米卡芬净的加压毛细管电色谱法测定

建立了加压毛细管电色谱法测定抗真菌药米卡芬净.采用EP-100-20/45-3-C 18-BP反相毛细管色谱柱,以乙腈∶2.5 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.5) (35∶65)为流动相,检测波长270 nm,分离电压15 kV.米卡芬净在62.5～800 μg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率为99.6％,RSD为1.47％.

左旋泮托拉唑钠肠溶片中有关物质的HPLC法测定

建立了高效液相色谱法测定左旋泮托拉唑钠(1)肠溶片中的有关物质A、B、C、D&F和E.采用C18色谱柱,以铵盐缓冲液(四丁基硫酸氢铵1.1g,乙酸铵3.85 g,用水溶解并稀释至1L,以氨水调至pH 7.9)∶乙腈(65∶35)为流动相,检测波长290 nm.1与各杂质及强制降解破坏产物均能完全分离.有关物质A、B、C、D&F和E分别在0.080～2.400、0.050～1.500、0.033～1.000、0.080～2.400和0.033～1.000μg/ml范围内线性关系良好;平均回收率分别为100.2％、101.6％、99.0％、100.2％和104.0％,RSD分别为1.5％、0.64％、3.0％、0.91％和1.1％.同时建立了手性固定相HPLC法测定右旋泮托拉唑钠(2),可有效检测1肠溶片中的2.

6-甲氧基-7-苄氧基喹唑啉-4-酮及其有关物质的HPLC法测定

益智胶囊中9种有效成分的UPLC-MS/MS法测定

建立了超高效液相色谱串联质谱法同时检测益智胶囊中的9种成分——原儿茶醛、绿原酸、紫丁香苷、隐绿原酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A的含量.采用Waters Acquity UPLC BEHC18色谱柱,以乙腈:0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱,负离子模式检测.结果9种有效成分在检测的范围内线性关系良好,方法回收率为97.7％～101.1％,RSD均小于3％.

注射用核糖核酸Ⅱ的抗肿瘤活性测定

将不同浓度梯度核糖核酸Ⅱ作用于7种细胞系,采用WST-8比色法测定其对细胞增殖的抑制情况,选择较敏感的人红白血病细胞K562作为试验对象,考察了细胞接种密度、药物作用时间等条件的影响,初步建立了注射用核糖核酸Ⅱ体外抗肿瘤活性的测定方法.核糖核酸Ⅱ在0.02～100 mg/ml范围内线性关系良好.采用本法测定了10批样品的抗肿瘤活性,结果对K562细胞的抑制率均大于55％.

吸入气雾剂中甲醛的HPLC法测定

建立了柱前衍生化-高效液相色谱法测定吸入气雾剂中的甲醛.以2,4-二硝基苯肼为衍生化试剂,使用WelchUltimate XB-C18色谱柱,乙腈∶水(50∶50)为流动相,检测波长355 nm.甲醛在0.1～20 μg/ml范围内线性关系良好,低检测限为12.5 ng/ml,低定量限为50 ng/ml.回收率为102.3％,RSD为1.34％.

利培酮微球中结晶型药物含量对释药的影响

为考察利培酮微球中结晶型药物对药物释放的影响,采用溶剂挥发法制备了利培酮微球,用扫描电镜观察微球的外观和截面,并建立了X-射线衍射法定量测定微球中结晶型药物含量的方法.结果表明,不同工艺制备的微球其内部药物结晶的形态和数量不同,结晶型药物含量越高体外释药停滞期越长.

载艾塞那肽介孔二氧化硅纳米粒的研制及其药动学

制备了孔径(6.0±0.2) nm、孔容(0.94±0.03) cm3/g、比表面积(701.4±0.70) m2/g的SBA-15型介孔二氧化硅纳米粒,平均粒径为(920±120) nm,以其为载体负载艾塞那肽.所得SBA-15型介孔二氧化硅纳米粒因具有较大比表面积和比孔容,可提高载药量至(15.2±2.0)％.体外释放试验表明,该纳米粒在pH 7.4磷酸盐缓冲液中d1释出近35％,d14时缓慢释出40％.将艾塞那肽的水溶液和SBA-15型介孔二氧化硅纳米粒分别皮下注射给予SD大鼠.结果两组的t1/2为0.60和14.53 h,AUC0→t为1.71和8.60 ng.ml-1.h,MRT为1.14和21.30 h,可见该载体可显著增加药物的半衰期和MRT,有望成为艾塞那肽皮下注射给药的理想载体.

他克莫司软膏的体外经皮渗透性考察

比较2种他克莫司软膏在离体乳猪皮肤及裸鼠皮肤的渗透吸收规律,评价质量一致性.采用改良Franz扩散池进行体外透皮试验,以LC-MS/MS法测定接收液及皮肤中的他克莫司浓度.结果表明,以猪皮为屏障时,3批受试软膏及原研制剂的24 h累积渗透量分别为(243.50±72.07)、(247.22±66.42)、(237.76±92.81)和(226.00±38.88) ng/cm2,24 h皮肤滞留量分别为(1 866.21±164.91)、(1 686.11±176.54)、(1 817.08±221.52)和(1 769.77±254.50) ng/cm2.以裸鼠皮肤为屏障时,2种制剂的24 h累积渗透量均约是猪皮的3～4倍.本研究结果提示受试软膏与原研制剂的体外经皮渗透性能基本一致.

塞来昔布纳米晶体的制备与表征

采用反溶剂沉淀法联合高压均质法技术制备塞来昔布的纳米晶体,提高其溶出度.以塞来昔布初混悬液形貌、纳米晶体混悬液粒子粒径和多分散系数(PDI)为指标,考察稳晶剂种类和比例、高压均质参数、固化方式等的影响.结果表明,将聚维酮K30 25 mg与十二烷基硫酸钠2.5 mg联用作稳晶剂,500 bar下循环10次,得到的纳米晶体粒径为(283.67±20.84) nm,PDI为0.16±0.01(n=3).喷雾干燥得到的产品复溶后能分散成均一混悬液,粒径为(623.33±28.71)am.采用X射线衍射、差示扫描量热法、扫描电镜、透射电镜、饱和溶解度对原药及纳米晶体性质进行表征分析,结果表明纳米晶体结构和晶型保持不变.所得纳米晶体的溶出率明显高于原药和物理混合物,且在高温高湿条件下放置10d仍较稳定.

(S)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的化学-酶法合成

3-羟基哌啶经N-叔丁氧羰基保护、次氯酸钠-TEMPO氧化、酮还原酶K198不对称催化还原得到依鲁替尼手性中间体(S)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶,总收率70％.

盐酸伊伐布雷定有关物质的分离、结构鉴定及合成

在盐酸伊伐布雷定质量研究中,通过HPLC-MS分析出2个新杂质,推测其结构为:3-(3-羟丙基)-7,8-二甲氧基-1H-苯并氮革-2(3H)-酮和3-(3-羟丙基)-7,8-二甲氧基-4,5-二氢-1H-苯并氮革-2(3H)-酮.以3-(3-氯丙基)-7,8-二甲氧基-1H-苯并氮革-2-酮为原料,经羟基取代和氢化制得这2个化合物,经1H NMR、13C NMR和MS确证结构,且其和盐酸伊伐布雷定粗品中的相应杂质保留时间相同.

17β-羟基-4α,5α-环氧雄甾烷并[2,3-d]异噁唑的合成工艺改进

17β-羟基雄甾-4-烯-3-酮与甲酸乙酯在甲醇钠条件下经缩合生成17β-羟基-2-羟亚甲基雄甾-4-烯-3-酮,与盐酸羟胺环合形成17β-羟基-4-烯-雄甾烷并[2,3-d]异噁唑,后经m-CPBA环氧化制得曲洛司坦关键中间体17β-羟基-4α,5α-环氧雄甾烷并[2,3-d]异噁唑,总收率为70％,纯度为99.1％.

盐酸厄洛替尼的合成新工艺

3,4-二羟基苯甲酸乙酯经取代、硝化、还原、环合和氯代反应制得4-氯-6,7-双(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉,然后与3-氨基苯乙炔发生亲核取代反应、与盐酸成盐得到盐酸厄洛替尼,总收率约67％(以3,4-二羟基苯甲酸乙酯计).其中首次报道了以苯乙酮为原料经硝化、氯化、消除和还原4步反应制得3-氨基苯乙炔,收率约48％.

赛洛多辛的合成

1-乙酰基-5-(2-氨基丙基)-2,3-二氢-7-氰基吲哚与2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙基甲磺酸酯缩合,经L-扁桃酸拆分得(R)-1-乙酰基-5-[2-[2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙胺基]丙基]-7-氰基吲哚啉,再经二碳酸二叔丁酯保护、碱性水解制得(R)-5-[2-[N-叔丁氧羰基-2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙胺基]丙基]-7-氰基吲哚啉,后经氰基水解、与3-溴丙基苯甲酸酯取代、酯基水解及脱保护基得赛洛多辛,总收率约6.6％.

甲磺酸达比加群酯有关物质的合成

根据甲磺酸达比加群酯的结构特征和合成工艺,制备了可能的10种有关物质:4-[[(己氧基)羰基]脒基]苯胺(A)、2-[[[4-(氨基亚甲胺基)苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸乙酯(B)、2-[[[4-[[(己氧基)羰基]-氨基亚甲胺基]苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸乙酯(C)、3-[[[2-[[[4-[[(己氧基)羰基]氨基亚甲胺基]-苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸甲酯(D)、3-[[[2-[[[4-[[[(己氧基)羰基]氨基]羰基]苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸甲酯(E)、3-[[[2-[[[4-(氨基亚甲胺基)苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸(F)、3-[[[2-[[[4-[[(己氧基)羰基]氨基亚甲胺基]苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)-氨基]丙酸(G)、3-[[[2-[[[4-[[(己氧基)羰基]氨基亚甲胺基]苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酰胺(H)、3-[[[2-[[[4-[[[(己氧基)羰基]氨基]羰基]苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯(Ⅰ)和3-[[[2-[[[4-[[[(己氧基)羰基]氨基]羰基]苯基]氨基]-甲基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸(J),并经1H NMR和MS确证结构,以作为甲磺酸达比加群酯质量研究的参照物.

抗体修饰纳米载体表面构建主动靶向制剂常用偶联方法

近年来出现了多种抗体修饰的主动靶向纳米载体,克服了载体本身的局限性.本文综述了目前常用的抗体修饰纳米载体表面的方法,对其进行了概括和分类,主要包括吸附法为主的非共价偶联法,以及采用偶联剂作催化剂进行反应的共价偶联法,并比较了各自的优缺点和适用条件,此外还介绍了常见的几种偶联抗体及相应受体,后展望了主动靶向制剂的应用前景.

儿童药物制剂现状及开发策略分析

当前儿童用药安全信息和儿童专用剂型的缺乏使儿童用药处于危险的状态.本文简介儿童用药缺乏的原因和目前世界儿科药物研发的立法现状,结合己上市儿童制剂的特点和近年儿科制剂的研究热点,分析儿科剂型的开发策略.

口服药物纳米结晶的研究进展

溶解度差己成为难溶性药物成功上市的主要壁垒.纳米结晶技术具有制备简便、载药量高和易放大等优势,可将药物破碎成纳米级,提高药物的饱和溶解度和溶出速率,从而提高药物口服生物利用度.如何获得粒径小、稳定性好的纳米结晶是目前该领域研究的重点与难点.本文将就这两方面的内容进行评述.

非达霉素的分离纯化

开发了高纯度非达霉素的分离纯化工艺.采用中压色谱系统,以聚合物微球为载体,优化了微球类型和洗脱条件.结果显示,选用聚合物微球UniPS 30-300为色谱介质,洗脱剂为75％甲醇(含0.05％乙酸),上样量1.0g/100ml填料,纯化所得产品纯度≥95％,纯化收率≥60％.

Enzastaurin的合成路线图解

Enzastaurin (1),化学名为3-(1-甲基吲哚-3-基)-4-[1-[1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基]吲哚-3-基]吡咯-2,5-二酮(1),是美国礼来公司研发的一种双吲哚马来酰亚胺类抗肿瘤药,目前处于Ⅲ期临床.1能选择性抑制蛋白激酶C-β (PKC-β)[1],1对来源于多药耐药患者体内的多发性骨髓瘤细胞的增殖、存活、迁移,以及生长因子和细胞因子所引发的PKC激活有抑制作用,且对其他多种肿瘤细胞株,例如白血病、结肠癌、中枢神经系统(CNS)癌、黑色素瘤、卵巢癌、前列腺癌和乳腺癌等也有类似的抑制效果[2].目前,1己被欧盟委员会批准为治疗多形性成胶质母细胞瘤(一种脑部肿瘤)的孤儿药.

阿法替尼的合成路线图解

马来酸阿法替尼(afatinib dimaleate),化学名为(2E)-N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[[(3S)-四氢呋喃-3-基]氧基]喹唑啉-6-基]-4-(二甲胺基)-2-丁烯酰胺双马来酸盐,由德国勃林格殷格翰研发,2013年7月获美国FDA批准上市,商品名Gilotrif,剂型为薄膜衣片,有20、30和40 mg 3种规格[1].阿法替尼(1)是一种不可逆的表皮生长因子受体(EGFR)和人表皮生长因子受体2(HER-2)双重酪氨酸激酶抑制剂[2],用于EGFR外显子19缺失和外显子21 (L858R)取代突变的转移性非小细胞肺癌(non-small-cell carcinoma,NSCLC)患者的一线治疗[3].一线治疗EGFR突变阳性的转移性NSCLC的Ⅲ期临床试验LUX-Lung 3表明,在EGFR变异的晚期肺癌患者中,与标准的顺铂加培美曲塞二元化疗法相比,1可延长无进展生存期(PFS)[4].

2007～2014年北京地区第一类精神药品用药数据分析

以北京地区部分第一类精神药品用药数据为依据,分析北京地区第一类精神药品用药品种特点、使用医院分布和用药剂型特点变化.结果显示自2007年以来,北京地区第一类精神药品临床使用以丁丙诺啡类为主,中小型医院的使用量增加,国产品种占临床使用的主导地位.说明北京地区使用第一类精神药物的需求逐步加大,新剂型使用逐渐增加,品种较为单一,管理不断规范,基本符合世卫组织的麻醉及精神类药品合理利用原则,可在杜绝精神类药品滥用的基础上合理使用第一类精神药品.

国际环境下的我国孤儿药产业发展策略研究

目前国际孤儿药市场的日趋繁荣和我国国内市场的停滞不前形成鲜明对比,意味着我国亟需重视和制定相应的孤儿药产业发展策略.本研究运用SWOT分析法对孤儿药产业进行了具体分析,旨在从优势、劣势、机会以及威胁4个方面阐述孤儿药产业发展的现状,在此基础上提出我国的产业发展策略建议.研究认为,我国应从完善孤儿药相关政策法规,促进国内社会对罕见病的全民关注;制定配套激励政策,鼓励孤儿药民间自发组织发展;促进传统中医药与孤儿药融合,实现传统医药、生物医药与孤儿药的协同发展;仿创结合,建立专门的罕见病诊疗机制与社会救助方案等4个方面建立具有中国特色的孤儿药产业发展策略,为我国政府引导孤儿药产业发展提供参考.

Crispr/Cas9技术在CHO细胞中基因敲除的应用

Crispr/Cas9技术是近年发展起来的基因编辑技术,已经在人、动物、植物等各类细胞中得到广泛应用.本文基于文献和本实验室研究成果,介绍了Crispr/Cas9技术在CHO细胞中运用的基本操作方法,以及与重组蛋白表达相关的基因敲除实例,对可能遇到的问题做出了技术解释.笔者认为可利用Crispr/Cas9技术对CHO细胞进行改造以创造出新的工程细胞株,为生物药物开发及生产服务.