SERPINA3在子宫内膜癌中表达上调的临床意义及功能研究

背景与目的：SERPINA3是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的一员，已有研究证实其在多种肿瘤细胞中异常表达。然而，它在子宫内膜癌中生物学功能及临床意义尚不清楚。本研究旨在探讨SERPINA3在子宫内膜癌细胞中的功能和子宫内膜癌预后评估中的价值。方法：①收集20对子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织，用实时定量PCR(quantitative real-time PCR)检测SERPINA3 mRNA在内膜组织中表达情况；②使用免疫组化方法，检测组织芯片(子宫内膜癌81例和正常对照37例)的SERPINA3表达情况，依据染色结果，用SPSS软件分析SERPINA3与子宫内膜癌临床病理特征之间的关系；③检测5株子宫内膜癌细胞系中SERPINA3的表达情况，选取表达量高的HEC-1A细胞，利用小片段干扰RNA(small interfering RNA)干扰SERPINA3基因在HEC-1A细胞中的表达；④蛋白质印迹法(Western blot)和qPCR检测干扰后HEC-1A中SERPINA3基因在mRNA和蛋白水平表达情况，细胞迁移实验检测细胞运动能力的变化。结果：①SERPINA3 mRNA在内膜癌中表达明显高于对照内膜组织(n=20，P<0.05)；②免疫组化结果显示SERPINA3在子宫内膜癌中的表达水平高于正常子宫内膜组织(P<0.001)。SERPINA3的表达水平与子宫内膜癌的临床分期、肿瘤细胞级别、脉管浸润、淋巴结转移之间比较差异有统计学意义(P<0.05)；③干扰SERPINA3组细胞迁移能力显著减弱。结论：SERPINA3基因在子宫内膜癌中表达显著上调，可能与子宫内膜癌的侵袭和转移等相关。SERPINA3有望成为评估子宫内膜癌预后的生物学标志物，并可能作为子宫内膜癌生物靶向治疗的靶标之一。

miR-486-5p对胃癌细胞株SGC7901生物学行为的影响

背景与目的：既往研究表明微小RNA-486-5p(miR-486-5p)在多种肿瘤的进展中起重要作用，但其在胃癌中作用的研究较少，本研究旨在探讨miR-486-5p对胃癌细胞株SGC7901增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法：使用实时定量PCR(quantification real-time PCR，qRT-PCR)检测胃癌细胞株SGC7901及胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-486-5p的表达，构建miR-486-5p过表达质粒，使用脂质体法瞬时转染胃癌细胞株SGC7901， qRT-PCR检测转染细胞后miR-486-5p的表达丰度，噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪检测细胞的增殖及凋亡情况， Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力。结果：miR-486-5p在SGC7901细胞中表达明显下调，SGC7901细胞转染miR-486-5p过表达质粒后，miR-486-5p表达明显上调，细胞增殖、迁移能力降低，凋亡率增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：miR-486-5p可抑制胃癌细胞株SGC7901的增殖和迁移。

小干扰RNA阻断周期蛋白依赖激酶4对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

背景与目的：细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin-dependent kinase 4，CDK4)是调控细胞周期进程的重要激酶之一，有实验报道其在子宫内膜癌中呈高表达，但是其在子宫内膜癌细胞中的生物学功能及其可能机制还不十分明确。本研究旨在通过小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)沉默CDK4表达，并检测其对人子宫内膜癌HEC-1B细胞生物学行为的影响及其可能机制。方法：将化学合成的CDK4-siRNA转染至HEC-1B细胞；实时荧光定量PCR法检测转染前后细胞中CDK4的mRNA表达量变化；Western blot检测转染前后细胞CDK4、视母细胞瘤基因(retinoblastoma gene，Rb)及其下游p-Rb的蛋白表达量的变化；分别采用CCK-8法、流式细胞仪、Transwell肿瘤细胞侵袭实验检测细胞增殖、周期、凋亡以及侵袭能力的变化。结果：转染后HEC-1B细胞中CDK4 mRNA及蛋白表达均明显下降(P<0.01)；抑制CDK4表达后，抑制HEC-1B细胞的增殖及侵袭，转染si-CDK4组细胞发生侵袭数为(117±21)个，而转染si-control组及未处理组分别为(269±39)个和(262±35)个，差异具有统计学意义(P<0.01)；细胞转染后早期凋亡率为(21.7±3.5)%，较未处理组[(12.4±2.1)%]和si-control组[(11.8±1.9)%]明显增加(P<0.01)；细胞周期分布发生变化，G1期比例增加(P<0.01)，S期细胞比例降低(P<0.01)；进一步的Western blot结果显示，抑制CDK4表达后，细胞内p-Rb表达下降，但是总Rb表达无明显变化。结论：针对CDK4基因的特异性小RNA干扰片段能够下调CDK4基因在子宫内膜癌细胞中的表达，抑制肿瘤生物学进程。

宫颈及宫颈癌间质成纤维细胞的分离、鉴定与衰老检测研究

背景与目的：宫颈癌作为常见的妇科恶性肿瘤之一，近年来发病呈年轻化趋势。目前认为人类乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)的感染，特别是高危型HPV感染是其发生的主要因素。已有研究证实，在肿瘤发生的微环境中，间质成纤维细胞衰老可能促进上皮性肿瘤的发生，但宫颈癌的发生是否也伴有间质成纤维细胞的衰老鲜见报道。本研究拟对正常宫颈和宫颈癌间质成纤维细胞进行特异性研究，以揭示慢性炎症诱导宫颈癌发生的机制，旨在为宫颈癌的诊治提供新的理论依据。方法：分离纯化正常宫颈成纤维细胞(normal ifbroblasts，NFs)和宫颈癌相关成纤维细胞(cancer-associated ifbroblasts，CAFs)，通过ELISA法检测细胞因子白介素-6(interleukin-6，IL-6)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的分泌水平；并用衰老相关β-半乳糖甘酶染色(senescence-associated β-galactosidase，SA-β-gal)、细胞计数和蛋白质印记法(Western blot)分别鉴定细胞衰老、绘制细胞生长曲线和检测NFs与CAFs中p16蛋白表达。结果：CAFs分泌的细胞因子IL-6和VEGF比NFs高2倍以上(P<0.05)；CAFs中SA-β-gal的活性比NFs高；而CAFs中p16水平的表达水平比NFs中高。结论：间质成纤维细胞衰老可能与宫颈癌的发生和HPV密切相关，研究细胞因子介导的宫颈癌间质衰老可能有助于宫颈癌的预防、诊断和治疗。

乳头状肾癌的临床病理特征及其预后因素

背景与目的：乳头状肾细胞癌相对少见，目前国内对此类肿瘤的研究较少。本研究总结乳头状肾细胞癌患者的临床病理特征，并对可能影响此类患者生存的预后因素进行探索分析。方法：回顾分析64例乳头状肾细胞癌患者的临床、病理及随访资料。研究终点为总生存期，生存分析数据采用Kaplan-Meier法进行计算，并用Log-rank法对生存率进行比较，进一步对有意义的因素行COX模型多因素回归分析。结果：乳头状肾细胞癌占同期肾癌的6.04%，中位年龄为55岁(22~78岁)，54.7%的患者为无症状性肾癌。Ⅰ型肿瘤22例(34.4%)，Ⅱ型肿瘤42例(65.6%)，组织学亚型与肿瘤的TNM分期、Fuhrman分级和手术方式显著相关。中位随访时间为46.0个月(19~133个月)，共14例(21.9%)患者死亡，其中Ⅰ型1例(4.5%)，Ⅱ型13例(31.0%， P=0.018)，总生存率分别为85.7%和55.8%。单因素分析显示，伴有临床症状、Ⅱ型乳头状肾细胞癌、Fuhrman Ⅲ~Ⅳ级、淋巴结受累、远处转移和肾周脂肪侵犯是此类患者预后的影响因素，多因素分析显示，仅远处转移是影响总生存期的独立因子，差异有统计学意义(HR=14.78，P=0.004)。结论：与国外数据相比，我国乳头状肾细胞癌占肾癌的比重低，Ⅱ型肿瘤相对较常见。确诊时发生转移是影响此类患者总生存期的重要因素。

癌相关成纤维细胞通过IL-6诱导的“上皮-间质”转换促进宫颈癌细胞的迁移和侵袭

背景与目的：癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts，CAFs)能促进上皮肿瘤的侵袭和转移，细胞因子IL-6在肿瘤间质微环境中可能介导间质和上皮的相互作用，促进肿瘤的侵袭和转移，但其具体机制尚不十分清楚。方法：以宫颈癌细胞HeLa为研究模型，用ELISA测定宫颈癌CAFs和正常宫颈组织成纤维细胞(normal fibroblasts，NFs)条件培养基中IL-6的表达；用条件培养基或IL-6分别处理宫颈癌细胞系HeLa；用Western blot测定样品处理前后上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)标志物(如N-Cadherin和Vimentin等)的变化，同时用划痕和transwell小室测定细胞迁移和侵袭能力的变化。结果：CAF中IL-6表达比NF高4～5倍；与对照组相比，用CAF条件培养基或IL-6处理的HeLa细胞间充质细胞标志物Vimentin和N-Cadherin升高，而上皮细胞标志物E-Cadherin和Cytokeratin下降，表明IL-6可以促进细胞的EMT发生；进一步研究发现过量IL-6处理的HeLa细胞中干细胞转录因子Snail 1随STAT3的激活而上升；同时发现过量IL-6处理的HeLa细胞的迁移和侵袭能力大幅增加。结论：CAF在肿瘤微环境中可能通过IL-6/STAT3/Snail通路诱导宫颈癌上皮细胞的EMT转化，从而促进宫颈癌的侵袭和转移能力。

趋化因子CCL28在乳腺癌中的表达及意义

背景与目的：目前已知趋化因子在乳腺癌的发生、发展中扮演着重要的角色，但对CCL28在乳腺癌的功能报道较少，本研究旨在探讨趋化因子CCL28在人乳腺癌中的表达情况，并分析其与乳腺癌相关临床病理指标之间的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测趋化因子CCL28在150例乳腺癌、相应癌旁正常乳腺组织的表达差异情况；分析乳腺癌中CCL28表达与患者年龄、临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移状况、雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)、人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2，HER-2)等临床病理指标的相关性。结果：①CCL28在乳腺癌组及癌旁正常乳腺组中均有表达，在乳腺癌组中CCL28的阳性表达率为54.6%，在癌旁正常乳腺组中的阳性表达率为9.3%；CCL28在乳腺癌组的表达明显高于癌旁正常乳腺组，差异有统计学意义(P＜0.001)。②CCL28的表达与患者的年龄、肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移与否、ER、PR及HER-2的表达等临床病理指标无关(P＞0.05)。结论：CCL28在乳腺癌中呈现高表达而在癌旁正常乳腺组织则表达较少，CCL28可能与乳腺癌发生、发展有关。CCL28在乳腺癌中表达的高低与发生淋巴结转移无明显的相关性，CCL28能否作为预测淋巴结转移的指标有待于进一步的研究。

广东省中山市1970-2010年鼻咽癌死亡概况

背景与目的：中山市是世界和中国鼻咽癌高发区，中山市虽对其发病进行了系统分析，但未对其死亡进行过系统分析。本研究探讨1970-2010年中山市鼻咽癌死亡概况及规律，为鼻咽癌防治提供科学依据。方法：整理中山市1970-2010年肿瘤登记资料中的鼻咽癌死亡资料，统计分析其死亡粗率、标化死亡率及截缩率等指标。结果：1970-2010年中山市鼻咽癌死亡5 276例，死亡粗率、世界人口标化死亡率(简称世标率)和截缩率分别为11.03/105、12.34/105和29.31/105。其世标率1999年前上升，但差异无统计学意义(P=0.64)，其后下降，差异有统计学意义(P=0.001)。总体而言，1970-2010年其死亡率呈下降趋势(P=0.001)。此外，期间中山市男性鼻咽癌死亡率明显高于女性，死亡高峰年龄为55～59岁年龄组，不同年龄组死亡趋势不同。结论：虽然总体呈下降趋势，但中山市鼻咽癌死亡率仍位于国内外较高水平，提示应加强其防治。

反向杂交检测肝癌相关乙型肝炎病毒前C区突变方法的建立和应用

背景与目的：日益增多的研究表明，乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)DNA前C区G1896A和G1899A突变是肝癌发生的危险因素。本研究旨在建立简单、快速、灵敏和准确的检测HBV前C区突变的反向杂交方法，并应用于检测江苏省启东地区HBV DNA前C区突变与肝癌发生的关系。方法：设计并合成HBV DNA前C区1896和1899位点的特异性探针，通过优化条件建立特异、敏感的杂交体系，并与直接测序检测结果进行比较。将该方法应用于检测启东100例肝癌和100例慢性HBV携带者(对照组)，分析HBV DNA前C区突变与肝癌的关系。结果：反向杂交对血清样本的低检测下限为HBV DNA 103 copy/mL，检测混合感染时比直接测序更占优势，混合株中10％以上的突变株均可被检测。启东地区HBV DNA前C区G1899A突变与肝癌高发具有相关性(P=0.000, OR=4.846, 95%CI：2.240～10.485)，而G1896A突变未见其相关性。结论：反向杂交检测HBV DNA前C区突变方便、快速、准确，可有效监控肝癌的发生，适合临床大规模推广应用。

河湟谷地胃癌临床流行病学特征分析

背景与目的：青海省境内的河湟谷地是我国胃癌高发病率及高死亡率地区之一，该地区位于青藏高原东北麓，地理位置特殊，具有民族多样性。本研究旨在分析青海省境内河湟谷地胃癌临床流行病学特征及其变化趋势，为胃癌的防治工作提供帮助。方法：回顾性分析近10年间河湟谷地2379例胃癌患者临床流行病学资料，并按照1∶2比例设立对照组，进行组内患者对照研究。结果：男性胃癌构成比(78.52%)与女性胃癌构成比(21.48%)相比，10年间差异无统计学意义(χ2=1.376，P=0.241)；青年型胃癌与老年型胃癌构成比近5年组与远5年组比较，差异有统计学意义(χ2=23.629，P=0.000)；胃癌民族构成比差异无统计学意义(χ2=0.757， P=0.685)；胃癌城镇与农村构成比，差异无统计学意义(χ2=1.102，P=0.294)；胃癌家族史者构成比近5年组与远5年组相比，差异有统计学意义(χ2=45.082，P=0.000)；近5年组与远5年组胃癌患者幽门螺旋杆菌(helicobacter pyloki, HP)感染阳性者构成比差异有统计学意义(χ2=13.512，P=0.000)；饮酒、进食速度快、高盐高脂辛辣食物、饮用浓茯茶及喜食过凉过烫食物与男性胃癌相关(P<0.05)；高盐高脂辛辣食物及饮用浓茯茶与女性胃癌相关(P<0.05)。结论：河湟谷地胃癌高发年龄为中老年男性，发病年龄呈年轻化趋势；农村仍是胃癌的高发地区，胃癌的发生与不良饮食习惯、HP感染及家族遗传有关；改变不良饮食习惯、根除HP感染及遗传监测是今后该地区胃癌一级预防的重要内容。

负载核糖体蛋白L8的树突状细胞对黑色素瘤的抑制作用

背景与目的：研究发现核糖体蛋白L8(ribosomal protein L8，RPL8)在黑色素瘤中表达能激活黑色素瘤患者外周血单个核细胞增殖并产生白细胞介素2，提示RPL8可能参与抗肿瘤免疫应答，有望成为抗肿瘤治疗的靶点。本研究通过RPL8蛋白负载树突状细胞(dentritic cell，DC)，探讨负载RPL8蛋白的DC对黑色素瘤的免疫效应。方法：原核表达RPL8蛋白，纯化后致敏小鼠骨髓来源DC，流式细胞仪检测DC表面标志，MTT法检测细胞毒性T淋巴细胞对小鼠黑色素瘤细胞的杀伤作用；负载RPL8蛋白DC免疫治疗小鼠后，观察肿瘤体积变化及小鼠生存时间。结果：纯化蛋白经蛋白质印迹法(Western blot)分析见约28×103大小的特异性条带；DC经RPL8及细菌脂多糖(Lipoplysaccharide，LPS)诱导成熟后细胞表面CD11c、CD80、MHC-Ⅰ类、MHC-Ⅱ类分子表达增高，能激活T淋巴细胞，对B16细胞有抑制作用，RPL8-DC组的抑制率在效靶比为30∶1时高达70%，较PBS组和DC组明显增高；负载RPL8蛋白DC免疫治疗小鼠后，肿瘤体积缩小，小鼠的生存期明显延长。结论：负载RPL8的DC对黑色素瘤有生长抑制作用。

甲状腺未分化癌的治疗进展

甲状腺未分化癌是恶性程度高的甲状腺肿瘤，其发病率低、病死率高。根治性手术有利于提高局部控制率和生存率。适形放疗优于常规放疗，可改善患者的生存质量。有效的化疗药物较少，单用疗效有限，放化疗同步应用于一部分患者可延长生存。而靶向治疗为难治性患者带来新的希望。多个肿瘤中心在探索手术、放疗、化疗、靶向及其他生物治疗的综合应用，以期提高疗效。现就甲状腺未分化癌的治疗方法作一综述。

三阴性乳腺癌化疗进展

三阴性乳腺癌作为乳腺癌的一种特殊亚型，对内分泌治疗和现有靶向治疗无效，并且通常复发较早、进展迅速、预后较差。现就三阴性乳腺癌的分子分型及其临床价值、化疗药物和化疗方案以及化疗和潜在的新靶点药物联合方面的新进展作一综述。

『肿瘤治疗规范及放疗进展』2014上海学习班第一轮通知

第八届全国肿瘤放疗暨综合治疗学术会议征文通知