分子诊断与治疗杂志
Journal of Molecular Diagnosis and Therapy 분자진단여치료잡지
- 主管单位: 中山大学
- 主办单位: 中山大学
- 影响因子: 0.65
- 审稿时间: 1个月内
- 国际刊号: 1674-6929
- 国内刊号: 44-1656/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
建立非重复序列FISH探针及在21/13三体产前诊断中的应用
目的 建立21/13号染色体的非重复序列荧光原位杂交(FISH)探针,比较其与商品化含重复序列的探针在对羊水脱落细胞进行快速产前诊断21/13三体的效能方面的差异. 方法 分析DSCR区域和RB基因区域DNA序列,剔除重复序列后进行PCR扩增和荧光标记,制备21/13号染色体FISH计数探针,与G显带中期淋巴细胞杂交,鉴定探针的杂交位置.选取50例孕周为18~35周的孕妇,经羊膜腔穿刺取羊水标本,分别在培养前后采用Cytocell的21/13号染色体FISH计数探针和自制的非重复序列FISH计数探针进行杂交,计算探针杂交率,并以核型分析结果作为参考,计算探针的准确率.两组数据间差异采用t检验进行统计学分析. 结果 非重复序列探针位置准确,荧光信号明确,背景更低;两种探针与培养后细胞杂交的杂交率和准确率无明显差异;但对于未培养的羊水间期细胞,非重复序列探针杂交的准确率明显优于普通探针,杂交率两者相似. 结论 采用非重复序列PCR方式制备21/13染色体计数探针用于羊水间期细胞杂交能明显改善探针的杂交效率和信噪比,有利于提高检测的准确度.
-
Gal-4蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义
目的 探讨Gal-4蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义. 方法 分别收集83例和31例石蜡包埋的大肠癌和正常大肠组织.免疫组化检测Gal-4蛋白在大肠癌及正常大肠组织中的表达.统计分析Gal-4蛋白表达变化与大肠癌临床参数之间的相关性. 结果 Gal-4蛋白在大肠癌中的表达明显下调.此外,下调表达的Gal-4蛋白明显与大肠癌的分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及Duke分期相关. 结论 Gal-4表达下调可能是大肠癌进展的一个恶性标志物.
-
HbF水平在β-地中海贫血携带者妊娠期产前筛查中的应用
目的 研究胎儿血红蛋白HbF与妊娠和β-地贫的关系. 方法 采集妊娠与非妊娠期女性外周血,进行HbF血红蛋白电泳分析.同时提取外周血基因组DNA,应用反向斑点杂交技术进行基因分析.分别比较HbF增高在妊娠组与非妊娠组、正常组与β-地贫组、非妊娠组内β-地贫与正常样本、妊娠组内β-地贫与正常样本和β-地贫组内妊娠与非妊娠样本间的统计学差异. 结果 不同β-地贫突变类型人群的HbF增高比例也不同,其中-28突变的HbF增高病例占所有HbF增高病例的比例大(39.39%),IVS-Π-654、CD27-28、CD41-42和CD17也都呈现出不同的HbF增高比例,而其他的突变类型的增高情况较少.HbF增高率的差异在各分组间均有统计学意义,但其增高水平之间的差异则仅在正常组与β-地贫病例组间有统计学意义. 结论 HbF增高率在β-地贫携带者妊娠期与非妊娠期、健康女性妊娠期与非妊娠期均有明显差异,β-地贫携带者在妊娠期的HbF水平增高水平更高,这些现象对β-地贫产前筛查中有积极的指导作用.
-
南中国多棘海星乙醇提取物体外抗肿瘤活性作用的初步研究
目的 研究多棘海星乙醇提取物对人肿瘤细胞体外生长的影响,为进一步筛选抗肿瘤活性成分提供重要的科学依据. 方法 用硅胶柱层析法对多棘海星乙醇提取物进行组分分离,采用MTT法观察各个组分对体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人宫颈癌Hela细胞、鼻咽癌CNE-1细胞等肿瘤细胞株增殖的抑制作用.结果 通过硅胶柱层析从多棘海星乙醇提取物中分离得到8个主要组分(Ⅰ~Ⅷ).MTT结果显示多棘海星乙醇提取物中的4个组分对肿瘤细胞增殖具有抑制作用,其中组分Ⅳ和Ⅷ对MDA-MB-231、Hela和CNE-l细胞的增殖具有非常显著的抑制作用(P<0.01),组分Ⅴ对Hela细胞增殖具有一定的抑制作用(P<0.05),组分Ⅶ则对Hela细胞的增殖具有抑制作用(P<0.01),而组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅵ则对上述3种细胞增殖均无抑制作用(P>0.05). 结论 多棘海星乙醇提取物对肿瘤细胞的增殖具有抑制作用,但不同组分对不同的肿瘤细胞株的增殖表现出不同的抑制作用,组分Ⅳ和Ⅷ可能是其主要的抗肿瘤活性成分存在部位.
-
蛋白芯片技术及免疫印迹技术检测抗核抗体的比对研究
目的 通过比对免疫印迹法与蛋白芯片法对血清标本中抗核抗体的检测结果,验证这两种方法是否具有等效性. 方法 分别用免疫印迹技术和蛋白芯片技术检测70例临床标本的抗核抗体,记录检验结果,并对检查结果进行统计学分析. 结果 经配对资料卡方检验分析,两种方法测定SSA、SSB、SM、Scl-70、Jo-1和CENP时结果差异无统计学意义(P>0.05).仅在测定RNP时结果差异有统计学意义(P=0.04). 结论 两种检测方法所测抗核抗体的结果一致性较好,蛋白芯片技术可用于临床抗核抗体的检测.
-
粤北山区域恙虫病自然疫源地的研究
目的 了解粤北山区域是否存在恙虫病自然疫源地. 方法 采用分子生物学诊断技术结合间接免疫荧光方法调查粤北山区发热人群、宿主动物感染状况;采用荧光定量PCR技术对粤北山区域恙虫病病人的标本检测Ot-Sta56kDa基因片段,对阳性标本进行基因分型和序列分析,并与巢式PCR检测结果相比较. 结果 在660份发热人群血清标本中有224份检测到恙虫病东方体,阳性率为33.94%;在55份鼠类脾脏组织标本中有10份黄毛鼠( R.lossea Swinboe)检测到恙虫病东方体,阳性率为18.18%,有2份褐家鼠(R.norvegicus Berkenhout)检测恙虫病东方体,阳性率为3.64%,各调查点之间无显著生差异(P0.05).经荧光定量PCR和巢式PCR鉴定为Gilliam型和Kawasaki型,间接免疫荧光法也诊断为恙虫病东方体Gilliam型.从病人、动物宿主、地里纤恙螨选取4株粤北代表株,其同源性为100%,与Kawasaki型的同源性为96.25%;另有3份阳性黄毛鼠标本的核苷酸序列与TA686型的同源性为78.5%. 结论 从宿主动物、媒介、分子水平上证实粤北山区域存在恙虫病自然疫源地.
-
高血压治疗对损伤后生长相关蛋白-43在神经系统表达的影响
目的 探讨应用高压氧治疗大鼠脑缺血再灌注损伤后,生长相关蛋白-43( GAP-43)在神经系统的表达. 方法 成年健康雄性SD大鼠32只,随机分为高压氧组(n=16)和高压空气组(n=16),每组再分为脑缺血再灌注模型组(n=8)和假手术组(n=8).应用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注动物模型,免疫组化法检测GAP-43在神经系统中的表达情况. 结果 应用高压氧治疗大鼠脑缺血再灌注损伤后,模型组GAP-43表达高于假手术组(P<0.05);但应用高压空气治疗后,模型组GAP-43表达略高于假手术组,差异无统计学意义(P>0.05).高压氧治疗模型组GAP-43表达高于高压空气治疗模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 应用高压氧治疗能够增强GAP-43的表达,有利于受损神经系统的结构修复和功能恢复.
-
乙型脑炎病毒NS1基因片段的克隆、表达及鉴定
目的 构建乙型脑炎病毒NS1基因的重组原核表达质粒,诱导重组蛋白表达及免疫学鉴定. 方法 以乙型脑炎病毒基因组为模板,RT-PCR扩增NS1基因片段,构建其重组原核表达载体,并采用Western Blot方法初步鉴定该蛋白的特异性. 结果 成功扩增出乙型脑炎病毒NS1基因片段,该基因在大肠杆菌表达系统中得到表达,并且特异性识别乙型脑炎患者血清. 结论 在大肠杆菌中成功表达乙型脑炎病毒NS1基因片段,为乙型脑炎病毒的诊断提供了新的特异性抗原.
-
导流杂交技术检测21种人类乳头瘤病毒
目的 探讨导流杂交技术在人类乳头瘤病毒感染分型检测中的应用. 方法 采用导流杂交技术,对3494例妇科患者下生殖道21种HPV亚型进行检测,并对51例HPV16型和50例HPV18型阳性患者DNA进行实时荧光定量PCR比较检测. 结果 患者标本除43亚型外其它20种HPV亚型均被检出,总的阳性率为36.1%( 1262/3494),阳性率大于5%的HPV亚型从高到低分别为:HPV16(19.8%、256/1262)、52( 18.8%、237/1262)、58( 16.4%、207/1262)、53 (7.2%、91/1262)、11 (87/1262、6.9%)、68 (6.6%、83/1262)、6(5.7%、72/1262)、18(5.4%、68/1262).单一亚型阳性率为62.8% (792/1262)、二重亚型为30.7%(388/1262)、三重亚型为5.2% (65/1262)、三重以上亚型为1.3% (17/1262).其中HR-HPV亚型感染占所有阳性标本的比例为77.0% (1069/1388),LR-HPV亚型为12.8%(177/1388),中间型HPV亚型为10.2%(142/1388).实时荧光定量PCR检测法与导流杂交技术检测符合率均为98%,kappa值均为0.96,说明一致性良好.结论 本地区HPV感染的主要亚型为16、52、58、53、11,常见亚型符合亚洲和中国人群的分布规律,又有一定的区域性.在人类乳头瘤病毒检测中,导流杂交技术不但与实时荧光定量PCR检测法的符合率高,而且它还具备分型的优势,可为临床提供更多的帮助.
-
TCT、HPV-PCR和阴道镜在宫颈癌疾病诊断中的应用研究
目的 探讨TCT、阴道镜下宫颈组织活检和HPV-PCR 3种检测方法在宫颈疾病筛查中的应用价值,指导临床正确应用. 方法 1.对细胞学检查为炎症反应性改变的112例和为非典型性增生以上病变的184例病人行阴道镜下宫颈组织学活检.2.另根据TCT和组织学结果对209例病人行HPV PCR检测.3.对53例第一次宫颈组织活检为阴性结果的病例进行跟踪,并进行第二次组织活检以确定第一次活检的漏诊率. 结果 1.以宫颈组织学活检为标准,TCT与组织学结果在炎症反应性改变、意义不明确的非典型性鳞状上皮细胞、不除外高度鳞状上皮内病变的不典型鳞状上皮细胞、低度鳞状上皮内病变、高度鳞状上皮内病变和鳞癌中的阳性符合率分别为92.8%、12.7%、27.8%、68%、100%、100%.细胞学诊断级别越高,阳性符合率越高.2.HPV-DNA检测中,总阳性率为22.5%,其中炎症反应性改变、ASCUS(含ASCUS-H)、CIN Ⅰ、CINⅡ-Ⅲ、SCC的阳性率分别为12.2%、12.3%、43.4%、100%、100%.高危型16/18亚型的感染在宫颈癌及癌前病变的发生上起着重要作用.3.第一次活检的漏诊率为5.9%,漏诊主要发生在细胞学诊断级别低的病例. 结论 无论是TCT检查、HPV-PCR检查或阴道镜下宫颈组织活检都各有优缺点.因此在临床工作中,应结合病人的病情及经济能力,合理有效选择筛选方法,以降低漏诊率和过度诊断率.
-
筛选结核分枝杆菌CFP10-ESAT6蛋白适配子的研究
目的 通过SELEX技术筛选出结核分枝杆菌CFP10-ESAT6蛋白的高亲和性适配子. 方法 构建一个78碱基的ssDNA文库,利用SELEX技术筛选获得CFP 10-ESAT6的适配子.用DNAMAN 软件对其结构进行分析,酶联寡核苷酸吸附试验( ELOSA)测定亲和力. 结果 经过15轮筛选,ssDNA文库与CFP 10-ESAT6亲和力从0.305提高到1.356.二级结构显示,口袋和茎环结构可能是适配子与CFP10-ESAT6结合的结构基础. 结论 初步获得了CFP 10-ESAT6的高亲和性适配子,为开发结核病诊断和治疗试剂奠定了基础.
-
潮州地区少见型人乳头瘤病毒型别分布及与宫颈病变的关系
目的 研究潮州地区少见型人乳头瘤病毒(HPV)型别分布及其与宫颈病变关系. 方法 采用实时荧光定量PCR对49458例农村女性健康人群进行高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测,HR HPV阳性者先进行21型核酸分子快速导流杂交分型技术(HybriMax)和液基薄层细胞学阳性检查(LCT),未分出基因型别者再进行37型HybriMax基因分型;对低级别鳞状上皮内病变(LSIL)及以上病变者行阴 道镜下组织病理学活检. 结果 49458例经实时荧光定量PCR检测,4080例HR-HPV DNA阳性,所有阳性标本进行21型HybirdMax基因分型,对其中未能分出基因型别的共285例应用37型HybriMax再次进行基因分型,成功分型251例,单一亚型感染48例,多重亚型感染203例,16种少见型HPV主要亚型分别为HPV55( 21.67%,57/251)、HPV61( 14.83%,39/251)、HPV70( 13.69%,36/251)和HPV84( 12.93%,34/251).285例都进行LCT检查,无上皮内病变及恶性病变(NILM)为阴性,共164例,阴性率65.34%;非典型鳞状上皮细胞意义不明确( ASC-US)及以上病变共87例,阳性率34.66%,其中ASC-US 61例,占24.30%;非典型鳞状上皮细胞不除外高级别鳞状上皮内病变(ASC-H)l例,占0.40%;低级别鳞状上皮内病变( LSIL) 20例,占7.97%;高级别鳞状上皮内病变(HSIL)4例,占1.59%;鳞状细胞癌(SCC)1例,占0.40%. 结论 潮州地区少见型HPV优势基因型是HPV55,复合少见型的多重感染能引起宫颈HSIL及以上病变,对宫颈病变的防治及其HPV基因疫苗的研制有重要意义.
-
登革病毒包膜蛋白E第三结构域的研究进展
登革病毒是目前人类重要的虫媒病毒之一,登革病毒包膜蛋白E的第三结构域是研究登革病毒亚单位疫苗及病毒入侵宿主细胞的重要靶点.
-
MicroRNA-21的生物学功能及其与肿瘤关系的研究进展
microRNA-21( miR-21)编码基因定位于TMEM49基因编码区域内(17q23.2),通过其自身的启动区域完成转录及poly A尾的聚合,终变成成熟的miRNA.miR-21与多种疾病相关.miR-21可作为一种肿瘤RNA,其基因簇对多种肿瘤具有促进作用,在肿瘤的发生和发展中有类似癌基因作用,参与肿瘤血管形成,与肿瘤细胞的增殖、侵袭及抗药性密切相关.miR-21也在心脏疾病及肺纤维化疾病中起重要作用.此外,miR-21还可以调节免疫过程,对不同信号传导的靶蛋白起关键作用.随着对miR-21功能研究的不断深入,miR-21可能成为早期诊断和基因治疗新的分子靶标.
-
星形胶质细胞升高基因-1与肿瘤血管生成的关系
AEG-1对肿瘤多种生物学特性均有促进作用,并与肿瘤血管生成密切相关.实验证实AEG-1过度表达的肿瘤部分新生血管较多,AEG-1也可以提高VEGF启动子的活性以及相关分子的表达水平.与AEG-1介导血管生成有关的分子包括PI3k/Akt、Tie2、Angl、H-ras和HIF-1α等.在信号转导途径中为重要的是PI3k/Akt信号通路,PI3k/Akt起到联系H-ras和AEG-1的作用,并介导由AEG-1引起的Angl/Tie2下游靶位点的激活.NF-κB,H-ras/MEK在AEG-1介导的血管生成中也起到重要作用.
-
一种新的分子治疗方式——RNAa
RNA激活是近发现在转录水平激活目的基因表达的新的RNA调控方式,能够激活基因转录的小分子RNA被称为小激活RNA( saRNA).和siRNA的沉默效果相比,RNAa的激活作用更为持久,具有更为广泛的肿瘤治疗范围,有可能成为基因功能研究及疾病治疗的一种新的有效工具.
-
新一代高通量测序技术——检验医学发展的挑战与机遇
基因突变以及碱基修饰等可以导致相关疾病的发生发展.个体的基因型也影响个人罹患相关疾病的风险和药物代谢率.随着数据的积累,越来越多与疾病相关的基因突变被发现,DNA测序在疾病预测、诊断、个体化用药等方面显得日益重要.测序技术在短短的数十年间,取得了惊人的进步,从Sanger法为代表的第一代测序技术发展到了第三代高通量测序技术.在个体化用药、遗传病、肿瘤、产前诊断以及微生物的鉴定等领域,高通量测序技术显示出强大的功能,部分传统检验项目有可能被测序技术所取代,高通量测序技术给检验医学学科建设带来了新的契机,使得检验医学发展更加全面和深入.