现代免疫学杂志
Current Immunology 현대면역학
- 主管单位: 上海市教育委员会
- 主办单位: 上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 影响因子: 0.40
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1001-2478
- 国内刊号: 31-1899/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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CCL20对HBV基因疫苗的免疫增强作用
CCL20为CC家族的趋化因子,对未成熟DC和T细胞具有较强的正向趋化作用.HBsAg是乙肝病毒中具有保护作用的结构抗原.以HBsAg为目的抗原进行基因免疫可诱导HBV特异性免疫应答.为进一步增强基因疫苗的免疫效果,研究中,应用基因重组技术,构建CCL20和HBsAg的真核表达载体,将重组体用肌肉注射方式免疫C57BL/6小鼠,通过ELISA方法检测C57BL/6小鼠的抗-HBs抗体水平、淋巴细胞增殖试验检测抗原特异性Th活性、FACS检测CTL效应.结果显示,用CCL20/HBsAg真核表达质粒共注射免疫后,100%小鼠能在第4、6周检测到抗-HBs抗体,CCL20可显著增强HBsAg基因疫苗诱导的体液免疫应答;Th活性和CTL效应检测也显示,CCL20增强了HBsAg诱导的特异性细胞免疫反应.这将为新型乙肝疫苗的分子设计和研制提供新的理论与实践依据.
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伤寒沙门菌质粒pRST98与树突状细胞在免疫反应中关系的研究
研究伤寒沙门菌质粒pRST98在沙门菌致病中的作用机制.将伤寒沙门菌质粒pRST98导入鼠伤寒沙门菌低毒株RIA形成接合子pRST98/RIA,经腹腔感染小鼠,检测脾脏DC的数量及其表面分子CD80和CD86的表达,比较细菌刺激DC成熟的能力;将接合子的热灭活抗原与其致敏的DC共培养,检测IFN-γ和IL-10水平,评价spv活化DC分泌细胞因子的能力;将接合子致敏的DC分别与初始型CD4+和CD8+T细胞进行混合淋巴细胞反应,检测DC刺激初始型T细胞活化增殖的能力.实验结果表明,pRST98/RIA接合子感染组小鼠脾脏DC的数量及其表面分子的表达均高于对照组(P<0.05),DC分泌的细胞因子水平与对照组无显著性差异(P>0.05),但其刺激初始型T细胞增殖的能力则明显增强(P<0.05).说明携带pRST98质粒的沙门菌感染能增强DC介导的特异性免疫应答.
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tPA信号肽和鼠疫杆菌保护性抗原V融合基因的构建及免疫效果鉴定
获得含有鼠疫杆菌V抗原编码基因以及tPA信号肽编码序列的重组质粒,并测定其诱导特异性免疫应答的能力.采用PCR扩增鼠疫菌杆菌V基因构建到pVAX1质粒中产生pVAX1/V重组质粒,PCR扩增tPA信号肽编码序列片段并将其插入到pVAX1/V中V基因的上游,构建tPA-pVAX1/V重组质粒;转染COS-7细胞,免疫细胞化学方法鉴定V蛋白的表达;二重组质粒分别加mGM-CSF质粒免疫BALB/c小鼠,观察免疫应答反应;以400个LD50强毒鼠疫杆菌皮下攻击免疫小鼠观察保护效率.结果显示,tPA-pVAX1/V在COS-7细胞中表达了V蛋白;免疫小鼠血清产生了特异性抗体和细胞免疫应答;攻毒保护率达80%.成功构建了分泌型V蛋白的真核表达质粒载体,具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力,对强毒鼠疫杆菌攻毒有一定的保护效力,为鼠疫杆菌新型疫苗研制奠定了基础.
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TLR4在HSP70EC-TCV冲激的DC成熟过程中的作用
观察TLR4在Hca-F榄香烯复合瘤苗来源的HSP70(HSP70EC-TCV)冲激处理的小鼠骨髓来源的DC成熟过程中的作用.用rmGM-CSF和rmIL-4诱导小鼠骨髓来源的DC,以HSP70EC-TCV或加入抗TLR4抗体30 min后再用HSP70EC-TCV冲激处理DC,流式细胞仪检测DC的CD40和CD86表达,ELISA法检测DC上清中IL-12和T细胞上清中IL-2浓度,MTT法检测T细胞对Hca-F细胞的杀伤率.结果表明,抗TLR4抗体对DC的CD40和CD86表达无明显影响,但对HSP70EC-TCV诱导DC分泌IL-12和进而致敏的T细胞分泌IL-2及产生杀瘤功能有明显的抑制作用.TLR4信号通路参与HSP70EC-TCV诱导DC成熟过程.
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结核杆菌抗原激活MEK-ERK信号通路延迟中性粒细胞自发性凋亡的作用
探讨结核杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发性凋亡的影响.取健康成人外周血分离中性粒细胞,加Mtb-Ag培养24 h,或用Mek抑制剂PD98059预处理30 min,Annexin V染色流式细胞术观察细胞凋亡;并用Western blot印迹法检测Mek活化情况.与中性粒细胞体外培养24 h后自发凋亡(55%±6%)相比,加入Mtb-Ag(1.125 mg/ml)后,中性粒细胞凋亡率(31%±3%)明显降低;并且Mtb-Ag可诱导Mek的激活;而PD98059(50μmol/L)预处理可阻断Mtb-Ag的抑制凋亡作用.Mtb-Ag对中性粒细胞自发凋亡有抑制作用,这一作用涉及Mek Erk途径.
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趋化因子 SDF-1α及其受体介导涎腺腺样囊性癌细胞的趋化与侵袭
探讨趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4对涎腺腺样囊性癌细胞趋化与侵袭活性的促进作用.采用RT-PCR法检测涎腺腺样囊性癌肺高、低转移细胞株ACC M和ACC-2中CXCR4 mRNA的表达;Boyden趋化小室法检测在SDF-1α作用下ACC-M细胞和ACC-2细胞的趋化与侵袭活性;检测CXCR4 mAb对ACC-M细胞和ACC-2细胞趋化活性和侵袭活性的抑制作用.结果显示:2株涎腺腺样囊性癌细胞中均存在不同程度CXCR4 mRNA的表达,其在肺高转移细胞株ACC-M中的表达显著高于肺低转移细胞株ACC-2;SDF-1α对2种细胞均具有趋化活性和侵袭活性,且对ACC-M细胞的趋化活性和侵袭活性显著强于ACC-2细胞;CXCR4 mAb能够抑制涎腺腺样囊性癌细胞的这种趋化活性和侵袭活性.趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4能够介导涎腺腺样囊性癌细胞的趋化与侵袭.
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天花粉蛋白及其肽段诱导的免疫抑制依赖APC表面Notch配体的表达
新近发现,Notch信号途径参与调节外周成熟T细胞及其亚群的分化和功能发挥.本研究应用天花粉蛋白及其衍生肽处理骨髓来源的小鼠树突状细胞(DC),检测Notch配体家族分子的表达及DC对CD8+T细胞分泌细胞因子的影响.结果表明,天花粉蛋白或其衍生肽PB处理DC可使Notch配体Jagged1、Delta1分子表达明显增加,并改变CD8+T细胞细胞因子分泌格局,明显抑制Th1相关细胞因子IFN-γ的分泌,而Th2相关细胞因子IL-4和IL-10分泌明显增加.Notch信号的阻断剂可以部分逆转Tk及肽段的抑制作用.表明天花粉蛋白及其衍生肽可诱导一群具有抑制能力的CD8+T细胞,该作用依赖于DC表面Notch配体的表达.
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抗弓形虫P30单克隆抗体的制备及其抗虫作用观察
制备抗弓形虫天然P30、重组P30的单克隆抗体(mAb),并研究它们对虫体的影响,为弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定奠定基础.采用弓形虫天然P30、重组P30及全虫抗原(对照)分别免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选稳定分泌高滴度mAb的杂交瘤细胞株.用ELISA法测定mAb亚类和效价;通过SDS PAGE和West-ern blot进行特异性鉴定;Giemsa染色观察杂交瘤细胞的染色体数目;利用扫描电镜及间接荧光抗体试验(IFAT)观察mAb对弓形虫的杀伤作用及其靶抗原定位.结果表明,筛选出2株(2B3、1H6)特异性较好、能稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株.Western blot结果显示,2B3、1H6产生的mAb与弓形虫全抗原的阳性反应带均在30 000 Mr处;mAb亚类均属IgM,其效价(ELISA)分别为:2B3 1:102 400、1H6 1:51 200;2株细胞的染色体数均在100条以上.电镜观察与mAb作用后的弓形虫虫体聚集、肿胀,膜变厚,表面出现缺口和空洞,甚至虫体变形、破碎.抗弓形虫天然P30的mAb能识别重组体pET 30a-P30的表达蛋白.成功制备了抗弓形虫天然P30、重组P30的mAb,可进一步用于弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定研究.
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小鼠小肠派伊尔结巨噬细胞吸附乳杆菌的研究
研究小鼠小肠派伊尔结巨噬细胞吸附乳杆菌及其与乳杆菌免疫调节作用之间的关系,可以为免疫调节性乳杆菌或活菌疫苗载体的筛选提供理论依据.提取了小鼠小肠派伊尔结(PP)巨噬细胞,研究其吸附9株乳杆菌的性能.结果发现,PP巨噬细胞吸附不同乳杆菌的能力差别很大,其中PP巨噬细胞对植物乳杆菌Lp6(L.plantarum Lp6)有强的吸附性能.用中性红吞噬法测定了不同乳杆菌对PP巨噬细胞吞噬活性的调节作用,结果发现乳杆菌对巨噬细胞吞噬活性的增强作用与PP巨噬细胞吸附它们的能力有正相关关系.9株乳杆菌的细胞表面物理化学性质和其巨噬细胞吸附性之间没有直接关系,植物乳杆菌Lp6细胞表面的甘露糖特异性凝集素参与了PP巨噬细胞吸附该细菌的过程.
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血管活性肠肽抑制实验性类风湿性关节炎的研究
类风湿性关节炎是一种自身抗原未明的慢性自身免疫病,以多关节的慢性炎症及渐进性骨和软骨的破坏为主要特征.胶原诱导的关节炎因其临床表现、病理组织学改变以及免疫学表现等方面与类风湿性关节炎的相似性而成为理想的动物模型.在成功建立了胶原诱导的大鼠关节炎模型(CIA)的基础上采用了血管活性肠肽(VIP)注射,研究其干预关节炎发生的效果.结果显示:使用血管活性肠肽组的大鼠CIA发病率和严重程度明显降低,关节肿胀以及骨和软骨的破坏减轻,大鼠血清中抗胶原抗体水平显著降低,大鼠T淋巴细胞对胶原的增殖反应也显著降低.提示VIP可能通过减轻对胶原的免疫应答而抑制关节炎症状,具有可能的临床应用价值.
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负载HCMV pp65抗原肽的HLA-A*1101-GPI四聚体的制备和鉴定
为体外复性制备负载人巨细胞病毒(HCMV)pp65抗原肽的HLA-A*1101-GPI四聚体,研究优化HLA-A*1101重链与生物素化酶底物肽融合蛋白(HLA-A*1101-BSP)在大肠杆菌中的诱导表达的温度、时间和诱导剂IPTG浓度,并以抗HLA-A*0201抗血清进行免疫印迹鉴定HLA-A*1101-BSP的表达水平.将初步纯化的HLA-A*1101-BSP与β2-微球蛋白(β2m)和HCMV抗原肽pp6516-24(GPISGHVLK,简称GPI)一起利用稀释法进行重折叠复性,获得可溶性HLA-A*1101-GPI单体,经生物素化和纯化后,与Streptavidin-PE结合成四聚体.流式细胞仪分析显示HLA-A*1101-GPI四聚体具有与特异性细胞毒T细胞(CTL)的结合活性,表明成功获得可溶性HLA-A*1101-GPI四聚体,为研究HLA-A*1101限制性CTL的免疫应答打下基础.
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血红素加氧酶-1 上调CD4+CD25+Treg foxp3表达以增强Treg的免疫抑制功能
本研究探讨血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)诱导CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)foxp3表达,增加IL-10分泌,提高CD4+CD25+Treg的免疫抑制功能.选用磁珠分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+Treg,转染含HO-1质粒pcDNA3HO-1,或用血红素(hemin)、锡-原卟啉(Sn-protoporphyrin,SnPP)干预,培养48 h.用卵清蛋白致敏、激发BALB/c小鼠建立哮喘模型,并在致敏、激发阶段分别经血红素和SnPP干预.用Real-Time PCR和Western blot方法分别测定培养细胞内HO-1、foxp3 mRNA及蛋白量;ELISA方法分别测定细胞上清液和动物血清中IL-10、TGF-β水平;用磁珠分离哮喘动物脾脏CD4+CD25+Treg进行功能抑制试验.结果显示:经pcDNA3HO-1和血红素上调CD4+CD25+Treg HO-1表达,foxp3表达及蛋白水平相应增加,上清液IL-10水平明显升高.而OVA致敏、激发的哮喘小鼠模型,经血红素干预后,血清IL-10分泌亦增多,CD4+CD25+Treg功能抑制作用显著增强.该结果表明HO-1诱导CD4+CD25+Treg特异性转录因子foxp3表达,促进IL-10分泌,增强CD4+CD25+Treg的调节功能,具有显著的免疫抑制作用.
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CpG-ODN下调HeLa细胞功能性Fas配体的表达
为观察CpG-ODN对宫颈癌细胞系HeLa细胞Fas配体(FasL)表达水平的影响,探讨其对由HeLa细胞Fas-FasL途径诱导的淋巴细胞凋亡作用.采用实时荧光RT-PCR方法检测HeLa细胞、正常宫颈上皮细胞中FasL和Jurkat T淋巴细胞中Fas的表达水平,应用HeLa细胞与Jurkat细胞共培养的方法体外研究HeLa细胞FasL诱导T淋巴细胞凋亡作用.结果显示:①HeLa细胞、正常宫颈上皮细胞中FasL表达阳性,其表达水平分别是(0.99±0.05)、(0.68±0.03),差别具有统计学意义(P=0.0007);Jurkat细胞Fas表达呈阳性;②HeLa细胞与Jurkat细胞共培养后Jurkat细胞的凋亡率为(38.23%±4.98%),应用抗体NOK-2中和HeLa细胞的FasL后,Jurkat细胞凋亡率减少为(3.54%±1.61%),两者相比,差别有显著性意义(P=0.0001);③HeLa细胞用CpG-ODN处理前后FasL的表达水平分别是(0.99±0.05)、(0.79±0.04),差别有统计学意义(P=0.005);CpG-ODN预处理的HeLa细胞与Jurkat细胞共培养后Jurkat细胞凋亡率为(6.41%±2.81%),而没有用CpG-ODN预处理的HeLa细胞与Jurkat细胞共培养Jurkat细胞凋亡率为(29.23±6.85)%,二者的差别有统计学意义(t=13.39,P=0.006).HeLa细胞可能通过表达FasL主动诱导T淋巴细胞凋亡从而在肿瘤的免疫逃逸中发挥作用,CpG-ODN可通过下调FasL的表达而减少肿瘤细胞主动诱导的T淋巴细胞凋亡.
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Toll样受体3与自身免疫性疾病
TLR3属于TLR家族中的一个重要成员,是dsRNA病毒的模式识别受体,与配体结合后,通过其信号转导通路引起炎症反应,在宿主抗病毒免疫中具有重要作用.研究表明TLR3分子的表达异常与多种自身免疫性疾病的发生关系密切.
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Notch配体在细胞发育过程中的作用
Notch是一个在进化上高度保守的跨膜蛋白家族,它通过Notch配体与受体结合而转导信号,从而精确地调控细胞各谱系的发育.近年来多项研究表明,Notch配体在T细胞、B细胞、NK细胞等细胞谱系发育中起着重要的作用,正受到了越来越多的关注,本文就此作一综述.
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MAPK信号通路在诱导Th1/Th2分化中的作用
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是介导细胞外刺激到细胞内反应的重要信号转号系统,在诱导Th1/Th2分化中起重要作用,其中JNK1能够抑制初始CD4+T细胞向Th2分化,JNK2诱导其向Th1分化并能促进相应细胞因子的分泌;p38既能诱导Th1分化,也能促进Th2分化;ERK1/2则能诱导CD4+T细胞向Th2分化.
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人类乳头瘤病毒免疫致病机制
人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是已被肯定的DNA肿瘤病毒之一,与多种疾病相关,尤其是高危型HPV感染和宫颈癌的发生密切相关.因此,明确HPV的致病机制对于宫颈癌的预防治疗,及未来疫苗的研究都具有重要的意义.本文拟从各种免疫细胞及分子(T细胞、抗原提呈细胞、NK细胞、MHC分子、及各种细胞因子)的角度对HPV的致病机制作一综述.
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2013 | 01 02 03 04 05 06 |
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2006 | 01 02 03 04 05 06 |
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