β-受体阻滞剂联合5-单硝酸异山梨醇酯预防食管静脉曲张再出血的荟萃分析

食管静脉曲张(EV)破裂出血是门静脉高压严重的并发症之一,首次出血后再出血和病死率明显升高.β受体阻滞剂(BB)广泛用于预防EV出血,但约有1/3的患者不能有效降低门静脉压力,且有较大的不良反应,15％～20％的患者服用BB有禁忌证.

非酒精性脂肪性肝病患者肝组织抵抗素的表达及其意义

抵抗素通过减弱胰岛素信号级联反应中多个环节的作用减弱胰岛素的作用,导致胰岛素抵抗(IR),另外,抵抗素可以通过激活核因子-KB(NF-KB)信号途径促进炎症细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)α等的产生,参与非酒精性肝病(NAFLD)的发生与发展.

甲基化特异性聚合酶链反应技术用于肝细胞肝癌的诊断

甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术检测DNA异常甲基化是一种极好的新方法.

罗格列酮在非酒精性脂肪性肝纤维化中的作用

非酒精性脂肪性肝病的病理过程包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,脂肪性肝纤维化是该疾病进展为肝硬化的重要阶段,肝星状细胞(HSC)激活及表型转化是肝纤维化形成的中心环节.

siRNA沉默巨噬细胞移动抑制因子基因对肝癌细胞血管内皮生长因子表达的影响

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是早发现的炎症因子之一[1].近年来的研究结果显示MIF在多种肿瘤细胞中过表达[3],参与肿瘤的发生及进展.

原发性胆汁性肝硬化患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T淋巴细胞及其免疫功能分析

原发性胆汁性肝硬化(PBC)的发病机制尚不清楚,目前尚无特效治疗方法.天然调节性T淋巴细胞(Tregs)可能在其发病机制中起关键作用,并有可能为其免疫治疗提供新的治疗手段.

可溶性纤维介素蛋白在实验性自身免疫性肝炎组织中的表达

自身免疫性肝炎(AIH)是一种病因不明的慢性肝细胞炎症.纤维介素蛋白(fgl2)可分为跨模型和可溶性.

转化生长因子β1信号肽区单核苷酸多态性与慢性丙型肝炎的相关性

目的 探讨HCV感染者转化生长因子β1(TGF β1)信号肽区密码子25基因多态性与HCV感染的相关性. 方法 采用扩增阻碍突变系统方法,分析106名健康对照者和85例慢性HCV感染者的TGF β1信号肽区密码子25基因多态性. 结果 TGF β1信号肽区密码子25的基因型分布与基因频数在HCV感染组和对照组之间,慢性丙型肝炎组和HCV相关肝硬化组之间的差异均无统计学意义.密码子25基因型分布在ALT正常组和ALT升高组之间的差异无统计学意义,但G基因频数在ALT升高组(G=108)较ALT正常组(G=47)高(P-0.040).密码子25基因型分布在尢病毒血症组(GG=18,CG=5,CC=3)和病毒血症组(GG=55,CG=4)之间的差异有统计学意义(P=0.005),且G等位基因更多出现干病毒血症组(P=0.000).结论 TGF β1信号肽区密码子25G→C突变影响HCV感染肝脏炎性反应,G等位基因与HCV感染病毒血症相关,TGF β1信号肽区密码子25G→C突变可能是影响HCV感染结局的因素之一.

乙型肝炎病毒基因调控的小鼠肝细胞质膜蛋白质变化

目的 通过对转HBV全基因小鼠肝细胞质膜蛋白质组的分析,研究病毒基因对宿主肝细胞质膜蛋白质表达的影响,探讨HBV感染机制. 方法 以HBV转基因C57小鼠和正常鼠肝为材料,通过蔗糖密度梯度离心结合抗体亲和法纯化肝细胞质膜.用Western blot法验证质膜的纯度和转基因鼠肝细胞质膜中HBV外膜蛋白质的表达.对纯化的质膜组分进行差异蛋白质组学分析. 结果 亲和纯化法较密度梯度离心法能进一步富集质膜近3倍,线粒体的污染减少近2倍;HBV外膜蛋白质只在转基因鼠肝细胞质膜中表达.蛋白质双向电泳分离得到500多个蛋白质点,分析得到26个具有2倍以上差异的蛋白质点,准确鉴定出7个蛋白质.结论 获得了好的质膜纯化方法;HBV基因调节了小鼠肝细胞质膜蛋白质的表达,鉴定得到了与HBV病毒感染相关蛋白质,为进一步探讨HBV感染机制打下了基础.

白藜芦醇对大鼠非酒精性脂肪肝的疗效及其机制

目的 观察白藜芦醇对非酒精性脂肪肝的治疗效果,并初步探讨其机制. 方法 Wistar大鼠3组(每组10只):正常对照(NC)组以标准饲料喂养,高脂饲料喂养(HF)组和白藜芦醇治疗(RT)组以高脂饲料喂养,RT组第7周开始加用白藜芦醇治疗(100mg·kg-1·d).在第16周结束实验,以正糖-高胰岛素钳夹术评价大鼠胰岛素抵抗;肝脏石蜡切片HE染色观察病理学改变;Western blot技术检测肝脏内5'-磷酸腺苷活化白激酶(AMPK)的磷酸化水平. 结果 HF组与NC组相比,内脏脂肪和肝指数增高(P<0.05);空腹胰岛素水平增高,葡萄糖输注率下降(t=10.554,P<0.01);光学显微镜下肝脏出现明显脂肪变性;肝组织内AMPK磷酸化水平降低到NC组的45.8%(t=8.384,P<0.01).白藜芦醇干预后,内脏脂肪指数显著下降(P<0.01);空腹胰岛素水平降低,葡萄糖输注率明显增高(t=5.866,P<0.01);光学显微镜下的肝脏脂肪变性得到明显改善;肝组织内的AMPK磷酸化水平提高到NC组的70.2%(t=3.816,P<0.01).结论 白藜芦醇通过AMPK途径可以同时改善胰岛素抵抗和减少肝脏脂质沉积,从而改善脂肪肝.

肝星状细胞收缩的分子信号机制研究进展

shRNA沉默Kir6.2基因表达载体的构建及其对HepG2细胞增殖和侵袭的影响

目的 构建shRNA体内表达载体pGenesil-3-shRNA,研究抑制Kir6.2基因表达对HepG2细胞增殖和侵袭的影响. 方法 以Kir6.2基因为目的 基因,以产生shRNA质粒载体pGenesil-3为表达模板,细胞内转录合成2条shRNA.重组质粒经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切鉴定和测序后,使用Lipofectamine 2000转染HepG2细胞.实验分为SK组(未转染)、SK-HK组(阴性对照),SK-K1(转染干扰序列1)组和SK-K2(转染干扰序列2)组.G418筛选出荧光单克隆进行培养.Westernblot检测Kir6.2蛋白在各组细胞中的表达.MTT法和Transwell系统分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力. 结果 经酶切、测序鉴定,重组质粒符合设计要求.Western blot检测结果显示SK组,SK-HK组、SK-K1组和SK-K2组Kir6.2蛋白质相对表达量分别为0.9349±0.0443,0.9098±0.0195,0.2869±0.0295,0.3256±0.0341;和对照组相比,实验组Kir6.2蛋白减少.MTT法检测SK组、SK-HK组、SK-K1组、SK-K2组细胞的增殖分数分别为0.7523±0.0681,0.7351±0.0589,0.2494±0.0485,0.2261±0.0298,F=0.2401,P=0.000.Transwell实验结果显示,SK组、SK-HK组,SK-K1组、SK-K2组细胞的穿膜数分别为47.0±7.1,40.7±8.0,14.3±5.1,15.0±3.7,F=-30.74,P=0.000.和对照组相比,实验组HepG2细胞增殖和侵袭能力均明显降低.结论 抑制HepG2细胞Kir6.2基因的表达可降低HepG2细胞的增殖和侵袭能力.

人宫颈癌基因小干扰RNA抑制HepG2细胞生长的作用及其机制

目的 利用RNA干扰技术探讨人宫颈癌基因(HCCR)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制. 方法 构建表达HCCR小干扰RNA的真核表达质粒pRIV2-siHCCR,将其转染肝癌细胞株HepG2细胞,定量PCR、Westem blot检测HCCR及其相关基因的表达,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖状态,流式细胞术观察细胞凋亡与细胞周期变化. 结果 成功构建真核表达质粒pRIV2-siHCCR,其表达的HCCR siRNA可有效抑制HepG2细胞内HCCR的表达,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加.Western blot结果显示HCCR小干扰RNA作用HepG2细胞后,细胞内P53蛋白的表达降低,P15蛋白的表达明显升高,而PTEN、P16、P27蛋白水平没有明显改变. 结论 HepG2细胞中HCCR蛋白下调后,细胞增殖受到抑制,凋亡细胞增多,其作用机制可能与蛋白质P53、P15有关.

双萘酰亚胺类化合物诱导SMMC-7721细胞凋亡的研究

目的 观察双萘酰亚胺类化合物(C8)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的作用. 方法 四甲基偶氮唑盐法检测C8对SMMC 7721细胞的抑制情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;Western blot检测Bcl 2蛋白表达量;流式细胞术分析细胞内Bcl 2蛋白量;酶联免疫法检测Caspase9和Caspase 3表达量. 结果 C8抑制SMMC 7721细胞增殖,半数抑制浓度为15 umol/L.C8作用浓度在10,15、20 umol/L时,SMMC 7721细胞的凋亡比例分别为16.8%、29.4%和35.8%,对照组为2.1%,SMMC 7721细胞的凋亡率明显高于对照组,P<0.01.细胞内Bcl-2蛋白表达水平下降.酶联免疫检测结果表明Caspase 9和Caspase 3被活化.结论 C8可诱导人肝癌SMMC 7721细胞的凋亡,为抗肿瘤药物的研究提供新的化合物.

人颗粒溶素对肝癌细胞SMMC-7721凋亡、线粒体跨膜电位及细胞色素C释放的影响

目的 构建携带人颗粒溶素(GLS)的真核表达质粒pBudCE4.1/GLS并研究其表达后对肝癌细胞SMMC-7721凋亡、线粒体跨膜电位与细胞色素C转位的影响. 方法 将RT PCR扩增出的人GLS编码基因克隆入pBudCE4.1载体中构建真核表达质粒pBudCE4.1/GLS并将其转染肝癌细胞株SMMC-7721,用RT-PCR、免疫细胞化学检测GLS的表达;用Hoechst法及电镜检测细胞的凋亡状况;用荧光染料MitocaptureTM检测线粒体跨膜电位,用Western blot法检测细胞色素C从线粒体的释放. 结果 成功构建了携带GLS的真核表达质粒pBudCE4.1/GLS,在转染的肝癌细胞株SMMC-7721中,从转录和翻译水半都检测到了目标基因GLS的表达产物;重组质粒转染SMMC-7721细胞后,细胞核染色质固缩,旱致密浓染的凋亡状态,线粒体膜跨电位下降并伴随有细胞色素C从线粒体至细胞质的释放. 结论携带人GLS的真核表达质粒在肝癌细胞SMMC-7721中表达后有致细胞凋亡作用,引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一.

胆汁淤积性肝病的基础和临床研究现状

胆汁淤积导致肝损害或者肝脏和胆管等损害的情形,临床上并未引起足够的重视,对其认识也不完整,治疗和处理的手段和方法也不够多,并有不少误区.

妊娠期肝内胆汁淤积的临床研究进展

妊娠肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)可导致早产,明显增加围生儿病死率,但其病因及发病机制尚不明确.

肝硬化患者腹水中细菌DNA与相关因素的关系

目的 探讨肝硬化患者腹水中细菌DNA与血浆内毒素、肠通透性、肠道菌群等因素的关系. 方法 选取失代偿期肝硬化伴腹水患者55例,于入院当日或次日抽取腹水行腹水中细菌DNA的提取及PCR扩增,同时行腹水常规、需氧菌及厌氧菌培养检查,于入院次日测定血浆内毒素、肠通透性并进行肠道菌群分析,同时测定血常规、肝肾功能、凝血功能等生物化学指标.30例健康成年人作为正常对照,行除腹水之外的上述检查. 结果 55例肝硬化患者腹水细菌培养均为阴性,其中19例(34.55%)患者腹水中检测到细菌DNA.与细菌DNA阴性组比较,细菌DNA阳性组患者的凝血酶原活动度明显降低(t=-3.184,P=0.002),而肝功能Child-Pugh评分(t=3.224,P=0.002)和腹水白细胞计数(t'=4.088,P=0.001)明显升高.与正常对照组比较,肝硬化患者血浆内毒素水平(t=13.705,P=0.000)、尿中乳果糖/甘露醇(L/M,t'=28.568,P=0.000)和肠道肠杆菌数量(t=2.912,P=0.005)明显升高,而肠道双歧杆菌数量明显减少(t=-3.669,P=0.000).与腹水中细菌DNA相关的指标为肠道肠杆菌数量(P=0.007)和凝血酶原活动度(P=0.011).结论 肝硬化患者发生腹水细菌移位的关键因素是肠腔细菌过度生长,并与肝病的严重程度相关.

胆汁形成与胆汁淤积性疾病发生的机制

胆汁淤积是指在肝细胞水平或胆管水平胆汁生成,分泌或流动障碍[1].肝细胞与胆管细胞膜上存在众多的蛋白质是胆汁形成与分泌的重要转运体,随着对这些转运体的鉴定,以及对影响胆汁酸盐合成、转运的复杂信号网络系统的深入了解,为充分认识胆汁淤积形成的分子机制提供了重要价值[2-3].

肝移植术后肝内胆汁淤积的发生机制及其处理策略

肝移植术后肝内胆汁淤积是术后一种比较常见的临床表现之一.虽然大部分患者的临床症状较轻,但少数随着基础疾病的进一步发展,胆汁淤积逐渐加重,当移植肝受到不可逆损害时,就不得不行再次肝移植.因此,肝移植术后肝内胆汁淤积,特别是其发生机制与相应的处理策略成为了国际肝移植界的研究热点之.

胆汁淤积的诊断

胆汁淤积这一名称首先由Popper和Schaffner在1970年提出,并定义为形态学上胆汁在肝小叶肝细胞、毛细胆管、库普弗细胞内贮积.当今对胆汁淤积的定义是肝细胞内胆汁生成障碍、胆管分泌或胆汁流动受损所引起的结果[1].

妊娠期肝内胆汁淤积的诊断和治疗进展

妊娠期肝内胆汁淤积(ICP)是妊娠期特有的并发症,常发生于妊娠中晚期.临床E以皮肤瘙痒及肝内胆汁淤积的血液学指标异常,以及_I者在产后迅速消失或恢复正常为特征.主要危害是引起早产、羊水胎粪污染、产时胎儿窘迫、胎死官内等,增加围产儿发病率及病死率.

胆汁淤积的治疗

胆汁淤积不是单一的疾病,而是一组临床综合征,且其病因及发病机制十分复杂.因此胆汁淤积的治疗应包括病因及相关并发症的治疗.

肝硬化门静脉高压食管胃静脉曲张出血的防治共识

一、概述门静脉高压症是指由各种原因导致的门静脉系统压力升高所引起的一组临床综合征,其常见病冈为各种原因所致的肝硬化.