一种新的2型糖尿病血管并发症细胞研究模型:葡萄糖、胰岛素、低密度脂蛋白联合诱导血管内皮细胞损伤的研究

目的观察不同浓度的葡萄糖、胰岛素和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对内皮细胞的协同损伤作用,建立一种2型糖尿病血管并发症体外内皮细胞损伤模型.方法采用L9(34)正交设计方法,将生长融合状的血管内皮细胞(ECV-304)随机分为9组,分别施加不同浓度的葡萄糖、胰岛素和ox-LDL条件液,培养24 h后观测细胞活性、细胞一般形态学和超微结构改变以及细胞凋亡情况.结果显微镜下见模型组细胞回缩变圆,轮廓分明,细胞内出现粗糙颗粒样变化;线粒体肿胀,嵴丢失,内质网结构模糊、肿胀,呈小泡状;琼脂糖凝胶电泳可见模型组有明显的细胞凋亡典型的阶梯状区带电泳图谱(DNA Ladder).结论三因素对细胞有协同损伤作用,可以诱导细胞发生凋亡和细胞器结构发生变化,含100 mg/L ox-LDL、20 mmol/L葡萄糖和100 mU/L胰岛素的混合条件培养液对细胞的损伤显著,可作为糖尿病血管并发症体外内皮细胞损伤模型的合适诱导条件液.

低相对分子质量肝素对内毒素诱导的内皮细胞表达vWF:Ag、PAI-1和PS的影响

目的观察低相对分子质量肝素(LMWH)对内毒素(LPS)作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达血管性血友病因子相关抗原(vWF:Ag)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)及蛋白S(PS)的影响.方法常规从脐带分离及培养HUVEC,取第1～3代HUVEC于24孔板进行分组实验.应用酶联免疫吸附法(ELISA)或免疫比浊法测定HUVEC上清液中的vWF:Ag、PAI-1及PS.结果 (1)在LPS刺激下,HUVEC培养上清液中vWF:Ag量较对照组增加(由2.0%增至3.5%),差异有显著性(P＜0.05).不同浓度LMWH(20 u/ml、50 u/ml、100 u/ml)均可抑制LPS对HUVEC表达vWF:Ag的影响,与内毒素组比较,差异有显著性(P＜0.05);(2)在LPS刺激下,HUVEC表达PAI-1的量增加,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05).加入不同浓度的LMWH,可下调LPS对HUVEC表达PAI-1的影响.各剂量组与LPS组比较,差异均有显著性(P＜0.05);(3)以1μg/ml LPS刺激HUVEC,PS表达量下降,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05).同时加入LMWH可上调LPS对HUVEC表达PS的影响,各剂量组与LPS组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论 LPS可上调HUVEC表达vWF:Ag及PAI-1,下调HUVEC表达PS.LMWH能拮抗上述作用.提示:LMWH对LPS诱导的内皮细胞的活化与损伤有保护作用,在重症炎症状态下使用LMWH可能有利于器官功能的恢复和预防DIC.

急性脑梗死患者D二聚体、纤维蛋白原及血小板参数的变化

目的探讨急性脑梗死患者血浆D二聚体(D-D)、纤维蛋白原(Fbg)含量及全血血小板5项参数的变化及其临床意义.方法选自2002年9月至2004年1月在我院神经内科收治的急性脑梗死患者53例.患者在发病后24h内抽肘静脉血抗凝.测定其血浆D-D、Fbg含量及全血血小板数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板比积(PCT)、大血小板比率(P-LCR),并与50例健康对照组进行比较.患者和对照组均未接受任何止血、凝血药物.结果急性脑梗死患者血浆D-D、Fbg含量显著高于对照组(P＜0.01);PLT明显低于对照组(P＜0.01);MPV、PDW、P-LCR显著高于对照组(P＜0.01),PCT两组间无明显差异.结论血浆Fbg含量升高和MPV增大是脑梗死的重要危险因素,观察D-D、Fbg、PLT、MPV、PDW及P-LCR的变化对脑梗死的诊断和病情判断具有重要的指导意义.

藻酸双酯钠对急性脑梗死的抗血小板作用及临床疗效

目的研究藻酸双酯钠治疗急性脑梗死的抗血小板作用及临床疗效.方法将发病半月内的急性脑梗死患者随机分为藻酸双酯钠(PSS)、阿司匹林(ASA)与噻氯匹啶(TP)等3组,观察治疗前后的血小板聚集率(PAgT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(aPTT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(Fbg)、血清脂质的改变,并观察治疗前后临床神经功能状况.结果 (1)PSS对ADP与花生四烯酸(AA)诱导的PAg T均有一定的抑制作用,而ASA对AA诱导的PAg T作用更显著,TP主要抑制ADP诱导的PAg T.(2)PSS延长aPTT,对PT仅3 d时有延长.对TT与Fbg作用不大.ASA、TP对以上指标均无影响.(3)PSS有明显降脂效果,而ASA、TP无此作用.(4)PSS组患者神经功能恢复优于ASA与TP组.结论 PSS具有降脂、抗凝作用,并具有一定的抗血小板作用,能在多个环节上发挥抗血栓作用,有效改善急性脑梗死患者神经功能缺损症状,并提高其日常生活能力.

华法林的Roberts的应用方法抗凝治疗心源性脑梗死

目的研究依年龄调整华法林负荷量法(Roberts用法指南)治疗心源性脑梗死,以期达到快速、安全、稳定和有效的抗凝.方法符合抗凝治疗的心源性脑梗死住院患者,分为4个年龄组,各年龄组华法林的起始量不同,每日服华法林1次,服药后16～17 h复查凝血酶原时间(PT)计算INR.首剂后的头3天,根据当天INR的结果及对应的年龄组决定当天华法林的用量,第4剂的华法林剂量设定为维持量.INR 2.0～3.0为目标.患者入院后给予相对低分子质量肝素(LMWH)皮下注射或肝素(UH)持续静脉注射,当达目标的抗凝强度时,则停用LMWH或UH.结果 33例患者中有11例和17例分别于服第2和第3剂华法林16 h后INR2.0～3.0,第3剂华法林后共有28例(84.8%)INR2.0～3.0,且多数患者1个月内的INR维持稳定.1个月基本痊愈9例,显著进步14例,进步7例,无变化3例,未发现卒中复发者.其中19例服药≥6个月.结论按华法林的Roberts用法指南口服华法林抗凝治疗心源性脑梗死可达到快速和有效抗凝强度,在1个月内基本可维持抗凝的稳定,能有效预防心源性脑梗死的复发.

血友病A家系因子Ⅷ基因内含子重复序列多态性的检测及分析

目的探索一种更简便和更特异的方法,用于血友病A的基因诊断及其家系遗传咨询.方法提取两个血友病A家系中成员外周血DNA,进行因子Ⅷ基因中内含子13(CA)n、内含子22(GT)n和(AG)n二核苷酸重复序列多态性分析.结果通过对内含子13和内含子22的两个STR位点的检测,两个家系均检出携带者.结论凝血因子Ⅷ基因中内含子重复序列是血友病A高多态性遗传标志之一,用于血友病A家系分析有较大的实用价值.

妊娠高血压综合征患者血管内皮细胞损伤指标测定的意义

目的探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者血管内皮细胞的改变及其在妊高征血栓前状态(PTS)中的诊断意义.方法应用ELISA法及发色底物法测定妊高征患者血中血管性血友病因子(vWF)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)活性.结果妊高征患者vWF、tPA、PAI-1较正常非孕组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);与正常晚孕组比较,妊高征及各组患者vWF、PAI-1活性显著增高(P＜0.05或P＜0.01),且病情越重增高越明显;而tPA则无明显改变.中、重度妊高征组血浆vWF与PAI-1水平呈直线正相关关系(r=0.723,P＜0.05;r=0.765,P＜0.05).结论妊高征患者由于内皮细胞功能异常,导致了凝血功能及纤溶抑制功能亢进,因此测定血浆中vWF和PAI-1水平,及时发现血管内皮细胞损伤,对于指导临床诊断及治疗具有重要意义.

难治性特发性血小板减少性紫癜治疗的探讨

目的观察脾动脉栓塞和骁悉(MMF)治疗难治性特发性血小板减少性紫癜(R-ITP)的临床意义.方法 32例R-ITP患者中23例采用介入方法进行大部分脾动脉栓塞术,9例服用骁悉连服3个月,并与环孢霉素A(CsA)治疗34例R-ITP疗效对照.结果脾栓塞术组所有患者血小板都较术前有不同程度上升,12例显效,4例良效,5例进步,2例无效,有效率为69.6%.骁悉组3例显效,2例良效,1例进步,2例无效,有效率为66.7%.CsA组17例显效,8例良效,6例进步,3例无效,有效率为73.5%.3种治疗方法有效率无显著差异.结论脾动脉栓塞、口服骁悉治疗R-ITP的疗效与CsA同样满意,且副作用小,值得临床推广应用.

肺栓塞16例临床分析

目的分析肺栓塞的临床特点及治疗转归,以减少误诊率,提高生存率.方法回顾分析2001年1月～2005年7月收治的16例肺栓塞患者,对其基础疾病、临床表现、辅助检查、治疗与转归,进行多因素回归分析.结果 16例肺栓塞治愈4例,好转9例,无变化2例,死亡1例.结论肺栓塞临床表现多样,不具有特征性.下肢静脉血栓与肺栓塞关系密切.抗凝和溶血栓是目前治疗肺栓塞的主要措施.

D二聚体在急性期下肢深静脉血栓形成中的变化规律

目的探讨D二聚体(D-D)在急性期下肢深静脉血栓形成(DVT)诊治中的变化规律.方法对30例急性期下肢DVT患者,分别于治疗前、治疗后第2 d、第5 d、第10 d、第20 d检测血浆D-D,并取迁延期下肢DVT 20例检测血浆D-D作对照.结果急性期下肢DVT形成的D-D水平明显增高,与迁延期比较差异有显著性(P＜0.001),而且治疗后D-D呈先升高后降低的动态变化.结论检测血浆D-D可作为诊断急性期下肢DVT及溶血栓治疗的可靠指标.

急性脑梗死患者凝血及全血细胞参数的观察

目的探讨急性脑梗死患者的凝血及全血细胞9项参数的变化.方法对180例脑梗死患者和90例健康人进行凝血象及全血细胞参数检测,并进行比较.结果脑梗死患者血浆凝血酶原时间、部分凝血活酶时间、凝血酶时间、平均红细胞体积、平均血红蛋白量、血小板计数显著低于对照组(P＜0.05～0.01).患者组纤维蛋白原、白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白含量、红细胞比容、平均血小板体积、血小板分布宽度显著高于对照组(P＜0.01).结论较高的凝血活性及血细胞参数异常与脑梗死的发生有关.

血管内皮生长因子与心脏血管的新生

心肌梗死(简称心梗)是危及人类健康的世界范围性问题.心梗后残留心肌代偿性肥厚,引起心室重构,进而促使心力衰竭,是造成心肌梗死患者远期死亡率居高不下的主要原因.急性心肌梗死患者的预后与其在心肌梗死后的心脏血运重建及其循环改善密切相关.

获得性血友病

1 获得性血友病的临床表现和实验室诊断步骤获得性血友病(AH)年发病率约为0.2～1.9/百万.Collins等[1]通过临床流行病学调查显示,AH的年发病率为每百万人群1.34;患者平均年龄在60岁以上,男女分布比例大致相同,另一发病高峰见于20～30岁的产后女性.

遗传性抗凝血酶缺乏症研究进展

遗传性抗凝血酶(AT)缺乏症是一种常染色体显性遗传疾病,是静脉血栓栓塞(VTE)的主要遗传性危险因素之一.西方国家报道,遗传性AT缺乏症在人群中的发生率为0.2%～0.5%,在VTE患者中的发生率为1%～8%,在未经选择的血栓患者中占0.5%～1%,在经选择后其发病率为0.4%～4.9%,明显高于遗传性蛋白C、蛋白S缺陷症等.

Idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) is a common hematologic disorder manifested by immunemediated thrombocytopenia. The estimated incidence ranges from 50 ～ 100 per million each year in western countries, roughly divided between adults and children.