中国药理学通报杂志
Chinese Pharmacological Bulletin 중국약리학통보
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国药理学会
- 影响因子： 1.54
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-1978
- 国内刊号： 34-1086/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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染料木素通过JNK调控Fas通路的抗Aβ诱导的PC12细胞凋亡机制研究
目的：探讨染料木素(genistein,GEN)通过激活 JNK调控Fas通路抑制Aβ(25-35)诱导的PC12细胞损伤凋亡的作用及分子机制。方法建立Aβ(25-35)诱导的PC12细胞模型,MTT法和流式细胞仪法测定细胞活力和凋亡率,荧光定量 PCR 检测 Fas 凋亡通路相关基因 Fas、FasL、caspase-3和caspase-8 mRNA相对表达情况,分光光度法检测caspase-3和caspase-8酶活性,Western blot检测JNK和p-JNK蛋白表达水平变化。结果 GEN下调Aβ(25-35)诱导引起的Fas、FasL、caspase-3和caspase-8 mRNA水平的增加,抑制Aβ(25-35)诱导的caspase-3和caspase-8酶活性,且明显降低Aβ(25-35)诱导的JNK磷酸化水平。结论GEN通过降低Aβ(25-35)诱导的 JNK磷酸化激活,调控JNK依赖的 Fas 凋亡通路,从而抑制 Aβ(25-35)诱导的PC12细胞凋亡,发挥神经保护作用。
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九龙藤总黄酮调控自噬对抗心肌缺血/再灌注损伤的实验研究
目的：研究九龙藤总黄酮( Bauhinia championii fla-vones, BCF)调控自噬抗心肌缺血/再灌注损伤的作用。方法120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、BCF高剂量组、BCF低剂量组、自噬抑制剂(3-MA)组(n=8),采用左冠状动脉前降支结扎法制备大鼠心肌缺血/再灌注模型,以紫外分光光度法检测缺血30min、缺血/再灌注1 h及3 h时肌酸激酶同工酶( CK-MB)、诱导型一氧化氮合酶( iNOS)、总抗氧化力( T-AOC)的含量；以Western blot法检测心肌微管相关蛋白轻链3蛋白-Ⅱ( LC3-Ⅱ)、Beclin-1、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)的表达。结果与模型组相比,BCF能剂量依赖性提高心肌缺血/再灌注不同时段的T-AOC,降低CK-MB及iNOS含量,下调LC3-Ⅱ、Bec-lin-1蛋白表达,上调 mTOR 蛋白表达( P <0.05或 P <0.01)；与3-MA组相比,BCF能够降低iNOS及CK-MB,提高T-AOC水平,缺血期上调LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达,再灌注期下调 LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达,缺血/再灌注期均下调mTOR蛋白表达(P<0．05)。结论自噬在心肌缺血期即发生,并随着缺血/再灌注时间延长而进一步加强；BCF预处理可促进缺血期自噬发生及抑制再灌注时自噬过表达,从而减轻心肌缺血/再灌注损伤。
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褪黑素减轻博来霉素诱发小鼠肺纤维化早期的内质网应激反应
目的：探讨褪黑素( MT )是否能减轻由博来霉素( BLM)诱发小鼠肺纤维化早期的内质网应激反应。方法将成年健康♂ ICR小鼠随机分为对照组、MT组、BLM组和MT+BLM组。 MT组小鼠给予生理盐水前30 min经腹腔注射MT(10 mg·kg-1),并在给予生理盐水后按每24 h一次经腹腔注射MT(10 mg·kg-1),BLM组小鼠经气管插管单次给予BLM(5 mg·kg-1),MT+BLM组小鼠在给予BLM(5 mg·kg-1)前30min经腹腔注射给予MT(10 mg·kg-1),并在给予BLM后按每24 h一次经腹腔注射给予MT(10 mg· kg-1),对照组小鼠经气管插管给予等容积的生理盐水。各组分别在BLM处理后不同时间点(24、72 h)剖杀小鼠并取材,肺组织进行病理切片,HE染色法观察肺部炎性细胞浸润情况,Western blot检测内质网( ER)应激相关蛋白( GRP78、p-eIF2α和p-IRE1α)的表达水平,免疫组化检测ER应激相关蛋白(GRP78、p-IRE1α、ATF6α和p-PERK)的分布。结果成功构建了小鼠肺纤维化急性炎症模型；在BLM处理后,肺重、肺重比和肺炎性细胞浸润明显增加,并呈明显时间-效应关系；MT可明显降低BLM引起的肺重和肺重比增加,减轻肺部炎性细胞浸润；Western blot显示, MT处理后明显对抗BLM引起的ER应激敏感蛋白GRP78蛋白的上调,抑制BLM引起的UPR通路相关蛋白eIF2α和IRE1α磷酸化；免疫组化结果显示,MT可降低BLM诱导的ER应激相关蛋白GRP78、p-IRE1α、ATF6α和 p-PERK的表达。结论 MT可减轻BLM诱发的小鼠肺纤维化早期ER应激反应。
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DADS通过Chk1/Cdc25 C/CyclinB1/CDK1通路诱导白血病HL-60细胞G2/M期阻滞
目的：研究二烯丙基二硫( diallyl disulfide, DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞及其分子机制。方法采用细胞计数、软琼脂克隆形成实验及流式细胞术观察DADS对HL-60细胞生长抑制与周期阻滞效应。 Western blot检测DADS对HL-60细胞Chk1/2以及下游分子的影响。结果细胞计数显示,60、120μmol · L-1 DADS处理后,其群体倍增时间从19．14 h增加到35．03、71．82 h ( P<0．05)。软琼脂克隆形成实验表明,30、60、90、120μmol · L-1 DADS 对HL-60细胞克隆形成率的抑制率分别为35．06%、62．10%、93．79%、99．35%(P<0．05)。流式细胞术检测显示,60和120μmol·L-1 DADS分别作用HL-60细胞24 h后,DADS可呈时间与浓度依赖性诱导 HL-60细胞 G2/M 期阻滞( P <0．05)。60μmol·L-1 DADS处理HL-60细胞后,p-Chk1可呈时间依赖性上调(P<0．05),而Chk1与Chk2总蛋白和p-Chk2无改变(P>0．05)。并且,Cdc25C、CyclinB1和CDK1分别呈时间依赖性下调( P<0．05),但14-3-3蛋白表达没有改变( P>0．05)。结论 DADS能够抑制HL-60细胞增殖,并通过Chk1/Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路阻滞HL-60细胞于G2/M期。
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夏枯草总三萜调控ERK、TGF-β1/Smad通路对肝纤维化大鼠的保护作用研究
目的：研究夏枯草总三萜( TTP)对四氯化碳( CCl4)致肝纤维化大鼠的保护作用及其分子机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、TTP(25、50、100 mg·kg-1)组和阳性对照组(秋水仙碱0．1 mg·kg-1),除正常组外,其余各组分别于大鼠背部皮下注射CCl40．1 ml·(100 g)-1,每周2次,连续12周,自造模第5周起开始给药,各给药组分别给予相应的药物,正常组、模型组给予等体积的溶媒,每天1次。实验结束后,比色法测定血清中丙氨酸氨基转氨酶( ALT)、天冬氨酸氨基转移酶( AST)含量；放免法测定透明质酸( HA)、Ⅲ型前胶原( PCⅢ)、Ⅳ型胶原( CⅣ)含量；同时取固定部位肝组织,苏木精伊红染色( HE)、Masson染色观察肝纤维化程度；制备100 g·L-1肝匀浆,进行丙二醛( MDA)、超(过)氧化物歧化酶( SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)、羟脯氨酸( Hyp)含量测定；RT-PCR法检测α-SMA、Procollagen I、Smad2、Smad3和 Smad7 mRNA表达；Western blot法检测p-ERK蛋白表达。结果与模型组相比, TTP (25、50、100 mg ·kg-1)给药组不仅能降低肝纤维化大鼠ALT、AST、HA、CⅣ、PCⅢ、Hyp水平,改善肝脏病变程度,降低MDA水平,增强SOD以及GSH-Px活性,还可抑制肝组织中α-SMA、Pro-collagen I、Smad2、Smad3及 p-ERK 表达,升高 Smad7表达。结论夏枯草总三萜对CCl4诱导的肝纤维化大鼠具有较好的保护作用,其机制可能与下调p-ERK表达,调控TGF-β1/Smad信号通路有关。
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RIP140/PGC-1α在AngII调节心肌能量代谢中的作用研究
目的：探讨转录辅助因子受体相互作用蛋白140( re-ceptor interacting protein 140, RIP140)与过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α( peroxisome proliferator-activated re-ceptor gamma coactivator-1α, PGC-1α)在血管紧张素Ⅱ( an-giotensin Ⅱ, AngⅡ)调节心肌细胞能量代谢中的作用。方法借助腺病毒载体系统诱导RIP140和PGC-1α基因过表达；利用荧光检测系统测定乳鼠心肌细胞线粒体ATP的含量；实时荧光定量PCR和Western blot的方法检测RIP140和PGC-1α的表达情况。结果乳鼠心肌细胞给予100 nmol· L-1 Ang Ⅱ刺激36 h后,心肌细胞线粒体ATP的含量降低(P<0．01),同时伴随RIP140 mRNA与蛋白水平的升高,而PGC-1αmRNA与蛋白水平下调。 AngⅡ诱导的ATP含量减少在过表达 RIP140组中进一步下降,而在过表达 PGC-1α组中有所减轻。结论 Ang Ⅱ诱导的 ATP 含量减少与RIP140表达上调和PGC-1α表达下调有关。
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新疆家蚕抗菌肽诱导人胃癌细胞AGS凋亡的研究
目的：探讨新疆家蚕抗菌肽( cecropinXJ)是否通过诱导人胃癌细胞 AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0．01~1000 mg·L-1浓度范围内的 cecropinXJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24 h,采用MTT法检测cecropinXJ对AGS细胞和GES-1细胞增殖的影响；透射电镜观察细胞超微结构变化；Hoechst染色观察细胞凋亡情况；流式细胞术检测细胞内活性氧和线粒体膜电位的变化；实时荧光定量PCR ( qRT-PCR)和Western blot检测Bax、Bcl-2、caspase-3以及细胞色素C mRNA和蛋白水平的表达变化。结果 CecropinXJ在体外能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖(P<0．05),并具有浓度依赖性,IC50值为61．19 mg· L-1,但对GES-1细胞无明显的抑制增殖作用。经cecropinXJ处理24 h后,AGS细胞核固缩,呈现典型细胞凋亡特征,同时细胞内活性氧增加,线粒体膜电位下降。 qRT-PCR 和Western blot结果表明,cecropinXJ 能够引起Bcl-2表达下调, Bax表达上调,促进细胞色素 C 的释放并活化 caspase-3。CecropinXJ促进caspase-3活性呈剂量依赖,经 caspase-3和caspase-9特异性抑制剂处理后可降低 cecropinXJ 介导的AGS细胞死亡率。结论 CecropinXJ 可通过下调 Bcl-2表达,上调Bax表达和活化caspase-3诱导AGS细胞凋亡,是其抗肿瘤机制之一。
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氟西汀对慢性应激大鼠前额叶谷氨酸转运体GLT-1表达的影响
目的：研究氟西汀对慢性应激大鼠前额叶谷氨酸转运体1(GLT-1)的影响,进一步探讨氟西汀抗抑郁作用可能的分子机制。方法正常SD大鼠60只,随机分为对照组、慢性不可预见性应激( CUS)组和氟西汀组。对CUS组和氟西汀组大鼠进行CUS应激后,氟西汀组给予氟西汀治疗,对照组和CUS组给予生理盐水。实验结束后进行糖水偏好和旷场行为测试,并使用免疫组织化学法和蛋白印迹分析检测大鼠前额叶GLT-1的表达水平。结果(1)行为学测试结果显示,CUS组大鼠糖水偏好、总行程、平均移动速度及直立次数均低于对照组(P<0．01)；氟西汀组上述指标均高于CUS组(P<0．01)。(2)免疫组织化学法分析显示,CUS组与对照组比较,大鼠前额叶GLT-1表达下降( P<0．01)；经氟西汀治疗后,大鼠前额叶GLT-1表达比CUS组明显升高( P<0．01)。(3)蛋白印迹分析显示,CUS组与对照组比较,大鼠前额叶GLT-1表达下降( P<0．01)；经氟西汀治疗后,大鼠前额叶GLT-1表达比CUS明显升高( P<0．01)。结论慢性应激下调大鼠前额叶 GLT-1表达水平,而氟西汀上调GLT-1表达水平,GLT-1表达增加可能是氟西汀抗抑郁作用的分子机制之一。
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大黄素对肺纤维化大鼠的保护作用及部分机制研究
目的：观察大黄素对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其保护机制。方法将60只♂ SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量干预组、大黄素高剂量干预组和泼尼松组,每组10只,后4组经气管内注入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,从d2开始,低、高剂量干预组大鼠分别予20、80 mg · kg-1大黄素2 mL灌胃,泼尼松组以5 mg·kg-1醋酸泼尼松2 mL灌胃,其余2组予2 mL生理盐水灌胃,d 28处死所有大鼠,取出肺组织行HE染色和Masson 染色,测定肺组织羟脯氨酸( HYP )、丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD )、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)含量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-17浓度,通过Western blot分析肺组织中Kelch样ECH联合蛋白1( Keap 1)、NF-E2相关因子2( Nrf2)、核因子-κB ( NF-κB) p65表达。结果低、高剂量干预组及泼尼松组肺泡炎症和肺纤维化程度明显轻于模型组( P <0．05或 P <0．01)。与正常对照组或假手术组比较,模型组肺组织HYP、MDA 含量、胞核 Nrf2、NF-κB p65表达水平及血清TNF-α、IL-6、IL-17浓度增加( P <0．01),而肺组织 SOD、GSH-Px、CAT含量及胞质Keap 1表达水平降低( P<0．01)。经低、高剂量大黄素或泼尼松处理后,肺组织HYP、MDA含量、胞质Keap 1表达水平、胞核NF-κB p65表达水平及血清TNF-α、IL-6、IL-17浓度减少,肺组织SOD、GSH-Px、CAT含量及胞核Nrf2表达水平升高,与模型组比较,差异均有显著性(P<0．01)。高剂量干预组、泼尼松组上述指标改善程度优于低剂量干预组(P<0．05),但高剂量干预组与泼尼松组比较,差异无显著性(P>0．05)。结论大黄素可能通过增强抗氧化能力及抑制炎症反应对肺纤维化大鼠产生保护作用。
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Tat-LK15运载siRNA沉默RGC-5神经细胞nNOS基因的实验研究
目的：探讨离体条件下细胞穿透肽Tat-LK15运载小干扰RNA( small interference RNA,siRNA)沉默RGC-5视神经节细胞(retinal ganglion cell line, RGC-5)神经元型一氧化氮合酶( neuronal nitric oxide synthase, nNOS)基因的可行性,为在体条件下研究Tat-LK15运载siRNA沉默nNOS表达治疗神经病理性疼痛提供理论依据。方法①通过凝胶阻滞分析测定Tat-LK15与siRNA的佳交联比。流式细胞术检测Tat-LK15/ FAM-siRNA以佳交联比转染RGC-5细胞的转染效率；不同剂量 Tat-LK15(1、2．5、5、10和20μg )孵育RGC-5细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡率。②制备nNOS高表达的RGC-5细胞模型。③将RGC-5细胞随机分为5组：对照组、模型组、Tat-S组( Tat-LK15运载nNOS/siR-NA转染模型细胞)、Lipo-S组( LipofectamineTM RNAiMAX运载nNOS/siRNA转染模型细胞)及 Tat-N组( Tat-LK15运载NCsiRNA转染模型细胞),通过Q-PCR及Western blot检测各组nNOS表达水平。结果 Tat-LK15与siRNA质量比为2∶1时可完全包裹siRNA,达到佳交联,此时其转染效率为(84．4±3．9)%。当 Tat-LK15剂量为20μg (6．1μmol · L-1)时才出现一定细胞毒性,细胞凋亡率高于对照组[(10．3±1．1)% vs (7．4±0．9)%,P <0．05]。造模后RGC-5细胞nNOS表达水平明显升高(P<0．05)。与模型组相比, Tat-S 组 nNOS mRNA 及蛋白表达水平降低( P <0．05),Tat-S组与Lipo-S组相比无差异(P>0．05)。结论Tat-LK15能高效转染siRNA,细胞毒性低,离体条件下可有效运载siRNA沉默nNOS的基因表达。
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双团棘胸蛙皮肤胸腺肽-β4的基因克隆及活性检测
目的：研究双团棘胸蛙( Nanorana yunnanensis)皮肤胸腺肽-β4的基因和促进血管生成作用。方法通过基因扩增的方法克隆出双团棘胸蛙的2个皮肤胸腺肽-β4( pTβ4-1和pTβ4-2)的cDNA；根据推导蛋白序列合成多肽在鸡胚尿囊膜和内皮细胞实验系统进行血管生成活性分析。结果 pTβ4-1和pTβ4-2的cDNA长度分别为662 bp和673 bp,开放阅读框都为135 bp,编码44个氨基酸残基。成熟蛋白拥有四足动物胸腺肽β4的典型特征。 pTβ4-1和pTβ4-2的cDNA序列及成熟蛋白与来源于人类、家鼠、家鸡、爪蟾、斑马鱼、大比目鱼和棕点湍蛙的胸腺肽-β4高度相似；合成的 pTβ4-1和pTβ4-2都能促进鸡胚尿囊膜血管生长和内皮细胞小管形成。结论双团棘胸蛙皮肤含有两个具有促血管生成的胸腺肽-β4。
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慢病毒介导新型Tet-On系统调控大鼠GDNF和TH双基因表达对帕金森病大鼠的实验研究
目的：观察改良Tet-On系统修饰慢病毒( Lv-TH-GD-NF)目的基因的表达调控及纹状体内直接转移对帕金森病(PD)大鼠的作用。方法①用 Lv-TH-GDNF 与 rtTA2s-M2病毒感染 HeLa 细胞,免疫印迹法检测强力霉素( Dox )对TH、GDNF基因表达的调控。②用 Lv-TH-GDNF 与 rtTA2s-M2病毒共同注射到PD大鼠患侧纹状体,Dox诱导目的基因表达。通过观察阿扑吗啡( APO)诱导旋转行为、黑质多巴胺能神经元数量、患侧纹状体 DA、DOPAC 含量评估 Lv-TH-GDNF治疗效应；通过移植侧纹状体内TH与GDNF蛋白量评估外源基因在体内的表达。结果①在体外HeLa细胞实验,仅Dox阳性组见TH、GDNF蛋白条带。②在动物体内实验,病毒移植4周后,与PBS对照组相比,仅病毒+Dox组大鼠旋转行为明显改善( P<0．01),损伤侧黑质致密部TH阳性细胞数、纹状体DA、DOPAC含量及TH和GDNF蛋白量明显增高( P<0．01)。结论新型Tet-On系统修饰的Lv-TH-GDNF目的基因表达受四环素类抗生素调控,在体外实验未见基础活动,且纹状体内直接转移对PD大鼠有一定治疗作用。
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三七总皂苷通过线粒体途径抑制顺铂诱导的大鼠肾细胞凋亡
目的：探讨三七总皂苷( PNS)通过线粒体途径对顺铂肾损伤大鼠肾组织细胞凋亡的影响。方法将36只♂ SD大鼠随机分为空白对照组、顺铂模型组、顺铂+PNS组；在给药8 d后,检测大鼠血清肌酐( Cr)、尿素氮( BUN)和尿β-N-乙酰胺基葡萄糖苷酶( NAG)水平。采用HE染色观察病理变化,利用透射电子显微镜观察大鼠肾脏线粒体形态,采用原位末端缺口标记法( TUNEL染色)检测肾细胞凋亡情况,通过免疫组化SP法检测凋亡相关蛋白Bax、caspase-9的表达,并采用Western blot检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果与空白对照组比较,顺铂模型组大鼠血清Cr、BUN和尿NAG水平明显升高(P<0．01),肾小管上皮细胞线粒体损伤严重,肾组织的细胞凋亡率明显增加( P<0．01),肾组织Bax、caspase-9及Bcl-2表达均明显增强( P<0．01)；与顺铂模型组比较,顺铂+PNS组血清Cr、BUN和尿NAG水平明显降低(P<0．01),肾小管上皮细胞线粒体损害明显改善,肾组织细胞凋亡率和Bax、caspase-9表达水平均明显降低( P<0．01),Bcl-2的表达则明显增强(P<0．01)。结论 PNS可能通过增加抑凋亡蛋白Bcl-2表达,减少促凋亡蛋白Bax和凋亡相关蛋白caspase-9的表达来调节细胞凋亡,从而发挥保护顺铂肾损害的作用。
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气道上皮细胞衍生的胰岛素样生长因子触发偏移CD8+T细胞极化
目的：探讨气道上皮细胞衍生的胰岛素样生长因子(IGF1)对CD8+T细胞极化的影响。方法人气道上皮细胞株RPMI2650与鼠过敏原Der p1共培养72 h,用定量PCR及Western免疫印迹检测其IGF1表达情况。将前述上皮细胞、重组IGF1和IGF1抗体分别加入抗体激活的CD8+T细胞中培养,用流式细胞仪检测细胞凋亡。检测Der p1活化的上皮细胞及IGF1对CD8+T细胞p53基因甲基化及表达的影响。结果加入 Der p1共同孵育后, RPMI2650细胞IGF1mRNA(23．1%±5．2% vs 5．2%±2．3%,P<0．01)和蛋白表达(33．4±6．4 vs 9．2±4．6,P<0．01)均明显增加。将CD3/CD28抗体激活的CD8+T细胞与Der p1活化的上皮细胞共培养,凋亡细胞增加的趋势被抑制(41．7%±8．2% vs 5．2%±1．8%,P<0．01)。直接加入重组IGF1有同样效果,而IGF1抗体能阻断该效应。 Der p1活化的上皮细胞能抑制活化CD8+T细胞p53基因mRNA(29．1%±5．9% vs 16．2%±4．3%,P<0．01)和蛋白表达(63．3±8．9 vs 26．9±5．6,P<0．01),加入 IGF1抗体后这种作用消失。重组 IGF1使CD8+T细胞p53基因甲基化增加。结论 Der p1蛋白能够诱发RPMI2650细胞产生IGF1,后者通过诱导p53基因甲基化抑制CD8+T细胞凋亡。
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RISK信号通路在1-磷酸鞘氨醇后适应减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
目的：研究再灌注损伤挽救激酶( reperfusion injury salvage kinase,RISK)信号通路在1-磷酸鞘氨醇( sphingosine-1-phosphate,S1P)后适应减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用。方法将H9 c2细胞随机分为7组,即(1)正常对照组(C)；(2)缺氧/复氧组(H/R)；(3)S1P组；(4)S1P+LY294002组(S1P+LY)；(5) LY 组；(6) S1P +PD98059组(S1P+PD)；(7)PD组。采用MTT法测定各组细胞存活率；比色法测定丙二醛( MDA )含量、总超氧化物歧化酶( T-SOD)和锰超氧化物歧化酶( Mn-SOD)活力；采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子浓度变化；流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率；Western blot法测定Akt和ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结果与H/R组比较, S1 P组可明显增加H9 c2细胞缺氧/复氧损伤后细胞存活率及凋亡率,增加 T-SOD及Mn-SOD活力,降低MDA含量,降低钙离子浓度,增加Akt和ERK1/2磷酸化水平,而PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002或ERK1/2阻断剂 PD98059可阻断 S1P对 H9c2的上述作用。结论 S1 P能够减轻H9 c2细胞缺氧/复氧损伤,加入 PI3K/Akt 抑制剂 LY294002和 ERK1/2抑制剂PD98059均使S1P 的保护作用被取消,表明S1P通过RISK信号通路发挥抗H9 c2细胞缺氧/复氧损伤作用。
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LC-MS/MS法同时测定CUMS大鼠血浆中3种单胺类神经递质
目的：建立测定大鼠血浆中五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)的LC-MS/MS方法,观察慢性不可预见性温和应激( chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁大鼠血浆单胺类神经递质DA、5-HT、NE的变化情况。方法♂ SD大鼠22只,分为对照组(n=10)和模型组(n=12),模型组每天给予9种慢性不可预见性温和刺激因子,造模21 d后,分别于造模前后进行行为学测定及眼眶采血；采用苯甲酰氯作为柱前衍生化试剂,将3种待测物及内标衍生化后进入LC-MS/MS检测,测定造模前后血浆中5-HT、NE、DA 3种神经递质浓度。结果造模21d后,与对照组相比,模型组大鼠体重明显降低(P<0．05),水平得分、垂直得分均明显降低(P <0．01),同时糖水消耗量明显降低(P <0．01)。血浆中5-HT、NE、DA的浓度在1．47~752、1．75~898、2．05~1053μg·L-1范围内线性关系良好,低定量限分别为1．47、1．75、2．05μg · L-1,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于70%,日内和日间精密度小于15%,符合生物样品分析要求。造模21 d后,模型组血浆中5-HT、NE、DA的浓度分别为(3．99±1．21)、(6．24±1．94)、(6．07±1．98)μg·L-1,与对照组相比均明显降低(P<0．01)。结论 CUMS造模成功后,血浆中的3种神经递质分别呈下降趋势。
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血管紧张素Ⅱ对足细胞Notch通路及Nephrin表达的影响
目的：探讨血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)刺激小鼠足细胞对Notch通路、Nephrin表达的影响。方法 AngⅡ刺激小鼠足细胞并给予缬沙坦干预，采用免疫荧光化学、Western blot、Real-time PCR 方法检测 Notch1、Notch 胞内域1( NICD1)、Hes1、Nephrin的表达情况。结果 AngⅡ呈时间依赖性增加足细胞Notch1、NICD1、Hes1表达，抑制 Nephrin 表达( P <0．01)；缬沙坦可抑制 AngⅡ对 Notch 通路的活化，增加Nephrin的表达( P<0．01)。结论 AngⅡ通过激活 Notch通路降低足细胞Nephrin表达。
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甘草次酸衍生物TY501抗肺纤维化作用及机制研究
目的：探索甘草次酸衍生物 TY501对博莱霉素( BLM)诱导的肺纤维化模型大鼠的抗肺纤维化作用及初步机制。方法将40只大鼠随机分成5组：假手术组、模型组、吡非尼酮组、TY501高剂量组和低剂量组。经气道给予BLM制备大鼠肺纤维化模型，每天灌胃给予受试药。实验结束后，测定肺系数、氧分压( PaO2)，测定 BALF 中 ALB、ALP、LDH以及肺组织中 GSH、HYP含量，测定血清Ⅲ型前胶原( PCⅢ)、Ⅳ型胶原( COL4)含量。结果①肺纤维化早期肺泡炎阶段相关指标：各治疗组与模型组相比，肺系数显著下降( P<0．05)、PaO2明显升高( P<0．05)；与模型组相比，各治疗组大鼠BALF中ALP、ALB以及LDH呈下降趋势(P<0．05)；模型组肺组织匀浆中GSH含量反馈性增高，与假手术组相比存在明显差异(P<0．05)，各治疗组较模型组含量降低(P<0．05)；(2)肺纤维化晚期肺间质纤维化阶段：大鼠肺组织 HYP、血清 PCⅢ( TGF-β通路指标)、血清COL4(MMPs通路指标)含量，各治疗组较模型组呈下降趋势，差异有显著性( P<0．05)。结论 TY501对肺纤维化治疗存在价值，能够减轻 BLM 诱导的肺纤维化程度。 TY501可能通过阻断TGF-β的作用、抑制MMPs等多途径抑制肺纤维化的发生，减轻肺纤维化症状。
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新天然化合物Jaridonin通过诱导氧化应激选择性杀伤肿瘤细胞
目的：研究化合物Jaridonin抗肿瘤作用的选择性并探讨其可能机制。方法采用噻唑蓝( MTT)法检测Jaridonin抑制细胞增殖的作用；使用倒置荧光显微镜进行细胞形态学研究；流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内活性氧( ROS )水平；Western blot法检测Jaridonin对细胞凋亡通路相关蛋白表达的影响。结果 Jaridonin 能明显抑制胃癌细胞 MGC-803的增殖,且呈较好的浓度依赖性,而对人正常胃粘膜细胞GES-1的增殖没有明显影响；Jaridonin 作用于 MGC-803后明显引起Bax表达上调、线粒体膜电位下降、细胞色素C释放、caspase-3激活以至细胞凋亡,而对GES-1凋亡的影响并不明显；Jaridonin诱导MGC-803活性氧水平持续增加,而GES-1内活性氧水平先迅速上升,6h后下降至基础水平；外源性GSH几乎可以完全逆转Jaridonin对MGC-803的抑制作用。结论 Jaridonin选择性的抑制胃癌细胞的增殖并诱导线粒体途径参与的凋亡,其选择性机制可能与Jaridonin直接作用于氧化还原系统引起胞内活性氧水平升高有关。
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桔梗皂苷-D抑制非小细胞肺癌H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用机制研究
目的：探究桔梗皂苷-D( platycodin-D,PD)抑制非小细胞肺癌( NSCLC) H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用及其作用机制。方法细胞黏附实验、划痕实验、Tran-swell小室侵袭实验分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力。RT-PCR检测H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达。同时,Western blot法检测MMP-2和MMP-9蛋白、其上游ERK信号通路相关蛋白和p-Akt的表达水平。结果PD有效抑制H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移能力,并呈浓度依赖性(P<0．05)。 PD降低H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达( P<0．01)；同时, PD下调H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达,并抑制其上游Ras、p-c-Raf、p-ERK 1/2和p-Akt的表达,并呈浓度和时间依赖性。结论 PD抑制NSCLC细胞黏附、侵袭和迁移,并且此作用与下调MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达,抑制其上游ERK信号通路和p-Akt表达有关。
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单胺类神经递质在药物成瘾中的作用机制
药物成瘾是一种慢性复发性大脑疾病,各种成瘾性药物通过作用于奖赏系统,终引起神经递质释放的改变,产生奖赏效应。其中,单胺类神经递质5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、去甲肾上腺素( noradrenergic,NE)和多巴胺( dopamine,DA)在药物成瘾中起到重要作用,该文就单胺类神经递质在药物成瘾中的作用及机制进行综述。
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血小板介导肿瘤血行转移的作用及其机制研究进展
肿瘤转移是恶性肿瘤为重要的生物学特性之一，同时也是影响预后及导致治疗失败的主要因素。临床研究显示，恶性肿瘤患者的血小板数目较正常人及良性肿瘤患者明显升高，表明血小板可能参与了肿瘤的发生发展过程。进一步研究发现，血小板在肿瘤血行转移的过程中能够与肿瘤细胞相互作用形成瘤栓，逃避免疫监视，进而促进了肿瘤的转移。近年来，临床上已经开展了针对血小板治疗肿瘤转移的研究，同时，血小板促进肿瘤转移的相关作用机制也逐步地被揭示。该文对近年来血小板介导肿瘤血行转移的作用及其作用机制研究进展进行综述，探讨临床针对血小板治疗肿瘤转移的策略，为后续的科学研究及指导临床提供参考。
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β-arrestins与纤维化疾病的研究进展
β-arrestins是在提纯β-肾上腺素受体激酶(β-adrener-gic receptor kinase,β-ARK)的过程中发现的一类重要的接头蛋白和信号调控蛋白,对绝大部分G蛋白偶联受体( G pro-tein-coupled receptor,GPCR)介导的信号转导都具有调节作用。纤维化疾病如肝纤维化、肺纤维化、心血管纤维化等,其发病因素和临床表现各不相同,但终的病理特征都是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在组织器官内过度沉积。大量研究表明,β-arrestins 在纤维化疾病的炎症反应、ECM沉积等作用中发挥重要作用,该文就β-arrestins在纤维化疾病中的研究现状和发展前景作一综述。
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缝隙连接与神经病理性痛的研究进展
缝隙连接是介导相邻细胞间物质转运、化学或电信号传递的专用跨膜通道，维持着细胞内环境的稳定。在神经系统中，缝隙连接不仅介导神经元和胶质细胞的胞间偶合，还参与病理条件下继发性损害。目前，研究证明缝隙连接在由神经系统损伤引起的神经病理性痛中发挥作用。对缝隙连接与神经病理性痛的关系进行研究有助于更深层次的了解神经病理性痛的发病机制，为治疗神经病理性痛提供新的研究方向。
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HBV病毒复制机制及慢性乙型肝炎药物靶点
乙型肝炎病毒( HBV)感染是一种严重影响公共卫生与人体健康的全球性流行性疾病，尽管乙肝防治已有很大提高，但仍缺乏高效的药物与手段。研究表明，肝损伤、肝衰竭程度与HBV及宿主免疫系统相互作用存在复杂关系。因而详细地探明HBV生命周期和感染过程，为研究HBV药物靶点和制定新的抗病毒策略提供前期坚实的基础，意义重大。该文详细介绍HBV病毒复制机制，并系统地阐述近年来新发现的和潜在的药物靶点，为制备新型的抗HBV药物提供参考。
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丹参水溶性化合物抗心肌缺血作用的研究进展
丹参为唇形科植物丹参的干燥根及根茎，其水溶性化合物被公认为是丹参抗心血管疾病的活性成分。该文查阅近年来国内外研究文献，从预防、治疗及防治再灌注损伤等多层次药理作用对丹参水溶性化合物抗心肌缺血作用进行综述，为丹参中活性单体成分及其复方制剂的研发提供理论依据。
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维药榅桲多糖抗血栓作用及其机制研究
榅桲( Cydonia oblonga Mill,COM)具有降血压、调血脂、补血、补肾、止泻、利尿等功效。还有资料报道榅桲具有抗氧化、抗菌作用。其果实含有糖类、黄酮类、生物碱类、氨基酸及多肽、鞣质、有机酸、挥发油等成分[1],其中糖类含量高。目前,在国内外尚未见到榅桲果实多糖结构及药理活性的相关报道。大量研究证明,植物多糖具有增强免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抗突变、抗衰老、抗凝血、降血糖和环境治理等生物学效应[2-5]。本文就榅桲果实多糖对大鼠动、静脉血栓形成的影响进行了研究,探讨其抗血栓作用及其可能的机制,为进一步筛选抗血栓有效部位提供实验依据。
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茶多酚有效成分对淋巴细胞增殖的抑制和抗氧化作用
研究表明，茶多酚具有很强的消除有害自由基、抗衰老等多种药理作用[1]，茶多酚临床治疗白癜风具有较明显的效果，但其各类组分在临床治疗白癜风所发挥的作用还未见报道。
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基于报告基因检测的PXR、FXR和LXRα激动剂高通量筛选模型的建立
目的：建立基于报告基因法的高通量筛选细胞模型,用来发现PXR、FXR和LXRα受体激动剂。方法利用Re-al-time定量PCR方法比较HEK293、HepG2和LS174T细胞中内源性核受体 PXR、FXR 和 LXRα的表达量,将 pSG5-hPXR 和 pGL3-XREM-CYP3A4、pEGFP-N3-hFXR 和 EcRE-TK-Luc、 pCMX-FLAG-hLXRα和 pGL3-XREM-CYP3A4等质粒分别共转染到工具细胞中,优化共转染比例,并考察阳性药与萤光素酶报告基因表达强度的量效关系、模型特异性和稳定性。结果①根据Real-time定量PCR结果,模型选用低表达PXR、FXR和LXRα的HEK293细胞作为工具细胞；②根据不同共转染比例对报告基因活性的结果,PXR、FXR和LXRα报告基因药物筛选模型的报告基因和过表达质粒比例,终分别选择1∶1、2∶1和2∶1；③模型中,报告基因活性均与相应阳性药物( PXR/Rif、FXR/CDCA和LXRα/T0901317)呈剂量依赖性增长；④仅 PXR 激动剂 Rif、FXR激动剂CDCA和LXRα激动剂T0901317可分别明显增加相应筛选模型的报告基因活性,分别重复5次试验后,计算得Z′值分别为0．58、0．66和0．63。结论该研究建立的PXR、FXR和LXRα激动剂高通量筛选模型,具有良好的特异性和稳定性,适用于对PXR、FXR和LXRα受体激动剂的筛选,进而开发以核受体作为药物靶点的药物。
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白香丹胶囊对经前期综合征肝气逆证模型大鼠学习记忆功能的影响
目的：以经前期综合征( premenstrual syndrome, PMS)肝气逆证大鼠模型为载体考察白香丹胶囊对模型大鼠学习记忆功能的影响,探讨行为学表现下病证对学习记忆功能的损伤及白香丹胶囊的干预效应。方法应用情志刺激为主,多因素分段刺激法制备PMS肝气逆证大鼠模型并进行药物干预,采用旷场实验评价模型。采用Morris水迷宫、Y迷宫、新物体识别实验对PMS肝气逆证模型大鼠空间学习记忆能力和非空间学习记忆能力进行检测。结果与正常组大鼠相比,模型组大鼠总路程明显增加,进入中央区次数及中央区停留时间均明显降低；与模型组相比,白香丹组大鼠总路程明显下降,中央区停留时间及进入中央区次数均明显升高,氟西汀组大鼠总路程明显下降。与正常组相比,模型组大鼠分辨指数( distinguish index,DI)明显下降,白香丹组大鼠DI明显升高；定位航行阶段,与正常组大鼠相比,模型组大鼠在d2、4逃避潜伏期明显上升；与模型组相比,白香丹和氟西汀组大鼠在d2、4的逃避潜伏期明显降低；空间探索阶段,与正常组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显上升,而平台穿越次数明显减少,与模型组相比,白香丹组大鼠平台穿越次数明显增多。结论 PMS肝气逆证模型大鼠伴有学习记忆功能损伤,白香丹胶囊能够纠正模型大鼠的学习记忆功能缺陷,且治疗效果可能优于氟西汀。
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 04 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
