,慢性肝炎组31例,急性肝炎组31例.所有患者均做IL-1和TNF-α;IL-1采用ELISA法,TNF-α采用放免法检测.在肝硬化组检测IL-1为360.45±42.86,TNF-α为0.5898±0.035,明显高于其它两组(P＜0.001).在临床研究中显示TNF-α、IL-1的测定,可更准确地反应肝硬化的进程,为早期诊断肝硬化提供新的诊断方法.

CT引导经皮肝穿射频治疗肝癌

研究集束电极射频(radio frequency,RF)治疗肝癌的方法及疗效.在CT引导下将中空金属钛多极穿刺针经皮直接穿刺置入瘤体,分点一次或多次对瘤体进行射频治疗,术中直视肿瘤射频治疗后的图像及CT值,术后观察患者的瘤体血供情况、肿瘤大小及AFP值的变化.瘤体直径＜5cm的肝癌,术后1-5个月大部分瘤体血供消失,瘤体缩小,瘤体直径＞5cm的肝癌,配合介入栓塞治疗,多数瘤体缩小.CT引导多弹头射频治疗肝癌定位准确,近期疗效安全有效.

长春地区TT病毒的基因分型及其临床意义

为调查各种急、慢性肝炎中TT病毒的感染状况及临床意义,并检测TTV基因的分型.利用半套式PCR(semi-nested PCR)方法检测了TTV-DNA.利用邻近丁(neighbor-joining)法画出系统树.TTV DNA的阳性率在非甲非乙非丙型急性肝炎中为42.3%,在非乙非丙型慢性肝炎中为45.5%.基因型可分为1a、1b、2a、2b等型.TTV-DNA在非甲非乙非丙型急性及非乙非丙型慢性肝炎中的感染率高;在TT病毒与乙型、丙型肝炎病毒混合感染的慢性肝炎中,TT病毒干涉乙型及丙型肝炎病毒造成的肝细胞损伤的可能性很小.

集束射频治疗肝癌36例疗效分析

了解集束射频治疗(RF)肝癌的近期疗效.检查36例原发性肝癌(PHC)患者接受RF治疗前后肿瘤大小、AFP值、肿瘤血供以及超声情况.超声检查提示,36例PHC中有26例治疗一周后肿块缩小30%以上.一个月缩小40%以上.所有病例肿块内的血供消失.治疗一个月后AFP值下降400ng/L以下者A组占66.5%,B组占59.8%.RF治疗中晚期PHC的近期疗效较其他治疗好.

丙型肝炎病毒NS5b区酶切基因分型及其在干扰素治疗中的应用

探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对269例肝炎患者血清进行HCVNS5b区基因片段扩增,并对56例阳性PCR产物进行酶切分型,同时观察干扰素α-2b对其中48例慢性丙型肝炎的疗效.HCV单纯1b型感染、1b基因变异及2a型感染对干扰素的应答率分别为70%(14/20)、9.5%(2/21)、71.4%(5/7);其中完全应答分别为45%(9/20)、4.8%(1/21)、57.1%(4/7);部分应答分别为25%(5/20)、4.8%(1/21)、14.3%(1/7).1b基因变异组同单纯1b型及2a型感染组比较有显著性差异(P＜0.01),而单纯1b型感染组与2a型感染组比较无明显差异(P＞0.05).HCV单纯1b型感染或2a型感染者对干扰素敏感,而1b基因变异者干扰素治疗效果极差,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标.

抗幽门螺杆菌治疗对肝硬化病人血氨浓度影响的观察

为进一步阐明合并Hp感染的肝硬化患者,抗Hp治疗对血氨浓度影响的意义,对63例此类患者随机分组对照研究.治疗组采用联合口服奥美拉唑、克拉霉素、灭滴灵;并以单纯服用奥美拉唑为对照.治疗组及对照组,用药前、二周后及四周后,分别行自身及组间对比.结果显示,治疗组血氨浓度低于对照组,差异显著(P＜0.01);而且发现单用奥美拉唑组前后自身对比,血氨浓度明显升高(P＜0.01).根治Hp对降低血氨,避免诱发肝性脑病至关重要.强抑酸剂使胃内较长时间pH＞6,可使Hp尿素酶所产氨大量弥散入血,致血氨升高.提示临床上应充分重视对合并Hp感染的肝硬化患者的抗Hp治疗,并应警惕此类患者长期单纯使用强抑酸剂有致血氨升高之虞.

慢乙肝患者PBMC中HBV-DNA存在状态的测定及其临床意义

用限制性长度多态性分析法(Restriction Fragment length Ploymorphism,RFLP)加半定量的Southem Fragmentlength Ploymorphism,RFLP)加半定量的Southern Blot法测定40例慢乙肝患者外周血单个核细胞中HBV DNA的不同存在状态:游离型和/或整合型,并同时测定其血清Ig、C3、C4、NK细胞活性、TNF(肿瘤坏死因子)、CD4+/CD8+.结果显示:40例中阳性35例(22例为整合型,10例为混合型,3例为游离型);整合型较混合型(包括游离型)其IgG、IgM、C3、NK细胞活性、TNF、CD4+/CD8+明显降低,存在显著性差异(P＜0.01).提示:HBV感染PBMC后可影响机体的免疫应答.

原发性肝癌一氧化氮及一氧化氮合酶的研究

探讨一氧化氮(Nitric oxide,NO)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)与原发性肝癌(HCC)间的关系,用Griess反应测定162例患者的血浆亚硝酸盐/硝酸盐(NO2-/NO3-)水平,其中HCC82例,非HCC80例,健康对照36名.用免疫组化法检查组织中iNOS的含量,取正常肝脏组织20例作对照,慢性肝炎(CH)和肝硬化(LC)的肝脏组织各40例,HCC组织48例.结果显示,正常人血浆NO2-/NO3-含量为16.8±4.9μmol/L,有HCC的CH(63.4±18.2μmol)和LC(42.2±11.5μmol/L)明显高于非HCC的患者(CH:28.5±8.7μmol/L;LC:24.7±6.2μmol/L.P＜0.01),患CH的HCC患者血浆NO2-/NO3-水平明显高于LC基础上的HCC患者(P＜0.05).正常肝组织iNOS阴性,LC有25例(62.5%)阳性,CH 36例(90%)阳性,HCC 46例(95.8%)阳性;且CH(P＜0.025)及HCC(P＜0.001)的表达水平明显高于LC.提示HCC患者有NO分泌的增加,NO可能参与HCC的发生发展的病理过程.

疏肝化瘀颗粒对慢性肝炎肝硬化患者肝纤维化的影响

应用疏肝化瘀颗粒治疗慢性乙型肝炎患者41例,肝炎肝硬化35例.疗程3月.并设对照组慢性乙型肝炎31例,肝炎肝硬化28例.两组患者具有可比性.于治疗前后重点检测HA、LN、PCⅢ、ⅣC.治疗组患者肝纤维化指标下降显著,优于对照组,P＜0.05或P＜0.01.说明疏肝化瘀颗粒具有良好的抗肝纤维化作用.

激素治疗硬化性胆管炎有效一例报告

患者男性,20岁.因"反复黄疸二月余"于2000年1月4日入院.入院前二月无明显诱因出现皮肤、巩膜黄染,自觉乏力、消瘦,时有厌油食,饮食欠佳,伴尿黄,体重下降.既往:出生3个月时曾有过类似的症状,皮肤、巩膜黄染明显,因营养不良呈小老头状,曾到中国医大检查,考虑诊断为先天性胆道疾患,后症状逐渐缓解.未再出现类似症状.19岁时顺利进入部队当战士.

干扰素治疗后肝炎持续活动的慢乙肝7例报告

在慢性乙型肝炎的治疗中,基因重组干扰素作为首选的抗病毒药物已较为广泛地应用于临床.但我们在近年的临床应用中发现7例慢乙肝患者出现干扰素治疗后的肝炎持续活动.现报告如下:此7例为1992年至1997年间住院的慢性乙型肝炎患者,均为男性,年龄29-37岁.

新生儿尸体检查见肝癌一例报告

患儿,男,生后5天以哭声低、不吃奶、呼吸微弱入院.入院查体:T36℃,P120次/min,R30次/min左右.皮肤轻度黄染,口周围青紫,四肢及面部轻度水肿,肌张力低.呼吸极不规则,双肺呼吸音粗并少许水泡音,心前区可闻及Ⅱ～Ⅲ级收缩期杂音,肝脏质软,剑突下2.5cm,肋下2cm.入院后补液及抗感染治疗.第二天6 am呼吸骤停,经人工呼吸抢救后呼吸略好转,于7 am.呼吸再次停止,抢救无效死亡,临床诊断:呼吸衰竭.

Budd-Chiari综合征合并肝肺综合征二例报告

Budd-Chiari综合征系由肝静脉和/或肝静脉出口以上的下腔静脉(inferior vena oava,IVC)阻塞所致,但Budd-Chiari综合征合并肝肺综合征(Hepatopulmonary syndrome,HPS)鲜见报道,本文报道二例,并就HPS的发病机制进行探讨.

端粒酶抑制剂与肝癌治疗的研究进展

端粒、端粒酶与肿瘤的关系十分密切,近年来大量文献报道,端粒酶的激活虽然不是引起细胞癌变的早因素,但确实是一个维持肿瘤生长的继发性因素.目前抑制端粒酶活性已成为抗癌新靶点,许多种端粒酶抑制剂已问世,现对端粒酶抑制剂及其治疗肝癌的研究进展介绍如下.

肝癌组织端粒酶活性检测临床应用研究进展

自Kim[1]等1994年建立了端粒酶活性检测的TRAP法,并发现端粒酶活性与多数恶性肿瘤密切相关以来,有关端粒酶与肿瘤关系及其临床应用研究的报道逐年增加.本文综述了肝癌(hepatocellular carcinoma HCC)组织中端粒酶活性检测在肝癌诊断和预后判断上应用的研究进展.

MMPs/TIMPs与肝脏疾病

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组蛋白酶类,具有降解细胞外基质(ECM)作用,其活性受金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)调节,近年发现在许多肝脏疾病如各种原因的肝纤维化和肝细胞癌中MMPs和TIMPs起重要作用,本文对它们的组成、特性、生物学功能及临床意义等方面的进展作一综述.

内皮素与梗阻性黄疸

内皮素(Endothelin,ET)是1988年首先由日本学者Yanagisawa等从猪主动脉内皮细胞分离纯化出来的一种迄今已知强的内源性缩血管活性肽,具有强大的缩血管和促血管平滑肌细胞增殖的作用.近年研究表明,ET与肝脏疾病的关系也十分密切,在肝病的循环障碍病理机制中起作用,是肝脏损伤的一个重要致伤因素.本文简要回顾ET的生物学特性及其与梗阻性黄疸(Obstructive jaundice)肝损伤的关系.

糖原累积病-Ia诊治新进展

糖原累积病(Glycogen Storage Disease,GSD)是一组因参与糖原分解或合成代谢的酶缺乏所引起的疾病.根据所缺乏的酶不同,目前将GSD分为12型.肝糖原累积病即是GSD-Ⅰ型,属于糖原累积病中早发现的且在儿科中多见的一种.本病为肝脏内缺乏葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P酶)系统所致,又根据具体酶的缺乏不同分为三个亚型,Ⅰa葡萄糖-6-磷酸酶缺乏;Ⅰb葡萄糖-6-磷酸微粒体转化酶T1缺乏;Ⅰc无机磷酸盐微粒体转化酶T2缺乏[1].GSD-I a又名Von Gierke病或Gierke病,发病率约为1/20万,累及肝、肾,但不侵犯骨骼肌与心脏.本文就Gierke病的临床特点、诊断、治疗进展作一综述.

权威巨著《当代肝胆疾病治疗学》