激光捕获显微切割技术纯化的乳腺癌上皮细胞和间质比较蛋白质组学研究

目的：研究乳腺癌上皮细胞和间质间蛋白表达的差异。方法用改良HE染色法对临床侵润性导管内原位癌患者的石蜡包埋样品进行染色，用激光捕获显微切割技术（LCM）纯化分离癌变的乳腺上皮细胞和其周围间质后分别进行质谱分析。结果质谱总共检测了431种蛋白，上皮细胞和间质中分别检测到384和298种蛋白。251种共同表达的蛋白中，69种间质蛋白的含量比在上皮细胞中高，60种比在上皮细胞中低。所检测到蛋白的上皮细胞和间质定位及表达水平和它们在肿瘤发生、发展过程中的作用一致。结论在上皮细胞和间质中差异表达蛋白可以是疾病的筛选、诊断和预后判断的蛋白标志。

FFJ-5下调PKM2抑制MCF7生长及逆转MCF7／DO X细胞耐药性的研究

目的：探讨 FFJ-5对人乳腺癌细胞 MCF7及其耐药细胞 MCF7／DOX 的作用及其机制。方法采用 MTT 法检测FFJ-5对 MCF7及 MCF7／DOX 细胞的增殖抑制作用及其对柔红霉素（doxorubicin，DOX）在耐药细胞 MCF7／DOX 中化疗敏感性的影响；Western blot检测FFJ-5对EGFR、p-EGFR、Akt、p-Akt、PKM2、caspase-3、cleaved caspase-3、PARP、cleaved PARP及P-gp蛋白表达的影响；DNA ladder 分析检测FFJ-5对细胞基因组DNA的影响；RT-PCR检测低剂量 FFJ-5对多药耐药基因MDR1 mRNA水平的影响。结果 FFJ-5抑制了MCF7细胞生长，降低了MCF7细胞中EGFR、Akt 的表达及活性，下调了PKM2水平；FFJ-5可激活caspase-3、促使基因组DNA断裂；同时FFJ-5也能抑制耐药细胞MCF7／DOX生长，并增强 DOX 在MCF7／DOX细胞中的活性，同时降低了MCF7／DOX 细胞中 EGFR、p-EGFR 及 PKM2水平，但对MDR1 mRNA水平无影响。结论 FFJ-5可通过抑制 EGFR-Akt-PKM2通路及激活线粒体凋亡相关因子 caspase-3来抑制MCF7细胞生长，并诱导其凋亡，并可逆转MCF7／DOX的耐药性。

百可利对6-羟多巴胺不同注射位点帕金森病模型大鼠的治疗作用

目的：观察百可利对6-羟多巴胺（6-OHDA）内侧前脑束（MFB）和纹状体尾壳核（CPu）两个不同注射位点帕金森病（PD）模型大鼠的治疗作用，两个注射位点模型分别记为：MFB-M，CPu-M。方法运用6-OHDA两点注射法，损毁大鼠左侧中脑多巴胺能神经元，制备PD模型。记录大鼠后肢肌电（EMG）信号频率观察肌肉震颤；测定大鼠自主活动；电化学法检测纹状体内多巴胺（DA）及其代谢产物含量；免疫组化法检测大鼠脑内酪氨酸羟化酶（TH）、OX-42表达；观察神经元超微结构变化。结果给药3周后，两个注射位点的模型组行为改变趋势一致，百可利在两个注射位点的模型动物上药效表现不同，在CPu-M组可明显提高PD大鼠自主活动数（P＜0.05）。EMG信号分析显示，在MFB-M组，给予百可利，肌电频率降低55％；在CPu-M组，给予百可利，肌电频率降低60％。EMG时效研究表明，在 CPu-M组，百可利药效持续420 min以上。纹状体递质水平显示，两个注射位点的模型组DA递质水平差异很大，在CPu-M组，百可利能够明显升高DA水平（P＜0.05）。两个注射位点的模型组免疫组织化学结果趋势一致，在CPu-M组，百可利有更明显神经元保护作用（P＜0.05），在MFB-M组，百可利抑制小胶质细胞过度激活作用更强（P＜0.01）。结论不同注射位点制备的PD模型能够反映不同时期PD的病理变化，百可利可通过抑制炎性介质生成和释放、保护残存神经元、恢复神经元功能等机制改善PD不同发病时期模型动物的行为学症状。

石榴皮多酚有效部位单次给药毒性及对无水乙醇致大鼠胃溃疡的保护作用

目的：研究石榴皮多酚有效部位对小鼠单次给药毒性，评价其安全性，为新药研发和临床用药提供理论依据。观察石榴皮多酚有效部位对无水乙醇致大鼠胃溃疡的保护作用。方法选择健康昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别灌胃给予不同剂量的石榴皮多酚有效部位，连续观察14 d，每日记录各组小鼠一般情况、毒性反应及死亡情况，采用Bliss 法计算半数致死量。选择健康大鼠70只，随机分为：正常组、模型组（等体积生理盐水）、三九胃泰颗粒组（1850 mg·kg－1）、枸橼酸铋钾组（33 mg·kg－1）和石榴皮多酚有效部位低、中、高剂量组（430、852、1704 mg · kg－1），连续灌胃10 d；d 10，除正常组外，其余各组采用无水乙醇灌胃（每只1.5 mL）致大鼠胃溃疡；计算各组胃溃疡指数、溃疡抑制率、观察胃黏膜组织形态学改变、测定胃黏膜组织中PGE2、NO、SOD、MDA含量。结果石榴皮多酚有效部位的半数致死量（LD50）为8520.9 mg·kg－1，其95％的可信限范围为（7291.2～9914.4）mg·kg－1；病理学显示，给药剂量为16000 mg·kg－1的小鼠脏器有不同程度的损伤。实验表明，与模型组比较，石榴皮多酚有效部位对胃黏膜损伤有明显修复作用，且明显升高胃溃疡大鼠胃黏膜NO含量、提高胃溃疡大鼠胃黏膜 SOD 活性及降低 MDA 含量、增加PGE2含量。结论石榴皮多酚有效部位给药剂量为5063 mg·kg－1未出现死亡，随着石榴皮多酚有效部位给药剂量的增加，给药剂量为16000 mg·kg－1可造成小鼠的心、肝、肺、肾脏有不同程度的损伤，甚至导致死亡。石榴皮多酚有效部位的LD50为8520.9 mg·kg－1，其95％的可信限范围为（7291.2～9914.4）mg·kg－1。石榴皮多酚有效部位对无水乙醇致大鼠胃溃疡具有良好的保护作用，这种作用可能与促进胃溃疡上皮细胞合成、提高再生黏膜功能、增强抗氧化能力和诱导、促进NO合成有关。

靛玉红衍生物PHⅡ-7促进sTRAIL对乳腺癌细胞及其耐药株杀伤的机制研究

目的：探讨靛玉红衍生物PHⅡ-7联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7／ADR的增殖及调节TRAIL受体表达的相关机制。方法采用MTT法，分别检测PHⅡ-7、TRAIL及低浓度PHⅡ-7联合TRAIL处理MCF-7、MCF-7／ADR细胞的生长抑制率，同时以TRAIL敏感细胞MDA-MB-231为对照，证实上述乳腺癌细胞对TRAIL的敏感性；采用流式细胞术检测细胞凋亡和药物作用后活性氧的产生情况；real time PCR检测PHⅡ-7以及PHⅡ-7和活性氧抑制剂NAC 联用后，乳腺癌细胞TRAIL功能性受体DR4、DR5的表达情况。结果 PHⅡ-7作用24 h 后对 MCF-7及 MCF-7／ADR 的 IC50分别为（4.49±1.55）、（3.44±0.90）μmol · L－1，TRAIL 可诱导MDA-MB-231细胞凋亡，而MCF-7、MCF-7／ADR对TRAIL极不敏感，各浓度组与MDA-MB-231相比差异具有统计学意义（P＜0.05）；低浓度PHⅡ-7联合TRAIL可有效促进TRAIL对MCF-7、MCF-7／ADR的杀伤并诱导凋亡，而两药单用对上述细胞的增殖抑制作用有限；此外，低浓度的PHⅡ-7还对人正常细胞PBMC的毒性很小，即使与TRAIL联用，在该浓度范围下也不会对正常组织细胞产生明显毒性；PHⅡ-7可有效诱导MCF-7及MCF-7／ADR细胞内活性氧的产生，同时上调TRAIL受体DR4、DR5的水平，并呈剂量依赖性。当PHⅡ-7与ROS 抑制剂 NAC 联用时，可有效抑制 PHⅡ-7对DR4、DR5的表达上调作用。结论低浓度的PHⅡ-7可有效增强乳腺癌细胞MCF-7、MCF-7／ADR对TRAIL治疗的敏感性，其机制可能是通过PHⅡ-7升高细胞内的活性氧水平进而上调TRAIL受体DR4、DR5表达而实现的。本研究为今后PHⅡ-7联合TRAIL 治疗方案的临床应用奠定了基础。

银杏内酯B抑制高糖诱导内皮细胞TLR4及炎症蛋白表达

目的：评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞，用高糖刺激内皮细胞，用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt 磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖（30 mmol·L－1）刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达明显增加，PAF 受体抑制剂银杏内酯B （0.6 g · L－1）和CV3988（30μmol·L－1）分别抑制了TLR4及PAF受体表达。银杏内酯B有效地抑制了高糖刺激内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达。分子机制的研究表明，银杏内酯B明显抑制了高糖诱导的Akt磷酸化，以及NF-κB p65的核转位。结论高糖刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达增高，银杏内酯B能够抑制高糖刺激TLR4、PAF受体和炎症蛋白表达，分子机制与抑制Akt磷酸化以及NF-κB活化相关。

马铃薯三糖五环三萜类化合物体外抗H5N1流感病毒的活性评价

目的：研究3种不同类型的马铃薯三糖五环三萜能否通过抑制H5 N 1流感病毒进入靶细胞，作为潜在的新型抗流感药物进行研发。方法以马铃薯三糖薯蓣皂苷衍生物1为先导化合物，设计并合成3个目标化合物，利用建立的H5 N 1假病毒活性检测方法，测试化合物的抑制活性。结果目标化合物1 a、1 b和1 c对源自A／Thailand／Kan353／2004的H5N1假病毒毒株均具有明显的抑制作用，且化合物1b的活性好，其IC50达到（1.25±0.22）μmol·L－1。结论初步构效关系研究表明，将先导化合物1结构中的薯蓣皂苷苷元替换成五环三萜苷元后可提高其抗病毒活性；五环三萜的苷元类型对抗病毒活性有重要影响，乌苏烷型的五环三萜为苷元其抗病毒活性强。

高盐上调压力超负荷大鼠的脑内APJ受体表达

目的：观察高盐对压力超负荷大鼠的交感神经活性和脑内Apelin和APJ系统的影响。方法♂ SD大鼠，在肾动脉分支上方部分结扎腹主动脉，建立主动脉缩窄大鼠模型。术后4周，分别给予含8％NaCl的高盐饲料或含0.3％NaCl的常规饲料，喂养1周后，记录各组大鼠的血流动力学变化；ELISA分析24 h尿去甲肾上腺素（NE）水平；real-time RCR和Western blot 方法观察室旁核Apelin和APJ的表达变化。另一组实验中，在给予高盐饲料的同时使用Alzet微渗透泵侧脑室灌流ML221或benzamil，观察24 h尿NE水平和心脏指数（HW／BW）变化。此外，在正常SD大鼠侧脑室灌流高钠脑脊液1周后，观察大鼠血压、24 h尿NE和APJ表达水平的变化。结果压力超负荷大鼠给予高盐饮食1周后，平均动脉血压（MAP）、心率（HR）、左室收缩末期压（LVESP）

二氟甲基鸟氨酸对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大与凋亡的影响

目的：探讨二氟甲基鸟氨酸（difluoromethylornithine， DFMO）对异丙肾上腺素（isoproterenol，ISO）诱导的心肌细胞肥大和凋亡的影响。方法实验分为4组：Control 组、ISO组、ISO＋DFMO组和ISO＋DFMO＋Pu 组。利用ISO建立心肌细胞肥大模型，0.5 mmol·L－1 DFMO和0.5 mmol·L－1腐胺预处理后检测ANP基因表达和心肌细胞表面积；检测各组细胞培养液中LDH活性和MDA含量，Annexin V／PI法检测心肌细胞凋亡率，real time-PCR和Western blot检测Bcl-2和Bax基因及蛋白表达。结果与ISO组相比，DFMO预处理后心肌细胞表面积和ANP基因表达降低（P＜0.05），培养液中LDH和MDA释放量均下降（P＜0.05），心肌细胞凋亡率降低（P＜0.05）；同时，DFMO上调Bcl-2基因和蛋白水平（P＜0.05），上调Bcl-2／Bax比值（P＜0.05），下调Bax基因和蛋白水平（P＜0.05）。结论 DFMO对ISO诱导的心肌细胞肥大和凋亡有保护作用，其机制可能与Bcl-2和Bax 表达有关。

耐力运动8周对大鼠骨骼肌收缩功能和线粒体生物合成的影响及机制

目的：探讨8周耐力运动对不同类型骨骼肌收缩功能及线粒体能量代谢能力的影响及其机制。方法分离经8周平台跑步训练的♂ SD大鼠的比目鱼肌和趾长伸肌，观测给予不同方式电刺激后两种类型骨骼肌收缩能力和抗疲劳能力的变化以及ATP含量和线粒体生物合成相关指标的改变。结果耐力运动8周可一定程度提高比目鱼肌和趾长伸肌在单次电刺激和强直电刺激下的收缩力，明显改善比目鱼肌的抗疲劳能力。ATP含量在两类肌肉中均明显升高，但只有比目鱼肌线粒体 DNA、PGC-1α、NRF 基因的转录及PGC-1α蛋白明显上调，并伴随p-AMPK／AMPK蛋白比值明显增加。结论耐力运动8周改善骨骼肌的收缩能力，但仅增加富含氧化型肌纤维的比目鱼肌的抗疲劳能力，这可能与耐力运动激活氧化型肌纤维的AMPK，上调PGC-1α转录和表达，增加线粒体生物合成有关。

rAAV-PR39-ADM防治大鼠脑缺血／再灌注损伤的研究

目的：探讨重组腺相关病毒协同表达双基因：抗菌肽（PR39）和肾上腺髓质素（adrenomedullin，ADM），即 rAAV-PR39-ADM对大鼠脑缺血／再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）损伤的治疗作用。方法离体实验：人脐静脉内皮细胞培养，行血管成型实验。在体实验：建立大鼠脑I／R模型（脑缺血2 h后再灌注）。SD大鼠随机分为：Sham组、生理盐水组（I／R＋NS ）、空病毒组（I／R ＋AAV ）及治疗组（I／R ＋rAAV-PR39-ADM组）。I／R组，再灌注24 h后股静脉分别给予等量生理盐水、空病毒及rAAV-PR39-ADM。术后1、2、3、4周，行头颅MRI、神经功能缺损评分、TTC染色及HE染色等方法评价 rAAV-PR39-ADM对脑 I／R损伤的疗效。结果离体实验中，rAAV-PR39-ADM同对照及空病毒组相比，有明显的促血管成型作用。在体实验中，头颅MRI 检查证实模型制备成功。与Sham组相比，各时间点I／R组的神经功能缺损评分及脑组织梗塞的体积均明显增高（P＜0.01），I／R组术后即刻神经功能缺损评分差异无统计学意义（P ＞0.05）。与生理盐水组及空病毒组相比，治疗组各时间点神经功能缺损评分及梗塞体积均明显减小（P＜0.01），空病毒组与生理盐水组比较，梗塞面积及神经功能缺损评分差异无统计学意义（P＞0.05）。HE染色显示，治疗组的神经元细胞数目与生理盐水组和空病毒组相比明显丰富，缺血区新生血管明显增多。结论 rAAV-PR39-ADM可能通过促进血管新生，改善脑I／R后局部供血及侧枝循环，保护神经元，促进血管再生，减轻I／R脑损伤。

抑制自噬促进培美曲塞对A549细胞的增殖抑制作用

目的：研究培美曲塞对肺癌细胞A549自噬的作用及自噬的功能。方法采用MTS法观察培美曲塞对A549细胞的增殖抑制作用；采用透射电镜和免疫印迹观察培美曲塞对A549细胞自噬体和自噬相关蛋白的影响；采用自噬抑制剂CQ抑制自噬后观察培美曲塞对A549细胞的抑制作用。结果培美曲塞抑制A549细胞的增殖；培美曲塞诱导A549细胞自噬体表达增加，并诱导自噬相关蛋白Beclin-1表达和LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转换增加，p62表达降低；自噬抑制剂CQ提高培美曲塞对A549细胞抑制作用，使培美曲塞单药组的抑制率由（28.42±2.45）％增加到 CQ 联合培美曲塞组的（45.36±3.52）％。结论培美曲塞可以诱导肺癌细胞A549自噬增加，抑制自噬提高培美曲塞对A549细胞的增殖抑制作用，为肺癌的临床治疗提供新的联合治疗方案。

双侧嗅球切除对小鼠行为、海马神经递质及抑郁相关基因表达的影响

目的：研究双侧嗅球切除对C57BL／6小鼠行为和海马神经递质及抑郁相关基因表达的影响。方法用探针捣毁并用负压吸出小鼠嗅球建立嗅球切除模型，术后18 d开始分别进行强迫游泳、悬尾、旷场、高架迷宫行为学测试，同时应用LC-MS／MS液质联用法检测海马内7种神经递质的变化，实时定量PCR法检测海马抑郁相关基因的表达。结果嗅球切除后小鼠在旷场中的水平运动明显增加（P＜0.05），进入高架迷宫开臂的时间明显延长（P＜0.01），海马组织中的5-HIAA／5-HT明显降低（P＜0.01），Glu／GABA明显增高（P＜0.01）。同时海马组织中的BDNF、Trkb、GDNF、CD11 b、TNF-α基因表达明显升高（P＜0.05），而TPH2基因表达下调（P＜0.05）。结论嗅球切除导致小鼠多种行为学改变，是多种神经传递以及神经营养因子、炎症因子和合成蛋白基因综合作用的结果，提示将该模型作为抗抑郁药物的研发及筛选工具时需要综合考虑多方面因素的影响，从而对实验结果作出科学合理解释。

钙络合剂BAPTA-AM对胞外酸化诱导大鼠关节软骨细胞自噬作用的影响及其可能机制

目的：观察 BAPTA-AM对胞外酸化诱导大鼠关节软骨细胞自噬作用的影响，探讨其可能的作用机制。方法体外使用胰酶-Ⅱ型胶原酶消化法分离提取大鼠关节软骨细胞，分为正常组（pH 7．4）、酸化组（pH 6．0）、以及分别经BAPTA-AM处理的正常组和酸化组，激光共聚焦技术检测软骨细胞胞内钙离子变化，实时荧光定量 PCR 法检测细胞自噬基因 Beclin-1、ULK1 mRNA的表达，Western blot法检测自噬蛋白 LC3的表达，吖啶橙染色分析细胞自噬溶酶体形成情况。结果与 pH 7．4正常组比较，pH 6．0酸化刺激明显增加大鼠关节软骨细胞内 Ca2＋的浓度，且自噬标志物 Bec-lin-1、ULK1 mRNA 及 LC3Ⅱ蛋白表达均明显升高，酸性自噬溶酶体形成增多，同时酸化刺激能引起 CaMKKβ及 p-AMPK蛋白表达水平增高，磷酸化蛋白 p-mTOR水平明显降低。BAPTA-AM酸化组自噬水平和 CaMKKβ及 p-AMPK 表达明显降低，p-mTOR表达明显升高。结论 BAPTA-AM能明显减弱胞外酸化诱导软骨细胞自噬作用，其机制可能与抑制胞内Ca2＋有关。

白藜芦醇对人胚肺成纤维细胞株MRC-5生长的抑制作用

目的：探讨白藜芦醇（Res）对人胚肺成纤维细胞生长的抑制作用及相关机制。方法以人胚肺成纤维细胞MRC-5为研究对象，分别予20μL二甲基亚砜（DMSO）及0、12.5、25、50、100、200μmol·L－1 Res处理细胞24、48、72 h，通过MTT法分析细胞增殖抑制率。另外，以20μL DMSO（溶媒组）及50、100μmol·L－1 Res孵育细胞48 h，采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率，行原位缺口末端标记法（TUNEL）测定细胞凋亡指数（AI），应用荧光实时定量PCR和Western blot分别检测细胞周期蛋白D1（cell cycle protein D1，Cyclin D1）、细胞周期蛋白依赖激酶4（cyclin-dependent kinase 4，CDK4）mRNA与蛋白表达，Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果随着Res浓度的升高和处理时间的延长，细胞增殖抑制率逐渐增加（P＜0.01）。在共同培养48 h后，50、100μmol·L－1 Res处理组S、G2／M期DNA比例及Cyclin D1、CDK4 mRNA与蛋白表达水平、Bcl-2蛋白表达水平降低，而G0／G1期DNA比例、AI、凋亡率及Bax蛋白表达水平增加，与溶媒组比较，差异均有显著性（P＜0.01），并且100μmol·L－1 Res 效果强于50μmol·L－1（P＜0.01）。结论 Res能抑制MRC-5细胞增殖，其机制可能与阻碍细胞周期进展及促进细胞凋亡有关。

内吗啡肽-1对人树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响

目的：观察内吗啡肽-1（EM-1）对人外周血来源树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响。方法从人外周血中提取和分离单核细胞，在含重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4的完全培养基中培养，6d后未成熟树突状细胞（imDC）分4组，空白对照组（BLA组）、EM-1组、LPS组、LPS＋EM-1组。继续培养2 d后，流式细胞术检测各组DC表面 TLR2、TLR4蛋白的表达；RT-PCR 法检测各组DC中TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达。结果流式结果显示，TLR2、TLR 4在imDC表达较高，随着DC成熟表达下降。与BLA组相比，EM-1组DC表面TLR2、TLR4的表达下调（P＜0.05）；与LPS组相比，LPS＋EM-1组DC表面TLR2、TLR4受体均明显下调（P＜0.01）。RT-PCR的结果显示，与BLA组相比，EM-1干预后引起DC 表面TLR2 mRNA表达明显降低（P＜0.01），TLR4 mRNA的变化无差异（P＞0.05）；与LPS组相比，LPS ＋EM-1组 DC 表面 TLR2 mRNA、TLR4 mRNA均有所下调（P ＜0.05）。结论 EM-1使 DC 表面TLR2、TLR4的表达下调，EM-1对DC免疫功能的影响可能与DC表面TLR2、TLR4表达有关。

室旁核血管紧张素Ⅱ在慢性间歇性低氧诱发大鼠高血压中的作用及机制

目的：研究下丘脑室旁核（paraventricular nucleus， PVN）中血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，Ang Ⅱ）在慢性间歇性低氧（chronic intermittent hypoxia，CIH）诱发高血压大鼠中的作用及机制。方法将♂SD大鼠随机分为对照（Sham）组和慢性间歇性低氧（CIH）组（每日8 h，连续15d）。用无创套尾法测大鼠尾动脉收缩压（SBP）和动脉插管法记录平均动脉压（MAP）、心率（HR），用立体定位仪进行 PVN 核团定位并微量注射药物，用Western blot测定PVN中Ang Ⅱ水平及Ang Ⅱ1型受体（AT1 R）蛋白表达。结果与Sham组相比，CIH 组大鼠PVN 内Ang Ⅱ水平及AT1 R表达明显增加。双侧PVN内微量注射Ang Ⅱ（0．03、0．3、3 nmol），均可剂量依赖性地升高Sham组和CIH组大鼠MAP，且CIH大鼠MAP升高更明显；双侧PVN 内微量注射AT1 R阻断剂氯沙坦（50 nmol），对Sham大鼠血压没有影响，但可使CIH大鼠血压降低，并抑制Ang Ⅱ升压作用。结论室旁核中AngⅡ及AT1 R功能上调在慢性间歇性低氧诱发大鼠高血压中起重要作用。

抗肿瘤靶向药物研究现状

目前针对恶性肿瘤的传统治疗药物已远远不能满足临床需要。近几年抗肿瘤靶向药物的研究取得了突破性的进展，给临床治疗带来了新的希望，它具有作用于特定靶点，直接抑制肿瘤细胞的生长，减少对正常细胞和组织器官的毒副作用，可以长期用药等优点。该文旨在近几年对小分子靶向药物和抗体靶向药物的新研究作一综述。

凝血因子XI作为抗栓防治新靶点的研究进展

出血是目前临床抗栓药物防治主要、常见的并发症。近年来，有关凝血因子XI（FXI）与血栓性疾病发生相关的临床资料、FXI基因敲除动物或抑制FXI的抗栓实验均表明FXI是出血风险小的抗栓防治新靶点，针对FXI靶点的抗栓药物出血副作用小。

AGXT2与ADMA代谢及心脑血管疾病的研究进展

心脑血管疾病严重威胁人类健康，有效预防和治疗心脑血管疾病是当代医学研究的重点。非对称性二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginine，ADMA）和对称性二甲基精氨酸（symmetric dimethylarginine，SDMA）是心脑血管疾病或心脑血管事件独立的预测因子。丙氨酸－乙醛酸转氨酶2（al-anine-glyoxylate aminotransferase 2，AGXT2）是内源性 ADMA的水解酶之一，其表达缺失或活性降低可影响体内 ADMA的水平，而AGXT2的多个单核苷酸多态性与体内SDMA的水平明显相关。深入研究AGXT2在心脑血管疾病发生发展中的作用对以AGXT2为靶点开发新型心脑血管保护药物具有重要意义。该文就AGXT2参与 ADMA 的代谢及其与心脑血管疾病的新研究进展进行综述。

参与肺动脉平滑肌细胞增殖信号转导机制及信号转导抑制剂的研究进展

肺动脉高压是一种以肺血管阻力升高为特征，终导致右心功能严重受限、衰竭甚至死亡的慢性进展性疾病。其组织病理学改变主要以肺血管重构为特点，而肺动脉平滑肌细胞在外周血管的异常增殖是肺血管重构的主要病理基础。该文主要对参与肺动脉平滑肌细胞增殖信号转导机制及信号转导抑制剂的研究进展作一综述。

药物经皮吸收数学模型研究进展

经皮给药是一种能避免肝脏的首过效应及肠胃灭活、维持血药浓度、提高生物利用度的给药途径。而药物经皮吸收需透过角质层、活性表皮层、真皮层的屏障。近年来，随着计算机技术的发展，根据药物的不同理化特性及皮肤各层的生理特征，建立了许多预测药物经皮吸收方面的数学模型。该文就预测药物经皮吸收数学模型的研究进展进行了综述。

组蛋白共价修饰在肝脏疾病发生与发展中作用的研究进展

组蛋白共价修饰通过乙酰化、甲基化、磷酸化等多种形式，影响基因的转录活性，参与疾病的发生与发展，是表观遗传学研究中的重要领域。越来越多的研究证实组蛋白共价修饰在肝脏疾病的发生与发展过程中扮演着重要角色。该文详细阐述与分析了组蛋白共价修饰在各类肝脏疾病中的具体作用及近年来的研究进展，以期能为各类肝病的治疗与药物的开发提供一定的理论支持。

2014年中美药理学发展研究比较

为了解中国与美国药理学学科发展的概况，该文研究了2014年中国作者与美国作者发表的药理学国际论文情况，并对其特点进行了比较分析，以指引我国药理学未来发展的方向。该研究在2013版期刊引证报告自然科学版药理学期刊中检索2014年中国学者与美国学者发文情况。结果表明，2014年中国作者共参与发表文献5506篇，其中中国作者为第一／通讯作者的文献5173篇；而美国作者参与发表文献量远高于中国作者，共发表11256篇，其中美国作者为第一／通讯作者的文献9470篇。从发文期刊上看，美国科研人员发文期刊影响因子更高，文章被引用次数也更多。从发文数量上看，植物药研究在我国药理学研究领域中占有重要地位，而美国药理学家则更注重应用性研究，神经药理为其重点关注的领域。中国作者发文涉及的机构大都为大学和高校，而在美国，除大学和高校外，企业也更多地参与到药理学研究中。结果提示，中国药理学研究虽然取得了长足的进步，但与发达国家相比仍有差距。中国药理学研究需立足自身特点，突出特色，加强创新，重视应用型研究。

胶艾汤与四物汤对子宫出血模型大鼠保血功效的比较研究

胶艾汤首载于东汉张仲景《金匮要略》，四物汤首载于唐蔺道人《仙授理伤续断秘方》，由胶艾汤减阿胶、艾叶和甘草三味，干地黄易为熟地，芍药定为白芍而成。胶艾汤衍化为四物汤，主治病症由漏下、半产出血及妊娠下血、妊娠腹痛衍化为血虚血瘀、月经不调。前期试验研究表明胶艾汤衍化为四物汤后活血功效增强［1］，本实验采用子宫出血动物模型评价胶艾汤衍化为四物汤前后的保血效应，以期为阐明两方衍化配伍机制［2］和临床合理用药提供依据。

HO-1介导芒果苷对大鼠肝脏缺血／再灌注损伤的保护作用

芒果苷属双苯吡酮类化合物，是芒果叶的主要活性成分，具有抗炎作用［3］。炎症是缺血／再灌注（I／R）损伤发生的重要机制［1－2］，但是芒果苷对肝脏I／R损伤的保护作用尚未见报道。本研究观察了芒果苷对I／R大鼠肝脏炎症反应以及损伤的影响。

染料木黄酮对大鼠胰岛素分泌的调控作用

我国糖尿病的发病率近年来呈现快速增长的趋势。2型糖尿病以胰岛素分泌相对不足和胰岛素抵抗为主要特征，因此，促进胰岛素分泌是临床治疗2型糖尿病的重要手段。染料木黄酮（genistein）主要来源于豆类植物，大量证据表明染料木黄酮对糖尿病、慢性缺氧、骨质疏松等有一定的预防和治疗作用［1－3］。研究显示，染料木黄酮可改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗［1］，但其对胰岛素分泌的作用及机制尚不明晰。本研究采用放免法测定胰岛素分泌，膜片钳测定胰岛β细胞钾离子通道电流等方法，观察染料木黄酮对大鼠胰岛素分泌的影响，并探讨其作用机制。

大鼠脑微血管内皮细胞与周细胞、星形胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型

目的：应用原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞（brain-microvessel endothelial cells，BMECs ）与脑微血管周细胞（brain-microvessel pericytes，BMPC ）、星形胶质细胞（astro-cytes，AS）共培养建立可模拟在体状态的体外血脑屏障（blood-brain barrier，BBB）模型。方法原代分离、纯化和培养大鼠BMECs、BMPC和AS，通过细胞形态学和免疫细胞化学染色方法鉴定原代培养的细胞，应用Millicell细胞培养插（孔径0.4μm）建立5种不同类型的体外BBB模型，经跨内皮电阻值（transendothelial electrical resistance，TEER）、荧光素钠通透性（sodium fluorescent，Na-FLU ）、碱性磷酸酶（AKP）和γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT1）的表达测定以及阳性药在体内和体外BBB通透量的相似性，比较评价其屏障功能。结果原代培养的BMECs呈典型的铺路卵石样结构，BMPC胞体较大且呈分枝状，AS 有细长突触，胞质较浅；免疫细胞化学染色证实原代细胞为目标细胞；BMECs与BMPC、AS共培养后TEER值可达（478±25）Ω·cm2，Na-FLU 的表观渗透系数为[（8.23±0.78）×10－6]cm·s－1，AKP和γ-GT1表达分别为（6.90±0.27）金氏单位· g－1 Pro，（4.39±0.32）μg·g－1 Pro；阳性药在体外BBB的表观渗透系数（apparent permeability coefficient，Papp ）与在体数据具有较好的相关性（R2＝0.92）。结论原代培养的大鼠BMECs与BMPC、AS共培养建立的体外BBB模型在形态、结构及屏障功能方面具备BBB的基本特征，为研究BBB的生理学、病理学以及筛选化合物提供了一种有用工具。

通心络胶囊抑制p38 MAPK磷酸化抑制糖尿病周围神经病变小鼠氧化应激

目的：观察通心络胶囊对糖尿病周围神经病变（DPN ）小鼠氧化应激的作用并探讨其机制。方法 KK／Upj-Ay小鼠分为模型组、通心络高、中、低剂量组，另设C57BL／6小鼠为对照组。灌胃给药12周，测定热痛觉阈值和运动神经传导速度（MNCV ）；比色法测定血液中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）活性和丙二醛（MDA）含量；荧光定量PCR和Western blot测定坐骨神经血红素氧合酶-1（HO-1）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）表达；Western blot 测定坐骨神经 p38 MAPK、p-p38 MAPK、JNK、p-JNK、ERK、p-ERK蛋白表达。结果与模型组比较，通心络组小鼠痛觉阈值升高，MNCV 明显增快（P＜0.05，P＜0.01）；SOD、GSH-Px活性明显上升，MDA含量上升（P＜0.01）；HO-1、γ-GCS mRNA和蛋白表达明显升高（P＜0.05， P＜0.01）；p-p38 MAPK 表达明显下降（P ＜0.05）。结论通心络胶囊可通过抑制p38 MAPK磷酸化水平而发挥其抗DPN小鼠氧化应激损伤的作用。

敬告读者