现代免疫学杂志
Current Immunology 현대면역학
- 主管单位: 上海市教育委员会
- 主办单位: 上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 影响因子: 0.40
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1001-2478
- 国内刊号: 31-1899/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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PCR-SSP结合测序分析快速筛选HLA-A*0201亚等位基因
建立相对简单经济的检测HLA-A*0201等位基因的方法,以便于从特定人群中快速筛选HLA-A*0201阳性的个体,满足科研的需要.根据第十二届HLA国际联合会提供的标准操作规程和一对HLA-A位点特异性的引物,从外周血中提取基因组DNA,扩增HLA-A基因;再设计两对HLA-A2组特异性引物,采用套式PCR分别扩增HLA-A基因的5'端和3'端,如出现特异条带,则将后两对引物的PCR产物进行测序分析,对照HLA-A2组等位基因的第2和第3外显子序列图,确定是否为HLA-A*02011~02016的6个等位基因.结果:以HLA-A*0201阳性的T2细胞株为阳性对照进行检测,结果完全正确,并设立非HLA-A*0201的A2细胞株RML(HLA-A*0204)及Raii细胞株(非A2组)为对照,同时随机检测30份门诊病人血样,其中7份为HLA-A2阳性,经测序,2例为HLA-A*02011,1例为HLA-A*0211或0235,1例是HLA-A*0206或0221或0241或0244或0251或0254,1例是HLA-A*0205或0214,1例是HLA-A*0234或0235,1例是0250.本方法利用位点特异性引物进行2~3次PCR扩增,结合PCR产物测序便可相对简便经济地检测出HLA-A*0201的全部6个亚等位基因,为快速检测其他特定HLA等位基因提供了经济实用的模式.
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实时定量PCR监测MM患者反应停治疗后微小残留病
探讨应用实时定量PCR方法在检测多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者微小残留病(minimal residual disease,MRD)中的作用.利用SYBR Green I荧光染料,采用实时定量PCR方法,以IgH为标志,对26例MM患者反应停治疗前后的IgH基因重排进行定量分析.结果发现,IgH(immunoglobulin heavy chain)基因重排拷贝数,在反应停治疗完全缓解组、有效组前后分别为(3 028±655、43±24)和(7 467±611、619±271),前后相比两者差异有显著性(P<0.05),无效组(6 153±1 527、6 575±1 227),前后差异无显著性(P>0.05),并与患者骨髓浆细胞比例成正相关(r=0.89,P<0.05).本实验表明,实时定量PCR对IgH基因重排的定量分析,可以监测MM患者体内MRD,作为判断MM治疗疗效的一种检测方法,并对患者的预后判断有指导意义.
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骨形成蛋白-7对人肾小管上皮细胞株HK-2凋亡的影响
研究不同浓度的骨成形蛋白-7(BMP-7)对人近曲小管上皮细胞株HK-2凋亡的影响并初步探讨其可能的机制.应用Hoechst 33258荧光染色、DNA电泳检测凋亡细胞的形态学和生化改变,流式细胞仪定量检测细胞的凋亡率,并观察凋亡特异性蛋白酶Caspase 3活性变化的情况.结果显示,HK-2细胞加人10 ng/ml TGF-β处理24 h后,可明显抑制细胞生长并诱导细胞凋亡,呈现明显的凋亡形态学改变,胞核或核质内可见浓度致密的颗粒状荧光,DNA电泳呈现典型的"梯形条带",而预先加入50 ng/ml、100 ng/ml BMP-7共处理24 h后,可减轻TGF-β对细胞的抑制作用,凋亡细胞亦减少,Caspase 3蛋白酶活性明显下降,细胞凋亡率下降.提示BMP-7对人肾小管上皮细胞凋亡的具有抑制作用,可能是通过抑制Caspase蛋白酶活性而实现的.
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树突状细胞在榄香烯复合瘤苗主动免疫效应中的作用
本实验以HCa-F或L615榄香烯复合瘤苗(H-TCV或L-TCV)、H-TCV溶解物(TH)、短小棒状菌(CP)免疫小鼠,分离制备其脾脏DC,在体外分别用相应瘤细胞溶解物(H或L)和瘤苗溶解物(TH或TL)冲激后,以MTT法检测其诱导同系小鼠脾不粘附细胞增殖的能力.结果表明用榄香烯复合瘤苗或其溶解物免疫DC供鼠和体外冲激DC,可增强其诱导同系小鼠脾不粘附细胞增殖的作用,给DC供鼠注射CP可进一步增强DC的这一作用.
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小鼠胃癌MAGE3抗原H-2Kk限制性抗原肽的筛选
本研究对小鼠胃癌MAGE3抗原H-2Kk限制性的抗原肽进行了筛选.用CTL表位预测的基序法对易与H-2Kk结合的多肽序列进行了预测并人工合成了4个多肽.在体外检测了各多肽刺激H-2Kk型小鼠T细胞增殖和分泌IFN-γ的能力,同时测定了各多肽诱导出的CTL对小鼠前胃癌细胞株MFC细胞的杀伤活性.结果显示,抗原肽MAGE3130-137可有效地刺激特异性T细胞的增殖和分泌细胞因子IFN-γ,其诱导出的CTL细胞对MFC细胞也有较高的杀伤活性.这些实验结果证实抗原肽MAGE313o-137可以作为多肽疫苗来对表达MAGE3抗原的H-2Kk型小鼠胃癌进行免疫治疗.
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SmB/B'抗原表位的表达及其免疫原性研究
为了构建SmB/B'抗原表位的真核表达载体,通过体内、外进行表达并研究其免疫原性,采用异硫氰酸胍一步法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,通过RT-PCR方法克隆了含编码SmB/B'抗原表位的目的DNA,构建了其真核表达质粒pcDNA3-fSmB/B',体外转染HeLa细胞检测其表达及与抗体结合活性.体内采用基因免疫的方法对其免疫原性进行研究.结果:成功构建pcDNA3-f SmB/B'真核表达质粒,Western blot显示其在真核细胞内可有效表达且与抗SmB/B'抗体具有结合活性,经基因免疫实验组小鼠皆产生抗SmB/B'抗体.构建的SmB/B'抗原表位真核表达载体可在体内、外有效表达,且表达的抗原表位具有免疫原性.
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重症肌无力患者抗Ryanodine受体抗体检测及其意义
本实验应用Western blot分析44例伴不同胸腺病理类型重症肌无力(MG)患者血清中Ryanodine受体(RyR)抗体特异性,同时应用ELISA法检测169例伴不同胸腺病理类型MG血清中RyR抗体水平.结果显示在Western blot法分析中,24例伴胸腺瘤重症肌无力(MGT)患者血清中有19例可见到RyR抗体阳性条带,20例非胸腺瘤重症肌无力(NTMG)患者血清中仅1例可见RyR抗体阳性条带,25例非MG个体(NMG)均未见RyR抗体阳性条带.MGT患者血清中RyR抗体阳性条带检出率明显高于NTMG和NMG组(P<0.01).在ELISA法检测中,MGT组患者血清中RyR抗体水平明显高于NTMG组、其他神经系统疾病(OND)组、正常对照(NC)组(P<0.01);59例MGT患者血清中46例RyR抗体阳性,283例NTMG、OND、NC组检测血清中19例RyR抗体阳性,ELISA法检测MGT患者血清中RyR抗体敏感性为78%,特异性为93.3%.结果表明RyR抗体检测是诊断MGT特异性较高的实验室指标,具有重要的临床意义.
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猪到猴异种胸腺修饰对猪心脏移植物存活及与外周血IL-2水平的影响
选用猪-新生猴腹腔心脏异位模型,通过异种胸腺修饰加60Co γ照射途径,来探讨此途径对异种器官移植中T细胞的作用及诱导异种T细胞中枢性耐受的可能性,并进一步研究外周血IL-2水平与排斥反应的关系.结果发现:MLR检测在照射+胸腺注射组接受脾细胞胸腺内注射后第3周,其刺激效应较空白组、照射组下降明显(P<0.01).照射+胸注组存活期较空白组明显延长(P<0.01),照射+胸注组存活期较胸注组和照射组延长(P<0.05).IL-2和IL-10检测的结果表明,各组在排斥时均表现为IL-2水平较移植前显著升高(P<0.001),胸注+照射组和胸注组,受体体内IL-2水平,在移植后早期与移植前比较无显著性差异(P>0.05),与同时期单纯照射和空白组术后比较有显著差异(P<0.01).结果表明:异种胸腺注射可诱导供体特异性的T细胞功能抑制,异种胸腺注射联合照射可有效地延长供心存活时间.IL-2水平与排斥反应的发生关系密切,可以作为监测晚期排斥反应发生的一个重要指标.
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夹心ELISA检测可溶型LAIR-1方法的建立及其应用的研究
为了探讨血清可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体1(sLAIR-1)的水平与疾病的关系,用生物传感器鉴定了3种抗LAIR-1分子胞膜外区mAb识别的表位,并应用2种识别不同LAIR-1表位的mAb首次建立了检测sLAIR-1的夹心ELISA方法,其检测灵敏度达到1.5μg/L.以此方法检测了活化的人PBMC培养上清以及正常人和肾综合征出血热(HFRS)患者血清中sLAIR-1的水平.在经PMA、PHA、LPS和抗CD3 mAb活化的人PBMC细胞培养上清中检测到sLAIR-1.24例正常人血清sLAIR-1的平均水平为(6.2±3.3)μg/L,62例HFRS患者血清sLAIR-1的平均水平为(47.2±35.9)μg/L.证明体内和体外存在天然sLAIR-1.HFRS患者血清sLAIR-1水平明显升高.为进一步研究LAIR-1分子的免疫调节功能及其在临床免疫中的应用提供了新的手段.
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小鼠血浆IL-1β和IL-6水平与脑不对称程度的关系
为研究血浆IL-1β和IL-6水平与脑不对称程度的关系,利用伸爪取食法,记录反映小鼠脑不对称程度的右利分(RPE),生理盐水或细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激4 h后ELISA法检测其血浆中IL-1β和IL-6水平.结果表明:血浆IL-1β水平在正常生理状况下随RPE的升高而呈抛物线样分布,LPS刺激4 h后血浆IL-1β水平随RPE的升高而下降,呈直线负相关分布;IL-6水平在正常生理状况下随RPE的升高而升高,呈直线正相关分布,LPS刺激4 h后则呈直线负相关分布.由于IL-1β和IL-6主要由单核/巨噬细胞分泌,这一结果提示脑不对称小鼠单核/巨噬细胞功能存在差异,脑不对称对免疫功能的影响程度与右利分有关.
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K562细胞转染HLA-B分子对NK细胞杀伤功能的影响
为了研究不同HLA-B分子对NK细胞杀伤活性的影响,我们分别构建pcDNA3-HLA-B*39052、B*2704、B*51022基因真核表达载体;借助脂质体将各质粒转染入K562细胞,经G418筛选,分别获得阳性表达细胞株;并应用LDH法检测转染细胞对不同个体外周血NK细胞杀伤活性的抑制效应.结果显示:与转染了空质粒的对照组相比,外周血NK细胞对K562-B39的杀伤率无明显影响,而对K562-B27,K562-B51的杀伤率降低.当使用针对NK细胞受体KIR3DL1的单抗DX9封闭NK细胞后,此抑制效应大部分消失.提示靶细胞表达HLA-Bw4分子可明显抑制NK细胞的杀伤效应,而表达HLA-Bw6分子对NK细胞杀伤功能无明显影响.
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体外筛选对猪具有免疫刺激活性的CpG ODN
设计并筛选对猪具有佳免疫刺激活性的CpG ODN.文献报道,设计并合成了38条CpG ODN.用猪PBMC体外增殖实验,3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法测定刺激指数,用SPSS软件对数值进行统计学分析;用双抗体夹心ELISA检测PBMC培养上清中的IFN-γ和IL-2的量,来评价CpG ODN对猪的免疫学作用.结果表明,多数CpG ODN能够刺激猪PBMC的增殖,并促进其分泌IFN-γ,但IL-2分泌的量均未显著增加.其中,含有三个GTCGTT基序ODN 2006刺激猪PBMC增殖的作用强,刺激指数达6.2,但仅能诱生低水平的IFN-γ;具有磷酸二酯键/硫代磷酸二酯键混合骨架及3'端poly G尾的ODN D19具有中等程度的促猪PBMC增殖的作用,刺激指数为4.2,但诱导PBMC分泌IFN-γ比阴性对照增加了5倍.ODN D19和ODN 2006对猪具有不同的免疫学效应,这为进一步研究适用于不同病原体的猪用疫苗佐剂提供了实验参考.
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SLE患者淋巴细胞凋亡和p53蛋白表达的相关性研究
研究SLE患者外周血淋巴细胞在体外培养下细胞凋亡和p53蛋白表达与SLE疾病活动相关性.Annexin V联合PI染色定量法及免疫荧光染色法,分析了44例SLE患者和30例正常人外周血淋巴细胞在体外培养后凋亡发生率,凋亡相关基因p53蛋白的表达以及淋巴细胞凋亡发生与疾病活动的相关性.在体外培养作用下,活动期SLE患者淋巴细胞凋亡发生率较正常人显著增高(P<0.01),而静止期则明显升高(P<0.05),疾病活动指数与体外淋巴细胞凋亡率呈正相关(P<0.01).p53蛋白表达在活动期SLE患者较正常人显著性下降(P<0.01),静止期明显降低(P<0.05).p53蛋白的表达与疾病活动指数SLEDAI,抗dsDNA抗体和C3补体之间有明显的相关性(P<0.01).SLE患者外周淋巴细胞在体外培养凋亡率较正常人显著增高,表明SLE存在体内凋亡或凋亡相关性免疫机制失调.
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口腔鳞癌细胞系HLA I类分子异常表达及其机制探讨
为探讨两个口腔鳞癌细胞系(KB和Tca8113)中HLA I类抗原的表达水平及其异常的分子机制.利用流式细胞术、Western blot检测细胞系中HLA I类抗原在蛋白水平的表达;RT-PCR检测细胞系在转录水平的表达.结果两个口腔鳞癌细胞系中HLA I类抗原蛋白水平的表达下调;RT-PCR结果显示Tca8113细胞系中A、B、C、LMP2、LMP7、LMP10基因的mRNA表达下调;在KB细胞系中除了A、B、C、LMP7、LMP10基因的mRNA表达下调,LMP2、PA28α基因的mRNA表达显著减少或缺失;而TAP1、TAP2、Tapssin基因在mRNA水平的表达无改变.IFN-γ诱导后纠正了多个基因在mRNA水平的异常表达.两个口腔鳞癌细胞系中HLA I类抗原表达下调,且多基因在转录水平的异常也即转录效率的低下很可能是该下调的重要原因.
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补肾中药对溴隐亭致流产鼠模型中蜕膜CD56+NK细胞表面CD69和CD94表达的影响
为了观察补肾中药是否能影响蜕膜CD56+NK细胞比例及其表面CD69、CD94的表达,从而进一步阐明补肾中药对母胎界面免疫的影响机制.SD大鼠于孕6~8 d皮下注射溴隐亭0.3 mg/kg@d,建立改良的溴隐亭致SD大鼠流产模型,随机分为三组.A组为模型组;B、C组在孕1~11d分别给予大剂量中药(4.5g/kg@d)、P(8 mg/kg@d),另设正常孕鼠对照(D组).孕12 d处死,取蜕膜组织,分离成单个细胞悬液,用流式细胞分析技术观察4组蜕膜CD56+NK细胞的量及蜕膜NK细胞表面CD69、CD94的表达差异.结果发现:B组(P<0.05)、C、D组(P<0.01)妊娠率与A组相比增加,并且有差异;B、C组蜕膜CD56+NK细胞比例与A组相比明显增加,与D组无差异;各组蜕膜CD56+NK细胞表面CD69表达无差异;B、C、D组CD94的表达与A组相比显著增加;A组蜕膜CD56+NK细胞表达CD69与CD94相比明显增加,B、C组相反.因此,补肾中药能影响蜕膜CD56+NK细胞表面CD69、CD94的表达,可能通过增加CD94的表达,抑制CD69从而进一步抑制NK细胞的活性,起到保胎作用.
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IL-4对DC产生IL-12影响的研究
为了研究白细胞介素4(IL-4)对树突状细胞(dendritic cell,DC)产生白细胞介素12(IL-12)p70的调节作用及其机制,将小鼠骨髓细胞在含GM-CSF和IL-4的培养液中培养6 d,加入成熟诱导剂脂多糖(LPS)或TNF-α、CpG-ODN继续培养2 d以获得成熟DC.流式细胞仪检测DC表面CD80和MHCⅡ类分子,混合淋巴细胞反应检测DC促进同种异体T细胞增殖的能力,ELISA法检测不同诱导剂诱导DC产生IL-12 p70的能力,RT-PCR和荧光定量PCR检测IL-12 p35和p40 mRNA的表达及其变化.结果显示小鼠骨髓细胞在含GM-CSF、IL-4和成熟诱导剂的培养液中培养后可以获得成熟的DC,成熟DC高表达CD80和MHCⅡ类分子,具有较强的刺激同种异体T细胞增殖的能力,LPS、CpG-ODN、TNF-α、PolyI:C在促进DC成熟的同时能诱导DC产生有活性的IL-12,IL-4对IL-12的产生具有明显的促进作用,RT-PCR和荧光定量PCR结果显示LPS诱导IL-12产生以及IL-4对其的促进作用与IL-12p35基因的转录水平增高有关.
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肾素-血管紧张素系统对细胞免疫的调节作用
肾素-血管紧张素系统(RAS)成分在免疫细胞表达,通过旁分泌和自分泌作用调节免疫细胞功能.干预RAS可以调节T淋巴细胞的增生、凋亡,甚至抗原递呈细胞的抗原递呈作用.文章旨在对RAS的细胞免疫调节作用及其机制进行概述.
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四聚体技术的新进展
四聚体技术是一种可直接对抗原特异的T淋巴细胞进行标记的新方法.多种MHC分子和多种来源的多肽分子被用于制备四聚体,研究抗原特异的T细胞在抗病毒感染、自身免疫病和抗肿瘤中的作用.另外,四聚体技术也被用于寻找T细胞表位的研究.
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rIL-2对T细胞CD69、CD137和CD28表达的影响
T细胞的活化是体内特异性免疫应答的重要环节,且T细胞的活化需双信号刺激.起始信号可使T淋巴细胞初步活化,共刺激信号的存在使初步活化的T淋巴细胞进入完全活化状态,发挥免疫效应,本研究用流式细胞仪检测健康人PBMC经rIL-2刺激后对T细胞及其亚群活化和共刺激信号分子表达的影响.
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银屑病血小板表面CD35分子变化分析
现已知红细胞表面分子CD35数量与活性变化在自身免疫性疾病、肿瘤及感染性疾病发病机制中具有重要作用[1],有关血小板膜CD35分子数量在疾病中变化甚少报道[2].
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胃癌患者血清IL-6、IL-8、sIL-2R和TNF-α水平的检测分析
机体免疫功能低下或免疫调节功能紊乱是肿瘤发生、发展的重要因素.文章对58例胃癌患者血清IL-6、IL-8、sIL-2R和TNF-α水平进行检测,探讨其临床意义.
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天然免疫在脊柱关节病发病机制中的作用
天然免疫和获得性免疫是宿主防御过程中不同而又互为补充的两个方面.机体接触致病微生物后即迅速进行识别并产生抵抗病原体入侵的反应.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |