重庆医科大学学报杂志
Journal of Chongqing Medical University 중경의과대학학보
- 主管单位： 重庆市教育委员会
- 主办单位： 重庆医科大学
- 影响因子： 0.72
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-3626
- 国内刊号： 50-1046/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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高强度聚焦超声联合超声监控下清宫术治疗子宫切口瘢痕妊娠疗效观察
目的:评价高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)联合超声监控下清宫术治疗Ⅱ型子宫下段剖宫产切口瘢痕妊娠(caesarean scar pregnancy,CSP)的安全性及有效性.方法:根据孕囊大径,将82例在遂宁市中心医院治疗的Ⅱ型CSP患者分为3组:10～mm组、20～mm组、30～mm组;3组患者均在接受HIFU消融后行超声监控下清宫术,术中清宫100 mL出血量作为安全性指标,并以术后超声显示宫腔线清晰、无异常回声为有效指标.结果:3组患者人数分别为23例、36例、23例,各组HIFU治疗功率分别为397(350～399)、399(387～400)、400(399～400)W(P=0.000).HIFU治疗时间分别为37.0(27.0～48.0)、62.0(37.5～78.0)、64.0(46.0～84.0) min(P=0.001),辐照时间中位数分别为250(200～321)、415(252～680)、522(400～800)s(P=0.000),平均治疗强度分别为(435.7±128.0)、(487.0±105.1)、(558.4±118.9) s/h(P=0.002).3组患者在清宫术中出血量分别为20(10～30)、20(15～35)、30(20～100) mL(P=0.000).孕囊直径越大,HIFU治疗时给予的治疗功率、治疗强度越大,辐照时间、治疗时间越长,清宫术中出血量越多;3组在清宫术后血清β-人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin β-subunit,[3-hCG)恢复正常的中位数时间分别为25(24～31)、27(23～30)、31(24～37) d(P=0.248),组间无明显统计学差异.结论:HIFU治疗联合超声监控下清宫术治疗Ⅱ型瘢痕妊娠,尤其是孕囊直径＜30 mm的CSP患者是安全及有效的;对于孕囊较大的患者,HIFU治疗时应给予更高治疗剂量、更长治疗时间以达到有效减少病灶血供,减少清宫时出血的风险.
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重庆地区451例睾丸扭转的临床特征分析
目的:了解重庆地区睾丸扭转的流行病学特点及诊治现状.方法:采用病案资料回顾性分析法,对重庆市50家医疗机构2012年1月至2016年12月间451例睾丸扭转病例进行调查,结果采用统计描述和Cochran-Armitage趋势检验.结果:疾病流行病学特点:发病年龄以18岁以下为主(65.9％),季节以冬季常见(43.2％),首发症状主要为阴囊疼痛(69.6％)和睾丸疼痛(25.7％),左右侧睾丸比为1.79∶1,扭转类型以鞘膜内型常见(88.1％).疾病诊治方面:首诊误诊率为32.8％,医生职称和医疗机构等级越低,误诊率越高;发病至就诊时间越长,睾丸切除率越高;差异有统计学意义.患者未及时就诊原因主要为患方未重视(52.6％)及首诊误诊(45.5％).结论:睾丸扭转诊治水平有待提高,提高基层医院、初级医务人员的诊治水平及公众对该病的认识是提高睾丸挽救率的关键.
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先天性心脏病术后脑组织氧饱和度与其预后的相关性分析
目的:探讨先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)患儿术后脑组织氧饱和度(cerebral tissue oxygen saturation,SctO2)与临床预后的相关性.方法:前瞻性队列研究.随机收集2016年12月至2017年10月于我院接受体外循环下CHD矫治术,并于术后转入重症监护室(intensive care unit,ICU)的患儿,共65例.采用美国CAS Medical System公司生产的Fore-sight近红外光谱仪(near-infrared spectroscopy,NIRS)对该65例患儿行术后24h连续SctO2监测,分析监测期间低SctO2(nadir of SctO2,nSctO2)、平均SctO2(mean of SctO2,mSctO2)与严重病情结局(adverse outcome,AO:包括低心排综合征、心肺复苏或死亡)、术后第三代24h小儿死亡危险评分(pediatric risk of mortality Ⅲ,Prism-Ⅲ)、术后24h大血管活性药物指数(maximum of vasoactive-inotropic score,VISmax)、机械通气时间及ICU留置时间的相关性.结果:AO组患儿26例(40.00％),非AO组患儿39例(60.00％);AO组nSctO2、mSctO2较非AO组均明显减低[44.00％ (32.00％～47.25％) vs.56.00％(50.00％～60.00％),P=0.000]、[61.94％(58.95％～65.15％)vs.70.00％(66.67％～73.76％),P=0.000].Spearman秩相关分析示nSctO2及mSctO2分别与Prism-Ⅲ评分负相关(rs=-0.653,P=0.000;rs=-0.593,P=0.000)、与VISmax负相关(rs=-0.346,P=0.005;rs=-0.422,P=0.000)、与呼吸机时间负相关(rs=-0.424,P=0.001;rs=-0.519,P=0.000)、与ICU留置时间负相关(rs=-0.407,P=0.000;r,=-0.528,P=0.001);ROC曲线示nSctO2临界值51.50％对预测AO具有中等准确性(AUROC=0.849,P=0.000),95％CI=0.756～0.942,灵敏度为92.30％,特异度为74.40％.结论:CHD术后24h内SctO2降低与不良预后有关,SctO2越低,持续时间越长,预后可能更差.nSctO2低于51.50％可能是预后不良的一个危险因素.
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超声及99mTc-MIBI核素显像对甲状旁腺腺瘤诊断价值的评价
目的:探讨超声及核素显像在诊断甲状旁腺腺瘤(parathyroid adenoma,PTA)中的价值.方法:对2012年6月至2016年7月在重庆医科大学附属第一医院行超声及核素扫描检查发现的150例甲状旁腺结节患者,其中经手术后病理证实的89例PTA患者进行回顾性分析,总结病灶超声及核素显像的影像学表现,分析2种不同检查方法的优势.结果:超声检查和核素显像可显示甲状旁腺腺瘤,超声和核素显像识别PTA病灶的灵敏度分别为86.9％、66％,特异度分别为88.1％、70.2％.差异有统计学意义(P=0.000).在ROC曲线中,超声检查的95％CI下限为0.464,上限为0.588.核素检查的95％CI下限为0.310,上限为0.437.两者联合诊断的灵敏度为96.7％,特异度为90.1％.在ROC曲线中95％CI下限为0.542,上限为0.658,较单独超声检查差异有统计学意义(P=.005).结论:超声识别PTA的灵敏度、特异度较核素检查高,与核素显像联合可进一步提高检出率.
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高强度聚焦超声治疗南非与中国子宫肌瘤患者的对比研究
目的:通过同期对照研究,对比南非黑人妇女与中国汉族妇女子宫肌瘤患者的差异性,以及这种差异对高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)消融治疗疗效及安全性的影响.方法:2015年10月至2016年11月南非Chris Hani Baragwanath教学医院以及新疆医科大学第五附属医院同期接受HIFU治疗的254例患者纳入本研究.其中南非中心132例患者399个肌瘤,新疆中心122例患者177个肌瘤.结果:南非黑人妇女多发性子宫肌瘤患者明显多于中国新疆汉族女性(62.9％vs.29.5％);BMI[(24.9±2.0) kg/m2 vs.(23.2±2.6) kg/m2]、皮下脂肪厚度[30.9(18.0,40.0) mmvs.17.0(15.0,23.0) mm]、子宫长径[101.6(87.4,125.7) mmvs.78.0(75.0,88.0) mm]、子宫体积[379.9(223.1,607.3) cm3 vs.137.5(104.5,198.5) cm3]以及肌瘤长径[45.3(32.6,63.4) mm vs.42.0(32.0,58.0) mm]、临床症状发生率(痛经症状,72.0％ vs.9.0％)明显大于中国新疆汉族患者(均P＜0.05),而肌瘤体积[36.7(15.3,102.1) cm3 vs.31.6(13.6,70.3) cm3]不具有统计学差异(P=0.102).两中心HIFU治疗时使用的大功率、小功率、平均功率、治疗时间无统计学差异:但新疆中心的辐照时间、治疗强度及治疗总剂量高于南非中心,具有统计学差异(P＜0.05);术后不同时间影像学随访,南非及中国新疆汉族女性子宫肌瘤患者的肌瘤缩小率一致,不具有统计学差异.南非中心术中不良反应发生率高于新疆中心,但均未出现需要处理的严重并发症.结论:虽然南非黑人妇女的体质指数及肌瘤与国内妇女具有统计学异性,但通过制定个体化治疗方案,HIFU能达到安全有效治疗子宫肌瘤的目的,该技术适用于非洲黑人女性.
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脉搏灌注指数在评估老年男性患者低位硬膜外麻醉阻滞效果中的应用
目的:评估脉搏灌注指数(pulse oximeter perfusion index,PI)在判断老年男性患者低位硬膜外麻醉阻滞效果中的应用.方法:66例美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists,ASA)Ⅰ～Ⅲ级、年龄≥60岁的男性患者经硬膜外导管给予2％利多卡因后观察30 min,记录针刺皮肤测痛时双侧脚趾PI、针刺皮肤测痛时痛觉的变化以及提睾反射消失的时间.PI的变化率≥100％、痛觉及提睾反射消失考虑硬膜外麻醉阻滞有效.不同时刻PI的比较使用单因素重复测量方差分析,PI与提睾反射及针刺皮肤测痛预测硬膜外麻醉的成功率在各时刻点的比较使用配对四格表资料的卡方检验.结果:硬膜外腔给药后2 minPI逐渐增加,4 min痛觉开始减退,20 min提睾反射开始消失.在硬膜外腔给药后10、20及30 min各时刻点所有患者的PI均增加100％(P=0.000),针刺皮肤测痛的结果是0/66、45/66(x2=24.973,P=0.000)、66/66,提睾反射消失的结果是0/66、51/66(x2=16.923,P=0.000)、66/66.结论:PI是评估老年男性患者低位硬膜外麻醉阻滞效果的早期、客观指标.
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显微镜下多血管炎肺部病变临床回顾性研究(附94例报告)
目的:分析显微镜下多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)肺部病变特点及治疗方式,提高对MPA肺部受累的认识及诊疗水平.方法:回顾性分析2011年5月至2016年10月收治于重庆医科大学附属第一医院的94例MPA肺部受累患者的临床资料,包括临床表现、实验室检查、胸部影像学、病理学、治疗及预后等,并将上述患者分为以呼吸道症状为首发表现患者组(A组,34例)和以非呼吸道症状为首发表现患者组(B组,60例),比较2组患者的主要临床症状、实验室检查和胸部CT表现.结果:男49例,女45例,平均年龄(65.2±10.9)岁.呼吸系统以咳嗽、咳痰、咯血及呼吸困难为主要表现,呼吸衰竭者21例.胸部CT或高分辨CT表现主要分为以下3类:①以斑片或磨玻璃影为主要表现者61例(64.89％);②以网格影或蜂窝样改变为主要表现者13例(13.83％);③上述2种表现均存在者20例(21.28％).12例(12.77％)影像学特点符合普通型间质性肺炎(usual interstitial pnermonia,UIP),30例(31.91％)符合弥漫性肺泡出血(diffuse alveolar hemorrhage,DAH)特点.A组呼吸系统表现发生率较B组高,差异有统计学意义(P＜0.05),如咳嗽/咳痰(32/34 vs.46/60)、咯血(15/34 vs.13/60)、呼吸困难(27/34 vs.20/60),而全身症状及其他肺外表现2组无明显差异(P＞0.05),如发热(24/34 vs.37/60)、皮疹(3/34 vs.8/60)、血尿(22/34 vs.41/60)、蛋白尿(21/34 vs.40/60)等.A组胸部CT中DAH发生率较B组高(18/34 vs.12/60),差异有统计学意义(P＜0.05).82例接受治疗的患者均采用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗,其中重症/危及生命患者中有11例采用甲泼尼龙+环磷酰胺静脉冲击治疗.结论:显微镜下多血管炎肺部受累发生率高,胸部影像学上以肺间质纤维化和DAH多见,DAH更易发生于以呼吸系统症状为首发表现的MPA患者.MPA治疗以激素联合免疫抑制剂为主,治疗短期预后较好.
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轻型链球菌缓解铜绿假单胞菌感染小鼠模型的炎症反应及机制的初步探讨
目的:探讨轻型链球菌(Streptococcus mitis,S.mitis)在铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAO1)感染小鼠模型中缓解炎症作用及可能机制.方法:将野生型和TLR2基因缺陷型小鼠随机分为4组,每组20只,通过气管内注入铜绿假单胞菌(PAO1组)、轻型链球菌(S.mitis组)、铜绿假单胞菌+轻型链球菌混合菌液(PAO1 +S.mitis组)和生理盐水(PBS组)建立模型,HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA检测肺泡灌洗液中炎症因子白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达,计数肺泡灌洗液细胞总数及细胞分类.结果:野生型小鼠中肺组织病理学显示:PAO1组肺泡间隙增宽明显,有大量炎症细胞浸润,PAO1+S mitis组炎症较PAO1组稍轻;S.mitis组和PBS组肺组织结构正常,基本未见炎症 细胞浸润;肺泡灌洗液中PAO1组IL-6和TNF-α的含量高于PAO1 +S.mitis组(P=0.032,P=0.007),S.mitis组和PBS组仅有少量表达;PAO1组BALF细胞总数及中性粒细胞计数均较PAO1+S.mitis组、S.mitis组和PBS组增加(均P＜0.05).TLR2基因缺陷型小鼠中肺组织病理学显示:PAO1组和PAO1 +S.mitis组均有肺泡间隙增宽,炎症细胞浸润,肺泡灌洗液中PAO1组和PAO1+S.mitis组IL-6和TNF-α的表达没有统计学差异(P=1.000,P=1.000),S.mitis组和PBS组仅有少量表达;PAO1组和PAO1+S.mitis组支气管肺泡灌洗液细胞总数及中性粒细胞计数没有统计学差异(P=1.000,P=1.000).结论:轻型链球菌可缓解铜绿假单胞菌炎症反应与TLR2有关.
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DHX15在HBV复制中的意义及其机制初步研究
目的:筛选DEx D/H-box家族中可能影响HBV增强子或核心启动子转录活性的基因,初步研究DHX15对HBV复制的调控作用.方法:克隆DEx D/H-box家族基因到表达质粒PCH9,并构建由HBV增强子和核心启动子驱动的海肾荧光素酶报告质粒pcore-Rluc;分别将各种DDX表达质粒与pcore-Rluc共转染HepG2细胞,筛选影响Pluc荧光素酶活性的DDX家族成员.在HepG2细胞中共转染HBV1.3倍体质粒和DHX15表达质粒,通过Western blot检测DHX15在细胞中的表达,用South-em blot、Northem blot检测过表达DHX15对细胞中HBV复制水平和转录水平的影响.构建HBV增强子与核心启动子截短突变体,确定DHX15在HBV增强子或核心启动子上的作用区域.结果:成功构建30种DEx D/H-box家族基因克隆;筛选出对HBV增强子/核心启动子有明显影响的基因DHX15 (P=0.042);与对照组相比,过表达DHX15能促进HBV DNA的复制水平;并且能上调HBV RNA转录水平;成功构建HBV核心启动子截短突变体,发现DHX15促进HBV的复制是通过增强子实现的(t=8.292,P=0.001;t=5.215,P =0.006).结论:过表达DHX15可通过影响HBV增强子的活性从而促进HBV复制.
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过表达Survivin通过调控缺氧血管内皮细胞EPAS1和CHOP-10表达影响细胞增殖、凋亡
目的:目的:研究过表达存活素(Survivin,SVV)基因对缺氧处理的大鼠血管内皮细胞增殖、迁移能力及内皮PAS1区域蛋白1 (endothelial PAS domain-containing protein 1,EPAS1)、C/EBP同源蛋白-10(C/EBP homologous protein-10,CHOP-10)蛋白表达的影响和机制.方法:用500 μmol/L氯化钴(CoCl2)缺氧处理大鼠动脉内皮细胞,并分为SVV干预组、阴性对照组、空白对照组.SVV干预组用腺病毒转染SVV-增强型绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP),阴性对照组转染空病毒,空白对照组不作处理.对细胞进行Transwell实验检测细胞迁移能力变化,酵素免疫分析法(enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的含量变化,WST-1检测细胞增殖能力,流式细胞学检测细胞周期,Western blot分别检测SVV、EPAS1、CHOP-10、凋亡蛋白Caspase-8表达变化.用U0126和LY294002分别阻断EPAS1上游信号通路P44/42丝裂原活化蛋白激酶(P44/42 mitogen-activated protein kinase,P44/42 MAPK)和磷酸肌醇3-激酶/AKT(phosphatidylinositide 3-kinase,PI3K/AKT)后,Western blot检测EPAS1表达,研究SVV影响EPAS1的机制.结果:过表达SVV能促进内皮细胞的细胞迁移能力,MMP-2、MMP-9分泌水平上升.转染SVV后细胞增殖能力增强,S期细胞增多,转染后SVV表达上升(F=326.137,P=0.000).过表达组EPAS1蛋白相对表达量为1.29±0.11,阴性对照组为0.97±0.06,空白表达组为0.99±0.06,SVV能上调EPAS1表达,且有统计学差异(F=17.765,P=0.000).过表达SVV能抑制CHOP-10表达,差异有统计学意义(F=78.908,P=0.000).过表达SVV后Caspase-8相对表达量明显减少(F=53.823,P=0.000).而阴性对照组和空白对照组的3种蛋白表达量无统计学差异(P=0.841,P=0.891,P=0.955).通过阻断P13K/AKT途径能抑制SVV引起的EPAS1表达上调[(0.78±0.04) vs.(1.32±0.28),P=0.002],P42/44 MAPK通路阻断剂U0126作用后EPAS1表达减少无统计学差异[(1.36±0.12) vs.(1.32±0.28),P=0.451].结论:缺氧条件下SVV过表达促进细胞增殖、促进MMP-2、MMP-9分泌和提高细胞迁移能力.SVV主要通过P13K/AKT途径上调内皮细胞EPAS1表达,并抑制CHOP-10和Caspase-8表达,从而保护细胞适应低氧环境,发挥抗凋亡作用和潜在促血管生成的功能.
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鼻滴脂多糖对新生小鼠肺发育的影响及机制探讨
目的:观察鼻滴脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对新生小鼠肺发育的影响及NF-κB、MIP-1α和VEGFR-2的变化,探讨出生后肺部炎症在支气管肺发育不良发病中的作用及可能的机制.方法:新生1d内的C57BL/6小鼠20只随机分为生理盐水组和LPS组:LPS组于出生后1 d(P1)到出生后13 d(P13)每天鼻滴LPS 25 mg/kg,生理盐水组P1到P13每天鼻滴等量生理盐水.第14天收集2组小鼠肺组织标本进行检测,运用HE染色观察各组小鼠肺组织形态学改变,免疫组化观察CD31的表达并进行肺微血管密度计数,qRT-PCR检测VEGFR-2、MIP-1α mRNA水平变化,Western blot检测P65、IκBα、磷酸化P65 (Ser536)、磷酸化IκBα(Ser32)及VEGFR-2蛋白水平的变化.结果:与生理盐水组相比,LPS组HE染色表现为肺泡增大,血管周围可见炎性细胞浸润.LPS组放射性肺泡计数(4.533±0.166)低于生理盐水组(8.377±0.290) (P=0.000),肺泡平均截距(54.890±2.074)高于生理盐水组(32.750±0.787) (P=0.000).CD31免疫组化示LPS组肺微血管密度(3.387±0.007)低于生理盐水组(5.631±0.014) (P=0.000).qRT-PCR示LPS组VEGFR-2 mRNA表达下降(P=0.000),MIP-1 αmRNA表达升高(P=0.000).Western blot示LPS组P65蛋白、磷酸化P65 (Ser536)及磷酸化IκBα(Ser32)蛋白水平升高,IκBα蛋白及VEGFR-2蛋白水平降低(p=0.000).结论:鼻滴脂多糖抑制新生小鼠肺发育,出生后肺部炎症可能参与支气管肺发育不良的发生,其机制可能和VEGFR-2表达下降、NF-κB激活上调MIP-1α有关.
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顺铂通过CREB1诱导乙肝病毒再激活的实验研究
目的:探索顺铂诱导乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)再激活的机制.方法:将稳定表达HBV的肝癌细胞系Hep-AD38分为2组,即磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)对照组及顺铂(Cisplatin)处理组,分别检测cAMP应答元件结合蛋白质-1 (cAMP responsive element binding protein 1,CREB1)、乙肝病毒蛋白表达(·HBsAg、HBcAg)及病毒复制水平(HBVDNA、HBV mRNA);同样在成功构建稳定敲低CREB1 (shCREB1)的HepAD38细胞中,同正常表达HBV的肝癌细胞系Hep-AD38进行对照,检测经顺铂处理后的HBV复制水平(HBV DNA、HBV mRNA)及蛋白表达水平(HBsAg、HBcAg).结果:稳定表达HBV的肝癌细胞系HepAD38中,Western blot检测显示,与PBS对照组相比,Cisplatin处理组中CREB1相对表达量为1.355±0.049(P=0.010);HBsAg蛋白相对表达量为1.679±0.060(P=0.003);HBcAg蛋白相对表达量为1.488±0.047(P=0.005).qRT-PCR结果显示经顺铂处理后,HBV DNA绝对表达量为249.600±54.400(P=0.006);HBV mRNA相对表达量为3.084±0.256(P=0.000);以上结果表明在HepAD38细胞中乙肝病毒蛋白表达水平以及病毒复制水平较PBS对照组明显上调,均具有统计学差异;与此同时,选择转入shCREB1质粒的HepAD38细胞,即shCREB1细胞,以及转入对照质粒且能正常表达CREB1的Hep-AD38细胞,即shControl细胞,2种细胞组内均设置PBS对照组和Cisplatin处理组,分别检测乙肝病毒蛋白表达以及病毒复制水平.qRT-PCR结果显示,HBV DNA在shControl细胞的Cisplatin处理组相对表达量为518.300±3.458;而在shCREB1细胞的Cisplatin处理组相对表达量为265.300±3.125 (P=0.000);HBV mRNA在shControl细胞的Cisplatin处理组相对表达量为2.713±0.318;而在shCREB1细胞的Cisplatin处理组相对表达量为1.263±0.056(P=0.000).Western blot分析显示shControl细胞的Cisplatin处理组中的HBsAg、HBcAg相对表达量分别为1.254±0.001、2.238±0.041;而在shCREB1细胞的Cisplatin处理组中的HBsAg、HBcAg相对表达量分别为1.121±0.036(P=0.021)、1.681±0.015(P=0.000).结论:顺铂可以通过CREB1促进乙肝病毒复制水平以及蛋白表达水平上调.
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丹参酮Ⅱ A对缺氧/复氧损伤肾小管上皮细胞的作用及机制研究
目的:探讨丹参酮磺酸钠Ⅱ A(Tanshinone Ⅱ A,TSN Ⅱ A)对缺氧/复氧(hypoxia/reperfusion,H/R)肾小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)氧化应激和凋亡的影响.方法:取传代培养的HK-2细胞建立H/R诱导细胞模型,实验分为正常对照组,单纯H/R组,H/R+20 μg/mL TSN Ⅱ A组,H/R+10 μg/mL TSN Ⅱ A 组,H/R+5μg/mL TSN Ⅱ A组共5组.光镜下观察各组细胞的形态变化;CCK-8法测定H/R HK-2细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平;荧光显微镜观察细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达.结果:与正常对照组比较,单纯H/R组HK-2细胞增殖活性明显减少,为(43.6±10.1)％;中低浓度TSN可提高H/R HK-2细胞的增殖活性,10 μg/mL浓度的TSNⅡA对H/RHK-2细胞的增殖具有明显的保护作用,为(79.1±11.1)％,与单纯H/R组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).20 μg/mL浓度TSN Ⅱ A组相对于10 μg/mL浓度组对细胞增殖有一定的抑制作用,为(51.0±10.4)％(P＜0.05).与H/R组比较,共聚焦荧光显微镜下TSN Ⅱ A减少细胞内活性氧产生.流式细胞术检测发现各浓度TSN Ⅱ A均对H/R HK-2细胞凋亡有一定抑制作用,其中以20 μg/mL为明显(P＜0.05).Western blot结果提示TSN Ⅱ A作用H/R HK-2细胞后凋亡抑制蛋白Bcl-2上调,而促凋亡蛋白Bax下调.结论:TSN Ⅱ A可能通过抑制氧化应激反应减少细胞凋亡,对H/R HK-2细胞产生保护作用.
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FK866在对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤中的保护作用及机制研究
目的:探讨FK866在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导小鼠急性肝损伤(acute liver injury,ALI)中的保护作用及机制.方法:24只6周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、FK866组、APAP组、FK866加APAP组.通过比色法检测血清中丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酸(aspartate aminotransferase,AST)活性;HE染色观察肝组织病理学变化;酶联免疫法检测血清中白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;Western blot检测尼克酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyl-tiansferase,NAMPT)的蛋白表达水平.结果:FK866加APAP组中,ALT和AST分别为(13.969±0.290)、(7.150±0.669) IU/L,较APAP组明显降低(ALT:F=364.709,P=0.000;AST:F=130.398,P=0.000),可见肝脏组织小叶结构较清晰,细胞变性轻微,无明显淤血;炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α检测值分别为(176.333±0.775)、(79.765±1.000)、(147.083±1.000) pg/mL,较APAP组含量明显减少(IL-6:F=207.106,P=0.000;IL-1β:F=165.027,P=0.000;TNF-α:F=118.636,P=0.000);NAMPT蛋白表达水平较APAP组下调.结论:FK866在APAP诱导的ALI中对肝脏具有保护作用,其机制可能与抗炎效应相关.
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低于米氏常数底物浓度下酶动力学参数的测定
目的:联用设定底物浓度下初速度(initial velocity,Vi)和过程分析法所得酶大反应速度(maximal reaction rate,Vm)与米氏常数(Michaelis-Menten constant,kn)比值(Vm/Km),据米氏方程推算酶的Km和Vm.方法:以苛求芽孢杆菌尿酸酶(Bacillus fastidious uricase,BFU)及其突变体(A1R,A1R/V144A)、牛小肠碱性磷酸酶(calf intestinal alkaline phosphatase,CIAP)及大肠杆菌碱性磷酸酶突变体R168K为模型.用A293 nm记录尿酸酶反应曲线、A450 nm记录碱性磷酸酶水解4-硝基-1-萘基磷酸酯(4-nitro-1-naphthyl phosphate,4NNPP)反应曲线;以反应时间为自变量、用积分速度方程拟合不超过10％ Km初始底物浓度下酶反应曲线测定Vm/Km,分析设定底物浓度下初速度反应数据确定初速度Vi;据相同酶量Vi和Vm/Km按米氏方程计算Km;据所得Vm/Km和Km推算Vm.结果:以E-H(Eadie-Hofstee)法分析50％～200％ Km底物浓度下Vi所得Km均值为其参考值;联用策略测定Vi所设定的底物浓度越高,则所得Km相对偏差越小;测定Vi所设定的底物浓度从35％Km逐渐升高到120％ Km,所得Km趋于稳定且相对偏差不超过20％.据此联用策略发现,苛求芽孢杆菌尿酸酶在生理pH下活性降低的原因不是其Km明显升高,而是其Vm下降.结论:当底物溶解度低于Km时,这种联用策略更适合测定酶的Km和Vm.
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艾塞那肽聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒制备及体外评价
目的:制备艾塞那肽聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly (lactic-co-glycolic acid),PLGA]纳米粒并对其进行体外评价及表征.方法:通过正交实验设计优化法筛选艾塞那肽PLGA纳米粒的处方及工艺,并通过动态光散射和透射电镜对其进行了表征,通过体外模拟胃肠液和Caco-2细胞模型对其稳定性和细胞摄取及转运进行评价.结果:通过正交设计终确定了佳处方工艺:内水相和油相的比例为1∶5,超声功率200W,超声时间4 min,聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)浓度为2％,初乳与外水相体积比为1∶20.所制得纳米粒粒径为116.2 nm,透射电镜显示PLGA纳米粒为类圆形球状纳米粒,表面规则.体外研究结果表明,PLGA纳米粒可延缓艾塞那肽在胃肠液中的释放,同时也明显增加了其稳定性(P＜0.05),在人工胃液和人工肠液中孵育4h后,仍分别有约50％和80％的保留.细胞实验表明,PLGA纳米粒的摄取和转运分别是对照组的7倍和5倍之多(P＜0.05).结论:PLGA纳米粒可作为艾塞那肽潜在的高效口服递药系统.
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AlphaLISA法同时测定动物组织中克伦特罗和莱克多巴胺
目的:建立同时测定动物组织中克伦特罗(clenbuterol,CLB)和莱克多巴胺(ractopamine,RAC)的纳米均相时间分辨荧光免疫(amplified luminescent proximity homogeneous assay linked immunosorbent assay,AlphaLISA)分析方法.方法:样品经β-葡萄糖醛酸苷酶/芳基硫酯酶和乙酸铵酶解提取,正己烷脱脂,滤膜过滤,滤液与生物素化抗原、抗体、供体微珠和受体微珠进行酶联免疫,AlphaLISA进行检测.结果:CLB和RAC在0.1～50 ng/mL范围内呈良好的线性关系(R2＞0.98),检测限为0.02 ng/mL;在5、10、20μg/kg 3个添加水平下CLB+ RAC(1∶1)、CLB和RAC的回收率分别为88.8％～102.8％、86.6％～98.3％和84.2％～103.2％;相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于12％.结论:该方法快速简单、结果准确可靠,适用于检测和筛选动物组织中的RAC和CLB.
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利用CRISPR/Cas9系统建立斑马鱼Morn3基因敲除模型
目的:采用高效基因编辑系统CRISPR/Cas9对斑马鱼的Morn3基因进行编辑,以期建立Morn3基因敲除斑马鱼模型.方法:针对斑马鱼Morn3基因用生物信息学选取靶位点,构建gRNA表达载体并体外转录,将gRNA和Cas9mRNA混合物显微注射到斑马鱼单细胞期的受精卵中,24～48 h提取基因组DNA,PCR扩增出目的片段,限制性酶切法初步检测基因打靶情况,后进行测序分析确定编辑效果.结果:取3个靶位点(M1、M2、M3)进行试验,选择gRNA浓度较高的M2和M3进行注射.限制性酶切及测序的结果显示M3已产生基因编辑效应.结论:本研究通过CRISPR/Cas9系统成功获得Morn3基因编辑的突变体,为进一步探讨Morn3基因的作用提供研究基础.
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血清胆汁酸代谢轮廓分析用于妊娠期肝内胆汁淤积症的早期诊断
目的:探讨血清胆汁酸代谢轮廓分析在妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)的早期诊断中的应用价值.方法:应用超高效液相色谱-三重四级杆-飞行时间质谱法对50例健康孕妇、51例ICP孕妇、14例早期ICP孕妇和21例妊娠肝功能紊乱孕妇血清中的27种已知胆汁酸和29种鉴定胆汁酸进行检测.采用偏小二乘判别分析建立ICP的诊断模型,应用受试者工作特征曲线和Logistic回归筛选成分胆汁酸作为ICP早期诊断标志物.结果:与正常孕妇比,早期ICP孕妇的牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)、甘氨胆酸(glycolcholic acid,GCA)、甘氨结合型三羟基胆汁酸-3(Gtri-3)、甘氨结合型三羟基胆汁酸-5(Gtri-5)等多种血清成分胆汁酸明显升高(P＜0.05),而妊娠肝功能紊乱孕妇未见明显改变(P＞0.05).ICP诊断模型对早期ICP的预测灵敏度为85.7％,特异性为95.2％.鉴定的胆汁酸Gtri-3和牛磺结合型三羟基胆汁酸-2作为联合标志物,对ICP的早期诊断具有较高效能,灵敏度为92.9％,特异性为90.5％.结论:血清胆汁酸代谢轮廓分析是一种较特异、灵敏的ICP早期诊断方法.
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Clus-human蛋白在精神分裂症患者脑脊液中的差异表达
目的:分析精神分裂症患者脑脊液中蛋白质的差异表达.方法:选取精神分裂症及非精神分裂症患者各12例,抽取脑脊液,用蛋白质分离技术——二维聚丙烯酰氨凝胶技术和蛋白质识别与鉴定技术——生物质谱技术筛选脑脊液中标志性蛋白质.结果:精神分裂症组Clus-human蛋白含量为(2.560 6±0.319 2)μg/L,对照组Clus-human蛋白含量为(2.134 9±0.418 7)μg/L,精神分裂症蛋白Clus-human含量与对照组Clus-human含量具有统计学差异(t=2.801,P=0.010).结论:精神分裂症患者脑脊液中发现Clus-human蛋白,对精神分裂症的诊断可能具有重要意义.
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Plk1PBD蛋白原核表达、分离纯化与活性鉴定
目的:原核表达保罗样激酶1底物结合域(Polo-like kinase 1 Polo-box domain,Plk1 PBD)蛋白,经分离纯化后进行生物学活性鉴定.方法:以HeLa eDNA为模板经PCR反应扩增Plk1 PBD基因,利用DNA重组技术与pET-28a载体连接构建重组质粒.将重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3),经诱导培养后进行Plk1 PBD蛋白原核表达.采用亲和层析方法分离纯化Plk1PBD蛋白后,以酶联免疫吸附测定实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和荧光偏振实验(fluorescence polarization,FP)进行生物学活性鉴定.结果:测序与重组质粒酶切结果表明,成功构建了pET-28a-Plk1 PBD原核表达质粒.SDS-PAGE电泳和Western blot实验证实了Plk1 PBD蛋白的原核表达.ELISA实验和FP实验表明Plk1 PBD蛋白具有良好的生物学活性.结论:成功进行了Plk1 PBD蛋白的原核表达、分离纯化与活性鉴定,为其生物学功能研究及以Plk1 PBD蛋白为靶标的新型抗肿瘤药物发现奠定了基础.
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核医学影像组学及人工智能技术在非小细胞肺癌中的应用分析
影像组学利用人工智能技术及统计学方法从医学影像中提取定量图像特征数据,将这些图像特征进行筛选并与临床信息建立模型,用于指导疾病的诊疗.影像组学作为一门新兴学科,具有广阔的应用前景.本文将围绕影像组学概述及核医学影像组学在非小细胞肺癌中的应用研究现状、进展及挑战作出综述.
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血管内皮生长因子受体-2在湿性年龄相关性黄斑变性中的研究进展
湿性年龄相关性黄斑变性(wet age-related macular degeneration,wAMD)是60岁以上老年人致盲性眼病主要的病因之一.眼内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)结合,与脉络膜新生血管的形成和wAMD病理过程密切相关.当前wAMD的一线治疗方式为抗VEGF治疗,但该方法存在药物浓度维持时间短,需频繁眼内注药,部分患者接受反复抗VEGF治疗后视力无法提高或提高后不能稳定维持.随着基础与临床对wAMD发病机制研究的深入,发现血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)与该疾病的发生发展密切相关.本文就近年来有关VEGFR-2的分子结构、病理生理学功能、在wAMD发生发展中的作用以及相关的临床前研究、临床研究进展作一简要综述.
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基于内源性干细胞归巢的牙髓再生模式研究进展
目前对于牙髓不可逆炎症和坏死患牙的标准治疗方法是根管治疗,但根管治疗不能恢复牙髓牙本质复合体的生理功能,不能形成修复性牙本质抵御外界侵袭.相比传统的根管治疗术,诱导根管内牙髓再生能达到更好的预后,也是今后的研究方向.研究表明利用组织工程原理将干细胞,合适的支架材料及信号因子植入到根管内可以形成牙髓样结构和管状牙本质.相比外源性干细胞移植的技术敏感性及潜在的安全性问题,基于内源性干细胞归巢实现牙髓再生的模式更加符合临床要求.现将基于内源性干细胞归巢实现牙髓再生模式的各个重要环节的研究进展综述如下.
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帕金森病和肿瘤的分子机制相关性研究进展
作为两种不同类型的疾病,帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病,而肿瘤是一种恶性增殖性疾病.流行病学研究提示帕金森病的发病与肿瘤的发病具有相关性,但迄今对两者共同致病机制尚未完全明确.对上述疾病致病机制的研究,将有助于为两种疾病的筛查和早期诊断提供依据,为寻求更有效的干预治疗措施提供思路.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 Z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 z1 |
