扇贝裙边糖胺聚糖体外抗I型单纯疱疹病毒实验研究

目的 研究扇贝裙边糖胺聚糖(glycosaminoglycan from Scallop Skirt,SS-GAG)体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的作用.方法 运用单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ SM44株),并以非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)为宿主细胞,通过观察病毒感染后的细胞变性反应(cytopathic effect,CPE)和运用MTT比色法,检测不同浓度药物SS-GAG对Ⅰ型单纯疱疹病毒是否有直接的灭活作用、对HSV-Ⅰ感染复制的抑制活性以及对HSV-Ⅰ感染细胞的综合作用等,并观察药物对Vero细胞的毒性作用.结果 与病毒对照组相比,SS-GAG各浓度组(100、50、25 mg·L-1)能有效地保护经HSV-Ⅰ感染的Vero细胞,使细胞活性增强(P<0.01);并减弱HSV-Ⅰ导致的病变效应,抑制病毒的复制.此作用随着药物浓度的增加而增强.但是SS-GAG对HSV-Ⅰ没有直接的灭活作用;SS-GAG在50～1 600 mg·L-1浓度范围内对Vero细胞无明显的细胞毒性.结论 SS-GAG在体外实验系统中显示出明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅰ病毒感染的活性作用.

肥胖大鼠非酒精性脂肪肝与血清脂联素和肿瘤坏死因子α的关系及吡格列酮干预

目的 观察营养性肥胖大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)与血清脂联素和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系,以及吡格列酮干预后的变化.方法 45只SD ♂大鼠随机分为3组:吡格列酮组(P)、高脂对照组(HF)和普通饮食组(NC),各15只.P、HF组给予高脂饮食,NC组给予普通饲料;12 wk后,P组行吡格列酮10 mg·kg-1·d-1灌胃,HF组和NC组用相应溶剂灌胃,均灌胃4 wk.检测血清脂联素、TNF-α、游离脂肪酸(FFA)水平和其他生化指标等,计算Lee′s指数、HOMA-IR指数和肝脏指数,行肝脏病理切片和HE染色.结果 与NC组相比,HF组大鼠体重、肝脏指数、FPG、FINS、ALT、HOMA-IR和血清TNF-α水平均明显增高,血清脂联素水平降低(P<0.05),肝细胞出现脂肪变性.与HF组比较,P组大鼠肝脏指数、HOMA-IR 、FFA、TNF-α均降低,脂联素水平升高(P<0.05),肝细胞脂肪变性明显改善.HF组大鼠血清FFA、TNF-α与HOMA-IR、肝脏指数正相关,脂联素与之负相关(P<0.05).结论 高脂饮食可引起大鼠营养性肥胖、胰岛素抵抗和NAFLD;吡格列酮能提高胰岛素敏感性,改善脂肪细胞变性,可能与降低TNF-α、升高脂联素有关.

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin表达的影响及机制

目的 探讨霉酚酸酯(Mycophenolate mofetil,MMF)对糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin蛋白表达的影响及机制.方法 建立链脲佐菌素诱导的单侧肾切除大鼠糖尿病模型,将模型大鼠随机分成糖尿病组(DM组)与MMF给药组(DM+MMF组,10 mg·kg-1·d-1灌胃给药),另设对照组(C组).8 wk末检测血糖、24 h尿白蛋白排泄率(AER)变化,通过免疫组化方法检测肾组织ED-1表达,Western blot方法检测肾组织Nephrin、Podocin、白细胞介素-1(IL-1)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达.结果 DM组大鼠尿AER明显高于C组(P<0.01),DM+MMF组大鼠尿AER明显低于DM组(P<0.05).DM组大鼠肾小球ED-1阳性细胞数明显高于C组(P<0.01), DM+MMF组肾小球巨噬细胞浸润明显低于DM组(P<0.05).DM组肾组织Nephrin与Podocin表达较C组分别下降80.2%与65.1%,MMF可明显恢复肾组织Nephrin与Podocin表达(P<0.01).DM组肾组织IL-1与TNF-α表达较C组分别增加2.8倍与3.8倍,MMF可明显降低肾组织IL-1与TNF-α表达(P<0.01).结论 MMF可能通过恢复糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin蛋白表达减少尿白蛋白排泄.

HSP90C-端抑制剂新生霉素与HSP90N-端抑制剂联合应用对白血病细胞的作用

目的 体外研究HSP90 C-端抑制剂新生霉素(novobiocin,NB)与HSP90 N-端抑制剂格尔德霉素(Geldnamycin,GA)的联合应用对Bcr-Abl-的HL-60细胞和Bcr-Abl+的HL-60/Bcr-Abl细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用及该作用与细胞色素C释放、Caspase-9/3活性的关系,并且研究序贯应用NB和GA对HL-60细胞的作用.方法 细胞用NB和GA联合处理后,采用AO/EB和AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡,分光光度法检测Caspase-9/3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C和procaspase-3的含量.用MTT法检测NB→GA和GA→NB序贯处理对HL-60细胞增殖的抑制作用.结果 NB和GA合用抑制HL-60细胞增殖有单独相加的作用;NB和GA合用激活HL-60和HL-60/Bcr-Abl细胞中Caspase-3/9的活性程度高于单独使用NB或GA,协同触发细胞凋亡;预先用NB处理可增强HL-60细胞对GA的敏感性,相比之下,预先用GA处理不影响HL-60细胞对NB的敏感性.结论 NB和GA合用可协同抑制白血病细胞生长,诱导细胞凋亡;NB可增强GA对HL-60细胞的抑制能力,而GA不影响NB对HL-60细胞的抑制作用.

二硫代氨基甲酸吡咯烷在铜绿假单胞菌肺炎中的抗炎作用

目的 探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)在大鼠铜绿假单胞菌(PA)肺炎中的抗炎作用.方法 54只SD大鼠建立急性PA肺炎模型,按随机法分为对照组、PA组和PDTC组,每组18只.模型制作前60 min,大鼠腹腔分别注射生理盐水(对照组及PA组)和PDTC(PDTC组),每组按PA刺激后不同时间又分为3、9、24 h亚组,每亚组6只大鼠.观察大鼠临床表现及肺组织湿/干比(W/D);病理组织切片观察大鼠肺组织形态学改变,行半定量中性粒细胞(PMN)计数;免疫组织化学染色检测肺组织NF-κB p65表达;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液中IL-8含量.结果 PA组大鼠肺组织明显水肿,大量炎性细胞浸润,PDTC组较PA组明显减轻;免疫组织化学染色显示PA刺激后3 h可见NF-κB阳性细胞,3～24 h均较PDTC组明显增多(P<0.01);IL-8蛋白分泌在PA刺激后3 h开始升高,9 h达高峰,3～24 h均较PDTC组明显增高(P<0.01).结论 NF-κB及其诱导的IL-8在PA肺炎中发挥重要作用,PDTC可能通过抑制NF-κB的活性减轻肺损伤.

九节茶提取物对小鼠免疫性肝炎及急性炎症的影响

目的 研究中药九节茶提取物对小鼠免疫性肝炎和急性炎症的作用,并且通过其对大鼠腹腔中性粒细胞体外释放白三烯的影响,探讨可能的作用机制.方法 通过建立痤疮丙酸杆菌和脂多糖(P.acnes-LPS)诱发小鼠肝损伤模型,用酶标仪测定小鼠血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性水平,利用反相高效液相法(RP-HPLC)测定大鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯B4 (LTB4)含量.观察九节茶提取物对2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱发变应性接触性皮炎(ACD)的影响,对巴豆油致小鼠急性耳肿胀及对角叉菜胶引起小鼠足肿胀的影响,评价九节茶提取物对迟发性过敏反应及急性炎症的作用.结果 与模型组相比,中药九节茶提取物125、250及500 mg·kg-1均能抑制由P.acnes-LPS诱发小鼠血浆ALT活性的升高,其抑制率分别为55.1%、70.3%及78.5%,并对大鼠腹腔中性粒细胞体外释放LTB4呈剂量依赖性抑制作用.此外,九节茶提取物对DNFB诱发ACD、巴豆油致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶引起足肿胀也显示一定程度的抑制作用.结论 中药九节茶提取物对于P.acnes-LPS引起的免疫性肝炎有较好的抑制作用,其作用机制可能与抑制中性粒细胞释放白三烯相关;而对于急性炎症也有一定的作用.

牛磺酸镁对豚鼠心室肌细胞钾离子通道的影响

目的 研究牛磺酸镁(taurine magnesium coordination compound,TMC)对正常豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨TMC抗心律失常的作用机制.方法 酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录豚鼠单个心室肌细胞IK、IK1的影响.结果 应用200 μmol·L-1 TMC使豚鼠单个心室肌细胞IK在实验电压+70 mV时,从给药前(8.67±1.04)pA/pF减少到(6.31±1.16)pA/pF(n=5,P<0.01);TMC对IK1无影响.结论 本实验表明TMC具有直接抑制心室肌细胞IK作用,减少IK可能会使动作电位时程(APD)和有效不应期(ERP)延长,这可能是其发挥抗心律失常作用的基础之一.

环磷酰胺对大鼠胚胎脑及骨骼发育的毒性作用

目的 探讨环磷酰胺对大鼠胚胎脑及骨骼发育的毒性作用.方法 将受孕大鼠随机分为对照组和给药组(设4个剂量:5、10、15、20 mg·kg-1),自动物受孕d 8开始,给药组分别给予环磷酰胺,对照组给予等量生理盐水,每日1次,连续给药3 d.受孕d 20处死孕鼠观察环磷酰胺对胎鼠体表、四肢形态、骨骼和脑形态发育的影响.结果 给予环磷酰胺5 mg·kg-1组胎鼠体表、四肢形态、骨骼和脑形态未见明显变化;10 mg·kg-1体重组胎鼠中脑导水管和左右脑室增宽,大脑半球、腰椎骨、肋骨、肢掌骨发育不全;15 mg·kg-1组胎鼠侧脑室扩大、大脑皮质、颞叶、双侧被盖区及结合臂发育不全,枕骨缺如,脑膨出,椎骨裂开,肋骨骨化不全,四肢远端骨未骨化;20 mg·kg-1体重组未见成形胚胎.结论 环磷酰胺对大鼠胚胎脑及骨骼发育有明显的毒性作用.

银杏内酯B对缺血/再灌脑损伤大鼠的保护作用

目的 探讨银杏内酯B对缺血/再灌注脑损伤大鼠的保护作用及其可能的作用机制.方法 通过颈总动脉栓线造成大脑中动脉缺血,缺血3 h后将线拔出以实现大脑中动脉血流再灌注,同时观察银杏内酯B对大鼠神经症状,脑梗死范围以及银杏内酯B对缺血侧脑组织匀浆SOD活力,MDA含量,LDH活力及LD含量的影响.并且进行了病理组织切片检查.结果 银杏内酯B对缺血3 h大鼠神经症状无影响,对再灌21 h大鼠神经症状有明显的改善作用.银杏内酯B 10、5 mg·kg-1能明显降低脑梗死范围,同时银杏内酯B能升高SOD活力,减少MDA含量及LDH活力,但对LD含量无明显作用.病理切片检查结果表明,银杏内酯B能减轻缺血侧大脑的水肿及空泡现象.结论 银杏内酯B对缺血/再灌注脑损伤有保护作用,该作用可能与其升高SOD活力,降低MDA含量及LDH活力有关.

Apelin-13促大鼠血管平滑肌细胞增殖的PKC-ERK1/2信号通路研究

目的 研究G蛋白偶联受体APJ(血管紧张素受体样受体或称血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白,putative receptor protein related to the angiotensin receptor AT1)的内源性配体apelin-13通过PKC-ERK1/2-Cyclins信号通路促进大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)增殖的影响.方法 培养SD大鼠胸主动脉VSMCs,Western blot检测p-ERK1/2、ERK1/2、细胞周期蛋白CyclinD1和CyclinE的表达,四噻唑蓝比色法观察PKC阻断剂GF109203X对apelin-13促大鼠VSMCs增殖的影响.结果 Apelin-13剂量依赖性和时间依赖性地促进大鼠VSMCs p-ERK1/2表达增加,对ERK1/2表达没有明显影响, GF109203X可明显抑制apelin-13诱导的细胞增殖及p-ERK1/2、CyclinD1和CyclinE的表达.结论 Apelin-13促进大鼠VSMCs增殖可能与apelin-APJ-PKC-ERK1/2-Cyclins信号通路有关.

人参皂苷预防大鼠心肌肥大的评价

目的 评价人参皂苷对心肌肥大的预防作用.方法 采用升主动脉缩窄的方法制作大鼠压力负荷心肌肥大动物模型,同时用人参皂苷进行预防性治疗,通过三维彩色超声技术和免疫荧光双重染色的方法评价人参皂苷的治疗作用.结果 超声学指标,与假手术组相比,心肌肥大组的LVPW、IVS增加(P<0.01),LVDD减小(P<0.01);而与心肌肥大组相比,人参皂苷组LVPW、IVS减少(P<0.01),LVDD增加(P<0.01).形态学上,人参皂苷能逆转心肌纤维肥大和减少间质增生.结论 人参皂苷在早期能预防或延缓心肌肥大的发生.

苦参碱对心房颤动犬心房肌IKM3电流的作用

目的 探讨正常和持续性心房颤动时犬心房肌M3受体介导IKM3电流的变化及苦参碱对IKM3的作用,为筛选抗心律失常药物作用靶点提供理论和实验依据.方法 建立快速心房起搏致心房颤动犬模型,通过膜片钳技术比较犬心房肌正常和模型组电流变化及药物作用的不同.结果 持续性心房颤动犬心房肌IKM3电流密度明显增高(实验电压+50 mV时,232±81 pA vs 198±80 pA,n=4,P<0.05),苦参碱对IKM3电流有抑制作用,且对正常组抑制作用明显高于模型组.结论 M3受体及其介导的IKM3电流可能是治疗房颤的新靶点.

灵芝多糖对肿瘤细胞与内皮细胞相互作用的影响

目的 研究灵芝多糖(GlPS)抗肿瘤作用及其机制.方法 通过相差显微镜和间接免疫荧光的方法鉴定了人脐静脉内皮细胞(HUVECs).采用MTT法检测GlPS对人前列腺癌细胞(PC-3M)和HUVECs增殖的影响.检测GlPS对PC-3M细胞与HUVECs粘附的影响.采用transwell双层小室观察GlPS对PC-3M迁移穿过单层HUVECs的影响.结果 GlPS对PC-3M无直接细胞毒作用,对HUVECs增殖无显著性作用.GlPS能够减少粘附和迁移穿过单层内皮细胞的肿瘤细胞数目.结论 灵芝多糖通过抑制肿瘤细胞粘附并迁移穿过内皮细胞发挥其抗肿瘤作用.

辛伐他汀改善大鼠心肌梗死后心室重塑与p-ERK1/2的关系

目的 探讨辛伐他汀对大鼠心肌梗死后心室重塑的影响及其与磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的关系.方法 结扎Wistar大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,大鼠随机分为4组(n=8～10):心肌梗死对照组、辛伐他汀20、40 mg处理组和假手术组.4 wk后心脏超声检测各组心脏形态和功能,免疫组化法和Western blot检测p-ERK1/2表达.结果 与假手术组相比,心肌梗死对照组及辛伐他汀处理组左室舒张末期内径(LVEDd)、左室后壁厚度(LVPWd)明显增加(P<0.01),左室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)、每博输出量(SV)和心输出量(CO)明显降低(P<0.01),心肌p-ERK1/2表达明显升高(P<0.01).与心肌梗死对照组相比,辛伐他汀处理组LVEDd、LVPWd明显减少(P<0.01),LVEF、FS、SV和CO明显升高(P<0.01),心肌p-ERK1/2表达明显下降(P<0.01);其中辛伐他汀40 mg组比20 mg组心肌p-ERK1/2表达下降更明显(P<0.05).结论 辛伐他汀改善心肌梗死后心室重塑和心功能,其机制可能与下调心肌p-ERK1/2表达有关.

N3-邻甲苯甲酰基-氟脲嘧啶通过凋亡作用抑制人胃癌细胞生长

目的 N3-邻甲苯甲酰基-氟脲嘧啶(N3-O-toluyl-fluorouracil,TFU)是N1-乙酰基-N3-邻甲苯甲酰基-氟脲嘧啶的降解产物和5-氟脲嘧啶(5-FU)前体物,本研究观察TFU体内外对人胃癌细胞生长抑制活性及作用特点.方法 体外实验,以MTT法测定TFU对人胃癌细胞SGC-7901和MKN-45生长抑制作用,并与肝微粒体酶存在条件下的结果比较.在肝微粒体酶存在时,将人胃癌细胞与低剂量TFU孵育10 h,以吖啶橙/溴乙锭染色(AO/EB)观察肿瘤细胞形态;分别以琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞仪分析肿瘤细胞DNA断裂特点;Western blot法检测肿瘤细胞Bcl-2和Bax蛋白表达.体内实验,以裸鼠移植人胃癌细胞并灌胃给药观察TFU对肿瘤细胞生长抑制作用.取肿瘤组织切片,以TUNEL(terminal deoxynucleoid transferase nick-end labeling)染色法,观察肿瘤细胞核染色比例,计算凋亡率.结果 TFU对胃癌细胞生长抑制作用较弱,而在肝微粒体酶存在时能够明显提高TFU对胃癌细胞生长的抑制率.TFU对裸鼠移植人胃癌细胞生长抑制作用较强,对动物体重抑制作用弱.进一步实验,在肝微粒体酶存在下,低剂量TFU能够诱导肿瘤细胞凋亡.吖啶橙/溴乙锭 (AO/EB) 染色后,胃癌细胞呈现剂量依赖性凋亡形态改变.细胞染色体DNA断裂呈现Ladder现象和亚二倍体(sub-G1)凋亡峰.TFU上调胃癌细胞Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白水平.TUNEL法检测裸鼠移植人胃癌细胞凋亡,TFU能够提高胃癌细胞核TUNEL染色水平.结论 TFU对人胃癌细胞生长具有抑制作用,该作用可能与肝微粒体酶缓慢水解释放出低水平5-FU有关,低水平5-FU可能通过调节Bcl-2和Bax表达活性诱导胃癌细胞凋亡.

日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的保护作用

目的 研究日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原多肽对血管内皮细胞的保护作用.方法 采用ox-LDL建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)损伤模型.MTT法测定血管内皮细胞的增殖活性;硝酸还原酶法测定血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)活力和NO释放量;TBA法测定细胞内MDA含量;DNA-Ladder法检测血管内皮细胞的凋亡.结果 不同浓度的酸性粘多糖、胶原蛋白多肽和低浓度的皂苷能明显抑制ox-LDL对血管内皮细胞的损伤,促进血管内皮细胞增殖(P<0.05, P<0.01);降低细胞内MDA含量(P<0.05, P<0.01);拮抗ox-LDL引起的血管内皮细胞凋亡.酸性粘多糖和胶原蛋白多肽还能明显促进血管内皮细胞NO释放量(P<0.05, P<0.01),提高细胞NOS活力(P<0.05, P<0.01).结论 日本刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对血管内皮细胞的脂质过氧化物损伤均具有明显的保护作用.

阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化血管内皮细胞膜超微结构影响的研究

目的 探讨纳米水平上阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)超微结构的影响.方法 44只♂新西兰大白兔,随机分为3组,对照组12只,高脂组16只,阿托伐他汀组16只,分别于2、6 wk末随机抽取6～8只处死,采血检测血脂,取胸主动脉制作标本,应用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)观察.结果 AFM 50 μm大范围扫描可见对照组VEC呈梭形,大小约11.96 μm×3.72 μm.排列规则,其长轴与血流方向一致;高脂组2、6 wk末兔VEC较正常对照组明显变大肿胀,变形,排列紊乱.500 nm超微结构扫描正常组细胞膜蛋白由圆形、椭圆形的隆起构成,大小基本一致,隆起光滑饱满,隆起间界线分明;2、6 wk高脂组内皮细胞膜蛋白由许多大小不一的隆起构成,形态各异,隆起表面凹凸不平,隆起间有许多孔洞,隆起间界限模糊;阿托伐他汀组2、6 wk末VEC超微结构明显改善,更接近正常对照组.同时比较了3组500 nm水平下膜蛋白的平均粗糙度(mean roughness,Ra),发现在2、6 wk高脂组明显高于正常对照组和药物组,差异具有统计学意义(P<0.01),阿托伐他汀组细胞膜粗糙度高于正常对照组(P<0.01).结论 AFM可直观的观察到AS受损的VEC及细胞膜的超微结构改变,以及阿托伐他汀明显改善AS引起的VEC损伤,从而发挥其降脂外的抗AS作用.[KH

沙樱桃黄酮对人A-704细胞毒性及增殖的影响

目的 探讨沙樱桃黄酮对人A-704(肾癌)细胞毒性作用及其对细胞增殖的影响,为沙樱桃的应用和开发提供实验依据.方法 体外培养人A-704细胞沙樱桃黄酮,用台盼蓝法检测对细胞毒性作用;用克隆形成法测定对细胞分裂增殖的影响;用X射线能量色散谱仪分析对细胞内微量元素含量的影响.结果 ①台盼蓝法测定结果显示,给药后培养6 h,沙樱桃黄酮(0.1,0.5,5 mg·L-1)组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组活细胞数比对照组分别减少了33.8%、35.8%、60.8%和40.3%,到18 h减少了57.3%、80.1%、99%和59.6%,差异有显著性(P<0.01).沙樱桃黄酮组间比较,差异有显著性(P<0.01).②克隆形成法测定结果表明,沙樱桃黄酮(0.1,0.5,5 mg·L-1)组和5-FU组克隆数比对照组减少了40.4%、47.6%、83.6%和43.4%,差异有显著性(P<0.01).③ X射线能量色散谱仪分析结果表明,细胞内Ca2+离子水平随给药浓度的增加而升高,K+和P3+离子浓度则降低,与对照组比,差异有显著性(P<0.01).结论 沙樱桃黄酮对人A-704细胞具有明显的毒性作用,其作用与抑制细胞分裂,改变细胞膜结构,使细胞内游离Ca2+增加活化细胞内核酸内切酶,引起细胞DNA损伤有关.

鞘内注射左旋布比卡因下调甲醛炎性痛大鼠远位触液神经元P物质的表达

目的 观察鞘内注射左旋布比卡因对甲醛炎性痛大鼠P物质(substance P,SP)在脊髓背角及远位触液神经元(the distal cerebrospinal fluid contacting neuron,dCSF-CN)表达的影响.方法 采用CB-HRP大鼠侧脑室注射示踪标记dCSF-CN;48 h后先鞘内注射0.5%左旋布比卡因10 μl(并以鞘内注射10 μl人工脑脊液作对照),大鼠左后掌足跖部皮下注射2.5%福尔马林建立炎性痛模型,记录大鼠舔足时间,1 h后测定机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)评估机械痛敏;免疫组织化学光镜镜检及免疫电镜镜检P物质在脊髓背角(L4～5)及dCSF-CN的表达.结果 鞘内注射左旋布比卡因减少大鼠福尔马林试验的舔足时间(P<0.01), MWT值无变化(与基础值对比,P>0.05),SP在脊髓背角及dCSF-CN的表达弱于对照组(P<0.01).结论 鞘内注射左旋布比卡因减低脊髓伤害性疼痛反应及下调SP在dCSF-CN的表达.

双参宁心胶囊对血栓性心肌缺血小型猪心室重构和室壁运动的影响

目的 观察双参宁心胶囊对血栓性心肌缺血小型猪心室重构和室壁运动的改善作用.方法 小型猪LAD经心导管介入自体血栓制备心肌缺血模型,喂饲双参宁心胶囊6 d后,应用常规超声和组织多普勒成像技术,观察心脏形态、左心收缩和舒张功能及左心室壁运动的改变.结果 各组造模给药6 d后行超声检查,模型对照组小型猪心脏室壁变薄,心腔扩大,出现心室重构,室壁运动减弱,双参宁心胶囊可明显降低模型动物LVIDd、LVIDs、ESV、EDV和IVRT,增加EF、左室前壁心尖段的室壁运动速度和追踪距离.结论 双参宁心胶囊可通过改善左室重构,增加左心做功,改善左心收缩和舒张功能,增加左心室壁运动,发挥抗心肌缺血的作用.

左旋沙丁胺醇抑制豚鼠气道平滑肌收缩的实验研究

目的 评价左旋沙丁胺醇(R-Salbutamol,R-Sal)对组胺(histamine,His)诱发的豚鼠离体气管条和肺条收缩功能的影响.方法 制备豚鼠离体气管条和肺条标本,以定量药理学方法测定10-8、10-7、10-6 mol·L-1剂量的R-Sal孵育前后对His诱发的离体标本的收缩反应的舒张作用,并与10-6 mol·L-1剂量的Sal进行比较.结果 R-Sal可显著抑制His所引起的豚鼠离体气管和肺条的收缩反应,呈剂量依赖性,其作用强于Sal(P＜0.01).结论 R-Sal对His诱发的豚鼠离体气管条和肺条的收缩反应具明显的舒张作用.

p27Kip1在RA诱导人神经前体细胞分化中的作用

目的 观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用.方法 取12 wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞.在细胞进入对数生长期时给予1 μmol·L-1 RA诱导.在诱导的d 1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT-PCR等方法检测p27Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化.结果 在RA诱导d 3,人神经前体细胞形态发生变化,至d 7时已接近成熟神经元形态.免疫细胞化学染色结果显示p27Kip1的表达在RA诱导d 3增加,在RA诱导d 7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR结果显示,p27Kip1mRNA的表达在RA诱导d 3增加,并在RA诱导d 5达到高峰,而p21Cip1mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势.cdk2、cyclinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化.结论 p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的.

盐酸西布曲明对高脂肥胖大鼠下丘脑增食欲素系统的影响

目的 观察盐酸西布曲明对高脂饮食肥胖大鼠下丘脑增食欲素系统基因表达的变化.方法 建立高脂饮食肥胖大鼠模型,分组连续灌胃给药4 wk,观察盐酸西布曲明给药对高脂饮食肥胖大鼠体重、血脂、血糖及下丘脑前增食欲素原及增食欲素受体mRNA表达的影响.结果 盐酸西布曲明8 mg·kg-1能明显降低高脂肥胖大鼠体重、血糖和血脂;升高肥胖大鼠下丘脑前增食欲素原mRNA表达水平;各组间增食欲素受体1和2 mRNA表达无变化.结论 盐酸西布曲明具有减重、降脂和增加高脂饮食肥胖大鼠下丘脑前增食欲素原基因表达的作用.

AMPK活化对INS-1细胞胰岛素释放的影响

目的 研究AMPK活化对INS-1细胞胰岛素释放的作用及其可能机制.方法 体外培养INS-1细胞株,观察不同浓度(0.2,0.5和1.0 mmol·L-1)AICAR(AMPK激动剂)作用不同时相点(8,12和24 h)对细胞内胰岛素含量及高糖刺激的胰岛素释放的影响;AICAR(0.5 mmol·L-1)与Compound C (10 μmol·L-1,AMPK阻断剂)单独或共同作用INS-1 细胞8 h,采用两种PCR(RT-PCR和实时定量PCR)方法检测PPARα基因转录水平的变化,免疫沉淀检测PPARα蛋白表达.结果 与正常对照组比较,AICAR (0.2,0.5和1 mmol·L-1)作用8,12和24 h,均抑制INS-1细胞高糖刺激的胰岛素释放及细胞内胰岛素含量.同时,AICAR诱发的AMPK活化能增强PPARα mRNA和蛋白水平的表达.结论 AICAR诱导的AMPK活化可能通过调节PPARα表达抑制INS-1细胞高糖刺激的胰岛素释放.

依那普利拉通过调控ET-1水平和NO含量抗新生鼠心室成纤维细胞增殖

目的 观察血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(angiotensin Ⅰ converting enzyme inhibitor,ACEI)依那普利拉(enalaprilat, Ena)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的新生大鼠心室成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)增殖及其对内皮素-1水平和一氧化氮含量的影响,探讨Ena抑制CFb增殖的初步机制.方法 以培养的新生Wistar大鼠CFb为研究对象,分为对照组、模型组、给药组3个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;羟脯氨酸(HYP)法测定胶原蛋白含量;流式细胞仪测定细胞周期;硝酸还原酶法和放射免疫法分别测定不同干预条件下CFb培养液中ET-1水平和NO含量.结果 Ena能够明显抑制Ang Ⅱ诱导的CFb增殖,降低HYP含量(P＜0.05或P＜0.01);提高细胞周期中G0/G1期百分率、降低S期百分率(P＜0.05或P＜0.01);降低ET-1水平、提高CFb NO含量,并呈剂量和时间依赖性(P＜0.05或P＜0.01).结论 Ena抗增殖的作用与改善CFb ET-1水平和NO含量,即降低ET-1,升高NO含量,拮抗Ang Ⅱ的生物效应有关.

硫化氢对正常及自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞PCNA和p-ERK蛋白表达的影响

目的 研究硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对正常大鼠及自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)主动脉平滑肌细胞(aortic smooth muscle cell,ASMC)增殖的影响.方法 分别将正常大鼠及SHR主动脉平滑肌细胞分为实验组和对照组,实验组中分别加入浓度为(10-5～10-3) mol·L-1 H2S供体的硫氢化钠(sodium hydrosulfide, NaHS)或浓度为(2～10)mmol·L-1胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂的炔丙基甘氨酸(DL-propargylglycine,PPG),对照组加入等体积的生理盐水,分别以蛋白质印迹法观察6、12、18和24 h时间点的平滑肌细胞中细胞增殖核抗原(PCNA)和磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达情况.结果 NaHS对正常大鼠ASMC增殖及p-ERK蛋白表达无影响.PPG显著促进正常大鼠ASMC增殖及p-ERK蛋白表达.NaHS显著抑制SHR的ASMC增殖及p-ERK蛋白表达.PPG显著促进SHR的ASMC增殖及p-ERK蛋白表达.结论 内源性H2S下调可促进正常大鼠及SHR的ASMC增殖,而外源性补充H2S可抑制SHR的ASMC异常增殖,ERK信号途径可能介导H2S抑制ASMC增殖的分子机制.

褪黑素抗乳腺癌作用及其机制的研究进展

褪黑素(melatonin,MT)是主要由松果腺分泌的生物活性物质.近年来大量文献表明MT能抑制乳腺癌的发生,其中有多种作用机制参与;MT可以抑制雌激素受体基因表达,调节雌激素信号转导通路,抑制细胞增殖和侵袭等等,因此提高内源性MT的生成或给予MT治疗可能对乳腺癌病人有益.该文综述了MT抗乳腺癌的作用机制及其可能应用.

色胺酮的研究进展

色胺酮属吲哚喹唑啉类生物碱.文章全面综述了近年来在色胺酮的提取、合成及药理作用等方面取得的研究进展.发现其具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等药理活性,有良好的应用价值和开发前景.

中药复方有效部位群研究现状

中药复方研究是中医药研究的核心之一.在结合传统中医药理论和现代科学理论、运用现代科技手段诠释传统中药理论及作用机制、揭示传统中医药的奥秘的过程中,对于中药复方有效部位群的研究应运而生.有效部位群药物的研制也成为中药新药研究开发的一个新领域.但是迄今为止,对于中药复方有效部位群的研究及开发,无论在思路还是在技术与方法上都处于探索阶段,尚有很多问题有待于广泛、深入、全面的研究.

选择性PPARγ调节剂治疗糖尿病的研究新进展

过氧化物酶体增殖物激活受体γ是一类主要调控糖脂代谢与脂肪细胞分化的核受体,与肥胖、胰岛素抵抗和糖尿病的发生发展密切相关,其激动剂作为胰岛素增敏剂治疗2型糖尿病也被临床广泛应用.近年来,随着对PPARγ信号通路和胰岛素增敏剂的深入研究,使我们对选择性PPARγ调节剂类胰岛素增敏剂的认识不断完善和更新.该文主要阐述选择性PPARγ调节剂类胰岛素增敏剂的作用机制和药物研究的新进展.

蛋白质组学在吗啡依赖分子机制研究中的应用

目前蛋白质组学技术被广泛应用于生物医学的各种研究领域,而在吗啡依赖分子机制的蛋白质组学研究方面才刚刚起步.该文通过介绍各种蛋白质组学技术在吗啡依赖分子机制研究中的应用及发现一些潜在的吗啡依赖分子标记物,从而肯定了蛋白质组学在研究吗啡依赖分子机制中的重要性.吗啡依赖蛋白质组学的研究策略应包括吗啡依赖动物和细胞模型的建立、选择合适的样品来源以及改进蛋白质组学技术等,为进一步阐明吗啡依赖分子机制和寻找新的治疗药物靶点提供研究思路和新方法.

促红细胞生成素对慢性肾衰竭大鼠骨髓红系祖细胞的增殖作用

促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是哺乳动物调节红细胞生成的主要刺激因子,成人90%以上由肾脏合成,通过与骨髓红系祖细胞表面的特异性EPO受体(erythropoietin receptor,EPOR)结合,促进骨髓红系祖细胞生长、增殖、分化和成熟[1,2].慢性肾衰竭时由于EPO产生相对不足,出现肾性贫血,目前临床上针对肾性贫血患者给予重组EPO(recombinant human erythropoietin,rh-EPO)治疗,效果明显.基于此缘故,增加rh-EPO应用剂量,能否快速纠正肾性贫血?本文通过3H-TdR参入实验观察rh-EPO对慢性肾衰竭大鼠骨髓红系祖细胞增殖的影响,旨在探讨这一问题,以此指导临床合理用药.

淀粉糊化有利于淀粉耐量实验结果的显现

目的 观察淀粉糊化是否影响淀粉耐量实验研究结果.方法 动物禁食过夜后,给予阿卡波糖和糊化(或未糊化)淀粉,于处理后30、60和120 min取血测定血糖,并计算各组30 min血糖上升百分率及血糖曲线下面积(AUC).结果 糊化淀粉对照组在30和60 min血糖、30 min血糖上升百分率及AUC明显高于未糊化淀粉对照组;糊化淀粉给药组在30 min和60 min血糖、30 min血糖上升百分率及AUC均明显低于相应对照组;未糊化淀粉给药组只有30 min血糖上升百分率明显低于其相应对照组.结论 淀粉糊化有利于淀粉耐量实验结果的显现.

三维凝胶NAT2基因分型芯片的制备与优化

目的 研制N-乙酰化酶2(NAT2)基因分型芯片,以快速、准确检测患者的NAT2单核苷酸基因多态性.方法 设计并合成中国人中常见的NAT2酶基因5个突变位点的探针对和包含5个突变位点的两对引物;样本经PCR扩增后,采用丙烯酰胺点样液制备芯片,并与TEMED反应固化芯片;分别用探针与芯片杂交,采用博奥晶芯LUXSCAN 10K微阵列芯片扫描仪分析结果.结果 优化了PCR扩增条件,使两组PCR在相同条件下扩增;优化了芯片制备及杂交条件,双链DNA采用碱变性,清除非特异键合采用电泳方法;建立了NAT2酶基因分型标准:信号强度Cy3:Cy5≥5为野生型,Cy3:Cy5为0.6～1.5时为杂合子,Cy3:Cy5≤0.2为突变型;对20例标本的基因分型结果采用直接测序法进行验证,结果均一致.结论 三维凝胶NAT2基因点突变分型芯片法是一种特异性强、高通量的NAT2基因分型方法,适用于临床快速基因分型,指导相关药物合理使用.[KH

《中国药理学通报》通过中国科协精品期刊工程项目总结验收