重庆医科大学学报杂志
Journal of Chongqing Medical University 중경의과대학학보
- 主管单位: 重庆市教育委员会
- 主办单位: 重庆医科大学
- 影响因子: 0.72
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0253-3626
- 国内刊号: 50-1046/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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应用MALDI-TOF-MS技术分析转移和非转移黑色素瘤患者外周血清蛋白的差异表达
目的:应用蛋白质组学技术分析转移性和非转移性黑色素瘤患者外周血清中差异表达的蛋白质,初步探讨其对转移性黑色素瘤患者的诊断及治疗指导意义.方法:共收集101例患者外周血清,包括25例转移性黑色素瘤患者及76例对照者(31例非转移性患者和45例健康者).从中随机抽取73例(18例转移患者,20例非转移患者和35例健康者)用于建立区分模型,其余28例(7例转移患者,1 1例非转移患者和10例健康者)用来对区分模型进行盲法验证.运用基质辅助激光解离飞行时间质谱技术,对外周血清蛋白质进行检测,应用Ciphergen蛋白质芯片软件对蛋白质谱进行分析.结果:黑色素瘤转移患者外周血清与对照组外周血清蛋白质谱相比,质荷比为2 598.33、3 646.79、4 605.48、8 603.10、7 756.64 m/z和9 598.82 m/z,共6个蛋白质峰呈表达有明显差异(P均=0.000),以此构建出转移性黑色素瘤的诊断模型,它的诊断敏感性为83.33%,特异性为74.55%.另外对该模型进行了盲法验证,其诊断转移性黑色素瘤的敏感性为71.43%,特异性为76.19%.结论:黑色素瘤转移患者外周血清蛋白质表达谱与对照组相比有明显变化,相对分子质量为2 598.33、3 646.79、4 605.48、8 603.10、7 756.64 m/z和9 598.82 m/z的蛋白质点可以作为黑色素瘤转移患者诊断的潜在生物学标志物.
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探讨端粒酶在沙利度胺诱导U266细胞增殖抑制及凋亡中的意义
目的:探讨端粒酶活性及人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA的变化在监测沙利度胺诱导多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)U266细胞增殖抑制、凋亡中的意义.方法:CCK-8法测定沙利度胺对U266细胞增殖抑制作用;流式细胞仪检测U266细胞凋亡率;端粒重复序列扩增酶联免疫吸附实验(TRAP-ELISA)检测端粒酶活性;逆转录聚合酶链反应检测hTERT mRNA表达水平.结果:沙利度胺对U266细胞有增殖抑制和促凋亡作用,且均呈时间-浓度依赖性;10 μg/ml沙利度胺作用24 h和48 h,端粒酶活性值分别为(7.96±0.09)和(7.65±0.07),相比对照组均无明显变化(P=0.082 0),hTERT mRNA表达分别为(2.82±0.03)和(2.31±0.04),与对照组相比表达均下降,差异有统计学意义(P=0.033 0);50μg/ml和100μg/ml沙利度胺作用U266细胞24、48 h及72 h,端粒酶活性、hTERT mRNA表达分别与对照组比较表达均下降,差异有统计学意义(P=0.002 8).结论:沙利度胺诱导U266细胞增殖抑制、凋亡与端粒酶有关;与端粒酶活性相比,hTERT mRNA改变更灵敏,可作为沙利度胺治疗MM疗效判定指标之一.
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STAT3特异性抑制剂STA-21对乳腺癌MCF-7B细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨信号传导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)特异性抑制剂STA-21对乳腺癌MCF-7B细胞增殖及凋亡的影响.方法:空白组为单独培养MCF-7B细胞,实验组采用不同浓度STA-21作用于乳腺癌MCF-7B细胞后,用MTr法观察STA-21对MCF-7B细胞生长抑制的作用;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;Westernblot检测MCF-7B细胞P-STAT3、STAT3、细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、Bcl-xl蛋白的表达.结果:MCF-7B细胞经各浓度STA-21(10、30、50μmol/L)作用后,其细胞增殖的抑制率及细胞凋亡率较空白组明显增加(P=0.000);流式细胞仪检测发现STA-21可导致MCF-7B细胞阻滞于G1期;Western blot结果显示与空白组相比,STA-21可降低MCF-7B细胞P-STAT3、CyclinD1、Bcl-xl蛋白的表达(P=0.000),但对STAT3蛋白的表达基本无影响(P=0.367).结论:STA-21可在一定程度上抑制MCF-7B细胞的增殖及促进凋亡,其作用机制可能与抑制STAT3活性有关.
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ERCC1、RRM1和TUBB3指导个体化化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌的评价
目的:探讨切除修复交叉互补基因1 (excision repair cross complement group1,ERCC1)、核糖核苷酸还原酶M1亚基(ribonucleotide reduc tase,RRM1)、3型β微管蛋白(tubulin beta-3,TUBB3)指导化疗药物个休化选择在晚期非小细胞肺癌(nonmallcell lung cancer,NSCLC)患者的疗效和安全性.方法:47例晚期NSCLC患者,按病理组织充足与否分个体化化疗治疗组(A组)及对照组(B组).A组采用分支DNA-液相芯片技术测定ERCC1、RRM1及TUBB3的mRNA水平,并根据测定结果确定化疗方案,B组则使用吉西他滨+顺铂治疗.结果:A组有效率为63.2%,明显高于B组(P<0.05);A组、B组疾病控制率分别为78.9%和50.0% (P<0.05);A组中吉西他滨+顺铂患者的有效率高于B组相同方案化疗者;2组生活质量均较治疗前明显提高(P<0.05),但2组改善率无显著差别(P>0.05);2组不良反应无差异且均易耐受.结论:分支DNA-液相芯片技术测定ERCC1、RRM1及TUBB3的mRNA水平用于指导晚期NSCLC个体化化疗方案,能显著提高化疗有效率;吉西他滨+顺铂方案在分子标志物指导策略下运用效果更明显,但仍需进一步探索更有效的个体化治疗方案.
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125I放射性粒子植入联合CIK细胞对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用
目的:观察125I放射性粒子组织间植入联合细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制效应.方法:取健康人外周血单个核细胞,加入不同的细胞因子促进CIK细胞成熟,流式细胞仪检测CIK细胞表型,CD3+CD56+双阳性细胞达20%以上为达标;用人肝癌细胞株SMMC-7721建立裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为125I放射性粒子组(A组)、CIK细胞组(B组)、125I粒子+CIK细胞组(C组),空白对照组(D组),分别加处理因素,每4d测量各组移植瘤体积,观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用.HE染色检测各组移植瘤病理变化,免疫组织化学技术检测各组Ki-67蛋白表达,TUNEL试剂盒检测各组移植瘤原位凋亡.结果:125I粒子放射性粒子植入联合CIK细胞静脉输入可明显抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,C组瘤体积为(0.42±0.17)cm3,显著小于A组(1.23±0.83)cm3、B组(3.77±1.42) cm3和D组(6.62 ±0.53) cm3,各组瘤体积有显著性差异(F-155.706,P<0.001);C组抑瘤率为93.71%,显著高于A组(81.33%)和B组(43.06%).免疫组化染色发现各组移植瘤Ki-67蛋白表达的平均吸光度值分别为:C组(0.481±0.063)、A组(0.592±0.104)、B组(0.669±0.120)、D组(0.797±0.113),差异有统计学意义(F=24.334,P<0.001).TUNEL法发现:C组凋亡的平均光吸光度值(0.859±0.067),显著高于A组(0.756±0.055)和B组(0.517±0.051),差异有显著统计学意义(F=318.373,P<0.001),联合治疗明显抑制细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡.结论:125I放射性粒子永久植入联合CIK细胞免疫治疗在体内可显著抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,抑制癌细胞增殖,诱导其凋亡,其疗效优于单一治疗方式,局部内放疗联合细胞免疫治疗可能有协同增效作用,有可能成为肝癌综合治疗的方法之一.
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TIAM1基因与大肠癌上皮间质转化的相关性及其相关miRNA的生物信息学分析
目的:对TIAM1基因进行生物信息学分析,探讨TIAM1基因在大肠癌细胞中的生物学功能及其在细胞信号网络中的作用.方法:通过miRNA预测工具预测与TIAM1相互作用的miRNA,通过TIAM1基因敲除的大肠癌细胞株SW480表达谱数据分析与TIAM1基因缺失相关的miRNA.综合2种分析,挑选出可能与TIAM1相关的miRNA.预测此miRNA的靶基因,并对靶基因进行通路富集,富集结果与TIAM1相互作用蛋白通路富集结果进行比较.将TIAM1缺失的SW480表达谱数据比野生型SW480表达谱数据中对数比大于1的基因集进行通路富集.对TIAM1相互作用蛋白网络中的蛋白进行通路富集.对TIAM1间接作用于上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)标志物E-cadherin和Vimentin的中间传递蛋白进行通路富集.结果:直接预测与间接预测均表明miRNA hsa-mir-340可能与TIAM1相互作用,通过通路富集结果的比较也发现hsa-mir-340功能上与TIAM1协同.对TIAM1缺失的SW480表达谱数据分析发现,TIAM1缺失后P53信号通路、DNA损伤的应答反应、Toll样受体信号通路等表达上调,表明TIAM1缺失可能与抑瘤作用增强相关.对TIAM1相互作用蛋白的通路富集可以发现TIAM1相互作用蛋白参与了细胞黏附、细胞骨架重构、细胞增殖与生长等信号通路,与肿瘤的发生发展密切相关.对TIAM1与EMT标志物E-cadherin和Vimentin的中间传递蛋白分析发现其主要由转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)受体、雄激素受体、核因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)等信号通路的成员构成.说明这些信号通路可能与TIAM1促进大肠癌EMT的发生相关.结论:预测hsa-mir-340能够调控TIAM1的表达,TIAM1的缺失可能导致抑瘤作用增强,TIAM1相互作用蛋白与肿瘤的转移密切相关.TIAM1可能通过TGF-β受体、雄激素受体、NF-κB、MAPK等信号通路影响EMT标志物E-cadherin和Vimentin的功能,进而促进大肠癌EMT的发生和转移.
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SIRT1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的影响
目的:探讨慢病毒介导沉默信息调节因子1 (silent information regulator 1,SIRT1)基因的shRNA对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响.方法:设计、合成2对针对SIRT1基因shRNA的寡核苷酸序列,与pLentilox3.7-GFP载体连接产生重组慢病毒质粒pshSIRT1-1、pshSIRT1-2,同时构建不针对任何基因的shRNA阴性对照pshCont.将表达shRNA的载体plentilox3.7与pLP1、pLP2和pLP/VSVG 3种质粒共转染293FT细胞,包装产生慢病毒并测定病毒滴度.将慢病毒感染人乳腺癌细胞MCF-7,行real time-PCR和Western blot验证SIRT1基因的沉默效果,台盼蓝排斥实验和流式细胞仪分别检测其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响.结果:成功构建靶向SIRT1基因shRNA慢病毒载体并获得了相应的慢病毒.2个靶向SIRT1的shRNA均能有效抑制SIRT1基因的表达(P=0.000 2),并使MCF-7细胞增殖明显减慢,凋亡明显增加(P=0.006 0).结论:靶向SIRT1基因RNA干扰能显著抑制MCF-7细胞的生长并促进其凋亡.
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促血管生成素2在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响
目的:探讨促血管生成素2 (angiopoietin2,Ang2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤病理分期的联系;观察反义Ang2基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响.方法:用Western blot法检测Ang2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中的表达,用免疫组化法检测53例不同病理分期的胃癌组织中Ang2蛋白的表达;应用脂质体转染法将既往实验合成[1]的pEGFP-N 1-anti Ang2转染体外培养的人胃癌细胞SGC-7901,以空载体(pEGFP-N1)转染组和未转染组作对照,RT-PCR及免疫组化检测转染后Ang2基因及蛋白的表达,MTT法和流氏细胞仪(flow cytometry,FCM)检测反义Ang2基因转染对细胞生长和细胞凋亡的影响;分别用上述3组细胞注射于裸鼠皮下,对比观察肿瘤生成的速度和肿瘤组织中的血管生成数量.结果:Ang2蛋白在正常胃黏膜组织中不表达,在不同病理分期的胃癌组织中均呈阳性表达(F=166.76,P<0.000 1);RT-PCR及免疫组化显示反义Ang2基因转染组无Ang2 mRNA及Ang2蛋白的表达,MTT法检测显示反义Ang2基因转染组细胞体外增殖能力明显低于其他两组(F=10.39,P=0.002 4),FCM检测显示其活细胞比率明显低于其他两组(x2=3 188.980 5,P<0.000 1);转染了反义Ang2基因的胃癌细胞成瘤速度较其它两组明显减慢[第6天(F=10.18,P=0.000 5)、第18天(F=7.80,P=0.002 1)及第30天(F=79.58,P<0.000 1)],肿瘤组织中血管生成的数量较其它两组明显减少[第1周(F=15.18,P<0.000 1)、第2周(F=3.50,P=0.044 4)、第3周(F=39.02,P<0.000 1)].结论:胃癌组织中Ang2的表达与胃癌血管生成及胃癌侵袭能力密切相关;反义Ang2基因转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901中Ang2 mRNA及Ang2蛋白的表达,抑制其体外生长,促进其凋亡;并对其体外成瘤性及其新生血管的生成有明显的抑制作用.
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带有HPV-16 E6/E7基因的树突状细胞疫苗对裸鼠人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的抗肿瘤作用
目的:探索带有HPV-16 E6/E7基因的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗对裸鼠人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的抗肿瘤作用.方法:体外诱导培养C57BL/6小鼠骨髓的未成熟DC(immature DC,imDC),将已经成功构建的携带人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)-16 E6/E7基因的重组腺病毒感染imDC,Western blot检测E7蛋白的表达;构建裸鼠的人宫颈癌CaSki细胞移植瘤模型,应用DC疫苗诱导的BALB/c小鼠脾脏的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)处理后,观察裸鼠肿瘤体积变化,肿瘤长出第28天后处死裸鼠,小心剥下肿瘤组织,石蜡包埋,HE染色观察各组肿瘤的细胞形态,免疫组织化学技术法检测肿瘤组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达情况.结果:成功培养出DC并制备出DC疫苗;第28天各组裸鼠肿瘤体积pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组与pAd-mock-DC-CTL-CaSki组、DC-CTL-CaSki组、CaSki组相比较,pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组裸鼠肿瘤体积小(P<0.05);免疫组化检测肿瘤组织中Bax蛋白的表达结果显示pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组高,而CaSki组表达低;免疫组化检测肿瘤组织中Bcl-2蛋白的表达结果显示pAd-E6/E7-DC-CTL-CaSki组低,而CaSki组表达高.结论:带有HPV-16 E6/E7DC疫苗能够诱导CTL抑制裸鼠人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的生长.
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磁珠细胞分选CD133+/CD44+前列腺癌干细胞的初步鉴定
目的:通过磁珠细胞分选(magnetic bead cell sorting,MACS)方法从人前列腺癌细胞系PC-3中分选CD133+/CD44+干细胞,为进一步功能性研究奠定基础.方法:运用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测MACS分选前后PC-3细胞膜上CD133和CD44表达情况;观察无血清培养成球情况,免疫荧光(immunofluorescenee,IF)表达情况;比较细胞在分选前后的形态学、增殖能力方面的差异;免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和Western blot检测诱导分化前后前列腺酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PAP)蛋白情况.结果:FCM检测PC-3细胞CD133和CD44的阳性表达分别是(1.33±0.05)%和(0.87±0.06)%,而MACS分选后PAP分别为(84.82±0.07)%和(99.91±0.03)%;IF检测CD133+/CD44+细胞培养后继续呈阳性表达;CD133+/CD44+细胞增殖能力高于PC-3细胞(t=11.0,P=0.008)以及高于诱导后的CD133+/CD44+细胞(t=40.1,P=0.001);CD133+/CD44+细胞经过转化生长因子-β诱导后IHC和Western blot检测PAP表达呈阳性,而未诱导的CD133+/CD44+细胞表达呈阴性.结论:MACS从PC-3细胞株中分选的CD 133+/CD44+细胞经过初步功能性鉴定具有干细胞的某些特性,可为前列腺癌干细胞的进一步探索充当铺垫.
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新城疫病毒抑制肝星状细胞活化的初步研究
目的:探讨新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)在活化肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)中的复制对HSC的活化增殖以及细胞生物学功能的影响.方法:用不同滴度的NDV溶瘤株Italien(NDV-Italien)感染经转化生长因子-β1 (transformation growth factor-β1,TGF-β1)刺激活化的人HSC系LX-2.MTT法检测NDV对细胞增殖率的影响.免疫荧光显微镜技术检测活化标志物α-SMA的表达变化.结果:NDV的感染抑制了LX-2细胞的增殖,细胞增殖率和病毒滴度呈负相关.与未刺激组相比,NDV在TGF-β1刺激的LX-2细胞中的增殖抑制率提高,LX-2细胞的活化标志物α-SMA的表达显著性下调.结论:NDV在活化LX-2细胞中的复制具有抑制细胞增殖和HSC活化的作用.
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载肝癌细胞GPC3抗体的纳米级脂质超声微泡制备及体外寻靶研究
目的:探索制备载肝癌细胞磷酯酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC3)抗体的新型纳米级脂质超声微泡造影剂的方法,并评价其体外对肝癌细胞的靶向结合效果.方法:以机械振荡法制备纳米级脂质微泡,并通过光学显微镜及电子显微镜检测纳米微泡大小形态、粒径分布;生物素-亲和素桥接肝癌细胞GPC3抗体与纳米级脂质超声微泡,流式细胞仪检测微泡与抗体结合效率;免疫组化检测常见3种肝癌细胞的GPC3阳性表达;微泡体外与肝癌细胞靶向结合,激光共聚焦显微镜检测寻靶效果.结果:纳米脂质微泡呈圆形,分布均匀,无明显聚集,粒径范围约350~450 nm.微泡与抗体结合效率达85.05%,人SMMC-7721、HepG2及Huh7肝癌细胞GPC3表达阳性,激光共聚焦显微镜显示载GPC3抗体纳米级脂质微泡可与肝癌细胞特异性结合.结论:本研究成功制备了具备靶向性的新型纳米级脂质超声微泡,生物素-亲和素桥接GPC3抗体可特异性结合肝癌细胞,达到靶向性识别效果,为微泡的靶向诊断及治疗研究奠定了基础.
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ERCC1和BRCA1基因在非小细胞肺癌术后辅助化疗患者预后中的作用
目的:探讨切除修复交叉互补基因1 (excision repair cross complementary gene 1,ERCC1)和乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)术后患者给予铂类基础化疗方案后的预后价值.方法:收集我院2004-2008年间接受手术并确诊为NSCLC的80例患者的肺组织,利用免疫组织化学方法,检测80例肺癌组织及20例癌旁组织中ERCC1和BRCA1蛋白的表达情况;术后所有患者接受2周期以上铂类化疗方案,联合分析这两种蛋白的表达与患者化疗方案的选择、无瘤生存期(disease-free survival,DFS)及总生存时间(overall survival,OS)的关系.结果:①ERCC1和BRCA1在肺癌组织中的表达比癌旁组织中高,差异具有统计学意义(P=0.036,P=O.041);同时2种蛋白的表达与患者的年龄、性别、临床分期、病理类型等临床特征无关;②ERCC1低表达患者DFS和OS均长于ERCC1高表达患者(P=0.004,P=0.032);BRCA1的表达也得出相同的结论(P=0.023,P=0.006);③ERCC1和BRCA1同时低表达患者DFS和OS长于两种指标同时高表达的患者;④ERCC1和BRCA1同时低表达的患者中,接受含铂类化疗方案的患者受益大.结论:ERCC1和BRCA1可作为NSCLC术后辅助化疗患者判断预后的有效指标,两种蛋白的高表达可能成为NSCLC术后铂类辅助化疗患者预后不良的预测因子.
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磷酯酰肌醇3激酶抑制剂对三阴性乳腺癌细胞增殖及迁移的影响
目的:为了研究磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3 kinase,PI3K)抑制剂单用及其联合表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞增殖、迁移的影响.方法:通过细胞增殖实验、克隆形成实验、细胞划痕愈合实验、流式细胞仪以及ELISA实验来分析PI3K抑制剂PF-04691502(以下简写为PF)单用或与EGFR抑制剂吉非替尼联合抗TNBC细胞(HCC1937和MDA-MB 231)增殖、迁移的的影响.结果:PF可显著抑制TNBC细胞的增殖,对TNBC细胞克隆的形成、迁移和蛋白激酶B[(protein kinase B,PKB),又名Akt]的磷酸化均有显著抑制作用(P<0.05),并可将TNBC细胞阻滞于G1期(P<0.05).小剂量PF联合EGFR抑制剂吉非替尼可协同抑制TNBC细胞的增殖、克隆形成、迁移及Akt的磷酸化.结论:PI3K抑制剂单用可显著抑制TNBC细胞的增殖、克隆形成和迁移,与EGFR抑制剂合用可形成明显的协同效应.其作用机制可能与其降低Akt磷酸化水平及G1期细胞周期阻滞作用有关.
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干扰Krüppel样因子8表达对肝癌SMMC7721细胞中血管生成相关因子的调控作用
目的:构建Krüppel样因子8(Krüppel-like factor 8,KLF8)的真核表达质粒及干扰质粒,考查KLF8对人肝癌SMMC7721细胞中血管生成相关因子的调控作用.方法:构建KLF8的真核表达质粒pcDNA3.1-KLF8,测序确认.构建靶向不同KLF8干扰位点的干扰质粒pGPU6/GFP/Neo-KLF8,筛选出于扰效率高的pGPU6/GFP/Neo-KLF8.将pcDNA3.1-KLF8、相应的对照质粒pcDNA3.1,pGPU6/GFP/Neo-KLF8、相应的对照质粒pGPU6/GFP/Neo-ShNC分别转染人肝癌SMMC7721细胞,共4组.实时荧光定量PCR及Westernblot检测KLF8的表达,qPCR检测各组细胞中低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF) 1-α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素(angiopoietin,Ang)1、Ang2、血管生成素受体Tie2及基质金属蛋白酶(matrix metallo-proteinase,MMP)2的mRNA表达.结果:pcDNA3.1-KLF8显著上调KLF8表达(相对表达量为68.8±6.5),pGPU6/GFP/Neo-KLF8下调KLF8的表达(相对表达量0.31±0.01).转染pcDNA3.1-KLF8组与其对照组相比,VEGF、Ang2、HIF1-α及MMP2 mRNA表达增加(P<0.05),血管生成素受体Tie2、Ang1的mRNA表达无差异(P>0.05);转染pGPU6/GFP/Neo-KLF8组与其对照组相比,Ang2和HIF1-α表达降低(P<0.05),VEGF、血管生成素受体Tie2、Ang1及MMP2的表达无差异(P>0.05).结论:在肝癌中,KLF8可能通过调控VEGF、Ang2、HIF1-α及MMP2来调控血管生成.
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反义促血管生成素2基因稳定转染对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的抑制作用
目的:观察以pEGFP-N1为载体的促血管生成素2(angiopoietin2,Ang2)反义基因转染的人胃癌细胞SGC-7901中Ang2蛋白的表达,研究其对人胃癌细胞体外生长的抑制作用.方法:应用重组质粒转染反义Ang2的pEGFP-N1载体(pEGFP-N1-anti Ang2)、pEGFP-N1空载体质粒以脂质体转染法转染体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,经G418筛选抗性克隆,扩大培养后,应用RT-PCR技术与免疫组化法检测Ang2基因及其蛋白的表达,MTT法分析细胞生长抑制作用,AnnexinV-FITC和PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:RT-PCR与免疫组化均示pEGFP-N1-anti Ang2转染组无Ang2 mRNA及其Ang2蛋白的表达,MTT检测表明pEGFP-N1-anti Ang2转染组活细胞数较其它两组均低,差异有统计学意义(F=10.39,P=0.002 4),流式细胞仪检测则显示其凋亡率较其它两组明显增高,差异有统计学意义(x2=3 188.98,P<0.000 1).结论:pEGFP-N1-anti Ang2成功转染人胃癌细胞SGC-7901且可封闭Ang2 mRNA表达,使已转染pEGFP-N1-anti Ang2的人胃癌细胞Ang2蛋白的表达减少,并抑制人胃癌细胞的恶性表型.
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Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌及乳腺癌术后患者血清标志物检测的临床应用价值
目的:评价血清肿瘤标志物糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)15-3、CA125、CYFRA21-1、CA72-4和肿瘤相关物质(tumor associated material,TAM)在Ⅲ期+Ⅳ期乳腺癌及乳腺癌术后患者中的临床应用价值.方法:选取乳腺疾病患者共229例,乳腺良性肿瘤组60例、乳腺癌组104例(Ⅰ期+Ⅱ期58例、Ⅲ期+Ⅳ期46例)、术后进展复发组65例;乳腺癌Ⅲ期+Ⅳ期患者及术后进展复发患者参与治疗的化疗组80例(无效组33例、有效组47例).CA15-3、CA125、CYFRA21-1、CA72-4采用电化学发光法测定,TAM采用生化法测定,对各项指标血清浓度进行比较分析.结果:乳腺癌Ⅲ期+Ⅳ期组、术后进展复发组检测的血清各标记物浓度明显高于乳腺良性肿瘤组和乳腺癌Ⅰ期+Ⅱ期组;单项还是联合对乳腺癌Ⅰ期+Ⅱ期诊断阳性率都不高.几种常用联合检测方式比较,CYFRA21-1+CA72-4联合检测意义较大,可以达到5项指标的联合效果;相比于化疗前组、无效组,CA15-3、CA125、CYFRA21-1、CA72-4和TAM的浓度在有效组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论;CYFRA21-1 +CA72-4联合检测是一组互补性较好的组合,用于乳腺癌术后随访监测患者复发转移意义较大;检测血清CA15-3、CA125、CYFRA21-1、CA72-4和TAM对于化疗药物疗效评估有很大的帮助.
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可溶性细胞间黏附分子-1在乙肝相关性肝病患者发病中作用的初步研究
目的:通过检测乙肝相关性肝病患者血清可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)的水平,探讨sICAM-1在乙肝相关性肝病患者发病中的作用.方法:选择慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化及肝衰竭患者各30例,另选择健康献血员30例作对照组,应用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清sICAM-1的水平.结果:慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝衰竭患者血清sICAM-1水平较正常对照组均明显升高(P=0.029、P=0.000 07、P=0.000 1),并与丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate amino transferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)呈正相关(ALT:rs=0.240,P=0.023;AST:rs=0.225,P=0.033;TBIL:rs=0.262,P=0.013),与白蛋白(albumin,ALB)、凝血酶原活动度(prothrombin activity,PTA)呈负相关(ALB:rs=-0.297,P=0.005;PTA:rs=-0.218,P=0.039).结论:sICAM-1可能参与了乙型肝炎免疫损伤过程,并可能在肝纤维化、肝硬化形成过程中发挥重要作用.检测乙肝相关性肝病患者血清sICAM-1水平对判断患者病情有一定临床意义.
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新疆昌吉回族自治州结节性甲状腺肿术后血清促甲状腺素水平与复发关系的研究
目的:研究新疆昌吉州结节性甲状腺肿术后血清促甲状腺素(thyroid-stimulating hormone,TSH)水平与复发的关系及影响因素,进一步探讨结节性甲状腺肿术后抑制血清TSH值的合适水平.方法:回顾性分析新疆昌吉回族自治州人民医院781例结节性甲状腺肿手术患者,按性别、年龄、大结节径、结节数目及施行手术方式的不同分别统计不同术后血清TSH值范围内的患者例数,统计分析术后复发率的差异.结果:结节性甲状腺肿术后复发组血清TSH水平为(3.21±1.34) mIU/L,明显高于未复发组患者的(1.09±0.63) mIU/L,(t=20.344 9,P=0.000 0).结节性甲状腺肿患者手术后随着血清中TSH水平的降低,复发率逐渐降低,但当TSH水平降低至1.0 mIU/L以下,其复发率并不再继续下降.术后血清TSH水平在4.5 mIU/L以下,甲状腺切除的范围越大,其复发的机会就越低.当TSH水平超过4.5 mIU/L,仅甲状腺次全切除组复发率小于甲状腺部分切除术组及腺叶切除+峡部切除组,后两组复发率差异无统计学意义(=0.000,P=1.000).结论:在切除足够的甲状腺后,抑制TSH至1.0 mIU/L以下水平,能够大限度地防止术后复发,同时又可以尽可能降低因应用左旋甲状腺素带来的不良作用.
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炎症标志物白细胞介素-13在多囊卵巢综合征患者外周血的表达水平及临床意义
目的:观察白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者外周血中的表达水平,并分析其与患者体质指数(body mass index,BMI)、生殖相关激素、血糖及血脂的相关性.方法:临床对照试验.研究对象分为3组:PCOS肥胖组(40例)、PCOS非肥胖组(35例)和对照组(39例).测量各组研究对象的体质量、身高、腰围及臀围,并计算BMI及腰臀比(waist/hip ratio,WHR).分别用酶联免疫吸附试验测定血清IL-13水平;应用化学发光法检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,Ins)、胆固醇(cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)水平;放射免疫测定:卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteum erythropoietin,LH)、雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、催乳素(prolactin,PRL)、睾酮(testosterone,T).结果:PCOS肥胖组外周血IL-13的表达高于非肥胖组(P=0.000),且二者均高于对照组(P=0.000;P=0.019).Ins、LDL、HDL、TG、TC、IR、E2、FSH、P等指标的血清水平无统计学差异;而WHR、BMI、FBG、LH、T等指标血清值在PCOS肥胖组、非肥胖组均高于对照组.简单相关回归分析显示1L-13与BMI (R=0.527,P=0.000)、FBG(R=0.449,P=0.000)及T(R=0.452,P=0.000)、WHR (R=0.272,P=0.021)及LH (R=0.247,P=0.037)有相关性,多元线性回归方程表示为IL-13=90.814+1.255BMI+0.755WHR+1.696FBG+0.146LH+0.738T.结论:炎症标志物IL-13在PCOS患者外周血中表达明显升高,并与BMI、WHR、FBG、LH及T等指标存在线性依存关系.
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银屑病及银屑病伴代谢综合征患者血清瘦素水平及意义
目的:观察瘦素在银屑病及银屑病伴代谢综合征(metabolic syndrome,MS)患者治疗前后血清中水平的变化,分析其临床意义.方法:收集66例寻常型银屑病患者身高、体质量、银屑病面积与严重程度指数、空腹血糖、血压、血脂和伴发MS等资料;根据患者有无MS分为两组并检测其血清瘦素水平,均与正常对照组比较.结果:发现银屑病伴MS者病程较不伴MS者长且对常规治疗效果欠佳;两组患者血清瘦素水平均高于正常组(P=0.000),而伴MS组瘦素水平更高;治疗后发现银屑病合并MS者瘦素水平下降不明显(P=0.209),而不伴MS者瘦素水平则有显著下降(P=0.000).结论:银屑病伴MS者对常规治疗效果欠佳,瘦素可能参与了银屑病伴MS对治疗的抵抗.
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血浆和肽素、N末端脑钠肽前体和肾上腺髓质素前体N端20肽与慢性心力衰竭的关系研究
目的:探讨血浆和肽素、肾上腺髓质素前体N端20肽(proadrenomedullin N-terminal 20 peptide,PAMP)、N末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)水平和慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)及其严重程度的相关关系.方法:分别入选CHF患者72例和32例非CHF对照,检测纳入对象血浆和肽素、PAMP和NT-proBNP水平,心脏彩超评价心脏的结构和功能.结果:CHF患者血浆和肽素、NT-proBNP水平与对照组相比明显升高(P<0.001),并随纽约心脏病协会(New York heart association,NYHA)分级的增加而升高.和肽素分别与左室舒张末期内径值(r=0.508)、血肌酐(r=0.320)、NYHA 分级(r=0.567)、NT-proBNP(r=0.412)呈显著正相关(均有P<0.01),与左室射血分数呈负相关(r=-0.663,P<0.01).CHF患者血浆PAMP水平与对照组相比无显著差异.结论:血浆和肽素、NT-proBNP水平在CHF中显著升高,并与CHF的严重程度密切相关.
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血浆高迁移率族蛋白1和肿瘤坏死因子-α评估严重胸部钝性伤患者并发症的比较
目的:探讨高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)和肿瘤坏死因子-仅(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在严重胸部钝性伤(blunt chest trauma,BCT)患者血浆中的动态变化及其评估伤后严重程度和预测伤后并发症发生风险性的临床意义.方法:自2011年3月-2011年12月共收集符合研究标准的严重BCT(简明损伤评分≥3)患者共57例,分别在伤后第1、3、5、7天采集患者外周静脉血.待标本收集齐后应用ELSIA测定血浆中HMGB1和TNF-α含量,并分析其与损伤严重程度和伤后并发症发生的相关性.结果:患者的中位年龄为(44.5±12.6)岁,中位损伤程度评分(injury severity score,ISS)评分为(18.4±6.02)分.伤后患者血浆HMGB1和TNF-α含量与损伤严重程度相关(第1天分别为:r=0.29,P=0.068和r=0.507,P=0.016;第3天:r=0.578,P<0.001和r=0.411,P=0.021;第5天:r=0.645,P<0.001和r=0.365,P=0.07;第7天:r=0.683,P<0.001和r=0.321,P=0.019).ISS≥20的患者伤后第3、5、7天内血浆HMGB1水平要明显高于ISS<20者(P均<0.001).通过受试者工作特征曲线分析结果显示,在伤后并发症预测方面,血浆HMGB1的敏感性要高于TNF-α,但特异性不及TNF-α(P<0.05).结论:血浆HMGB1能够较好的评估严重BCT患者的损伤严重程度和并发症发生情况.
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血浆E-FABP与FASN蛋白水平与人股动脉粥样硬化关系
目的:探讨血浆表皮型脂肪酸结合蛋白(epidermal fatty acid binding protein,E-FABP)与脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)蛋白水平与人股动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)及相关危险因素的关系.方法:对178例患者行股动脉彩超检查并测定股动脉内膜中层厚度(intimal medial thickness,IMT),根据股动脉IMT分为股AS组(128例)和对照组(50例),测定空腹血浆E-FABP、FASN蛋白水平,分析其与股AS及危险因素的关系.结果:与对照组比较,股AS患者血浆中E-FABP与FASN蛋白水平增高(P<0.05),血浆E-FABP与FASN水平呈正相关(P<0.05),血浆E-FABP水平与年龄、体质指数(body mass index,BMI)、甘油三酯(triglyceride,TG)、脂联素、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、IMT呈正相关(P<0.05),血浆FASN水平与年龄,BMI、空腹血糖(fasting blood-glucose,FPG)、稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance index,HOMA-IR)、TG、脂联素、CRP、IMT呈正相关(P<0.05),血浆E-FABP、FASN与高密度脂蛋白-胆固醇呈负相关(P<0.05);Logistic回归分析表明:年龄,FASN,E-FABP,HOMA-IR,CRP,TG是股AS的危险因素(P<0.05).结论:股AS与血浆E-FABP、FASN水平相关联,可能成为新的诊断与评价人股AS的循环标志.
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HA、PⅢNP、LN、CⅣ在慢性肝病及肝纤维化诊断中的临床意义
目的:观察肝硬化患者的透明质酸(hyaluronic acid,HA)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(typeⅢprocollagen amino peptide,PⅢ NP)、层黏蛋白(laminin,LN)及Ⅳ型胶原(collagenⅣ,CⅣ)血清水平变化,探讨其变化与肝纤维化及纤维化程度的关系.方法:对2011年1月至2012年9月送检至我中心的204例肝病患者血清标本进行分析.204例肝病患者中,男124例,女80例,年龄26~67岁,平均年龄48岁;慢性肝炎轻度44例,中度50例,重度31例,肝炎后肝硬变79例.正常对照组46例,男25例,女21例,年龄22~52岁,平均年龄38岁,为我中心健康工作人员及健康体检者,无肝胆疾病史.用γ放射免疫计数器进行检测HA、PⅢNP、LN、CⅣ水平.分析肝病各组与正常对照组的差异和各组间的水平变化.结果:肝病各组血清中HA、PⅢNP、LN、CⅣ 含量与正常对照组比较均有升高,差异有统计学意义(P<0.01);且随病情发展而逐渐升高,以HA升高为明显.结论:通过对肝炎病患者和肝硬化患者血清中HA、PⅢNP、LN及CⅣ水平进行监测,可以观察病患者的肝纤维化及纤维化程度,并将此作为病人治疗后疗效观察的指标之一.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 Z1 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 z1 |