不同冷冻预处理温度对大鼠骨、血管超微结构的影响

目的探讨不同冷冻预处理温度对大鼠骨、血管组织超微结构的影响.方法采用两步冷冻法,以15%二甲基亚砜(DMSO)为低温保护剂,分别对SD大鼠的骨、动脉、静脉进行温度为-45、-50、-55、-60、-65和-70℃的冷冻预处理,液氮保存1周,HE染色和透射电镜观察.结果～55℃是骨、动脉组织冷冻预处理佳温度;-60℃是静脉组织冷冻预处理佳温度.经用上述温度冷冻预处理和超深低温保存的3种组织,超微结构得到较好保持,优于其他温度的实验组.结论 -55～-60℃是适宜吻合血管同种异体骨的冷冻预处理温度.

肝细胞在胚胎干细胞分化系统中的获得及其分化率测定

目的探讨肝细胞在胚胎干细胞(ES cells)分化系统中的分化及其分化率的测定,为肝细胞移植及肝脏组织工程学提供新的肝细胞来源.方法选用BALB/c小鼠ES细胞进行分化状态的培养,在ES细胞培养系统中对肝细胞特异性标记物甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)利用双标免疫荧光法进行检测,观察它们表达的时间规律,并利用流式细胞仪进行肝细胞的相对计数,从而得到肝细胞的分化率.结果 AFP早在分化第7天表达,ALB早在分化第13天表达,两者随分化时间的增长而表达增强;肝细胞分化率在第13天为5.5%,在分化第21天达到10.4%.结论肝细胞在ES细胞分化系统中出现并随分化时间延长而分化率增加,ES细胞有望成为肝细胞移植以及肝脏组织工程学中的新型肝细胞来源.

骨髓源性肝干细胞定向分化及脾内移植研究

目的寻找骨髓源性肝干细胞的表面标记,进行定向分化及脾内移植研究.方法 流式细胞仪检测淤胆大鼠骨髓中干细胞群体的数量变化,寻找肝干细胞标记,免疫磁珠分离,进行体外诱导分化和肝再生模型的脾内移植,观察细胞形态的变化,免疫组织化学和免疫荧光技术检测白蛋白、AFP、CK8/18等肝细胞标记的表达.结果淤胆鼠β2微球蛋白阴性(β2m-)细胞数量较对照组数量明显增高,分别为(6.17±2.70)%和(0.79±0.61)%(P＜0.01),β2m-细胞体外培养及脾内移植均可出现肝细胞样细胞,白蛋白、AFP、CK8/18表达阳性.结论β2m-细胞在体内外具有向肝细胞分化的能力,脾内移植是肝干细胞移植可供选择的部位之一.

自制颈椎融合器的实验研究

目的探讨自制颈椎融合器在动物体内的应用,为进一步临床应用提供实验依据.方法应用实验动物山羊20头,分为实验组和对照组,分别测试抗压缩力、椎间隙高度及组织反应.结果 (1)抗压缩力:自制颈椎融合器(358.64±15.63)N,自体骨植入组为(268.82±11.36)N,差异有显著性(P＜0.05);(2)椎间高度:自制颈椎融合器组为(12.05±0.16)mm,自体髂骨植入组为(12.05±0.14)mm,差异无显著性(P＞0.05);(3)自制颈椎融合器有较好的生物相容性.结论自制颈椎融合器强度大、生物相容性好、稳定性好,是一种比较理想的颈椎融合器.

循环中胰岛素样生长因子-Ⅰ水平调节结肠癌的生长和转移研究

目的探讨血清中肝特异性胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平在刺激小鼠结肠癌生长和转移中的作用.方法我们实验中所用的肝脏特异性IGF-Ⅰ基因缺失(LID)小鼠,其循环中IGF-Ⅰ水平仅为正常小鼠(对照组小鼠)的25%.将Colon 38腺癌组织块(碎片)植入LID和对照组小鼠的盲肠表面.总共156只5周龄的雄鼠(其中82只LID小鼠,74只对照鼠)接受了肿瘤移植.小鼠被随机分成两组:一组接受腹腔注射重组人IGF-1(rhIGF-1),每天2次,共6周,另一组接受生理盐水注射.结果接受rhIGF-Ⅰ注射组的LID和对照小鼠,血清IGF-1和IGFBP-3水平均升高.在生理盐水注射组中,对照鼠的盲肠肿瘤的发生率和肝脏转移率显著高于LID小鼠.和盐水注射组相比,腹腔注射rhIGF-1组中,LID和对照组小鼠均有显著的盲肠癌发生率和肝脏转移率.对照小鼠的肝脏转移结节数明显高于LID鼠.结肠癌组织VEGF的表达和血管的密度依赖于血液中IGF-Ⅰ水平.结论血液循环中IGF-I水平在结肠癌发展和转移中起了重要作用.

脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1基因表达的信号转导机制

目的探讨Janus激酶(JAK)/信号转导和转录激活因子(STAT)通路对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达的调节作用及其意义.方法采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)模型造成脓毒症,98只动物随机分为正常对照组、脓毒症组、JAK2抑制剂AG490处理组和STAT抑制剂雷帕霉索(RPM)处理组.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织HMGB1 mRNA表达水平,同时测定髓过氧化物酶(MPO)活性.结果与正常对照组相比(0.207±0.019),CLP组2、6、24 h肺组织HMGB1 mRNA均显著升高(P＜0.05～0.01),分别为0.471±0.035、0.369±0.028、0.491±0.042.AG490处理组2 h肺组织HMGB1 mRNA表达明显抑制(P＜0.05),RPM处理组2、6、24、48 h HMGB1均显著下降(P＜0.05～0.01).同时,AG490、RPM处理组24、48 h肺组织MPO活性显著降低(P＜0.05～0.01).结论 JAK/STAT信号通路参与了脓毒症肺组织HMGB1 mRNA表达的病理过程,抑制其活化有助于下调HMGB1 mRNA表达并减轻肺损伤.

神经节苷脂对大脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨神经节苷脂(GM1)对脑缺血再灌注损伤的神经细胞的影响.方法仿照Pulsinelli四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,检测外源性GM1对脑缺血再灌注损伤后脑细胞外液乳酸及葡萄糖含量的影响.结果急性缺血再灌注组、GM1治疗组乳酸缺血后迅速升高,再灌注30 min达高峰,其后逐渐下降.再灌注组在30～120 min内显著高于对照组,治疗组在30～90 min内显著高于对照组,但低于再灌注组(P＜0.05).急性缺血再灌注组、GM1治疗组葡萄糖缺血后迅速降低,再灌注30 min达低谷,其后逐渐上升.再灌注组在30～120 min内显著低于对照组,治疗组在30～90 min内低于对照组,但显著高于再灌注组(P＜0.05).结论脑缺血再灌注损伤后,早期使用GM1治疗,明显减轻脑组织中乳酸的堆积,增加葡萄糖含量,增强神经元细胞的存活.

波动性高血压与中膜板层变化的动物实验

目的为了验证和完善关于波动性血压可引起主动脉中膜板层分离,从而导致Stan-ford B型夹层动脉瘤的假说.方法通过犬的动物模型设计,同时加大血压的波动性和应用悬吊法来加大应力对主动脉弓与主动脉降段交界处的作用.结果在施加血流动力学应力作用影响后,主动脉弓与主动脉降段交界处中膜可较明显地形成3个板层区.结论用本实验方法,验证了波动性高血压可以造成主动脉弓与主动脉降段交界处中膜板层的分离破坏.在一定角度上解释了Stanford B型胸主动脉夹层动脉瘤形成和发展趋势.

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导膀胱癌EJ细胞凋亡的研究

目的探讨肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)诱导膀胱癌细胞凋亡的效应.方法 10～100μg/L梯度浓度的TRAIL与培养的EJ细胞共孵育4～24 h.采用Annexin V染色,DNA云梯实验和流式细胞技术检测诱导后EJ细胞凋亡发生的时期和程度.结果 TRAIL诱导4 h即后可观察到早期细胞凋亡发生,8 h后即可检测DNA片段化,24 h后凋亡细胞多达到66.29%.结论 TRAIL能够迅速诱导EJ细胞凋亡,可能成为膀胱癌治疗的新方法.

神经生长因子对颅脑损伤后神经细胞的保护作用

目的探讨神经生长因子(NGF)对颅脑损伤后神经细胞的保护作用.方法建立大鼠液压脑损伤模型,向其脑室灌注7SNGF 5μg,观测其对脑组织超氧岐化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化物酶(CAT)活性、[Ca2+]i及细胞凋亡的影响.结果 (1)伤后3 d,NGF处理组SOD、GSH-Px和CAT含量分别为(198.96±7.76)UN/ml、(1.21±0.04)UN/mg蛋白、(32.58±2.01)UN/mg蛋白,显著高于单纯致伤组(P＜0.01).(2)伤后24 h,NGF处理组[Ca2+]i为(878.56±137.30)nmol/L,明显低于单纯致伤组(972.48±146.66)nmol/L(P＜0.01).(3)NGF处理组凋亡细胞显著少于单纯致伤组(P＜0.01).结论 NGF能增加颅脑损伤后脑组织中主要抗氧化酶的活性,降低[Ca2+]i超载,对神经细胞有明显保护作用.

新型同种异体猪全胰十二指肠移植模型的建立与评价

目的建立一种符合生理、稳定的猪全胰十二指肠移植模型.方法采用手术切除受体胰腺,制造I型糖尿病模型.移植物的门静脉与受体门静脉或肠系膜前静脉吻合;移植物的腹主动脉下段与受体腹主动脉下段吻合;十二指肠与受体空肠吻合.结果 16例动物移植后效果满意,胰腺功能良好.同时,猪的免疫和胰腺解剖与人极为相似.结论在胰腺移植的研究中,猪全胰十二指肠移植是较理想的动物模型.

基因芯片检测人脑胶质瘤恶性进展的分子变化

目的探讨胶质瘤恶性进展过程中的分子变化,为进一步研究胶质瘤的分子亚型作准备.方法收集同一患者低级别向高级别发展过程中3次手术标本及远离病灶的正常脑组织,用基因芯片技术检测、分子生物信息学分析、优筛表达差异有非常显著性、有进一步研究价值的基因;再用半定量逆转录-聚合酶链反链(RT-PCR)验证其在不同患者、不同级别手术标本中的表达.结果在基因芯片中,4份标本两两对比后获得差异表达2倍和3倍以上的基因分别有2 053条和489条,他们分布在15类功能不同的基因组中,有些是不同级别特有的表达差异基因.筛选到与胶质瘤恶性进展相关的4条基因(X54304、NM19896、AI264216、NM15962),在22例临床标本中,经半定量RT-PCR检测表明,其表达量随恶性程度增高而增加或减少.结论胶质瘤基因芯片和RT-PCR结合测得的与恶性程度相关的基因,可为进一步研究胶质瘤的分子病理亚型提供实验依据.

N-甲基亚硝基脲诱导大鼠膀胱肿瘤作用的动态观察

目的观察N-甲基亚硝基脲(MNU)诱发Wistar大鼠膀胱癌的作用及动态过程.方法 MNU大鼠膀胱灌注2mg/次,1次/2周,共4次.分别观察实验第3、6、9、12和14周时膀胱黏膜的改变、并作尿吖啶橙(AO)荧光染色.结果膀胱灌注3周出现不典型增生或腺性膀胱炎,6周时有原位癌改变,9周时膀胱内有明显癌性肿块,12～14周为膀胱乳头状癌或浸润性癌,9周时的致癌率100.0%,组织学改变及病理学特征与人膀胱癌十分相似.AO染色诊断大鼠膀胱癌的阳性率为77.0%.结论 MNU灌注诱导大鼠膀胱癌方法简便、可靠,致癌过程经历上皮增生、乳头状瘤形成和癌变动态变化.

心肌或"心肌样"环境而不是化学物质诱导骨髓基质细胞向心肌细胞分化研究

目的比较心肌或"心肌样"环境与胞嘧啶类化学物质5-氮胞苷对骨髓基质细胞(MSCs)向心肌细胞分化的诱导作用.方法用不同浓度(3、5、10μmol/L)的5-氮胞苷以各种方法(一次处理与反复处理)诱导MSCs,连续观察30 d.采用免疫荧光技术检测心肌特异性肌球蛋白重链(MHC)及肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)的表达,并用心室肌特异性肌球蛋白轻链(MLC2v)启动子(250bp)控制的蓝绿色荧光蛋白(ECFP)报告基因表达技术从转录启动水平进行检测;将MSCs与心肌细胞共培养或移植入大鼠心肌内,检测MHC及TnⅠ表达.结果 5-氮胞苷处理过的MSCs培养物中未见细胞搏动、肌管形成、MHC和TnⅠ表达,亦无MLC2v转录启动阳性细胞出现;但在共培养及体内移植实验中,检测到心肌特异性蛋白在MSCs中的表达.结论体外5-氮胞苷处理不能诱导MSCs表达心肌特异性蛋白;但MSCs与心肌细胞直接接触可向心肌细胞分化.

人外周血内皮祖细胞培养及特性

目的探讨人外周血来源的内皮祖细胞(EPCs)体外诱导培养和扩增的方法,以期证实人外周血是临床治疗缺血性疾病一个理想的内皮祖细胞来源.方法采集正常人外周血单个核细胞进行体外培养,应用免疫组织化学和免疫荧光技术进行内皮细胞表面标记物检测,应用细胞荧光化学检测进行培养细胞的内皮细胞功能检测.结果人外周血单个核细胞(MNCs)经体外培养,表达内皮细胞的特异性抗原,包括Ⅷ因子(VWF)、FLK-1、CD31和CD34,并显示出能内吞乙酰低密度脂蛋白(acLDL),结合UEA-1等内皮细胞的特性,提示这些培养细胞具有内皮细胞的表面蛋白特性和具有内皮细胞的功能.结论人外周血中存在具有分化增殖能力的EPCs,可体外扩增和收集.

神经肽Y剌激肾动脉平滑肌热休克蛋白表达的实验研究

目的以热休克蛋白-70(HSP-70)作为神经肽Y(NPY)刺激肾动脉平滑肌细胞增殖活动为信号,探讨高血压肾动脉重塑中发挥的作用.方法应用快速微量MTT比色法和荧光免疫组织化学定量技术观察神经肽Y作用下肾动脉平滑肌细胞(vSCM)增殖活动中HSP70表达作用.结果神经肽Y可刺激体外培养肾动脉平滑肌细胞的增殖,其增殖度(MTT-A值)和细胞内因损伤产生的HSP-70表达明显高于对照组(P＜0.05).结论神经肽Y可影响肾动脉平滑肌细胞增殖,而HSP-70表达水平是肾动脉平滑肌细胞增殖的重要信号.

NF-κB激活在大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤中的意义

目的从核转录因子-κB(NF-κB)途径研究心肌缺血再灌注损伤早期众多细胞因子表达的分子机制.方法建立大鼠离体工作心脏模型,心肌缺血30 min后再灌注60 min,期间取心室肌.同时,稳定阶段在实验组Krebs-Henseleit碳酸盐缓冲液(KHBB)里应用吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC).对照组测定心肌NF-κB的DNA结合活性、胞质IκBα水平和肿瘤坏死因子(TNF)-α mR-NA的表达.分别测定两组在短时间缺血后NF-κB的DNA结合活性和TNF-α mRNA的表达情况.结果短时间的单纯缺血即引起细胞质IκBα水平的明显降解,同时有相对应的NF-κB的DNA结合活性增加;再灌注后,虽然细胞质IκBα的水平有恢复,但是却有更强的NF-κB的DNA结合活性;首次明确激活的心肌NF-κB有p65-p50和p50-p50两种形式.此外,在实验组,NF-κB的DNA结合活性明显受抑;相应的,TNF-α mRNA的表达也受到抑制.结论分析了心肌在缺血再灌注过程中NF-κB经历了两种不同激活途径,但没能确定p50-p50的确切作用.同时,确定NF-κB的快速活化是心肌缺血再灌注早期众多细胞因子表达的始动因素.

大鼠上矢状窦闭塞模型脑血流和脑组织血氧饱和度的变化

目的探讨大鼠上矢状窦闭塞模型脑血流与脑组织血氧饱和度的变化.方法利用大鼠上矢状窦闭塞模型,激光多谱勒扫描法测定脑表25处局部脑血流(lCBF)和脑组织血氧饱和度,以25处lCBF的中位数代表区域脑血流(rCBF).荧光血管造影技术检测上矢状窦闭塞情况和血栓扩展情况.大鼠分为以下3组:A组,对照组(n=5);B组,上矢状窦结扎组(n=8);C组,上矢状窦结扎加上矢状窦内注入血栓形成因子(n=10).结果 C组上矢状窦结扎加上矢状窦内注入血栓形成因子后rCBF与脑组织血氧饱和度明显降低(P＜0.05),B组上矢状窦结扎后rCBF降低(P＜0.05),15 rin后又恢复到结扎前水平.B组的平均动脉压较A、C组增高15%左右(P＜0.05).结论急性上矢状窦闭塞血栓扩展到脑皮层静脉后rCBF和脑组织血氧饱和度降低,脑血管造影及rCBF和脑组织血氧饱和度监测可早期诊断上矢状窦闭塞,提升脑灌注压可以延长静脉窦血栓形成的治疗时间窗.

青藤碱对肾移植大鼠急性排斥反应及T细胞增殖的影响

目的探讨青藤碱(SIN)对大鼠肾移植急性排斥反应(AR)抑制作用的机制.方法 48只实验模型随机分为:N.S组、SIN组、FK506组、S+F组.观察其存活时间,检测血肌酐/尿素氮(SCr/Bun)、干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平及T淋巴细胞亚群.结果 N.S组术后10 d内死亡,SIN组与N.S组相比较,差异有显著性(P＜0.05);S+F组与SIN、FK506组相比较,差异存在显著性.SCr/Bun:N.S组明显高于其他组,差异有显著性(P＜0.05);SIN、FK506组与S+F组比较差异有显著性.外周血TNF-α、IFN-γ表达水平、CD4+T细胞:N.S组的水平高,与其他组相比较,差异有显著性,S+F组与SIN组或FK506相比较,差异有显著性(P＜0.05).结论 SIN可能通过抑制受体鼠外周血CD4+细胞增殖,下调TNF-α、IFN-γ的表达水平,从而对同种异体大鼠肾移植起免疫抑制作用.并与FK506有协同作用.

胰岛素样生长因子结合蛋白-2在脑胶质瘤中的表达及意义

目的了解胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)在不同级别脑胶质瘤中的表达情况及其临床意义.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法,对30例脑胶质瘤IGFBP-2 mRNA和蛋白的表达情况进行研究.结果低级别胶质瘤的IGFBP-2 mRNA平均水平为28.6%(8%～38%),而高级别的平均mRNA为39.36%(12%～59%);低级别胶质瘤IGFBP-2平均标记指数(MLS=1.000)也明显低于高级别胶质瘤(MLS=2.129).结论 IGFBP-2mRNA及蛋白表达水平与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关,提示IGFBP-2在脑肿瘤的恶性转化、肿瘤坏死及转移中起重要作用.

大鼠单侧隐睾对侧睾丸的损害与抗氧化酶mRNA的表达

目的从基因表达水平探讨单侧隐睾对侧睾丸损害机制.方法 30只SD雄性大鼠分为对照组与隐睾组,每组各15只.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测对侧睾丸中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、铜/锌超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)mRNA的表达;化学比色法测定丙二醛(MDA)的含量;生物素-dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡.结果术后2周,与对照组比较,隐睾组GSH-PX和SOD mRNA表达明显下降,MDA和生殖细胞凋亡明显升高(P＜0.01),而CAT mRNA表达无明显改变(P＞0.05).结论单侧隐睾对侧睾丸存在GSH-PX和SOD mRNA表达降低,氧自由基升高和生殖细胞过度凋亡.

半胱氨酸酶-3在依托利酸诱导肝癌细胞凋亡中的作用

目的探讨选择性环氧合酶(COX)抑制剂依托利酸(etodolac)诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡的分子机制.方法采用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳法测定细胞凋亡情况;Western blotting法检测不同浓度etodolac处理后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的变化;并以流式细胞术检测半胱氨酸酶-3(Caspase-3)酶活性的变化.结果流式细胞术显示etodolac(0、0.25、0.50、1.00、2.00 mmol/L)作用SMMC7721细胞48 h后,对照处理组(0 mmol/L)没有出现凋亡峰,其余各组(0.25、0.50、1.00、2.00mmol/L)出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(16.3±3.1)%、(19.9±3.6)%、(22.9±3.2)%、(31.2±3.3)%(P＜0.001);DNA琼脂糖凝胶电泳出现明显的DNA Lad-der;不同浓度etodolac处理后凋亡相关蛋白Bcl-2表达下降,Bax表达增加;随着etodolac处理浓度的增加,表达活性Caspase-3的细胞百分率分别为(3.61±0.32)%、(2.93±0.15)%、(10.29±0.39)%、(27.33±1.28)%、(57.40±1.69)%(P＜0.001).结论选择性COX-2抑制剂可能通过调节Bc1-2、Bax蛋白表达活化Caspase-3,从而诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡.

AP-1反义寡聚脱氧核苷酸逆转人膀胱癌耐药细胞多药耐药的实验研究

目的观察以激活剂蛋白-1(AP-1)位点为靶序列的特异性反义寡聚脱氧核苷酸(a-sODNs)对人膀胱癌耐药细胞株多药耐药性的逆转作用.方法设计针对谷胱甘肽(GSH)生物合成的限速酶γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因启动子区域AP-1序列的特异性asODNs,用阳离子脂质体包被后转染人膀胱癌细胞株BIU87及其多药耐药(MDR)亚株BIU87/A,然后分别用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法[以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照]、荧光分光光度法、MTT法等检测AP-1-asODNs对两株细胞γ-GCS mRNA表达、细胞内GSH水平及其对6种抗癌药物肿瘤细胞抑制率的变化.结果 AP-1-asODNs转染72 h后,BIU87和BIU87/A细胞的γ-GCSmRNA的表达和细胞内GSH的水平均出现下降.同时6种抗癌药物对反义转染后的两株细胞的抑制率大部分都有所提高.结论γ-GCS特异的AP-1-asODNs可通过降低细胞内的GSH水平增强膀胱癌细胞对化疗的敏感性,逆转肿瘤细胞的耐药.

去甲斑蝥素对人原发性胆囊癌GBC-SD细胞系增殖及相关基因的干预效应

目的研究去甲斑蝥素(NCTD)对人原发性胆囊癌GBC-SD细胞系增殖及相关基因的干预效应.方法实验分NCTD组(7个浓度梯度组,每组6孔)和对照组(n=6),分别应用四唑盐比色法和链霉素亲合生物素复合物法测定NCTD对体外培养GBGSD细胞的体外杀伤效应和对增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67表达的影响.结果 NCTD分别在浓度10 mg/L、时间6 h时,即对GBC-SD细胞增殖有抑制作用,且随浓度升高、时间延长作用增强,呈剂量-时间效应关系;实验组PCNA和Ki-67表达的棕褐染色细胞数和阳性指数(PCNA:0.932±0.031 vs 0.318±0.023;Ki-67:0.964±0.092vs 0.297±0.018;n=10)与对照组比较均显著减少(P＜0.05).结论 NCTD能抑制人原发性胆囊癌GBC-SD细胞的生长和PCNA、Ki-67增殖相关基因蛋白的表达.

右旋柠烯乳剂对人胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用

目的研究右旋柠烯乳剂(D-limonene)对人胰腺癌生长和转移的抑制作用并探讨其作用机制.方法采用人胰腺癌完整组织块建立人胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型.移植后第5天开始分别用生理盐水灌胃(剂量为每天0.3 ml/只,对照组)、5-氟尿嘧啶腹腔注射(剂量为每天30mg/kg,5-FU组)、D-limonene灌胃(剂量为每天15 ml/kg,D-limonene组)、D-limonene灌胃+5-FU腹腔注射(剂量同前,联用组),共用7周.移植后第8周处死动物,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率,检测胰腺癌细胞凋亡指数(AI),免疫组织化学检测肿瘤组织微血管密度(MVD)与血管内皮生长因子(VEGF),并观察荷瘤鼠腹膜、肝、其他脏器肿瘤转移及腹水情况.结果对照组、5-FU组、D-limonene组、联用组的原位肿瘤瘤重分别为2.73±0.23、2.55±0.28、1.49±0.09、1.48±0.21;抑瘤率分别为0、7%、45%、46%;AI分别为(3.49±0.33)%、(7.13±1.17)%、(20.50±2.39)%、(19.97±3.44)%;MVD分别为22.30±2.76、19.88±3.75、8.51±5.47、9.12±5.71;VEGF分别为48.35±6.12、47.44±5.27、33.68±8.65、34.26±7.24;腹膜转移率分别为100.0%、62.5%、30.0%、22.2%;肝转移率分别为50.0%、50.0%、20.0%、22.2%.腹水发生率分别为62.5%、50.0%、20.0%、11.1%.D-limonene组、联用组分别与对照组相比,组间胰腺癌生长和转移的抑制作用差异有显著性(P＜0.05).胰腺癌的生长和腹膜、肝转移受到明显抑制(P＜0.05).结论 D-limonene通过诱导癌细胞凋亡,对体内胰腺癌生长和转移具有明显的抑制作用.

紫杉醇和维甲酸对前列腺癌PC-3细胞的作用

目的观察紫杉醇(PA)和维甲酸(RA)协同对前列腺癌细胞系PC-3的体外作用,并探讨其可能的作用机制.方法应用光镜形态学、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了10-6、10-7、10-8mol/L浓度紫杉醇和10-5、10-6、10-7mol/L浓度维甲酸在体外单药或协同对前列腺癌细胞系PC-3的作用和对细胞DNA含量及Cyclin D1表达的影响.结果 10-6mol/L以上浓度维甲酸作用48 h可增强10-7mol/L以上浓度紫杉醇对前列腺癌PC-3细胞系的生长抑制[抑制率≥(56.3±5.2)%,P＜0.05],增强诱导凋亡作用[凋亡率≥(20.5±2.3)%,P＜0.05],下调Cyclin D1的表达[表达率≤(9.2±1.1)%].维甲酸使紫杉醇所致的G2/M期细胞比例由(70.3±9.3)%变为(54.6±6.7)%,部分地逆转了其G2/M期细胞周期阻滞(P＜0.05).结论 紫杉醇和维甲酸可以协同增强对前列腺癌细胞系PC-3的生长抑制和诱导凋亡作用,显示了紫杉醇和维甲酸协同用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性.

蚕丝及胶原海绵与颌下腺细胞相容性的实验研究

目的探讨SD鼠颌下腺细胞在蚕丝和胶原海绵支架上生物相容性,为颌下腺组织工程中支架选择提供依据.方法体外培养SD鼠颌下腺细胞,传至第2代,将浓度为50×106/ml细胞分别接种在蚕丝和胶原海绵支架上.于接种后1、3、5、7 d取材,进行细胞计数、倒置相差显微镜及扫描电镜观察等.评价颌下腺细胞在蚕丝和胶原海绵支架上生长情况.结果颌下腺细胞在蚕丝与胶原海绵支架上均能黏附增殖及分化,在胶原海绵上生长较佳.结论蚕丝和胶原海绵均可为组织工程化颌下腺体外构筑的支架材料,但胶原海绵更优于蚕丝.

人肝癌HepG2多药耐药细胞系的部分生物学性状研究

目的研究人肝癌多药耐药(MDR)的机制,建立HepG2多药耐药细胞系并研究其部分生物学性状.方法应用HepG2细胞系,通过培养液中阿霉素(ADM)的浓度梯度增加法,得到肝癌多药耐药株HepG2/ADM.Westem blot增强化学发光法(ECL)检测细胞株表面多药耐药基因(MDR1)的表达产物P-糖蛋白(P-170)、多药耐药相关蛋白(MRP)及肺耐药蛋白(LRP)的表达水平.结果耐药细胞的倍增时间延长2.05倍.该耐药模型的P-170表达水平较亲本细胞升高3.90倍(P＜0.01),但MRP及LRP无明显变化.结论 HepG2/ADM同其亲本细胞相比,其耐药性、倍增时间有明显改变;多药耐药性主要与MDR1的高表达有关.

环孢霉素A逆转肝癌多药耐药的实验研究

目的探讨环孢霉素A(CsA)对肝癌(BEL-7402/ADM)多药耐药性的逆转作用.方法以四唑蓝法测定CsA对抗癌药细胞毒性的影响,用流式细胞仪检测细胞膜转运蛋白(Pgp)的表达和罗丹明(R123)浓度,以人肝癌裸小鼠原位移植耐药模型进行在体实验.结果 CsA在4.0μmol/L以下对BEL-7402/ADM细胞无明显毒性,超过此浓度,其毒性呈剂量效应,半数抑制率(IC50)为10.0μmol/L.CsA(4.0μmol/L)能增加BEL-7402/ADM对R123的蓄积并减缓其外排,对阿霉素(ADM)、表阿霉素、氟尿嘧啶的逆转倍数分别为2.72、6.06和1.31倍,并可部分下调BEL-7402/ADM细胞Pgp的表达;体内实验显示,CsA+ADM组(每周腹腔注射CsA 2.0 mg/kg体重与ADM 1.5 m/kg体重,共8次)肿瘤体积和肿瘤重量分别为(0.20±0.04)cm3和(0.82±0.18)g,明显小于ADM组的(0.67±0.39)cm3和(1.55±0.58)g,两组间差异有显著性(P＜0.05),抑瘤率达70.15%.结论 CsA可有效逆转肝癌耐药性,其主要机制是通过抑制细胞Pgp泵功能同时部分下调Pgp表达水平.

转化生长因子-β1对鼠肝细胞凋亡的调控研究

目的探讨正常和硬化肝细胞中转化生长因子(TGF)-β1的作用及其与凋亡的关系.方法应用胶原酶原位灌注法分离正常和肝硬化小鼠的肝细胞.利用1.5%的琼脂糖凝胶电泳及Hoechst 33342对正常肝细胞进行染色来检测TGF-β1(5μg/L)诱导的凋亡.结果胶原酶原位灌流法分离肝细胞的活率为95.20%.电泳发现正常肝细胞具有梯形条带(55.00%),硬化肝细胞则很少出现(18.75%).应用Hoecbst染色发现,正常肝细胞的凋亡率(58.03%)明显高于未处理组(18.76%,P＜0.05).结论硬化肝细胞的抑制性生长调控机制已受损.

超氧化物歧化酶-肺表面活性物质脂质体的肺保护作用

我们利用高氧性肺损伤动物模型可以为预防和治疗体外循环后的肺损伤提供实验基础.

缺血预适应对缺血脊髓保护作用的实验研究

我们通过阻断腹主动脉建立脊髓缺血模型,观察缺血预适应(IPC)对缺血损伤后脊髓组织中内皮素-1(ET-1)、前列环素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)等变化的影响,探讨缺血预处理对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制.

腹腔镜术对腹腔内细胞吞噬及免疫黏附功能的影响

近年来,腹腔镜技术发展迅速,但腹腔镜手术对腹腔内局部中性粒细胞吞噬及红细胞CR1,免疫黏附功能方面的研究尚少,为此,我们进行了这方面的研究.

原发性肝癌PTEN基因表达及血清转化生长因子-β1水平的变化

我们研究了原发性肝癌中PTEN的表达和血清转化生长因子-β1(TGF-β1)的水平变化及其相互关系,现将结果报道如下.

不同体积肝脏移植疗效的实验研究

我们拟通过体外减体积法获得小体积供肝,以探讨大鼠不同体积的原位肝脏模型的建立方法及疗效.

金仓鼠肝内胆管癌微转移与血管生成的相关性研究

我们应用免疫组织化学法对金仓鼠肝内胆管癌骨髓癌细胞进行测定,探讨肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)与骨髓癌细胞含量的关系.

局灶性脑缺血预处理后凋亡相关蛋白表达的动态研究

一次短暂的脑缺血能够激发脑组织对再次严重缺血产生保护性耐受,这次短暂的缺血被称为脑缺血预处理[1].我们通过采用开颅方法直接阻断大鼠大脑中动脉(MCA)模型,检测局灶性脑缺血预处理后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及胱天蛋白酶(Caspase)-3p20表达的动态改变及它们对神经细胞凋亡的影响.

从结直肠癌患者血清中筛选特异的生物标记物

我们应用表面增强激光解吸附及离子化飞行质谱技术从血清中筛选可用于临床结直肠癌早期诊断的特异性生物标记物,现将结果报道如下.

螺旋藻多糖对体外培养胃肠道癌细胞的抑制作用

本文采用改良的MTT法研究了螺旋藻多糖对体外培养胃肠道癌细胞的抑制作用.

中人氟安局部植入对小鼠肝癌的治疗作用

本研究旨在观察瘤旁、瘤内植入中人氟安与腹腔注射5-FU的疗效、安全度以及血和肿瘤组织中药物浓度.

胃癌中Syndecan-1、CD44V6的表达及其临床意义

我们应用SP免疫组织化学方法,研究124例胃癌标本石蜡切片的Syndecan1和CD44V6表达情况,旨在探讨它们对胃癌进展程度和对预后的影响.

围手术期肠内营养支持对胃肠肿瘤患者红细胞免疫功能的影响

为探讨围手术期肠内营养对红细胞免疫功能的影响,我们对20例胃肠肿瘤患者红细胞免疫功能进行检测.

胃泌素及其受体拮抗剂对胃癌细胞PCNA、p53基因表达的影响

为探讨胃泌素促肿瘤细胞增殖作用的机制,我们观察了胃泌素及其受体拮抗剂对MKN45胃癌细胞PCNA、p53基因表达的影响.

人硫氧还蛋白cDNA的克隆和表达

我们在本研究中克隆出hTrx成熟区cDNA序列并在原核中高效表达出hTrx蛋白,现将结果报道如下.

输供体骨髓对嵌合体的影响

微嵌合状态是指接受了同种实质性器官移植的受体内可检测到供者的细胞或遗传物质的现象,同时移植的组织内有很多细胞如巨噬细胞被宿主细胞代替,形成一种相互嵌合的状态.供体骨髓中的造血干细胞比外周血多10～100倍,通过输供体骨髓更易形成嵌合体[1].

骨髓基质细胞向神经细胞诱导分化过程的形态学观察

骨髓基质细胞(BMSCs)是骨髓内的一种多潜能的干细胞,具有分化为间叶组织,包括骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉等的能力,在一定条件下,骨髓基质细胞可诱导分化神经细胞,对中枢神经系统疾病的治疗有潜在的应用价值[1].

抑癌基因DPC4在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨大肠癌组织中DPC4的表达及其与大肠癌淋巴结转移、临床分期、分化程度等的关系.方法大肠癌切除手术标本48例,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DPC4mRNA相对表达量;免疫组织化学方法和Westem blot分析检测DPC4蛋白表达情况.结果半定量RT-PCR显示癌旁正常组织中都有DPC4mRNA表达,部分癌组织中表达缺失;癌组织为0.15±0.06,癌旁组织为0.53±0.15,差异有显著性(P＜0.001).其表达程度与肿瘤大小、细胞分化程度、淋巴结的转移及临床分期有关;与患者性别、年龄、肿瘤部位无关.免疫组织化学结果为:癌旁组织大多数表达在～,癌组织大多表达成-～,癌组织表达程度显著低于癌旁正常组织.DPC4蛋白表达程度与肿瘤大小、细胞分化、临床分期及淋巴结转移有关.Westem blot分析结果为:48例大肠癌组织中有10例表达呈阴性.结论 DPCA的表达与大肠癌密切相关,将来有可能作为大肠癌诊断和治疗过程中一种具有重要价值的生物学标记物.

膀胱白斑的电切镜下表现及病理特点

目的探讨膀胱白斑的电切镜下表现及病理特点,为临床诊断、治疗提供可靠依据.方法随机对门诊436例患者用电切镜进行膀胱尿道镜检和病灶活检,发现膀胱白斑68例,观察膀胱白斑,取病灶组织活检,观察病理变化.结果电切镜下膀胱白斑为白色不规则稍隆起白色斑片状,多见于膀胱三角区.病检所见膀胱白斑为膀胱黏膜鳞状上皮化生,并有活跃的细胞角化.68例中增生型65例,增生、萎缩混合型3例.合并腺性膀胱炎23例.固有膜炎性浸润36例.细胞增生活跃、排列紊乱、有异形性9例,合并移行细胞癌Ⅰ级1例.合并膀胱颈部炎性息肉13例,慢性滤泡性膀胱炎1例,发现结石或结晶6例,可见出血灶7例.结论膀胱白斑是较常见的膀胱黏膜变异现象,可能为癌前病变,常与慢性膀胱炎、腺性膀胱炎等合并存在,用电切镜检查较易发现,及时取病灶组织活检对早期确诊具有重要意义.

术前动脉灌注化疗治疗乳腺癌的临床研究

目的评价动脉灌注化疗药物治疗乳腺癌病例临床疗效.方法采用Seldinger法经皮股动脉穿刺,将导管置于锁骨下动脉与胸廓内动脉开口交界处的近侧,用充气止血带高于患者收缩压阻断患侧肱动脉血流后,注入化疗药物,根据患者情况3～4周重复灌注化疗.化疗方案:环磷酰胺(CTX)200～400 mg/m2、阿霉素(ADR)或表阿霉素(EADR)50～70 mg/m2、5-氟尿嘧啶(5-FU)750～1 000 mg/m2、甲酰四氢叶酸钙(CF)100～200 mg.结果本组65例,随访8个月～11年(平均50个月),CR 4例,PR 47例,MR 14例,总缓解率(CR+PR)78.5%;11例曾接受全身化疗者,PR 8例、MR 3例;5例曾行局部放疗者均为PR.结论动脉内灌注化疗药物对提高乳腺癌的生存率有积极意义,且对全身化疗或局部放疗无效果者仍有可能通过动脉灌注取得较好效果.

左-卡尼汀对心瓣膜替换术患者血浆基质金属蛋白酶的影响

目的研究风湿性心脏病心瓣膜替换术患者,围术期静脉滴注不同剂量的左-卡尼汀以及术中应用左-卡尼汀作为心麻痹液的组成成分进行冠状动脉顺行灌注对血浆基质金属蛋白酶(MMPs)的影响及与心功能的关系.方法 96例风湿性心脏病体外循环(CPB)下心瓣膜替换术患者随机分为3组,每组32例(即治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组和对照组).治疗Ⅰ组术前7 d和术后7 d每日静脉滴注左-卡尼汀6 g,术中于ST.ThomasⅡ号冷晶体心麻痹液中按12 g/L加入左-卡尼汀,治疗Ⅱ组术前7 d和术后7 d每日静脉滴注左-卡尼汀3 g,术中于ST.ThomasⅡ号冷晶体心麻痹液中按6 g/L加入左-卡尼汀,对照组围术期不用左-卡尼汀,术中仅以ST.ThomasⅡ号冷晶体液作为心麻痹液,3组其他治疗条件相同.结果 (1)治疗Ⅰ组患者血浆MMP-2从转流20 min到术后1 d明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),其中从转流毕到术后1 d明显低于治疗Ⅱ组(P＜0.05或P＜0.01);治疗Ⅰ组患者血浆MMP-9从转流20 min到转流毕明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),两治疗组之间比较差异无显著性(P＞0.05).(2)血浆心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)从转流毕到术后3 d明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),其中治疗工组明显低于治疗Ⅱ组(P＜0.05).结论围术期静脉滴注大剂量左-卡尼汀以及术中应用左-卡尼汀作为心麻痹液的组成成分进行冠状动脉顺行灌注可降低患者血浆基质金属蛋白酶水平,可能的机制是左-卡尼汀减轻了长链酰基辅酶A和酰基卡尼汀对心肌细胞的毒性作用,改善了心肌的能量代谢,从而减少了MMPs的合成与释放,对减轻心肌组织的重构可能存在较好的研究前景.

人脑膜瘤血管内皮细胞生长因子表达的临床意义

目的探讨脑膜瘤血管内皮生长因子(VEGF)基因表达与血管生成和脑水肿的关系.方法应用免疫组织化学方法检测35例脑膜瘤组织中VEGF基因表达;Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体组织化学染色显示微血管,用微血管记数(MVC)测定血管生成;从脑水肿与肿瘤本身的体积之比估计脑水肿程度.结果 35例脑膜瘤VEGF表达率77%(27/35),4例可疑染色,其中恶性脑膜瘤和血管母细胞型脑膜瘤呈现高表达(100%);VEGF表达与脑膜瘤血管生成,瘤周脑水肿呈显著正相关(r=0.682 3,P＜0.01;r=0.765 3,P＜0.01).结论 VEGF存在于脑膜瘤组织中,在脑膜瘤血管生成和瘤周水肿中发挥重要作用.

联合检测大肠癌患者外周血CK20 mRNA和CEA mRNA的临床意义

目的探讨同时检测两种肿瘤标志物与大肠癌预后的关系.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法联合检测102例行根治性手术的大肠癌患者外周血中细胞角蛋白(CK)20 mRNA和癌胚抗原(CEA)mRNA,并随访3年.结果大肠癌组CK20 mRNA、CEA mRNA的阳性表达率分别为60.78%(62/102)和64.71%(66/102),均显著高于正常对照组(P＜0.01);CK20 mRNA和CEA mRNA均阳性表达组患者的3年复发率和死亡率分别为55.00%和50.00%,显著高于CK20 mRNA和CEA mRNA均阴性表达组及单一阳性表达组(P＜0.01).结论 CK20mRNA和CEA mRNA均阳性表达是大肠癌患者外周血存在癌细胞的重要证据,提示预后不良.

胃癌基因治疗的现状及展望

胃癌为一种高发、高恶性度、预后不良的恶性肿瘤,长期以来包括手术切除及其他综合性治疗的应用,并没有带来满意的生存率.胃癌本身的生物学过程归根结底也是基因变化产生的,因此基因水平治疗成为胃癌治疗学的取得突破的新希望.

猫视神经压迫动物模型的建立

目的探讨制作与肿瘤压迫的神经生物学特性相近的视神经压迫动物模型.方法 采用家猫,显微开颅将球囊置于视交叉前下方,MR检查视交叉、视神经的形态学变化,经电生理检查PVEP监测视觉电生理的变化,光镜和电镜观察神经组织的病理及超微结构变化.结果 MR示视交叉有脱髓鞘改变;PVEP监测示潜伏期延长,振幅降低;光镜下示神经组织广泛脱髓鞘改变,胶质细胞增生;电镜下示髓鞘结构紊乱、脱失,神经丝疏松,线粒体肿胀,空泡化,有轴索髓鞘溶解.结论本方法制作的视神经压迫动物模型,与肿瘤压迫所至的视神经损伤具有相近的生物学特性,是一种理想的模型.

进一步加强我国胃癌外科的实验研究

现代胃癌外科的发展依赖于临床与基础实验研究两个方面的协调进行.临床上提高诊断水平、改进手术操作、提高综合治疗措施等是促进胃癌外科发展的关键,但临床诊治水平的提高从根本上还是取决于基础实验研究的发展状况.加强胃癌外科基础实验研究在于揭示胃癌发生发展的内在机制,提高胃癌防治的总体水平.

胃癌细胞增殖活性与淋巴结转移关系的研究

目的探讨溴化脱氧脲嘧啶核苷(BrdUrd)/DNA双参数流式细胞术(FCM)检测胃癌的价值,研究胃癌细胞BrdUrd标记指数(LI),G2/M期细胞比率(G2/MPF)和DNA含量与胃癌淋巴结转移的关系.方法 60例胃癌新鲜标本,用BrdUrd/DNA双参数流式细胞术进行检测.结果 淋巴结阳性者,Brdurd LI明显增高(P＜0.01,P=0.000 58),G2/MPF明显增高(P＜0.01,P=0.002 70).淋巴结转移个数大于5枚者,BrdUrd LI较无转移者明显增高(P＜0.01,P=6.43E-05),较转移1～4枚者明显增高(P＜0.05,P=0.043 10),G2/MPF较无转移者明显增高(P＜0.05,P=0.008 40);淋巴结转移1～4枚者,G2/MPF较无转移者明显增高(P＜0.05,P=0.01600).淋巴结转移第Ⅱ站以远者,Brdurd LI较无转移者明显增高(P＜0.01,P=0.001 32),G2/MPF较无转移者明显增高(P＜0.01,P=0.001 30);淋巴结转移第Ⅰ站者,G2/MPF较无转移者明显增高(P＜0.01,P=0.007 18),异倍体癌淋巴结阳性者明显增多(P＜0.05,χ2=5.71).结论胃癌细胞BrdUrd LI、G2/MPF和DNA含量与淋巴结转移及转移数量和距离有关.

钙黏蛋白-链蛋白复合体在进展期胃癌转移淋巴结的再表达及其临床意义

目的探讨钙黏蛋白-链蛋白(Cadherin-catenin)复合体在进展期胃癌转移淋巴结的再表达及其临床意义.方法用免疫组织化学染色的方法检测并比较上皮钙黏蛋白(E-cadherin),α-和β-链蛋白(catenin)在96例胃癌原发灶与79例转移淋巴结内的表达,并结合临床病理资料与随访结果进行综合分析.结果 79例转移淋巴结中52例(66%)出现了一个或多个蛋白分子的再表达,并与肿瘤的临床病理分期密切相关;再表达阳性组和阴性组的5年生存率分别是8%和33%,两者差异有显著性(P＜0.01).结论钙黏蛋白-链蛋白复合体在进展期胃癌转移淋巴结的再表达对癌细胞在转移灶的聚集生长起着重要作用,可作为胃癌预后的一个新指标.

胃癌患者临床预后及病理因素与瘦素表达的相关性研究

目的探讨胃癌组织中瘦素(Leptin)的表达与胃癌患者临床预后及病理因素的相关性.方法 61例有3年以上完整随访资料的胃癌术后患者,用免疫组织化学方法检测其手术标本石蜡切片的瘦素和血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果分化好、有淋巴结转移及分期晚的肿瘤其瘦素表达阳性率显著高于与分化差、无淋巴结转移及分期早的肿瘤(88.2%、62.8%、64.2%比48.9%、50.0%、47.4%,P＜0.05).在分化差的肿瘤组,瘦素组织学评分＜0.5的生存率明显高于瘦素评分≥0.5者(P＜0.01).Cox回归模型单因素分析结果显示:浆膜浸润、肿瘤大小、远处转移、肿瘤分化程度、瘦素表达、淋巴转移、年龄、术后化疗为具有显著统计学意义的预后因素.结论 瘦素表达与胃癌的分化程度、分型、淋巴转移及临床分期有关,在分化差的肿瘤组瘦素表达越强其预后越差.

5-氨基乙酰丙酸光动力治疗裸小鼠胃移植癌的实验研究

目的探讨以5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)作为光敏剂对胃癌进行光动力治疗(ALA-PDT)的疗效,为胃癌的综合治疗寻找有效的手段.方法接种胃癌细胞MGC-803于裸小鼠皮下,建立胃移植癌模型,以5-ALA(100mg/kg体重)作为光敏剂,采用瘤内局部注射和口服两种不同方式给药,继以波长630 nm的激光照射肿瘤局部,观察光动力治疗后肿瘤的生长速度和组织形态学变化.结果接受光动力治疗的两组肿瘤生长速度明显减慢,肿瘤表面可见坏死,组织学检查见肿瘤组织有广泛坏死,两种给药途径,其疗效差异无显著性(P＞0.05).结论 5-ALA光动力治疗对胃癌有杀伤作用,这将为胃癌的综合治疗提供有效的手段.

生长激素在体外对人胃癌细胞的作用

目的研究重组人生长激素(rhGH)在体外对人胃癌细胞生长的影响.方法实验分组:对照组、rhGH组、奥沙利铂(L-OHP)组和rhGH+L-OHP组,利用体外细胞培养、MTT比色技术及流式细胞仪等方法,测定不同浓度的rhGH对人胃癌细胞株BGC823生长曲线、细胞抑制率、细胞周期和增殖指数(PI)的影响.结果 rhGH在体外无明显促进BGC823细胞分裂增殖,rhGH组与对照组、rhGH+L-OHP组与L-OHP组比较差异均无显著性(P＞0.05),且生长曲线没有升高;rhGH+L-OHP组与对照组比较或rhGH+L-OHP组与对应的rhGH组配对比较,细胞抑制率增加,阻滞于G0～G1期的细胞数增加,S期细胞明显减少,PI明显降低(P＜0.01).rhGH+L-OHP组与L-OHP组比较,细胞抑制率呈现升高趋势,而PI呈下降趋势,提示rhGH与抗肿瘤药合用可以增强抗肿瘤药对肿瘤细胞的杀伤作用.结论 rhGH在体外无明显促进胃癌细胞的分裂增殖,与抗肿瘤药合用可提高抗肿瘤药的疗效.

血管内皮生长因子-C在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在胃癌中的表达并探讨其与淋巴结转移的关系.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF-CmRNA在5株胃癌细胞株中的表达情况,同时采用免疫组织化学法,检测63例接受根治性切除手术病例的胃癌组织标本VEGF-C蛋白的表达.结果 VEGF-C mRNA表达于胃癌细胞株MKN-45、SGC-7901及AGS.VEGF-C蛋白则在52.4%(33/63)的病例中呈阳性表达.在伴淋巴结转移的胃癌中,VEGF-C表达较无淋巴结转移者更显著(P＜0.01).同时,VEGF-C表达与淋巴管浸润和TNM分期密切相关(P＜0.01),但与年龄、性别、肿瘤大小、位置、Lauren分型、浸润深度和血管浸润均无明显相关.结论 VEGF-C的表达与胃癌淋巴结转移密切相关.

外科领域营养支持研究的新进展和方向

经过30余年众多学者的不懈努力,现代临床营养支持治疗[肠外营养(PN)、肠内营养(EN)]无论在基础理论探索,还是营养制剂和设备的研制,以及临床实施的经验积累等方面,都有了非常显著的进步.

启事

第二届全国普通外科主任论坛会议征文通知

第七届烧伤外科学术会议征稿通知

《其实你还没懂Word》征订启事

《医学理论与实践》杂志征稿启事

《临床科研方法讲习班》通知

《中国CT和MRI杂志》征文、征订通知

2004海峡两岸创伤医学论坛暨第十一届全国创伤学术交流会征文通知

国际肝胆胰协会中国分会第一届学术研讨会征文通知

中华医学会系列杂志对论文统计学处理的有关要求