中华实验外科杂志
Chinese Journal of Experimental Surgery 중화실험외과잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-9030
- 国内刊号： 42-1213/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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铜绿假单胞菌QS系统对大鼠皮肤溃疡面生物被膜形成的影响
目的 对比野生型铜绿假单胞菌及LasI和RhlI突变株铜绿假单胞菌感染大鼠皮肤溃疡创面后生物被膜形成的差异,探讨铜绿假单胞菌LasI及Rhll基凶在活体生物被膜形成中的作用.方法 制备大鼠皮肤溃疡模型,共60个创面,分成3组,前两组分别接种导人绿色荧光蛋白(GFP)质粒的野牛型铜绿假单胞菌及LasI和RhlI突变株铜绿假单胞菌,另一组不接种细菌作为空白对照组.分别于术后1、3 7 10 d切取标本,每个标本分成两等份,分别进行细菌学检测和光学显微镜及荧光显微镜观察二组上皮化及生物被膜形成情况.结果 除了第7天外,在第1、3、10天感染了野牛型铜绿假单胞菌创而组织内细菌数多于LasI及RhlI缺陷组的细菌数.空白对照组细菌数则更少,且野生组上皮化较慢,生物被膜较厚.结论 活体内LasI及RhlI基因缺损的铜绿假单胞菌生物被膜形成能力及组织感染能力均低于野生株.
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重组胶原矿化骨负载骨形态发生蛋白2活性多肽复合材料的制备及其异位成骨研究
目的 构建重组胶原矿化骨/BMP2活性多肽新型仿生骨修复材料,并评价其异位成骨能力.方法 将48只成年SD大鼠随机分为4组,在A、B、C组的大鼠背部肌肉内分别植入含3、2、1 nag BMP2活性多肽的重组胶原矿化骨;在D组的大鼠背部肌肉内植入单纯重组胶原矿化骨,于4、8和12周时间点将大鼠处死,经CT三维重建、组织学观察及钙含龟测定检测植入材料的成骨情况.结果 A、B.C组,在各时间点的CT三维重建、组织学观察及钙含量检测结果均表明其异位成骨能力优于D组,差异有统计学意义(P<0.01),其中A、B两组的异位成骨能力优于C组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 BMP2活性多肽町以显著增强重组胶原矿化骨的骨诱导活性,这种骨诱导性存在一定的剂量效应关系.
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反义转化生长因子-β1质粒对肌腱术后粘连形成的影响
目的 观察反义转化生长因子(TGF)-β1质粒对肌腱粘连的治疗作用.方法 将24只成年新西兰大白兔随机分成3组,行中趾屈指肌腱切断吻合术,腱鞘内分别注入生理盐水、反义TGF-β1脱氧寡核苷酸和反义TGF-β1质粒,4周后取出肌腱进行生物力学测试;48只成年新西兰大白兔随机分成2组,行中趾屈指肌腱切断吻合术,腱鞘内分别注入生理盐水或反义TGF-β1质粒,于术后7、14、28、56 d取出肌腱,原位杂交方法测定肌腱TGF-β1和Ⅰ型胶原mRNA的表达.结果 生物力学结果表明使用反义TGF-β1质粒能有效的改善屈指肌腱术后的粘连;原位杂交显示反义TGF-β1质粒能有效的降低每个时间点TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达.结论 反义TGF-β1质粒能有效的抑制TGF-β1在肌腱损伤修复中的作用,减少粘连的形成.
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壳聚糖-胶原生物膜介导雪旺细胞联合神经干细胞桥接周围神经缺损
目的 观察以壳聚糖一胶原偶联的生物膜为载体,联合移植雪旺细胞(SCs)与神经干细胞(NSCs)在坐骨神经损伤修复过程中所起的作用,评价该方法的疗效.方法 分离纯化SCs和NSCs,传代4代后共培养于壳聚糖一胶原生物膜上.32只Wistar成鼠(体重350～400 g)建立坐骨神经缺损动物模型,随机分为4组:空白组;SCs移植组;NSCs移植组;NSCs联合SCs移植组.14周后观察Cy3荧光素染色、MBP免疫酶染色及苏木素-伊红(HE)染色的结果.结果 BDA示踪显示术后联合移植组和SCs组有较多的神经纤维穿过缺损部位,大鼠右后肢感觉和运动功能恢复较其他组明显,修复神经段神经传导速度比值也大于其他组(P<0.05).SCs组和联合移植组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 NSCs和SCs与壳聚糖一胶原生物膜相容性良好,壳聚糖一胶原生物膜介导的SCs联合NSCs桥接周围神经缺损可使部分神经再生.
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不同剂量的重组人粒细胞集落刺激因子对大鼠心脏移植排斥反应的抑制作用
目的 观察不同剂量的重组人粒细胞集落细胞刺激因子(rh-G-CSF)对大鼠心脏移植排斥反应的抑制作用.方法 建立大鼠异位心脏移植模型,于术后当天起分别给予各组受体鼠rh-G-CSF每日0、125、250、500μg/kg体重,共6 d.术后第6天行供心组织学检查、混合淋巴反应实验(MLR)、细胞因子检测、外周血流式细胞仪检测,并观察各组供心存活时间.结果 250μg组与500μg组在体内、外均显示排斥反应减弱,并伴随外周血CIM+CD25+T细胞和MLR中自细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的增加.125 μg组中以上各指标与对照组比较差异无统计学意SL(P>0.05).结论 rh-G-CSF的抗排斥作用与其剂量有关.rh-G-CSF增加外周血的CD4+Cff25+T细胞是其发挥抗排斥作用的重要机制,其中IL-10和TGF-β1是重要的效应细胞因子.
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骨形成蛋白-2和转化生长因子-β1双基因真核表达载体的构建
目的 构建骨形成蛋白(BMP)-2、转化牛长因子(TCF)-β1双基因真核表达载体.方法 以pGEM-T-BMP-2及pGEM-T-TGF-β1两个质粒为模板,分别用引入新的酶切位点引物,PCR扩增出长度为1188 bp的BMP-2和1 173 bp的TGF-β1两个目基因片段;将其分别定向连入真核双基因表达载体plRES;酶切分析及序列测定重组子.结果 双酶切分析电泳可见长度为1188bp的BMP-2条带和1 173 bo的TGF-β1条带,核酸序列测定证实重组质粒pIRES-BMP-2-TGF-β1构建正确.结论 成功构建了BMP-2及TGF-β1双基因真核表达载体.
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低氧诱导因子-1的病毒载体制备及感染效果
目的 制备低氧诱导因子(HIF)-1腺病毒载体并评价其对表皮角质细胞的感染效果.方法 Ad/HIF-1质粒经酶切鉴定后,以4μg质粒转染1.2×106个HEK293细胞,2 d后荧光显微镜下观察转染效率.1周后收集细胞及上清并感染HEK293细胞进行病毒扩增,待扩增的细胞及上清量达300 ml时进行病毒纯化及滴度测定.后用制备的病毒载体感染表皮角质细胞,流式测定其感染效果.结果 Ad/HIF-1质粒酶切鉴定正确;转染或感染HEK293细胞后有绿色荧光蛋白(GFP)表达;获得的腺病毒滴度为1.8×1011PFu/ml.病毒以MOI=50感染表皮细胞,2 d后GFP阳性细胞的比例为97.46%.结论 成功制备了HIF-1腺病毒载体,且感染表皮角质细胞后能得到较高的感染效率,从而为腺病毒介导的基因功能研究提供理论基础.
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他莫昔芬对大鼠腹主动脉瘤形成的抑制作用
目的 观察他莫昔芬对大鼠腹主动脉瘤(AAA)形成的影响及作用机制.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分成2组,实验组他莫昔芬预给药7 d(每天15 mg/kg体重),建立A从灌注模制.术后7 d切取腹主动脉.一计算腹主动脉直径变化率,苏木素-伊红(HE)染色观察动脉壁炎性细胞浸润,Verhoff染色观察动脉壁弹性纤维,免疫组织化学观察动脉壁基质金属蛋白酶(MMP)-2,9及巨噬细胞的表达.结果 他莫昔芬明显抑制AAA的形成,抑制率95%～99%.动脉壁内炎性细胞浸润明显减少,弹力纤维破坏受到抑制,MMP-2,9及巨噬细胞的表达受到抑制.结论 他莫昔芬通过抑制大鼠腹主动脉壁内早期的炎症反应和MMPS的表达,抑制大鼠AAA的形成.
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高原烧伤大鼠脑损伤与丙二醛、超氧化物歧化酶含量变化
目的 观察高原严重烧伤延迟复苏后早期大鼠脑组织中丙二醛及超氧化物歧化酶含量变化及其与脑损伤的关系.方法 130只雄性Wistar大鼠设计高原(海拔3800 m)烧伤实验动物模型(TBSA 30%,Ⅲ度),并随机分4组:A组(高原烧伤即时复苏组)、B组(高原烧伤延迟复苏组)和C组(高原正常对照组),同时设D组(兰州地区正常对照组)(海拔1517 m).采用分光光度比色法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量,采用干、湿重比重法测定脑组织含水量,运用末端脱氧核苷酸介导的X-dUTP缺口末端标记法(TUNEL)测定脑皮质细胞凋亡阳性细胞数.结果 A组大鼠脑组织中SOD活性于烧伤后24 h降至低(90.45±14.78),B组大鼠腩组织中SOD活性除烧伤后12h外各时相点均低于A组(P<0.05).高原烧伤后大鼠脑组织中MDA含量即显著升高,于烧伤后12 h达高峰(10.63±4.98),其后逐步降低至正常水平;B组大鼠脑组织中MDA含量变化趋势同A组,但于伤后7 d仍处于较高水平.脑组织含水量于伤后6 h开始升高,于24 h达高峰(71.70±2.32),于伤后7 d降至正常水平;B组变化趋势同A组.脑皮质TUNEL阳性细胞在伤后1 h即增多,于伤后24 h达高峰(233.33±16.22),于伤后7 d仍高于正常水平.结论 高原严重烧伤及延迟复苏后,脑组织中脂质过氧化物增加及超氧化物歧化酶耗竭,表明其可能参与了高原严重烧伤延迟复苏脑损伤的发生.
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仿生型人工小血管支架的构建与体内降解研究
目的 以复合成型工艺构建可降解仿生型人工小血管支架,观察其体内降解过程及组织反应.方法 模仿天然血管的三层结构,使用可降解的聚埘二氧环己酮(PDS)编织支架作为中间弹力层、以小肠黏膜F层(SIS)为外层、内层用共混硫酸软骨素胶原海绵涂层构建复合型人工小血管支架,将支架材料植入比格犬背部脊柱两侧肌肉内,于2、4、12、24周取材,行组织学和透视电镜观察.结果 所有实验动物术后活动正常,切口I期愈合.2～4周时,SIS与胶原结构基本保持,日J见较多的炎细胞浸润,胶原海绵网孔结构开始破坏融合,形成板层结构.12周时,自身纤维结缔组织完全取代胶原海绵材料,纤维组织广泛长人网材孔间隙内,PDS发生了部分的降解,炎细胞浸润明显消退.24周时,支架材料完全吸收,被新生纤维组织填充,炎细胞和和异物巨噬细胞少见.降解过程中未见材料周围组织变性、坏死或肉芽肿异常增生现象.结论 本实验制备的仿生型人工小血管支架组织反应轻,降解时间合适,满足体内组织再生要求,可用于下一步实验.
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STAT3信号通路与血管重塑中平滑肌细胞表型转化及增殖关系
目的 观察静脉桥再狭窄模型中血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化和增殖活性的变化,探讨信号转导子和激活子3蛋白(STAT3)的表达与VSMC表型转化及增殖活性的关系.方法 建立猪静脉桥再狭窄模型,采用血管病理形态学、免疫组织化学和免疫印迹(Western blot)方法,观察术后7、14、30 d血管蓖塑及血管壁中增殖细胞核抗原(PCNA)、平滑肌ot肌动蛋白(SM-α actin)和STAT3表达变化及其相关性.结果 (1)术后7 d新牛内膜形成逐渐增厚,于术后30 d达大;重塑指数和外弹力板围绕面积(EELA)术后7 d稍有增大,其后不断减小,术后14～30 d明显减小(P<0.05).(2)免疫组织化学和Western blot测定STAT3蛋白显示,术后7 d中膜VSMC中阳性表达明显,术后14 d中膜VSMC和内膜VSMC中阳性表达均增加达高峰;术后30 d中膜VSMC中有较少部分阳性表达,内膜VSMC中阳性表达较14 d减少.血管中膜中STAT3和PCNA的蛋白呈显著性正相关(r=0.726,P<0.05).结论 血管平滑肌细胞的表型转化和增殖活性改变对内膜增生和血管重塑起着重要作用,STAT3信号通路与血管重塑中VSMC的增殖高度相关,参与并促进了VSMC的表型转化和增殖.
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CD8+T细胞和调节性T细胞在食管癌中表达及与预后的关系
目的 探讨食管癌组织中CD8+T细胞、Foxp3阳性调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)表达及对预后的影响.方法 应用免疫组织化学SP法检测CD8、Foxp3在90例食管癌组织间质、癌巢中的表达,计数阳性细胞,分析阳性细胞数目与预后的关系.结果 间质中CD8+T细胞的数量与浸润深度、分化程度呈负相关(P<0.05);Foxp3+Treg细胞数量与淋巴结转移、病变长度呈正相关(P<0.05).本组病例3年总生存率66.67%(60/90).单因素生存分析显示,无论癌巢或间质中,CD8+T细胞计数高者的总体生存曲线优于计数低者,差异有统计学意义(P<0.05);roxp3+Treg细胞计数高者的累计生存情况较计数低者差(P<0.05).多因素分析显示,间质浸润的CD8+T、Foxp3+Treg细胞数量和病变长度是影响生存期的独立因素(P<0.05).结论 间质中浸润的CD8+T细胞数量、Foxp3+Treg细胞数量是影响食管癌患者预后的独立因素,Foxp3+Treg细胞数量增多预后不良,CD8+T细胞数量增多则预后良好.
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转染环氧合酶-2反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞侵袭性的抑制作用
目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)反义寡核苷酸(ODNs)对人骨肉瘤细胞株OS-732侵袭性的抑制作用及其机制.方法 设计和合成COX-2反义寡核苷酸,体外转染骨肉瘤OS-732细胞,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot证实转染效果.改良Boyden-transwell方法观察肿瘤细胞侵袋抑制率,RT-PCR方法研究转染COX-2反义ODNs对OS-732细胞尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA、uPAR)mRNA表达的影响.结果 转染COX-2反义ODNs的细胞COX-2核酸、蛋白表达水平显著降低.转染组细胞侵袭能力显著降低,呈浓度依赖性.转染组细胞uPA、uPAR的mRNA表达水平显著降低(P<0.01).结论 COX-2反义ODNs对OS-732细胞侵袭能力有明显抑制作用,其对uPA、uPAR表达的下调是主要作用机制.
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过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对转化生长因子β1诱导皮肤成纤维细胞作用的影响
目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对转化生长因子(TGF)-β1诱导成纤维细胞(Fb)转分化及对胶原牛成作用的影响.方法 体外培养成人正常皮肤Fb,免疫荧光细胞化学法观察PPARγ配体15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)、曲格列酮对TGF-β1诱导的α平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,Western blot检测15d-PGJ2、曲格列酮对TGF-β1诱导的α-SMA及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响,噻唑蓝(MTT)比色法观察对Fb增殖活性的影响.结果 与TGF-β1诱导组比较,10μmoL/L曲格列酮、10 μmol/L 15d-PGJ2预处理组的α-SMA表达量显著减少(P<0.01),抑制效应分别为31%、57%;预处理组的Ⅰ型胶原表达量也屁著减少(P<0.01),抑制效应分别为57%、38%.曲格列酮、15d-PGJ2对Fb的增殖活性影响分析,各实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 PPARγ激动剂能抑制TGF-β1诱导的人正常皮肤Fb的转分化和Ⅰ型胶原合成增多的效应,具有抗瘢痕的潜在作用.
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表皮生长因子受体抑制剂AG1478对乳腺癌裸鼠移植瘤的生长影响
目的 观察表皮生长因子受体抑制剂AG1478和内分泌治疗联合应用对乳腺癌荷瘤裸鼠移植瘤生长的影响.方法 应用MCF-7乳腺癌细胞建立裸鼠动物模型,当肿瘤体积在100～200 mm3时,按肿瘤体积大小将裸鼠随机分成溶剂对照组、AG1478组、三苯氧胺(TAM)组、AG1478+TAM组,分别给予空白溶剂、AG1478腹腔注射、TAM灌胃、AG1478腹腔注射和TAM灌胃.同时给药6周,动态观察移植瘤生长,用药结束后2d处死裸鼠,取肿瘤称重、计算肿瘤体积(V=长径×短径2×π/6)、抑瘤率([(V对照组-V实验组)/V对照组]×100%).结果 各组裸鼠体重和肿瘤体积在治疗前具有均衡性.用药期间,溶剂对照组肿瘤生长快,AGl478组次之,TAM组肿瘤生长较缓慢,而AGl478+TAM组肿瘤有缩小趋势.用药结束后,各组的抑瘤率分别为AG1478组30.4%,TAM组62%,AG1478+TAM组84.8%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 AG1478对乳腺癌裸鼠移植瘤具有抑制作用,也可以加强三苯氧胺的抑瘤效果,两者有明显协同作用.
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骨髓基质细胞经CM-Dil标记后的活性及移植到损伤脊髓的示踪观察
目的 观察骨髓基质细胞(BMSCs)经CM-Dil荧光染料标记后的生物活性及移植后在损伤脊髓中的迁移和分布.方法 取Wistar大鼠的第3代BMSCs消化后分两组,实验组和对照组,实验组以CM.DiI标记,另一组正常细胞不标记,测定生长曲线.以改良Allen法制备脊髓损伤模型,将CM.DiI标记的BMSCs通过蛛网膜下腔注射移植,分别于移植后24 h、1、2、3、4周取损伤脊髓段作冰冻切片,倒置荧光显微镜下观测移植的BMSCs在损伤脊髓中的迁移和分布规律.结果 BMSCs经CM-Dil荧光染料标记成功率100%,实验组和对照组的生长曲线基本吻合;移植后24 h,脊髓损伤区未见标记细胞,移植后1周,标记的BMSCs开始迁移到损伤区硬脊膜下,移植后2～3周.BMSCs迁移、聚集在损伤脊髓的中心,移植后4周,仍有标记细胞聚集在脊髓损伤中心.结论 (1)BMSCs经CM-Dil荧光染料标记后的生物活性保持正常;(2)CM-Dil标记的BMSCs移植后能迁移聚集在损伤脊髓的中心,CM-Dil在活体内至少能维持4周
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肾上腺髓质素对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用
目的 观察肾上腺髓质素(ADM)在肺缺血再灌注损伤的保护作用.方法 三套管法建立大鼠左肺移植模型,分对照组和静脉ADM给药组(每分钟0.05μ/kg体重),分别进行髓过氧化物酶(MPO)活性测定、移植肺支气管肺泡灌洗液(BAL)中性粒细胞计数、缺血再灌注后血气分析以及移植肺组织湿/干(W/D)重比测定.结果 再灌注4 h后,对照组的MPO活性(0.45±0.07)显著大于ADM给药组(0.24±0.06),差异有统计学意义(t=2.764,P<0.05).对照组左肺BAL中性粒细胞计数值为(152士23)×105,明显高于ADM给药组的BAL中性粒细胞计数值(87±12)×103,t=2.813,P<0.05.对照组移植肺组织湿/干(W/D)重量比为8.39±0.96,显著高于ADM给药组7.02±0.71(t=3.509,P<0.01).在灌注2 h时,对照组左肺静脉血氧分压为(177.62±23.12)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),显著低于ADM给药组(438.50±45.5)mm Hg(t=3.016,P<0.05);再灌注4 h时,对照组左肺静脉血氧分压为(141.75±19.32)him Hg,显著低于ADM给药组427.75±49.98(t=3.248,P<0.05.此外,对照组在再灌注4 h的左肺静脉血氧分压较再灌注2 h时明显降低(t=2.583,P<0.05);而ADM给药组在再灌注2h和4 h时的左肺静脉血氧分压却无显著变化(t=2.134,P>0.05).结论 ADM能够通过抑制移植肺缺血再灌注过程中炎性损伤的机制发挥其器官保护的功能.
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气-液面培养对角质形成细胞分化的影响
目的 研制角质形成细胞-胶原-猪去细胞真皮基质(PADM)组织工程皮肤,观察气-液面培养对角质形成细胞分化及细胞因子基因表达的影响.方法 将角质形成细胞种植在真皮基质胶原面进行气-液面培养和浸没式培养.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对比研究两种培养方法获得的细胞膜片bFGF基因表达差异.结果 气-液面培养获得的角质形成细胞层结构与正常皮肤相似,细胞分化良好.单纯浸没式培养角质形成细胞层较薄,分化较差.气一液面培养获得的细胞膜片bFGF mRNA表达量明显高于单纯浸没式培养(t=3.825,P<0.01).结论 气-液面培养可促进角质形成细胞的生长、分化及复层表皮结构形成,影响细胞因子的基因表达.
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缺氧通过抑制E-cadherin促进胰腺癌细胞侵袭的研究
目的 观察缺氧对胰腺癌细胞E-cadherin表达的抑制以及侵袭性生物学行为的影响,探讨E-cadherin表达抑制的调控机制.方法 分别在常氧和缺氧环境下培养胰腺癌细胞Pane-1,通过Western blot和TransweU技术对比观察E-cadherin表达的差异以及细胞侵袭能力的变化.体外转染表达HIF-α siRNA的真核表达载体pGenesil-1-HIF-1α以及对照载体,进一步检测沉默HIF-α之后,Pane-1细胞E-cadherin和细胞侵袭能力的变化.结果 缺氧可以抑制Pane-1细胞E-cadherin的表达,并增强其在体外的侵袭能力.而通过RNAi技术沉默了HIF-α之后,则町以部分恢复缺氧微环境对Pane-1细胞E-cadherin表达的抑制,同时降低其在体外的侵袭能力.结论 缺氧微环境中HIF-α的活化可抑制E-cadherin的表达并加强胰腺癌细胞侵袭能力.
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乙肝病毒X蛋白通过激活核因子-κB信号通路上调MDR1的表达
目的 探讨核因子(NF)-κB信号通路是否是乙肝病毒X蛋白(HBx)上调多药耐药基因(MDR1)的途径之一.方法 建立稳定转染HBx基因的L02(L02/HBx)细胞系,用NF-kB信号通路阻断剂吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)阻断NF-κB信号通路.采用荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察转染前后及PDTC加入前后NF-κB信号通路的激活失活,同时用实时聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测转染前后及PDTC加入前后MDRl的表达.结果 转染HBx基因后NF-κB信号通路被激活,MDRI表达明显上调(P<0.05);PDTC加入后NF-κB信号通路被阻断,MDRi表达明显下调(P<0.05).结论 NF-κB信号通路可能是HBx介导肝癌多药耐药,上调多药耐药基因MDR1的途径之一.
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少枝胶质细胞肿瘤星形细胞上调基因-1表达及其临床意义
目的 探讨少枝胶质细胞肿瘤AEG-1的表达,及其与肿瘤恶性程度和预后的关系.方法 回顾性复习42例经病理证实的少枝胶质细胞肿瘤患者的病史资料,随访患者的预后,采用免疫组织化学法检测42例肿瘤标本和4例正常脑组织AEG-1表达.结果 AEG-1总阳性率为45.2%(19/42),OG(WHOⅡ)组和AOG(WHOⅢ)组的表达率分别为35.5%(11/31)和72.7%(8/11)(x2=4.55,P<0.05),表达水平与肿瘤的级别呈正相关(r=0.392,P<0.05),4例正常脑组织中均无AEG-1表达.42例患者中,失访率14.3%(6例),AEG-1(-),(+)和(艹)组中位生存期分别为7.6、2.3、1.6年(x2=32.74,P<0.01),表明AEG-1的表达水平与少枝胶质细胞肿瘤患者的生存时间呈负相关(r=-0.876,P<0.01).结论 AEG-1可能是少枝胶质细胞肿瘤恶性程度的分子标志物之一,可作为临床评估预后的潜在指标之一.
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7.5%高渗盐水对急性弥漫性腹膜炎术后液体平衡的影响
目的 观察7.5%高渗盐水对急性弥漫性腹膜炎急诊手术后液体平衡的影响.方法 42例急性弥漫性腹膜炎急诊手术患者,术毕进入外科ICU后,实验组(n=21)输注7.5%高渗盐水(4 ml/kg体重)后续平衡液;对照组(n=21)仪输半衡液.比较两组患者的输液量、尿量、液体平衡、体莺变化以及并发症发生率和病死率.结果 与对照组比较,实验组手术日的输液量减少(P<0.05);手术日和术后第1天的尿量较多(P<0.05,P<0.05),液体正平衡量减少(P<0.01,P<0.01);术后体重增加幅度降低(P<0.01),体重下降时间提前(P<0.01);总体并发症发生率较低(P<0.05).结论 7.5%高渗盐水有明显的利尿作用,可减少急性弥漫性腹膜炎急诊手术后的输液量和液体正平衡量,促进液体负平衡提前出现,并使总体并发症发生率降低.
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Caspase-3在间质干细胞分化过程中的基因芯片分析及体外作用
目的 观察Caspase-3在小鼠胚胎肢芽间质干细胞分化过程中的作用,并将其运用于体外间质干细胞模型中进行验证.方法 用基因芯片技术检测Caspase-3在小鼠胚胎肢芽间质干细胞分化过程中的基因表达,分析其表达规律和可能作用;Yg用Caspase-3活性检测试剂盒,荧光比色法和Western blot法检测体外培养的骨髓间质干细胞诱导失巢凋亡中Caspme-3活性的改变;借助流式细胞仪分析骨髓间质干细胞凋亡的变化.结果 Caspase-3在小鼠胚胎肢芽间质干细胞向软骨分化的关键期(E12)出现显著的表达下调;Caspase-3的活性以及蛋白表达水平随诱导凋亡时间的延长而明显升高,且与细胞凋亡率相关.结论 Caspase-3蛋白在体内和体外诱导间质干细胞凋亡的过程中均发挥着重要作用;胚胎发育过程中,通过下调Caspase-3的表达以促进软骨形成,而抑制Caspase-3的活性可以有效降低细胞凋亡率.
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CD24表达在乳腺浸润性导管癌中的意义
目的 探讨乳腺浸润性导管癌组织中CD24的表达与肿瘤增殖和侵袭的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测142例乳腺浸润性导管痛组织中CD24、Ki67的表达,与其他临床病理参数进行比较;分析57例CD24阳性病例中导管内癌成分与浸润性成分CD24的表达;根据ER和c-erbB-2表达分组,比较各组间CIY24的表达.结果 在乳腺浸润性导管癌中,CD24的表达在患者年龄分组、肿瘤大小及PR、c-erbB-2的表达上差异无统汁学意义,而在有无淋巴结转移、组织学分级、临床分期、ER及Ki67的表达上差异有统计学意义;且CD24表达等级与Ki67的表达等级之间呈正相关.在合并DCIS的IDC中导管内癌成分和浸润性成分CD24的表达差异无统计学意义.在不同的ER和c-erbB-2表达组间CIY24的表达差异有统计学意义.结论 CD24的高表达在乳腺癌的增殖和侵袭中起重要作用.检测C1Y24和Ki67有助于乳腺癌病情的预后判断.
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缺血预处理通过抑制炎症反应保护心肌细胞的研究
目的 探讨缺血预处理(IP)对心肌细胞的保护作用及其机制.方法 2004年4月至2004年12月期间在我科行瓣膜置换手术的患者36例,根据是否采取缺血预处理分为预处理组(20例)和对照组(16例),比较两组炎症因子白细胞介素(IL)-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和心肌细胞转录因子NF.KB p65蛋白的变化情况,分析IP对机体炎症反应的影响.结果 两组患者细胞因子IL-8、IL-10、TNF-α均在主动脉开放6 h时达到高峰,术后5 d均恢复到术前水平.预处理组开放后6 h、术后1 d、术后2 d IL-8和TNF-a水平明显低于对照组(P<0.05),IL-10水平显著高于对照组(P<0.05).复灌后两组心肌细胞中NF-KB p65蛋白表达明显增多,预处理组表达量明显低于对照组(P<0.05),与术后1 d TNF-α呈正相关.结论 缺血预处理可能通过降低机体的炎症反应途径达到心肌细胞保护的效果.
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细胞增殖对DNA损伤敏感度的影响
目的 观察细胞增殖状态对DNA损伤敏感度的影响.方法 相同时间和强度的紫外线(uV)作用于过以及未经过植物m凝素(PHA)刺激的外周血淋巴细胞(PBLs),荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DSBs)处的,y-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤,用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡.结果 经PHA刺激PBLs细胞进人增殖状态,UV可引起DNA双链断裂,增殖期的PBLs细胞DNA损伤程度明显大于静止期PBLs细胞.结论 受到相同打击后,处于增殖期的淋巴细胞DNA损伤较静止期更为明显.
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C1侧块C2椎板螺钉固定与C1-2关节螺钉固定的生物力学性能比较
目的 比较1侧块C2椎板螺钉固定与后路C1-2关节螺钉固定的牛物力学性能,为枢椎交叉椎板螺钉的临床应用提供参考依据.方法 收集新鲜成年人尸体颈椎标本(C0-C4)10具,男6具,女4具,平均年龄58岁(50～72岁).分别制备成C1-2完整状态的模型(M0)、C1-2失稳的模型(M1)、C1,侧块螺钉C2交义椎板螺钉固定模型(M2)及后路C1-2关节螺钉固定模型(M3),进行三维生物力学测试,记录各组模型在屈伸、轴向旋转和侧屈的运动范围(ROM)和中性区(NZ).结果 屈伸模式下M0、M1、M2、M3的ROM和NZ分别为:(20.4±9.2)°、(10.4±5.8)°;(46.3±17.2))°、(34.5±14.1)°;(4.1±0.9)°、(1.9±0.8)°;(4.3±1.0)°、(2.1±0.7)°.轴向旋转模式下 M0、M1、M2、M3的ROM和NZ分别为:(65.3±12.9)°、(40.8±11.2)°;(91.7±10.5)°、(72.3±12.6)°;(8.9±2.1)°、(4.7±1.8)°;(8.4±2.5)°、(4.4±2.3)°.侧屈模式F M0、M1、M2、M3的ROM和NZ分别为:(11.5±4.3)°、(7.2±3.2)°;(35.0±12.9)°、(21.9±11.8)°;(2.9±1.1)°、(1.4±0.8)°;(2.5±1.4)°、(1.3±1.0)°.在三维运动模式下M2和M3力学稳定性均明显优于M1和M0,然而M2和M3,的差异无统计学意义(P>0.05).结论 C1侧块C2椎板螺钉固定拥有良好的生物力学稳定性,可作为C1-2关节螺钉固定的良好替代.
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失血性休克猪输注不同剂量游离血红蛋白后血清白细胞介素-12及γ-干扰素的含量变化及意义
目的 观察失血性休克猪输注不同剂量游离血红蛋白(FHb)后血清白细胞介素(IL)-12及γ-干扰素(IFN-γ)的含量变化,探讨FHb对休克动物免疫功能的影响.方法 30头家猪随机分为5组,分别给予不同剂量FHb(0、2.5、5、10、15 ms/ks体蕈),监测动物生命体征、各重要脏器功能变化以及多器官功能障碍综合症(MODS)的发生率,检测休克动物在输注不同剂量FHb后血清IL-12、IFN-γ的含情变化.结果 失血性休克猪在输注FHb后血清IL-12及IFN-γ含量明显下降(P<0.01),它们的变化趋势与FHb剂量呈负相关.其中输注FHb 15 ms/kg体重组动物MODS发生率与休克对照组比较明显增加(P<0.05).结论 FHb能明显抑制失血性休克动物抗原提呈细胞(APCs)的功能,使细胞免疫功能受到抑制;输注高剂量FHb(>15 mg/kg体重)会增加失血性休克动物MODS发生率.
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人胰腺癌细胞系表达干细胞标志物研究
目的 观察胚胎干细胞和胰腺相关干细胞标志物在胰腺癌细胞系中基因和蛋白水平的表达,探讨胰腺癌起源.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胚胎干细胞标志物Oct4、abc2、c-kit以及c-kit配体干细胞因子(SCF)和胰腺相关干细胞标志物角蛋白19(ck19)、巢蛋白(nestin)、波形蛋白(vimentin)、胰十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)等在胰腺痛细胞系sw1990、BxPC3、pc3和jt305中基因水平(mRNA)的表达;利用免疫细胞化学(ICC)方法检测Oct4、abcs2、c-kit和ck19、nestin在上述细胞系中蛋白水平的表达.同时结合异硫氰荧光素(FITC)标记抗体进行流式分选检测上述指标在胰腺癌细胞中的表达率.结果 除BxPC3、pc3和j1305不表达c-kit以外,上述4种胰腺癌细胞系在mRNA水平表达其余所有的标志物;在蛋白水平,上述4种细胞均表达Oct4、abcg2、ck19、nestin,而除sw1990以外的3株胰腺癌细胞株小表达c-kit.结论 人胰腺癌细胞系表达胚胎干细胞标志物Oct4、abcg2和胰腺干细胞标志物ck19、nestin、vimentin、PDX-1,部分表达c-kit.胰腺癌可能来源于成体胰腺干细胞或胰腺前体细胞.
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Ⅰ型神经纤维瘤病基因型小鼠的破骨细胞功能研究
目的 观察Ⅰ型神经纤维瘤病基因型小鼠的破骨细胞功能变化,探讨Ⅰ型神经纤维瘤病引起骨质疏松的发病机制.方法 选取神经纤维瘤病基因杂合型(Nfl+/-)和野生型(Nfl+/+)小鼠为研究对象,取胫骨干骺端行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,比较两组小鼠骨内破骨细胞含量.体外实验取两种基因型小鼠的骨髓单核细胞,观察在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和细胞核因子KB受体活化因子配基(RANKL)诱导下的破骨细胞分化能力,测定两组破骨细胞形成、分化、贴附、迁移和骨吸收功能.结果 Nfl+/一小鼠骨内成熟破骨细胞数量比Nn+/+增多,细胞体积明显增大(TRAP阳性区面积占总面积的百分比分别为Nfl+/+,(0.8800±0.0014)%;Nfl+/-,(2.3300±0.0013)%,P<0.01),差异有统计学意义;体外培养的Nn+/-破骨细胞形成增多,(每1×105骨髓单核细胞形成的破骨细胞数分别为Nfl+/+,41.75±13.14:N仃+/-,61.17±18.17,P<0.01)差异有统计学意义;体外诱导培养的破骨细胞的黏附、迁移、骨吸收功能强(黏附细胞数量Nn+/+,53.00±11.08;Nil+/-,108.00±11.67,JP<0.01;迁移细胞数量Nn+/+,88.33±12.40;Nn+/-,239.83±67.77,P<0.01骨吸收面积百分比Nfl+/+.18.37%±0.0367;Nfl+/-,(40.4400±0.1052)%,P<0.01).两者差异有统计学意义.结论 破骨细胞增多,功能增强是Ⅰ型神经纤维瘤病引起骨质疏松的发病机制之一.
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猪脑出血血肿灶周脑白质超微结构改变
目的 观察猪脑出血后不同时间血肿灶周白质的超微结构的变化.方法 选取小猪15头,随机分为实验组12头和对照组(假手术组)3头,其中实验组1、3、5、7 d各3头.取血肿周围白质行超微结构观察,对照组(假手术后3 d)取相对应脑白质超微结构观察.结果 脑出血后1 d可见胶质细胞及神经纤维较明显的结构改变;3 d时病变重;5-7 d,胶质细胞及纤维损伤有所减轻.结论 脑出血后宜尽早采取有效的干预措施,从始动环节上抑制或减轻继发性脑白质损伤.
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非小细胞肺癌中Ezrin和E-cadherin的表达及其临床意义
Ezrin蛋白可促进肿瘤转移,上皮钙黏素E(E-cadherin)在上皮细胞的细胞连接中起莺要作用.本研究采用免疫组织化学法联合两者进行检测,以探讨它们与非小细胞肺癌(NSCLC)的临床病理及预后的关系.
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一种压力式肝门血流阻断新技术
我们自行设计一款充气压力式肝门血流阻断仪(简称阻断仪,已有专利),通过本实验比较该阻断仪与传统Pringle肝门阻断法的阻断结果.
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载体介导的RNAi对胰腺癌细胞交叉抑制的研究
国内外研究结果显示,以K-ras基因突变位点在内的mRNA片段作为靶序列设计的shRNA(短发卡RNA),能有效的抑制相应突变型K-ras基因的表达和细胞的增值,且不影响野生型K-ras基因的表达[1,2].
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人甲状腺组织中钠碘转运体基因表达的研究
钠碘转运体(The sodium-iodide symporter-NIS)定位于甲状腺滤泡细胞的基底外侧膜,将2个钠离子和1个碘离子同时转运人甲状腺细胞,从而形成甲状腺细胞内碘的浓聚.我们采用实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应(Real timeQuantitative PCR)方法测定人甲状腺乳头状癌及转移淋巴结组织中NIS mRNA的表达,探讨hNIS mRN-A和甲状腺乳头状癌及转移淋巴结的关系.
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鞘内注射罗哌卡因和布比卡因对大鼠早期脊髓细胞凋亡的影响
罗哌卡因是一种新型长效酰胺类局麻药,因其毒性作用小、低浓度时可使运动和感觉神经阻滞分离而在手术麻醉、分娩镇痛及术后镇痛等中得到广泛应用,但罗哌卡因用于蛛网膜下腔阻滞对骨髓的损伤尚无定论[1].
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去铁胺预处理对幼龄大鼠深低温脑缺血/再灌注损伤的影响
复杂先天性心脏病外科手术中往往需要采用深低温停循环或深低温低流量,但一旦时间过长,均可能造成不同程度的神经系统后遗症.我们通过建市幼龄大鼠深低温缺血/再灌注模型,并检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)及一氧化氮(NO),探讨去铁胺对脑损伤的影响及可能的保护机制.
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分级液压脑损伤并骨折模型的建立
临床发现骨折并脑损伤患者,相对单纯骨折患者,其骨痂量多、骨折愈合快,甚至异位骨化,而骨折不愈合、延迟愈合及骨质疏松仍然是临床工作者所面临的难题[1,2].重复性好、稳定性高与临床相似的骨折脑损伤模型是脑损伤对骨折愈合加速及相关研究的基础.
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大鼠鼻位腹部器官簇移植模型的改良
由于手术操作复杂,技术难度大,国内外报道的大鼠腹部器官簇移植模型尚少.本研究旨在介绍一种简易、可靠的大鼠异位腹部器官簇移植模型.
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去神经对大鼠跟腱愈合的影响
既往国内外大量的研究已证实了各种生长因子在肌腱愈合过程中起着重要作用[1].近来的一些研究表明在大鼠正常跟腱周围存在着降钙素基因相关肽(CGRP)等神经肽,CGRP能调节血管的生成、细胞的增殖和生长因子的分泌[2],对皮肤、肌肉等组织的愈合起着关键作用[3].
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飞行质谱技术分析乳腺癌血清蛋白质谱临床意义
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,常用的CA15-3和CA27-29灵敏度和特异度低,诊断效果较差.我们利用表面增强激光解吸离子化时间飞行质谱(SEL-DI-TOF MS)技术研究了正常人和乳腺癌患者血清蛋白质组构型,发现血清中3种蛋白质可作为一组特异性生物标志物用于诊断乳腺癌,其灵敏度和特异性均在90%以上.蛋白M11368具有单独应用于临床检测的前景,其灵敏度和特异度均明显优于CA15-3和CA27-29.
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输尿管结石67例诊治分析
随着体外冲击波碎石(ESWL)技术及各种内窥镜手术技术的发展和成熟,如输尿管镜取石(URSL)、经皮肾镜手术(PCN)、腹腔镜手术(LS)等,输尿管结石治疗模式发生了较人改变.现就我们自2000年至2007年输尿管结石治疗情况作一回顾性分析.其中部分病例应用这些技术治疗输尿管结石,现探讨输尿管结石的治疗方案.
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cFLIP蛋白与肾细胞癌TRAIL耐药关系的研究
Fas相关死亡域样白细胞介素21B转换酶抑制蛋白(cFLIP)是近年新发现的凋亡抑制蛋白,它的表达在黑色素瘤和其他一些类型的肿瘤中对TRAIL诱导的凋亡有抑制作用[1,2],是肿瘤对TRAIL产生耐药的原因之一.肾细胞癌是否对TRAIL敏感?是否对TRAIL产生耐药?cFLIP蛋白是否是其耐药的原因?本实验旨在探讨上述问题.
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重组转化生长因子-毒素蛋白对膀胱癌的作用及机制
基因重组转化生长因子α-绿脓杆菌外毒素融合蛋白(TGFα-PE40,简称TP140)对人膀胱癌细胞的生长具有剂量、时间依赖性抑制作用[1].本研究旨在探讨该抑制作用的机制.
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反义IgG寡核酸诱导膀胱肿瘤细胞T24凋亡及其增强丝裂霉素敏感性的研究
研究结果显示多种上皮来源的肿瘤细胞可产生IsG,抗人IgG抗体可以抑制肿瘤细胞生长并促进细胞凋亡[1].为此,我们将IgG反义寡核苷酸(ASODN)作用于膀胱癌细胞系T24,观察其对T24细胞的生物学效应.
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钝性胸部创伤后肺组织中性粒细胞凋亡及其意义
每年因交通事故而死亡的患者中,约有25%的死亡者合并有胸部创伤[1].而钝性胸部创伤(BCT)是交通事故中的常见伤类.有报道多器官功能衰竭后中性粒细胞(PMN)的凋亡受到抑制[2].本研究采用兔BCT模型,观察BCT后肺组织中PMN凋亡、坏死和存活变化及其功能改变.
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大鼠原位左肺移植模型的改进
在Mizuta套管技术的基础上,我们通过3年左右的摸索和实验,进一步简化了大鼠原位左肺移植动物模型,使之更容易被重复.
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心肌组织工程种子细胞的研究进展
在心脏外科领域,目前使用的各类补片、管道都没有生长能力,无法辅助心脏功能,远期还会出现感染、血栓形成、毁损等[1].同时,冠心病发病率高,心肌梗死后无法再生或再生能力有限.
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经皮椎体成形术和经皮后凸成形术的止痛机制研究进展
经皮椎体成形术(PVP)是近20年来发展起来的新技术,是在影像装置引导下通过椎弓根或直接向椎体内注入骨水泥的方法,以达到增强椎体强度和稳定性,缓解腰背疼痛的目的.经皮后凸成形术(PKP)是PVP技术发展而来,通过球囊扩张骨折椎体,使椎体高度得以恢复,纠正脊柱的后凸畸形,并进一步在较低的压力下注人骨水泥,恢复椎体的强度.尽管其确切的机制尚小明确,而且骨质疏松性椎体压缩性骨折和转移性肿瘤患者的疼痛缓解机制可能并不一样,但可能存在的机制包括力学、热学、化学等方面的因素.
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前列腺特异性抗原相关指标检测对于前列腺癌与良性前列腺增生鉴别诊断的意义
目的 探讨前列腺特异性抗原相关指标检测在前列腺癌(PCa)与良性前列腺增生(BPH)鉴别诊断中的作用.方法 对5家医院107例PCa患者和319例BPH患者的血清总前列腺特异性抗原(t-PSA)、游离前列腺特异性抗原(f-PSA)、结合前列腺特异性抗原(c-PSA)、f-PSA/t-PSA和c-PSA/t-PSA的差异进行分析比较.结果 PCa和BPH患者中,血清t-PSA处于4～20 μw,/L区间者分别达到68.2%和32.9%.血清t-PSA、f-PSA和c-PSA以及f-PSA/t-PSA和c-PSA/t-PSA在PCa组和BPH组之间差异均有统计学意义(P<0.05).只有f-PSA/t-PSA和c-PSA/t-PSA在PCa和BPH组内各年龄组之间差异无统计学意义(P>0.05),结果相对稳定.血清t-PSA在4-20μg/L区间时,以f-PSA/t-PSA<0.16作为诊断PCa的指标,诊断PCa的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是89.0%、78.0%、60.7%和94.6%,以c-PSA/t-PSA>0.84作为诊断PCa的指标时,分别是91.8%、81.3%、66.3%和96.1%.结论 PCa和BPH患者血清t-PSA在4～20μg/L区间存在较大重叠.在此区间,f-PSA/t-PSA<0.16和c-PSA/t-PSA>0.84可作为诊断PCa较为理想的标准.
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hepaCAM基因对人膀胱癌T24细胞黏附性影响及其机制
目的 探讨转染外源性野生型hepaCAM基因对人类膀胱移行细胞癌T24细胞黏附性的影响及其机制.方法 用脂质体介导的基因转染技术,将pEGFP-N2-hepaCAM质粒转染人人膀胱癌T24细胞,用潮霉素G418(400 ms/L)筛选出阳性克隆.Western blot检测hepaCAM蛋白表达;T24细胞与血管内皮细胞黏附实验了解hepaCAM基因对T24细胞黏附力的影响;激光共聚焦显微镜观察T24细胞肌动蛋白细胞骨架的形态学变化;流式细胞仪检测T24细胞肌动蛋白的含量变化.结果 获得稳定表达hepaCAM基因的T24细胞克隆;Western blot证实hepaCAM蛋白的表达;T24细胞与血管内皮细胞黏附实验表明实验组细胞的黏附能力(0.182±0.012)%明显高于空白组(0.110±0.002)%及阴性对照组(0.105±0.004)%(P<0.05);实验组纤维状肌动蛋白荧光增强,亮度增加,按细胞极性方向排列紧密规则,空白组及阴性对照组纤维状肌动蛋白荧光弥散,亮度降低,极性消失,排列疏松不规则;流式细胞分析仪检测证明实验组纤维状肌动蛋白含量(60.71±8.25)%明显高于空白组(7.00±1.01)%及阴性对照组(8.50±1.26)%(P<0.05).结论 hepaCAM基因可显著增强肿瘤细胞的黏附力,其原因可能是通过重组人类膀胱移行细胞癌T24细胞肌动蛋白骨架而影响肿瘤细胞的侵袭与转移.
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脊髓损伤后逼尿肌细胞钙通道改变
目的 探讨脊髓损伤(SCI)后逼尿肌细胞钙通道改变及其与逼尿肌反射亢进(DH)的关系.方法 建立SD大鼠骶髓上损伤动物模型,进行逼尿肌条钙通道阻滞实验及逼尿肌细胞钙震荡激光共聚焦线性扫描.结果 相同前负荷下逼尿肌条的收缩频率SCI组(2.51±0.39)明显高于正常对照(C)组(1.95±0.58,P<0.05),滴加高浓度T型钙通道阻滞剂咪拉地尔后两者收缩频率降低至相同水平,滴加高浓度L型钙通道阻滞剂异搏定后两者收缩频率下降相同;逼尿肌细胞钙振荡频率SCI组(2.68±0.42)明显高于C组(1.87±0.48,P<0.05),滴加高浓度咪拉地尔后两者钙振荡频率降低至相同水平,滴加高浓度异搏定后两者振荡频率下降相同.结论 SCI后DH的发生与逼尿肌细胞T型钙通道性状改变密切相关.
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沉默PAK6基因可抑制前列腺癌生长并增强多烯紫杉醇的作用
目的 观察沉默p21活化激酶6(PAK6)基因对前列腺癌生长及联用多烯紫杉醇的作用.方法 转染siRNA(30 nmoL/L)前列腺癌细胞PC-3和DU145中,检测细胞增殖、集落形成能力、侵袭性能力、细胞周期及凋亡.以3 x 106个PC-3细胞(100μl)注射裸鼠皮下成瘤,观察siRNA及联用多烯紫杉醇对肿瘤生长效应.结果 PAK6-siRNA能有效沉默PAK6并抑制前列腺癌细胞的生长、集落形成能力和侵袭力、使细胞周期停滞在G2/M期.还可抑制裸鼠体内移植瘤生长.PAK6-siRNA治疗组瘤体重为(146.0±8.5)mg,低于对照组(451.0±22.3)mg(P<0.01).PAK6-siRNA在体内外均可增强多烯紫杉醇作用.结论 沉默PAK6可抑制前列腺癌生长并增强多烯紫杉醇的化疗作用.
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基因重组rAAV-TK治疗膀胱癌
目的 探讨基因重组rAAV-TK基因治疗膀胱癌的效果.方法 (1)通过rAAV-EG-FP转染膀胱肿瘤T24细胞,来确定重组腺相关病毒对该细胞的转染情况及转染效率;(2)通过rAAV-TK体外转染T24膀胱肿瘤细胞,MTT、流式细胞仪等方法来检测对T24细胞凋亡的诱导作用;(3)构建裸鼠膀肮肿瘤模型,分析rAAV-TK基因治疗膀胱痛的体内效果.结果 (1)在T24细胞中可以表达携带的外源基因EGFP;(2)rAAV-TK可以稳定感染T24细胞;(3)rAAV-TK转染124细胞72 h后,流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率是34.12%,明显高于空病毒转染组和空白对照组;(4)瘤内注射rAAV-TK大约9 d后,肿瘤生长受到显著抑制,治疗结束后:各组肿瘤的体积分别是:rAAV-TK组(0.71±0.11)cm3、rAAV-MCS组(1.27±0.13)cm3和空白对照组(1.24±0.17)cm3(P<0.05).结论 体外和体内实验表明rAAV-TKⅨ可有效抑制膀胱肿瘤的生长,能够有效基因治疗膀胱肿瘤.
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骨髓间充质干细胞自体移植时间对兔急性肾功能衰竭治疗效果的影响
目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)自体移植对兔急性肾功能衰竭的治疗作用并探讨不同移植时间对其治疗效果的影响.方法 骨髓穿刺抽取新西兰大耳白兔骨髓,分离、培养、扩增MSCs.30只兔通过夹闭双肾动脉90 min后再灌注制作急性肾功能衰竭模型,随机分为移植A组、移植B组和未治疗C组,每组10只.移植A组在恢复血流即刻,移植B组在恢复血流后72 h将BrdU标记的自体MSCs经颈静脉回输移植,未治疗C组仅制作急性肾功能衰竭模型.于造模后21 d处死兔,比较各组的存活率、肾功能及肾组织形态学改变.结果 与未治疗组比较,移植组肾功能较快恢复(P<0.05),肾组织损伤明显改善(P<0.05).移植A组的效果优于移植B组(P<0.05).结论 骨髓间充质干细胞自体移植能有效治疗缺血再灌注损伤引起的急性肾功能衰竭,早期移植的效果好.
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内支架法原位端-端吻合大鼠移植肾静脉
目的 建立一种省时、高效的大鼠肾移植静脉吻合方法.方法 建立同种异体肾移植动物模型.根据移植肾静脉重建方式不同进行模型分组:实验组(n=32):内支架法原位端一端吻合;对照组Ⅰ(n=25):原位端.端吻合;对照组Ⅱ(n=22):cuff管套扎法吻合;对照组Ⅲ(n=20):与受体下腔静脉端侧吻合.比较各组移植肾静脉手术操作时间、手术并发症发生率.结果 实验组供肾静脉切取用时同对照组Ⅲ间差异有统计学意义[(9.08±0.88)main比(12.07±0.88)min,P<0.05];修整用时与对照组Ⅱ间差异有统计学意义[(4.97±0.58)win比(8.14±0.64)min,P<0.05];对照组Ⅱ术后静脉血栓发生率高,同实验组间差异有统计学意义(X2=4.77,P<0.05);实验组静脉吻合口狭窄的发生率低,同对照组Ⅰ间差异有统计学意义(x2=3.90,P<0.05).结论 应用内支架法行移植肾静脉端.端吻合操作时间短、并发症少,可有效解决大鼠肾移植静脉重建的问题.
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超抗原SEA联合树突状细胞诱导特异性抗膀胱肿瘤研究
目的 观察超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合树突状细胞(Dc)诱导CTL对膀胱肿瘤高效特异性的免疫杀伤作用和对肿瘤局部免疫提呈功能的改善情况.方法 用GM-CSF和IL-4联合刺激诱导外周血单个核细胞分化为DC.将Dc与同源淋巴细胞(DC-L组)、超抗原SEA淋巴细胞(DC-SEA-L组)共培养,用FCS分析DC供刺激分子表型,酶联免疫吸附测定法检测细胞因子IL-2,MTT法测定激活的CTL对膀胱癌E-J细胞的体外杀伤效应.结果 在体外,DCSEA-L对膀胱癌细胞具有相对特异的杀伤作用,SEA-L和Dc-L则无明显特异性.结论 SEA和Dc联合应用可诱导产生高效并具有相对特异性的抗膀胱癌效应,并改善膀胱癌组织局部的DC抗原提呈功能.
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臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的热休克蛋白表达的影响
目的 探讨臭氧氧化预处理通过诱导热休克蛋白70(HSP70)的合成,保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用与机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,I/R前15 d经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体5.0～5.5 ml(臭氧浓度50 mg/L,1 mg/kg体蕈,每日 1次).全自动生化分析仪检测尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),比色法测定血清的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD).Western blot检测HSP70蛋白的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSP70的表达.结果 肾缺血再灌注24 h后,血清中BUN、Cr、MDA明显增高,肾组织内HSPT0表达明显增强(P<0.05),经臭氧氧化预处理后,血清中的BUN、Cr、MDA均降低,SOD升高;HSP70表达升高更加明显(P<0.05).结论 臭氧氧化预处理可以诱导大鼠肾缺血再灌注组织中HSP70表达,减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤.
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姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响
目的 探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型的影响及其可能机制.方法 将30只大鼠随机分为3组,每组10只:假手术组、模型组、姜黄素组.模型组和姜黄素组行右侧输尿管接扎术,假手术组只游离不接扎.术后第14天处死各组中的大鼠,股动脉取血,检测血清肌酐、尿素氮;留取梗阻侧肾脏,Maason染色观察肾间质纤维化程度,免疫组织化学方法测定TGF-β1、CTGF的表达情况,RT-PCR技术榆测肾组织TGF-β1 mRNA、CTGF mRNA表达.结果 姜黄素降低了BUN、Scr的含量,同时姜黄素显著减少了大鼠肾间质TGF-β1、CTGF的表达,并有效改善了肾脏的病理学损伤.结论 姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠有较明显的保护作用,这可能与其能减少大鼠肾间质TGF-β1、CTGF的表达有关.
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神经因子诱导的克隆B基因和Nur相关因子1基因在醛固酮瘤中的表达及意义
目的 探讨神经因子诱导的克隆B(NGFI-B)基因和Nut相关因子1(Nurr1)基因在醛固酮瘤中的表达及意义.方法 应用实时逆转录-聚合酶链反应(Real time RT-PCR)检测34例醛固酮瘤和13例正常肾上腺组织中神经因子诱导的克隆B基因,Nur相关因子1基因,醛固酮合成酶基因(CYP11B2)和皮质醇合成酶基因(CYP11B1)的mRNA表达水平.结果 醛固酮腺瘤组织中NGFI-B基因的mRNA表达量与正常肾上腺组织的差异无统计学意义(P>0.05),醛固酮腺瘤组织中Nurr1基因呈高表达,与正常肾上腺组织的差异有统计学意义(P<0.01),醛固酮腺瘤组织中Nurr1基因的表达量与其CYP11B1和CYP11β2的表达量之间明显相关(分别r=0.434,P<0.01;r=0.376.P<0.05).结论 孤核受体Nurr1对醛固酮瘤组织中CYP11B2的表达有促进作用,醛固酮瘤组织CYP11B1和CYP11B2的表达是多种转录因子共同作用的结果.
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腰椎间盘退变动物模型的建立
目的 制备椎问盘退变动物模型.方法 将48只新西兰大白兔随机分为骨性手术组和软组织手术组.骨性手术组L4L5、L5L6为实验组椎间盘,L3L4、L6L7为自身对照组;软组织手术组L4L5、L5L6为实验对照组椎问盘.术后1、2,4及8个月行MRI及分子生物学检查.结果 (1)MRI:兔髓核位于椎间盘中央,占椎间盘横截面积50%左右.术后1、2、4及8个月,3组椎间盘横断面T2高信号区域面积分数均逐渐减小(F=96.2～1544.4,P<0.01);术后相同时间段,实验组面积分数小,自身对照组次之,实验对照组高,差异有统计学意义(F=125.7～1850.6,P<0.01).(2)分子生物学:蛋白多糖、胶原为椎间盘主要细胞外基质,术后1、2、4及8个月,3组椎间盘蛋白多糖、Ⅱ型胶原表达量进行性下降(F=148.2～1544.4,P<0.01),Ⅰ型胶原表达量进行性上升(F=94.3～579.6,P<0.01).术后相同时间段,实验组蛋白多糖、Ⅱ型胶原小,自身对照组次之,实验对照组高(F=135.5～3520.6,P<0.01);Ⅰ型胶原表达量实验组高于实验对照组、自身对照组(F=7.8～143.1,P<0.01).结论 破坏关节突关节成功制备出椎间盘退变动物模型.
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L-精氨酸诱导大鼠暴发型胰腺炎模型建立
目的 建立L-精氨酸诱导大鼠暴发性胰腺炎动物模型.方法 用20%L-精氨酸(450 mg,120 ms/100 g大鼠体重)序贯腹腔和皮下给药建立大鼠暴发性胰腺炎模型.结果 实验大鼠胰腺有广泛变性、坏死,48 h达高峰,胰腺病理评分13.21±3.02;大鼠6～48 h死亡率为56.67%;血清淀粉酶和脂肪酶显著升高,皆12 h达到高峰,分别是(4120±759)、(1490±354)U/L;肺功、肝脏酶学和肾功能皆有显著性改变,48 h PaO2(78.24±3.56)InnlHg(1mmHg=0.133 kPa),48 h谷丙转氨酶(224.67±4.73)U/L,12 h肌酐(94.53±13.49)tunol/L;肺、肝、肾分别有轻到重度病理改变.结论 L-精氨酸能诱导出大鼠暴发性胰腺炎动物模型
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肾透明细胞癌分子靶向治疗的应用基础研究进展
肾癌是一种常见的泌尿系统肿瘤,在我国居第2位,仅次于膀胱癌,过去30年肾癌发病率在逐年上升.肾癌起源于近段肾小管上皮细胞,75%为透明细胞癌.
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内皮祖细胞参与肿瘤血管发生的研究进展
肿瘤与生俱来就有诱导血管新生的能力.在肿瘤进展过程中包括肿瘤生长、侵袭、转移都伴随血管新生.越来越多的研究表明,肿瘤血管系统产生和发展主要依靠血管新生和血管发生两种方式完成,两者互相补充、相辅相成.
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腹腔镜保留肾单位术三级培训模式初探
目的 介绍腹腔镜保留肾单位术的三级培训模式.方法 三级培训模式的内容包括体外模拟阶段、动物模型训练和临床实践操作.以小型猪作为实验模型建立腹腔镜保留肾单位术的标准操作方式.临床实践操作又细分为三步进行,包括辅助手术、开展相对简单的腹腔镜手术和进行LNSS. 结果 4名学员均成功完成全部三级培训内容.其中体外模拟培训累计时间平均为70 h.经过体外模拟培训后全部学员均能够熟练地掌握腔镜器械下缝针打结等基本操作技能.4名学员均完成动物模型LNSS 20例,其中半肾切除术6例.肾上极或下极平均手术时间由初的(120.0±10.9)min降低到在完成12台LNSS时的(69.0±5.2)min,差异有统计学意义(P<0.01).学员在开展后腹腔镜肾囊肿去顶术和上段输尿管切开取石术等相对简单的手术7～9例后,各自成功地完成LNSS手术3例,均未出现术中并发症.LNSS平均手术时间为87 rain,肾脏热缺血时间平均为25 min.结论 "三级培训模式"能够帮助年轻医生掌握LNSS这类高难度复杂性泌尿外科腹腔镜手术,显著地降低手术并发症的发生,提高手术疗效,有利于腹腔镜手术的推广应用.
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中华医学会第十届全国实验外科学术会议纪要
由中华医学会外科学分会实验外科学组主办、西安交通大学医学院第一附属医院承办的第十届全困实验外科学术会议于2008年9月6～7日在西安召开.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 |
