现代生物医学进展杂志
Progress in Modern Biomedicine 현대생물의학진전
- 主管单位： 黑龙江省卫生厅
- 主办单位： 黑龙江省森工总医院 哈尔滨医科大学附属第四医院
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1个月内
- 国际刊号： 1673-6273
- 国内刊号： 23-1544/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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常规磁共振成像结合磁共振波谱在临床脑胶质瘤诊断及鉴别诊断中的应用价值
目的:分析磁共振氢质子磁共振波谱(Proton Magnetic Resonance Spectroscopy,1H-MRS)的特征与脑胶质瘤病理分级的相关性,探讨氢质子磁共振波谱及常规磁共振成像(Magnetic Resonance Imaging,MRI)联合应用在提高脑胶质瘤的临床诊断中的应用价值.方法:脑胶质瘤(经临床手术证实及病理诊断确诊)患者34例,参照国际卫生组织诊断标准,分为低级别胶质瘤组及高级别胶质瘤组.其中,低级别组16例,高级别组18例,在行常规MRI检查的同时,配合1H-MRS检查,测NAA(N-乙酰天门冬氨酸)、Cho(胆碱)、Cr(肌酸)值,在不同级别胶质瘤、同级别胶质瘤不同位置的代谢物进行综合分析.结果:在获得常规MRI图像并进行诊断后,进行氢质子磁共振波谱检测分析:在低级别胶质瘤及高级别胶质瘤患者中,Cr(肌酸)的总量变化不大,有轻度的下降；而NAA(N-乙酰天门冬氨酸)下降程度较为明显；Cho(胆碱)则明显升高.低级别胶质瘤及高级别胶质瘤患侧的肿瘤组织同对侧的正常脑组织的各种代谢物及其比值(Cho、NAA、NAA/Cho、NAA/Cr值)具有显著性差异(P＜0.05)；低级别胶质瘤及高级别胶质瘤的肿瘤组织的代谢物比值NAA/Cr、NAA/Cho值差异具有显著性(P＜0.05).低级别胶质瘤及高级别胶质瘤的Cho/Cr、NAA/Cho、NAA/Cr值与脑胶质瘤的病理分级具有相关性；在各个比值中,NAA/Cr与NAA/Cho值能够较好地反映脑胶质瘤的病理分级,二者的值呈现负相关；Cho/Cr值呈正相关.结论:常规MRI联合1H-MRS在脑胶质瘤的诊断中,能够有效提高准确性,在临床评估脑胶质瘤的分级、确定范围和鉴别诊断都具有重要的指导作用.
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冠状动脉介入治疗非透析终末期慢性肾脏病患者的临床疗效分析
目的:探讨冠状动脉介入(PCI)治疗非透析终末期肾脏病患者的临床疗效及预后.方法:回顾性分析7例确诊为冠心病并进行PCI治疗的慢性肾脏病5期患者的临床资料,重点分析对比剂肾病(contrast-induced nephropathy,CIN)的发生和转归.结果:所有患者血管病变程度均较重,除第1例患者外均为多支病变,介入治疗只对一部分狭窄病变进行了干预.5例术后需要透析治疗,其中有3例出院时仍不能脱离透析.所有术后没有接受规律透析的患者均表现出血肌酐升高且超过44.2μmol/L.所有出院前脱离透析的患者,血肌酐水平恢复到介入前水平.所有患者均服用双联抗血小板药物并接受低分子肝素皮下注射,无严重出血事件发生.7例患者均在病情稳定后出院.结论:终末期非透析慢性肾疾病患者进行冠脉介入治疗,CIN发生率接近100％,水化、等渗造影剂和预防性透析的采用,对这些患者仍具有保护作用.介入前的肾功能是决定患者术后是否需要长期透析的主要因素,对比剂比值越高,术后脱离透析的可能性越小.
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神经传导速度对糖尿病痛性周围神经病的诊断价值
目的:探讨糖尿病痛性周围神经病的神经传导特点及神经传导速度在糖尿病痛性周围神经病中的诊断价值.方法:对18例痛性周围神经病患者进行病史采集及神经系统查体.采用肌电诱发电位仪,测定患者的正中神经、尺神经、胫神经、腓总神经及腓肠神经的运动感觉神经传导速度.结果:18例患者中男性13例,女性5例.年龄40-89岁.主要表现为双足烧灼样、针刺样、过电样疼痛.神经系统查体:针刺觉减弱7例,痛觉过敏3例,音叉震动觉减弱12例,跟腱反射减弱/消失15例.18例患者中有14例神经传导速度检查结果异常,腓肠神经感觉神经检查结果异常率高,83.3％,对诊断有帮助.结论:糖尿病痛性周围神经病变出现疼痛症状时已经存在大纤维受累,故神经传导速度异常阳性率高.神经传导速度不能早期发现糖尿病痛性周围神经病,探索一种简单易行的早期筛查方法意义重大.
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甲型H1N1流感临床特征与诊疗研究
目的:探讨我国本土新型甲型H1N1流感临床特征和诊疗经验.方法:310例新型甲型H1N1流感确诊病例为对象,进行前瞻性临床诊治研究.结果:本组患者以青少年为主,主要症状体征包括发热(98.4％)、咳嗽(85.2％)、咽痛(60.3％)、咽部充血(96.1％)和扁桃体肿大(50.3％).总体预后良好.约20％患者在疾病初期白细胞降低.68.7％患者C-RP升高、75.8％患者血清铁降低.31.3％患者CK升高.危重患者可出现低钾血症.肺部炎症恢复滞后于临床症状恢复.年龄≤10岁和奥司他韦在起病48小时后服用是H1N1流感病毒清除延迟的独立影响因素(P＜0.01).结论:新型甲型H1N1流感发病以青少年为主,多数病情温和,C-反应蛋白和血清铁变化与病程相关,早期服用奥司他韦能较快清除病毒.
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活肾汤辅助治疗老年稳定型心绞痛的临床研究
目的:观察活肾汤辅助治疗老年稳定型心绞痛的临床疗效及其安全性.方法:90例老年稳定型心绞痛患者被随机分成两组,对照组予常规西药治疗,治疗组在对照组基础上加用中药活肾汤治疗,观察和比较两组治疗前后患者每周心绞痛发作的次数、疼痛程度、持续时间及硝酸甘油的消耗量,临床疗效,心电图疗效及不良反应的发生情况.结果:治疗组的临床总有效率和心电图总有效率分别为91.1％和82.2％,均明显高于对照组,分别为68.9％和66.7％(P＜0.05).治疗8周后,两组患者每周心绞痛发作次数和硝酸甘油消耗量均较治疗前显著减少(P＜0.05),且治疗组患者每周心绞痛发作次数和硝酸甘油消耗量均较对照组显著减少(P＜0.05).两组不良反应的发生率比较无统计学差异(P＞0.05).结论:活肾汤辅助治疗老年稳定型心绞痛可显著提高常规治疗的临床疗效,且不增加不良反应的发生.
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全胃切除术后四种消化道重建方式的对照研究
目的:全胃切除术后常常会发生明显的营养不良、各种术后不良症状以及生活质量的下降.本研究通过对比全胃切除术后四种消化道重建方式,探讨全胃切除术后理想的消化道重建术式.方法:选取自2007年11月至2011年3月间我院行全胃切除术治疗胃癌患者196例,分为A组(行功能性空肠间置代胃术)、B组(P型空肠间置代胃术)、C组(P型Roux-en-Y空肠代胃术)、D组(改良Longmire法空肠代胃术)4种消化道重建术.比较4组患者手术时间、出血量、住院时间和死亡率以及术后1年生活质量、营养状况和术后并发症情况.结果:4组患者在平均手术时间、出血量、住院时间和死亡率方面无明显差异(P＞0.05).A组患者倾倒综合征、反流性食管炎、Roux-en-Y滞留综合征发生率分别为2.1％(1/48)、4.2％(2/48)和2.1％(1/48),均显著低于其他3组(均P＜0.05).术后1年生活质量(Visick分级指数)的比较,A组明显优于其他3组(均P＜0.05).术后1年营养预后指数(PNI)分别为55.40± 3.6,52.30± 2.8,41.5±4.3和40.7±5.5,A组和B组明显高于C组和D组(P＜0.05),A组和B组组间数据差异无统计学意义(P＞0.05),C组和D组组间数据差异无统计学意义(P＞0.05).结论:全胃切除术术后消化道重建应保持空肠的连续性并保持摄入食物通过十二指肠.功能性空肠间置代胃术安全可靠,对于减少全胃切除术后并发症的发生率,提高生活质量和营养状况有着重要的意义.
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霉酚酸酯和环磷酰胺治疗表现为肾病综合征的紫癜性肾炎的疗效比较
目的:观察霉酚酸酯和环磷酰胺治疗表现为肾病综合征的紫癜性肾炎的临床疗效.方法:将我科2001年6月至2011年6月的42例表现为肾病综合征并确诊为紫癜性肾炎的患者随机分为两组:一组用激素联合霉酚酸酯,另一组用激素联合环磷酰胺,治疗3、6、9个月,分别观察两组患者的临床疗效,并比较治疗前后24h尿蛋白定量、尿红细胞计数、血浆白蛋白变化.结果:治疗3、6、9个月临床完全缓解率霉酚酸酯组与环磷酰胺组分别为38.1％和33.3％、61.9％和47.6％、80.9％和66.7 ％(P＞0.05)；临床部分缓解率霉酚酸酯组与环磷酰胺组分别为42.8％和38.1％、28.6％和33.3％、14.3％和23.8 ％(P＞0.05)；总缓解率(完全+部分缓解)霉酚酸酯组与环磷酰胺组分别为80.9％和71.4％、90.5％和80.9％、95.2％和90.5 ％(P＞0.05).治疗6、9个月时尿蛋白缓解率霉酚酸酯组高于环磷酰胺组,分别为80.6％与53.8 ％(P＜0.05)、和91.2％与66.4 ％(P＜0.05).治疗3个月后两组肉眼血尿均消失,治疗6个月时血尿缓解率霉酚酸酯组高于环磷酰胺组(67.9％与38.7％,P＜0.05)；9个月时两组血尿缓解率相近(93.5％与90.8％,P＞0.05).霉酚酸酯组8例出现不良反应,包括胃肠道反应、上呼吸道感染和轻度肝损害.环磷酰胺组12例出现不良反应,包括胃肠道反应、白细胞下降、轻度肝损害、上呼吸道感染和脱发.结论:霉酚酸酯和环磷酰胺联合中等量激素治疗表现为肾病综合征的紫癜性肾炎临床完全缓解率均较高,但前者在缓解蛋白尿和血尿方面更有优势,且不良反应较少.紫癜性肾炎对激素和免疫抑制剂敏感,预后良好.
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脾切断流术围术期患者外周血淋巴细胞的变化及免疫功能的研究
目的:本实验旨在探讨脾切除门奇静脉断流术后患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞的变化,评估患者的抗肿瘤免疫能力是否有所影响,及机体的免疫系统有何变化.方法:选择择期行脾切除门奇静脉断流术的肝硬化患者20名,给予全凭静脉麻醉.分别于麻醉前(T0)、切皮前(T1)、脾切除即刻(T2)、脾切除后1h(T3)、手术完毕(T4)、手术后1d(T5)、手术后7d(T6)时抽取病人外周静脉血2mL,采用流式细胞仪测定CD3+、CD4+、CD8+、CD19+B细胞、CD3-56+(NK细胞)绝对数量.结果:与麻醉前相比,切皮前CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD19+B细胞、NK细胞均明显的降低,而在脾脏切除即刻各系细胞又明显恢复,基本与麻醉前水平相当.然而随着手术继续,在脾脏切除后1h,仅B细胞低于术前,一直持续到手术完毕,但是,此时B细胞与麻醉前比已没有统计学差异.手术完毕时T、B细胞和NK细胞再次降低,但仍明显高于切皮前水平.手术后1d时,CD4+T细胞与NK细胞仍然低于麻醉前,CD3T细胞、CD3+CD8+T细胞和B细胞已经恢复到麻醉前水平.术后7d时,CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞及B细胞不仅得到恢复,而且还比麻醉前明显升高,但是NK细胞仍与麻醉前的水平相当.结论:异丙酚联合瑞芬太尼麻醉对门脉高压患者行脾切除门奇静脉断流术患者的T、B淋巴细胞和NK细胞有快速、短期的降低作用,术后7d人体淋巴细胞数量不仅得到恢复,并且反馈性地升高,提示脾脏切除手术能够有效提升患者的免疫细胞数量.
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老年男性慢性心衰患者在标准化抗心衰治疗后血浆脑利钠肽水平的分布及其影响因素
目的:探讨老年男性慢性心衰患者在经过标准化抗心衰治疗后的血浆脑利钠肽水平的分布及其影响因素.方法:选取我院高干病房心内科65例老年男性慢性心衰患者,收集患者一般资料、入院后检查结果及药物治疗情况,包括:年龄、有无心衰相关性疾病(高血压、糖尿病、冠心病、肾功能不全)、入院时心率、血压,入院后血肌酐、电解质、胸片有无肺淤血、超声心动图指标(ESV,EDV,EF)、出院前血浆BNP水平以及住院期间的药物治疗情况(主要指β-受体阻滞剂,ACEI或者ARB,强心剂、利尿剂等).住院期间给予标准化抗心衰治疗并在出院前检测血浆BNP水平,按BNP水平将患者分成高BNP组(BNP＞463 pg/ml)和正常BNP组(BNP≤ 463 pg/ml),比较两组间各研究因素分布有无差异,并对BNP水平与各因素之间的相关性进行统计分析.结果:经过标准化抗心衰治疗,出院时高BNP组患者44例(67.69％),这部分患者更多的伴有血压低、心率快、高肺动脉压、肺淤血的胸片表现.同时还发现高BNP组的患者中房颤及冠心病的发病率也偏高.对BNP的影响因素进行多元线性回归分析后得出房颤、低收缩压、肺淤血、高肌酐为出院时高BNP水平的影响因素.结论:在不同BNP分组中多个研究因素的分布有显著统计学差异,提示老年男性慢性心衰患者伴有低血压、房颤、高肌酐、肺淤血是出院时高血浆BNP的危险因素,需要给予密切的医疗关注和治疗.
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GPⅡb/Ⅲa抗体及ACA在系统性红斑狼疮血小板减少患者中临床意义探讨
目的:探讨血小板膜糖蛋白(GP) Ⅱb/Ⅲa抗体及抗心磷脂抗体(ACA)在系统性红斑狼疮血小板减少(SLE-TP)患者中的临床意义.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SLE血小板减少组35例、非血小板减少组27例、ITP组14例及健康对照组16例血清中抗GP Ⅱb/Ⅲa抗体及ACA的水平,分析其与SLE-TP患者临床、实验室指标及SLEDAI评分的相关性；统计方法采用x2检验、Fisher确切概率法.结果:①SLE血小板减少组抗GP Ⅱb/Ⅲa抗体表达水平显著高于非血小板减少组及健康对照组(P＜0.01)；②抗GP Ⅱb/Ⅲa抗体在SLE血小板减少组与ITP组间的表达差异无统计学意义；③各组间ACA阳性率差异无统计学意义；④在SLE血小板减少组,抗GP Ⅱb/Ⅲa抗体与SLEDAI评分等级有显著关联(P＜0.05),与血小板减少程度、皮疹、光过敏、脾大、关节炎、粒细胞减少、肾脏及神经系统受累等临床指标无相关性,与dsDNA、Sm、SS-A、C3、C4、Coombs实验及ACA无显著关联.结论:SLE-TP患者血清中抗GP Ⅱb/Ⅲa抗体高表达,且与疾病的活动呈正相关,可能在SLE-TP的发病过程中发挥了重要作用.
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肝细胞癌肝移植患者血清miR-221检测及其临床意义
目的:探讨肝癌患者肝移植手术前后血清中miR-221的表达变化及其临床意义.方法:选择2009年6月至2011年8月在我院行肝移植手术的42例肝癌患者、26例肝良性疾病患者和40例正常对照组人员为研究对象,采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)对比检测移植前后患者血清中miR-221的表达水平.根据肝移植术前患者血清miR-221表达水平的平均值作为划分标准,将36例患者分为高表达组和低表达组.分析miR-221的表达与移植术后肿瘤复发和转移的关系.结果:原发性肝癌患者血清miR-221表达水平明显高于正常对照组(P＜0.05).移植术后患者血清miR-221的表达显著降低(P＜0.01).术前血清miR-221水平与肝移植术后HCC转移/复发情况密切相关.高表达组肝移植患者术后肝癌转移/复发率明显高于低表达组患者(P＜0.05)；术后6月内肝癌复发患者血清miR-221水平显著高于未复发者(P＜0.05).结论:血清miR-221表达水平与肝癌肝移植术后肿瘤复发和转移密切相关,有可能成为肝癌肝移植预后的评估指标.
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抑制eIF3I蛋白的泛素化降解促进人宫颈癌细胞增殖
目的:研究eIF3I蛋白在细胞中的泛素化修饰,阐明其对人宫颈癌细胞系Hela增殖的影响.方法:通过点突变技术获得突变体K282R,与野生型eIF3I比较泛素化的水平,研究细胞内的泛素化修饰调控.经流式细胞仪分析细胞周期,研究野生型蛋白eIF3I和突变体K282R对Hela细胞的细胞周期影响.再从周期蛋白水平研究eIF3I对细胞增殖的调控作用.结果:突变体K282R比野生型eIF3I蛋白的外源表达量大.在Hela细胞中K282R突变体的泛素化水平低,抑制了该蛋白的泛素-蛋白酶体途径降解.过表达eIF3I能上调周期蛋白Cyclin D1的表达量,促进细胞进入由G1期进入S期.同时,泛素化程度低的突变体K282R具有较强的促进细胞增殖的作用.结论:抑制eIF3I的泛素-蛋白酶体途径降解能上调周期蛋白CyclinD1的表达,促进肿瘤细胞增殖,提示eIF3I在细胞增殖和肿瘤发生发展中发挥作用.
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去铁敏干预蛛网膜下腔出血后溶酶体组织蛋白酶表达研究
目的:探讨大鼠蛛网膜下腔出血(SAH,Subarachnoid Hemorrhage)早期脑损伤中溶酶体组织蛋白酶B(CathepsinB)、溶酶体组织蛋白酶D(Cathepsin D)的表达变化及去铁敏(DFO)对其的影响.方法:将24只SD大鼠随机分为四组:正常对照组(6只),SAH模型组(6只),安慰剂组(6只),DFO药物组(6只),视交叉前池注血法(APC)制作大鼠SAH模型,免疫组化分别检测CathepsinD、CathepsinB的蛋白表达,干湿法测定48 h脑含水量.结果:与正常组比较,SAH模型组大鼠48 h后CathepsinD、Cathepsin B的蛋白表达明显增强,水肿指数增高,DFO药物组大鼠48h后Cathepsin D、Cathepsin B的蛋白表达较SAH组明显减低,水肿指数减低.结论:Cathepsin D、Cathepsin B在大鼠蛛网膜下腔出血后表达增强,DFO能减少其表达并对早期脑损伤有保护作用,溶酶体可能参与了蛛网膜下腔出血早期脑损伤的过程,稳定溶酶体膜,减少Cathepsin B/D的释放可能为SAH后早期脑损伤提供新的治疗途径.
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EPO/EPOR-JAK2-STAT5信号传导通路在成釉细胞瘤中表达意义的研究
目的:促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)具有促进细胞分裂、生存、肿瘤血管新生以及肿瘤细胞的侵润和转移等多种生物学功能.EPO/EPOR激活的蛋白酪氨酸激酶-2(JAK2)、信号转导子和转录激活子5(STAT5)这一信号传导通路导致头颈部鳞癌的侵润,但在成釉细胞瘤中的作用尚不明确.本文将探讨EPO/EPOR-JAK2-STAT5信号通路在AB中的表达及意义,进一步探索AB的发病机制.方法:应用免疫组化法检测9例牙胚(TG)、10例牙源性角化囊肿(OKC)和36例成釉细胞瘤(AB)中上述四种蛋白的表达.结果:EPO在TG和OKC两组之间免疫组化表达水平存在显著性差异(P＜0.05)；EPOR在OKC分别与TG组、AB组间比较,差异具有显著型(P＜0.05).EPOR在AB的无细胞变异亚型分别与棘皮瘤亚型、颗粒细胞亚型之间比较有显著差异(P＜0.05).JAK2在细胞浆、细胞核中的表达,在TG、OKC、AB三组间比较均有显著性差异(P＜0.05)(P＜0.01)；在细胞变异亚型、棘皮瘤亚型、颗粒细胞亚型之间比较有极显著差异或显著差异(P＜0.001) (P＜0.01).STAT5在细胞浆、细胞核中的表达,OKC组分别与TG组、AB组比较,均有显著性差异(P＜0.05).结论:EPO/EPOR-JAK2-STAT5信号通路在TG组、OKC组、AB组之间,以及AB的各分型、亚型之间,表达显著差异.研究结果表明,EPO/EPOR在牙源性组织、瘤样病变、AB中通过JAK2-STAT5信号途径发挥作用,EPO/EPOR-JAK2-STAT5通路的异常活化与成釉细胞瘤的发生、发展有关.
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一种建立下颌骨发育性偏颌畸形动物模型的新方法
目的:对小型猪下颌骨升支部植入自行设计的钛板,通过机械力限制下颌骨生长,建立一种无髁状突直接损伤或破坏的发育性偏颌畸形的动物模型,为研究发育性偏颌畸形提供一种可靠的动物建模方法.方法:4月龄贵州小型猪(8只)单侧下颌骨升支后缘植入并螺钉固定末端卷曲的T形钛板,对侧假手术作为对照.术后24周处死动物,进行下颌骨大体形态观察、咬合关系观察下颌骨组织学检查.结果:大体观察显示小型猪下颌骨发生向植入侧的偏斜,牙列发生代偿性倾斜.组织学检查显示,植入侧后缘成骨活性低,骨质致密,未见明显成骨活动.对照侧成骨活跃,骨小梁结构疏松,有明显的成骨活动存在.结论:通过植入钛板影响下颌骨生长发育的方法,能够有效建立小型猪发育性偏颌畸形的动物模型.可能主要是机械力的作用直接导致骨骼大小与形态的改变；肌力等局部环境改变的变化、手术所造成的创伤与瘢痕也可能参与了这一过程.该方法成功率较高,为发育性偏颌畸形的发生、发展以及对骨性偏颌畸形的治疗策略的研究提供了一种可靠而有效的建立动物模型方法.
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磷脂酶C抑制剂U73122对COPD大鼠肺组织内MMP-9,MMP-12表达影响的实验研究
目的:探讨磷脂酶C抑制剂U73122对COPD大鼠肺组织内MMP-9,MMP-12表达的影响.方法:通过烟熏及气管内注入脂多糖(LPS)建立COPD大鼠模型,从第1d起通过尾静脉注射磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122(以U73343为阴性对照),持续28天.第28d,观察各组大鼠肺组织病理变化,western blot法检测肺组织中MMP-9、MMP-12表达水平.结果:模型组和干预组大鼠MMP-9、MMP-12蛋白表达高于对照组(P＜0.05),干预组低于模型组(P＜0.05).干预组肺组织形态学改变较模型组改善(P＜0.05).结论:U73122通过抑制磷脂酶C(PLC)信号途径减少了COPD中MMP9、MMP12的表达,减轻肺组织结构破坏.
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以噬菌体作为配基的一种新型亲和材料的制备方法研究
目的:针对亲和层析材料制备困难的问题,本文拟研究以聚丙烯酰胺冷凝胶为基质,以噬菌体展示多肽为配基制备亲和材料方法的可行性.方法:以低温聚合制备的聚丙烯酰胺冷凝胶作为基质,将筛选噬菌体展示人肝脏cDNA文库获得的噬菌体作为配基,通过两种不同的化学键合方法键合于凝胶表面,制备亲和材料.通过高效液相色谱法(HPLC)分析此亲和材料对药物分子是否具有亲和能力.结果:聚丙烯酰胺冷凝胶具有较大的孔径及良好的亲水性,适用于生物大分子如噬菌体的键合,键合特异噬菌体展示多肽的凝胶材料与键合未筛选噬菌体文库的亲和材料比较,对药物分子具有明显的高亲和力.结论:以展示特异多肽的噬菌体为亲和配基,以聚丙烯酰胺冷凝胶为基质,通过化学键和方法制备亲和材料是具有可行性的,此种亲和材料在生物分子纯化特别是药物分析纯化、蛋白质分离纯化以及细胞分离分析等方面将具有一定的应用前景.
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Rpf结构域及其突变体对MTB感染小鼠的免疫治疗作用
目的:观察复苏促生长因子Rpf结构域(Rpfd)及其突变体E54K (Rpfd1),E54A (Rpfd2)和E54K+ D48A (Rpfd3)对MTB感染小鼠的免疫治疗作用.方法:表达、纯化Rpfd及其突变体Rpfd1,Rpfd2和Rpfd3.结核毒株H37RV从尾静脉感染BALB/c小鼠,剂量为1× 105C F U.感染4w后,随机分为6组,在感染后4w、6w和8周分别腹部皮下注射含50 μg/ml相应蛋白Rpfd、Rpfd1、Rpfd2、Rpfd3的生理盐水,同时设异烟肼(INH,54.25 mg/L)联合利福平(RFP,52.5 mg/L)治疗组.在感染后11w和13w,分别取一侧肺脏计数荷菌数.将各时间点的感染小鼠另一侧肺脏固定后进行组织学观察.结果:表达产物均可与抗-Rpf结构域单抗特异性结合,相对分子量约为32 kDa.感染后11w和13w,Rpfd、Rp fd1、Rpfd2治疗组肺部荷菌量明显少于Rpfd3治疗组和生理盐水组(P＜0.05),但其对肺部MTB的控制未达到INH+RFP联合治疗的效果(P＜0.05).结论:MTB感染小鼠后,利用Rpfd蛋白进行免疫治疗,发现Rpfd及其突变体Rpfd1和Rpfd2蛋白能够显著的降低肺脏荷菌数,并且诱导淋巴细胞的增值.为利用Rpf结构域突变体制备MTB的免疫治疗疫苗提供了理论依据和实验基础.
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组蛋白去乙酰化酶HDAC2突变体构建及其SUMO修饰E3连接酶功能研究
目的:针对人源HDAC2外显子拼接功能区(CDS)基因,运用双管法突变体构建技术,构建HDAC2去乙酰化酶功能失活的片段缺失与关键位点突变体,检测突变体的SUMO化修饰E3连接酶功能活性,探究此HDAC2新功能是否受到其固有的去乙酰化酶功能的影响.方法:设计HDAC2 100-322位氨基酸密码子缺失的片段突变体引物与142位H→A点突变体引物,利用HDAC2的pcDNA3.1真核表达质粒为模板,通过耐热Fusion酶PCR反应双管扩增相应的单链DNA,并经退火、模板酶切、乙醇纯化、感受态转化、抗性平板筛选、测序鉴定获得两种HDAC2去乙酰化酶功能失活的pcDNA3.1真核表达质粒.免疫印迹检测突变体质粒在细胞中的表达,荧光素酶(LUC)报告基因实验检测其SUMO化修饰E3连接酶功能活性.结果:成功构建HDAC2去乙酰化功能失活的片段缺失突变体pcDNA3.1/HDAC2 (DEL 100-322AA)与关键位点突变体pcDNA3.1/HDAC2(142 H→A).C-myc标签的免疫印迹检测显示两种突变体在细胞中可稳定表达.将突变体转染进入三种细胞,LUC报告基因分析结果显示突变体仍具有E3连接酶功能活性.结论:HDAC2的E3连接酶功能不依赖于其去乙酰化酶活性,并且E3连接酶功能结构域位于其序列C端.
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PDTC调控癌性恶病质肌肉萎缩的实验研究
目的:本研究旨在评价吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对C26癌性恶病质小鼠肌肉萎缩的调控作用.方法:采用雄性BALB/c小鼠皮下接种C26结肠癌细胞诱导癌性恶病质模型,荷瘤鼠自第7天开始每日腹腔注射生理盐水及PDTC(10、50及100 mg/kg),第16天处死小鼠后测量体重、去瘤体重及腓肠肌重量,检测肿瘤组织NF-KB活性,血清及肿瘤组织IL-6水平.结果:荷瘤对照组出现显著的去瘤体重下降及腓肠肌分解(P＜0.01),血清及肿瘤组织IL-6水平显著升高(P＜0.01).PDTC能够显著抑制肿瘤组织NF-kB的激活,从而抑制了肿瘤组织IL-6的合成,其抑制程度与PDTC剂量相关,同时抑制了去瘤体重、腓肠肌的消耗,且腓肠肌重量与血清IL-6水平呈显著负相关(r=0.87,P＜0.01).结论:PDTC能够显著抑制肿瘤组织NF-kB的激活及IL-6的合成,从而抑制癌性肌肉萎缩.
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高温对原代支持细胞增殖能力和occludin紧密连接蛋白的影响
目的:研究高温对原代大鼠睾丸支持细胞增殖作用和对紧密连接蛋白的损伤机制.方法:体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC),免疫组化FasL鉴定.实验分为对照组(36℃)和实验组(37℃、38℃、39℃).在相应的温度下培养5d后,CCK-8法检测SC增殖作用,Western印迹法检测OCLN表达水平.结果:体外培养SC的纯度＞90％,CCK-8结果显示,细胞增殖活性在36℃时强,37～39℃时逐渐降低；Western印迹显示,36℃时OCLN表达量高；高于36℃时,OCLN表达量随着温度的增加而降低(P＜0.05).结论:高温影响SC增殖活性,破坏了支持细胞紧密连接蛋白的正常表达和血睾屏障的完整性,从而影响正常精子的形成.
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MXRA5在结直肠癌中的表达及其意义
目的:在我们的前期实验中,我们运用质谱技术研究新鲜培养的结直肠癌和对应的正常黏膜蛋白组学差异时发现基质重建相关蛋白5(MXRA5)在两者之间的表达有明显的差异,而目前并没有关于MXRA5是否可以作为结直肠癌肿瘤标志物的研究;本实验的目的是探索MXRA5在结直肠癌中的表达情况以及其临床意义.方法:运用免疫组化和实时定量PCR技术,对MXRA5在结直肠中的表达情况进行检测,并分析其与临床病理特征的关系.结果:MXRA5在结直肠正常组织、腺瘤和肿瘤中的免疫评分有明显差异(P＜0.05),而且MXRA5的阳性表达与肿瘤的分期和大网膜转移明显相关.基因水平MXRA5的表达没有发现明显差异.结论:我们的研究结果证实了MXRA5在肠癌组织中存在异常表达,并且可能是结直肠癌早期诊断或者大网膜转移的肿瘤标志物.
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腹腔感染大鼠肠粘膜通透性改变与I-FABP表达关系
目的:观察腹腔感染大鼠肠屏障损伤后肠道通透性的改变与I-FABP表达的关系.方法:清洁级健康的成年雄性Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组(仅行简单的剖腹手术)和腹腔感染(采用CLP盲肠结扎穿孔法制作腹腔感染模型)术后12h、24 h、36h、48 h组,每组8只,相应时间点处死大鼠后,测定血浆D-乳酸和I-FABP含量.结果:腹腔感染后12h,大鼠血浆D-乳酸含量开始增加(P＜0.05),血浆I-FABP含量也开始增加(P＜0.01)；血浆D-乳酸含量在24 h达到高值(P＜0.01),血浆I-FABP含量在36h达到高值(P＜0.01).大鼠血浆D-乳酸水平与I-FABP具有显著相关性(r=0.626,P＜0.01).结论:腹腔感染状态下,肠屏障严重受损,肠粘膜通透性的改变与血浆I-FABP水平具有显著的相关性.
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肾脏脱细胞基质结构功能重建的初步研究
目的:本实验利用多种脱细胞剂通过半自动体外循环灌注洗脱肾脏细胞,摸索出佳脱细胞剂种类及脱细胞方案.方法:以健康兔肾为研究对象,采用半自动体外循环灌注法,在10-15 ml/min流速及不同浓度、温度条件下经肾动脉灌注各种脱细胞剂,观察肾脏灌注过程中变化,灌注结束解剖肾脏,大体观察后行苏木精-伊红(HE)染色及组织形态学观察,重点观察肾小球、肾小管细胞结构的变化.结果:比较理想的肾脏脱细胞方案是1％Ⅳ型胶原酶-37℃,20 min,该酶能在相对较短的时间内洗脱部分肾实质细胞而对肾脏基质未造成明显损伤.该方案灌注时间短,能减少肾脏热缺血时间,有助于肾脏再生.其次是0.5％胰蛋白酶-25℃,2h,该方案能使肾小球细胞比较彻底的脱出,只留基质部分,对肾小管作用较小,但该方案用时较长,已达到肾脏体外耐受缺血的极限,理论上肾脏灌注后很可能会因缺血缺氧时间过长而坏死,故不推荐使用.洗脱效果强的脱细胞剂是SDS,但其对肾脏实质结构造成不可恢复的破坏,尤其是引起基底膜断裂不利于肾实质细胞再生.其他脱细胞方案均不理想.结论:本研究证实通过选择适当的脱细胞剂,配合适合的温度、浓度、灌注压等条件,是可以实现肾脏部分脱细胞基质的,为下一步研究衰竭肾脏的部分脱细胞基质甚至是在体灌注乃至脱细胞后肾脏结构功能的重建提供了实验依据.
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内生菌液体发酵提高穿山龙提取物中薯蓣皂苷元的含量
目的:分离提取穿龙薯蓣内生真菌,筛选能够发酵提高穿山龙药材提取物中薯蓣皂苷元含量的功能菌种.方法:采用PDA培养基分离纯化穿龙薯蓣内生真菌,将内生真菌与灭菌后穿山龙药材提取物在恒温振荡培养箱中,120 r/min,28℃培养7天.以高效液相法测定发酵物中薯蓣皂苷元的含量,并与原药材提取物、灭菌药材提取物以及未灭菌药材提取物的发酵物进行比较.结果:分离提取穿龙薯蓣内生真菌102种,其中C39菌能够稳定提高灭菌后穿山龙提取物中薯蓣皂苷元的含量,提高幅度达原药材提取物的20％-30％.结论:经液体发酵,穿龙薯蓣内生真菌C39能够稳定提高穿山龙药材提取物中薯蓣皂苷元的含量.
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中国汉族女性TLR7基因主要编码区的全长扩增及多态性分析
目的:扩增TLR7主要编码区外显子3(exon 3)的全长基因片段并进行基因多态性分析,筛选健康人群中TLR7基因的主要SNP位点.方法:采用酚-氯仿抽提方法从28例健康女性血样中提取基因组DNA,采用长片段扩增方法分别扩增TLR7 exon 3区的3个片段,测序、拼接后进行多态性分析.结果:采用LA-Taq酶体系成功扩增TLR7 exon 3区基因片段；经与Genbank数据库中TLR7参考序列比较,我国女性TLR7基因序列高度保守,仅出现了4个点突变,并发现1个SNP位点RS3853839,表现为GG、CG和CC三种基因型.结论:建立了TLR7编码区基因扩增方法,筛选到1个TLR7SNP位点RS3853839,可为分析TLR7多态性与多种病毒感染性疾病的关系提供参考.
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常压下强电场辐射对国稻6号DNA甲基化的影响
目的:研究常压下强电场辐射对国稻6号DNA甲基化的影响.方法:常压下在相同时间下,以不同强度(和在相同强度下,以不同时间)辐射国稻6号种子,应用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplification polymorphism,MSAP)技术,研究在不同辐射条件下,水稻基因组DNA甲基化的水平及差异.结果:所有强电场辐射的试验组甲基化水平都比未辐射的对照组有所降低,并与辐射的时间和强度有关.细胞DNA全甲基化、半甲基化扩增位点占总扩增位点的比例为:12.89％～13.62％,3.36％～4.63％,随着辐射强度和时间的增加有所降低.结论:说明经强电场辐射的国稻6号水稻基因组DNA甲基化较亲本发生了明显的变异,强电场能引起表观遗传变异,为研究其规律奠定了基础,也为探讨水稻甲基化对水稻生长调控的分子机理提供了帮助.
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量子点的荧光特性在生物标记成像中的应用及展望
与传统的荧光染料相比,量子点作为一种新型的无机荧光纳米材料,具有激发光谱宽而连续、发射光谱窄而对称、光稳定性好、荧光寿命长、量子产率高和生物毒性小等优点,被广泛地应用于生命科学的许多领域,其在细胞标记(固定细胞和离体活细胞)和活体示踪成像领域具有独特的应用优势.它突破了传统的有机荧光染料在荧光性能及生物毒性等方面的不可克服的缺陷.它的应用,极大地推动了生命体系高灵敏、原位、实时、动态示踪成像研究的发展.该文综述了量子点的荧光性质及其在细胞标记(固定细胞和离体活细胞)和活体实时动态示踪成像中的应用,并对其在荧光原位杂交,流式细胞术,实时荧光定量pcr等方面的应用前景进行了展望.
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骶髂关节复合体损伤的诊疗进展
骶髂关节复合体是骨盆后环的主要组成部分,包括双侧髂骨,骶骨,骶髂关节及髂前后韧带等组织,将躯干的力传向下肢.在骨盆后环的稳定上有着重要的作用.随着现代科技的发展,高能量暴力的损伤越来越多,其带来多发伤中骨盆骨折的发生率很高,而不稳定的骨盆骨折多由于骨盆后环骶髂关节复合体的损伤引起.因此,在治疗不稳定骨盆骨折时,必须强调治疗骶髂关节复合体损伤的重要性.本文就骶髂关节复合体的诊疗进展进行综述.
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肥胖状态下的内分泌功能
目前,超重和肥胖在全球蔓延.与高血压和糖尿病一样,肥胖是一种慢性疾病.它的发病与内分泌功能紊乱密切相关.肥胖患者常伴随着高胰岛素血症和胰岛素抵抗,但其作用机制和临床意义还没有完全被阐明.脂肪组织亦是一种分泌激素的内分泌器官,由脂肪细胞分泌的瘦素水平升高,其是一种饱足信号,这是一确定的由肥胖所引起的内分泌变化.肥胖可引起生长激素分泌下降,其病理生理机制很可能是多因素的.女性腹部肥胖与雄激素增多及性激素结合球蛋白水平降低相关.肥胖的男性,尤其那些病态肥胖者睾丸激素和促性腺激素水平都降低.肥胖与皮质醇生成速率增加有关,血浆皮质醇水平一般正常.在肥胖人群中,脑肠肽的水平是降低的,其是唯一已知的促食欲因子.肥胖也可使促甲状腺激素和游离三碘甲状腺氨酸水平增加.本文就肥胖在胰腺组织、脂肪组织、脑垂体、性腺、肾上腺、胃肠道激素、甲状腺等内分泌系统的主要影响作用进行阐述.
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青光眼患者生存质量量表的研究进展
青光眼是当今世界不可逆性致盲眼病的主要病因,同时也是导致视力丧失的第二主要病因.青光眼的症状、以及治疗方式、不良反应使患者的日常生活、心理、工作、社会活动等均受到不同程度的影响.随着医学模式的转变,单纯观察视功能的变化已不能够全面反映疾病对患者的影响,生存质量作为一种较全面的体现新的健康观和医学模式的评价体系已被引入眼科领域,是对传统视功能评价方法的有益补充.本文就国内外与青光眼相关的生存质量量表的研究进展作一综述.
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非酒精性脂肪性肝病细胞凋亡的内质网应激启动机制
内质网应激反应,是由于某些因素导致内质网的生理功能紊乱引起的一种细胞自我防御保护机制.内质网应激所诱导的细胞凋亡是近年来新被认识的一种凋亡途径,它不同于既往经典线粒体、死亡受体介导的细胞凋亡.当短暂性内质网应激时,通过激活未折叠蛋白反应来增强机体自我保护及生存能力；而持续性应激状态下,如非酒精性脂肪性肝病所诱导的内质网应激启动一系列凋亡途径如CHOP、JNK、Caspase等,上述凋亡途径可以加速诱导肝细胞凋亡,使NAFLD向肝纤维化方向甚至肝硬化发展.
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CD40/CD40L信号系统与子痫前期的关系
子痫前期是病理产科中常见的疾病,是导致孕产妇和围生儿死亡的主要原因,其具体病因目前尚未完全阐明,大多数学者认为主要与氧化应激导致的血管内皮细胞损伤,胎盘浅着床,免疫平衡的破坏等因素有关,其中内皮细胞损伤导致的内皮细胞生理功能失衡是其病因学研究的热点.CD40/CD40L是一对互补的肿瘤坏死因子和肿瘤坏子因子受体超家族跨膜糖蛋白,相互作用可以促进内皮细胞、平滑肌细胞表达和释放细胞因子、组织因子、金属蛋白酶、粘附分子,这些物质间接或直接的参与了炎症反应和免疫调节,导致内皮细胞损伤.因此,CD40/CD40L相互作用在炎症反应和免疫失调中亦起着关键作用,可能是子痫前期的病因之一,以CD40/CD40L为靶点为子痫前期的诊断和治疗提供了新的思路和方向.本文拟对CD40/CD40L信号系统与子痫前期的关系做一综述.
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食品毒理学实验教学改革与思考
食品安全日益严峻的现实给食品毒理学实验教学提出了新的挑战和要求.为进一步适应社会和学科发展需要,提高食品毒理学的实验教学效果,笔者根据课程的特点以及在实际教学中所发现的相关问题,对食品毒理学实验课程改革进行了思考,并且提出了提高实验教学质量的一些方法和措施.
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医学遗传学“PBL”教学改革初试
目的:探讨PBL(Problem-based learning)在医学遗传学教学中的应用效果.方法:随机选取临床专业中的两个小班学生作为实验组,采用PBL教学方法,另选择进行传统教学的两个小班学生作为对照组.对PBL教学效果的主观评价采用实验组学生问卷调查方式,客观评价通过比较两组考核成绩的方式.结果:实验组80％以上的学生认为PBL教学方法在学习兴趣、学习主动性、临床思维培养和知识面扩展方面优于传统教学方法,两组学生的试卷在临床症状、诊断方法和发病机制的题目得分率,均明显高于对照组(P＜0.05).结论:PBL教学在医学遗传学中取得较好的教学效果,与传统教学相结合的综合教学,是未来医学遗传学教学改革的趋势.
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负性情绪与认知执行功能的关系研究
目的:对负性情绪组和正常对照组被试进行认知执行功能测定,探讨负性情绪患者的认知执行功能特征,为临床诊断治疗提供参考.方法:通过贝克抑郁量表和贝克焦虑量表测查被试的抑郁和焦虑程度,并运用认知调控测试、Stroop测试和语词流畅性测试研究所有被试的认知执行功能,比较高负性情绪组和低负性情绪组的认知执行功能特征.结果:(1)低负性情绪组比高负性情绪组在完成AST测验大多数任务操作上速度更快(P＜0.05),错误数更少,且抑郁情绪症状和焦虑情绪症状与完成AST测验所需时间的相关性分别在0.01和0.05的水平上显著；(2)低抑郁组比高抑郁组在完成Stroop任务操作上速度更快(P＜0.01),且难度越大,低负性情绪组与高负性情绪组的成绩差异越明显；(3)低负性情绪组与高负性情绪组在完成VF测验中,除了低焦虑组在正确率指标上不如高焦虑组外,其他成绩都优于高负性情绪组.结论:高负性情绪者的认知执行功能受到不同程度的损伤,任务难度越大,其认知执行功能受损表现越明显.
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小努力原则在医学图书馆编目中应用的探讨
目的:为提高编目效率,实现读者在接受图书馆提供的信息服务过程中的小努力原则期待.方法:通过理论分析,说明小努力原则对医学图书馆编目工作的意义,并以此为理论依据,在确保书目数据质量的前提下,可以通过加强编目人员业务培训、制定科学合理的编目细则以及对编目数据进行监控、审校来改进编目工作.结果:小努力原则在医学图书馆编目工作中的应用,有助于加快文献处理进度,提高编目效率,促进信息/知识的交流.结论:在医学图书馆编目工作中应推广应用小努力原则.
