临床基因扩增实验室的建立

一、临床基因扩增实验室的现状基因扩增技术作为现代分子生物学检测的先进手段之一,为多种疾病提供了核酸的诊断依据,但部分地区呈现开展基因扩增检验过热现象,造成检验结果和临床意义十分混乱;为加强对临床基因扩增检验的管理,1998年卫生部医政司发文,停止临床出PCR检验报告.

肝纤维化非创伤性指标的综合诊断

近50年来对肝纤维化(LF)的研究有很大进展.过去曾认为LF仅是肝细胞坏死后间质细胞支架塌陷的结果,现在认为主要是HSC激活后形成大量细胞外基质,特别是间质胶原蛋白大量积聚.是人体对肝脏损害后一种修复疤痕反应,以局限病理损害.但其持续过度发展常造成严重肝损害,以至肝硬化(LC)及肝衰竭.LF形成过程中常受基质降解及基质积聚两方面因素制约,受细胞因子调控.早期LF是可逆性的,采用有效抗纤维化治疗,包括消除病因,加速降解过程或诱导星状细胞凋亡,均有可能逆转病程.所以早期诊断LF对慢性肝炎的治疗具有重要意义.肝脏活检病理诊断被视为诊断LF的金标准,但作为常规诊断及观察病情的方法,似不现实.寻找一个有效的非侵入性诊断方法,实属必要.

以肝病为首发症状的小儿肝豆状核变性30例

我院1992年5月～1999年4月收治30例以肝病为首发症状的小儿肝豆状核变性(Wilson disease,WD),误诊为慢性肝炎、肝炎后肝硬化.现总结如下.

慢性乙型肝炎的肝脏微循环变化

我们对慢性乙型肝炎(CHB)患者进行组织学观察肝脏微循环的病理改变.

根治幽门螺杆菌对肝硬化高氨血症的影响

幽门螺杆菌(Helieobacter pylori,HP)由于其尿素酶活性较尿素酶阳性的肠杆菌强好多倍而产生大量氨.本研究旨在了解根除HP对肠菌群得以适当治疗的肝硬化患者高氨血症的影响.

肝细胞癌及慢性肝病的肝脏图象分析、免疫组织化学和原位杂交检测

为探讨HCC发生机理,寻找早期诊断的有效指标和方法,特作以下实验.

血清肝纤维化指标诊断价值的评价

一、资料与方法肝病患者103例,男89例、女13例,年龄21岁～52岁,均采用16号肝脏穿刺针行肝穿活检,肝组织固定于10%甲醛溶液,石蜡包埋,切片行H.E染色和Masson染色,病理医师集中读片,按1995年北京会议制定的"病毒性肝炎防治方案”标准,进行慢性肝炎分级和肝纤维化分期(0至4期),再将0、1期归为无肝纤维化组;2、3期归为肝纤维化组;4期和肝硬化者为肝硬化组.上述患者近期内采血查肝功能和血清肝纤维化指标,血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型胶原(PCⅢ)测定采用放免法,血清脯氨酸肽酶(PLD)测定采用生化法.上述试剂均购自上海海军医学研究所,按试剂盒说明书操作进行.结果输入SPSS9.0软件数据库做统计分析,以肝脏病理诊断为金指标,按临床流行病学有关诊断试验评价方法,分析上述血清指标对肝纤维化诊断价值.

抗血小板衍生生长因子受体β亚单位核酶的体外制备与活性鉴定

] 目的研究针对血小板衍生生长因子(PDGF)受体β亚单位基因的核酶的制备与体外切割活性鉴定. 方法将大鼠PDGF受体β亚单位基因的PCR片段克隆于T载体T7启动子下游,32P标记的体外转录物作为靶RNA;设计并合成针对大鼠PDGF受体β亚单位胞外区的核酶,将核酶基因克隆于自我切割核酶载体P1.5的5′-cis核酶和3′-cis核酶之间,并进行32P标记的转录.核酶与靶RNA按一定比例和条件进行切割反应电泳,放射自显影. 结果核酶制备正确,在适条件下具有切割活性.其Km＝13.20nM,Kcat＝0.28min-1.高切割效率达78.3%. 结论体外制备的核酶具有良好的特异催化切割活性.[

白介素18和胞嘧啶脱氨酶基因对小鼠肝癌的联合基因治疗

目的观察白介素18和胞嘧啶脱氨酶基因对小鼠肝癌MM45T.Li联合基因治疗的效果. 方法将小鼠IL-18基因克隆入pGCEN中,构建成pGCEN/IL-18.包装成逆转录病毒,感染小鼠肝癌细胞MM45T.Li, 制出具有生物活性的MM45T.Li/IL-18瘤苗,灭活后对荷瘤小鼠进行皮下接种.同时利用AdCD/5FC对小鼠肝癌原位注射,进行联合基因治疗. 结果在接受治疗30d后,MM45T.Li对照组肿瘤体积1580～1625mm3,MM45T.Li/IL-18治疗组(366±159)mm3,AdCD/5FC治疗组(438±65)mm3,IL-18和AdCD/5FC联合治疗组体积(15±7)mm3(P＜0.05).MM45T.Li对照组中位生存期50.0～51.5d,MM45T.Li/IL-18治疗组65d,AdCD/5FC治疗组57d,联合治疗组76d,和单独治疗组相比,联合治疗组中位生存期明显延长(P＜0.05).联合基因治疗组肿瘤组织周围有更多CD4+及CD8+淋巴细胞浸润. 结论 IL-18和CD基因的联合治疗组,其疗效要明显好于IL-18或CD基因单独治疗组.进行联合基因治疗,既有效地减少了肿瘤负荷,又充分调动了机体的抗肿瘤免疫,提高了疗效.

携带AFP增强子反义c-fms真核表达载体的构建及其临床意义

目的构建人肝癌细胞中高效特异表达的反义c-fms真核表达载体,观察其对肝癌细胞生物学行为的影响. 方法采用PCR法扩增人c-fms癌基因第571位酪氨酸为中心的DNA片段,将其反向克隆入pcDNA3载体(命名pAS);将扩增的人甲胎蛋白(AFP)增强子核心区克隆入pAS(命名pAEAS).磷酸钙法将空载体pcDNA3及反义真核表达载体pAS、pAEAS分别转导入HepG2肝癌细胞及HeLa宫颈癌细胞,观察细胞生长速度及凋亡. 结果人反义c-fms基因片段及AFP增强子核心区片段,测序结果与Genbank中登录的序列一致.导入反义基因的HepG2肝癌细胞生长速度较对照细胞明显减慢(P＜0.05),pAEAS抑制作用较pAS强(P＜0.05),pcDNA3组、pAS组、pAEAS组HepG2肝癌细胞凋亡率分别为5.25%、14.7%、31.2%(P＜0.01),pAEAS组细胞DNA出现梯状凋亡带.在HeLa宫颈癌细胞中,pAS及pAEAS组生长速度减慢,但二者差异无显著性(P＞0.05),pcDNA3组、pAS组、pAEAS组细胞凋亡率分别为3.99%、8.27%、8.86%(P＜0.05),DNA均未出现梯状凋亡带. 结论携带AFP增强子的人反义c-fms真核表达载体对AFP阳性肝癌细胞生长有选择性抑制作用,可诱导凋亡,是一种新的肝癌基因治疗方法.

聚合白蛋白和胶体32P瘤内注射治疗肝癌的动物实验与临床应用

目的研究单纯注射胶体32P和先注入聚合白蛋白(MAA),再注射胶体32P两种不同给药方法的32P体内分布情况,探讨瘤内注射MAA和胶体32P治疗肝癌的疗效与副作用. 方法在Bal b/c 小鼠右侧胸前皮下接种H22肝癌细胞,10d后长出直径约1cm的肿瘤,将其随机分为2组,第1组只注射胶体32P 1.85MBq;第2组先注入1×105颗粒MAA,再注入胶体32P 1.85MBq,注射后30min、24h、48h、8d和16d分别测定肿瘤组织、外周血液和心、肝、脾、肾、骨髓的放射性;第16天和1个月时对肿瘤组织作病理切片,观察治疗效果.临床上B超引导下将MAA和胶体32P依次瘤内注射治疗肝癌30例,观察治疗前后临床症状、肿块大小、AFP水平、心肝肾功能、外周血象和免疫指标. 结果胶体32P内照射可使肿瘤组织坏死、纤维化.预先注射MAA,MAA可以有效阻止32P的全身扩散,使胶体32P长时间滞留在肿瘤内.临床应用发现该方法可使肿块缩小,平均缩小率53.25%,血清AFP水平下降,临床症状改善,1、2、3年生存率分别为90%、76.67%、43.33%,无心、肝、肾损害和骨髓抑制等副作用. 结论瘤内注射MAA和胶体32P是一种简单、安全、有效的治疗肝癌的新方法.

扶正化瘀方对肝星状细胞分泌血管内皮生长因子的干预

目的探讨扶正化瘀方对肝星状细胞(HSC)分泌血管内皮生长因子(VEGF)的干预以及对自分泌激活途径的影响. 方法大鼠灌以扶正化瘀方,制备含药血清;用含药血清添加法观察扶正化瘀方对活化HSC分泌VEGF的影响;以含药血清活化HSC条件培养液温育原代HSC,观察药物对HSC增殖与I型胶原分泌的作用.结果扶正化瘀方对活化的HSC分泌VEGF的增加有抑制作用;活化的HSC可明显促进静止HSC的增殖与I型胶原的分泌;扶正化瘀方可明显抑制这一促进作用. 结论扶正化瘀方对HSC的自分泌激活途径有抑制作用,抑制活化的HSC分泌VEGF可能是其作用机制之一.

硫代反义寡核苷酸对裸鼠异植瘤HCV 5′NCR基因表达的抑制作用

目的在HCV 5′NCR转基因细胞模型HepG2.9706细胞建立成功的基础上,采用裸鼠异植瘤模型进行HCV特异性硫代反义寡核苷酸(HCV363、HCV279及HCV349)的体内活性评价. 方法将HepG2.9706细胞接种于4～6周龄的雌性BALB/C裸鼠的侧腹皮下,动物随机分组,约1周后,采用腹腔注射途径,开始给药. 结果针对HCV 5′NCR的硫代反义寡核苷酸HCV363、HCV279及HCV349对异植瘤细胞内HCV 5′NCR调控荧光素酶表达具有明显的序列特异性抑制作用,抑制率分别为80.4%、78.6%及47.9%.三个不同浓度的HCV363作用结果表明随着药物浓度的增加,HCV363对荧光素酶基因的表达抑制活性明显增强,大抑制率可达82.7%. 结论该研究提示反义寡核苷酸有可能成为HCV感染治疗的新途径.

以肝脏为靶器官的基因治疗时重组腺病毒引起的急性肝炎

] 目的研究腺病毒为载体的基因治疗时淋巴细胞在肝组织免疫反应中的作用,探讨免疫抑制疗法在腺病毒载体基因治疗中的可行性. 方法取8只恒河猴,经不同路径输入携带大肠杆菌lacZ基因或荧火虫荧光素酶基因luc的重组腺病毒6只.其中4只进行免疫抑制治疗.将含lacZ的质粒DNA注入2只动物作为对照.用免疫组织化学法检测β2-MG、HLA-DR、CD3、CD4、CD8及CD20. 结果腺病毒介导的基因治疗时肝脏的β2-MG、HLA-DR、CD3、CD4及CD8阳性细胞明显增多.腺病毒载体和转基因均与肝损害有关, 表现为一过性, 呈轻、中度无黄疸性肝炎.免疫抑制的动物只要处于免疫抑制状态下就没有肝炎的表现,基因表达的时间延长.质粒介导的基因转导效果差, 无肝损害及免疫反应.所有动物B淋巴细胞抗原CD20始终阴性. 结论腺病毒介导的基因治疗时肝脏的β2-MG、HLA-DR、CD3、CD4及CD8阳性细胞明显增多, 造成轻、中度一过性肝损害.使用免疫抑制药物可避免肝损害的发生并延长基因表达的时间.[

白细胞介素-2对人肝癌细胞侵袭力及转移力的调节作用

目的研究白细胞介素-2(IL-2)对肝癌细胞侵袭力及转移力相关因素的调节作用. 方法用IL-2处理肝癌细胞,采用流式细胞仪分析肝癌细胞表面抗原分子的表达水平,用附壁试验检测肝癌细胞对细胞外基质的亲和力,用细胞聚集试验检测肝癌细胞的聚集能力以研究IL-2对肝癌细胞侵袭力及转移力相关因素的调节作用.结果经高浓度和低浓度IL-2处理后,肝癌细胞表面ICAM-1及HLA-I表达均增加,CD44表达减少,肝癌细胞对细胞外基质的亲和力及肝癌细胞聚集程度均降低. 结论 IL-2可明显增加肝癌细胞ICAM-1及HLA-I的表达,抑制CD44表达,抑制肝癌细胞对细胞外基质的亲和力及肝癌细胞的聚集作用.因此可抑制肝癌细胞的侵袭力和转移力.

人肝细胞癌c-myc基因扩增、MTS1/p16基因变异和HBV感染的研究

] 目的探讨原癌基因c-myc扩增、抑癌基因MTS1/p16变异以及HBV感染在人肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用. 方法应用差异PCR结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染及激光扫描(d-PCR-PAGE-Laser)技术检测c-myc基因扩增,应用PCR结合单链构象多态(SSCP)银染法分析MTS1/p16基因变异,PCR检测HBV DNA. 结果 (1)29例配对肝细胞癌、癌旁组织中c-myc基因扩增阳性率分别为44.83%(13/29)和51.72%(15/29),两者差异无显著性,P＞0.05;但两者均显著高于肝硬化组织c-myc基因扩增的阳性率8.33%(1/12),P＜0.05.(2)只有3例(10.34%,3/29)肝细胞癌中发现MTS1/p16基因纯合性缺失,未发现MTS1/p16基因突变.(3)正常肝脏、肝硬化和肝细胞癌组织中HBV DNA的阳性率分别为14.29%(2/14)、66.67%(8/12)和96.55%(28/29),三者间差异具有高度显著性,P＜0.001,并且HBV DNA的阳性率随肝脏病情的加重而增高(b＝0.3986, P＜0.001).(4)29例肝细胞癌中c-myc基因扩增和HBV DNA存在与否无关(P＜0.01). 结论 (1)c-myc基因扩增和HBV感染与HCC的发生、发展密切相关,HCC中c-myc基因扩增和HBV感染之间无内在相关性.(2)HCC中MTS1/p16基因纯合性缺失和突变的发生频率较低.[

视黄酸影响大鼠肝星状细胞周期素依赖激酶抑制剂的表达

目的研究视黄酸影响培养大鼠肝星状细胞周期素依赖激酶抑制剂的表达. 方法分离、培养正常大鼠肝星状细胞,传代细胞经1ng/ml转化生长因子β1刺激后再以1nmol/ml视黄酸处理,然后采用MTT法、免疫细胞化学法、原位杂交技术并结合图像定量分析观察细胞增殖、α-平滑肌肌动蛋白、视黄酸受体β2及p16、p21与p27等基因的表达情况. 结果视黄酸明显抑制星状细胞增殖(41.50%, P＜0.05)、降低α-平滑肌肌动蛋白水平(55.09%, P＜0.05),并诱导视黄酸受体β2基因的表达.同时,视黄酸增高p16蛋白水平(218.75%, P＜0.05),促进p21蛋白表达;而两组细胞均未能以免疫细胞化学法检出p27.此外,视黄酸对p16、p21与p27 mRNA水平均无影响. 结论视黄酸抑制由转化生长因子β1介导的大鼠肝星状细胞激活与其上调p16、p21基因转录后表达有关.

酒精性肝病的病理诊断标准分级、分期与分类

病理组织学检查在酒精性肝病(ALD)的诊断、分类及预后判定上占有重要地位,是衡量ALD炎症活动度、纤维化程度的金标准,也是进行分类的重要依据.但在诊断ALD前首先需确定患者是否嗜酒者,了解患者的饮酒史,包括饮酒年限、日饮酒量及戒酒史,以保证ALD诊断的准确性.关于嗜酒者的标准我们参考国内外标准,将日饮酒精量超过40g(合50度白酒100ml),连续饮酒5年以上者定为嗜酒者,以此标准检出的136例嗜酒者,经肝穿无一不具ALD改变,包括轻症ALD 41例.说明日饮酒精≥40g已为不安全剂量.

酒精性肝病的诊断与治疗

一、诊断1. 长期大量饮酒史:长期大量饮酒是诊断酒精性肝病(ALD)的必备条件.英国皇家学院建议的男性每周饮酒21单位(210g),女性14单位以上为超量.意大利的前瞻性研究6534例对象中,发生ALD 危险性是每日超过30g酒精,并有时间依赖性升高.日本以每日饮用50g酒精称为习惯饮酒者,每日80g称为大量饮酒者.国内一般也采用这个标准.

酒精性肝病的流行病学

酒精性肝病在我国近年来有逐渐增多的趋势,目前已经成为仅次于病毒性肝炎的第二大肝病病因.我国目前尚缺乏大规模的流行病学调查.

IFN-γ治疗20例慢性乙型肝炎肝纤维化患者肝组织学变化

目的采用重组人IFN-γ治疗20例慢性乙型肝炎肝纤维化患者，通过治疗前后肝组织活检，观察其组织病理学的变化。方法 20例慢性乙型肝炎患者，肝纤维化分期在2～4期。采用重组人IFN-γ肌注，开始3月每日一次，其后6月隔日1次，每次100万U，疗程为9个月。组织病理学观察包括HE染色和天狼红染色。使用肝纤维化半定量计分方案评价治疗前后肝纤维化程度变化。另测治疗前后血清肝纤维化指标，包括血清透明质酸、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原、层粘蛋白等四项指标。结果 20例患者经IFN-γ治疗9月后，其肝纤维化计分由治疗前的11.24±5.34下降为治疗后的8.67±4.16（P＜0.01）；治疗后的炎症计分由治疗前的12.78±5.19下降为治疗后的6.57±2.95（P＜0.01）。结论 IFN-γ能较好改善慢性乙型肝炎肝纤维化患者的肝纤维化程度，证明其有良好的抗肝纤维化治疗效果。

肝硬化时肝细胞胰岛素受体和酪氨酸蛋白激酶表达的定量研究时德仁东传凌陆立丛闻天周燕

目的探索肝硬化时肝组织细胞胰岛素受体(IR)和酪氨酸蛋白激酶(TPK)含量的变化规律. 方法应用图象分析系统对12例血清HBV标志物阳性的肝炎后肝硬化患者肝组织石腊包埋切片对抗胰岛素受体和酪氨酸蛋白激酶抗体免疫组化标记物的定量测定. 结果肝硬化糖耐量试验(GTT)异常组和GTT正常组IR含量分别为(41.44±6.47)AU和(43.36±4.78)AU,较对照组[(48.11±4.42)AU]显著减少(P＜0.01),肝硬化GTT异常组和GTT正常组IR含量无显著性差异(P＞0.05);TPK表达量:肝硬化GTT异常组较GTT正常组显著性减少,分别为(41.31±5.55)AU和(51.16±5.83)AU. 结论肝硬化时肝细胞IR减少;肝硬化时GTT异常与肝细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性减退有关.

HBsAg真核表达重组质粒在EB病毒转化B淋巴母细胞中的表达

目的探讨HBsAg真核表达重组质粒在乙型肝炎患者EB病毒转化B淋巴母细胞中的表达,建立与该患者相同HLA的HBsAg高效表达细胞系,为检测乙型肝炎患者HBsAg特异性CTL反应提供靶细胞. 方法取乙型肝炎患者外周血分离的单个核细胞,经EB病毒转化成永生化的B淋巴母细胞系后,用HBsAg真核表达重组质粒pCI-S、pcDNA3.1-S、pMEP4-S、pLXSN-S分别转染B淋巴母细胞,经Hygromycin B或G418筛选,用ELISA检测抗性细胞培养上清液和细胞裂解液中HBsAg. 结果 4种HBsAg重组质粒转染的EB病毒转化细胞,在转录水平上,可检出乙型肝炎表面抗原mRNA的表达;在蛋白水平上,细胞培养上清液和细胞裂解液均可检出HBsAg. 结论 4种HBsAg真核表达重组质粒可在乙型肝炎患者EB病毒转化B淋巴母细胞中稳定表达,为检测该患者HBsAg特异性CTL反应提供相同HLA的HBsAg高效表达靶细胞系.

全国肝脏疾病学术研讨会纪要

由中华医学会肝病学分会和中华肝脏病杂志编辑委员会联合主办的第三届全国肝脏疾病学术研讨会于2001年5月27至30日在厦门召开,大会收到论文950余篇;来自我国大陆、香港和台湾的945名肝病学专家参加大会,就目前国内外肝病学现状和我国肝病科研临床进展进行了学术研讨.大会特邀全国知名专家分别就病毒性肝炎的发病机理、抗病毒治疗,肝纤维化的诊断、治疗,酒精性肝病、脂肪性肝病及肝癌的早期诊断和非手术治疗等18个专题进行了继续教育讲座.

国产丙型肝炎病毒抗体酶免检测试剂盒的质量评价

我国血站目前在抗HCV检验中,采用二种厂家的试剂进行初、复检,结果发现二次检验差异很大,造成血液的大量报废.为此,受医政司委托卫生部临床检验中心对此问题进行了调查.

乙型病毒性肝炎患者血清中IL-18的检测及意义

1. 材料与方法:急性乙型肝炎12例;慢性乙型肝炎28例,其中轻度9例、中度11例、重度8例;慢性乙型肝炎、肝硬化24例,其中静止期9例、活动期15例;重型肝炎10例.诊断依据1995年全国传染病与寄生虫病学术会议讨论修订的标准.14例正常对照为本院研究生及工作人员.所有研究对象空腹静脉采血3ml,4h内分离血清,置-20℃保存待测.用ELISA法检测IL-18,ALT、PTA、TBIL由本院临床化验室检测.数据处理:两组间比较用成组设计的两样本均数比较的t检验,多组数据间比较用方差分析的q检验,比较两组间相关性用直线相关分析.

肝胃乙醇脱氢酶活性变化与酒精性肝病发生的关系

目的探讨肝、胃乙醇脱氢酶(ADH)活性的变化在酒精性肝病(ALD)不同病理阶段中的作用.方法 Wistar大鼠39只随机分成两组:模型组24只,对照组15只,用乙醇直接灌胃的方法建立大鼠ALD模型;用酶组织细胞化学染色技术,观察ALD不同病理阶段肝、胃ADH活性变化,并用LUZEX-F灰度图像分析仪进行ADH半定量. 结果 ALD不同病理阶段肝ADH活性进行性增加,胃ADH活性进行性下降,两者均与对照组比较差异有显著性(P＜0.05＝. 结论肝、胃ADH活性变化可能在ALD发生发展中起重要作用.

基质金属蛋白酶-2和-9在实验性酒精性肝病中的动态变化及表达

目的动态观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和-9(MMP-9)在大鼠酒精性肝病发生中的变化及表达. 方法用灌胃的方法制备大鼠酒精性肝病的动物模型;应用免疫组织化学技术检测MMP-2及MMP-9在酒精性肝病中变化和表达. 结果酒精性肝病组MMP-2、MMP-9含量明显高于对照组(P＜0.05),并且随造模时间延长其含量进行性增加.免疫组织化学可见MMP-2主要位于血管内皮细胞、窦内皮细胞及肝窦细胞的胞浆.MMP-9主要位于静脉周围的肝细胞及肝窦细胞的胞浆中. 结论在大鼠酒精性肝病发生发展中,MMP-2及MMP-9水平进行性增加.

酒精性肝病诊断标准(草案)

酒精性肝病表现多样,初期通常表现为脂肪肝,进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化.在严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死甚或肝功能衰竭.

关于"病毒性肝炎防治方案”问题解答

酒精性肝病发病机理的研究现状

一、酒精及其代谢产物对肝细胞的毒性作用酒精在肝脏的代谢过程中产生许多有毒性的代谢产物,造成肝脏形态和功能的改变.影响大的有还原型辅酶Ⅰ(NADH)和乙醛.(1)NADH:黄嘌呤(包括次黄嘌呤)的代谢是由黄嘌呤脱氢酶及氧化酶起作用,两酶保持着动态平衡.由于NADH的增加,氧化酶的作用占优势,结果使自由氧产生增加,导致肝细胞的损害,发生高脂血症及脂肪肝等.(2)乙醛:乙醇的代谢产物乙醛可引起细胞内线粒体和微小管的损害,不但引起肝细胞的气球样变,还可造成糖蛋白的糖化发生障碍,从而产生糖蛋白的微小变异(Carbo-hydrate deficent transferrin,CDT,De-Tf),后者成为临床诊断酒精性肝病重要的血清标志物之一[1].乙醛与血清蛋白结合形成乙醛-蛋白加合物,作为一种抗原而发生免疫反应是发生肝损伤的重要因素.采用豚鼠实验提示乙醛-蛋白加合物引起的免疫反应可造成肝炎和肝纤维化,血清中该抗体的测定也可作为诊断酒精性肝病有用的标志物.

抗乙型肝炎病毒分子治疗新策略

乙型肝炎病毒(HBV)复制受到病毒与病毒之间以及病毒与宿主之间复杂的相互作用[1],对病毒成分的物理性破坏、功能的损伤或阻止其相互作用,都可能影响病毒的增殖.根据近年来对HBV包装、逆转录及成熟过程的认识,下面将讨论一些有潜力的抗HBV策略.

高表达HBV转基因小鼠建成

非创伤性诊断指标优势组合对肝纤维化诊断价值的初步研究

目的探讨非创伤性诊断指标的优势组合及其对肝纤维化的诊断价值. 方法以肝活检组织学分级分期为标准,检测200例慢性肝病患者同期血清学指标、免疫学指标、肝纤维化血清标志物及B超、CT、MRI,运用逐步回归方法判别分析获得肝纤维化非创伤性诊断指标的优势组合,并计算其敏感性、特异性及准确率. 结果以S0为无纤维化组,S1+S2+S3+S4为纤维化组,获得指标组合:B超门静脉每分钟血流流量参数、年龄、B超肝右叶大斜径、CT/MRI肝表面波浪状表现、γ-谷氨酰转肽酶(GGT),其诊断敏感性为80.36%,特异性为86.67%,准确率为81.10%;以S1+S2为轻度肝纤维化组,S3+S4为重度肝纤维化组,获得指标组合:透明质酸(HA)、A/G比值、B超脾长径,其诊断敏感性为59.57%,特异性为91.26%,准确率为81.33%;以S1+S2+S3为纤维化组,S4为肝硬化组,获得指标组合:HA、CT/MRI肝内胆管附近小囊状改变情况、B超肝包膜厚度、年龄、症状积分,其诊断敏感性为77.78%,特异性为91.45%,准确率为89.63%. 结论非创伤性诊断指标的优势组合对诊断肝纤维化具有较高的敏感性和特异性,其诊断价值高于单一指标.