现代生物医学进展杂志
Progress in Modern Biomedicine 현대생물의학진전
- 主管单位： 黑龙江省卫生厅
- 主办单位： 黑龙江省森工总医院 哈尔滨医科大学附属第四医院
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1个月内
- 国际刊号： 1673-6273
- 国内刊号： 23-1544/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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替吉奥治疗结肠癌的研究
目的:探讨替吉奥治疗结肠癌的疗效.方法:75例经病理组织学确诊的结肠癌患者,分为A、B、C组.A组:替吉奥联合奥沙利铂(艾恒)25例.B组:5-Fu/LV联合奥沙利铂(艾恒)25例.C组:替吉奥单药治疗25例.观察疗效、疾病控制率及不良反应.结果:A组、C组与B组对比,不良反应发生率明显降低.A组有效率48％,疾病控制率88％.B组有效率28％,疾病控制率84％.C组有效率32％,疾病控制率80％.结论:替吉奥是结肠癌辅助化疗联合用药及单药治疗老年结直肠癌较好的治疗药物.
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梗阻性低位直肠癌保肛手术可行性探讨
目的:探讨梗阻性低位直肠癌保肛治疗(直肠癌前切除术(dixon手术))的可行性及术后肠瘘的防治.方法:回顾性分析我科2009年1月-2012年1月梗阻性低位直肠癌的保肛治疗(dixon)24例手术患者(梗阻性保肛组)临床资料及非梗阻性低位直肠癌保肛治疗(dixon)的24例患者(非梗阻性保肛组)临床资料,比较梗阻性与非梗阻性低位肠梗阻保肛治疗的临床疗效,分析梗阻性低位肠梗阻保肛治疗的可行性.结果:梗阻性保肛组住院天数:11.9天,非梗阻性肠梗阻保肛组8.7天P＜0.05;梗阻性保肛组发生肠瘘:4例(16.7％),非梗阻性肠梗阻保肛组发生肠瘘:1例(4.2％)P＜0.05,经充分引流后肠瘘愈合,无1人死亡,两组术后至出院期间死亡人数:0例;梗阻性保肛组肠功能恢复(以排气排便为指标):5.1天,非梗阻性保肛组肠功能恢复:3.8天,P＜0.05;术后6个月腹泻便秘患者两组相同为24人;术后6个月梗阻性保肛组肿瘤复发6人(25％),非梗阻性保肛组肿瘤复发5人(20.8％),P＞0.05.结论:梗阻性低位肠梗阻保肛治疗住院期疗效较非梗阻性保肛组差,中远期疗效无明显差异.梗阻性低位直肠癌可行保肛治疗.
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右美托嘧啶用于喉癌患者局麻下气管切开的临床效果分析
目的:探讨预注右美托嘧啶(dexmedetomindine,Dex)对喉癌患者局麻下行气管切开时的影响.方法:选择择期喉癌手术拟行气管切开的患者40例,随机分为Dex组(D组)和生理盐水组(C组),D组在局麻前静脉注射Dex 0.5 μg/kg(10 min泵注完毕),C组以相同方式泵注等量生理盐水,观察5 min后开始行局麻下气管切开.分别记录两组患者给药前(T0)、局麻开始时(T1)、切皮时(T2)、气管内麻醉时(T3)、气管切开造口时(T4)的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SpO2)和呼吸次数(RR);观察并记录患者T1～T4各时间点的VAS评分、Ramsay镇静评分和手术耐受程度评分.结果:与T0相比,C组T1～T4各时点MAP和HR均升高,尤以T3～T4时明显(P＜0.05),D组T1-4时MAP下降、HR明显减慢(P＜0.05);与C组相比,D组T1～T4各时间点MAP均显著下降(P＜0.05),HR均明显减慢(P＜0.01),VAS评分显著降低(P＜0.05),手术耐受程度评分和Ramsay镇静评分均显著升高(P＜0.05).结论:喉癌患者行局麻气管切开前预先静注右美托嘧啶0.5 μg/kg(10min泵注完毕),可有效维持血液动力学稳定,并产生明显的镇静、镇痛作用.
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血清同型半胱氨酸、脂联素、高敏C反应蛋白水平与颈动脉内膜中层厚度在老年2型糖尿病合并脑梗死患者中的意义
目的:观察血清同型半胱氨酸(Hcy)、脂联素(APN)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平与颈动脉内膜中层厚度(IMT)在老年2型糖尿病合并脑梗死患者中的意义.方法:选择2008年5月至2012年5月在我院就诊的2型糖尿病患者218例,按照是否合并脑梗死分为糖尿病伴脑梗死组(105例)和单纯糖尿病组(113例).选择同期健康体检者30例为健康对照组.观察三组血清Hcy、APN、hs-CRP和IMT的水平变化.结果:糖尿病伴脑梗死组和单纯糖尿病组的血清Hcy、hs-CRP和IMT的水平均较正常对照组明显提高(P＜0.01),糖尿病伴脑梗死组以上指标显著高于单纯糖尿病组(P＜0.01);而糖尿病伴脑梗死组和单纯糖尿病组的血清APN的水平较正常对照组明显降低(P＜0.01),糖尿病伴脑梗死组血清APN的水平较单纯糖尿病组显著降低(P＜0.o1).血清Hcy和hs-CRP水平随着IMT的严重程度增加而升高(P＜0.01),而APN水平随着IMT严重程度升高而降低(P＜0.01).结论:糖尿病伴脑梗死的患者大血管病变较单纯糖尿病患者更为严重,颈动脉IMT与Hcy和hs-CRP呈正相关,而与APN呈负相关.
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大黄联合抗生素治疗脑出血合并肺部感染的临床疗效观察
目的:观察大黄联合抗生素治疗脑出血后肺部感染的临床疗效.方法:96例急性高血压脑出血血肿清除术后并发肺部感染患者随机分为治疗组(56例)和对照组(40例).对照组应用抗生素治疗,治疗组在抗生素治疗的基础上加用大黄6 g,以温开水100 mL调匀后经胃管鼻饲,每日2次,共治疗7天.治疗结束后比较和评价两组的治疗效果效果.结果:治疗组患者肺啰音消失的时间、炎症消散的时间和平均治愈天数分别为3.52± 1.81、10.32± 3.25、10.73±3.26天,较对照组(分别为10.86± 3.43、13.51±2.66、14.73±3.11)均显著缩短,差异有显著统计学意义(P＜0.01).治疗组和对照组治疗总有效率分别为94.64％和85％,差异有统计学意义(P＜0.05).两组不良反应的发生率比较无统计学差异(P＞0.05).结论:大黄联合抗生素治疗脑出血术后合并肺部感染,可缩短治疗时间,提高疗效,且无严重不良反应.
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原发性小肠淋巴瘤6例临床分析并文献复习
目的:探讨原发性小肠淋巴瘤临床特点,诊断及治疗方法.方法:对1997-2012年确诊的6例原发性小肠淋巴瘤患者的临床资料进行临床分析,总结其临床特点,同时复习相关文献.结果:隐性失血、脐周隐痛、腹部肿物、隐匿消瘦是原发性小肠淋巴瘤的常见表现,而以全身症状为主的很少.推进式小肠镜及胶囊内镜的应用对该病诊断有重要价值,但阳性率较低.MSCT和MRE对本病的诊断有重要辅助作用.本组患者病理结果均为非霍奇金淋巴瘤,其中B细胞型4例,T细胞型2例,4例发生淋巴转移.6例患者中4例行手术切除治疗,2例行单纯化疗,2例死亡.结论:选择有效的检查手段,可提高小肠肿瘤的术前诊断,降低其误诊误治的发生率.手术切除是治疗该疾病的主要手段,采用手术后配合化疗及放疗的综合治疗可提高患者的生存率.
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磁感应热疗联合放疗治疗颈部淋巴结复发的临床观察
目的:探索磁感应热疗技术联合放疗治疗不宜手术的颈部淋巴结复发的疗效和安全性.方法:2012年2月至2012年7月选取27例不宜手术的颈部淋巴结复发病例,给予2次磁热籽植入和4-8次不等的加热治疗,计划治疗目标温度为48-50℃、维持30min,磁感应治疗后一周内行放射治疗,治疗结束后1-3个月时复查CT,治疗后6月内不予化疗.结果:治疗结束后3个月时,27例患者中CR55.6％,PR37％,NC3.7％,PD3.7％,治疗总有效率为92.6％;25例疼痛缓解,疼痛缓解有效率92.6％.治疗结束后6个月未发现远处转移病例,未发生大出血、放射性食管炎、放射性骨坏死、骨髓抑制、粒子移位脱落等并发症.结论:磁感应热疗联合放疗治疗不宜手术的复发颈部淋巴结安全、有效.
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UACR在老年人群中的分布及其与心血管病危险因素的相关性研究
目的:观察老年人群尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UACR)的分布情况,探讨其与心血管病危险因素的相关性.方法:选取2011年5月至2012年11月在我院接受体检的年龄在60岁以上的老年人922名,收集整理上述人群的基本临床资料.通过检测其清晨尿样,分析UACR在老年人群中的分布情况及和其于心血管病危险因素的关系.结果:①问卷调查结果:在接受调查的所有老年人中,有68名为健康人群,有724名为具有不同程度的心血管病危险因素人群.78.52％的老年人存在至少1个或多个心血管病危险因素.在众多心血管病危险因素中,患病率排在前三位的是:血脂异常、高血压和糖尿病.②UACR检测结果:健康人群中,男性UACR显著低于女性,差异有统计学意义(P＜0.05);患有高血压,糖尿病和血脂异常人群的UACR显著高于健康人群,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UACR)与老年人群心血管疾病危险因素有着密切的联系,通过检测患者的UACR,为心血管疾病的治疗及预后奠定基础.
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PBRM1和P21蛋白在子宫内膜癌的表达及意义
目的:探讨PBRM1和P21蛋白在子宫内膜癌中的表达和临床意义.方法:应用免疫组化方法对105例子宫内膜癌组织进行PBRM1和P21蛋白检测.结果:子宫内膜癌中PBRM1和P21的阳性表达率分别为62.86％和80％;癌旁组织PBRM1和P21阳性表达率分别为45.71％和34.2％,子宫内膜癌组织表达高于癌旁组织(P＜0.05);PBRM1和P53阳性表达与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移、组织学分级、临床TNM分期相关(P＜0.05),与患者年龄无关(P＞0.05) PBRM1和P21的表达呈正相关(P＜0.05)结论:PBRM1和P21表达水平与子宫内膜癌组织的病理分级和临床分期的增高而增高,对其进行监测对子宫内膜癌的诊断、治疗及预后有指导意义.
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体重指数对腹腔镜直肠癌根治术的影响及分析
目的:回顾性分析我院同一组医生施行腹腔镜下直肠癌根治术患者的临床资料,探讨体重指数对于腹腔镜直肠癌根治术的影响,评估腹腔镜下直肠癌根治术在肥胖患者中的应用.方法:选择2009年1月至2010年12月因直肠癌在我院行腹腔镜直肠癌根治术的患者199例为研究对象,根据患者不同体重指数分为3组,正常体重组:BMI＜24.0 kg/m2 143例、超重组:24.0 ＜=BMI＜28.0 kg/m2 50例、肥胖组:BMI＞=28.0 kg/m26例,进而比较3组间患者围术期的各项指标,包括手术时间,估计术中出血量,术后住院时间,取检淋巴结数,对正常体重组,超重组及肥胖组三组患者围术期的各项数据进行比较.结果:3组患者均顺利完成手术,无术中死亡病例.1例患者中转开腹,中转开腹率为0.5％.1例患者术后3天死亡.分别比较三组间的手术时间、术中出血量、取检淋巴结数、术后住院天数,在正常体重组、超重组、肥胖组,手术时间分别为183.5± 49.1 min,191.2± 54.3 min,170.0± 26.8 min;术中出血量分别为65.6± 66.4 mL,59.9± 61.1 mL,83.3± 20.4 mL;取检淋巴结数分别为10.5± 6.8枚、9.0±4.3枚、11.5± 10.0枚;术后住院天数分别为13.1± 3.8天、13.1± 3.6天、12.7±1.0天,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:腹腔镜下直肠癌根治术是一种安全、有效的手术方式,可安全地用于肥胖患者,可体现出其微创优势.
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染色体畸形变与膀胱癌发生发展的相关性研究
目的:通过荧光原位杂交技术(FISH)结合病理分级,探讨染色体畸形变与膀胱癌发生和发展的关系.方法:采用3、7、9、17号染色体着丝粒探针和9P16区带探针对105例膀胱癌复发患者尿液脱落细胞进行荧光原位杂交,观察膀胱癌复发患者中3、7、9、17号染色体的畸形变情况并分析其与患者临床和病理特征之间的关系.结果:105例膀胱癌复发患者中,3、7、9和17号染色体的非整数倍突变率分别是21.9％、29.5％、12.4％、和36.2％,与患者的性别、年龄无显著相关性(P＞0.05).仅7号染色体畸变与膀胱癌的病理分级具有显著相关性(P＜0.05).结论:7号染色体畸形变与复发膀胱癌的病理分级显著相关.
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体质指数与直肠癌的关系探讨
目的:探讨体质指数(body mass index,BMI)与我国直肠癌发病的关系,为直肠癌的预防提供参考.方法:用病例-对照研究方法分析353例首次确诊的直肠癌患者和354名健康人的BMI,比较两组人群BMI的情况.结果:首次确诊的直肠癌患者平均BMI为(24.54± 4.48)kg/m2,健康对照人群平均BMI为(23.58± 3.12)kg/m2,直肠癌患者的BMI明显高于健康对照人群,其差别具有统计学意义(P＜0.001).根据性别的不同进行分组后,可以看出不同性别直肠癌患者的BMI均比健康对照组高.logistic回归分析,BMI的升高是直肠癌发生的危险因素,OR值为1.056 (95％CI,1.027～1.089).结论:直肠癌的发生与BMI有关.
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阴茎阴囊转位合并尿道下裂分期手术修复(附43例报道)
目的:探讨阴茎阴囊转位合并尿道下裂的手术方法及分期手术修复的临床意义.方法:回顾性分析2005年1月至2012年6月间兰州军区兰州总医院收治的43例阴茎阴囊转住伴尿道下裂的病例资料并分析手术方式及术后随访外观情况.结果:43例患者经2期阴囊成形术后疗效满意,其中2例伴严重尿道下裂患者经分手术后达到预期效果,术后随访6个月至7年.所有患者在阴茎阴囊复位后经同期或分期尿道成形术后终均达到尿道下裂修复的标准.结论:阴茎阴囊转位合并尿道下裂应及早手术矫正治疗.分期手术方法使操作简化,阴茎阴囊复位整形效果满意,终尿道成形术后预后良好,术后并发症少,是一种安全可行的手术方式,但性器官发育后易复发,术后要随访至青春期以后.
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冠状动脉支架植入术后行冠脉旁路移植术
目的:总结15例冠状动脉支架植入术后行冠状动脉旁路移植术的临床经验.方法:回顾分析行冠状动脉支架植入术后行冠状动脉旁路移植术15例患者的资料,男10例,女5例,平均年龄(61±5)岁.行冠状动脉支架植入术后再行冠状动脉旁路移植术时间间隔(24±4)月,冠状动脉内置入支架3-6枚,左室射血分数为43 ％-64％,其中＜50％为3例.全组行体外循环下冠状动脉旁路移植术3例,行非体外循环心脏跳动下冠状动脉旁路移植术12例.结果:全组共行动脉桥吻合13支,静脉桥33支;围术期并发低心排综合征3例,肺部感染4例,胸腔内出血行胸腔闭式引流术2例,本组患者无死亡病例.术后平均住院日(13±4)天.结论:对冠状动脉内支架植入术后再狭窄或(和)冠状动脉再血管化不足的病例进行冠状动脉旁路移植治疗,可使冠状动脉达到充分再血管化,提高冠心病患者生活质量及预后.
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中性粒细胞/淋巴细胞比值与药物支架内再狭窄关系
目的:探讨经皮冠状动脉支架植入术前中性粒细胞/淋巴细胞比值(Neutrophil-to-Lymphocyte Ratio,NLR)与患者药物支架(Drug Eluting Stent,DES)植入后发生支架内再狭窄(In-Stent Restenosis,ISR)的关系.方法:回顾性分析2012年01月至2012年10月间有DES植入史并再次入院接受冠脉造影的92例患者(平均年龄65.22±9.73岁)的血液学检查、既往冠脉造影结果及再次冠脉造影结果.根据DES植入前的NLR的四分位点将所有入选患者分为3组:低三分位组(n=31,0.91-1.83),中间三分位(n=30,1.87-2.63),高三分位(n=31,2.66-4.67),比较3组间ISR发生率有无差异.结果:再狭窄发生在低NLR三分位的有3例(9.68％),发生在中间NLR三分住组的有2例(6.67％),而有4例(12.90％)发生在NLR高三分位组(P=0.714),3组之间的差异无统计学意义.结论:因稳定或不稳定型心绞痛而植入药物支架的患者,其术前NLR同支架术后ISR的发生无明显相关性.NLR不能作为DES植入后发生再狭窄的预测指标.
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急性心肌梗死患者冠脉介入治疗后血浆apelin的变化及作用
目的:观察急性心肌梗死(AMI)患者围手术期血浆apelin的表达变化,分析AMI合并2型糖尿病(T2DM)患者血浆apelin的表达与预后的相关性,探讨apelin在冠脉介入治疗(pCI)中的心脏保护作用.方法:72例于2012年2月～8月在我院心内科接受冠状动脉造影确诊为AMI并成功完成PCI的冠心病患者,分别在术前、术后0小时、术后4小时、术后24小时收集血清,酶联免疫吸附法测定血浆apelin-13水平;进一步对糖尿病及非糖尿病AMI患者(每组各20例)进行亚组分析,随访两组患者在术后6个月时主要不良心脑血管事件(MACCE).结果:AMI患者术后0h组apelin水平与术前基线水平明显降低(31.54±5.48 vs35.15± 6.48 ng/L,P＜0.05);术后4小时及24小时组apelin水平较术前明显升高(39.65± 5.48 vs 35.15±6.48 ng/L,43.93± 5.37 vs35.15± 6.48 ng/L,P＜0.05).糖尿病与非糖尿病组apelin水平术前无明显差异;糖尿病组在术后各时间点的apelin水平均明显高于非糖尿病组(31.12± 5.50 vs 29.21± 6.53 ng/L,40.57± 5.37 vs 33.49±3.89 ng/L,43.50± 7.41 vs 34.54±3.52 ng/L,P＜0.05).两组术后6个月随访T2DM组LVEF值改善明显高于NT2DM组,但MACCE事件无明显差异.结论:AMI患者PCI术后存在血浆apelin表达的升高,其中糖尿病患者在术后血浆apelin表达较非糖尿病患者明显增高,提示PCI冠脉血运重建可促进糖尿病患者apelin分泌,调节胰岛素抵抗改善预后.
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音频刺激与光耦合激发蝗虫趋光响应的效应
目的:研究光声耦合和对照光激发蝗虫趋光响应试验,为蝗虫的光电诱导捕集治理及趋光增益调控激发技术提供理论基础.方法:依据蝗虫趋光机理和声频刺激激发蝗虫的响应特性,利用LED光源、声频播放设备和蝗虫行为试验装置,进行了蝗虫对光声耦合和光谱光照趋光响应的对比测定,并探讨了光声耦合对蝗虫趋光效果影响的机理.结果:(1)蝗虫光声感受器对光能和声能接受和神经处理方式的不同,光谱光照和声频耦合刺激激发蝗虫生物活性和趋光响应的双重叠加效应,增强了蝗虫的趋光活性,强化了蝗虫的趋光行为,提高了蝗虫的趋光响应,达到了推拉驱动蝗虫趋光响应的效应;(2)在光声耦合激发蝗虫趋光响应峰值上,蝗虫对不同声刺激的敏感性参数不同;(3)蝗虫对声刺激敏感参数接受的容限性,导致光谱光照在蝗虫诱导响应行为中起主导作用,而声刺激则起驱动激发蝗虫趋光响应的增益效应.结论:光谱光照和声刺激的合理布置和组合,能够有效提高蝗虫的趋光诱导响应效果.
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CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中作用的研究
目的:探讨CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中的作用及其机制.方法:线栓法建立小鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO);激光共聚焦显微镜检测小鼠脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞浸润情况;流式细胞仪检测脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞/CD3+T细胞的比例及脾和胸腺中CD8+CD 122+T细胞数量变化;RT-PCR方法检测CD8+CD 122+T细胞对氧糖剥夺(Oxygen-glucose deprivation,OGD)条件下星形胶质细胞表达TNF-α,IL-lβ,IFN-γ的影响.结果:各时间点脑缺血组织中均有CD8+CD122+T细胞浸润,且随脑缺血时间延长,缺血侧脑组织中CD8+CD12TT细胞/CD3+T细胞比例逐渐增加,5d和7d组差异显著,与非缺血侧相比,P5d＜0.05,P7d＜0.05;MCAO小鼠脾及胸腺中CD8+CD122+T细胞呈现先增高后降低的趋势.星形胶质细胞经OGD处理后,与对照组相比,IFN-γ、TNF-α、IL-1 β表达显著增高,PIFN-γ＜0.01、PTNF-α＜0.00l、PIL-1β＜0.01;CD 122-blocked组与CD8+组相比,IFN-γ、TNF-α、IL-1β表达明显增高,PTNF-γ＜0.05、PTNF-＜0.05、PIL-1β ＜0.01;CD8+组与HBSS组相比,IFN-γ表达降低,P＜0.05; IL-1β表达有降低的趋势.结论:CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中发挥保护性作用,其保护作用通过CD122抑制星形胶质细胞TNF-α,IL-1β,IFN-γ炎症因子表达实现的.
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A549肺癌细胞株中癌睾丸抗原的表达及生物学意义研究
目的:癌睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)是一类主要表达于睾丸组织和癌组织,并具有较强诱导体液和细胞免疫应答能力的抗原,可以作为抗肿瘤的理想靶分子.本研究探讨了A549肺癌细胞系中CTA的表达情况及其生物学意义.方法:本研究中选取了A549肺癌细胞株,运用RT-PCR的方法检测了其中九种常见CTA的表达情况,进一步通过AV-PI双染法观察了表柔比星,紫杉醇,卡铂,伊立替康,依托泊苷五种化疗药物对A549细胞的凋亡作用及其调控CTA表达的情况.另外用转化生长因子β1 (TGF-β1)处理A549细胞,验证了TGF-β1促进细胞生长的作用,进一步检测此时CTA的表达调控.结果:结果显示MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1,HCA661在A549细胞系中稳定表达,表柔比星能够强烈诱导细胞发生凋亡,其诱导作用岁浓度增高而增强.表柔比星下调了MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达,对HCA661的表达无影响.TGF-β1增强了肿瘤细胞增殖能力,与此同时下调HCA661的表达,对MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达无影响.结论:MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1,HCA661在肺癌细胞系A549中稳定表达.TGF-β1作用48小时,使HCA661的表达下调,MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达无变化.表柔比星作用48小时,使MAGEA1,MAGEA3,MAGEC1的表达下调,HCA661表达无影响,卡铂,紫杉醇,伊立替康,依托泊苷对CTA的表达无调控,为进一步明确CTA的表达调控机制奠定了研究基础,同时为将HCA661作为临床中诊断与治疗的新靶点提供了可行性.
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鞭毛蛋白FliC突变体/HPV 18 L2N融合蛋白的表达与纯化
目的:人乳头瘤病毒(HPV)的持续性感染导致女性宫颈癌的发生.HPV的次要衣壳蛋白L2可以诱发交叉中和多种型别HPV的中和抗体,但是单独免疫L2诱发的抗体滴度较低.鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC是一种有效的佐剂.删除FliC超变区域的突变体可与外源抗原融合表达并且显著增强外源抗原特异性抗体的产生.本研究旨在构建鞭毛蛋白FliC超变区删除突变体与HPV 18 L2N(aa.13-154)的融合基因,通过大肠杆菌原核表达系统表达FliC突变体与HPV 18 L2N的融合蛋白并纯化,为研究鞭毛蛋白的佐剂活性及新型HPV 18L2疫苗奠定基础.方法:以鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白编码基因fliC为模板,通过重叠PCR法构建删除fliC D3区域(fliC△D3)、D3+CD2a区域(fliC△D3CD2a)、D3+D2区域(fliC△D2D3)的突变体,同时将HPV 18 L2N基因插入置换突变体的超变区删除区域.含有重组基因的表达载体在大肠杆菌中诱导表达,经SDS-PAGE及Westem blot鉴定分析.表达的融合蛋白经Ni-Sepharose亲和层析纯化及Q-Sepharose离子交换层析去除内毒素.纯化后的融合蛋白经Native-PAGE鉴定分析,通过鲎试剂凝胶法测量蛋白溶液中的内毒素含量.结果:构建了pET22b-fliC△D3/18 L2N、pET22b-fliC△D3CD2a/18L2N、pET22b-fliC△D2D3/18 L2N重组载体.重组载体在大肠杆菌以包涵体形式高效表达,且主要以单体形式存在.结论:通过原核表达及层析法纯化,成功获得了无热源、高纯度的鞭毛蛋白FliC突变体与HPV 18 L2N的融合蛋白,为增强HPVL2免疫原性提供了一种新的途径,为进一步研制HPV 18 L2疫苗奠定了基础.
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煮沸裂解法和试剂盒法提取浸矿菌基因组DNA的比较
目的:在生物浸出中,微生物群落结构分析有着重要意义,而群落分析的基础是提取纯度高、损失少的基因组DNA.为了解决这一问题,本实验通过比较两种较常用的DNA提取方法,煮沸裂解法和试剂盒法,寻找一种灵敏、快速、经济实用的制备浸矿细菌基因组DNA的方法.方法:分别用煮沸裂解法和试剂盒法提取6种浸矿菌的基因组DNA,从所提取的基因组DNA浓度、纯度、回收率和对PCR扩增反应的影响方面比较了两种方法的提取效果;用两种方法来处理不同浓度梯度的一种菌,通过实时定量PCR来比较两种方法的灵敏性.结果:相同处理量(108个)的革兰氏阳性菌(1株)、革兰氏阴性菌(4株)、古菌(1株)经两种方法提取的基因组DNA差异较大,煮沸裂解法所得的6组基因组DNA更纯,其OD260/OD280的值更接近1.8-2.0(纯DNA的OD260/OD280在1.8-2.0之间),前者所提DNA回收率大可达后者的16.7倍;煮沸裂解法只需较少菌(102个)便能让实时定量PCR检测到所提DNA模板浓度,比试剂盒法灵敏.结论:两种方法提取的基因组DNA均可用于后续的PCR扩增,此外,前者提取的DNA浓度随细菌浓度增加而呈线性增大,而后者随菌浓度增大,所提DNA量增加有限,因此,在生物浸出中微生物基因组DNA的提取可直接采用简单快速的煮沸提取法,为实验节约成本和时间.
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骨桥蛋白通过调控MMP-2和VEGF参与肝癌细胞侵袭的机制研究
目的:骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)在肝癌细胞侵袭中的作用机制.方法:采用siRNA干涉的方法处理人肝癌细胞,用PCR和Western-blot法检测OPN的表达;用transwell小室检测不同处理后的HepG2和MHCC97H细胞的侵袭能力;采用Westem-blot和ELISA方法检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达和活力的变化情况.结果:在不同肝癌细胞系中,随着肝癌细胞系侵袭能力的增强,OPN的表达逐渐增高.siRNA可以降低HepG2和MHCC97H细胞中OPN的表达,并且能够降低HepG2和MHCC97H细胞的侵袭能力;抑制OPN的表达能够降低MMP-2和VEGF蛋白表达和蛋白活性.结论:OPN在肝癌侵袭过程中起着重要作用,其作用机制可能是通过调控MMP-2和VEGF蛋白表达和活性来参与肝癌的侵袭,OPN可作为肝癌侵袭转移治疗的新靶点.
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Kras突变基因真核表达载体的构建及在不同肝细胞株中的表达
目的:构建携带突变Kras基因,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体,并导入两种不同的肝细胞株中表达.方法:PCR扩增突变Kras目的基因,将该全长基因定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,枸建重组质粒载体.并利用脂质体转染人肝癌细胞株Huh7.5和鸡肝癌细胞株LMH,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察Kras-EGFP融合蛋白在细胞中的表达;用Western Blotting方法验证Kras蛋白水平的表达.结果:酶切和测序证实pEGFP-N1-Kras重组质粒构建正确,将EGFP报告基因融合在突变的Kras基因的3'端;在Huh 7.5和LMH中均观察到了绿色荧光,转染率分别为19％和53％; Western Blotting也检测到融合蛋白的表达.结论:通过基因克隆方法成功构建了pEGFP-N1-Kras重组质粒载体,并且在Huh7.5和LMH中均稳定表达,为下一步筛选针对突变Kras基因的靶向药物奠定了基础.
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靶向下调FOXM1基因表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响
目的:探讨靶向抑制FOXM1对乳腺癌细胞增殖能力的影响,为乳腺癌的个性化靶向治疗提供理论依据.方法:利用重组真核转录载体pSilencer1.0-U6-FOXM1-shRNA,脂质体法转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231,下调其FOXM1基因表达.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、平板克隆形成实验观察细胞增值曲线以及克隆形成能力;采用实时定量-聚合酶链反应(Real-timeqPCR)、蛋白免疫印迹法(Westem blot)分别检测FOXM1基因在mRNA、蛋白水平的表达变化.结果:重组载体pSilencer1.0-U6-FOXM 1-shRNA转染MDA-MB-231细胞后,与对照组相比,增殖速率明显下降(P＜0.05),平板克隆形成显著减少(P＜0.05),重组载体转染后显著抑制MDA-MB-231细胞中FOXM1基因在mRNA、蛋白水平的表达.结论:沉默FOXM1基因对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生长具有抑制作用,为阐明乳腺癌发病机制提供了新的切入点,也为临床抑制肿瘤生长提供了新的作用靶点.
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鼠伤寒沙门菌pStSR100质粒对生物膜形成的影响
目的:鼠伤寒沙门菌在多种表面形成的生物膜对其致病性和引起食物中毒等方面起着重要作用,本研究探讨鼠伤寒沙门菌pStSR 100质粒对细菌在不同材质表面生物膜形成的影响.方法:用LB(Luria-Bertani,LB)培养基和TSB (Tryptose Soya Broth,TSB)培养基分别将携带pStSR100质粒的野生株在96孔板与放置无菌小圆玻片的24孔板中静态培养48 h,用结晶紫半定量法确定生物膜形成的适宜培养基.将野生株与消除质粒的突变株,用结晶紫半定量法和激光共聚焦显微镜(Confocal Laser scanning microscopy,CLSM)观察其在聚苯乙烯培养板和小圆玻片表面形成生物膜的差异.结果:用LB培养时细菌生物膜的形成能力高于用TSB培养,LB培养基更适宜生物膜形成;结晶紫半定量法结果表明野生株比突变株在小圆玻片表面形成生物膜的能力明显增强,而在聚苯乙烯培养板表面两者则无明显差异;CLSM观察发现,野生株在小圆玻片表面形成融合成片的大克隆,突变株仅形成较小克隆.结论:鼠伤寒沙门菌pStSR100质粒能促进该菌在亲水性材质表面生物膜的形成,但其对该菌在疏水性材质表面生物膜的形成未见明显影响,这一新发现为进一步研究鼠伤寒沙门菌生物膜形成的调控机制,研制抗感染材料提供了理论和实验依据.
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新生小鼠缺氧缺血性脑损伤模型的制作研究
目的:通过对动物模型的制作模拟新生儿围产期缺氧缺血性脑损伤,研究其脑组织病理变化,为新生儿缺氧缺血性脑损伤的病理生理的研究以及进一步有效的治疗提供实验基础.方法:将40只7d新生昆明小鼠分四组,分别为正常组(A组)、单侧颈总动脉结扎组(B组)、单侧颈总动脉结扎+缺氧组(C组)和双侧颈总动脉结扎组(D组).单侧颈总动脉结扎组(B组)行右侧颈总动脉结扎;单侧颈总动脉结扎+缺氧组(C组)行右侧颈总动脉结扎后将其置于20℃的恒温50 mL密闭容器中,分不同的时间将其取出;双侧颈总动脉结扎组(D组)行双侧颈总动脉结扎,各组术后均送回母鼠身边继续母乳喂养,三天后再作病理检测.结果:行单侧颈总动脉结扎加缺氧60 min时,小鼠结扎侧皮质及海马区出现病理改变,随着缺氧时间延长(90 min、100 min、120 min)病变范围逐渐扩大,病理改变越明显.结论:本实验显示单侧颈总动脉结扎同时缺氧一定时间可以导致小鼠脑组织损伤,脑细胞发生病理改变,且皮层及海马区域的神经细胞对缺氧缺血为敏感,从而为进一步研究新生儿缺氧缺血性脑损伤提供了较为可靠的模型.
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荷瘤抑郁样模型小鼠的血清代谢组学研究
目的:从代谢组学角度开展肿瘤共病抑郁的研究,将在复杂疾病发生发展机制以及药物治疗新靶点方面做出有益探索.本实验采用代谢组学方法检测荷瘤抑郁样模型小鼠血清小分子代谢物的变化及抗抑郁药氟西汀的影响,探讨代谢组学在肿瘤共病抑郁研究中的应用.方法:制备移植性荷瘤小鼠模型,氟西汀处理组对荷瘤小鼠连续28 d灌胃给药,观察各组行为学反应.采用液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(LC-QToF/MS)获取荷瘤小鼠与正常小鼠的血清代谢轮廓,并用正交信号校正的偏小二乘法(OPLS)进行多元统计分析,结合单维水平筛选结果,得到荷瘤小鼠区别于正常对照小鼠的特征性差异代谢物,并观察氟西汀对上述代谢物的影响.结果:行为学反应结果显示,与正常小鼠相比,荷瘤小鼠表现抑郁相关性行为改变,氟西汀对荷瘤引起的行为学变化有显著改善作用.代谢组学分析结果显示,荷瘤小鼠血清中乙酰肉碱和油酰胺的含量较正常小鼠显著降低,氟西汀处理后可增加荷瘤小鼠血清中的乙酰肉碱和油酰胺的含量.结论:基于代谢组学分析得到的特征性代谢产物的下调可能与荷瘤小鼠的抑郁样状态有关,氟西汀对这两种潜在生物标志物有明显的调节作用.代谢组学研究为疾病特异性生物标志物的筛选及药物药效的评价提供了新的思路与方法.
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周期性静水压对人软骨细胞活性的时间依赖性影响
目的:目前软骨细胞体外研究多为动物模型,本研究以正常成人软骨细胞研究对象,探讨在适当强度、类型的周期性静水压下不同持续时间对软骨细胞活性的影响,探究人软骨细胞体外培养、构建组织工程软骨合适的时间参数.方法:将体外培养的正常成人膝关节软骨第3代软骨细胞随机分为4组:4h组、8h组、12h组、对照组.应用高压恒温静水压加压系统,充入含有95％的空气和5％的CO2混合气体,以2 MPa压力大小对3个实验组进行周期性加压,分别每天加压4h、8h、12h,三组加压时间均为10d.10d后倒置相差显微镜下观察4组细胞形态,甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行细胞鉴定,并对Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色行半定量分析.MTT法分析各组软骨细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:3个实验组细胞增殖均快于对照组(P＜0.05),与对照组相比4h组、8h组均抑制凋亡,12h组促进凋亡.12 h组第6代细胞开始细胞形态即逐渐发生改变.结论:软骨细胞的增殖和凋亡水平对静水压的作用时间具有依赖性.在2 MPa静水压力下,8h组更适合细胞生长,细胞活性更强.为进一步构建组织工程软骨人类模型及组织工程软骨的临床应用提供了一定的实验基础.
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阿霉素与青蒿素半乳糖苷联合用药对乳腺癌细胞的体外抑制作用及机制
目的:青蒿素及其衍生物具有抗癌活性,本研究旨在探讨阿霉素(DOX)与青蒿素半乳糖苷(AG)联合用药对乳腺癌细胞的体外抑制作用及机制.方法:DOX与AG联合对乳腺癌MCF-7细胞株进行干预,MTT法评价二者对癌细胞增殖的影响;流式细胞计量术检测细胞凋亡;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白表达情况.结果:DOX与AG联合作用对MCF-7细胞增殖抑制率高可达91.6％,均显著高于同浓度DOX或AG抑制效果(P＜0.01),且浓度分别为10 μM和20 μM量效比佳.10 μM DOX+20 μM AG联合干预组癌细胞凋亡率为19.8％,显著高于对照组及单用10 μM DOX或20 μM AG干预组.DOX与AG联合给药比单独应用其中一种均更加显著激活caspase级联信号通路,进而更加有效的促进癌细胞凋亡.结论:DOX和AG联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞具有协同抑制效应,其机制可能与caspase家族介导的蛋白酶级联反应以及PARP裂解失活有关.这项研究为提高DOX治疗乳腺癌的有效性提供了新的思路.
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CRT_D介导室性心动过速的研究进展
心室再同步心脏转复除颤器(CRT_D)可有效改善心力衰竭(CHF)患者的运动耐量和生活质量,预防猝死,提高生存率,但CRT D植入后由于心室激动顺序的改变,使QT间期延长、跨室壁复极离散度(TDR)增加,潜在致室性心律失常风险;且CHF患者通常存在心肌解剖改变,传导的不均一性,也为折返性心动过速的发生提供了维持的机制;而多次电击也可导致肌钙蛋白升高,引起心肌损伤,局部心肌复极离散度增加(DRVR)和QT间期延长,以及电除颤后心肌纤维化和急性细胞损伤,反复室速、室颤也会引起进行性左心功能不全、心肌细胞凋亡、恶化心律失常基质和增加心律失常易感性.CRT D潜在致室性心律失常作用逐渐引起人们的重视,本文就近年来CRT D致室性心律失常的电生理机制与临床防治对策等做一综述.
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几种药物对吗啡相关的条件位置偏好影响的研究进展
条件化位置偏好(conditioned place preference,CPP),常用于研究药物成瘾的相关记忆.这里主要综述了一些药物对CPP的影响.神经肽S,神经肽FF,肌肽,孤啡肽,α-2受体激动剂,L-左旋千金藤啶碱,东莨菪碱,丙戊酸钠,巴氯芬对吗啡CPP有抑制效应;聚肌胞苷酸,氟伏沙明和金刚烷胺能增强吗啡CPP;阿坎酸能抑制乙醇和某些类别的滥用药物的条件化奖赏效应,但不影响吗啡引起的条件化奖赏效应;褪黑激素逆转吗啡诱导的奖赏效应;人重组干扰素-α导致吗啡CPP的恢复.
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PCNA泛素化修饰对DNA损伤应答途径的调控
机体细胞在多种化学物质和内外环境不断攻击下会诱发DNA损伤.为了维持基因组的稳定性,细胞内拥有一系列完善而精确的细胞应答机制来保护基因组DNA的完整性.细胞首先通过DNA损伤检测点,然后通过一系列细胞信号转导通路,启动细胞周期阻滞,进而介导细胞修复或凋亡.大量研究表明泛素化作为一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,参与调控了多种细胞生理过程.近期研究表明,DNA损伤导致复制应激可诱发PCNA的翻译后泛素化修饰,泛素化修饰的PCNA可能参与了多种DNA损伤应激过程,影响细胞选择不同的DNA损伤应答途径,导致细胞截然不同的转归.因此,更好地了解PCNA泛素化的作用及其影响DNA损伤应答通路可为我们更深入地了解人类细胞如何调控异常的DNA代谢过程和癌症的发生和发展机制提供依据.
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细胞角蛋白20在膀胱癌中的研究进展
膀胱肿瘤是常见的泌尿系统肿瘤,其中上皮性肿瘤占95％以上,绝大多数为尿路移行上皮细胞癌.膀胱癌的早期症状不明显,复发率较高,早期诊断和治疗对提高其疗效非常重要.近年来,诊断膀胱肿瘤的新方法不断出现,显著提高了膀胱肿瘤诊断及预后预测水平.其中,膀胱肿瘤标记物检测已成为膀胱肿瘤的诊断新方法,具有十分重要的临床意义.研究发现,细胞角蛋白20(cytokeratin 20,CK20)是中间纤维家族成员之一,在正常膀胱组织中特异性表达于伞细胞,在膀胱癌中特异性表达于膀胱移行细胞癌,其诊断膀胱肿瘤的特异性和灵敏性均较高,且与膀胱肿瘤的临床分级、病理分期和转移均密切相关,因此可作为辅助诊断膀胱肿瘤的检测标志物及治疗和预后评估指标.本文将就其在膀胱癌中的研究进展综述如下.
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阻生牙拔除术的临床进展
阻生牙是指由于各种阻力导致不能正常萌出的牙齿的统称,通常阻生牙牙体大部甚至全部埋伏于骨内.阻生牙可导致各种并发症的发生,因此临床上一般主张预防性拔除阻生牙.阻生牙拔除手术因其难度高、风险大、术后反应重一直是口腔牙槽外科关注的重点.近年来随着手术器械、手术观念等方面的进步,阻生牙拔除术取得了一些临床进展.新型CT扫描设备CBCT可以为手术设计提供精确定位;借助各类微创器械,微创拔牙技术减小了手术创伤,降低了手术风险;新型麻醉方式和新型局麻药物可以极大减轻疼痛反应;心理干预也将成为阻生牙拔除患者围手术期管理的重要步骤.本文对近年来阻生牙拔除术在定位方式、微创技术、团队协作、疼痛控制和心理干预等方面的临床进展做一综述.
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基因治疗的输送屏障及输送载体的研究
基因治疗是将可具有治疗性的基因导入病变细胞以达到治疗遗传性疾病或获得性功能缺损疾病的治疗手段,是一种极具潜力的新型治疗方法.然而基因治疗面临着一系列临床应用障碍,其中缺乏理想的基因输送载体是首要问题.绝大多数基因治疗方案受困缺乏安全有效的基因输送手段,载体要达到目的地发挥作用,需要克服一系列复杂的体内生物屏障,包括细胞外屏障和细胞内屏障.目前基因输送载体主要分为病毒载体和非病毒载体,其中病毒载体天然进化至可进入宿主细胞,具有输送效率高,靶向性好的特点,但存在长期安全性的缺点.非病毒载体主要包括阳离子脂质体和阳离子聚合物,由于易于制备和无免疫原性、安全性好,被认为是更有潜力的输送载体,是目前研究的重点.本文结合基因治疗输送屏障的理论基础及临床研究,对基因输送载体系统的现状进行了综述.
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1950 MHz射频电磁场对SRA01/04细胞周期和凋亡的影响
目的:研究显示射频电磁场与白内障的发生关系密切,为了评价晶状体上皮细胞在射频电磁场诱导的白内障发生中的作用,本实验探讨了1950MHz射频电磁场暴露对人眼晶状体上皮细胞株(SRA01/04)细胞周期与凋亡的影响.方法:将处于对数生长期的SRA01/04细胞暴露或假暴露于频率为1950MHz,比吸收率(SAR)为2.79 W/kg的射频电磁场中,每天暴露1h,每周暴露5天,连续暴露4周.暴露结束后立即收集细胞,显微镜下观察细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活力,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期与凋亡.结果:与假辐照组相比,暴露组细胞形态未见明显变化;细胞存活力、细胞周期分布及细胞凋亡率亦无显著改变(P＞o.05).结论:1950MHz射频电磁场暴露4周对SRA01/04细胞的形态、活力、周期以及凋亡均无明显影响,提示在本实验条件下1950 MHz射频电磁场不会诱发白内障的发生.
