中国免疫学杂志
Chinese Journal of Immunology 중국면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,吉林省医学期刊社
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-484X
- 国内刊号： 22-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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淋巴细胞共刺激信号和凋亡信号异常与RA免疫效应亢进的研究
目的:探究T淋巴细胞表面多种细胞信号分子所介导的细胞活化或凋亡信号在RA患者免疫功能紊乱中的作用.方法:采用流式细胞术检测RA患者外周血T细胞亚群及其表面共刺激分子CD154(CD40L)、CD30和凋亡受体CD95(Fas)的表达.结果:RA患者外周血T细胞亚群偏移,CD4+T细胞增加,CD8+T细胞减少;共刺激分子CD154在CD4+和CD8+T细胞上的表达均上调,但CD30分子的表达均降低,并以CD4+T细胞降低更为明显.同时,凋亡受体CD95分子在T细胞亚群上的表达均明显增加.结论:RA患者T淋巴细胞表面多种信号分子表达异常,共同导致了RA患者免疫功能紊乱.
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胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及临床意义
目的:研究胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞频数的变化,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤的病理类型及临床分期的相关性.方法:应用流式细胞仪分析胃癌患者和健康对照组外周血中单个核细胞(pBMCs)的CD4+CD25+调节性T细胞频数,并探讨该种细胞频数的变化与胃癌的相关性.结果:32例胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞19.40%±8.76%,高于25例健康对照组的10.68%±3.57%(P＜0.01).分化较好的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞16.79%±4.21%,低分化胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞20.02%±10.42%,两者之间差异显著(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞22.43%±8.36%,明显高于Ⅰ、Ⅱ期的胃癌患者(CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的15.27%±6.85%,P＜0.05).结论:CD4+CD25+T细胞在胃癌患者中比例升高,可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25+T细胞的高表达可作为胃癌患者肿瘤进展的重要标志.
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类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库的构建
目的:构建类风湿关节炎(RA)滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选和鉴定RA特异性基因的研究奠定基础.方法:取确诊RA患者的滑膜组织,用Trizol试剂提取总RNA,Oligotex离心柱分离mRNA,电泳检测其质量,逆转录合成双链cDNA,经末端修平、接头连接、酶切后去除过多接头,收集＞300 bp的cDNA片段,与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库.后,通过铺平板滴度测定及PCR技术鉴定文库质量.结果:所构建原始文库重组克隆数为2×107 pfu,扩增滴度8.9×1010 pfu/ml.PCR法检测片段插入率为90%,插入片段在300～2 000 bp之间.文库噬菌体裂解液PCR扩增得到BiP基因片段.结论:成功构建了高质量的RA滑膜T7噬菌体展示cDNA文库,为下一步RA自身抗原的筛选奠定了基础.
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免疫耐受的形成与打破
机体免疫系统维持对自身物质的免疫耐受、防止自身免疫性疾病发生的机制非常复杂.尽管胸腺能触发自身反应性T细胞的清除,但胸腺内仍有多种组织特异的蛋白表达量较少而不足于诱导自身耐受[1].机体也存在胸腺外耐受,如树突细胞(DCs)等抗原递呈细胞(APCs)可从其它细胞捕获自身抗原再传递给自身反应性T细胞(间接递呈),使后者缺失或无能而形成免疫耐受;或APCs由于不完全成熟而使得自身反应性T细胞仍具部分活性[2].因此,给予APCs成熟信号可能打破胸腺外T细胞的免疫耐受而诱发自身免疫性疾病.
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树突状细胞与相关激素的基础研究
内分泌系统和免疫系统之间的联系是近十几年来的研究热点.研究显示,淋巴细胞膜表面有多种神经递质受体及激素受体,提示神经内分泌系统通过其递质或激素和淋巴细胞膜表面受体结合,介导免疫系统的调节.
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治疗性乙肝疫苗的抗体效应
通常认为,疫苗接种是疾病预防的手段,即在未病时使用,而一旦患病,疫苗接种就无任何意义,只能用药物治疗.随着人类对免疫应答机制的深入研究,发现利用抗原激发患者针对感染病原体(如病毒)的特异性免疫应答,也是一种行之有效的治疗手段.治疗性疫苗的概念因此出现,对它的研究也日渐增多,现在已经成为免疫治疗学的重点研究课题.本文拟探讨治疗性疫苗抗体效应的实践意义.
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携带vIL-10的逆转录病毒重组体的构建及体外表达研究
目的:构建携带vIL-10表达序列的重组逆转录病毒rRV-vIL-10并检测该重组病毒对体外培养的兔滑膜细胞的转染情况和目的基因的表达水平.方法:①设计带有酶切位点的引物,对含有目的基因的质粒进行PCR扩增并纯化目的基因片段.②双酶切目的基因vIL-10与逆转录病毒载体pLXSN,将pLXSN与vIL-10进行定向克隆连接,筛出阳性克隆并进行鉴定.③扩增逆转录病毒重组体rRV-vIL-10,与辅助质粒pVSVG通过磷酸钙-共沉淀法共转染GP-293包装细胞,收集病毒并测定滴度.④将获得的重组逆转录病毒rRV-vIL-10转染体外培养的兔滑膜成纤维样细胞.细胞免疫组化测定目的蛋白的表达.结果:①成功构建了携带治疗基因的重组逆转录病毒rRV-vIL-10,病毒滴度为5×106 cfu/ml.②rRV-vIL-10能有效转染体外培养的兔滑膜成纤维样细胞,细胞免疫组化法可检测到vIL-10的表达.结论:①成功构建了携带治疗基因vIL-10的重组逆转录病毒rRV-vIL-10.②以逆转录病毒为载体可以成功地将vIL-10基因导入体外培养的兔滑膜成纤维样细胞并表达vIL-10蛋白.
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NKG2D真核表达载体的构建及其对YT细胞生物学功能的影响
目的:建立NK细胞受体NKG2D真核表达载体,通过转染NK细胞系YT,初步探讨NKG2D分子对YT细胞系杀伤功能的增强作用.方法:用RT-PCR方法从NK-92细胞中调取NKG2D基因片段,克隆到pGEM-T Easy载体并对克隆的DNA片段进行序列分析.用限制内切酶EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ消化pGEM-T Easy/NKG2D重组质粒,分离NKG2D片段,并插入真核表达质粒pEGFP-N1的相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pEGFP-N1/NKG2D.然后经脂质体介导转染CHO细胞和YT细胞.应用荧光显微镜观测、Western blot方法和免疫组化染色对转染细胞内pEGFP-N1/NKG2D的表达进行鉴定,MTT方法观察YT细胞对肿瘤细胞的杀伤功能.结果:RT-PCR扩增获得650 bp基因片段,经DNA序列分析证明所获得的DNA序列与文献报道的NKG2D序列一致.转染的CHO细胞在荧光显微镜下发出强绿色荧光,Western blot分析显示重组蛋白能特异地与抗人NKG2D单克隆抗体结合;免疫组化检测显示, 转染的CHO中有棕色颗粒,证明所构建的NKG2D真核表达载体可以在细胞中表达;转染NKG2D真核表达载体的YT细胞对乳腺癌细胞具有更强的杀伤效果.结论:所获得的表达NKG2D分子的真核表达载体,通过转染YT细胞, 初步鉴定所表达NKG2D分子具有生物学功能,可以提高NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性.
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MAGE-1基因疫苗的构建及其免疫学活性的研究
目的:制备MAGE-1基因疫苗,观察该疫苗诱导小鼠脾脏的抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞CTL活性及产生特异性抗体的影响.方法:应用基因重组技术,构建基因疫苗pcMAGE-1;转染HEK293细胞;RT-PCR及Western blot检测MAGE-1 mRNA及蛋白的表达;pcMAGE-1免疫3次BALB/c小鼠,末次免疫后7日收集血清及脾细胞.流式细胞术检测血清中抗MAGE-1多抗的产生,MTT法检测小鼠CTL杀伤活性.结果:构建的pcMAGE-1转染HEK293细胞,RT-PCR表明在mRNA水平有MAGE-1的表达;Western blot显示表达产物46 kD,与预期一致.基因疫苗免疫组小鼠血清MAGE-1抗体的产生增加,与SMMC-7721结合率显著高于对照组(P＜0.05).杀伤实验结果显示,免疫组小鼠脾细胞对SMMC-7721的杀伤率明显高于两个对照组(P＜0.05).结论:成功地构建了MAGE-1基因疫苗,该疫苗能够有效地诱导特异性免疫应答.
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抗p185单抗5E12Fab段基因的克隆及表达
目的:克隆抗p185单抗5E12的Fab段基因并在原核细胞进行表达.方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),以可变区第一骨架区的通用引物从分泌抗p185单抗的杂交瘤细胞系5E12中克隆Fd段和κ链的基因,重组到Fab表达载体中,在大肠杆菌中表达噬菌体抗体和可溶性Fab;根据前导肽序列设计引物,通过PCR介导的定点突变将V区基因氨基端序列恢复为5E12的原始序列;以NIH3T3/erbB-2细胞ELISA法、免疫组化法等进行特异性鉴定.结果:以第一骨架区的通用引物从小鼠杂交瘤细胞5E12中克隆到Fd段和κ链的基因,在大肠杆菌中表达出Fab段抗体但无特异性抗原结合活性,分别将Fd段和κ链V区基因的氨基端序列矫正为亲本单抗的原始序列后,恢复了Fab段的抗原结合活性.单独恢复Fd段可变区氨基端序列可恢复抗原结合活性.但同时恢复κ链后活性却有所下降.结论:成功构建了抗p185小分子抗体Fab并进行功能性表达,为进一步构建抗p185鼠单抗其他小分子抗体及其人源化改造打下基础;进一步证实抗体氨基端序列对抗体活性的重要性,为今后以PCR方法构建小分子抗体的工作提供了有益的借鉴.
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真核表达4-1BBL调节淋巴细胞功能活性及抗肿瘤效应的研究
目的:在非免疫非肿瘤细胞中转染表达4-1BBL,并研究4-1BBL在调节淋巴细胞功能活性及抗肿瘤方面的作用和机制.方法:构建含有4-1BBL全长cDNA序列的表达质粒p4-1BBL,脂质体介导体外转染BHK细胞,G418筛选出阳性克隆,RT-PCR、免疫细胞化学染色及免疫印迹检测4-1BBL的表达,检测BHK细胞表达的4-1BBL对脾淋巴细胞增殖和杀伤活性的影响;建立小鼠H22肝细胞癌移植瘤模型,裸DNA肌肉注射法体内转染表达4-1BBL进行肿瘤治疗,检测肿瘤生长速度;另外,利用免疫组化染色法分析瘤周组织中CD8+T淋巴细胞.结果:BHK细胞转染表达的4-1BBL能够显著增强肿瘤抗原肽激活的脾淋巴细胞增殖和杀瘤活性(P＜0.01),并显著提高IL-2和IFN-γ表达水平(P＜0.01),同时增强非特异性免疫杀伤活性.肿瘤接种部位转染表达4-1BBL,瘤周组织中CD8+T淋巴细胞数量显著增加(P＜0.01),肿瘤生长速率显著低于生理盐水对照组和空载体对照组(P＜0.01).结论:在肿瘤微环境中的正常细胞转染表达4-1BBL,能够有效促进T细胞增殖及杀伤等功能活性,可望成为肿瘤免疫生物治疗的一种新的手段.
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TIL识别的HLA-A2限制性人黑色素瘤特异抗原肽的研究
目的:探讨TIL识别的人黑色素瘤HLA-A2限制性的肿瘤抗原肽特性.方法:通过亲和层析柱从三种肿瘤细胞系(624-Mel、Chap-Mel和JY)中纯化HLA-A2蛋白和结合的多肽分子,经弱酸高温处理和离心超滤后,应用反相-高效液相色谱层析(RT-HPLC)分离各多肽组份,并将其各组份与T2细胞共同孵育、进行重建TIL识别的人黑色素瘤特异表位试验,鉴定肽分子生物活性,通过质谱分析所获活性肽分子特性,参照活性肽序列,制备人工合成肽加以进一步证实.结果:从RT-HPLC层析的624-Mel的肽组份,经特异表位鉴定发现3个活性峰(P19、P25和P31).其中P31, TIL杀伤率达67%,质谱分析表明肽分子量为948,氨基酸序列为H+ Ala Lue Trp Lue Phe Phe Gly Val Lue OH-的9肽分子.经特异表位测定表明人工合成肽具有纯化活性肽的生物活性特征.结论:分离鉴定的这一9肽分子是一种TIL识别的HLA-A2限制性肿瘤抗原肽,为肿瘤防治、合成肽疫苗的研究奠定了可靠的实验基础.
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乙型肝炎患者血清IgE和IL-4的检测及其临床意义
IgE与白细胞介素4(IL-4)是参与Ⅰ型超敏反应的主要抗体和介质,也是检测Ⅰ型超敏反应的重要指标.为了论证Ⅰ型超敏反应与乙型肝炎发病机制的关系,对急、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者结合血清谷丙转氨酶(ALT)浓度的变化,检测了血清内IgE和IL-4含量.现将研究结果报道如下.
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17β-雌二醇对子宫内膜间质细胞体外分泌趋化因子IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309的影响
目的:探讨17β-雌二醇对子宫内膜间质细胞分泌IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309的调控,以解析雌激素在子宫内膜异位症发生发展中的作用机制.方法:用不同浓度17β-雌二醇处理子宫内膜间质细胞48小时;此后选用10-9 mol/L 17β-雌二醇处理子宫内膜间质细胞12、24、36和48小时,ELISA法分析刺激前后培养上清中IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309分泌水平.结果:子宫内膜间质细胞体外高水平自然分泌IL-8,17β-雌二醇能抑制IL-8的分泌,呈剂量依赖性.RNATES和MIP-1α分泌水平较IL-8低,经雌激素刺激子宫内膜间质细胞后MIP-1α表现出与IL-8相同的分泌方式,但对RANTES分泌无明显影响.子宫内膜间质细胞经雌激素刺激前后均未检测到I-309.结论:雌二醇可能参与子宫内膜白细胞和单核巨噬细胞的募集,但不是异位灶中上述趋化因子高表达的原因.
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成熟DC固有胆碱能系统nAChRα7、ChAT和AChE及其调节的研究
目的:探讨成熟树突状细胞(dendritic cells,DC)是否存在非神经元性胆碱能系统及其调控机制.方法:分离正常小鼠骨髓细胞,体外用细胞因子(IL-4,GM-CSF)诱导、分化为DC,细菌脂多糖(LPS)刺激其成熟.光镜和流式细胞术进行DC鉴定.免疫荧光抗体方法、流式细胞术和RT-PCR方法进行DC烟碱样乙酰胆碱受体亚单位α7(nicotinic acetylcholine receptor subunitα7,nAChRα7)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase ,ChAT)和乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)检测.流式细胞仪检测神经节阻断剂美加明(mecamylamine, MEC)作用于成熟DC 12小时nAChRα7的变化.结果:成熟状态DC表达nAChRα7、ChAT、AChE蛋白和mRNA.nAChRα7蛋白主要分布于细胞膜,ChAT和AChE分布于细胞浆.AChE表达强,与ChAT比较(P＜0.05),nAChRα7表达量次之;MEC作用后nAChRα7蛋白明显下调(P＜0.05).结论:成熟状态DC 存在固有胆碱能系统通路物质,外源性因素(美加明等)可调节该通路.DC可能在胆碱能抗炎通路的免疫调节机制中发挥重要作用.
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快速老化小鼠胸腺细胞分化与Notch信号相关基因表达关系的研究
目的:研究快速老化小鼠(Senescence-accelerated mice,SAM)增龄过程中胸腺T细胞亚群的变化与Notch 1、Presenilin 1、2(PS1、2)、HES1等Notch信号转导通路相关基因mRNA表达变化及这两种变化的关系.方法:选择出生后1～8周龄SAM,采用流式细胞技术检测胸腺细胞亚群变化、用荧光实时定量PCR的方法检测Notch 1、PS1、PS2、HES1基因mRNA表达的动态变化.结果:SAM出生1～2周,胸腺中CD4+CD8+细胞所占比例较高,4周龄后逐渐降低,各周龄SAMP8与SAMR1之间无显著性差异;在CD4+CD8-细胞比例上,SAM呈增龄性增加,1～6周龄的SAMP8与SAMR1之间无显著性差异,8周龄的SAMP8低于SAMR1;在CD4-CD8+细胞比例上,SAM呈增龄性增加,4周龄后的SAMP8均明显高于SAMR1;Notch 1、PS2、HES1基因mRNA表达量呈增龄性增加,各周龄SAMP8的Notch 1基因表达水平高于SAMR1,4周龄后SAMP8的PS2、HES1基因表达水平高于SAMR1;PS1基因mRNA表达量呈增龄性降低,4周龄后的SAMP8低于SAMR1.结论:Notch 1、PS2、HES1的表达与胸腺CD4-CD8+细胞的分化呈正相关,PS1表达与胸腺CD4-CD8+细胞的分化呈负相关.
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PRLr mRNA在人体免疫系统中的表达
目的:探讨催乳素受体(PRLr)在人体免疫系统中的表达.方法:临床获取人中枢免疫器官胸腺瘤、骨髓和外周免疫器官淋巴结、外周血单个核细胞,经RNA抽提,RT-PCR扩增PRLr mRNA的特异片段,并进行测序.结果:从胸腺瘤、骨髓、淋巴结及外周血单个核细胞均扩增出PRLr mRNA,其片段长度与预计长度一致,均为276 bp,经测序证实为所需片段.结论:人中枢免疫器官胸腺瘤、骨髓以及外周免疫器官淋巴结、外周血单个核细胞存在PRLr表达,从受体角度直接证实内分泌激素PRL发挥免疫调节作用的生物学结构依据.
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重读"教学园地"栏目文章有感
中国免疫学杂志的栏目根据免疫学的发展及需要,有所增减."教学园地"是1993年设立的,立即受到免疫学专业教师,特别是一线执教老师们的关注,其中亦有部分研究生参与写作.翻阅刊出的文章,自1994年至今,约计21篇.其内容涉及医学5年制、7年制本科生及硕士、博士研究生的免疫学教学问题.再次阅读让我感到作者们的思维也在因势求进,与时俱进,由此引发出点点杂思.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 04 05 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
