南宁地区壮族人群甲状腺功能与血脂关系的研究

目的 探讨广西南宁地区壮族人群甲状腺功能与血脂的关系.方法 采用整群抽样方法对1 000例广西南宁地区壮族人群的甲状腺激素(TSH、TT3、TT4、FT3、FT4)和血脂:总胆同醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白A(apoA1)、载脂蛋白B(apoB)进行测定,并将其结果与1 000例当地汉族人群作比较.结果 壮族人群的老年组TT4、FT3、FT4高于汉族人群(p<0.05).TSH低于汉族人群(P<0.05);而TC、TG、HDL、LDL、apoB低于汉族人群(P<0.01,P<0.05).壮族人群的TSH、FT3、FT4与HDL呈负相关,TSH、FT3、FT4与TG呈正相关.结论 广西南宁地区壮族成年人群甲状腺功能与血脂有密切关系,壮族成年人群的甲状腺激素水平和血脂与汉族人群存在着显著性差异.

不同固定剂对冰冻切片免疫组化结果的影响

目的 分析不同固定剂对冰冻切片免疫组化的影响,寻找出佳的冰冻切片免疫组化的固定剂.方法 取常见的组织或肿瘤6种,冰冻切片后,置于6种不同冰冻固定液,95%酒精、4%甲醛、甲醇、丙酮、EAF(配方为无水乙醇85 mL、冰醋酸5 mL、40%甲醛10 mL)、AAF(配方为丙酮85 mL、冰醋酸5 mL、40%甲醛10 mL),固定5 min,根据组织含有的特定抗原进行相应抗体的免疫组化染色,结果采用中国病理学工作者委员会免疫组化质控中心推荐的免疫组化质控评分标准进行评分.结果 不同的固定剂可直接影响到冰冻切片免疫组化染色的成败和质量的高低,甚至会造成假阴性;混合固定液EAF优于其它固定液,其它五种固定液的染色效果依次为AAF、95%酒精、4%甲醛、甲醇、丙酮.结论 用冰冻切片做免疫组化染色,对于大多数抗体而言,EAF固定液的效果优于其他5种固定液.

冠心病患者超敏C反应蛋白测定的临床价值

目的 探讨冠心病患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)测定的临床价值.方法 选择临床诊断为冠心病的患者82例及健康对照者78例,采用免疫透射比浊法分别对上述病例组及对照组进行超敏C反应蛋白含量测定.结果 冠心病患者超敏C反应蛋白含量均高于正常对照组,差异有非常显著性(P<0.01);冠心病患者各组间超敏C反应蛋白含量也具有高度显著性差异(P<0.01).结论 血清超敏C反应蛋白含量的测定,对冠心病的发生、发展及预后具有预测价值.

我国非腹泻患者肠道内腺病毒感染的分子流行病学初步研究

目的 研究非腹泻人群肠道内腺病毒感染的分子流行病学情况.方法 采集非腹泻患者的粪便样本,在A549细胞中进行培养,提取病变细胞的基因组DNA进行PCR扩增,然后进行克隆、测序,确定病毒基因型.结果 114份样本中,细胞培养结合PCR分型方法检测出12份样本中存在腺病毒,阳性率为10.5%.序列分析显示,其中人腺病毒5型占25.0%(3/12)、7型占16.7%(2/12)、12型占25.0%(3/12)、48型占33.3%(4/12).结论 本研究在我国非腹泻的一般人群粪便样本中检测到人腺病毒5型、7型、12型及48型的存在.文献报道人腺病毒48型为罕见血清型,但其占本研究中阳性样本的33.3%,其在我国是否属于罕见,需要慎重对待.

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎过程中乙型肝炎病毒基因型变化情况分析

目的 研究阿德福市酯(adefovir dipivoxil,ADV)治疗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)过程中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型变化情况.方法 选取16例应用ADV治疗的CHB患者作为研究对象,用一片段PCR法扩增了用药前(baseline,BL)、用药后第28周、52周、92周时的HBV全基因组,克隆后进行全基因组序列测定及基因型分型.结果 16例CHB患者治疗开始时(baseline,BL)的HBV基因型分布为:B型9例,C型7例,未发现A、D、E、F基因型.但有5例患者在接受ADV治疗后的28周、52周、92周,基因型发生了变化即从B型变为C型,或从C型变为B型.结论 本研究发现,在ADV治疗CHB过程中,31.25%患者体内的HBV基因型发生了变化.这种变化产生的原因及其生物学意义,有待于进一步研究.

寡核苷酸微阵列芯片在人乳头瘤病毒基因分型检测中的应用评估

目的 探讨寡核苷酸微阵列芯片技术在人乳头瘤病毒(HPV)检测中的实用价值.方法 使用HPV寡核苷酸微阵列芯片试剂盒对227例宫颈拭子样本进行16种高危型(HPV-16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,CP8304)和5种低危型(6,11,42,43和44)检测,所检测的样本为HC2探针捕捉法检测所得到的HPV高危型和低危型样本,用以评估该DNA微阵列试剂的性能.结果 190例经HC2法检测为高危型HPV阳性以及30例被HC2法检测为低危型的样品被寡核苷酸微阵列芯片试剂盒检测出具体的高危和低危HPV型别,总共检测出13种高危型和5种低位危型HPV亚型,在高危亚型中,各型检出率分别是16型26.01%、58型20.18%、52型14.71%、68型7.59%、31型7.13%、33型6.37%、66型6.24%、18型4.05%、59型2.18%、39型1.10%、56型1.50%、45型1.40%、51型1.07%;在低危亚型中,各型检出率分别为6型45.43%、11型29.70%、42型14.11%、43型5.89%和44型5.00%.单一HPV亚型感染及2种、3种HPV亚型混合感染分别为60.46%、29.89%、9.65%.7例经HC2检测为高危型,但寡核苷酸微阵列芯片试剂盒未能检测出HPV的具体型别,寡核苷酸微阵列芯片试剂盒与HC2法高危型HPV检测结果的符合率为96.92%(220/227).结论 HPV寡核苷酸微阵列芯片试剂盒与HC2法高危型HPV检测阳性符合率高,并可以明确具体分析21种HPV型别,是一种准确、商效、经济的HPV型别检测方法,可用于HPV的常规基因型分型诊断及人群筛查.

肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药监测及耐药机制研究

目的 研究肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素类抗菌素的耐药机制.方法 K-B纸片法测定肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药性.对全部红霉素耐药菌株和部分红霉素敏感菌株用聚合酶链反应(PCR)检测ermB和mefA基因.结果 97株肺炎链球菌时红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药率分别为60.8%、58.8%、0和0.59株红霉素耐药菌株均检出ermB和/或mefA基因,其中34株(57.6%)ermB阳性,18株(30.5%)ermB和mefA同时阳性,7株(11.8%)mefA阳性.5株敏感菌株ermB和mefA基因均为阴性.结论 本研究显示肺炎链球菌对泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀高度敏感,而对红霉素和林可霉素则表现出较高的耐药性.肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药机制以ermB基因介导的靶位改变为主.

不同保存条件对血清荧光定量HCV RNA检测的影响

目的 了解不同的保存条件对血清标本HCV RNA检测结果的影响.方法 实时定量荧光聚合酶链法(FQ-PCR)检测已确诊的HCV患者30例.结果 血清标本-20℃存放7 d HCV RNA检测结果、加RNA酶抑制剂-20℃保存7d及-20℃反复冻融3次的HCV RNA检测结果差异无统计学意义.结论 血清标本-20℃保存7d,加RNA酶抑制剂-20℃保存7d,-20℃反复冻融3次,不影响HCV RNA的检测结果.HCV RNA检测结果重复性不好,应该考虑内、外源性等Rnase的降解作用及所用试剂的特异性、敏感性、重复性等因素的影响.

AML和喉鳞状细胞癌患者血浆中hTERT mRNA的定量检测及其临床意义

目的 建立定量检测肿瘤患者血浆中hTERT mRNA水平的实时荧光RT-PCR方法,探讨其在急性髓细胞性白血病(AML)和喉鳞状细胞癌的诊断与疗效观察中的应用价值.方法 采用TriZOLLS提取21例AML患者、23例喉鳞状细胞癌患者以及25例健康志愿者血浆总RNA,逆转录后利用Taqman技术对hTERT mRNA进行实时定量检测.结果 健康志愿者血浆hTERT mRNA水平(NhTERT)为1.2±0.8,喉鳞状细胞癌患者手术前与手术后2天,NhTERT分别为11.8±8.3和8.0±5.7(P=0.03),AML首次治疗前与完全缓解患者分别为13.5±8.5和2.4±2.0(p<0.001).与健康志愿者比较,AML首治患者与手术前喉鳞状细胞癌患者血浆hTERT mRNA水平显著升高.结论 采用实时荧光RT-PCR能够有效地检测血浆中hTERT mRNA水平,为AML和喉鳞状细胞癌患者的诊断与疗效观察提供信息.

45例儿童急性淋巴细胞性白血病流式细胞术免疫分型的研究

目的 研究儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫表型的特点.方法 采用流式细胞仪对45例初治儿童急性淋巴细胞性白血病进行免疫表型分析.结果 ①45例ALL中T淋巴细胞性ALL(T-ALL)5例(11.1%),B淋巴细胞性ALL(B-ALL)36例(79.9%);ALL1型(L1)9例(20%).ALL2型(L2)27例(60%),ALL3型(L3)5例(11.1%);②45例ALL中4例符合急性混合性白血病(HAL)的诊断标准(8.9%),25例(55.6%)为髓系抗原阳性的ALL(My+ALL),其中CD13阳性率多,为44.4%(20例),CD33为22.2%(10例),CD15为22.2%(10例).B-ALL中My阳性率为55.6%,T-ALL中My阳性率为20%,有明显差异;L1中My阳性率为22.2%(2/9),L2中My阳性率为70.4%(19/27),L3中My阳性率为40%(2/5),L2中My阳性率明显高于L1和L3(P<0.05).结论 结合免疫表型分析与细胞形态学检验能为儿童急性淋巴细胞性白血病的诊断提供更可靠和更有价值的分型依据.

尿液中乙肝病毒DNA与血清中ALT的关系

目的 探讨血清HBsAg(+)且HBV-DNA含量大于1 000拷贝/mL患者尿液乙肝病毒DNA与血清ALT含量的关系.方法 应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测32例患者(血清HBsAg(+)且HBV-DNA含量大于1 000拷贝/mL)尿液的HBV-DNA,与其血清HBV-DNA比较,并分析与ALT的关系.结果 尿液HBV-DNA与血清HBV-DNA存在正相关关系(r=0.797,P<0.01),尿液HBV-DNA与ALT有正相关关系(r=0.655,P<0.01).结论 血清中乙肝病毒拷贝数越大,尿液检出率也越大且与其ALT含量呈正相关.HBV-DNA高拷贝的患者更要注意尿液的传染性.

4℃条件下血细胞细胞核DNA稳定性的探讨

目的 探讨全血在4 ℃保存,细胞核DNA的稳定性.方法 通过人类白细胞抗原A、B、DR位点(HLA-A、B、DR)基因分型结果来判断细胞核DNA的完整性.结果 24份全血4 ℃保存20d内,其提取的DNA电泳条带清晰完整,而25 d后,则有2份已无法提取出细胞核DNA,有2份细胞核DNA电泳条带出现拖尾现象,提示该DNA样本出现降解,以此DNA进行HLA-A、B、DR位点分型,电泳图谱出现部份特异性和内对照条带缺失,无法进行正确分型.结论 全血4℃下保存20 d,其细胞核DNA可保持稳定.

荧光定量PCR在检测儿童EB病毒感染中的应用

目的 探讨荧光定量PCR方法检测Epstein-Barr Virus DNA(EBV-DNA)在儿童临床EB病毒感染诊断中的价值.方法 对376例表现为不明原因发热、咽炎、肝脾肿大等患儿采用实时荧光定量PCR方法检测血浆EBV-DNA.结果 检测出174例患儿血浆EBV-DNA阳性,阳性率46%,其中男性100例,女性74例,年龄≤1岁36例,1岁～8岁108例,>8岁30例.结论 荧光定量PCR方法检测对儿童EB病毒(EBV)感染的检测具有早期、快速等优点.

干燥综合征患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性分析

目的 探讨干燥综合征(SS)患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多态性.方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法,分析73例SS患者和195例无血缘关系的健康对照组KIR基因.结果 SS组以KIR3DL1+,3DS1-,2DS5-,2DL3+,2DS3-,2DL5-,2DL1+,2DS2-,2DL2-,2DS4+,1D+,2DS1-为主,占15.07%,与对照组比较,差异无统计学意义(p>0.05);对照组以KIR3DL1+,3DS1-,2DS5-,2DL3+,2DS3-,2DL5-,2DL1+,2DS2-,2DL2-,2DS4+,1D-,2DS1-为主,占25.13%,与SS组比较,差异具有统计学意义(p<0.05).KIR基因组合3DL1+2DL2-,2DS5+2DS1-,2DL5+2DS1-,2DS4-2DS1-在两组间的差异均具有统计学意义(p<0.05).结论 部分KIR基因及两两基因型组合的分布差异可能与SS发病有关.

树突状细胞与HIV-1免疫治疗

抗原提呈细胞(APC),尤其是树突状细胞(DCs)的抗原靶向及活化作用,在疫苗研究中是非常重要的.在HIV-1感染中,DCs具有诱导和维持抗原特异性T细胞免疫反应功能.目前临床试验表明DC免疫治疗在HIV-1感染患者身上是安全和有效的.本文主要对DCs的分化、迁移、成熟及HIV-1的DCs免疫治疗效应、抗原类型、临床试验等进行阐述.

Toll样受体与疾病

天然免疫反应是机体抵御外界微生物感染的第一道防线.固有免疫系统通过模式识别受体(PRRs)识别病原微生物的病原相关分子模式(PAMPs).PAMPs在结构上相对保守,主要存在于微生物.Toll样受体家族是重要的PRRs,通过识别相应的PAMPs介导天然免疫反应,同时通过DCs启动适应性免疫应答.另外,TLRs能够识别某些内源性的TLR配体,这些配体称之为损伤相关分子模式(DAMPs).研究发现TLRs在抗感染、变态反应、自身免疫性疾病、肿瘤等疾病的发生发展过程中起着重要的作用.在深入研究Toll样受体及其信号通路的基础上,以其作为药物干预靶点,对治疗相关感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病等具有重要的科学意义和应用价值.

格列卫治疗慢性髓细胞白血病的分子机制

慢性髓细胞白血病(chronic myeloid Ieukemia,CML)的典型遗传学特征为t(9;22)(q34;q11)易位,导致bcr/abl融合基因形成.该基因编码的bcr/abl融合蛋白为非受体酪氨酸激酶,能激活多条信号传导通路,干扰细胞的正常基本生理活动,是CML发病的关键因素.酪氨酸激酶抑制剂格列卫能竞争性结合酪氨酸激酶的ATP结合位点,抑制该酶活性,从而有效地治疗CML,是目前公认的比较理想的靶向治疗CML的小分子药物.针对CML的某些耐药机制,现正在研究多种新型有效安全的酪氨酸激酶抑制剂.

小泛素类蛋白对低氧诱导因子-1调控作用的研究进展

低氧诱导因子-1的表达和调节对肿瘤的发生、生长、血管形成、转移、凋亡、糖代谢及耐药性产生重要影响.小泛素类蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)是一类结构与泛素类似的小分子蛋白,在低氧应激等状态下表达增加,SUMO通过与泛素竞争HIF-1结合位点增强HIF-1的稳定性,包括SUMO化和去SUMO化及增强SENP活性和抑制pVHL作用等机制.这对寻找新的肿瘤干预靶点具有非常重要的意义.

个体化检测及其临床应用

随着人类基因组计划的发展,基因检测被视为能显著提高个体化医学能力的关键,基因组学相关技术的发展可改进疾病预测的诊断方法,包括疾病的早期诊断,疾病发展的分子(基因)表征和对治疗反应的预测.虽然基因组学指导下的个体化医学仍处存早期开发阶段,但是个体化检测已开始用于患者护理的指导,本文对当前个体化检测及其临床应用作一简要的评述.

分子诊断与治疗杂志稿约