低氧应激因子PHD2与血管新生相关疾病

PHDs家族是低氧应激的重要调控因子,通过调控低氧诱导因子HIFs的稳定性和活性,使细胞和组织适应低氧应激环境.其中,PHD2作为PHDs家族中的重要一员,是低氧诱导因子HIF-1的关键调控因子.近年研究表明,PHD2不仅在缺血性疾病的血管新生中起重要作用,还能通过调控肿瘤生长、转移等相关基因的表达,影响肿瘤微环境下肿瘤的生长及转移.本文就PHD2的分子调控机制及其在生理病理过程中的作用机制进行综述,重点介绍PHD2在血管再生治疗和肿瘤血管新生中的作用,以及目前PHD2作为治疗靶标的开发应用研究.

小分子共价抑制剂研究进展

小分子共价抑制剂,也称不可逆抑制剂,是通过共价键与靶标发生不可逆结合而发挥其生物学功能的一类抑制剂.与非共价抑制剂相比,虽然共价抑制剂在生物活性方面具有较大的优势,但如果这类抑制剂脱靶,也将带来更大的毒副作用.由于共价抑制剂的这种两面性,长期以来药物研发人员对其是敬而远之.近年来,由于可逆抑制剂所面临的难以解决的耐药性等问题,人们又重新重视对共价抑制剂的研发.本文将对近年来共价抑制剂的研究进展,以及共价抑制剂与靶蛋白残基的作用模式进行综述.

核交联聚合物胶束递药系统的研究进展

核交联聚合物胶束作为一种新型的递药系统,能减少药物在血液循环中的提前释放,提高胶束稳定性,可将药物有效地传递到治疗部位,进一步提高药物的生物利用度,降低毒副作用.大多数药物以物理包埋或者通过聚合物化学共价的方式存在于胶束内.由于聚合物的组成和性质具有多样性,以及机体内微环境特有的性质,可制备出具有环境响应性、主动靶向作用的核交联聚合物胶束,达到控制药物释放的目的.本文主要介绍了近年来各种类型的核交联聚合物胶束研究进展,分析并总结其作为药物传递系统的特点和作用.

中国产藤黄属植物中抗肿瘤活性化学成分的研究概况

藤黄属(Garcinia L.)植物具有广泛的药用价值,是天然(口山)酮类、苯甲酮类等化合物的主要资源之一,这类成分具有新颖多变的结构和显著的生物活性,特别在抗肿瘤方面的研究,成为近年来天然产物的研究热点之一.本文结合作者多年来在该领域的研究工作,对中国产藤黄属植物中具有显著抗肿瘤生物活性的化学成分和生物活性的研究进展进行介绍.

传统药物对西药药代动力学影响的研究与探索

近20年来草药(或称植物药、传统药)的使用再次盛行,据调查以草药作为补充和替代药物的人群占世界人口的70％,近10年的数据显示,加拿大、澳大利亚以及欧洲的草药消耗量以指数形式增长.特别是草药与西药同时服用己成为一种趋势,草药与西药联合应用是一个需要引起高度重视的问题,国际上已有大量文献、临床报告、动物实验对草药-西药相互作用进行了广泛的研究,临床上对草药-西药相互作用的问题也日益关注.本文综述了临床上草药与西药联合应用时所产生的相互作用,及其对患者病情及治疗影响的研究.研究内容包括草药-西药相互作用的临床表现、循证医学研究和证据等级标准的建立;在作用机制方面包括药物代谢酶的诱导与抑制、转运体的诱导与抑制、胃肠道功能的改变、肾脏清除药物能力的改变等.本文还介绍了国内当前中药-西药联合用药的现状和存在的问题.

京尼平抗抑郁作用的1H NMR代谢组学机制研究

寻找抑郁症模型大鼠海马组织中潜在的标志性代谢产物,探究京尼平抗抑郁作用机制.通过慢性温和不可预知应激(CUMS)程序对大鼠进行抑郁造模,2周后灌胃京尼平低、中、高3个剂量(25、50和100 mg·kg-1)及文拉法辛药物(空白组和模型组除外),每天1次,连续2周.采集大鼠海马组织并进行1H NMR测试,采用代谢组学技术分析海马组织中内源性代谢产物的变化.结果表明,京尼平中剂量可以显著升高抑郁模型大鼠海马组织中甘氨酸和N-乙酰天门冬氨酸,降低谷氨酸、肌醇、乳酸和丙氨酸水平,表现出较好的抗抑郁效果.海马组织中显著性变化的代谢物对神经系统功能的正常发挥有重要影响,京尼平可能是通过调节上述代谢产物来增强海马组织中神经元的活性,修复和改善神经元的功能而发挥抗抑郁效果.代谢组学方法是研究京尼平抗抑郁效果及药理作用机制的有效手段.

力达霉素联合利妥昔单抗对人B细胞淋巴瘤的治疗作用

研究力达霉素与利妥昔单抗联合抗人B细胞淋巴瘤的作用和机制.采用MTS法检测细胞的增殖抑制率,采用Annexin V-FITC/PI法进行细胞凋亡检测,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达量变化,后用人B细胞淋巴瘤裸鼠模型验证该联合方案对淋巴瘤的体内抑制作用.结果表明,利妥昔单抗与力达霉素联合效果显著,增殖抑制作用和细胞凋亡比率显著多于单独用药组,信号通路分析表明凋亡相关蛋白表达升高,凋亡抑制蛋白表达下降.联合用药组荷瘤小鼠生存时间明显高于对照组和单独用药组,体内脾脏转移程度低于对照组和单独用药组.研究表明力达霉素与利妥昔单抗对人B细胞淋巴瘤的体内、体外增殖有协同抑制作用,这种联合协同机制可能与增加肿瘤细胞的凋亡有关.

XCT790通过下调雌激素相关受体α的表达抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖

为探讨雌激素相关受体α (ERRα)的特异性反向激动剂XCT790对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及相关分子信号传导机制,采用原代培养大鼠胸主动脉VSMCs,以胎牛血清(FBS)刺激VSMCs增殖,分别加入不同浓度的XCT790,以CCK-8试剂检测XCT790对VSMCs增殖的影响;以RT-PCR考察ERRα、PGC-lα、OPN和MCAD的mRNA表达水平;以Western blotting检测ERRα、ERK2及p-ERKl/2蛋白表达水平;以ELISA法检测VEGF蛋白水平.结果显示,XCT790对VSMCs增殖的抑制作用在5～20 μmol·L-1剂量范围内呈显著剂量依赖性,在10～20 μmol·L-1剂量范围内呈显著时间依赖性;且5～20 μmol·L-1 XCT790能明显下调ERRα与p-ERK1/2水平(P＜0.05,P＜0.01).提示:XCT790可通过下调ERRα及其靶基因转录,进而抑制ERK途径来抑制大鼠VSMCs增殖.

SphK1抑制剂SKI Ⅱ抑制肝癌HepG2细胞周期及细胞侵袭

鞘氨醇激酶1 (sphingosine kinase 1,SphK1)在调控细胞基本生物学功能方面发挥重要作用,本研究考察了SphK1抑制剂SKI Ⅱ对肝癌细胞HepG2周期及侵袭的影响.采用SRB方法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期分布,Matrigel-Transwell方法检测细胞侵袭能力,Western blotting检测蛋白表达变化.结果表明,SKI Ⅱ能够抑制HepG2细胞的存活,诱导HepG2细胞发生G1期阻滞以及抑制HepG2细胞的侵袭;SKI Ⅱ能降低细胞G1期相关蛋白CDK2、CDK4以及Cdc2的表达水平,同时降低与细胞侵袭相关的MMP2和MMP9的蛋白水平.结果提示,SphK1抑制剂SKI Ⅱ能引起细胞G1期阻滞及降低细胞侵袭能力,提示SphK1可能成为肝癌治疗的一个潜在靶点.

基因序列分析指导的海洋糖丝菌中特曲霉素X的发现

一株海洋来源的稀有放线菌(Saccharothrix sp.10-10)发酵液粗提物显示出较强的抗革兰阳性耐药菌活性.对该产生菌中可能参与次级代谢产物生物合成的主要关键酶系基因保守序列的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分析,发现其Ⅱ型聚酮合酶基因片段,与特曲霉素生物合成基因簇中的相关序列具有较高的同源性.经活性追踪,利用多种色谱方法从Saccharothrix sp.10-10发酵液中分离纯化得到特曲霉素X(tetracenomycin X,1),同时还得到氧代托马霉素(oxotomaymycin,2),该两种化合物为首次从海洋糖丝菌属放线菌中发现,并利用2D NMR对这两个化合物的13C NMR数据进行了准确归属.体外活性结果表明,化合物1对甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)和万古霉素耐药肠球菌(VRE)等耐药菌显示出显著的抗菌活性,低抑菌浓度(MIC)为32～64 μg·mL-1;此外,化合物1还对多株人肿瘤细胞显示出较强的细胞毒活性,IC50值为5.1～18.0μmol·L-1.

柔毛鸦胆子茎中一个新的吲哚生物碱

运用各种色谱方法从柔毛鸦胆子茎的95％乙醇提取物中分离得到8个化合物,通过NMR等波谱技术鉴定其结构分别为bruceolline O(1)、1-(l-β-glucopyranosyl)-1H-indole-3-carbaldehyde (2)、canthin-6-one (3)、11-hydroxycanthin-6-one (4)、9-methoxycanthin-6-one (5)、4-methoxycanthin-6-one(6)、infractin (7)和β-carboline-1-propionic acid (8).采用MTT法对以上化合物进行体外细胞毒活性测试,化合物1～8对所测试的两种人源肿瘤细胞HCT-8和A549均没有表现出明显的细胞毒活性(IC50＞ 10 μmol,L-1).化合物1为一个新的吲哚生物碱,化合物2、5～7为首次从该植物中分离得到.

含Schiff碱芳香氮芥香豆素衍生物的设计、合成及抗肿瘤增殖活性

基于生物电子等排及活性单元拼接原理,将Schiff碱、芳香氮芥药效基团N,N-二(2-氯乙基)胺基拼接到香豆素结构中,设计合成了系列新型含Schiff碱芳香氮芥的香豆素衍生物(7a～7v),结构经1H NMR、MS及元素分析确证.采用MTT法评价了化合物对HepG2、DU 145及MCF7肿瘤细胞的抗增殖作用.结果表明,部分化合物对肿瘤细胞的增殖具有较好的抑制作用,其中化合物7c、7f、7g、7h和7q对DU145和MCF7的抑制作用优于或相当于阳性对照,值得进一步研究.

吸收促进剂对绿原酸的跨膜转运影响

采用Caco-2细胞模型,研究不同吸收促进剂对绿原酸跨膜转运的影响.绿原酸浓度采用高效液相色谱法测定.在20～80 μg·mL-1内,绿原酸吸收速率常数(Ka)无显著性差异;40和20 μg·mL-1的双向转运表观渗透系数(Papp)比值分别为1.14和1.18;在吸收促进剂的作用下,绿原酸吸收速率常数和表观渗透系数增加,吸收半衰期减少.绿原酸主要以被动转运的方式通过Caco-2单层细胞膜,转运过程可能有载体参与;冰片对其通过Caco-2细胞膜的转运过程无影响,牛胆盐、十二烷基硫酸钠和卡波姆3种吸收促进剂的促吸收能力按以下顺序递减:十二烷基硫酸钠＞牛胆盐＞卡波姆.

大鼠重复注射米托蒽醌热敏脂质体产生ABC现象

考察大鼠重复注射米托蒽醌热敏脂质体是否产生加快血液清除现象(accelerated blood clearance phenomenon,ABC phenomenon).液质联用测定大鼠血浆中米托蒽醌浓度,并对血浆样品中抗聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG) IgM抗体进行酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的检测.结果显示,第2次给药后药物清除速率变快,给药前血浆中抗PEG IgM抗体在第2次给药后被迅速中和.证明大鼠重复注射米托蒽醌热敏脂质体会产生ABC现象.

顶空气相色谱法测定硫黄熏蒸中药材中二氧化硫的残留量

地锦草有效部位对红色毛癣菌细胞膜合成及MEP、SUB基因表达的影响

藏药佐太对CYP1A2和NAT2的活性及蛋白和mRNA表达的影响

HPLC-DAD-FT-ICR-MS法分析华蟾素中蟾毒配基类成分

华蟾素为中华大蟾蜍皮水煮醇沉制剂,临床具显著抗肿瘤活性.本文首次采用高效液相色谱串联高分辨傅立叶变换离子回旋共振质谱(HPLC-DAD-FT-ICR-MS)方法,针对华蟾素中主要抗肿瘤活性成分蟾毒配基类化合物进行了分析,旨在阐明华蟾素抗肿瘤活性效应物质基础.该研究首先采用二氯甲烷-硅胶固相萃取法对华蟾素中蟾毒配基类成分进行富集,根据化合物的UV及FT-ICR-MS高分辨质谱的一级、二级质谱数据,结合文献,比较分析了华蟾素中的主要蟾毒配基类成分的化学组成,共推导出33个蟾毒配基类成分,其中8个成分通过与对照品比对,准确鉴定了结构.该研究基本阐明了华蟾素中主要蟾毒配基类成分,为华蟾素的进一步药效学研究奠定了物质基础.

核磁共振内标法测定波生坦的含量

建立1H NMR核磁共振定量法(简称QNMR)测定波生坦的含量.采用Bruker AVANCE Ⅱ 400型核磁共振谱仪,以对苯二甲酸二甲酯为内标,氘代氯仿为溶剂,zg30脉冲序列获取1H NMR谱,测定波生坦的含量,并与采用质量平衡法计算含量的结果进行比较.采用核磁定量法与质量平衡法测定本品含量分别为96.25％与96.58％.本文建立的核磁定量的方法准确、快速,为该品种的质量控制和首批对照品的标定提供了新的方法,并为质量平衡法定值提供有力的佐证.

LC-FT-ICR-MS方法鉴定黄连解毒汤在大鼠血浆中的原形及代谢产物研究

为深入研究黄连解毒汤体内发挥疗效的效应物质基础,本文采用正负离子扫描模式下的LC-FT-ICR-MS方法,通过与黄连解毒汤提取物和混合对照品的保留时间和高分辨质谱信号比较分析,发现并确证了给予黄连解毒汤后大鼠血浆中主要的38个入血成分,包括22个原形成分和16个代谢产物.在原型成分中,16个原型化合物通过与对照品比对得到了准确鉴定;在代谢产物中,除M11为一相代谢产物外,黄连解毒汤主要成分在大鼠体内多以二相代谢产物形式存在,包括葡糖醛酸和硫酸化产物.该研究通过对黄连解毒汤入血成分的分析,基本阐明了黄连解毒汤体内发挥药效的可能作用物质基础,为进一步的药理作用及其机制研究提供了依据.

中药材威灵仙及其伪品DNA条形码鉴别研究

利用DNA条形码技术对中药威灵仙及其伪品进行鉴别,为威灵仙分子鉴定提供更多依据与参考.本实验利用psbA-trnH序列对来自3个属10个物种的72份威灵仙及其伪品样本进行扩增测序,结合GenBank数据库中7个属21个物种的284条序列,分析ITS、ITS2、psb A-trnH、rbcL、matK各序列种内与种间变异、遗传距离、barcoding gap,并采用近距离法(nearest distance)和相似性搜索算法(BLAST1)评价5条序列的鉴定成功率.结果显示psbA-trnH序列在两种DNA序列鉴别评价方法中的效率均较高,且该序列种间变异较大,在barcoding gap检验中,其序列重叠区较少,种间与种内变异分布呈两边分开的趋势,NJ树分析可将各物种分开,差异显著.综合鉴别效率和扩增成功率,推荐使用psbA-trnH序列作为威灵仙药材及其伪品的鉴别序列.

化学生物学与药物化学研发托伐替尼

1 新靶标的期待与发现自身免疫性疾病是由于体内的免疫缺陷,导致机体不能容忍自身的蛋白,从而引发反应性疾病,这些疾病包括1型糖尿病、关节炎、牛皮癣和免疫性疾病等.如果药物能够对抗过于活跃的免疫系统,则可进行治疗或加以控制.而且,降低免疫系统的活性也是对器官移植防止排斥的必要手段.