红景天对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用及对VEGF的影响

目的:探讨中药红景天对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用及其对血管内皮生长因子(EGF)蛋白和mRNA表达的影响.方法:52只SD大鼠随机分成单纯手术组、术后给药组、提前给药组、假手术组和正常对照组.采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,4周后处死动物.Ⅷ因子免疫组化染色后对各组大鼠梗死边缘区微血管进行计数;免疫组化技术及Western blot技术检测各组缺血心肌VEGF蛋白质水平表达变化;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测缺血心肌VEGF mR-NA表达变化.结果:术后给药组和提前给药组血管计数均较单纯手术组增多(P＜0.01),且提前给药组明显多于术后给药组(P＜0.01);术后给药组和提前给药组缺血心肌VEGF及其mRNA表达较单纯手术组增加(P＜0.01),提前给药组缺血心肌VEGF及其mRNA表达明显高于术后给药组(P＜0.01).结论:红景天能够促进心梗后大鼠缺血心肌血管新生,其作用机制可能与上调局部心肌VEGF及其mRNA表达有关.预给红景天可能增强对心梗大鼠的上述作用.

黄芩甙对重症急性胰腺炎保护作用的研究

目的:探讨黄芩甙对重症急性胰腺炎保护作用的机制.方法:45只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和黄芩甙干预组,每组15只.假手术组进腹后仅翻动胰腺和十二指肠后关腹,模型组采用3.5%牛黄胆酸纳逆行胰胆管注射造成重症急性胰腺炎大鼠模型,黄苓甙干预组在造模成功后给予黄芩甙治疗.观察各组大鼠术后胰腺的病理变化,术后3 h、6h、12h腹水及血清淀粉酶、脂肪酶的变化,测定胰腺组织MDA,SOD,TNF-α及IL-8的含量.结果:①在各时间点,模型组腹水量、血清淀粉酶、脂肪酶均较假手术组显著增加(p＜0.01);黄芩甙干预组腹水量、血清淀粉酶、脂肪酶均较模型组显著减少(p＜0.05),其中12 h组腹水量较6h组显著减少(p＜0.05);6h、12h血清淀粉酶、脂肪酶较3 h组显著降低(p＜0.05);②假手术组组织结构完整,无明显改变;模型组胰腺及周围有皂化斑的形成,胰腺水肿、出血,炎细胞浸润,胰腺组织结构破坏明显,有大片坏死区;黄芩甙治疗组和模型组比较显著改善;③在各时间点,模型组胰腺组织中MDA,TNF-α及IL-8含量较假手术组均显著升高,SOD显著降低(p＜0.05);黄芩甙干预组较模型组MDA,TNF-α及IL-8含量显著降低,SOD显著升高(p＜0.05).结论:黄芩甙可能通过降低氧自由基对组织的损害,抑制炎症因子的产生和释放起到保护胰腺组织的作用.

COX-2介导的TH2类细胞因子与重症肝炎的关系研究

目的:探讨重症肝炎与COX-2的关系,为临床防治重症肝炎提供新的治疗理论和方法.方法:用FH643A-γ测量仪检测50例肝病患者和25例正常对照血清中PGs代谢产物TXB2、6-keto-PGF1α的水平.结果:各组肝病患者血清中TXB2和6-keto-PGF1α的表达水平均明显高于正常人(P＜0.001),并且随着病情的好转,T/6-K比值明显下降,但肝痛患者各组间细胞因子水平无显著性差异(p＞0.05).结论:检测重症肝炎患者血清TXB2、6-keto-PGF1α的水平和T/6-K比值不仅对揭示肝病发生发展过程有一定的实用价值,而且对监测病情转归和预后有重要临床意义.

胃癌组织中P16蛋白的异常表达与临床病理学意义

目的:通过研究P16蛋白表达与胃癌发生及胃癌临床病理因素的关系,以探讨检测P16蛋白在胃癌诊断及判断胃癌恶性程度、估计预后和指导临床治疗的临床病理学意义.方法:采用免疫组化S-P法,检测100例胃癌与20例正常胃黏膜组织中P16蛋白表达情况.结果:P16蛋白在胃癌中表达率(36.0%)明显低于正常胃黏膜组织(85.0%)(P＜0.01);P16蛋白表达与肉眼类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移,TNM分期有关(P＜0.05);P16蛋白表达与患者性别、年龄、原发灶部位无关(P＞0.05).结论:检测P16蛋白的表达对辅助胃癌的诊断有很高的价值,并可作为判断胃癌恶性程度、估计预后和指导临床治疗的临床病理参考指标.

Survivin基因RNA干扰对肺癌细胞凋亡及增殖的影响

目的:探讨Survivin表达对肺鳞癌细胞的凋亡和增殖的影响.方法:利用siRNA阻抑人肺鳞癌细胞内survivin基因的表达,用RT-PCR和Western Blotting法分析survivin基因mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞集落形成实验检测细胞增殖.结果:(1)Survivin在肺癌细胞中表达.转染Survivin siRNA可在RNA和蛋白水平阻断其表达;(2)转染Survivin siRNA的肺癌细胞凋亡率显著增加;(3)转染Survivin siRNA的肺癌细胞的集落形成率显著降低.结论:阻断Survivin表达可通过增加细胞凋亡率和降低细胞增殖增加肺鳞癌细胞的放疗敏感性.

与小鼠胚胎发育相关新基因0610038D11Rik的研究

目的:初步分析与小鼠胚胎发育相关的新基因0610038D11Rik表达模式及生物学功能.方法:采用RT-PCR,全胚胎原位杂交和Northern Blotting技术对该基因进行表达谱分析;细胞免疫染色对其进行细胞结构定位.结果:全胚胎原位杂交结果显示0610038D11Rik在胚胎E9.5的端脑、间脑、菱脑和听泡处有较强的信号.随着神经管逐渐关闭,胚胎E10.5在背部神经嵴,神经管区也出现表达信号.E11.5时除了在上述部位表达外,心脏部位也检测到较弱的信号.RT-PCR和Northern Blot实验发现该基因在小鼠胚胎发育直至出生后均有持续性分布,并且在发育中后期的脑、心脏、肺、肾、肝脏,肌肉和舌等多种重要脏器广泛表达.细胞定位表明其主要集中在核内和细胞质中.结论:0610038D11Rik基因在小鼠的脑神经系统和多器官表达,提示该新基因可能在这些组织的发育过程中发挥重要的作用.

干扰素-γ对小鼠哮喘模型治疗的研究

目的:探讨IFN-γ对哮喘小鼠肺部过敏炎症的抑制作用.方法:30只6-8周龄清洁级BALB/c小鼠随机分成正常组、哮喘组和IFN-γ组,以卵白蛋白致敏激发制作小鼠哮喘模型.哮喘组每次激发前给生理盐水鼻内滴入,IFN-γ组每次激发前给IFN-γ鼻内滴入.以ELISA试剂盒测定血清IgE的水平,采血后取肺组织,作病理切片.结果:哮喘组小鼠病理改变与其它各组有明显区别,而IFN-γ组与正常组无明显区别.哮喘组血清IgE水平高于正常组、IFN-γ组,差异均有统计学意义(P＜0.05),但IFN-γ组与正常组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:IFN-γ局部滴入治疗可抑制小鼠肺部过敏性炎症反应,改善过敏性哮喘的症状,减少EOS在炎症处聚集,降低哮喘小鼠血清IgE水平,在哮喘治疗上有一定的前景.

SCD1在高脂饮食大鼠肝脏的表达及其与肝细胞凋亡的相关性

目的:探讨高脂饮食大鼠肝脏中硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)的表达及其与肝细胞凋亡的相关性.方法:30只SD大鼠随机分成正常组和高脂组,分别给予普通饲料和高脂饲料喂养.在实验的第8w,16w和24w分批处死,观察肝细胞组织学改变,RT-PCR方法检测SCD1和丝氨酸棕榈酰转移酶(serine palmitoyl transferase,SPT)mRNA的表达,TUNEL方法观察肝细胞的凋亡.结果:肝组织HE染色显示高脂组大鼠肝脏内肝细胞呈弥漫性脂肪变性,8w即达到脂肪肝的诊断标准.RT-PCR分析结果显示高脂组SCD1 mRNA表达下降,SPTmRNA表达进行性上升.TUNEL凋亡检测表明,随着高脂饮食时间延长,肝细胞凋亡趋于严重.SCD1表达与SPT和凋亡指数(AI)之间呈负相关,SPT表达和AI指数之间呈正相关.结论:长期高脂饮食可引起肝SCD1表达下调,同时促进细胞凋亡关键基因SPT的表达,肝细胞凋亡增多.

大鼠胰腺发育过程中AFP动态表达的意义

目的:探索大鼠胰腺发育过程中AFP动态表达的意义.方法:采用高密度寡核苷酸芯片对胚胎12.5天(E12.5)、E15.5、E18.5、初生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析.结果:AFP显著高表达于E18.5大鼠胰腺,AFP在胚胎期的动态表达趋势与胰腺功能细胞标志物以及可能介导AFP促细胞增殖效应的有关信号系统成员的表达趋势一致.结论:AFP在大鼠胰腺发育过程中动态表达的生物学意义可能在于参与胰腺发育调控.

依托咪酯对大鼠杏仁核点燃模型的抑制作用

目的:研究依托咪(Etomidate,ET)对大鼠杏仁核点燃发作的抑制及其抗癫痫作用.方法:测定ET对大鼠杏仁核点燃发作的脑电活动及行为变化指标的影响,测定ET对GABAA受体拮抗剂印防己毒素诱发小鼠惊厥的影响.结果:依托咪酯(6～9mg·kg-1)可抑制杏仁核点燃发作,缩短后放电时程,降低Racine's分级(P＜0.01);ET对GABAA受体拮抗剂印防己毒素致惊小鼠有抑制作用.结论:依托咪酯对大鼠杏仁核点燃模型和印防己毒素致惊小鼠均具有抑制作用,可能与GABA神经系统抑制作用有关.

椒目油对哮喘大鼠肺组织Fas/FasL表达水平和肺血管通透性的影响

目的:观察椒目油(zanthoxylum seed oil,ZSO)对支气管哮喘大鼠肺组织Fas/FasL表达水平和肺血管通透性的影响,为临床应用椒目油治疗哮喘提供实验证据和理论支持.方法:将雄性SD大鼠80只随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组和椒目油治疗组,每组各20只.以卵白蛋白(ovaibumin,OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型,以免疫组化ABC法检测肺组织中Fas/FasL蛋白的表达,伊文思蓝(evans blue dye,EBD)分光光度法检测肺血管通透性.结果:椒目油和地塞米松均能增强哮喘大鼠肺组织淋巴细胞表面Fas/FasL的蛋白表达;与哮喘模型组相比较,有统计学意义(P＜0.05).哮喘模型组大鼠肺内EBD浓度显著高于对照组(P＜0.01),而与哮喘组相比,椒目油和地塞米松均能显著缓解EBD的升高(P＜0.01).结论:椒目油可有效降低哮喘大鼠肺血管通透性,可能通过增强Fas/FasL蛋白表达而促进炎症局部淋巴细胞凋亡减轻哮喘气道炎症反应.

大鼠p75NTR荧光真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

目的:构建大鼠p75神经营养素受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)cDNA序列的绿色荧光真核表达载体并鉴定其在人胚肾293(human embryo kidney 293,HEK293)细胞中的表达.方法:采用PCR方法从含野生型大鼠p75NTR的pDC316-RP75质粒中扩增目的片段,经EcoRⅠ和SaⅡ双酶切,定向克隆于pEGFP-N1质粒中,构建绿色荧光真核表达栽体pEGFP-N1-RP75,经酶切及测序鉴定后,通过脂质体转染HEK293细胞,激光共聚焦及免疫组织化学法鉴定大鼠p75NTR的表达.结果:重组质粒经酶切鉴定和序列分析证实含有大鼠p75NTR的编码序列,转染后经激光共聚焦显微镜及免疫组织化学染色观察表明重组质粒能够在HEK293细胞中表达出具有活性的大鼠p75NTR片段.结论:大鼠p75NTR绿色荧光真核表达栽体构建成功并可在HEK293细胞中表达,为进一步研究奠定了基础.

小鼠下颌切牙胚发育的动态组织学观察

目的:牙齿发育生物学研究是当今口腔医学领域研究的热点,国内外对切牙胚发育机制的研究仍较少见.本研究时小鼠切牙胚发育过程进行动态观察,从细胞水平上了解切牙胚存在的时空位置和形态变化规律.方法:选取孕12、13、14、15、16、17、18天胎鼠及新生1、2、3天乳鼠,在体视显微镜下观察含有切牙胚的颌骨,并分离取得下颌骨,常规固定包埋,进行连续切片及HE染色,在光学显微镜下进行动态观察,了解切牙胚发育大小和形态的时空变化规律.结果:观察发现小鼠切牙胚位于下颌突内,牙胚由远中向近中斜向上前方走行,牙胚前端表面被一层矿化的硬组织覆盖;发现E13 d胎鼠切牙胚发育进入蕾状期,E16 d的胎鼠切牙胚处于帽状期,E18d的胎鼠切牙胚处于钟状早期,新生1 d的乳鼠切牙胚处于钟状晚期.结论:本实验明确了小鼠切牙胚发育的时空变化规律,为进一步阐明小鼠切牙胚发生发育机制奠定了重要的实验基础.

27个群体7个Y-STR基因座多态性的聚类分析

目的:选择具有高度多态性与稳定性的7个Y-STR位点,分析27个群体遗传关系.方法:应用Y-STR复合扩增方法,获得150名宁夏回族个体DYS19、DYS389Ⅰ、DYS389Ⅱ、DYS390、DYS391、DYS392、DYS393 7个基因座等位基因频率.收集国内外26个群体这7个基因座基因频率的数据.结果:应用这7个Y染色体STR的多态性研究结果显示:国内群体与朝鲜、韩国、日本的遗传关系较近,与几内亚、莫桑比克的遗传关系较远.结论:27个不同群体这7个Y-STR基因座多态性有明显的种族与地域差异,与三大人种的分类基本一致.

高血压糖尿病大鼠心脏肾上腺素受体的改变与心功能变化之间的关系

目的:研究高血压糖尿病大鼠心脏肾上腺素受体(AR)的改变与心功能变化之间的关系.方法:采用左肾动脉缩窄和注射链脲佐菌素制高血压糖尿病大鼠模型,放射配体结合实验和离体左心房收缩功能实验等方法观察心脏AR(β-AR和/或α1-AR)及功能的改变.结果:与正常对照相比,高血压糖尿病大鼠心脏β-AR的大结合容量(Bmax)增加35%(P＜0.01),KD值不变;且心脏α1-AR的Bmax也显著增加(P＜0.05).高血压糖尿病大鼠左心房与对照相比,β-AR介导的大收缩反应(Rmax)下降48%(P＜0.01),pD2值不变;α1-AR介导的大收缩反应也降低41%(P＜0.05),pD2值不变.结论:高血压糖尿病大鼠心脏β-AR和/或α1-AR数量代偿性增加,但其介导的大收缩反应降低,可能与受体后信号转导效应减弱有关.

多功能的钙/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ介导的细胞信号传导

钙调素(Calmodulin,CaM)是一个特别的对钙敏感的蛋白,在钙信号传导通路中扮演重要角色钙/钙调素依赖性蛋白激酶(Calcium/calmodulin-dependent kinases(CaMKs))与荷尔蒙、神经递质及其他信号引起的细胞反应相关作为重要的第二信使,钙/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaM-KⅡ)是一类在细胞中无所不在的表达的蛋白激酶,能维持细胞内的钙浓度在很低的水平,再增加后续的特定的钙激动刺激.钙/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ独特的全酶结构和自我调节的性质使其对短暂的钙信号和胞内钙的变化能做出延长反应.本文从结构、合成、细胞分布、反应底物、生理功能等方面介绍了钙/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ的激活对细胞信号传导的作用.

脂联素受体的研究进展

脂联素作为一种脂肪细胞因子具有维持能量代谢内稳态、调节免疫平衡、调控细胞增殖的作用.因此脂联素受体被认为是具有潜在应用价值的新靶点.随着研究的进展,人们对其结构特性、生物学功能、介导的信号转导通路以及表达调控有了更加深入的认识.在疾病过程中,脂联素受体含量以及功能的变化可以引起细胞对脂联素的敏感性发生改变,成为影响疾病发生与发展的重要机制之一;开发调控脂联素受体表达的药物并明确其作用的机制将会有力地促进对代谢紊乱和心血管疾病的防治.

危重病多发神经病与危重病肌病的研究进展

危重病多发神经病(CIP)与危重病肌病(CIM)是重症监护病房(ICU)中患者重要的并发症,是机械通气病人撤机困难的主要原因之一.但由于其诊断困难,一定程度上阻碍了对CIP和CIM的研究,使之成为临床上棘手的问题.随着电生理学的进展,其发病机理得到了初步认识.本文围绕CIP和CIMD的发病机制、临床表现和鉴别诊断作一综述.

营养因子调控脑缺血后内源性神经发生的研究进展

目前成年神经发生的调节机制及其在脑缺血后功能修复中的作用尚不清楚,研究表明神经发生受体内外多种信号分子的调控,许多内源性营养因子影响脑缺血后神经干细胞的增殖、迁移和分化.本文就多种营养因子对脑缺血后内源性神经发生的调控研究进展和存在的问题作一综述.

钙释放激活钙通道研究进展

库操纵的钙(Store Operated Calcium,SOC)进入参与许多重要Ca2+信号生理过程,如细胞分化和凋亡虽然SOC的许多生物物理特性被表述,但研究清楚的是钙释放激活的钙(Ca2+ release-activated Ca2+,CRAC)通道.近通过RNA干扰技术在果蝇和哺乳动物细胞上鉴定出CRAC通道的两个组成蛋白STIM1和Orail细胞静息时,STIM1均匀分布在内质网膜(ER)上.一当钙库耗竭,ER上STIM1会聚集迁移到细胞膜下,相比而言,Orail是一个形成CRAC通道孔的四次跨膜蛋白.有报道说STIM1作为ER上一个Ca2+感受器向细胞膜传导钙库耗竭信号.虽然钙库耗竭激活CRAC通道的过程在近的研究中被定量描述为四个步骤,但还有很多细节仍然不清楚.如STIM1是如何感受钙库耗竭而导致其发生聚集的不清楚,又如STIM1是如何定位到细胞膜下又如何传导信息的不清楚,STIM1和Orai1直接到底是如何相互作用的等都有待进一步的研究.本文对CRAC通道的研究历史和新进展进行了讨论.

肾移植术后巨细胞病毒感染的诊治进展

肾移植术后长期大量的使用免疫抑制药物,使患者的细胞免疫、体液免疫均受损,特别是细胞免疫受损更为严重,因而增加了各种感染的机会.感染时间以术后2～4月多见.感染病原茵有细菌、病毒、真菌及卡氏肺囊虫等,常常为混合感染.其中病毒感染以巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)多见,且CMV感染是降低受者和移植肾存活率的重要因素.本文就肾移植术后巨细胞病毒感染的诊治作一综述.

胃癌相关MicroRNA的研究

microRNA是一种内源性的大小在20nt左右的一类非编码RNAs,其通过下调靶基因的表达或翻译而参与调节细胞的发育、增殖、分化、凋亡.近期研究发现microRNA具有癌基因和抑癌基因的作用,已发现miR-21,miR-191,miR-223,let-7a microRNA,miR-106b-25亚群等与胃癌的发生,let-7 microRNA,miR-155与胃癌的侵袭与转移相关,miR-15,miR-16则参与胃癌的耐药机制.对其相应的调控机制和靶基因E2F1,PRL-3,HMGA2,BCL-2等的研究也已有了一些进展,为胃癌的研究开辟了一条新途径.本文就胃癌相关MicrRNA的研究进展予以综述.

PIAS蛋白家族的功能

PIAS(protein inhibitor of activated STAT)蛋白家族能够与许多蛋白质发生相互作用,其中大部分为转录因子.通过相互作用,PIAS蛋白通过影响了蛋白的活性和功能,参与基因的转录调控和包括STAT(Signal transducer and activator of transcription),Wnt,TGFβ,NF-κB等通路在内的细胞信号通路,具有重要的生理功能.PIAS蛋白的调控机制主要有两种:一种是通过其自身所具有的SUMO(small ubiquitin-related modifiers)E3连接酶活性,促进对一些转录因子、转录辅因子的化学修饰,尤其是SUMO化修饰,从而调控它们的转录活性;另一种是作为构架蛋白,为蛋白质之间的相互作用提供平台,促进细胞信号通路复合物或基因转录复合物中其它调节蛋白的去除和募集,并涉及到靶蛋白的亚核定位.同时,针对不同的靶蛋白,PIAS蛋白的上述两种作用机制并不是完全互相排斥的,这体现了PIAS蛋白功能的特异性和复杂性.本篇综述将就上述内容作一介绍.

磷脂酰肌醇4,5二磷酸对TRP家族离子通道的调节作用研究进展

磷脂酰肌醇4,5二磷酸(PIP2)是细胞膜中的一种磷脂类信号分子,其在细胞膜中的含量处于动态变化之中.PIP2可以被PLC(phospholipase C)分解为IP3(inositol trisphosphate)和DAG(diacylglycerol),这两者作为信号分子又可以与胞内或细胞膜上的许多蛋白质发生相互作用.近研究发现很多种离子通道被认为和PIP2之间存在着相互作用,TRP(transient receptor potential)家族就是其中一类.有一些TRP通道需要PIP2来行使功能,而PIP2对另外一些TRP通道却起抑制作用.Ca2+经由激活的TRP通道进入细胞后反过来又可以影响到细胞膜上的PIP2水平.本文着重回顾PIP2和TRP家族的离子通道之间的研究进展情况.

冠心病和高血压病的免疫机制进展

冠心痛和高血压病的发病机制比较复杂.近来的一些研究已证实,在冠心病和高血压病的病程进展中,包括靶器官损害、动脉粥样硬化形成、急性冠脉综合征的发生、缺血性心脏损害的进展等方面,免疫系统的激活包括自身免疫反应起着重要作用.冠心病和高血压病的免疫机制研究进展可能为其提供新的治疗措施.

微创技术在腰椎固定、融合术中的临床应用

近几年来,随着脊柱基础研究的发展以及各种新理论、新方法、新技术相继出现,微创技术在,临床中治疗各种腰椎疾患取得了很大进步.脊柱微创外科,具有创伤小、出血少、术后疼痛轻、恢复快等优点,受到腰椎疾病患者的欢迎.目前用于腰椎椎间融合的微创手术方法有前路腰椎椎体间融合术、后路腰椎椎体间融合术、经椎间孔腰椎椎体间融合术、极外侧椎体间融合术、轴向椎体间融合术以及多种微创技术联合应用.不同微创技术各有其优缺点,具有不同手术适应征,在临床应用中需要根据腰椎疾患的具体特征,选用合适的腰椎微创手术,以达到佳临床效果.本文从腰椎微创手术入路改进、手术器械的创新以及在临床应用的效果方面作一综述.

生物信息学方法在基因芯片数据功能分析中的应用

基因芯片技术是当前功能基因组研究的重要工具.基因功能分析是将基因表达数据与基因功能或生物学通路相联系,寻找有意义的变化基因.本文介绍了GO分类法、信号通路和生物调控网络等常用的基因功能分析方法和工具.

线虫碳纤检测研究

目的:记录线虫神经细胞单个突触囊泡的释放.方法:碳纤电极安培测量法已经被证明足够灵敏来检测单个囊泡的量子化释放.本实验就是采用的碳纤电极安培测量法在原代培养的线虫NSM神经细胞上检测单个囊泡的量子化释放.结果:使用实验室自制的低噪声检测优化的碳纤维电极,能在不同的时间记录到尖刺样的瞬变电流.结论:用碳纤维电极检测单个突触囊泡是可行的.

CHO-K1细胞中基因瞬时转染的条件优化

目的:以CHO-K1细胞为宿主基因瞬时转染条件的优化.方法:以GFP(Green Fluorescence Protein)为报告基因,考察了DNA∶PEI比例、DNA用量及血清的加入对CHO-K1细胞的转染效率和细胞数目的影响.结果:DNA∶PEI=1∶2(w/w)、2 gDNA/106 cells时,转染结果优;血清的加入可降低细胞转染效率.结论:在CHO-K1细胞中进行瞬时转染的佳条件为DNA∶PEI=1∶2(w/w)、2 gDNA/106 cells,及血清的加入抑制细胞转染.

数值解法研究生物膜泡形状

目的:研究生物膜泡的可能形状.方法通过数值解法中的打靶法,运用Mathematica软件进行编程.结果:获得与Udo Seifert计算基本相符的图,得到了相应的生物膜泡形状,包括双凹圆盘,长椭球和扁椭球等,且获得了新的形状.结论:本法提供了一种相对精确的寻找膜泡的方法.

白藜芦醇体外对肝癌HepG2细胞分化及P21WAF1/CIP1表达的影响

目的:探讨白藜芦醇(Resvratrol,Res)在体外对肝癌细胞分化及相关周期蛋白依赖激酶抑制因子P21WAF1/CIP1的影响.方法:体外培养肝癌HepG2细胞.用MTT法检白藜芦醇对HepG2细胞的生长抑制作用,用倒置显微镜观察肝癌细胞的形态改变,用放射免疫法检测其AFP分泌.以RT-PCR方法检测HepG2细胞中P21WAF1、CIP1mRNA的表达,用免疫细胞化学检测其P21WAF1、CIP1蛋白的表迭.结果:白藜芦醇呈时间剂量性抑制HepG2细胞株的增殖,使其亚细胞结构趋于正常,AFP分泌量下降,并显著上调HepG2细胞中P21WAF1/CIP1 mRNA和蛋白的表达.结论:白藜芦醇能诱导HepG2细胞在体外向正常肝细胞分化,并上调其P21WAF1/CIP1的表达.

一株产槲皮素类色素的银杏内生真菌的研究

从银杏树根中分离出70余株内生真菌.将它们置于马铃薯葡萄糖(PD)液体培养基中培养,发现其中一株(Gh01)能产生橙黄色色素.经过化学反应及HPLC检测证明该橙黄色色素为槲皮素类糖苷.这是关于内生真菌产槲皮素类糖苷的首次报道.本文深入探讨了碳源,氮源,金属离子,初始PH及培养温度对色素产量的影响.PD液体培养基的适培养温度和初始PH分别为28℃和7.0.正交设计结果显示:适碳源和氮源分别为20g/L葡萄糖和5g/L蛋白胨.增加1g/L的氯化锌可提高色素产量.在适培养条件下连续培养120h色素的产量可达到27.515g/L.

免疫纳米荧光微粒的制备和在中药研究中的应用

目的:制备免疫纳米荧光微球(Immunologic Nano-Fluorescence beads,INFB)并对其粒径和功能进行了研究.方法:应用纳米生物技术、免疫学技术和现代细胞生物学研究技术进行研究.选用K562细胞和Hela细胞为靶细胞,经INFB作用48 h后,MTT法检测各组OD值.选用苏木、大血藤、秦巴西菇水提液和茶多糖诱导脐血单个核细胞,用INFB标记,FACS检测结果.结果:扫描电镜显示,荧光微球粒径平均为136.9nm.MTT结果显示,各实验组数据与对照组比较,无统计学意义(p＞0.5),表明INFB对所选靶细胞无生物毒性作用.中药有效成分诱导人脐血单个核细胞后,CD34、CD33、CD14、CD119、CD19、CD4阳性细胞的数值,呈现剂量依赖关系,经统计学分析,药物浓度与检测的靶细胞数量呈现良好的线性关系(r=0.745376～0.986402).结论:INFB可用于医学检验学、免疫学标记和中药活性成分的靶向作用研究等领域.

31p磁共振波谱物质检测准确性的验证研究

目的:评价1.5T磁场下31PMRS磷化合物检测的准确性.方法:以卵磷脂为参照标准品,对照研究对同一位正常志愿者骨骼肌肉磷谱代谢特征,对其股骨下端先后行两次相同参数、相同条件状态下的31P波谱检测,第二次检测时在感共趣区内体外加入卵磷脂标准品,对比两次检测的结果变化.结果:对同一位正常志愿者先后两次进行渡谱检测,加入卵磷脂后各代谢物波谱变化为β-ATP:-24.46,α-ATP:+82.61,γ-ATP:-32.89,PCr:+64.32,Pi.+110.5,PDE:+462.57,PME:+15.71.加入卵磷脂后,PDE峰改变明显.结论:1.5T磁场下31P MRS能准确检测体内化合物的存在及其定量分析,研究结果可信.

词汇识别的ERP研究

词汇识别即词汇的意义获得.作为一种独特的电生理研究手段,事件相关电位(Event-related potentials,简称ERP)对词汇识别的研究为揭示语言加工的脑机制提供了直观的证据.该文介绍了对词汇识别敏感的N400、RP、PMN等脑电成分,从词汇通达和词汇歧义消解两个角度出发,对比了关于词汇通达中形、音的作用以及词汇歧义消解中语境作用等问题的不同观点.在此基础上,分析总结了ERP研究词汇识别的特点,提出了有待于研究的问题.

视觉中文词汇识别的整体优先效应和词内核证原则:来自ERPs的证据

目的:以视觉的汉语真假双字词为材料,用词汇判断任务考察词汇加工过程与表征的关系.方法:记录了16名被试者的行为数据和ERPs数据.结果:①真词的反应时间显著短于假词.②真词和假词均诱发了明显的N1、P2、N2、P3、N400、P600成分.③假词的N2波幅显著大于真词;假词的P3波幅、潜伏期显著小于真词.④假词的N400波幅显著小于真词,假词减真词的差异波波幅表现出显著的半球效应,左半球大于右半球.⑤假词的P600潜伏期显著长于真词.结论:N2、P3成分分别反映了词汇认知加工早期对心理表征的匹配和评价、注意的分配;N400、P600成分分别反映了词汇认知加工晚期词素之间的语义冲突和词素之间语义、句法等关系的整合.研究结果证明了中文双字词识别的整体优先效应和词内核证原则,支持了词汇后加工的观点,为假词反应时长于真词提供了电生理证据.

抑郁症与自杀

自杀是一种社会现象也是医学问题,自杀意念是抑郁症主要症状之一,抑郁症与自杀之间存在密切的关系,抑郁症患者甚至视自杀为一种解脱.本文从社会文化的角度探讨抑郁症病患自杀的原因与特征,旨在有效识别抑郁症患者的自杀倾向,及早防护,降低抑郁症患者自杀率,同时丰富我国抑郁症研究的医学社会学内容.

Hela基因周期表达数据聚类及功能分析

目的:进一步了解与宫颈癌相关基因的功能以及作用关系.方法:根据Hela基因周期表达数据的时序特点,提出了KLCC聚类法.该方法以K-means法为平台,以基因问的局部相关系数(Local Correlative Coefficient,LCC)为相关性测度,并对K-means法进行了相应的改进,根据基因间的相关关系,分批对基因聚类.结果:在对Hela基因周期表达数据的聚类分析中,得到9个显著的功能类,其中有3个与肿瘤紧密相关,具有优于当前常用算法的性能.结论:KLCC法能够有效地识别Hela基因周期表达数据中的局部相关和异步相关,并对其进行功能显著的聚类,为宫颈癌的基因治疗提供参考和依据.

腹主动脉瘤的流固耦合分析方法研究

目的:将流固耦合分析方法运用于血流动力学的研究,可以获得更加准确的结果,为临床诊断和治疗提供有效的指导.方法:本文运用ANSYS和CFX对腹主动脉瘤(Abdominal Aortic Aneurysm,AAA)进行流固耦合模拟分析,以便获得动脉瘤的血流速度和瘤壁的应力分布,判断易破裂危险区域.结果:实验结果表明,本例的腹部主动脉瘤应力峰值位于瘤体颈部.结论:流动和壁面切应力分布揭示动脉瘤颈部为破裂的危险区域.

内生黄曲霉对丹参悬浮细胞氧化酶活性的影响

目的:研究内生黄曲霉对丹参悬浮细胞次生代谢相关氧化酶活性影响,探讨丹参组织培养和次生代谢产物产生的有效诱导途径和诱导机理.方法:将丹参内生黄曲霉以活菌、发酵茵液及制作成诱导子方式分别添加到丹参悬浮细胞中,测定丹参悬浮细胞过氧化物酶、过氧化氢酶及多酚氧化酶活性.结果:不同处理方式,内生黄曲霉对丹参悬浮细胞氧化酶表达均有明显的诱导作用,其中将黄曲霉制作成诱导子对三种酶活诱导作用明显.结论:内生黄曲霉诱导子能有效提高丹参悬浮细胞氧化酶活性.

维生素E琥珀酸酯的合成及表征

目的:合成维生素E琥珀酸酯并对其进行表征.方法:以d,1-α-生育酚和丁二酸酐为原料,吡啶为溶媒,合成了维生素E琥珀酸酯.采用紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振氢谱和差示扫描量热分析对产物进行表征.结果:经验证,成功合成了维生素E琥珀酸酯.结论:成功合成了维生素E琥珀酸酯.

黄芪总皂苷的纯化工艺

目的:优化黄芪总皂苷的纯化工艺.方法:以总皂苷含量为指标,采用均匀设计法对黄芪总皂苷的纯化工艺参数进行优化.结果:佳纯化工艺条件为:药液浓度为1 g原生药/ml,加入氢氧化钠至5%,加入水饱和正丁醇动态萃取2次,每次1.25倍量,加5%氢氧化钠溶液1倍量动态洗涤1次,加水1倍量动态洗涤2次,调节正丁醇溶液pH至中性.优化条件下的验证试验得到的黄芪总皂苷含量平均值为65.23%(n=3).结论:建立的黄芪总皂苷的纯化工艺稳定、可行,适合放大生产.

芍药甘草汤"酸甘化阴"配伍的化学内涵研究初探

目的:探讨芍药与甘草"酸甘化阴"配伍的化学内涵.方法:①薄层色谱法对比分析芍药甘草配伍前后不同极性提取部位化学成分的变化.②反相高效液相色谱法对芍药与甘草配伍前后主要化学成分芍药苷、甘草酸进行含量测定并比较煎出率.结果:①芍药与甘草配伍前后水提液的不同极性溶剂提取部位进行薄层色谱定性分析结果表明,总体成分在配伍前后无明显变化,未发现新物质的产生;②高效液相检测结果表明,芍药配伍甘草能够促进芍药苷、甘草酸的煎出.结论:芍药配伍甘草不产生新的物质,但时其中一些主要化学成分的煎出有一定的影响.

青岛崂山药用植物资源多样性调查

目的:为有效保护和合理利用青岛崂山药用植物资源提供科学依据.方法:实地考察青岛崂山药用植物资源,对有较高药用价值的种类从药用部位和基本药用功能角度进行了归类.结果:青岛崂山的珍贵药用植物种类达330种,且在药用部位和药用功能方面表现出了丰富的多样性.结论:青岛崂山是具有多样性的药用植物资源宝库,并提出了保护和利用建议.

旋转磁场对60Coγ射线放射损伤小鼠肺损伤影响

目的:探讨旋转磁场对放射损伤小鼠肺损伤的影响.方法:132只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组(N),单纯磁疗组(M),单纯照射组(R)和照射磁疗组(R+M)4组,R组和R+M组小鼠接受吸收剂量6.0Gy的60Coγ射线全身一次照射,M组及N组不予以照射,M组及R+M组予以磁场处理30 d,每天2次,每次1.5 h,分别于第9,23、30 d测定小鼠湿肺羟脯氨酸含量,并进行小鼠肺光镜、电镜超微结构的观察.结果:N组和M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点上都低于R组和R+M组,有明显差别(P均＜0.05).R组和R+M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点均无明显差别(P均＜0.05).苏木精-伊红染色结果显示,N组肺组织结构正常;照射后d9,R组及R+M组肺泡壁轻度增厚,普遍肺毛细血管扩张、充血,少量淋巴细胞、中性粒细胞浸润.小鼠肺组织透射电镜观察结果显示,照射后d30,N组及M组肺间质胶原纤维正常无增生;R组及R+M组肺可见肺间质胶原纤维较N组及M组明显增多,但R+M组与R组比较差别不明显.结论:6.0Gy的60Coγ射线照射后小鼠的肺受到了损伤,但磁场没有加重这种损伤且磁疗对正常小鼠无明显肺损伤.

旋转恒定磁场对大鼠血清中铁代谢相关蛋白的影响

目的:观察旋转恒定磁场对大鼠血清中铁代谢相关蛋白的影响,为深入认识磁场的多方面生物学效应提供依据.方法:将SD大鼠随机分为对照组和曝磁组.后者在磁场强度是0.4 T、频率为8.97 Hz的环境中每天曝磁1次,每次2 h,连续处理30 d后处死分组大鼠,获得血清,冻存后测定血清中铜蓝蛋白活力和总抗氧化能力、铁蛋白和乳铁蛋白含量等指标.结果:曝磁组大鼠血清中铜蓝蛋白活力与对照组大鼠相比没有显著性变化;总抗氧化能力有了显著性的提高(P＜0.05);铁蛋白含量有显著性的降低(P＜0.05);乳铁蛋白含量有显著性的降低(P＜0.01).结论:磁场对大鼠血清中铁代谢的部分相关蛋白存在影响.

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