高原环境对大鼠桡骨骨折愈合过程中TGF-β1表达的影响

为探讨高原地区骨折愈合过程中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达特点及其对骨折愈合的影响,建立高原大鼠单侧桡骨中段骨折模型,采用免疫组化-图像分析方法检测骨折愈合各阶段TGF-β1的表达.结果表明,在骨折愈合过程中,高原组大鼠TGF-β1的表达量较平原组低,其中3天组和3周组与平原组比较差异有显著性意义(P＜0.01).提示高原环境影响成骨细胞等的增殖、分化,进而影响TGF-β1的表达,并终影响到骨折的愈合.

帕金森病患者前庭功能的改变及意义

为了探讨帕金森病患者前庭功能的改变及意义,作者对54例帕金森病患者和20名健康老人(作为对照)用眼震电图(ENG)仪进行视动系统反应、自发眼震、冷热试验反应、位置试验检查.结果发现,帕金森病患者组前庭功能减退占81.4%,正常老年人组前庭功能减退占30%,两组之间差异有显著性意义(P＜0.01).研究表明,帕金森病平衡障碍与前庭功能减退有一定关系,ENG可提供客观检测.

兔颈总动脉创伤性假性动脉瘤微弹簧圈栓塞治疗研究

在24只兔的右侧颈总动脉制作创伤性假性动脉瘤(TPA).术后3～4周存留的16个TPA随机分为对照组、微弹簧圈(MC)瘤腔栓塞组和MC载瘤动脉栓塞组,给予相应的治疗.栓塞治疗后3个月复查,数字减影血管造影(DSA)见MC瘤腔栓塞组TPA完全闭塞,载瘤动脉通畅,局部解剖发现TPA消失.MC载瘤动脉栓塞组TPA亦消失.对照组均于观察过程中死于TPA破裂出血.统计分析显示两组实验均有显著性意义(P＝0.029).

肝素、鱼精蛋白对血小板膜糖蛋白影响的实验研究

探讨心肺转流(CPB)体外循环期间肝素化与肝素中和对血小板膜糖蛋白GPⅡb-Ⅲa及P-选择素的影响.10名健康供血者的静脉血注入含枸橼酸或肝素的试管中,用流式细胞术检测肝素、鱼精蛋白对血小板分泌标志物P-选择素和凝集标志物活性纤维蛋白原受体GPⅡb-Ⅲa的影响.结果发现,肝素在5～50μg/ml浓度范围内,呈剂量依赖性增加ADP诱发的P-选择素和GPⅡb-Ⅲa的表达(P＜0.05);鱼精蛋白中和肝素,减少GPⅡb-Ⅲa的表达,但不影响肝素引起P-选择素的表达增加.提示肝素、鱼精蛋白对血小板分泌和凝集均有影响.

单胺类递质对神经细胞的影响

研究高浓度单胺类(monoamine,MA)递质对神经细胞的毒性作用.观察不同浓度、不同时间多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)对体外培养神经细胞的毒性,并用琼脂糖凝胶电泳、原位末端标记、流式细胞仪进行细胞凋亡的检测.结果显示,①高浓度MA引起神经细胞凋亡;②给予80、160、320μmol/L DA、NE及320μmol/L 5-HT处理24h后,神经细胞凋亡率明显高于浓度效应对照组(P＜0.05);③给予300μmol/L DA、NE处理12、24、48h后,或300μmol/L 5-HT处理24、48h后,神经细胞的凋亡率明显高于时间效应对照组(P＜0.05).提示高浓度MA对体外培养的神经细胞具有细胞毒性,诱导神经细胞凋亡具有时间及剂量效应.

9-顺维甲酸对肺鳞癌细胞生长、分化及凋亡的作用

为探讨9-顺维甲酸(9-cisRA)对肺鳞癌细胞的生物学作用,应用流式细胞术等对9-cisRA处理前后L78和A2两肺鳞癌细胞株的生长、分化和凋亡等特性进行检测观察.结果显示,9-cisRA对两肺癌细胞株的生长产生明显的抑制作用;应用9-cisRA后,两株细胞分化特征明显;经9-cisRA处理后的两肺鳞癌细胞凋亡率明显高于对照组.研究表明,9-cisRA具有抑制肺鳞癌细胞的生长、诱导其分化和凋亡等生物学作用.

迅速减压对兔肺的损伤作用

为研究迅速减压对兔肺的损伤作用,将30只新西兰白兔分组进行慢减压实验和迅速减压实验,观察动物损伤情况.结果显示,慢减压对肺不造成明显的损伤;迅速减压引起不同程度的肺损伤,减压峰值越大,伤情就越重.研究表明,迅速减压能引起机体肺损伤,主要原因是迅速减压造成一过性胸内压增高,引起肺表面与胸壁碰撞以及肺泡的过度扩张.

肿瘤患者红细胞天然免疫分子CR1密度相关基因组多态性分布变化与年龄的相关性及其意义分析

探讨肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因多态性与年龄变化是否有关.采用PCR方法测定肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因多态性.结果132例肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因高表达率(56.8%)明显低于201例正常人(78.11%),而青年患者(33.3%)比老年患者(61.3%)更为低下;青年肿瘤患者红细胞天然免疫分子CR1密度相关基因缺陷与癌变易感性密切相关.

老年糖代谢异常人群冠心病患病率、发病率及其危险因素的分析

对老年人群冠心病(CHD)患病率和发病率及其相关危险因素进行分析研究.选择1996年5月～1997年6月在本院接受健康查体,年龄60岁以上的无CHD的老年人群作为基线人群,随访至2000年6月.糖尿病(DM)诊断分别按照1985年WHO和1997年美国糖尿病学会(ADA)标准确定.计算基线时CHD患病率,采用人年法计算其发病率,同时还采用Logistic回归分析对4年中新发的CHD危险因素进行分析.基线时按1985年WHO标准,糖耐量低减组(IGT)和DM组的CHD和心肌梗死(MI)患病率均明显高于糖耐量正常组(NGT)(P＜0.05,P＜0.01).基线时无CHD人群875例,老年人群CHD的发病率为34.26/1 000人年,其中IGT和DM组分别为50.42和57.08/1 000人年,明显高于NGT组的27.55/1 000人年(P＜0.05,P＜0.01).Logistic逐步回归分析表明,DM、IGT、高血压(HT)、体重指数(BMI)和年龄与CHD发生明显相关;按ADA诊断标准分类,与CHD发生密切相关的危险因素为年龄、HT和DM,空腹血糖异常(IFG)与CHD的发生无明显关系(P＞0.05).老年人群中按1985年WHO标准诊断的IGT和DM组的CHD患病率和发病率明显高于NGT组,糖代谢异常、高血压、肥胖和增龄与CHD发病密切相关.而按ADA诊断标准,只有糖尿病(DM)的CHD患病率和发病率明显高于NGT组,而与IFG无关.

模拟功能咬合时人颞下颌关节内的应力分布和位移特征

为了认识正中咬合时颞下颌关节(TMJ)内的应力分布和位移特征,作者采用基于小波金字塔分解的方法对人颅颌面CT、MRI医学图像进行融合,以测量和分析颅颌面部各咀嚼肌的三维肌力向量,再借助实验获得的人TMJ各结构的材料性能参数和在活体基础上建立的模拟了关节内接触关系的TMJ三维非线性有限元模型,计算并分析正中咬合时TMJ内各结构的应力和位移.结果显示,正中咬合时关节盘、髁突和关节窝表面应力分布的范围和力值大小差异较大,以髁突受力大,关节窝次之,而关节盘相对较小.正中咬合时关节盘、髁突和关节窝向上、后及内侧移动,以髁突位移大,关节盘次之,关节窝小.研究表明,在临床实践中,系统、合理地计算和分析正中咬合时TMJ内的应力分布和位移特征是切实可行的,结果是满意的.

肾损伤300例临床分析

为探讨肾损伤的诊断与治疗方法,作者对300例肾损伤进行了回顾性分析.其中闭合性损伤274例(91.3%),开放性损伤26例(8.7%);合并伤123例(41%);伴失血性休克56例(18.7%).常规剂量IVU阳性率48.7%,双倍剂量IVU阳性率90.9%,B超阳性率79.3%,CT阳性率95.7%;非手术治愈185例,死亡14例.研究结果表明,B超可作为初步判断肾脏伤情便捷的检查;CT检查准确快速,能正确显示肾脏伤情;治疗主要取决于伤情,保守治疗是重要的治疗方法;手术经腹探查切口利于腹腔脏器探查及伤肾处理;早期处理中及时纠正休克、预防严重并发症的发生极为重要.

气相色谱仪鉴别大肠埃希菌初探

大肠埃希菌感染可引起食物中毒,其中0157:H7菌株感染严重者可引起出血性肠炎,出现溶血尿毒综合征、肾功能衰竭及血小板减少性紫癜,部分病人因肾功能衰竭死亡.

瘤区注射高聚生协同微波凝固治疗肝癌的临床观察

对22例经组织病理学诊断的肝癌志愿者的28个结节行高聚生瘤区注射治疗.其中,肝细胞癌(HCC)19例,转移癌3例,原发癌为胃癌者2例,直肠癌1例;低分化癌9例,中分化癌11例,高分化癌2例.

高原地区带锁髓内钉在股骨干骨折中的应用

患者28例,其中男19例,女9例,年龄18～57岁,平均36.5岁.骨折类型采用AO标准评定:A型10例,B型13例,C型5例.伤后至入院时间为6～72h.

自服浓盐酸致全胃坏死1例

1临床资料患者女性,32岁,因自服浓盐酸20h入院.患者于1天前因家中琐事自行服下300ml浓盐酸,送往当地医院后因技术设备不足仅服食牛奶,未予洗胃.

心房颤动f波振幅和时限的诊断及其价值

研究对象为142例临床诊断明确的房颤病人.男75例,女67例.年龄19～96岁.房颤病程:1年以下者37例(占26.06%);1～5年者48例(占33.80%);5～10年者34例(占23.94%);10年以上者23例(占16.20%).房颤类型:阵发性房颤45例(占31.69%);慢性房颤97例(占68.31%).

反坦克地雷对坦克内绵羊的致伤效应

为了解遭受反坦克地雷袭击时坦克内人员的致伤情况,采用3枚反坦克破甲地雷置于坦克履带下,坦克内布放绵羊,用电雷管引爆地雷,检查动物伤情.结果地雷被引爆后,将车轮炸飞,履带炸断,坦克内12只绵羊有12耳出现轻度损伤,并伴有内脏轻度损伤.提示反坦克地雷袭击坦克后能造成动物听觉器官轻度损伤,强烈震动也可造成动物的损伤.

破甲弹侵彻钢板后防护效果试验

为了解反坦克武器侵彻钢板后,采用钢板和防弹背心两种防护方法的防护效果,用某式坦克所配大口径炮,在100m距离发射大口径破甲弹侵彻180mm厚钢板,钢板后布放绵羊,实验分为钢板遮挡防护组、防弹背心防护组和无防护组.试验后进行有防护和无防护对照,同时观察两种防护效果的差异.结果发现,有防护可以大大减轻受伤几率和受伤程度,且钢板防护效果优于防弹背心.提示作战时坦克内应采取防护措施.

慢性丙型肝炎患者血清脂蛋白水平改变的研究

为观察丙型肝炎病毒(HCV)感染者与健康人血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(apoB)、载脂蛋白C2(apo C2)、载脂蛋白C3(apo C3)、载脂蛋白E(apo E)及脂蛋白(a)[LP(a)]水平的差异,分别取健康人及HCV感染者血清各75份,并对其进行检测.结果发现,HCV感染者血清中的HDL-C、apo B及apo C3的含量均低于健康人(P＜0.05)LDL-C、apo C2的含量亦低于健康人,但无统计学意义(P＞0.05);apo E及LP(a)的含量均高于健康人(P＜0.05).另外,HCVRNA及抗-HCV均阳性的患者血清中的HDL-C、LDL-C、apoB、apo C2、apo C3、apoE及LP(a)的含量与抗-HCV阳性但HCVRNA阴性者比较有差异,但无统计学意义(P＞0.05).

中口径穿甲爆破燃烧弹对坦克内绵羊致伤的试验研究

为了解中口径穿甲爆破燃烧弹对坦克内绵羊的致伤特点,用某型中口径炮发射同样口径穿甲爆破燃烧弹,在100m距离向坦克前甲板射击,试验后检查动物伤情.结果在坦克内的4组共16只动物中有2只即刻死亡,其余14只均受到了不同程度的弹片伤、冲击伤、复合伤,其伤处总数为157处,致伤率达100%.说明反装甲武器侵彻坦克后,致绵羊伤情复杂、严重,死亡率高,加之舱室类兵器机动性强,内部空间小等特点,给救治带来困难.

大口径反坦克武器侵彻坦克后绵羊的致伤特点

观察某型大口径反坦克武器破甲后对绵羊的致伤特点和规律,为战时防护、救治提供依据.将16只绵羊平均分为4组布放在坦克内,用火炮发射破甲弹攻击坦克.在致伤的同时,测量坦克内冲击波超压,致伤后进行病理解剖等检查.结果16只羊有3只即刻死亡,其余13只都受到了不同程度的损伤,其致伤因素主要是破甲后产生的温度极高的金属射流和冲击波.说明大口径破甲弹致动物损伤严重,死亡率高,受伤器官多,致伤因素复杂.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活SV40病毒早期启动子的研究

聚合酶链反应(PCR)扩增丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(一)中,构建HCVNS3基因真核表达载体pcDNA3.1(一)-NS3;以该质粒转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,免疫印迹方法(Western blotting)检测转染细胞中HCV NS3蛋白的瞬时表达;与报告质粒pCAT3-promoter共转染HepG2细胞,用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性.结果显示,质粒pcDNA3.1(一)-NS3在HepG2细胞瞬时表达HCV NS3蛋白,共转染实验中pcDNA3.1(一)-NS3组的CAT表达活性是空质粒对照组的4.6倍.表明构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达出相应蛋白,并能够反式激活SV40病毒早期启动子.本研究为进一步克隆HCV NS3蛋白反式激活的靶基因,为深入阐明HCV NS3蛋白致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供了理论基础.

应用基因表达谱芯片筛选丙型肝炎病毒核心蛋白反式调节基因

应用基因表达谱芯片技术对HCV核心蛋白表达质粒pcDNA3.1(一)-core转染的HepG2细胞和空载体处理的相同细胞差异表达的mRNA进行检测.基因表达谱芯片所检测的1 152条目的基因均为GenBank中登录的基因,HCV核心表达质粒转染的细胞有95条差异表达基因,其中45条基因表达增强,50条基因表达降低.这些核心蛋白反式调节基因与细胞增殖、分化、凋亡、信号转导及免疫调节密切相关.本实验结果为进一步阐明HCV核心蛋白致病(癌)的分子生物学机制提供了理论依据.

应用噬菌体表面展示技术筛选丙型肝炎病毒核心蛋白抗原模拟表位

为筛选丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(core)特异性噬菌体12肽模拟表位,应用噬菌体表面展示技术,以抗-HCV核心蛋白抗原的单克隆抗体作为固相筛选分子,对人工化学合成的噬菌体随机12肽库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,随机挑取50个克隆,经噬菌体酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定,并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验,后对所选克隆进行DNA序列分析,以确定HCV核心抗原的模拟表位.经免疫学鉴定后,从随机筛选的50个克隆中确定10个阳性克隆,进行DNA序列测定,确定氨基酸序列XRQXXPXXXHXX为HCV核心的模拟表位.本实验为开展用HCV模拟表位探索HCV的防治研究创造了条件.

对人体损伤的兵器噪声和冲击波的标准化测量

本文简要介绍了常规兵器发射或弹药爆炸所产生的脉冲噪声与冲击波对人体损伤研究中物理参数测量的有关噪声与冲击波的分界问题,笔者通过对GJB 349.28-90<常规兵器定型试验方法炮口冲击波超压测试>和GJB 2A-96<常规兵器发射或爆炸时脉冲噪声和冲击波对人员听觉器官损伤的安全限值>国家军用标准的制定,提出了常规兵器噪声与冲击波对人体损伤研究中物理参数测量的标准化问题,供同行们参考.

小口径穿甲武器致伤坦克内绵羊的现场试验

为了解小口径反坦克武器对坦克内绵羊的致伤特点,用2种武器在60m距离向坦克前甲板射击,然后检查动物伤情.结果发现,在坦克受到某型高射机枪穿甲燃烧弹攻击后,16只试验动物中有8只受到了不同程度的损伤,而步枪穿甲燃烧弹穿甲后,16只动物中只有1只因弹丸直接击中受伤.以上伤情无燃烧因素.说明高射机枪穿甲燃烧弹所致绵羊受伤率仍很高,而步枪穿甲燃烧弹如果不直接击中动物一般不会造成伤亡.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因的克隆化研究

应用抑制性消减杂交技术构建丙型肝炎病毒非结构蛋白5A(HCV NS5A)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCV NS5A蛋白反式激活相关基因.以HCV NS5A表达质粒pcDNA3.1(一)-NS5A转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(一)为对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.文库扩增后得到121个阳性克隆,经菌落PCR分析,得到115个200～1 000bp的插入片段,对其中的90个片段测序,并进行同源性分析,显示31种已知基因编码蛋白和15种未知功能基因序列,包括一些与细胞周期、细胞凋亡、信号传导及肿瘤发生等细胞生长调节密切相关的蛋白编码基因,可能是NS5A反式激活靶基因.结果提示,成功构建了HCVNS5A反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,该文库的建立为进一步阐明HCV NS5A反式调节的靶基因及致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供了理论依据.

反坦克武器击中坦克时舱室内有害气体测试方法的探讨

为探讨在模拟实战条件下,坦克受到反坦克武器攻击后舱室内有害气体的取样方法和分析方法,用3种武器发射3种弹药攻击坦克,在远距离控制取样设备,取样后在实验室进行坦克舱室内有害气体浓度分析.结果取样成功,坦克被击中后,一氧化碳气体含量有明显的增高,氮氧化物、二氧化硫增高幅度不大,氧含量无明显变化.说明对坦克舱室进行远距离现场控制气体采样是可行的;坦克在受反坦克武器打击后,除弹片和冲击波等致伤因素外,还会造成坦克内乘员一氧化碳中毒.

筛选与克隆丙型肝炎病毒NS5A蛋白结合蛋白的基因

细胞内蛋白-蛋白的结合是丙型肝炎病毒(HCV)与宿主肝细胞相互作用的分子生物学基础.HCV的非结构蛋白5A(NS5A)被认为是一种HCV基因组编码的重要调节蛋白因子,参与HCV的复制、转录和信号传导等过程,但是它在HCV的致病及耐药等方面的作用还存有争议.为了进一步阐明这个多功能蛋白质与宿主蛋白的关系,作者采用酵母双杂交系统3,在酵母细胞融合蛋白表达型人肝cDNA文库中进行筛选,得到35个与NS5A特异性结合的阳性克隆,包括载脂蛋白、线粒体单体型基因、磷脂酸酸性磷酸酶等11种已知功能蛋白质基因和3个未知功能基因.本研究结果为阐明NS5A在HCV致病中的作用提供了重要研究线索.

酵母双杂交技术筛选克隆丙型肝炎病毒NS3结合蛋白基因

为克隆与丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白结合的肝细胞中的蛋白基因,采用酵母双杂交系统Ⅲ技术进行筛选.构建HCVNS3蛋白诱饵酵母质粒,转化酵母AH109后与含文库质粒的酵母Y187进行配合,在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选.选择既能在4重营养缺陷培养基(SD/-Trp-Leu-Ade-His)上生长,又能在涂有X-α-半乳糖(X-α-gal)的四缺培养平皿上生长的蓝色菌落,提取此酵母克隆的质粒,转化大肠杆菌后进行测序,并进行生物信息学分析.分析的结果显示,筛选出19个阳性克隆,包括已知功能基因17个,还有1个克隆的测序结果与GenBank中的1个未知功能序列有44%的同源性,初步证明了此基因与HCV NS3有结合活性.说明成功克隆了HCV NS3蛋白结合蛋白基因,为以后研究此基因在HCV致病机制以及在肝细胞中的生理功能提供了线索.

丙型肝炎病毒NS4A抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定

为探索新型治疗方法,制备抗丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS4A的抗独特型人源单链可变区抗体(抗-Id scFv),采用噬菌体表面展示技术,将抗HCV NS4A单克隆抗体固相包被于Nunc板,应用半合成的人源单链可变区抗体文库技术,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,随机挑选82个克隆,利用酶联免疫吸附法(ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验,对其进行免疫学检测和鉴定,获得与HCV NS4A单克隆抗体结合活性较强的抗-Id scFv阳性克隆,并对HCV NS4A特异性抗-Id scFv的编码基因进行序列测定分析.结果,经过筛选82个克隆中有40株克隆ELISA的吸光度(A450nm)值较高,将这些噬菌体上清与牛血清白蛋白(BSA)进行交叉反应,确定其中有7株交叉反应较弱,结合2次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果,后确定1株阳性克隆.提取质粒,进行DNA序列测定,DNA为789bp.本实验结果提示,用噬菌体抗体库技术能够成功地获得抗HCVNS4A的抗-Id scFv,为开展用抗-Id scFv防治丙型肝炎的研究创造了条件.

丙型肝炎病毒包膜蛋白E2人源单链可变区抗体的筛选与鉴定

采用噬菌体表面展示技术,以重组的HCV结构蛋白E2为固相包被抗原,从半合成的噬菌体单链可变区抗体库中经过3轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,获得抗原特异性和结合活性较强的HCV E2人源单链可变区抗体(ScFv)片段,片段为771bp,阳性克隆,对其进行免疫学检测,并对HCV E2特异性ScFv的编码基因序列进行测定分析.结果筛选得到的HCV E2 ScFv片段(771bp)具有结合HCVE2抗原的生物学活性和特异性.

几种反坦克武器对坦克舱室内环境影响的研究

为了解坦克在受到反坦克武器攻击后舱室内环境的改变,以确定人员的受伤机制和特点,用4种武器发射4种弹药,并用某型反坦克地雷置于坦克履带下引爆,同时测量坦克舱室内冲击波超压、有害气体和温度.结果发现,坦克受攻击后舱室内空气压力明显增高,一氧化碳浓度明显增加;反坦克地雷爆炸后舱室内空气压力增高;上述武器所致舱室内温度变化不明显.提示坦克受反坦克武器攻击后,除弹片因素外,还会造成冲击伤、一氧化碳中毒等.

丙型肝炎病毒核心蛋白抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定

为制备抗丙型肝炎病毒核心蛋白的抗独特型单链可变区抗体(抗-Id scFv),采用噬菌体表面展示技术,将抗-HCV核心蛋白的单克隆抗体固相包被于Nunc板,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,获得可与HCV核心蛋白单克隆抗体结合的抗独特型人源单链可变区抗体的噬菌体集落.随机挑选60个克隆,利用酶联免疫吸附法(ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验,对其进行免疫学检测和鉴定.获得与HCV核心蛋白单克隆抗体结合活性较强的抗-Id scFv阳性克隆,并对HCV核心蛋白特异性抗-Id scFv的编码序列进行测定分析.结果经过5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选,在随机挑选的60个克隆中,有20株克隆ELISA的吸光度(A450nm)值较高,这些噬菌体上清与牛血清白蛋白(BSA)进行交叉反应后,确定了其中有6株交叉反应较弱,结合2次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果,后确定1株阳性克隆,提取质粒,进行DNA序列测定,DNA大小为768 bp.本实验结果提示用噬菌体抗体库技术能够成功地获得抗-HCV核心蛋白的抗-Id scFv,为开展用抗-Id scFv防治慢性丙型肝炎的研究创造了条件.

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3与乙型肝炎病毒 X蛋白协同反式激活作用的研究

构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)的重组表达质粒pcDNA3.1(一)-NS3和表达乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白的重组质粒pcDNA3.1(一)-X,分别瞬时转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,用免疫印记(Western blotting)方法鉴定病毒基因的表达.两个表达质粒分别及同时与报告质粒pCAT3-promoter共转染HepG2细胞,检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达水平,酶的活性反映了表达的肝炎病毒蛋白对SV40病毒早期启动子功能的影响.结果显示,两个重组表达载体pcDNA3.1(一)-NS3及pcDNA3.1(一)-X在HepG2细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白;单独共转染实验中pcDNA3.1(一)-NS3、pcDNA3.1(一)-X组的CAT的表达分别是对照的3.5倍和4.4倍,两种质粒共同转染时酶的表达是对照的8.5倍;表达质粒对CAT酶表达的激活作用呈剂量依赖性.研究表明,HepG2细胞中表达的HCV NS3蛋白和HBV X蛋白均具有反式激活SV40早期启动子的功能,并且两种蛋白的反式激活功能具有协同特性.本实验有助于解释HCV、HBV感染,尤其是共同感染的致病(癌)机制.

内毒素激活血管内皮细胞的机制研究进展

近年来已认识到血管内皮细胞在烧伤脓毒症发展中起着关键作用,而内毒素,即细菌细胞壁上脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是引起脓毒症的主要致病因子.

子宫内膜异位症与粘附分子相关研究进展

子宫内膜异位症(endornetriosis,EMS)是一种常见妇科疾病,其发病率呈上升趋势,发病机制至今尚未明了.发生机制主要有子宫内膜来源学说和体腔上皮化生学说等.

丙型肝炎病毒致病的分子生物学机制

丙型肝炎病毒(HCV)属于黄病毒属,基因组为单股正链RNA,其致病机制与DNA病毒和逆转录病毒截然不同.由于诱导中和抗体的抗原表位恰好位于其包膜抗原E2蛋白的高变区1(HVR1),因而容易逃避机体的免疫监视,形成慢性感染,同时造成发展广谱预防性疫苗的困难.噬菌体表面展示技术和模拟表位的理论和技术,是构建新型蛋白或基因疫苗,克服这一困难的可能途径.HCV基因复制和翻译有关的调节基因序列与肝细胞来源的蛋白质之间相互作用的研究,将有助于阐明HCV调节机制和相对嗜肝特性的分子生物学基础;HCV特异性受体的研究,将有助于阐明HCV感染并进入肝细胞的各个细节;酵母双杂交技术对于HCV结构和非结构蛋白结合的肝细胞蛋白的筛选,以抑制性消减杂交(SSH)技术对HCV蛋白调节的肝细胞靶基因的筛选,将有助于阐明HCV与肝细胞大分子之间相互作用的分子机制.所有这些,将为终揭密HCV感染引起慢性病毒性肝炎、肝纤维化、肝细胞癌、肝脏脂肪变、B细胞淋巴瘤、冷球蛋白血症等的分子生物学机制,并为反义技术、人源化单链可变区抗体为目的基因的细胞内免疫基因治疗和治疗性基因疫苗等抗HCV治疗新型方法的研究奠定了坚实的基础.

对坦克内乘员的受伤特点和早期救治进行研究的意义和途径

在现代高技术局部战争中,坦克等装甲兵器既是主要的突击武器,也是被攻击的重点,因而其乘员的伤亡与救治日益引起人们的重视.针对这一情况,作者从研究需求性、研究的真实性和结果的指导性三个方面论述了"作战兵器密闭舱室内人员受伤特点与救治原则"研究的意义,并从武器部门与医学单位结合的角度指出了研究途径,其中也特别指出军民合作研究的重要性.

2003年上半年计划刊登的部分专题

论成批烧伤伤员的分流

随着社会的发展,工矿、交通等事业也随之发展,人们愈来愈依赖频繁的群体活动.虽然安全防灾作为制度已为各级领导和部门所重视,但由于种种原因,特大火灾所致的群死群伤事故仍时有发生.