现代免疫学杂志
Current Immunology 현대면역학
- 主管单位： 上海市教育委员会
- 主办单位： 上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 影响因子： 0.40
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-2478
- 国内刊号： 31-1899/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
PFP、GrB的共表达杀伤人喉癌Hep-2细胞的体外研究
为探讨穿孔素(PFP)、颗粒酶B(GrB)共表达对人喉癌(Hep-2)细胞生长的抑制及其诱导该细胞的凋亡作用,采用RT-PCR的方法从人的喉癌组织浸润淋巴细胞中扩增全长PFP、GrB的cDNA片段,构建共表达重组体pVAX1-PIG,并将其转染入人的Hep-2细胞株中.收集转染后的Hep-2细胞,采用软琼脂集落形成实验、MTT法、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞仪(FCM)检测分析各组人Hep-2细胞的生长抑制及其凋亡情况.结果显示pVAX1-PIG转染组的集落形成数目比空白对照组与pVAX1转染组明显减少(P<0.05),MTT检测结果显示对照组细胞生长速度比pVAX1-PIG转染组要快.TUNEL染色、FCM法检测均显示pVAX1-PIG转染组的Hep-2细胞大量凋亡且其凋亡率显著高于对照组(P<0.05).因此,PFP,GrB的共表达能够抑制人Hep-2细胞的生长并且可以诱导该细胞的凋亡.
-
死亡受体5在内毒素诱导人肝细胞凋亡中的作用
探讨内毒素(LPS)在体外直接作用于L()2细胞引起凋亡及可能机制.将LO2细胞常规培养7 h贴壁后,分为对照组、内毒素处理组、抗人DR5单抗mDRA-6处理组及联合组(内毒素+mDRA-6).然后在倒置显微镜下观察LO2细胞形态变化;MTT法检测内毒素对LO2细胞生长的影响;流式细胞术检测LO2细胞表面DR5的表达率;Annexin-V和PI双染法检测细胞凋亡率.结果:经内毒素处理的LO2细胞呈现明显的凋亡形态特征,出现核固缩、染色质边缘化、凋亡小体形成.流式细胞术分析表明:对照组LO2细胞表面DR5的表达率为4.8%,用内毒素(10 mg/L)处理12 h后,DR5表达率上调为37.76%.LO2细胞12 h凋亡率:内毒素处理组、抗人DR5单抗mDRA-6处理组、内毒素联合mDRA-6组细胞凋亡率分别为37.78%(早期凋亡21.65%,晚期凋亡16.13%)、29.58%(早期凋亡18.21%,晚期凋亡11.37%)和65.81%(早期凋亡50.61%,晚期凋亡15.20%)(P<0.05).细胞凋亡率与内毒素的剂量及细胞表面DR5的表达呈相关性.结论:LPS对LO2细胞的杀伤作用主要通过诱导凋亡,细胞表面DR5受体的表达上调可促进这种凋亡作用.
-
早孕期弓形虫感染对大鼠胎盘RT.BMl及RTl-E基因转录的影响
通过检测正常妊娠和早孕期弓形虫感染的Wister大鼠胎盘RT.BMl和RTl-E mRNA的表达水平,发现二者在正常妊娠中的规律,进而探索早孕期弓形虫感染对胎盘RT.BMl和RTl-E mRNA表达的影响,以阐明弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制.将48只孕鼠随机分为感染组和正常组,每组24只.感染组于妊娠第5天腹腔注射1×105个弓形虫强毒株(RH株)速殖子/只,正常组不作任何处理.两组于孕第9、13、15、17天分别处死6只孕鼠,无菌剖腹,观察胎鼠情况,计数死胎及活胎数.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测胎盘RT.BMl和RTl-E mRNA表达水平.结果:①正常组活胎数204只,死胎3只,死胎率1.4%,感染组活胎数133只,死胎27只,死胎率16.9%,死胎率明显高于正常组(P<0.05);②正常组RT.BMl mRNA在孕第9、13、15、17天的相对表达水平为(3.21±1.32)、(4.35±1.29)、(3.96±1.49)、(11.1±2.15),前三个时间点表达水平基本一致(P>0.05),第17天则明显增高(P<0.01);RTl-E mRNA在各时间点相对表达水平为(0.79±0.45)、(2.15±1.03)、(2.13±1.74)、(2.394±1.85),第9天明显低于后三个时间点(P<0.05);③感染组各时间点RT.BMl mRNA相对表达水平为(12.4±2.86)、(11.5±3.67)、(6.89±1.59)、(17.3±3.06),第9、13、15天与正常组相比有显著差异(P<0.01);而RTl-E mRNA分别为(1.834±0.886)、(4.72±1.59)、(4.24±2.26)、(3.83±2.26),第9、13、15天与正常组相比均有显著差异(P<0.01)、(P<0.05)、(P<0.01).结果显示弓形虫感染量合适,动物模型成功建立;RT.BMl和RTl-E mRNA在大鼠胎盘的表达水平与妊娠进展密切相关;大鼠早孕期弓形虫感染可致胎盘局部RT.BMl和RTl-E表达增高,从而打破正常妊娠所需的胎蕊局部免疫平衡状态,可能是早孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子机制之一.
-
哮喘患者外周血DC参与Th2型偏移
体外诱导和扩增树突状细胞(DC)并从形态学、细胞超微结构、特异性表面标志、分泌的细胞因子和混合淋巴细胞反应等五方面予以鉴定并研究其在哮喘中的生物学功能.采用正常人外周血单个核细胞(PBMC)经贴壁去除悬浮细胞,加入细胞因子(IL-4、GM-CSF)培养7 d后,LPS刺激其成熟.通过形态学观察、特异性表面标志、分泌细胞因子IL-12的能力及混合淋巴细胞反应予以鉴定,ELISA法检测DC分泌的细胞因子IL-12以及与自身T细胞反应后,流式细胞术检测T细胞分泌的胞内细胞因子IL-4和IFN-γ水平.结果显示正常人外周血诱导的DC具有典型的树突状突起和超微结构,高表达特异性表面标志物CDla和CD83,分泌细胞因子IL-12以及很强的促进T细胞增殖功能.DC诱导培养第8天,哮喘组DC分泌的IL-12水平低于正常对照组,差异有显著性意义(P<0.01);混合培养第7天,哮喘组IFN-γ水平低于正常对照组(P<0.05),而IL-4和IL-4/IFN-γ比值均高于正常对照组,有显著性差异(P<0.01).因而PBMC经细胞因子的序贯培养,可获得高纯度、功能性的DC,且该DC能通过调节IL-12的分泌在哮喘发病机制中发挥重要作用,为DC在肿瘤免疫、感染免疫、抗移植排斥等方面的研究奠定了基础.
-
非小细胞肺癌患者外周血树突状细胞的数量变化分析
检测不同分期非小细胞肺癌患者外周血树突状细胞(PBDC)的数量差异及术后PBDC的数量变化,并探讨其临床意义.用流式细胞仪检测10名健康人、44例非小细胞肺癌患者PBDC亚群DC1和DC2.与正常健康人群相比,非小细胞肺癌患者外周血DC1/DC2的数量明显减少,并且分期越晚PBDC的数量越少;与术前基线相比,术后1个月时PBDC的数量均出现了一定程度的恢复,进一步检测发现Ia期患者在术后6月时PBDC数量接近正常水平.因此可以认为非小细胞肺癌细胞可导致PBDC数量减少,DC治疗前对肿瘤患者适当地减轻肿瘤负荷有可能提高抗肿瘤疗效.
-
血清乙肝病毒大蛋白在HBeAg阴性和低水平HBV-DNA乙肝患者中的检测意义
为了探讨血清乙肝病毒大蛋白在HBeAg阴性与低水平HBV-DNA乙肝患者中的检测意义.对162例HBV感染者及47名健康对照血清采用酶联免疫吸附试验检测乙肝病毒大蛋白、乙肝病毒前S1抗原、病毒前S2抗原及乙肝病毒标志物;FQ-PCR定量检测HBV-DNA.结果显示:162例HBV感染者血清中,HBV-LP浓度与HBV-DNA拷贝数间具有良好的正相关性(rs=0.64,P<0.001),不同HBV-DNA拷贝数组别间HBV-LP浓度存在差异显著性(P<0.01);HBV-LP与HBV-DNA、HBeAg、HBVpres2、HBVpreS1间均关联显著(P<0.01).HBV-LP与HBV-DNA、HBeAg、HBVpreS2、HBVpreS1间阳性率均存在差异显著性(P<0.05),HBV-LP阳性率为84.57%,较HBV-DNA、HBeAg、HBVpres2、HB-VpreS1均敏感.其中HBeAg阴性组中HBV-LP与HBVpreS1,HBVpreS2、HBV-DNA间阳性率均存在差异显著性(P<0.05),HBV-LP阳性率为76.77%(76/99),较HBV-DNA,HBVpreS2,HBVpreS1均高(P<0.01);DNA阴性组中HBV-LP与HBVpreS2、HBVpreS1、HBeAg间阳性率均存在差异显著性(P<0.05),HBV-LP阳性率为73.33%,较HB-VpreS2、HBVpreS1、HBeAg均高.血清HBV-LP浓度是反映血清HBeAg阴性和低水平DNA的HBV感染者体内病毒复制、疾病进程、疗效与预后判断的新的敏感监测指标.
-
Toll 样受体7及Ⅰ型干扰素通路在系统性红斑狼疮中的作用研究
探讨Toll样受体7(TLR7)及Ⅰ型干扰素(IFN-α)通路在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用.采用实时荧光定量PCR方法检测42例SLE患者和34例正常人外周血TLR7mRNA以及4个干扰素调节基因mRNA的表达水平,同时观察TLR7mRNA的表达量与SLE疾病活动相关指标和干扰素积分(IFN score)的关系.结果,SLE患者外周血TLR7mRNA的表达水平显著增高;TLR7mRNA的表达水平与SLEDAI积分,肾脏损伤指数、抗双链DNA(dsDNA)抗体、抗RNA相关抗体水平及干扰素积分呈正相关;与补体C3、C4、白细胞数呈负相关.TLR7-IFN-α通路可能参与了SLE的病理过程.
-
Toll样受体4在多发性骨髓瘤患者外周血白细胞的表达及临床意义初探
为了探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在外周血白细胞上的表达及其在多发性骨髓瘤中的意义.采用流式细胞术检测50例多发性骨髓瘤患者及35名健康对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上TLR4的表达.结果TLR4在患者外周血淋巴细胞和中性粒细胞中的表达率较低;单核细胞TLR4阳性表达率在多发性骨髓瘤患者组为(24.71%±7.83%),显著低于健康对照组阳性率(43.14%±15.20%),差异有统计学意义(P<0.01),而TLR4在各型多发性骨髓瘤患者组的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05).TLR4主要表达于外周血单核细胞,在多发性骨髓瘤患者中其阳性率降低,而且TLR4的阳性率高低与多发性骨髓瘤分型无关.表明TLR4及其介导的天然免疫应答与多发性骨髓瘤的发病存在一定的相关性.
-
人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建
人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建.以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD2基因启动子不同长度的4段序列,利用特定的限制性内切酶位点,以切除启动子的pEGFP-N3作为框架结构,将这4个序列片段进行酶切并插入表达载体pEGFP-N3中,用Vsp I和Pst I双酶切和PCR鉴定重组质粒,再将重组质粒进行DNA序列分析.构建的重组质粒经脂质体LipofectamineTM2000介导转染HTK293T细胞,转染24 h后加入TNF-α持续刺激细胞24 h或不加TNF-α刺激,在倒置荧光显微镜下观察其能否在N()D2基因启动子的调控下表达报告基因绿色荧光蛋白(green fluore～cent proteins,GFP).结果:pEGFP-N3-NOD2(617 bp)、pEGFP-N3-NOD2(747 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 136 bp)、pEG-Fp-N3-NOD2(1 387 bp)分别经酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,构建的4段重组质粒pEGFP-N3-NOD2(617 bp)、pEGFP-N3-NOD2(747 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 136 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 387 bp)转染的HTK293T均能表达绿色荧光,其中构建pEGFP-N3-NOD2(1 387 bp)重组质粒经TNF-α持续刺后激绿色荧光表达强.4段不同长度的人NOD2基因启动子绿色荧光蛋白表达载体成功构建,这为进一步研究NOD2基因表达及调控机制奠定了良好的基础.
-
M1和M2型巨噬细胞表型的比较分析
通过对M1和M2型巨噬细胞表型相关指标的比较分析,评价各鉴定巨噬细胞类型的表型指标及其意义.按常规方法以IFN-γ及LPS将骨髓来源巨噬细胞诱导成M1型巨噬细胞,以IL-4诱导出M2型巨噬细胞.分别以RT-PCR和酶活性定量方法检测精氨酸代谢相关酶的表达和活性;以ELISA检测IL-12和IL-10的分泌;以FACS检测巨噬细胞膜分子的表达.结果显示:M1型巨噬细胞诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达和活性水平较未刺激组明显升高,IL-12产生显著增加,CD16/32表达上调;而M2型巨噬细胞Ⅰ型精氨酸酶(arginase 1,Arg-1)的表达水平和酶活性较未刺激巨噬细胞显著提高,IL-10分泌轻度增加.并且表达高水平的CD206和DECTIN-1.表型比较分析结果表明,iN-OS表达和活性、IL-12的分泌和膜蛋白CD16/32可用于鉴定M1型巨噬细胞,而Arg-1、CD206和DECTIN-1是鉴定M2型巨噬细胞较为理想的表型指标.
-
天花粉蛋白合成肽通过诱导CD8抑制性T细胞治疗实验性自身反应性脑脊髓炎
为了探讨天花粉蛋白合成肽(M-Tk)治疗实验性自身反应性脑脊髓炎(EAE)的可能性及其作用机制,应用自身抗原MBP衍生肽MOG35-55免疫C57BL/6小鼠成功地诱发EAE后,以流式细胞术测定小鼠淋巴结细胞及脾细胞T亚群及细胞因子的表达,并通过临床评分观察M-Tk治疗EAE的有效性,包括以HE和LFB染色观察髓鞘病变.结果发现,M-Tk可抑制MOG35-55特异性T细胞的增殖反应,选择性诱导CD8+CD28-T调节细胞的扩增,明显提高IL-10的分泌和降低IFN-γ的产生,并有效改善EAE小鼠神经功能评分.采用M-Tk诱导的CD8 T细胞作体内输注可取得相似甚至更好的治疗效果(P>0.01).提示M-Tk在体内诱导产生CD8+CD28-抑制性T细胞并上调IL-10分泌降低IFN-γ产生,是对EAE取得疗效的关键.
-
应用蛋白磷酸化流式细胞分析技术研究STAT在SLE患者PBMC中的活化
应用蛋白磷酸化流式细胞分析技术研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)STAT的活化,探讨SLE患者是否存在胞内信号传递网络的异常.采用蛋白磷酸化流式细胞分析技术测定28例SLE患者PBMC基础水平以及多种细胞囚子刺激后胞内pSTAT1、pSTAT3、pSTAT5的水平,以18例正常人为对照.结果:基础水平,SLE患者T淋巴细胞pSTAT5表达百分率显著高于正常对照组(P<0.01);SLE患者T淋巴细胞可能存在STAT5的持续活化;SLE患者对IL-6、IL-10反应异常.SLE患者存在胞内信号蛋白STAT的活化异常,并具有一定的特征性.
-
湖南汉族人群MICA基因多态性分析
为了解湖南地区汉族人群MICA基因第2、3和4外显子多态性分布特点,采用PCR-SSP方法对162名无亲缘关系湖南汉族人群MICA等位基因进行分析.结果显示:在湖南汉族人群中共检测出12个等位基因和28种基因型,各等位基因分布频率有差异,其中以MICA·00801基因频率高(37.9%),其次为MICA·00201/020(20.1%)和MICA·010(17.3%),频率低的是MICA·019和MICA·031.将MICA基因在湖南汉族人群中的分布与该基因在其他人群中的分布进行比较,显示MICA基因的分布在不同人群之间存在差异,可作为中国人群的遗传标志.
-
S1P1受体ERY保守基序突变对FTY720诱导其内化的影响
1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)是淋巴细胞表面的重要受体.为研究S1P1中ERY保守基序与FTY720诱导其内化的关系.以HA-S1P1-Myc-EGFP-N1为模板,应用重叠PCR的方法,将S1P1第142位的Arg(R)突变为Asn(N),连同N端HA标签一起,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体.同时PCR扩增野生型S1P1,克隆人pcDNA3·1(+)中.限制性酶切消化、PCR和测序鉴定后,经Polyfect转染入HEK293细胞.G418筛选出稳定细胞株.100 nmol/LFTY720处理12 h后,抗HA-PE抗体染色,用流式细胞仪检测S1P1在HEK293细胞上的表达情况.结果显示HA-S1P1(WT)-pcDNA3.1(+)和HA-S1P1(R142N)-pcDNA3.1(+)载体被成功构建,HA-S1P1(WT)和HA-S1P1(R142N)蛋白表达在HEK293稳定细胞株的表面.FTY720能诱导HA-S1P1(WT)内化,但不能诱导HA-S1P1(R142N)内化.提示FTY720诱导S1P1内化与ERY保守基序有关.
-
表达TSHR-A亚单位的腺病毒免疫BALB/c雌性小鼠建立甲亢模型
应用表达TSHR-A亚单位的重组腺病毒免疫BALB/c小鼠建立甲亢模型.分别用1010和108病毒颗粒/50μl PBS的腺病毒免疫6～8周雌性BALB/c小鼠,在完成3次免疫后通过检测血清T4、TRAb水平,甲状腺体积及甲状腺病理来鉴定动物模型.在所有接受免疫的小鼠中.甲亢的发生率为75%,表现为血清T4、TRAb增高,甲状腺体积增大,甲状腺病理表现符合甲亢.低免疫剂量组和高免疫剂量组小鼠血清T4较对照组均显著增高,两组间无显著性差异;低免疫剂量组和高免疫剂量组小鼠血清TRAb水平均显著高于对照组,前者血清TRAb水平低于后者.该模型具有成模率高,稳定性好的特点.低免疫剂量建立的动物模型更符合GD特点.
-
小鼠骨髓瘤细胞分泌的免疫球蛋白对其自身增殖作用的体外研究
为了研究小鼠骨髓瘤细胞系P3X63Ag8所分泌的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)对其自身增殖的影响,首先用ELISA方法检测P3X63Ag8细胞培养上清中的Ig含量;而后以不同浓度的P3X63Ag8细胞培养上清作用于P3X63Ag8细胞.通过3H-TdR掺入和MTT比色法检测细胞增殖水平,并比较P3X63Ag8细胞与其他肿瘤细胞对该培养上清的反应性;后以抗小鼠IgG抗体中和P3X63Ag8细胞分泌的Ig,观察其对细胞增殖的影响.结果显示,P3X63Ag8细胞分泌小鼠IgG;不同浓度的P3X63Ag8细胞培养上清均可促进细胞增殖,并具有一定的剂量依赖性;与P3X63Ag8细胞不同,小鼠乳腺癌细胞系4Y1的增殖不受P3X63Ag8细胞培养上清的影响;以抗小鼠IgG抗体中和P3X63Ag8细胞分泌的Ig,司部分抑制P3X63Ag8细胞增殖.该结果表明,小鼠骨髓瘤细胞分泌的Ig可能具有促进骨髓瘤细胞增殖的能力,这为我们更加深入理解多发性骨髓瘤的发病机制提供了一定的实验依据.
-
细胞因子对破骨细胞生物学功能的调控作用
破骨细胞(osteoclast,OC)是一种多核巨细胞,主要来源于骨髓造血干细胞的单核巨噬细胞谱系.在促进OC生成的细胞因子、激素、PGE2等的作用下,脾细胞、人外周血单核细胞、骨髓细胞被诱导成OC.OC是维持骨代谢平衡和稳定的一种重要的细胞;其分化,产生及活性增加参与骨质破坏有关的疾病如骨质疏松、类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)、牙周病和Paget病.在这些疾病中均存在细胞因子的改变;这些细胞因子对破骨细胞分化的调控作用是这些疾病发生发展的关键.
-
一种Th1-like调节性T细胞新亚群
本文描述了一种独特的调节性T细胞亚群--Th1-like调节性T细胞,这类细胞是卵清蛋白特异性的调节性T细胞,经CD8α+DC诱导产生,其表达的表面标志与Thl细胞和调节性T细胞均有相似之处,既表达Th1细胞的特异性标志T-bet,又表达调节性T细胞的特异性标志Foxp3.Th1-like调节性T细胞分泌IL-10、IFN-γ等细胞因子,这些细胞因子在免疫抑制与平衡中发挥蕈要作用.Th1-like调节性T细胞主要作用于呼吸道,对气道超反应呈现显著抑制作用.
-
miRNA在免疫系统中的研究进展
microRNA(miRNA)是一类长度约21～25碱基的非编码蛋白质的单链小分子RNA,广泛存在于多细胞生物和病毒体内,主要通过核酸序列互补匹配结合到特定的靶mRNA上,抑制靶mRNA翻译过程或降解靶mRNA,是一种起负调控作用的分子.目前越来越多的研究显示,miRNA广泛参与了生物体多种生理过程,且相关研究报道也表明其表达及功能失调可能导致肿瘤发生、白血病以及病毒感染等多种病理现象.本文主要阐述目前在免疫系统中对miRNA研究的一些进展情况.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
