改良冠状动脉介入技术建立猪冠状动脉微栓塞动物模型

目的：探讨建立简便又经济的小型猪冠状动脉微栓塞（CME）模型的技术。方法将11只小型猪随机分为对照组5只和CME组6只。采用21号桡动脉穿刺针穿刺股动脉，5 F造影管及1.8 F微导管往CME组左前降支注入栓塞微球。检测栓塞前及栓塞6 h后血清脑利钠肽（BNP）及心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平。栓塞6 h后取心尖部心肌光镜下观察。结果对照组5只全部存活，CME组1只死亡。5 F造影管及1.8 F微导管可顺利到位。微栓塞前CME组与对照组血清BNP（ng/L：143.00±13.51 vs 134.00±15.57）及cTnI水平（μg/L：0.39±0.09 vs 0.38±0.10）差异无统计学意义（t分别为0.976、0.294，均P＞0.05）。微栓塞后CME组血清BNP（561.00±80.65）及cTnI水平（2.75±0.58）均高于对照组（BNP、cTnI分别为139.00±13.87、0.54±0.14），差异有统计学意义（t分别为11.530、8.337，均P＜0.001）。光镜下CME组心肌可见栓塞微球、微梗死、炎症细胞浸润。结论利用新的手术耗材可以成功建立小型猪CME模型，该技术简便、经济、实用，值得推广。

运动训练对脊髓损伤大鼠脊髓内BDNF及其受体TrkB表达的影响

目的：研究运动训练对脊髓损伤（SCI）大鼠脊髓内脑源性神经营养因子（BDNF）及其酪氨酸激酶受体B（TrkB）表达的影响。方法24只SD大鼠随机均分为假手术组、损伤对照组和运动训练组。采用通用型脊髓打击器建立T10 SCI大鼠模型。运动训练组于损伤后1周起对大鼠进行4周运动训练，假手术组和损伤对照组不进行运动训练。采用BBB评分观察损伤前及损伤后第1~5周大鼠后肢运动功能的变化。运动训练结束后取大鼠T12～L1节段脊髓，免疫组化结合图像平均光密度分析观察脊髓组织BDNF和TrkB的表达及分布，Western blot检测脊髓内BDNF和TrkB蛋白含量。结果损伤前，3组大鼠BBB评分为21.00分。损伤后，损伤对照组及运动训练组BBB评分均低于假手术组（均P＜0.05）。损伤3周后运动训练组BBB评分高于损伤对照组（P＜0.05）。BDNF、TrkB免疫反应阳性产物均多分布于脊髓前角、脊髓后角及中央管周围；运动训练组BDNF、TrkB阳性染色颗粒均增多，平均光密度值均高于假手术组和损伤对照组（均P＜0.05）。运动训练组大鼠脊髓内BDNF及TrkB的表达高于假手术组和损伤对照组。结论运动训练能诱导SCI大鼠脊髓内BDNF及其受体TrkB表达，促进其运动功能恢复。

负载干细胞抗原的DC联合CIK细胞对乳腺癌荷瘤鼠肿瘤杀伤研究

目的：研究不同乳腺癌细胞抗原负载的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）联合培养后对乳腺癌荷瘤鼠体内肿瘤的杀伤效果。方法分离乳腺癌细胞系MCF-7/ADR中的乳腺癌干细胞并制备冻融抗原，以此冲击由正常人外周血提取的单个核细胞诱导培养的DC和CIK，注入乳腺癌荷瘤鼠模型中，以此为实验组（BCSC-AP-DC+CIK组），并与普通抗原冲击的DC联合CIK组（AP-DC+CIK组）、DC+CIK组、CIK组及生理盐水组（NS组）建立对照实验。观察各组中小鼠肿瘤生长情况，采用免疫组化法检测bcl-2、bax表达，原位末端标记法（TUNEL）检测各组肿瘤组织凋亡。结果各组小鼠肿瘤体积在治疗前后及各组小鼠肿瘤体积在治疗后差异均有统计学意义（P<0.05），NS组小鼠治疗后肿瘤体积大（3.625±0.093）cm3，BCSC-AP-DC+CIK组肿瘤体积小（1.234±0.131）cm3。BCSC-AP-DC+CIK组bax强阳性表达，较其他组强；bcl-2弱阳性或不表达，较其他组弱。凋亡指数BCSC-AP-DC+CIK组>AP-DC+CIK组>DC+CIK组>CIK组>NS组。结论经乳腺癌干细胞抗原冲击的DC与CIK作用后诱导同种乳腺癌细胞凋亡强于经普通乳腺癌细胞抗原冲击的DC联合CIK、单纯DC与CIK共同作用后及单独CIK的治疗效果。

碳酸饮料对乳恒牙更替期牙齿健康的影响

目的：研究碳酸饮料对乳恒牙更替期牙齿健康的影响作用及机制。方法40颗犬牙釉质样本分别采用15μL可口可乐（可口可乐组）、雪碧（雪碧组）、纯苏打水（苏打水组）和生理盐水（生理盐水组）浸泡，各10颗。测定处理后饮料中钙、磷溶出浓度；分离牙乳头干细胞，以添加可口可乐、雪碧、苏打水和生理盐水的条件培养基进行细胞培养，采用PCR法和Western blot法检测核因子-κB受体活化剂配体（RANKL）、骨保护素（OPG）和维生素D受体（VDR）的mRNA和蛋白表达水平。结果各组钙、磷溶出浓度（mmol/L）由高到低均依次为：雪碧组（3.679±0.114、0.089±0.008）、可口可乐组（2.217±0.109、0.036±0.005）、生理盐水组（0.021±0.004、0.009±0.001）和苏打水组（0.007±0.001、0.002±0.000）。各组RANKL的mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义。苏打水组和生理盐水组OPG的mRNA和蛋白表达水平均高于可口可乐组和雪碧组（均P<0.05），雪碧组与可口可乐组、生理盐水组与苏打水组间差异均无统计学意义。生理盐水组VDR的mRNA和蛋白表达水平低于可口可乐组和雪碧组，高于苏打水组（均P＜0.05）。结论碳酸饮料可能通过调控成骨相关基因表达及维生素D受体家族共同影响乳恒牙更替期的牙齿健康。

脑室内注射瘦素对四肢骨折愈合的影响

目的：观察兔胫腓骨骨缺损模型脑室内注射瘦素蛋白（leptin）对骨折愈合速度的影响。方法建立新西兰兔右侧胫腓骨外侧骨缺损模型，leptin组经兔枕骨大孔向小脑延髓池脑脊液中注射重组兔leptin，对照组以相同方法注射等剂量生理盐水。于术后1、3、7、14、21 d记录兔体质量变化，并通过CT动态记录骨缺损区域骨痂骨密度（BMD）的变化。于术后21 d，所有动物均处死后取右侧胫腓骨骨缺损区域，以荧光原位杂交技术(FISH)检测骨折区域骨形成蛋白（BMP）-2的表达情况。结果2组动物造模后，体质量先下降后（14 d）上升，BMD一直呈上升趋势；术后1、3 d，2组体质量及BMD差异均无统计学意义，术后7、14、21 d，leptin组的体质量低于对照组，BMD高于对照组（均P＜0.05）。术后21 d，骨缺损区域BMP-2表达阳性细胞数目高于对照组(个：120.87±29.14 vs 97.65±20.97, t=6.79, P＜0.001)。结论经枕骨大孔向小脑延髓池内中注射leptin可加速兔四肢骨缺损的愈合。

艾灸预处理对脑缺血再灌注损伤模型大鼠大脑皮质caspase-3蛋白表达的影响

目的：观察艾灸预处理对脑缺血再灌注损伤模型大鼠大脑皮质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-3蛋白表达的影响，探讨艾灸预处理减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠21只，分为假手术组(6只)、模型组(8只)和艾灸预处理组(7只)。采用线栓法闭塞大脑中动脉2 h后进行再灌注，制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型。采用TTC染色检查脑组织梗死情况；HE染色检查大脑皮质的形态结构；电子显微镜观察大脑皮质神经细胞的超微结构；荧光免疫组织化学技术检测大脑皮质caspase-3蛋白的表达。结果艾灸预处理组大鼠患侧脑组织梗死体积百分比[(24.9±4.7)%]低于模型组[(45.8±4.6)%]，大脑皮质神经细胞形态结构变化较模型组轻，caspase-3阳性细胞数(39.17±7.28)低于模型组(58.17±16.53)。结论艾灸预处理具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用，降低大脑皮质caspase-3蛋白的表达可能是其作用机制之一。

Smac参与雷公藤甲素对TGF-β1作用的大鼠系膜细胞凋亡的研究

目的：探讨雷公藤甲素（Triptolide）对转化生长因子（TGF）-β1作用下的大鼠系膜细胞凋亡及Smac表达的影响。方法大鼠HBZY-1系膜细胞株分为对照组、TGF-β1组和低、中、高Triptolide组。低、中、高Triptolide组加入含不同浓度Triptolide(0.4、2、10μg/L)预处理24 h后再加TGF-β1(10μg/L)培养24 h。TUNEL法检测细胞凋亡；Real-time PCR法检测Smac mRNA表达；Western blot检测Smac蛋白表达；激光共聚焦荧光显微镜检测Smac蛋白亚细胞定位。结果与对照组相比，TGF-β1组系膜细胞凋亡减少，且Smac mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)；与TGF-β1组相比，Triptolide能够促进系膜细胞凋亡，且高Triptolide组Smac mRNA及蛋白表达量高(P<0.05)。对照组及TGF-β1组Smac蛋白呈点状分布的线粒体定位，而经过Triptolide处理后Smac蛋白呈胞浆溶解状及染色体浓集。结论Triptolide可通过上调大鼠系膜细胞Smac表达，促进其由线粒体释放至细胞质及细胞核，从而促进TGF-β1作用下的大鼠系膜细胞凋亡。

吡格列酮对胰岛素抵抗OLETF大鼠血清IL-18、TLR4表达的影响

目的：研究吡格列酮对胰岛素抵抗(IR)自发性持续高血糖（OLETF）大鼠血清白细胞介素（IL）-18和Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其降低心血管疾病风险的可能机制。方法 OLETF大鼠24只，高脂喂养20周建立IR模型，后随机均分为模型（M）组和吡格列酮(P)组，M组继续给予高脂饲料，P组给予吡格列酮加高脂饲料。另择LETO大鼠12只为正常对照(NC)组，给予标准饲料。药物干预20周后测定各组大鼠血清胰岛素（FINS）、空腹血糖（FBG）、IR指数（HOMA-IR）、胰岛素敏感指数（ISI）、三酰甘油(TG)、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、IL-18、TLR4水平。结果24只OLETF大鼠均造模成功。M组FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、IL-18和TLR4均高于NC组和P组，ISI、HDL-C均低于NC组和P组（均P＜0.05）。血清IL-18与FBG、FINS、HOMA-IR、TLR4呈正相关，与ISI呈负相关。血清TLR4与FBG、FINS、HOMA-IR、IL-18呈正相关，与ISI呈负相关（均P＜0.05）。多元Logistic回归分析结果显示IL-18、TLR4是HOMA-IR的影响因素。结论吡格列酮可改善OLETF大鼠的IR及炎症状态，其可能通过降低IL-18水平和抑制TLR4途径发挥抗炎作用，从而降低心血管疾病的发生风险。

不同呼气末正压对COPD患者腹腔压力及肝脏的影响

目的：研究机械通气时不同呼气末正压（PEEP）参数对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者肝脏形态、功能及血流动力学的影响。方法采用前瞻性、开放性、自身对照的研究方法，对50例因COPD呼吸衰竭行机械通气的患者，待其病情稳定后，观察在PEEP分别为0、5、10 cmH2O时腹腔压力（IAP）的改变，以及肝脏形态、肝门静脉内径、血流动力学和肝功能的变化。结果随着PEEP值增大，IAP随之增加(P<0.01)；肝脏形态未发生明显变化，门静脉内径无显著改变(P>0.05)，门静脉血流减慢(P<0.05)，肝功能改变差异无统计学意义(P>0.05)。结论机械通气时较高的PEEP值会使IAP升高、门静脉血流减慢，但门静脉内径及肝功能所受影响不明显。

不同刺激频率与时间经穴经皮神经电刺激对电流感觉阈值的影响

目的：分析不同频率与时间的经穴经皮神经电刺激对电流感觉阈值(CPT)的影响。方法通过测量颏孔区和手臂区的电流感觉阈值评价经穴经皮神经电刺激的效用。对30例健康志愿受试者的合谷穴分次给予不同刺激时间和刺激频率的经皮神经电刺激，并测量同侧颏孔区和手臂区的电流感觉阈值。结果颏孔区电流感觉阈值升高。低频电刺激对慢痛(5 Hz CPT)有明显抑制作用（P＜0.05），高频电刺激对快痛(250 Hz CPT)和慢痛均有抑制作用（P＜0.05）。经皮神经电刺激的刺激频率（β=0.363）比刺激时间（β=0.274）对疼痛的抑制作用的影响更明显。结论经穴经皮神经电刺激确实可以影响特定反应区的感觉阈值，且治疗频率的选择比单纯延长治疗时间更为重要。

XRCC1基因多态性与宫颈鳞癌放疗敏感性的关系

目的：探讨XRCC1基因Arg194Trp、Arg399Gln单核苷酸多态性(SNP)与外生型宫颈鳞状细胞癌放疗敏感性的关系。方法选择经组织病理学确诊的外生型宫颈鳞状细胞癌患者73例。其中临床分期Ⅰ期4例，Ⅱ期36例，Ⅲ期30例，Ⅳ期3例。肿瘤直径≤4 cm 30例，肿瘤直径＞4 cm 43例；A点剂量≤80 Gy者36例，A点剂量＞80 Gy者37例。近期疗效为完全缓解者(CR组)47例，部分缓解者(PR组)26例。采用错配扩增聚合酶链式反应检测患者血液标本的XRCC1 Arg194Trp、Arg399Gln SNP的基因型频率分布，分析其与宫颈癌放疗敏感性的关系。结果 XRCC1基因Arg194Trp分型中，携带Arg/Arg、Arg/Trp、TrP/Trp分别有31例（42.5%）、37例（50.7%）、5例（6.8%）；Arg399Gln分型中，携带Arg/Arg、Arg/Gln、Gln/Gln分别有26例（35.6%）、39例（53.4%）、8例（11.0%）。CR组与PR组Arg194Trp、Arg399Gln基因型分布差异均无统计学意义。影响放疗敏感性的多因素Logistic回归分析结果显示，临床分期晚为PR的危险因素。结论 XRCC1基因Arg194TrpSNP、Arg399Gln SNP与外生型宫颈鳞状细胞癌放疗敏感性无相关性。临床分期越晚放疗敏感性越差。

自锁托槽和传统托槽非拔牙矫治上颌轻中度拥挤软硬组织及牙弓变化的研究

目的：比较Damon Q自锁和3M金属托槽非拔牙矫治轻中度上颌拥挤软硬组织及牙弓变化的研究。方法选择正畸矫治患者87例，以上颌拥挤程度和采用的矫治器种类分为Ⅰ度、Ⅱ度拥挤Damon Q自锁托槽组（41例），Ⅰ度、Ⅱ度拥挤3M金属托槽组（46例）。测量治疗前后头颅侧位片及模型，整理数据采用配对t检验和成组t检验分析。结果非拔牙矫治上颌Ⅰ度、Ⅱ度拥挤时，两种托槽治疗后上颌牙弓宽度和牙弓长度均有增大，但2组间变化量差异无统计学意义。上颌Ⅱ度拥挤时，比较2组软组织测量项目鼻唇角、上唇倾角、上下唇倾角数值减少，且自锁托槽组变化量大于金属托槽组。结论非拔牙矫治上颌轻中度拥挤时，随拥挤度增大，Damon Q自锁托槽对于软组织上唇突度的改变较3M金属托槽略大，在临床应用中要重视托槽及治疗体系的选择。

GDNF、GFRα1和RET在先天性直肠肛门畸形中的表达及意义

目的：探讨神经胶质细胞源性的神经营养因子（GDNF）、其受体GFRα1和原癌基因RET在先天性直肠肛门畸形肠壁组织中的表达及意义。方法收集经手术治疗的直肠肛门畸形患者12例，男8例，女4例，年龄3 d~2岁，高位无肛2例，中位无肛4例，低位无肛6例。采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测12例患儿肠壁盲端组织和距离盲端3 cm处的组织标本中RET、GDNF和GFRα1的表达。结果高、中、低位无肛患儿盲端标本中均缺乏神经节细胞，且RET、GDNF和GFRα1在盲端中均未见表达；距离盲端3 cm处，高、中、低位无肛组织中有神经节细胞，存在RET、GDNF和GFRα1的表达，中、低位无肛组织中呈棕褐色为强阳性，而高位无肛呈淡黄色和棕黄色为弱阳性或者阳性；术后功能随访，高位无肛中1例出现污粪，1例出现稀便不能控制，无肛门失禁情况。中、低位无肛中有1例出现直肠黏膜脱出，经坐浴肛门护理好转，1例出现排气时偶有污便，其余8例术后排便功能未见异常。结论先天性直肠肛门畸形患儿的直肠末端中神经营养因子GDNF、GFRα1和RET的低表达可能与直肠肛门畸形术后排便功能不良关系密切。

sTn在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的：研究肿瘤相关糖抗原sTn在子宫内膜癌、子宫内膜非典型增生、良性子宫病变患者子宫内膜组织中的表达情况，分析其与子宫内膜癌患者手术病理分期、病理分级等的关系及临床意义。方法采用免疫组化方法检测sTn在子宫内膜癌组（93例，包括子宫内膜样癌80例，浆液性乳头状癌10例，透明细胞癌3例）、子宫内膜非典型增生组（50例）、子宫良性病变组（50例）子宫内膜组织中的表达。结果 sTn在子宫内膜癌组的阳性率为73.1%，与子宫内膜非典型增生组（32%）和良性子宫病变组（14%）差异均有统计学意义（P<0.017）；sTn在子宫内膜样癌组织中表达率为78.8%，明显高于在其他组子宫内膜组织中的表达（P<0.008）；sTn在低分化的子宫内膜癌中的表达率显著高于高分化的子宫内膜癌（P<0.017）；在肿瘤浸润深度＞1/2肌层组的子宫内膜癌组织中的阳性表达率高于≤1/2肌层组（P＜0.05）；在有、无淋巴结转移组的子宫内膜癌组织中的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论sTn的表达可能在子宫内膜癌的发生、发展中起一定的作用。

高出血风险MODS患者连续性血液滤过治疗抗凝方案的安全性及有效性分析

目的：探讨高出血风险多器官功能障碍综合征（MODS）患者连续性静脉静脉血液滤过（CVVH）抗凝方案的安全性及有效性分析。方法选择高出血风险MODS行CVVH治疗的患者40例，分为无肝素抗凝组（A组）和小剂量肝素抗凝组(B组)，观察2组治疗前、治疗后24 h、48 h ApacheⅡ评分、血小板计数、凝血功能、尿素氮、肌酐、氧合指数（PaO2/FIO2）的变化，并记录2组患者滤器寿命、机械通气时间、住重症监护病房（ICU）时间及出血并发症的发生情况。结果 B组治疗后24 h、48 h血肌酐、PaO2/FIO2、ApacheⅡ评分及尿素氮水平均较A组明显好转（均P<0.05）。B组治疗后24 h激活部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）均较治疗前明显延长，血小板计数明显下降，但随着治疗时间的延长，APTT、TT及血小板计数无明显变化。B组患者的平均机械通气时间、住ICU时间均较A组患者明显缩短，滤器使用寿命较A组明显延长（均P<0.05）。B组患者出现1例皮肤黏膜出血现象，无严重出血并发症发生。结论高出血风险MODS患者采用小剂量肝素抗凝可以保证CVVH治疗的顺利进行，临床应用安全、有效。

复合辅酶联合维生素E对新生儿高胆红素血症肝肾损害的保护作用

目的：探讨早期联合应用复合辅酶及维生素E对新生儿高胆红素血症肝肾功能损害的干预效果。方法150例足月高胆红素血症新生儿作为观察组，据胆红素值分为轻、中、重3组，另选取同期出生的健康无黄疸或生理性黄疸的足月新生儿共45例作为对照组。入院24 h内检测血清γ-谷氨酰转移酶（γ-GGT）、总胆红素及胱抑素C （Cys-C）、丙二醛（MDA）等指标。另将观察组随机分为常规组和联合组。联合组早期给予复合辅酶、维生素E以及常规治疗，常规组仅给予常规干预，治疗1周复查以上指标。结果治疗前轻、中、重度组MDA均较对照组增高（P＜0.05），而γ-GGT及Cys-C仅在中、重度组较对照组升高（P＜0.05），且总胆红素与MDA、γ-GGT及Cys-C水平间呈正相关（P＜0.05），MDA与Cys-C、γ-GGT间亦呈正相关（P＜0.01）。经早期干预治疗后，随着胆红素下降，血γ-GGT及Cys-C、MDA等亦有所降低，其中联合组较常规组降低更显著（P＜0.05）。结论高胆红素血症时，可能通过胆红素诱导的脂质过氧化作用对新生儿肝肾造成损害，在常规治疗基础上加用复合辅酶及维生素E有一定的保护作用。

Snail和Raf激酶抑制蛋白与非小细胞肺癌侵袭转移的关系

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织中Snail和Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测124例NSCLC及67例癌旁正常肺组织中Snail和RKIP的表达情况，比较临床病理特征与Snail和RKIP阳性表达率的关系，分析Snail和RKIP的相关关系。结果 Snail蛋白在肺癌中表达率为79.03%，高于正常肺组织的19.40%（χ2=63.538，P<0.01）；RKIP在肺癌中的表达率为36.29%，低于正常肺组织的77.61%（χ2=29.716， P<0.01）。两者的表达水平均与肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存时间有关；Snail与RKIP的蛋白表达水平呈负相关（P<0.05）。结论 Snail高表达与RKIP低表达可能是NSCLC侵袭转移的重要生物学标志，可作为NSCLC的预后指标。

五味子醇提液对阿霉素损伤足细胞中nephrin和desmin表达的影响

目的：观察五味子醇提液（SE）对阿霉素（ADR）诱导的体外足细胞损伤中足细胞裂孔膜蛋白nephrin和骨架蛋白desmin表达的影响，并探讨其作用机制。方法体外ADR作用于足细胞24 h，造成足细胞损伤后，加入含SE的培养基，继培养24 h。设对照组（0 mg/L ADR）、模型组（0.25 mg/L ADR）、SE干预组（250 mg/L SE+0.25 mg/L ADR）、SE组（250 mg/L SE）。免疫荧光法测定各组nephrin的表达；Western Blot检测各组nephrin和desmin蛋白表达；RT-PCR检测各组nephrin和desmin mRNA表达。结果免疫荧光结果显示对照组和SE组nephrin呈颗粒状或线性分布于细胞膜，模型组较对照组、SE组和SE干预组表达强度明显减少。模型组nephrin蛋白和mRNA表达较对照组显著减少，SE干预组nephrin蛋白和mRNA表达水平较模型组增加。模型组desmin蛋白和mRNA表达较对照组显著增加，SE干预组desmin蛋白和mRNA表达水平较模型组显著减少（均P<0.05）。SE和SE干预组的nephrin和desmin蛋白和mRNA表达水平与对照组差异无统计学意义。结论250 mg/L SE对体外培养足细胞无损伤作用，且SE能拮抗ADR对足细胞的损伤，这可能与SE可以上调nephrin和下调desmin的表达有关。

自噬相关蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达及相关性研究

目的：探讨肺鳞癌和腺癌中自噬相关蛋白Beclin1、自噬相关蛋白1（Atg1）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达情况及其相关性分析。方法采用免疫组织化学Envision二步法，检测82例肺癌（鳞癌和腺癌）组织及17例癌旁正常肺组织中Beclin1、Atg1、mTOR的表达情况，并分析其表达的相关性。结果肺癌组织中Beclin1的阳性表达率低于正常组（52.44%vs 94.12%，P＜0.01），在淋巴结转移、TNM分期、不同分化程度情况的肺癌组织中阳性表达率差异有统计学意义，且随肿瘤恶变和侵袭程度的增强呈递减趋势。肺癌组与正常组Atg1阳性表达率比较差异无统计学意义（64.71%vs 46.34%），但在肿块较大肺癌组织中的阳性表达率低于肿块较小者（P<0.01）。肺癌组mTOR阳性表达率高于正常组（53.66%vs 5.88%，P＜0.01），有淋巴结转移的肺癌组织中mTOR阳性表达率高于无淋巴结转移者（P<0.01）。相关性分析显示，鳞癌中Beclin1与Atg1表达呈正相关（r=0.609），Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关（r分别为-0.617、-0.444）；肺腺癌中，Beclin1与Atg1表达呈正相关（r=0.458），Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关（r分别为-0.497，-0.541），均P<0.01。结论 Beclin1、Atg1、mTOR在肺鳞癌和腺癌组织中的表达呈现较好的相关性，提示肺鳞癌和腺癌的临床病理学变化与自噬有关。

小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响

目的：观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响，探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子机制。方法3T3-L1脂肪细胞经不同浓度小檗碱（0、5、10、20和40μmol/L）处理24 h后，采用qRT-PCR技术检测相关因子mRNA表达水平，包括白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、瘦素、脂联素和内脂素以及脂肪酸合酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、脂肪组织甘油三酯水解酶（ATGL）、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（AFABP）。同时用10μmol/L小檗碱分别处理脂肪细胞0、4、8、24、48 h后，以相同方法测定上述指标mRNA表达水平。结果10~40μmol/L小檗碱剂量组的脂肪细胞内IL-6、TNF-α、瘦素、FAS、ATGL、AFABP mRNA表达水平均低于0μmol/L组，内脂素mRNA高于0μmol/L组（P<0.05），各组间脂联素mRNA表达无明显差异（P>0.05）。8~48 h时间处理组细胞内IL-6、TNF-α、瘦素、AFABP、ATGL、FAS mRNA表达水平均低于0 h组，内脂素mRNA水平高于0 h组（P<0.05）。脂联素mRNA表达水平仅在48 h处理组降低（P<0.05）。各组间ACC mRNA表达无明显差异（P>0.05）。结论小檗碱能影响3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子和关键脂肪酶及蛋白mRNA的表达，且呈时间、剂量依赖效应，这可能是其改善胰岛素抵抗的重要分子机制。

真性红细胞增多症基因组学与疾病进展的关系

目的：研究135例真性红细胞增多症(PV)患者ASXL1、TET2、IDH1、IDH2、SETBP1、MPL515、JAK2V617F及JAK2 exon12基因突变情况，综合评判PV后骨髓纤维化（PPMF）疾病进展与基因组学特征。方法用Sanger方法对ASXL1、TET2、IDH1、IDH2、SETBP1、MPL515和JAK2 exon12基因进行测序；用巢式等位基因特异性PCR方法检测JAK2V617F突变，对突变患者用Taqman-MGB探针检测突变负荷。分析基因突变与PPMF疾病进展的关系。应用Logis-tic多因素分析分析PV后继发PPMF的危险因素。结果 PV患者ASXL1、TET2、IDH1、IDH2的突变率分别为7.69%（8/104）、5.26%(1/19)、0.08%(1/120)、和0.08%(1/121)。未发现SETBP1、MPL515突变者。PV患者JAK2总突变率为82.22%（111/135）。其中JAK2 exon12突变率为2.96%(4/135)。PPMF患者中，ASXL1突变率高达31.82%（7/22）。ASXL1与JAK2V617F负荷(V617F%)呈正相关（rs=0.298，P=0.002），ASXL1突变组的血红蛋白低于未突变组，白细胞、V617F%≥50%比例、血栓栓塞比例及继发PPMF比例高于未突变组（P＜0.05）；ASXL1突变、V617F%≥50%和脾大是PPMF的危险因素。结论 ASXL1突变可能通过某种机制促进V617F%增高，参与PPMF的发生和发展。

hnRNP A1的增强型绿色荧光标记及细胞应激定位分析

目的：构建包含有核不均一核糖核蛋白（hnRNP）A1蛋白编码区序列的真核表达质粒pEGFP-C1-hnRNP A1，并对增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记的hnRNP A1蛋白进行细胞应激共定位分析。方法提取HeLa细胞总RNA，以针对hnRNPA1-3′非翻译区的特异性片段为反转录引物，反转录出包含hnRNP A1编码区序列的cDNA，并以其为模板，降落PCR法扩增出带EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切位点的目的基因，利用双酶切法分别酶切目的基因片段和线性pEGFP-C1，在T4-DNA连接酶的催化下将两者连接构建成pEGFP-C1-hnRNP A1重组质粒，然后将重组质粒转染入HeLa细胞内，以激光共聚焦荧光显微镜观察EGFP-hnRNP A1的荧光表达情况，Western印迹法检测EGFP与hnRNP A1的融合表达情况，后进行细胞原位杂交及细胞免疫荧光检测在氧化应激状态下EGFP-hnRNP A1蛋白与poly(A)+mRNA（应激颗粒的标记成分）及DPC1a（加工体的标记蛋白）的应激共定位。结果以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒无误，激光共聚焦荧光显微镜观察和Western印迹结果检测到绿色荧光融合蛋白的表达；EGFP-hnRNP A1蛋白与poly(A)+mRNA呈现共定位，但与DPC1a无共定位关系。结论重组pEGFP-C1-hnRNP A1质粒成功构建并表达，应激状态下EGFP标记的hnRNP A1参与应激颗粒的构成。

强力霉素对胃癌细胞增殖及Notch1、MMP-9表达的影响

目的：研究强力霉素对胃癌细胞BGC-823细胞的增殖及Notch1、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达的影响，为胃癌的治疗提供新的抗肿瘤药物。方法分别以0、5、10、20、40 mg/L终浓度的强力霉素作用于人胃癌细胞系BGC-823，运用MTT法检测细胞增殖程度；流式细胞仪检测细胞周期分布的影响；Western Blot检测Notch1、MMP-9蛋白水平的表达。结果强力霉素能够抑制人胃癌细胞BGC-823细胞的增殖，且有剂量及时间依赖性（P＜0.01）；强力霉素能够改变胃癌细胞BGC-823周期的分布，随着浓度的增加，S期所占比例降低；并且随着浓度的增加，Notch1的表达增强，MMP-9的表达降低（P＜0.01）。结论强力霉素能够抑制胃癌细胞BGC-823的增殖，促进Notch1上调为可能的机制之一。

胶质瘤组织中TSSC1的表达及其对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响

目的：研究肿瘤抑制可转移候选基因1(TSSC1)在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响。方法采用Real time-PCR和Western blot检测80例胶质瘤（Ⅰ期25例，Ⅱ期32例，Ⅲ期15例，Ⅳ期8例）组织和瘤旁组织中TSSC1的表达，采用化学合成的针对TSSC1基因的2个小干扰RNA(siRNA-TSSC1-1和siRNA-TSSC1-2)下调该基因的表达，通过MTT和Transwell法分别检测TSSC1对U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果TSSC1在胶质瘤组织中的表达低于相应的瘤旁组织，同时在临床分期Ⅲ期、Ⅳ期中较Ⅰ期表达降低，将siRNA-TSSC1-1和siRNA-TSSC1-2转染入U87细胞后，U87细胞中TSSC1 mRNA和蛋白表达水平都明显降低，细胞增殖能力显著增强，细胞的迁移和侵袭能力显著增强。结论 TSSC1有望成为胶质瘤早期诊断和预测预后的生物分子标志物。

HBV感染的肝癌患者外周血中调节性T细胞的水平分析

目的：检测乙肝病毒(HBV)感染的肝癌患者外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Tregs)的水平，分析其与HBV感染的相关性。方法采集41例感染HBV的肝癌患者（HBV+组）、34例未感染HBV的肝癌患者（HBV-组）及29例正常健康受试者（对照组）的外周抗凝血，利用流式细胞术检测各组受试者外周血中CD4+CD25+CD127lowTregs水平，通过荧光定量聚合酶链反应检测感染HBV的肝癌患者血清中HBV DNA载量，分析Tregs水平与HBV DNA载量的相关性。结果 HBV+组外周血中CD4+CD25+CD127lowTregs占CD4+T细胞的比率显著高于HBV-组和对照组[(8.24±2.20)%vs (7.06±2.46)%vs (6.51±1.99)%, P<0.05]，HBV-组高于对照组；CD4+CD25+CD127lowTregs水平与HBV DNA载量(取对数转换)呈正相关(r=0.350，P<0.05)。结论肝癌患者外周血中Tregs的水平异常增高，且与HBV DNA复制密切相关，这可能是肝癌细胞免疫逃逸的重要原因。

正常肾脏血氧依赖磁共振成像特点及与生理指标相关性研究

目的：探讨正常肾脏的血氧水平依赖磁共振（BOLD-MRI）成像特点，以及与部分生理指标之间的相关性。方法纳入90例行腹部磁共振检查的非肾脏病患者。使用GE 3.0 T磁共振扫描仪和Torsopa相控阵线圈，行肾脏冠状面T1WI及BOLD成像，BOLD-MRI成像扫描采用T2*自旋梯度回波（T2*SPGR）序列，BOLD影像分析采用R2*map后处理软件，分别从肾脏皮质和髓质区选取感兴趣区（ROI）测量表观自旋-自旋弛豫率(R2*)值。分析R2*值与患者年龄、性别、身高、体质量、体质量指数（BMI）、体表面积（BSA）和估算的肾小球滤过率（eGFR）之间的相关性。结果两侧肾脏皮质区R2*值[左侧（16.56±1.40）Hz和右侧（16.66±1.28）Hz]均低于相应髓质区[左侧（28.82±3.71）Hz和右侧（28.36±3.72）Hz]；女性和男性患者皮质R2*值[女性（16.55±1.30）Hz和男性（16.66±1.38Hz）]也低于相应的髓质区[女性（28.46±3.64）Hz和男性（28.70±3.78）Hz]。双侧肾脏髓质区肾脏下极R2*值[（27.29±3.05）]Hz低于中极[（29.32±3.47）Hz]和上极[（29.16±4.21）Hz]；差异均有统计学意义。髓质R2*值与年龄呈正相关，与eGFR呈负相关(r分别为0.284、-0.232,均P<0.05)。结论 R2*值可反映肾脏皮髓质氧分压的水平，判断其缺血缺氧程度。BOLD-MRI提供了一种简单、易行且无创性检测肾脏皮髓质氧代谢的方法。

肾镜联合S形尿道扩张器治疗男性尿道狭窄

目的：探讨肾镜联合S形尿道扩张器治疗男性尿道狭窄的临床疗效。方法利用肾镜直视下将斑马导丝置入膀胱，导丝引导下通过S形尿道扩张器进行尿道扩张治疗男性尿道狭窄41例，术后留置硅胶尿管4～6周，定期门诊随访，必要时再行尿道扩张，比较患者术前、术后排尿及尿流率情况。结果所有患者手术均成功，平均手术时间（40.16±5.78）min。全部患者拔除尿管后排尿情况均较术前明显改善，术后门诊随访并定期返院进行尿道扩张至少6周，平均随访时间（34.75±6.42）周。所有患者术后尿道扩张期间排尿通畅，无尿失禁、性功能进行性减退及其他并发症。结论肾镜联合S形尿道扩张器进行尿道狭窄扩张具有可操作性强、创伤小、成功率高、安全等优点，值得推荐。

健肝降脂丸联合干扰素治疗慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪肝的疗效观察

目的：探讨慢性乙型肝炎（慢乙肝）合并非酒精性脂肪肝（NAFLD）的临床特点，抗病毒联合脂肪肝治疗对其疗效的影响。方法以98例慢乙肝合并NAFLD患者（肝脏病理G≥2且S≥2，HBV DNA>1×105 copies/mL）为观察对象，给予干扰素α-1b抗病毒治疗24周。按随机数字表法分为联合组（干扰素α-1b联合健肝降脂丸）55例和对照组（单用干扰素α-1b）43例，并均应用利可君预防白细胞减少。观察2组血清生化指标改变，HBV DNA阴转率，分析应用健肝降脂丸治疗对干扰素α-1b抗病毒治疗的影响。结果合并NAFLD的慢乙肝患者经过24周抗病毒治疗，联合组与对照组ALT和AST均明显降低，治疗后联合组ALT低于对照组，治疗后联合组TC、TG及对照组TC均较治疗前降低（均P<0.05）。联合组HBV DNA阴转率优于对照组（98.2%vs 86.0%，P＜0.05）。结论抗病毒联合抗脂肪肝治疗能明显改善慢乙肝合并NAFLD患者肝功能及血脂指标，提高HBV DNA阴转率。

《天津医药》协作办刊单位（排名不分先后）

《天津医药》第七届编辑委员会委员名单

天津市中老年非高血压人群高同型半胱氨酸血症的影响因素分析

目的：调查天津市中老年非高血压人群血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平及高同型半胱氨酸血症（hHcy, Hcy≥15μmol/L）患病的影响因素。方法采用自然抽样方法，于2011年5月-2012年12月对天津市内六区非高血压居民进行调查，循环酶法检测血浆Hcy，Logistic回归分析hHcy患病的相关因素。结果共入选874例，平均年龄（57±6）岁，男性25.5%，血浆Hcy水平为12.0μmol/L，hHcy患病为25.2%。多变量Logistic回归分析中，年龄、男性、吸烟、体育锻炼对应的hHcy患病OR（95%CI；P）分别为1.048（1.015~1.083；P=0.004）、4.191（2.359~7.448；P<0.001）、1.280（0.896~1.829；P=0.175）、0.460（0.259~0.816；P=0.008），蔬菜水果摄入量为250~500 g/d、>500 g/d与<250 g/d相比，hHcy患病OR（95%CI；P）分别为0.290（0.179~0.469；P<0.001）、0.168（0.092~0.309；P<0.001）。结论男性、年龄是hHcy患病的危险因素，蔬菜水果摄入量、体育锻炼是保护因素。

腹膜后畸胎瘤误诊为肾上腺囊肿一例

1病例报告
　　患儿女，7岁。主因右侧腹部可见隆起包块，于2011年5月12日入院。患儿父母代诉5 d前无意中发现患儿右侧腹部隆起，触摸局部无疼痛，无腹痛、腹胀及尿频、尿急、尿痛等不适。于2011年5月7日入外院，于外院当日CT检查见右侧肾上腺区见一大小约7 cm×7 cm的水样低密度影，CT值约28 HU，形态欠规则，边缘清晰，密度均匀，多囊性空间，囊壁薄而光滑。增强扫描后病灶无强化，与肾脏上极无法分界。CT提示：右肾上腺囊肿。未做处理。为进一步明确诊断，来我院诊治。既往体健。自患病以来无不适症状及消瘦，饮食、睡眠良好，二便通畅。入院查体：双肾区不对称，右肾区可见隆起包块，无压痛及叩击痛，左肾区无压痛及叩击痛，未触及包块，双侧输尿管走形区及膀胱区无压痛，未触及包块，尿道外口无红肿及分泌物，腹饱满，右上腹无压痛及反跳痛，可触及一包块，质地中等，移动性浊音阴性，肠鸣音弱。B超检查示右上腹可见一12.1 cm×7.9 cm×7 cm异常回声区，边界清楚，形态欠规则，有管样结构与之相通，其内为细小密集点状回声，呈流沙状运动，内无血流信号，并可见分隔光带，腹部横切面示胰腺向前移位，腔静脉向后移位，俯卧位纵切面显示以上异常回声位于右肾前方，上段呈迂曲管状结构，直至肾上极上方。提示右上腹囊性包块，多来自腹膜后，可疑囊性畸胎瘤。MRI检查提示：右侧中腹部可见一8.7 cm×7.2 cm的囊性病变，右肾前方中部受压，胰头受压前移，胆囊、胆囊管、左右肝管及胆总管形态如常。术前诊断：右侧肾上腺囊肿。入我院当日在全身麻醉下行腹膜后探查术。术中见一囊性包块，见图1，大小约12 cm×10 cm×6 cm自腹膜后沿腹主动脉及下腔静脉之间突入腹腔，包块将腹主动脉压向后侧，下腔静脉向右侧推移，十二指肠被推向左前方，囊肿下缘游离，上段至肝门处呈多囊性，有分隔，证实为腹膜后囊肿。术后应用抗生素预防感染。术后诊断：腹膜后畸胎瘤。病理结果：腹膜后囊性成熟性畸胎瘤伴局部神经组织分化。术后7d病愈出院。随访2年无复发。

注重心理心脏疾患的蔓延

心理心脏病学或精神心脏病学又称为双心医学（psycho-cardiacology），其研究心理疾患与心脏病之间的关系，即人的情绪与心血管系统疾病之间的深层次联系，以及控制这些心理疾患对心血管疾病治疗和转归的影响。Harold Wolff于1943年首先开展双心医学方面的工作，在心理免疫学、心理心脏病学和心理神经内分泌学领域进行了规范研究。1998年世界各地的数十位专家召开了心理心脏病学现状及共识大会，针对心理心脏病学的概念、研究方法及治疗进行了规范。此后，欧美地区多个大学和研究机构对心理心脏病学的相关课题，主要是心理疾患与心血管疾病的关系进行了广泛研究，并对干预和治疗进行了评估，促进了双心医学的快速发展。近年，国内心血管病专家对双心医学也日益重视，多个城市陆续开展了双心门诊和病房，提倡既要加强冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）的二级预防，又要干预精神心理障碍，从而达到身心协调，体现了疾病治疗过程中“以人为本”的现代医学理念。

“双心医学”模式在慢性心衰伴抑郁障碍患者中的应用

目的：探讨“双心医学”模式在慢性心力衰竭（心衰）伴抑郁障碍患者中的应用。方法采用PHQ-2和PHQ-9患者健康问卷对住院的慢性心衰患者进行问卷调查，选出符合条件的80例患者，随机分为常规组（40例）和干预组（40例）。常规组给予常规药物治疗，干预组在常规药物治疗基础上给予“双心医学”模式干预，3个月后再次测评，将干预组患者干预前后积分进行统计学分析。结果与常规组比较，干预组PHQ-9评分显著降低（P＜0.01），2组治疗后较治疗前左室射血分数（LVEF）、B型钠尿肽（BNP）、C反应蛋白（CRP）均明显改善（P＜0.05）。干预组治疗3个月后LVEF、BNP、CRP改善情况明显优于常规组。结论“双心医学”模式可在治疗慢性心衰的同时化解患者的心理问题，缓解抑郁情绪，达到心血管和心理双重治疗，改善患者预后，促进康复。