现代生物医学进展杂志
Progress in Modern Biomedicine 현대생물의학진전
- 主管单位： 黑龙江省卫生厅
- 主办单位： 黑龙江省森工总医院 哈尔滨医科大学附属第四医院
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1个月内
- 国际刊号： 1673-6273
- 国内刊号： 23-1544/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对万古霉素的MIC值的5年监测
目的:了解我院5年来耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对万古霉素敏感性的变化,为临床治疗和控制该类感染提供依据方法:采用以内汤稀释法测定近5年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA)临床分离株对万古霉素的低抑菌浓度(MIC),按NCCLS/CLSI2010年标准判定结果,WHONET5.5软件进行数据分析.结果:MRSA检出率从2005年的19.23％上升到2009年的42.14％,万古霉素的M IC几何均数从0.54 μg/ml上升到1.21μg/ml,未检出万古霉素、替考拉宁耐药株,但2007年有2株,2008年、2009年各有1株菌株对替考拉宁呈中介,抑菌圈直径依次为12mm、12mm、13mm、12mm,MIC值均为16.0 μg/ml.结论:MRSA栓出率逐年上升,MRSA对万古霉素MIC值有升高的趋势,加强金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性的监测非常必要.
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粪乳铁蛋白和C反应蛋白对溃疡性结肠炎的评价
目的:研究粪乳铁蛋白(1actoferrin,LF)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对溃疡性结肠炎的严重程度、活动性和对治疗反应的评价作用.方法:选取我院2009-2010年43例特发性溃疡性结肠炎患者,同时进行对照平行研究.对患者进行临床评估、内镜和病理检查,了解疾病活动性、严重程度,并检测LF、CRP在治疗前后的水平.结果:与对照组相比较,病例组生物学标志都升高(P=0.000),特发性溃疡性结肠炎严重组粪LF和CRP更高,治疗后,生物学指标下降到与Mayo分数齐平,ROC曲线下面积分别为0.953和0.721,其灵敏度和特异性分别为:LF(90.7％,100％)和CRP (44.2％,100％).结论:在对特发性溃疡性结肠炎的活动性、严重程度和对治疗反应的评价中,粪LF和CRP是非常有用的生物学指标.
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血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测在乳腺癌诊断中的价值
目的:探讨血清多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在乳腺癌诊断中的临床价值.方法:临床确诊的乳腺癌患者307例为乳腺癌组,非乳腺癌的其他恶性肿瘤患者495例为对照组.应用多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统检测12种肿瘤标志物水平,评价血清肿瘤标志物的在乳腺癌组与对照组之间的差异.结果:CA153,CEA,Free-PSA这三项指标为诊断乳腺癌的独立相关因素(P＜0.05),比较三项指标ROC曲线下面积可见,CA153对于鉴别乳腺癌准确性更高,其敏感性、特异性分别为78.92和56.14,女性乳腺癌患者Free-PSA可见明显升高,对乳腺癌有特殊提示意义,手术前后标志物CA199、CA242、Ferrin、CA125水平差异有统计学意义.结论:在临床常用的肿瘤标记物中,CA153,CEA,Free PSA水平的升高与乳腺癌发生独立相关,其中CA153具有更高的诊断准确性,Free_PSA水平升高对乳腺癌的诊断有特别提示意义.
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骨科住院患者死亡原因的研究分析
目的:对骨科住院患者死亡原因进行研究分析.方法:本研究采用回顾性病史分析方法,对我院2002年11月至2011年3月期间的骨科住院患者死亡病例进行统计分析.结果:在此期间共发生死亡病例27例.死亡的原因分别是:呼吸系统衰竭、急性心肌梗死、急性脑血管病、多器官衰竭以及出血性休克.结论:年龄在70-80岁之间的股骨颈骨折病人的死亡率高,属于高危人群；手术的治疗干预并没有提高患者的死亡率；患者的死亡时间并没有在特定的时间段出现高值.肺栓塞是导致骨科病人死亡的高危因素.通过采取有效的预防措施,可以降低骨科住院患者的死亡率.
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外固定架联合抗感染活性骨治疗下肢创伤性骨髓炎
目的:验证外固定架联合抗感染活性骨(ARBX)治疗下肢创伤性骨髓炎的疗效.方法:25例下肢创伤性骨髓炎患者给予原内固定取出、病灶清除、断端修整、抗感染活性骨植骨、外固定架固定,通过长期随访,分析评价其疗效.结果:随访2-10年,平均6年,感染彻底控制无复发23例,感染治愈率92％；骨不连、骨缺损获得骨性愈合24例,1例残留骨不连,愈合时间6-24月,骨性愈合率96％.结论:外固定架联合抗感染活性骨是治疗下肢创伤性骨髓炎的安全有效手术方法.
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120例不稳定型心绞痛的地尔硫卓治疗临床观察
目的:探讨地尔硫卓治疗不稳定型心绞痛的临床疗效,以供医生参考使用.方法:将我院2010年1月～2011年5月收治的120例不稳定型心绞痛的患者随机分为两组,对照组患者给予硝酸甘油,实验组患者给予地尔硫卓,比较两组患者的治疗效果.结果:实验组患者的总有效率为93.33％(56/60),对照组患者总有效率为78.33％(47/60),实验组明显优于对照组患者,P＜0.05.结论:地尔硫卓治疗不稳定型心绞痛具有较好的疗效,值得在临床应用.
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逆行交锁髓内钉联合单侧骨皮质锁定钢板固定治疗股骨髁上骨不连
目的:探讨逆行交锁髓内钉联合单侧骨皮质钢板固定治疗股骨髁上骨不连的临床疗效.方法:对25例股骨髁上骨不连,均采用逆行交锁髓内钉联合单侧骨皮质钢板固定加自体髂骨植骨治疗.结果:25例获12～24个月随访,平均12个月.4～8个月内均获骨性愈合.结论:应用逆行交锁髓内钉联合单侧骨皮质钢板固定后骨折端可获得坚强内固定,手术操作简便、安全,可早期进行膝关节和股四头肌功能锻炼,是一种治疗股骨髁上骨不连的有效方法.
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3670例早期妊娠妇女梅毒血清学检查及处理
目的:了解早期妊娠妇女梅毒感染情况,采取防治措施,减少先天梅毒的发生.方法:采用梅毒明胶颗粒试验(TPPA)和梅毒甲苯胺红试验(TRUST)对早期妊娠妇女进行梅毒血清学检查,两项结果均阳性者诊为妊娠期梅毒,可采取驱梅治疗或终止妊娠.结果:3670例早期妊娠妇女中,确诊为妊娠期梅毒的29例,其中TRUST滴度大于1∶8的有8例,小于1∶8的有21例；有12人接受驱梅治疗,有17人选择终止妊娠.结论:在早期妊娠妇女中进行梅毒血清学检查,可及早采取措施,减少先天梅毒的发生.
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CXCR4及VEGF在肾母细胞瘤中的表达及其意义
目的:检测趋化因子受体4(CXCR4)及血管内皮生长因子(VEGF)在肾母细胞瘤中的表达,探讨其在肾母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法:选择临床及病理资料齐全的存档肾母细胞瘤标本30例,另取正常肾脏标本10例作对照.采用免疫组化(SABC)方法检测CXCR4及VEGF的表达.结果:CXCR4在肾母细胞瘤组织中高表达(66.67％),在正常肾脏组织中低表达(30.0％),两者相比有统计学意义(P＜0.05),VEGF在肾母细胞瘤组织中高表达(73.33％),在正常肾脏组织中低表达(20.0％),两者相比同样有统计学意义(P＜0.05),肾母细胞瘤组织中CXCR4与VEGF的表达两者之间呈正相关性(r=0.392,P＜0.05).结论:肾母细胞瘤组织中CXCR4和VEGF均高表达.CXCR4及VEGF可能成为预测肾母细胞瘤浸润转移的重要指标.
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西妥昔单抗联合FOLFIRI方案治疗晚期胃癌的疗效观察
目的:观察西妥昔单抗联合FOLFIRI方案用于一线治疗失败的局部晚期或转移性胃癌患者,观察其疗效和不良反应,并观察其与疗效和预后的相关性.方法:每2疗程评价肿瘤病灶情况,观察不良反应,随访肿瘤进展情况及生存期.按照实体瘤疗效评价标准(Response Evaluatione Criteria in solid Tumors,RECIST)进行肿瘤缓解评估,按照国立癌症研究所常见不良事件评价标准3.0版(NCI-CTCAE3.0)进行不良事件分级.计算肿瘤缓解率、中位至疾病进展时间和中位总生存期.结果:在38例至少完成了2个周期治疗并进行了疗效评价的患者中,观察到1例完全缓解(CR),占0.03％；13例部分缓解(PR),占34.00％；总的缓解率(ORR=CR+PR)为37.00％.疾病稳定(SD)的患者有20例,占53.00％;疾病控制率(Disease Control Rate,DCR=CR+PR+SD)为89.00％;疾病进展(PD)的患者为4例,占11.00％.本研究方案总体安全性良好,未发生一例治疗相关性死亡.其中Ⅲ/Ⅳ度粒细胞减少的发生率为52.5％,粒缺性发热的发生率为13.1％,Ⅲ/Ⅳ度度贫血的发生率为29.5％,Ⅲ/Ⅳ度度血小板下降的发生率为8.2％.Ⅲ/Ⅳ度非血液学毒性包括恶心(8.2％),呕吐(6.6％),口腔炎(1.6％),腹泻(6.6％),感染(4.9％),乏力(4.9％),肠梗阻(6.6％),转氨酶升高(1.6％),过敏反应(1.6％)和皮疹(9.8％).结论:本研究显示在晚期胃癌患者的二线治疗中西妥昔单抗联合FOLFIRI是一个安全有效的方案,需要进一步的研究寻找有效的生物标记物.
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西妥昔单抗联合FOLFIRI与单用FOLFIRI方案治疗转移性结直肠癌近期疗效的对照研究
目的:比较西妥昔单抗(爱必妥)联合FOLFIRI化疗方案与单用FOLFIRI化疗方案治疗转移性结直肠癌患者的临床疗效和毒副反应.方法:回顾性分析2008年1月至2011年11月解放军总医院经组织病理学证实的46例转移性结直肠癌患者临床资科,其中西妥昔单抗联合FOLFIRI化疗方案组22例,单用FOLFIRI方案组24例,观察比较两组方案的近期疗效和不良反应.结果:两组方案治疗转移性结直肠癌的客观缓解率(CR+PR)分别为41.6％和12.5％,其中联合治疗方案治疗效果明显优于单用FOLFIRI化疗方案,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).患者出现的不良反应有痤疮样皮疹、腹泻、骨髓抑制、恶心呕吐、脱发等.除痤疮样皮疹和腹泻外,两组患者毒副反应无显著性差异.结论:西妥昔单抗联合FOLFIRI化疗方案治疗K-Ras基因野生型转移性结直肠癌近期疗效显著,毒副反应较单用FOLFIRI方案无明显增加,患者可以耐受.
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高脂血症对直肠癌不同手术方式合并症的影响
目的:探讨高脂血症对直肠癌不同手术方式合并症的影响.方法:回顾分析行开腹或腹腔镜直肠癌根治术治疗的255例患者的临床资料,比较伴或不伴高脂血症患者的围手术期指标,采用卡方检验或t检验进行统计学分析.结果:与非高脂血症组患者相比,高脂血症组术中出血量大(P＜0.01),术后恢复进食时间长(P＜0.01),术后住院时间增加(P＜0.05),拔除引流管时间延长(P＜0.01),切口脂肪液化并发症增多(P＜0.05).与开腹组相比,腹腔镜组术中出血量少(p＜0.01),手术时间、术后恢复进食时间、术后住院时间、拔除引流管时间均明显缩短(均为P＜0.01),切口脂肪液化发生率低(P＜0.05).在腹腔镜手术组,与正常血脂组相比,高脂血症患者术中出血量较大(P＜0.01),余指标无明显差异.结论:高脂血症可引起直肠癌手术出血量增加、术后恢复慢、伤口脂肪液化发生率高,腹腔镜手术可加快患者术后恢复.
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穴位按摩疗法对改善经内镜逆行胰胆管造影治疗患者焦虑的临床研究
目的:探讨采用穴位按摩疗法对经内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)患者进行术前护理的临床效应.方法:特124例患者随机分为对照组和实验组,各62例.对照组采用传统的术前准备和心理护理方法,实验组在对照组的基础上采用穴位按摩疗法进行行为干预,观察2组患者生理指标的变化情况,并用焦虑自评量表(SAS)对2组患者术前及术后焦虑情况进行评估.结果:实验组患者生理指标、焦虑改善情况明显优于对照组.结论:穴位按摩疗法有助于消除患者的焦虑情绪,简单易行,患者痛苦小,提高患者配合治疗的积极性,促进患者早日康复.
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种植体稳定系数测定与种植体负重时机选择
目的:通过测量ITI和Osstem-SS种植系统的稳定系数(ISQ),评价这两种种植体的骨结合情况,为临床确定其上部结构修复时机提供依据.方法:93例牙列缺损患者共植入179颗种植体,根据患者种植区骨量情况分为两组,其中A组为种植区骨量良好,不需骨增量手术病例(62例)；B组为种植区骨量不足,需进行骨增量手术病例(31例).A组共植入125颗种植体,其中ITI种植系统64颗,OSSTEM-SS种植系统61颗；B组共植入54颗种植体,其中ITI种植系统28颗,OSSTEM-SS种植系统26颗.术后即刻及第4、6、8、12、16、24周分别测量各时期种植体稳定系数(ISQ),并同期进行临床和影像学检查.结果:A组中ITI种植系统术后8周ISQ值平均(74.17±1.85),进行负重；OSSTEM-SS种植系统术后12周ISQ值平均(72.00± 2.59),进行负重.B组中ITI种植系统术后16周ISQ值平均(65.09± 3.42),进行负重；OSSTEM-SS种植系统术后24周ISQ值平均(62.09± 6.16),进行负重.负重后临床随访3-24个月所有病例均成功,咀嚼功能良好,患者满意.结论:种植体稳定系数(ISQ)能反应种植体骨结合情况,可以协助医生选择种植后合适的冠修复时机.
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上颌结节在不同年龄阶段发育特征的对照研究
目的:对上颌结节在不同年龄阶段的发育进行研究,并进行组间比较,得出上颌结节的发育特征.方法:全部病例均采用同一台牙科X线机拍摄全口曲面断层片,拍摄条件选择1.1倍恒定放大率模式.根据纳入标准选择病例样本180例,按年龄分为6个实验组,各实验组再按性别分组,对比组间各测量指标的差异.结果:男、女性别组均在M1、M2、M3、L4、L5、L7、L8、L10、L11等测量指标中存在显著性差异.结论:上颌结节的发育并不是随着年龄的增长而平稳增长的,其发育存在高峰期,即10-11岁年龄段,在此年龄段上颌结节在垂直和水平距离上都有快速的发育.而其因素主要来自于上颌第二、第三磨牙的牙冠和牙根发育,其次来自于骨骼的净增长.
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食管腺癌、Barrett食管活检粘膜中TGF-β1的表达
目的:研究食管腺癌、Barret食管(Barrett esophagus,BE)和正常食管粘膜中转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)的表达.方法:采用免疫组化方法检测35例食管腺癌患者、40例BE患者及30例健康对照组食管组织中TGF-β1的表达水平.结果:表在健康对照组食管粘膜中发现TGF-β1的表达,食管腺癌组TGF-β1的表达水平＞BE组＞健康对照组(P＜0.05).食管腺癌组中,TGF-β1在中-高分化腺癌及低分化腺癌患者食管粘膜中的表达无明显差异(Z=1.07,P＞0.05).结论:食管腺癌、BE食管粘膜中TGF-β1表达水平升高,在食管腺癌中的表达与细胞分化程度无关.
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交联聚乙烯亚胺衍生物的构建及其转染COS-7细胞的研究
目的:优化构建交联聚乙烯亚胺( Polyethylenemine,PEI)衍生物PEI-Bu,研究其对非洲绿猴肾成纤维细胞系(COS-7)的转染活性和细胞毒性.方法:以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力,MTT法检测PEI-Bu对COS-7的毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/DNA复合物在COS-7细胞的转染活性.结果:凝胶电泳表明PEI-Bu/DNA在质量比大于1时即具有复合DNA的能力,PEI-Bu的细胞毒性随浓度增大而增大,在同一浓度下PEI-Bu的细胞毒性小于PEI 25kDa,(P＜0.05),PEI-Bu/DNA在质量比为5时达到高转染活性,高于PEI 25 kDa(P＜0.01),并与Lipofectamine2000相当(P＞0.05).结论:PEI-Bu在COS-7细胞中是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒基因载体(与商业化的PEI 25kDa比较),其在基因治疗领域中具有潜在的应用前景.
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结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c的表达、纯化和鉴定
目的:克隆结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1733c基因片段,克隆入pMD 18-T载体,序列测定正确后将其亚克隆入原核表达载体pPro-EXHTb,并在大肠杆菌DH5α中进行表达,表达蛋白经SDS-PAGE及Western-blot分析后,以Ni-NTA亲和层析纯化蛋白.结果:成功克隆了Rv1733c基因片段并构建了其原核表达载体pPro- EXHTb-1733c,转化E.Coli DH5α后能表达大小约30 KD的蛋白,Western-blot分析表明表达产物正确.通过亲和层析获得纯化蛋白.结论:成功构建结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c原核表达载体pPro-EXHTb-1733c,并获得纯化蛋白,为研究新型结核疫苗的靶抗原奠定了基础.
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Bevacizumab联合吉西他滨对荷肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用
目的:探讨抗血管生成药物Bevacizumab联合吉西他滨对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用.方法:构建人肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白对照组、Bevacizumab组、吉西他滨组和联合用药组.观察用药前后肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线；应用免疫组化检测肿瘤微血管密度(MVD)；Western Blot检测Bel-2蛋白的表达.结果:Bevacizumab和吉西他滨单药均能抑制肿瘤生长,两药联合疗效明显增强(P =0.000).与对照组和吉西他滨组相比,Bevacizumab组和联合用药组能明显抑制肿瘤血管生成,MVD值均明显降低,以联合用药组为明显(P均0.000).Bevacizumab和吉西他滨单药均能下调Bcl-2的表达,两药联合下调作用明显增强.结论:Bevacizumab联合吉西他滨能增强对人肝癌裸鼠移植瘤的生长及微血管生成的抑制作用,其机制可能与调控Bcl-2的表达有关.
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HLRP蛋白在大鼠脑中的定位及LPS对其表达的影响
目的:研究HLRP分子在大鼠脑中的细胞定位和表达特点,观察LPS刺激对动物脑HLRP表达的影响.方法:对原代培养的大鼠神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞和大鼠脑组织冰冻切片分别进行免疫荧光染色,观察HLRP的细胞定位和表达特点；给大鼠侧脑室注射LPS,提脑组织蛋白,进行Western blot检测,半定量分析LPS刺激后,大鼠脑HLRP的表达变化.结果:①HLRP 选择性表达于部分神经元的细胞核中,正常的星形胶质细胞和小胶质细胞不表达HLRP.②从嗅脑到脑干各节段,HLRP在大鼠脑组织中均匀分布,未发现HLRP阳性神经元聚集的现象.③侧脑室注射LPS 1天以后,HLRP表达明显升高(P＜0.05).结论:大鼠脑中正常表达HLRP,侧脑室注射LPS能刺激HLRP表达.
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HSP27特异性shRNA表达载体的构建及在耐吉西他滨人胰腺癌细胞株SW1990/Gem中的表达
目的:构建HSP27基因的短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体及观察其在耐吉西他滨人胰腺癌细胞株SW1990/Gem中的表达,为进一步探索肿瘤的基因治疗打下前期基础.方法:参考文献及shRNA设计原则,设计并合成2条能转录shRNA的DNA序列,退火连接后,插入含绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因和U6启动子的真核表达载体pRNAT-U6.3中,构建重组载体pRNAT-shHSP27.重组载体经鉴定后转染SW 1990/Gem,倒置荧光显微镜观察转染情况,RT-PCR、Western Blot从mRNA及蛋白水平探讨转染对耐吉西他滨人胰腺癌细胞株SW1990/Gem的影响.结果:成功构建了针对HSP27基因的shRNA表达载体.倒置荧光显微镜下显示转染48h后SW 1990/Gem细胞内存在GFP表达.RT-PCR、Western Blot结果提示转染后HSP27的mRNA及蛋白表达水平较对照组有明显抑制(P＜0.05).结论:成功构建针对HSP27基因的特异性shRNA真核表达载体,转染细胞后可抑制HSP27表达,为进一步研究HSP27与胰腺癌生物学行为及化疗耐药等相关性奠定了基础.
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常压氧与高压氧对成年大鼠脑缺血再灌注损伤后微血管新生影响的比较
目的:研究常压氧与高压氧对成年大鼠脑缺血再灌注损伤后微血管新生影响的差异.方法:将成年SD雄性大鼠随机分为三组:假手术组(SS组)、常压氧治疗组(NBO组)、高压氧治疗组(HBO组),每组又随机分为3、7、10天三个亚组.采用线栓法对NBO组和HBO组大鼠进行大脑中动脉栓塞(MCAO),缺血1.5小时后拔出栓子再灌注,NBO组进行常压氧治疗,HBO组进行高压氧治疗.大鼠分别在3、7、10天麻醉处死,取脑组织切片,血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体-1(FLT-1)和CD34免疫组化染色,光镜观察取图和统计分析.结果:NBO各组与SS各组相比,VEGF、FLT-1和CD34阳性细胞数目均明显增多(P＜0.05)；HBO各组与NBO各组比较,7天、10天组VEGF、FLT-1和CD34阳性细胞数目均显著增多(P＜0.05).结论:HBO治疗较NBO治疗对成年大鼠微血管的新生更有促进作用.
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茶多酚对Lewis肺癌小鼠移植瘤MMP-2、TIMP-2表达的影响
目的:观察茶多酚对肺癌小鼠移植瘤基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其相应的组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响,探讨茶多酚抗新生血管生成的效应机制.方法:建立57小鼠肺癌移植瘤模型,测定茶多酚低、高剂量组以及茶多酚联合沙利度胺组的肿瘤抑制率,并且采用免疫组化法检测各组MMP-2、TIMP-2表达水平以及MMP-2/TIMP-2比值,以探讨其抗肿瘤的分子机制.结果:实验表明,茶多酚有如下作用:①沙利度胺组、茶多酚低剂量组、茶多酚高剂量组、茶多酚低剂量联合沙利度胺组、茶多酚高剂量联合沙利度胺组的肿瘤抑制率分别为17.26％、16.94％、20.81％、21.94％和44.32％,茶多酚高剂量联合沙利度胺组与模型组瘤重比较,有统计学意义(P＜0.05)；②茶多酚各组及联合用药各组能下调肿瘤组织MMP-2蛋白表达,茶多酚高剂量联合沙利度胺组能上调TIMP-2蛋白表达,与模型对照组比较,均具有统计学意义(P＜0.05)；③用药各组MMP-2/TIMP-2比值均有所下降,茶多酚各组明显降低,茶多酚大剂量联合沙利度胺组比值下降为显著.结论:茶多酚高剂量联合沙利度胺组对肺癌有明显抑制作用.其机制可能与下调MMP-2表达、上调TIMP-2表达、调整MMP-2/TIMP-2比值失衡状态,从而抗肺癌新生血管生成相关.
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MIR-122慢病毒表达载体构建及稳定转染HepG2细胞系
目的:构建人mir-122慢病毒表达载体,感染肝癌细胞HepG2,建立稳定表达mir-122的HepG2细胞系.方法:以人has-mir-122成熟序列,设计并合成引物,采用PCR的方法扩增目的基因,并连接到慢病毒表达质粒pGCSIL-GFP(含绿色荧光蛋白GFP基因)中.对重组质粒进行双酶切鉴定后,进行mir-122基因慢病毒(pGCSIL-GFP-miR- 122)的包装及病毒滴度测定,用构建好的慢病毒表达载体感染HepG2细胞,qPCR检测感染后细胞中MIR-122的变化.通过流式细胞仪检测荧光蛋白GFP,western blot检测mir- 122靶分子CAT-1,验证pGCSIL-GFP-miR- 122在HepG2细胞中的表达效果.结果:pGCSIL-GFP-miR- 122经双酶切分析及测序,插入序列正确.qPCR检测显示转入病毒后mir-122在细胞中的表达显著提高.表明mir- 122慢病毒表达载体构建成功.流式细胞仪根据GFP荧光筛选纯化感染后细胞,感染率达90％以上.Western blot显示mir-122明显抑制其靶分子表达.进一步验证pGCSIL-GFP-miR- 122在细胞中的稳定表达.结论:成功构建mir-122慢病毒表达载体,并建立稳定表达的细胞系,为研究mir- 122在人体所起的作用及功能机制打下基础.
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葛根素对肥胖型高血压大鼠血压和血管功能影响的实验研究
目的:本研究旨在观察饮食中添加葛根素对肥胖型高血压大鼠的心血管代谢指标的影响,尤其关注其对于血压和血管功能的效应.方法:①自发性高血压大鼠24只,分正常饮食对照组(8只)、高脂饮食组(8只)、高脂饮食+葛根素组(8只),大鼠先进行l周的适应性喂养,1周后进行干预,干预时间为14周；②每周测1次体重、鼠尾血压；③实验结束时空腹取血浆测血脂、血糖值,取胸主动脉观察主动脉的内皮依赖性及非内皮依赖性舒张功能.结果:①葛根素可防止高脂饮食导致的自发性高血压大鼠体重的增加及血压、血糖的升高,与高脂饮食组比较,P＜0.05或P＜0.01.②长期葛根素喂养可有效防止高脂饮食导致的高血压大鼠的血脂水平升高；③长期的葛根素喂养可显著改善肥胖型高血压大鼠的血管舒张功能及降低血压.结论:葛根素可有效改善肥胖型高血压大鼠的相关代谢指标,并可明显降低血压及改善血管功能,提示葛根素对肥胖型高血压有较好的防治作用,值得进一步深入研究.
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ESYT-2在致密核心囊泡分泌中起到的作用
目的:研究秀丽隐杆线虫(简称线虫)中一种扩展的Synaptotagmin同源物ESYT-2在致密核心囊泡分泌过程中起到的作用.方法:以线虫为研究对象,运用线虫腔胞吸收ANF-GFP的基本原理来确定ESYT-2与分泌相关,之后又进一步使用全内反射荧光显微镜技术(TIRFM)采研究ESYT-2对致密核心囊泡的具体调控.结果:①ESYT-2功能缺失影响线虫神经细胞致密核心囊泡分泌.②ESYT-2影响致密核心囊泡分泌的栓系过程.结论:ESYT-2调控了致密核心囊泡的分泌过程.
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P-gp和MDR1在三种乳腺癌细胞中表达差异研究
目的:比较P-gp和MDR1在人乳腺癌敏感细胞(MCF-7/S)和耐药细胞(MCF-7/ADR、MCF-7/TAM)中的表达差异,初步探讨乳腺癌细胞对阿霉素与对三苯氧胺产生耐药机制的区别.方法:采用免疫细胞化学法、流式细胞术检测P-gp,采用实时荧光定量PCR法检测MDR1在三种乳腺癌细胞中的表达情况.结果:在MCF-7/ADR细胞中P-gp和MDR1均呈高表达,阳性表达率与MCF-7/S细胞比较,有统计学意义(P＜0.01).在MCF-7/TAM细胞中P-gp、MDR1均呈低表达,与MCF-7/S细胞比较,无统计学意义(P＞0.05).结论:P-gp和MDR1的高表达是乳腺癌细胞对阿霉素产生耐药的主要机制,而并非是乳腺癌细胞对三苯氧胺产生耐药的机制.
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间断性人工重力对模拟失重大鼠颈总动脉平滑肌细胞凋亡的影响
目的:研究3周模拟失重大鼠颈总动脉平滑肌细胞凋亡的变化及间断性人工重力对其的影响.方法:以尾部悬吊大鼠(SUS)模拟失重,同期每天悬吊23h、站立1h(STD)模拟间断性人工重力的对抗效果,用M30染色及Tunel染色方法观察3周SUS组、同步对照(CON)组及STD组颈总动脉平滑肌细胞早期和中晚期的凋亡情况,并用免疫组织化学方法及Western blot印迹方法观察各组大鼠颈总动脉组织Caspase-3的蛋白表达变化.结果:与CON组比较,SUS组大鼠颈总动脉平滑肌细胞M30染色阳性细胞明显减少,STD组M30染色阳性细胞较CON组及SUS组显著增加；SUS组Tunel染色阳性细胞较CON组及STD组显著减少,STD组Tunel染色阳性细胞较CON组及SUS组显著增加；SUS组Caspase-3的表达较CON组显著降低(P＜0.05),STD组Caspase-3的表达较CON组及SUS组显著增高(P＜0.01).结论:模拟失重可引起大鼠颈总动脉平滑肌细胞凋亡减少,每日1h的-Gx对抗使颈总动脉的凋亡增加.Caspase-3可能在调控模拟失重所致血管组织平滑肌细胞的凋亡中发挥作用.
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携带人二氢叶酸还原酶基因慢病毒表达载体构建及鉴定
目的:构建携带人二氢叶酸还原酶(DHFR)基因的慢病毒表达载体pWPI.方法:采用PCR方法扩增二氢叶酸还原酶cDNA 全长,与EZ-T克隆载体连接,HindIII及BamHI-HF限制性内切酶双酶切回收的PCR片段并补平其缺口.慢病毒系统载体使用pWPI系统,采用PmeI酶切载体后回收片段,将其磷酸化,T4酶连接载体与目的基因.表达载体鉴定均采用核苷酸序列测定,重组质粒采用脂质体转染293T包装细胞后获得包装的病毒颗粒.结果:成功扩增二氢叶酸还原酶全长并连接入pWPI载体构建成重组表达载体DHFR-pWPI,重组质粒测序结果显与DHFR基因的同源性达100％,按标准生产程序转染293T后有DHFR基因的表达.结论:成功采用慢病毒载体系统构建了二氢叶酸还原酶重组慢病毒转基因,为探讨DHFR在肿瘤多药耐药过程中的分子机理奠定基础.
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骨性关节炎生物学标志物研究进展
骨性关节炎(oseteoarthritis,OA)是一种随着年龄增长发病率明显升高的退行性变,常累及脊柱、髋、膝等人体负重关节,以关节缓慢发展的疼痛、肿胀,伴功能障碍为临床表现,主要有滑膜增生、软骨破坏、软骨下骨骨化及骨赘形成等一系列病理表现.OA对人类的健康和生活质量影响很大,随着老龄化社会的到来,本病的发病率日趋升高,其研究已成为医学领域中的重要课题.目前,OA的早期诊断、病变监测和有效防治仍是骨科领域亟待解决的疑难问题.随着分子生物学的发展和研究手段的提高,许多研究者都在试图寻找用于临床评价OA的生物学标志物.本文将就OA研究中所使用的主要标志物进行综述,为深入研究OA提供方便.
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脐带间充质干细胞与再生障碍性贫血
再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是由于物理、化学、生物或不明因素作用使骨髓造血干细胞和骨髓微环境严重受损,造成骨髓造血功能降低或衰竭,以全血细胞减少为主要表现的一组综合征.间充质干细胞(MSC)是属于中胚层的一类多能干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中.不仅具有多向分化潜能,还有多种免疫调节作用.许多研究表明MSCs抑制同种异体效应T淋巴细胞增殖,还能下调T淋巴细胞表面的活化分子CD25、CD38、CD69的表达.MSCs对DCs的分化、成熟和活化具有抑制作用,改变DCs的细胞因子分泌,使成熟的DCI分泌TNF-a减少,DC2分泌IL-10增加,从而抑制T淋巴细胞增殖.MSCs能够抑制IL-2和IL-15介导的NK细胞增殖,使IL-2刺激NK细胞分泌的IFN-y减少.通过这些机制来干预再生障碍性贫血,同时研究发现MSCs免疫原性较低.尤其脐带MSC,因为其独特优势,目前已经成为干细胞干预治疗AA的研究热点.
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ABCB1与氯吡格雷抵抗的研究进展
氯吡格雷和阿司匹林双联抗血小板已是急性冠状动脉综合征和经皮冠脉介入术后的标准治疗,因此氯吡格雷抵抗越来越受到人们的关注,但焦点更多的集中在氧吡格雷氧化代谢基因(P2Y12、CYP3A4等)多态性方面,而对氯吡格雷吸收方面基因多态性的关注相对较少,本文就调控氯吡格雷在肠道吸收的基因(ABCB1)进行综述,并探讨其多态性与氯吡格雷抵抗的关系.
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POCD发病机制的研究进展
术后认知功能障碍(Postoperative Cognitive Dysfunction,POCD)的特征性表现是麻醉和手术后认知功能的持续性下降.这种多认知领域的功能需要感觉和广泛的神经学检测来评估,由于不同的检测仪器、不同的时间点和应用不同的统计学方法,因而对POCD一直没有统一的定义,各POCD间的研究也缺乏比较性.因此,进一步阐述POCD的影响因素及发病机制,有利于对POCD的研究建立标准的检测、诊断和防治方法.
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C族GPCRs寡聚体的激活机制
C族GPCRs是体内重要的受体亚家族,参与众多重要的生理和病理进程.该族受体的单体包含七螺旋跨膜结构(heptahelical transmembrane domain,HD)、捕蝇草模块(venus flytrap domain,VFT)和半胱氨酸富集区(cysteine-rich domain,CRD)、C末端等多个功能域,同时形成组成性的二聚体和寡聚体.这种多功能域寡聚体结构使该家族受体的激活机制非常复杂,本文回顾和介绍了多年以来对该家族受体在单体、二聚体、寡聚体等多个层面的激活机制研究的历程和进展,同时也展望了进一步的研究方向和这些研究成果对于开发新型药物的意义.
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噬菌体展示技术在血液肿瘤诊断治疗中的应用
血液肿瘤即造血系统的恶性肿瘤,是一种严重危害公共健康的疾病.目前,血液肿瘤诊断治疗的理想方法就是分子特异性诊断和靶向治疗,但该方法面临的大困难就是分子靶点的选择.噬菌体展示技术是近十年发展起来的一种新的生物学技术,具有高通量筛选、模拟天然表位、易于纯化、将蛋白功能与编码基因相统一等优点,广泛应用于功能性蛋白质和多肽的筛选、蛋白质间的识别与相互作用、抗原表位的鉴定、基因工程抗体的筛选等多个分子生物学领域,非常适于理想靶点的选择.目前,噬菌体文库技术在血液肿瘤诊治中的应用主要集中在噬菌体抗体文库和噬菌体随机放库上.本文就噬菌体展示技术在血液肿瘤诊断治疗中的研究成果做一总结分析,并对该技术在这一领域的应用前景进行展望.
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2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝病患者IGF-1与胰岛素抵抗关系研究
研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)与2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗关系.有研究证实给予IGF-1后,可改善胰岛素抵抗、肝脏脂质代谢,IGF-1基因缺失的动物会产生胰岛素抵抗和高胰岛素血症,低水平的IGF-1还可能与非酒精性脂肪肝病(NAFLD)肝纤维化有关,而T2DM和NAFLD与胰岛素抵抗共存,T2DM合并NAFLD患者IGF-1水平更低.IGF-1与胰岛素抵抗关系密切,IGF-1水平能反映胰岛素抵抗的严重程度,为IGF-1在今后治疗T2DM和NAFLD的提供了潜在的临床应用前景.
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第三代测序基本原理
文章阐述了以单分子实时测序和纳米孔技术为标志第三代测序的基本原理,介绍了Helicos的Heliscope单分子测序仪、Pacific Bioscience的SMRT技术和Oxford Nanopore Technologies公司正在研究的纳米孔单分子测序技术.与其他测序技术进行了简单的对比以并提出一些单分子测序仍需面对的问题以及对未来单分子测序的展望.
