尼卡地平血药浓度测定及其人体药代动力学

目的建立人血浆中尼卡地平(Nic)浓度测定的毛细管柱气相色谱法,并以此法研究健康受试者po Nic缓释胶囊后的药代动力学.方法样品经甲苯提取,过无水硫酸钠小柱后,用HP-1 25 m×0.32 mm ID毛细管柱分离,采用无分流进样方式,以巴尼地平作为内标,63Ni电子捕获检测器检测.结果该法在0.5～100 ng·mL-1浓度范围内呈线性关系,低定量浓度为0.5 ng·mL-1,日内、日间RSD分别小于4%和7%,低、中、高浓度(0.5,10,50 ng·mL-1)的平均回收率分别为86.0%,95.7%和91.2%.用此法测定了12名健康受试者单剂量及多剂量po Nic缓释胶囊后的血药浓度经时变化过程.结论此法提取率高、重现性好、操作简便、检测灵敏度高,适用于临床药代动力学研究及血药浓度监测.

大豆异黄酮及其衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

目的合成大豆异黄酮及其衍生物,对其抑制肿瘤的活性进行初步评价.方法以多元酚和取代苯乙酸衍生物为主要原料经多步合成制备了大豆异黄酮及其衍生物,对所得化合物用蓝染法测定了在50 μg·mL-1时体外抗肝癌H22瘤株活性. 结果合成了13个脱氧安息香和14个异黄酮化合物,其中5个(1f～4f, 1h)为新化合物. 结论未发现有显著的抗肿瘤活性,其中化合物1d和1g样品在24 h, 100 μg·mL-1时蓝染率分别为5%和10%.对目的物抑制肿瘤转移评价方法的研究正在进行中.

丁基苯酞对大脑中动脉阻断后皮层组织中花生四烯酸释放及磷脂酶A2基因表达的影响

目的研究丁基苯酞(dl-NBP), d-NBP和 l-NBP对大脑中动脉阻断(MCAO) 6 h后缺血区皮层中花生四烯酸(AA)释放及磷脂酶A2(PLA2)基因表达的影响.方法阻断大脑中动脉起始部造成局灶性脑缺血模型.HPLC检测AA.Northern blot检测皮层中PLA2基因表达.结果 MCAO后6 h,皮层中AA释放明显增加.于脑缺血后5 min 和120 min,给dl-NBP(10或20 mg·kg-1) 和尼莫地平(0.5 mg·.kg-1) 可显著抑制AA的释放.d-NBP和l-NBP作用比较,显示d-NBP有与dl-NBP相似的作用,而l-NBP则无明显影响.Northern印迹结果表明,脑缺血6 h,皮层中PLA2的基因表达增强. dl-NBP和d-NBP(10, 20 mg·kg-1,ip)皆可使表达降低,而l-NBP对缺血脑组织中PLA2的基因表达的升高无明显影响.结论 dl-NBP和d-NBP可抑制MCAO后脑组织中AA释放和PLA2的基因表达.

新型可降解聚酯材料地西泮缓释微球的研制

目的优化制备工艺,用新型的生物可降解材料聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物(PHBV)与D,L-聚乳酸(PLA)共混物为基材制备以地西泮(diazepam,DZP)为模型药物的缓释微球(MS).方法用正交设计优化微球制备工艺,用扫描电镜(SEM)观察微球表面形态.对微球粒径及其分布、体外释药、稳定性及在动物体内药动学进行了测定.结果微球平均粒径为(20.45±4.50) μm,粒径在15.5～35.2 μm占总数88%以上.载药量为(16.95±0.80)%,包封率为(69.68±1.13)%;体外释药方程为Q=2.7027t+13.50(γ=0.9827),动物体内实验表明,微球的血药浓度-时间曲线下面积AUC是溶液对照组的2.35倍,平均驻留时间MRT是对照组的3.62倍.微球在冰箱4℃与室温(20～25℃)条件下性质稳定.结论微球制备工艺稳定,与DZP针剂相比,具有明显缓释作用.

五味子酚对大鼠中性粒细胞呼吸爆发的影响

目的研究五味子酚对大鼠中性粒细胞呼吸爆发时自由基生成和溶酶体酶释放的影响.方法分别用紫外分光法、荧光分光法和同位素法测定该细胞自由基生成、溶酶体酶释放、胞浆钙离子和环磷酸腺苷(cAMP)含量.结果五味子酚能抑制中性粒细胞超氧阴离子、过氧化氢、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)以及一氧化氮的生成,减少溶菌酶和β-葡糖醛酸苷酶的释放,而且,还能拮抗FMLP引起的细胞胞浆钙离子的增加,进一步增强FMLP引起的胞浆cAMP的增加.结论五味子酚可能通过降低细胞内钙离子浓度和/或升高胞浆cAMP的含量而抑制中性粒细胞呼吸爆发所导致的上述变化.

甘草中有机氯类农药残留量的毛细管气相色谱测定

目的对甘草中15种有机氯农药的毛细管气相色谱测定方法的研究.方法样品经有机溶剂超声提取、Florisil硅土色谱柱净化后,采用不分流进样方式,用DB-5弹性石英毛细管柱经柱程序升温技术分离, 并用电子捕获检测器检测,外标法计算含量.结果三水平的平均回收率为74.7%～119.2%,RSD为0.7%～18.9%;被测样品中均含有不同程度的农药残存.结论本法简便,重复性及净化效果好,可用于甘草中15种有机氯农药的残留量检测.

AFLP法构建人参、西洋参基因组DNA指纹图谱

目的采用扩增片段长度多态性DNA(AFLP)分子遗传标志技术,分析人参、西洋参基因组DNA多态性.方法人参、西洋参干燥根基因组DNA,经EcoRI/MseI酶切并与其相应的人工接头连接后,使用选择性引物进行PCR扩增.结果经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,成功构建出多态性丰富和重复性好的人参、西洋参DNA指纹图谱.结论 AFLP法有望成为一种独立的切实可行的手段,将在人参、西洋参等药用植物的鉴定、生物进化、系统发育研究及指导道地性药材的科学栽培等方面发挥重要作用.

脂质体、乳剂图像自动定量分析方法

目的研究脂质体、乳剂图像的形态参数的自动测量与定量分析.方法在研究脂质体、乳剂形态特征的基础上应用数学形态学的多种逻辑算法、灰度-梯度共生矩阵法和灰度图像增强法建立了脂质体图像的参数抽取方法和算法及相应的自动分析软件.结果此法可抑制图像中的噪声和干扰,提高图像清晰度,建立了脂质体图像的参数抽取自动测量与定量分析方法,并应用于多糖多相脂质体(bipolysaccharide liposome)等样品的分析.结论此方法能显著提高脂质体图像形态定量分析的速度和精度.

柱前衍生化HPLC法测定积雪草及三金片中积雪草苷的含量

目的建立积雪草中积雪草苷的柱前衍生化高效液相色谱测定法,并用该法测定积雪草和三金片中积雪草苷的含量.方法以吡啶-苯甲酰氯为衍生化试剂,对积雪草苷分子中的羟基进行苯甲酰化后,采用RP-HPLC法测定.色谱柱:Spherisorb ODS C18柱;流动相:甲醇-四氢呋喃-水(90∶4∶6,0.1%三乙胺);柱温:25℃;流速:0.8 ml.min-1;检测波长:235 nm;内标物:VD3.结果积雪草苷0.396～3.960 μg与峰面积比呈线性关系,相关系数为0.9985.用此法对不同产地的积雪草和三金片中积雪草苷进行测定,结果积雪草中积雪草苷的平均回收率为99.6%,RSD为2.3%(n=6);三金片中积雪草苷的平均回收率为99.2%,RSD为2.7%(n=6).结论此法准确、灵敏度高、重现性好,为中药积雪草和中成药三金片的质量评价提供了科学依据.

中国健康志愿者口服福辛普利的药代动力学研究

目的研究中国健康志愿者po福辛普利后的药代动力学.方法 10名男性健康受试者po福辛普利20 mg后,用LC/MS/MS法测定不同时间血浆中活性代谢物福辛普利拉浓度,SRM方式选择性检测待测物的特征碎片离子,full-scan ms2方式检测内标物的碎片离子.结果本法线性良好,精密度、准确度、回收率均符合要求.测得的主要药代动力学参数为:T1/2=(6.6±1.2) h, Tmax=(3.7±1.1) h, Cmax=(451.9±251.2) ng·mL-1, AUC0-∞=(3578.4±2231.2) h·ng·mL-1.结论本实验测得的Tmax,Cmax和AUC0-∞均高于文献报道的白人受试者的参数值,而T1/2显著低于文献值.

无纹紫背苔化学成分的研究

目的研究苔纲植物无纹紫背苔(Plagiochasm intermedium L.)的化学成分.方法用95%的EtOH回流提取,所得浸膏分部萃取后经硅胶柱及Sephadex LH-20柱色谱反复分离纯化,并用1DNMR,2DNMR及X-ray单晶衍射等技术对化合物的结构进行鉴定. 结果从无纹紫背苔中分离到6个化合物,分别鉴定为:双联苄类化合物Pakyonol(I), 24-乙基胆甾-5,22-二烯-3β-软脂酸脂(24-ethylcholesta-5,22-dien-3β-ol-palmitic acid ester,II), 22-羟基何伯烷(22-hopanol,III), β-谷甾醇(β-sitosterol, IV),胡萝卜苷(daucosterol,V),甘露醇(mannitol,VI). 结论 II为新化合物, 其余化合物为首次从该属植物中分离得到.

多目标同步优化法优化硫酸沙丁胺醇渗透泵控释片的制备工艺

目的将多目标同步优化技术应用于药物剂型的处方筛选中.方法通过硫酸沙丁胺醇渗透泵型控释片的处方设计,将两种同步优化技术:反应曲面法(response surface method, RSM)与人工神经网络(artificial neural network, ANN)应用于药物剂型的优化筛选过程中,并将两种方法进行比较.结果两种方法筛选的优处方结果较为接近,但ANN的预测结果误差较小.结论在处理多目标同步优化问题上,人工神经网络技术是值得推广应用的一种新型的处方优化筛选技术.

NO-cGMP信号转导系统的上调参与阿片类药物耐受和戒断的生化机制

目的观察阿片激动剂长时程作用对NO-cGMP信号转导系统的影响.方法选用iNOS cDNA稳定表达的NG-LNCXiNOS细胞,采用NOS活性和cGMP放免测定,Western杂交和NADPH黄递酶组化染色技术.结果阿片类药物长时程作用剂量依赖性增高胞浆相iNOS活性和胞内cGMP含量,药物作用强弱顺序是DPDPE> DADLE>吗啡,EC50都在nmol·L-1数量级.用纳洛酮急性戒断阿片耐受细胞,造成酶活性和cGMP水平增加更显著.DPDPE长时程作用还引起iNOS基因表达增强和NADPH黄递酶染色阳性细胞增多.结论提示NO-cGMP信号转导系统上调可能是阿片耐受和成瘾的重要生化改变.

间氯苯哌嗪诱导的小鼠明暗箱焦虑模型一种新的经济简便抗焦虑药筛选模型

目的建立经济简便的抗焦虑药模型.方法用间氯苯哌嗪(mCPP)诱导产生焦虑,观察ddy小鼠和ICR小鼠在明暗箱的行为表现.结果 mCPP在sc 1～4 mg·kg-1的剂量下即可显著降低ddy小鼠在明箱的活动次数,而对暗箱的活动次数影响不显著;mCPP在sc 2～10 mg·kg-1的剂量下对ICR小鼠在明箱的的活动次数影响不明显;用地西泮对该模型进行验证,发现只用较小的样本量即可得出显著结果.结论 ddy小鼠可取代Wistar大鼠进行mCPP诱导焦虑的明暗箱模型,且简便易得,经济有效.

PEG表面修饰硬脂酸脂质纳米粒的制备与体外细胞摄取

目的研究不同分子量聚乙二醇[poly(ethylene glycol),PEG]表面修饰的硬脂酸脂质纳米粒的制备方法及体外细胞摄取的情况.方法以亲脂端为硬脂基,亲水端为不同链长度PEG的非离子性表面活性剂,用"乳化蒸发-低温固化"的方法制备硬脂酸纳米粒.以小鼠腹腔巨噬细胞为细胞模型做体外细胞吞噬实验.结果用Brij 78,Myrj 53和Myrj 59为表面活性剂制备了粒径分别为(162.0±67.4) nm, (50.2±28.9) nm和(326.8±195.2) nm的纳米粒.体外细胞摄取实验证明,各种纳米粒相对于硬脂酸溶液均可增加巨噬细胞对硬脂酸的摄取,其中以Myrj 59组摄取少;在样品中加入小鼠血浆可以增加巨噬细胞对硬脂酸纳米粒的摄取.结论用"乳化蒸发-低温固化"的方法可以制备PEG表面修饰的硬脂酸纳米粒;表面修饰PEG链的长度可以影响硬脂酸纳米粒体外细胞的摄取.

苄基四氢巴马汀细胞内用药对豚鼠乳头状肌动作电位和心室肌细胞延迟整流钾电流的作用

目的研究将苄基四氢巴马汀(BTHP)导入细胞内对豚鼠乳头状肌动作电位及单个心室肌细胞延迟整流钾电流的影响.方法利用外加电压脉冲将药物导入乳头状肌细胞内,并用标准微电极方法测定动作电位;利用浓度差扩散方式使药物进入单个心室肌细胞内,采用全细胞膜片钳技术记录延迟整流钾电流(IK).结果 100 μmol·L-1 BTHP使APD20和APD90分别延长13.5%和20.5%.30 μmol·L-1 BTHP使IK和IK,tail分别从(14.1±2.2) pA·pF-1和(4.0±0.6) pA·pF-1降至(9.4±1.3) pA·pF-1和(2.1±1.0) pA·pF-1,下降率分别为33.2%和35.3%. 该药使IK和IK,tail的I-V曲线幅度降低,对曲线形状影响不明显.结论 BTHP入细胞内后可阻滞延迟整流钾电流和延长动作电位时程.

麦角生物碱生物合成研究进展

老年痴呆的发病机理及治疗策略