大黄酚对铅中毒小鼠免疫功能的影响

目的研究大黄酚对铅中毒小鼠免疫功能的保护作用。方法采用连续8 d腹腔注射7 mg · kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠模型,大黄酚治疗14 d后检测脾脏和胸腺指数、白细胞计数、巨噬细胞吞噬功能、T、B淋巴细胞增殖能力,自然杀伤细胞( NK)活性。以酶联免疫吸附测定法( ELISA)测定铅中毒小鼠血清中细胞因子含量。结果连续8d腹腔注射7 mg·kg-1醋酸铅造成铅中毒小鼠免疫能力下降,大黄酚可明显提高铅中毒小鼠的免疫能力,主要表现为连续腹腔注射大黄酚14 d治疗后,可不同程度改善铅中毒小鼠生长速度,明显提高铅中毒小鼠脏器指数和白细胞计数(P <0．05或P<0．01)；大黄酚治疗组(1．0、10．0 mg·kg-1)可明显提高铅中毒小鼠B脾淋巴细胞增殖能力和T脾淋巴细胞增殖能力(P<0.01),大黄酚治疗组(1．0、10．0 mg·kg-1)可明显提高铅中毒巨噬细胞吞噬能力和NK细胞杀伤力( P<0.01),与溶媒组相比铅中毒模型组小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10含量均明显降低(P<0.01)；与模型组相比,大黄酚治疗组(1.0,10.0 mg·kg-1)小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10均明显升高( P<0．01)；与模型组相比,大黄酚治疗组(0．1 mg·kg-1)小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4含量未见明显变化(P >0.05),仅 IL-10含量明显升高(P <0．05)。结论大黄酚可提高铅中毒小鼠免疫功能。

POR基因多态性与华法林维持剂量关系的研究

目的探讨POR基因多态性与华法林维持剂量的相关性。方法共纳入185例中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者,采用 Sequenom MassARRAY? System 检测VKORC1及 POR 相关 SNPs,采用 PCR-RFLP 法检测CYP2C9*3基因型。采用 ANOVA 或 t检验考察目的 SNPs与患者华法林维持剂量的关系。结果在CYP2C9*1*1携带者中,POR rs17685 T等位基因携带者( TT型和CT型)华法林维持剂量明显高于 CC 型携带者(3．50±1．07) mg · d-1 vs (3．14±0．94) mg·d-1,P=0．03。在CYP2C9*1*1及VKORC1 rs9934438 GA/GG携带者中, POR rs17685 T等位基因携带者( TT型和CT型)的华法林维持剂量明显高于CC型携带者(4．76±0．90) mg·d-1 vs (4．08±1．03) mg· d-1,P=0．04。未发现POR rs2868177与华法林维持剂量存在相关性。结论在中国汉族人工心脏机械瓣膜置换术患者中,POR rs17685 T突变与华法林剂量上调相关,该基因型检测将有助于指导华法林的临床合理应用。

阿托伐他汀减轻氧化型低密度脂蛋白导致的人微血管内皮细胞活化和损伤

目的研究阿托伐他汀( ATV)对氧化型低密度脂蛋白( ox-LDL)导致人微血管内皮细胞活化和损伤的抑制作用。方法采用ox-LDL激活和损伤人微血管内皮细胞。损伤前加入ATV与内皮细胞孵育。细胞暴露于ox-LDL后,MTT法测定细胞活力,酶活性测定法检测培养上清中乳酸脱氢酶( LDH)活力, ELISA 检测上清中 ICAM-1含量, Western blot检测细胞质内NF-κB p65的磷酸化水平,并采用双萤光素酶报告基因检测系统测定NF-κB的核内转录活性。结果 Ox-LDL能导致人微血管内皮细胞的活化和损伤。 ATV的干预可有效减轻ox-LDL对细胞活力的抑制、减少LDH释放、下调ICAM-1分子的表达、减弱细胞质内NF-κB p65的磷酸化、抑制NF-κB核内转录活性的上调。结论 ATV能有效减轻ox-LDL导致的人微血管内皮细胞活化和损伤,其机制可能与抑制NF-κB的磷酸化和核内转录活性有关。

8-溴-7-甲氧基白杨素逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化

目的：研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxy-chrysin, BrMC)能否有效逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化( epithelial-mesenchymal transi-tion, EMT)。方法体外培养SiHa细胞系细胞,干细胞条件培养基悬浮培养得到球形成细胞( sphere forming cells, SFCs)。以BrMC处理SFCs后,通过单层贴壁培养观察细胞形态。 Western blot 分析 SFCs 的 E-cadherin、N-cadherin 和Twist1蛋白表达水平。结果与亲本细胞比较,SiHa细胞系SFCs呈现间叶样细胞(梭形细胞)形态,并低表达E-cadherin和高表达N-cadherin蛋白。 BrMC(1．0μmol·L-1)处理72 h后,SFCs由梭形细胞转变为多边形细胞；BrMC(0．1和1．0μmol·L-1)作用24 h,SFCs中E-cadherin表达上调,N-cad-herin和Twist1蛋白表达降低。结论 BrMC具有逆转SiHa细胞系SFCs的 EMT作用,其机制涉及降低 Twsit1蛋白表达。

没食子酸诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡机制的探讨

目的：探讨没食子酸( gallic acid,GA)抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用,揭示其促凋亡的相关分子机制。方法体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,MTT法观察细胞在GA作用24、48、72 h后的增殖情况；用倒置显微镜观察细胞形态学的变化；透视电镜观察细胞内部结构变化；Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡；采用RT-PCR技术研究p53 mRNA的变化；应用Western blot法检测p53蛋白水平的表达。探讨GA对人肝癌细胞SMMC-7721的诱导凋亡作用及机制。结果剂量为6．25~50μmol · L-1 GA作用SMMC-7721细胞48 h有明显的增殖抑制活性,引起核固缩、凝聚、碎裂,诱导细胞凋亡,并呈剂量依赖性；RT-PCR和Western blot结果显示,GA能升高p53 mRNA水平和p53蛋白表达。结论GA可抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,诱导凋亡,可能与其上调肿瘤相关抑癌基因p53有关。

中华眼镜蛇神经毒素微球的制备及镇痛作用研究

目的：研究中华眼镜蛇神经毒素PLGA微球制备及通过鼻黏膜给药的镇痛作用。方法采用复乳溶剂挥发法制备眼镜蛇神经毒素PLGA微球，采用大鼠甩尾法测定其镇痛效果。结果采用W/O/O方法，成功制备出中华眼镜蛇神经毒素鼻腔给药PLGA微球，微球平均粒径25μm左右，药物包埋率达80%以上。通过大鼠甩尾法显示明显的镇痛效果。结论将中华眼镜蛇神经毒素制成微球制剂鼻腔给药，镇痛作用明显增强。

丹皮酚对脂多糖/三磷酸腺苷诱导的小胶质细胞NLRP3炎症小体激活的影响

目的：观察丹皮酚( Pae)对脂多糖( LPS)与三磷酸腺苷( ATP)诱导大鼠原代小胶质细胞NLRP3炎症小体激活的影响,探讨Pae对小胶质细胞炎症反应的抑制作用及其具体机制。方法采用白细胞分化抗原11b(CD11b)免疫荧光染色法鉴定小胶质细胞；采用ELISA法测定培养液中白细胞介素-1β( IL-1β)的水平；采用Western blot检测细胞NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达水平；采用2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酯( DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧( ROS)的水平。结果 LPS(0.5 mg·L-1)/ATP(5 mmol·L-1)能增加小胶质细胞ROS及上清液IL-1β水平,上调细胞NLRP3、ASC和caspase-1蛋白水平；Pae能减少细胞 ROS和上清液IL-1β水平,抑制LPS和ATP双信号上调的NLRP3、ASC和caspase-1蛋白水平。结论 Pae能抑制LPS/ATP激活的小胶质细胞NLRP3炎症小体,减少细胞上清液IL-1β水平,Pae对NLRP3炎症小体抑制作用可能与其下调小胶质细胞ROS水平有关。

氯肟衍生物对记忆障碍模型动物空间学习记忆障碍改善作用及其机制研究

目的：研究氯肟衍生物arimoclomol和TCO-2对记忆障碍动物学习记忆能力的影响并初步探讨其机制。方法采用东莨菪碱致记忆获得性障碍小鼠模型和侧脑室注射 Aβ1-42所致记忆障碍大鼠模型。动物分为正常组、模型组、多奈哌齐对照组、arimoclomol 干预组和TCO-2干预组。正常组与模型组动物每日相同时间腹腔注射相应剂量的药物溶剂(生理盐水)；多奈哌齐对照组及待测药物干预组分别给予相应剂量的药物。给药8 d 后，采用Morris 水迷宫方法检测动物的空间学习记忆能力，并且检测动物海马组织的乙酰胆碱酯酶活性；检测侧脑室注射Aβ1-42大鼠海马组织的 Aβ1-42含量，并测定磷酸化tau 蛋白表达。结果与模型对照组相比，给予两种氯肟衍生物的动物搜索平台潜伏期缩短，穿越平台次数增加，表明氯肟衍生物可以明显改善注射东莨菪碱或Aβ1-42引起的记忆障碍；给予氯肟化合物还能够明显降低脑内乙酰胆碱酯酶活性和Aβ1-42含量，下调磷酸化 tau 蛋白的表达。结论氯肟衍生物可改善东莨菪碱以及侧脑室注射Aβ1-42所致的记忆障碍，其作用机制可能与增强中枢胆碱能系统功能、降低脑内Aβ蛋白和磷酸化tau 蛋白含量有关。

SHIP2通过上调Bim表达增强胃癌细胞BGC-823对紫杉醇的敏感性

目的：探讨 SHIP2( SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法( Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定量 PCR ( real-time quantitative PCR, qRT-PCR)分析mRNA的变化水平。将 pCMV6-SHIP2质粒在脂质体介导下转染人胃癌BGC-823细胞,同时以转染空载体和未转染细胞作为对照组。将 GV112-Puromycin空载体和 GV112-Puromycin-Bim ( Bcl-2 interacting mediator of cell death)慢病毒颗粒分别感染 BGC-823细胞,建立稳定细胞株,再将 pCMV6-SHIP2质粒分别转染空载体和稳定干扰Bim表达细胞株。结果与 SGC-7901细胞相比, BGC-823细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对不敏感,0．3μmol · L-1紫杉醇诱导BGC-82348 h后细胞凋亡率仅为(25．6±1．6)%,在紫杉醇作用不同时间点Bim蛋白和mRNA表达均无明显变化；与对照组相比,转染SHIP2基因能明显增加Bim的表达,紫杉醇作用48 h 后,细胞凋亡率上升到(50．8±0．9)%；GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的BGC-823细胞,Bim的表达明显被抑制,在GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的稳定BGC-823细胞中转入pCMV6-SHIP2,紫杉醇作用48 h后,凋亡率为(27．6±1．6)%。结论转染外源性SHIP2基因能有效提高 BGC-823细胞内 Bim 的表达,诱导BGC-823细胞凋亡,明显增加BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。

转导血红素氧合酶-1蛋白减轻脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤

目的：评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R (11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10)：脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5 mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg· kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果 C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0．05)；H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0．01)；H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高( vs H1组,P<0．01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。

野黄芩素及其葡萄糖醛酸结合物在大鼠体内的药动学研究

目的：建立测定大鼠血浆中野黄芩素及其代谢产物葡萄糖醛酸结合物浓度的UPLC-MS/MS法，并讨论两者在大鼠体内的药代动力学过程。方法色谱采用 Waters BEH C18色谱柱，流动相为0．1%甲酸乙腈-0．1%甲酸水溶液，梯度洗脱，质谱采用多反应监测( MRM)进行正离子检测野黄芩素。大鼠静脉给予野黄芩素，测定给药后不同时间的野黄芩素的血药浓度；采用酶解方式间接测定野黄芩素葡萄糖醛酸结合物的血药浓度，以DAS 2．0软件获得药动学参数。结果野黄芩素在0．116~28．2 mg · L-1呈良好线性相关，提取回收率为80．5%~90．0%，精密度、准确度、稳定性良好。药代动力学研究结果表明静脉给予野黄芩素后其原型及其葡萄糖醛酸结合物药代动力学过程均符合二室模型。结论本研究所建立的方法具有灵敏度高，重现性好，操作简便等特点，可用于同时测定野黄芩素及其葡萄糖醛酸结合物在体内的浓度，便于原型药物及其代谢物产物的药动学研究。

大胡蜂肥大细胞脱粒肽对血管生成的抑制作用

目的研究大胡蜂肥大细胞脱粒肽12a对血管生成的影响。方法利用鸡胚绒毛尿囊膜( CAM)实验体内观察不同浓度的12a对血管形成的影响；采用MTT法和小管形成实验体外观察不同浓度的12a 对人脐静脉内皮细胞( HU-VEC)增殖和血管形成的影响。结果0．1和1μg 12a能明显抑制0.2μg重组人碱性成纤维细胞生长因子( rh-bFGF)诱导的10 d龄鸡胚的绒毛尿囊膜血管生成，导致不同程度的CAM血管大范围明显褪色，密度减少，结构模糊，分支多处断开，生长抑制率分别为60．2%和90．3%；1 mg · L-1和10 mg · L-112a 对 HUVEC 的增殖和血管形成分别有55．4%、39．3%和51．6%、26．7%的抑制率；结论大胡蜂肥大细胞脱粒肽12a能明显抑制新生血管的生成。

青刺果总黄酮对四氧嘧啶致糖尿病小鼠肾组织形态学的影响

目的：观察青刺果总黄酮对四氧嘧啶导致的糖尿病小鼠肾组织形态学的影响，探讨其对肾脏的保护作用。方法腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型，连续4周给予青刺果总黄酮灌胃治疗。2周及4周后分别处死小鼠，测血糖，称肾重和计算肾脏脏器指数。取部分肾做切片，分别在光镜和电镜下观察肾脏病理变化。结果糖尿病模型小鼠经青刺果总黄酮治疗后，在光镜和电镜下均可观察到由四氧嘧啶导致的肾脏病变的减轻。经青刺果总黄酮治疗的糖尿病小鼠其肾小球体积减小，基底膜无明显增厚；肾小管内糖原沉积减少，间质纤维减少；细胞器损伤较模型组轻微。结论青刺果总黄酮能有效的改善糖尿病小鼠肾脏的病变，控制肾脏肥大，对糖尿病肾病有一定的保护作用。

红景天苷对腹水型H22肝癌抑制作用及其机制的初步研究

目的：观察红景天苷体内抗肿瘤作用,初步探讨其可能机制。方法建立荷瘤小鼠模型,实验分为5组,即红景天苷低、中、高剂量组,NS组及苦参碱对照组；ip给药8 d,观察小鼠肿瘤生长情况及生存时间,测定抑瘤率、生命延长率、脾脏系数以及血清IL-2、IL-12水平等指标。结果红景天苷能明显改善荷瘤小鼠一般状况；红景天苷低、中、高3个剂量组均有抑瘤作用( P<0．01),抑瘤率分别为28．9%、43．3%、53．5%；红景天苷各剂量组均能延长小鼠的生存时间( P<0．01),生命延长率分别为37．54%、48．96%、52．85%；红景天苷各剂量组小鼠脾脏系数与血清IL-2、IL-12水平均明显高于NS组与苦参碱组。结论红景天苷具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与提高机体免疫功能有关。

银杏内酯B对内皮细胞连接蛋白的影响及其分子机制研究

目的：探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯 B (0．2、0．4、0．6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实验观察ox-LDL损伤内皮细胞以及银杏内酯B对单核细胞向内皮细胞下迁移的影响。结果①ox-LDL刺激内皮细胞4 h,JAM-A表达增加了22%,Cx43表达增加了24%,银杏内酯B处理的细胞JAM-A、Cx43表达明显降低。免疫荧光检测获得了同样的结果。② PI3K特异性抑制剂 LY294002同样抑制了 ox-LDL刺激的 JAM-A、Cx43表达,表明银杏内酯B降低JAM-A、Cx43表达与抑制Akt磷酸化相关。③白细胞迁移实验表明,银杏内酯B明显减少ox-LDL诱导的单核细胞向内皮细胞下迁移。结论银杏内酯B能抑制ox-LDL刺激的内皮细胞连接蛋白JAM-A、Cx43表达,从而改善血管渗透性,减少白细胞迁移,分子机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。

丙戊酸通过CREB上调脑红蛋白并保护N2 a细胞免受双氧水诱导的神经损伤

目的：研究丙戊酸对脑红蛋白表达的影响和机制，及其对双氧水诱导的神经损伤的保护作用。方法 Western blot、RT-PCR和荧光素酶活性实验检测丙戊酸对小鼠和人脑红蛋白表达的影响；荧光素酶活性实验分析CREB在丙戊酸诱导脑红蛋白启动子活性过程中的作用；MTT实验分析丙戊酸对双氧水诱导的神经损伤的保护能力。结果发现丙戊酸上调小鼠和人脑红蛋白的蛋白和mRNA水平，并能上调脑红蛋白基因的启动子活性；CREB特异性抑制剂KG-501和CREB显性负突变体KCREB均抑制丙戊酸诱导脑红蛋白基因的启动子活性；丙戊酸可保护N2 a神经瘤母细胞免受双氧水诱导的损伤。结论 CREB介导了丙戊酸诱导的脑红蛋白表达上调；脑红蛋白可能在丙戊酸保护N2 a细胞免受氧化应激诱导的神经损伤过程中扮演重要作用。

甘草酸对AGEs培养肾小球系膜细胞及ECM表达的影响

目的观察甘草酸( glycyrrhizic acid, GA)对糖化终产物(advanced glycation endproducts, AGEs)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)细胞增殖、细胞周期及细胞外基质成分中纤粘连蛋白( FN)和Ⅳ型胶原( C-Ⅳ)的影响。方法用含AGEs的培养液配制GA,同时设牛血清白蛋白( BSA)对照组。 HBZY-1各组细胞培养48 h后, MTT检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期, ELISA方法测定细胞上清液中FN和C-Ⅳ。结果在AGEs的刺激下,细胞增殖明显,细胞S期延长, G1期缩短, PI 从35．01%±4．21%增长到44．93%±0．25%( P<0．05),细胞分泌FN和C-Ⅳ明显增加(P<0．05)。加入GA后,细胞异常增殖明显减少, S期细胞减少, G1期增加, PI从44．93%±0．25%减少到42．16%±1．04%( P<0．05),细胞分泌FN和 C-Ⅳ有所减少( P<0．05)。结论 GA能对抗 AGEs对 HBZY-1细胞的损伤作用,其可能是通过抑制AGEs诱导细胞的异常增殖和改变细胞周期来保护细胞免受AGEs的损害,另外,甘草酸能降低ECM中FN和C-Ⅳ的合成。

松果菊苷对血管性痴呆大鼠氧化应激损伤的保护作用

目的：研究松果菊苷( ECH)对血管性痴呆大鼠氧化应激损伤的保护作用。方法采用间隔3d分2次结扎大鼠双侧颈总动脉法制备血管性痴呆( VD)模型；给药后,采用生化方法测定皮层及海马组织中还原型谷胱甘肽( GSH)、一氧化氮( NO)含量,谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)、一氧化氮合酶( NOS)的活力；HE染色,光学显微镜下观察各组大鼠海马组织CA1区组织结构的变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠的皮层及海马组织中的GSH 含量以及GSH-Px的活力明显下降(P<0．01),NO含量及NOS的活力明显升高(P<0．05, P<0．01),海马CA1区细胞数目减少,细胞排列紊乱稀疏,细胞形态不完整,结构不正常,胞质稀少,胞核与胞质界限模糊,细胞核深染、固缩,呈三角形或不规则形,核仁不明显,并出现增生胶质细胞；与模型组比较,各给药组大鼠皮层及海马组织中的GSH 含量以及GSH- Px的活力有不同程度的升高(P<0．05, P<0．01),NOS的活力有不同程度的降低(P<0．05, P<0．01),同时大鼠海马CA1区神经元排列较为整齐,结构相对正常,核固缩现象减少,深染程度降低；与阳性药组以及假手术组比较,ECH高剂量组的皮层及海马组织中 GSH、NO含量, GSH-Px、NOS的活力差异均无显著性( P>0．05),且ECH高剂量组海马CA1区神经元损伤程度低,更接近于假手术组。结论松果菊苷对血管性痴呆大鼠氧化应激损伤有较好的保护作用。

辛伐他汀对oxLDL诱导的巨噬细胞活性氧及IL-1β分泌的影响

目的：探讨辛伐他汀对氧化低密度脂蛋白( oxidized low density lipoprotein, oxLDL )诱导的巨噬细胞内活性氧( ROS)的水平及IL-1β分泌的影响。方法将oxLDL 0、50、100、200 mg·L-1作用于巨噬细胞J774A.1后,采用油红O染色观察脂滴在巨噬细胞内的聚集情况；用辛伐他汀0．5、1．0μmol·L-1作用于oxLDL处理的巨噬细胞,流式细胞仪检测辛伐他汀作用前后细胞内ROS的水平；Western blot检测pro-caspase-1、cleaved caspase-1和成熟 IL-1β的表达情况。结果油红O染色结果表明,oxLDL可导致巨噬细胞内明显的脂质聚集,并于100 mg·L-1作用剂量达到摄取脂质的饱和状态；流式细胞仪结果表明,oxLDL可以诱导脂质聚集巨噬细胞内ROS的水平增加,辛伐他汀作用后,ROS水平由(167±0．47)%下降到(139±0．97)%,并呈明显的剂量依赖；Western blot结果表明,辛伐他汀可抑制oxLDL诱导的caspase-1活化及IL-1β的分泌,辛伐他汀处理组与oxLDL实验组相比,cleaved caspase-1及成熟 IL-1β的表达呈下降趋势,灰度值差异有统计学意义( P<0．05)。结论在oxLDL诱导的巨噬细胞脂质聚集模型中,辛伐他汀可以抑制巨噬细胞内ROS的产生及caspase-1的活化,并减少IL-1β的分泌。

内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性的信号机制

目的探索内皮-单核细胞激活多肽-Ⅱ( endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ, EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障( blood-tumor barrier, BTB)通透性的相关信号机制。方法采集出生3~5 d 的 Wistar 胎鼠的大脑皮质,应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后,接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞( brain microvascular endothelial cells, BMECs)原代培养；将BMECs 与 C6脑胶质瘤细胞共培养,构建体外BTB模型；共培养后的BMEC被随机分成5组(每组6例)：对照组、EMAP-Ⅱ组、H7+ EMAP-Ⅱ组、C3 ex-oenzyme+EMAP-Ⅱ组和C3 exoenzyme+ H7+EMAP-Ⅱ组。测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量评估各组 BTB 通透性变化情况；Western blot法检测 BMECs上紧密连接相关蛋白occludin 和 ZO-1的表达水平变化；免疫荧光法检测oc-cludin 和 ZO-1在 BMECs上的分布与表达。 Western blot法检测 BMECs上肌球蛋白轻链( myosin light chain, MLC)和磷酸化肌球蛋白轻链( phosphomyosin light chain, pMLC)的表达水平变化。结果与对照组相比较, EMAP-Ⅱ组 BTB的通透性明显增高,BMECs上occludin 和 ZO-1的表达水平明显降低,pMLC 的表达水平明显增高；EMAP-Ⅱ的上述作用受到蛋白激酶C ( protein kinase C, PKC)抑制剂 H7或(和) RhoA 抑制剂 C3 exoenzyme 预处理的明显抑制。结论信号分子PKC和RhoA在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性过程中发挥着重要的作用,信号通路 PKC-pMLC 和 RhoA-pMLC参与调控该过程。

激活蛋白酶活化受体2抑制肺癌细胞凋亡

目的：观察蛋白酶激活受体2( PAR2)活化对肺癌细胞株A549表皮生长因子受体( EGFR)表达及凋亡影响。方法在A549及EGFR基因沉默的A549细胞株培养液中加入类胰蛋白酶,用定量RT-PCR及Western blot法检测EGFR表达,观测细胞凋亡情况及与Bax/Bcl-xL表达水平。结果与类胰蛋白酶共培养48 h后,A549细胞EGFR表达明显增加。凋亡比例明显降低,而且这种降低呈现剂量浓度依赖性。细胞中Bax表达明显减少而 Bcl-xL 明显增加。 EGFR基因沉默后,类胰蛋白酶对A549细胞凋亡的抑制作用被阻断,对Bax/Bcl-xL比率亦无影响。结论类胰蛋白酶能增加肺癌细胞株A549EGFR表达,减少其凋亡,明显减少Bax表达而增加Bcl-xL表达。

脂联素通过增强糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌抗氧化能力减少细胞凋亡

目的研究脂联素( adiponectin, APN)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注( ischemia /reperfusion, IR)损伤的保护作用,并从氧化-抗氧化角度初步探讨其作用机制。方法Sprague Dawley大鼠随机分为糖尿病组和非糖尿病组。糖尿病组腹腔注射链脲佐菌素致糖尿病。非糖尿病组和糖尿病组大鼠被随机分为正常组( NS )、缺血/再灌注组( NIR )、糖尿病组( DS )、DS+IR组( DIR )、DS +IR +APN 组( APN )。NIR组、DIR组、APN组动物经历IR 损伤,APN 组于再灌注前10 min经舌静脉注射APN。结果糖尿病模型组动物血糖明显升高,体重下降(P<0．05)。 NIR组和DIR组心梗面积增加,细胞凋亡增多；心肌组织MDA含量、ROS生成均明显高于各自的对照NS组和DS组；SOD、NO活性则分别明显减低( P<0．05或P<0．01)；并且DIR组上述指标变化较NIR组更明显。 APN预处理可明显逆转DIR所致的心肌凋亡,并抑制氧化应激( P<0．05或 P<0．01)。结论 APN 可能通过增强抗氧化能力减轻糖尿病大鼠心肌IR损伤。

自噬在As2O3诱导Burkitt淋巴瘤Raji细胞死亡中的作用及机制研究

目的：研究自噬在As2 O3诱导的Raji细胞死亡中的作用及机制。方法透射电镜和MDC荧光染色观察细胞自噬形态,MTT 法测定细胞增殖活性；流式细胞术( FCM )及FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞周期和细胞凋亡, Western blot 检测细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ表达及转换；RT-PCR检测细胞bcl-2 mRNA和p53 mRNA的表达水平。结果 As2 O3明显抑制Raji细胞增殖,诱导其细胞周期G2/M阻滞和凋亡,抑制bcl-2基因和增强p53基因表达。同时, As2 O3可同步诱发Raji细胞的自噬活性。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制As2 O3诱导的自噬活性,上调bcl-2基因和下调p53基因表达,抑制As2 O3对 Raji 细胞的杀伤效应、降低 Raji 细胞对As2 O3的敏感性。而自噬诱导剂雷帕霉素( Rapa)的作用则与3-MA的效应正好相反。结论细胞凋亡和自噬性细胞死亡共存于As2 O3诱导的Raji淋巴瘤细胞死亡中,Bcl-2和p53可能起着关键的调控作用。

靶向乳腺癌耐药蛋白逆转肿瘤耐药：研究进展与药物开发

乳腺癌耐药蛋白( BCRP)是一种重要的ABC转运体，在肿瘤多药耐药产生中发挥重要作用，靶向BCRP逆转肿瘤耐药进行药物开发是近期的研究热点。该文对BCRP表达调控、亚细胞定位、能量依赖、转运活性抑制以及临床用药策略等方面的研究进展进行综述，为针对BCRP进行药物开发提供理论支持和新研究思路。

卫星胶质细胞对外周神经元作用的研究进展

近年来的研究表明，神经胶质细胞在整个神经系统中发挥着极为重要的作用。和中枢神经系统中的星型胶质细胞相似，外周神经中的卫星胶质细胞参与了神经系统中的各种生理和病理过程，并且通过神经元与胶质细胞的相互作用，影响着神经元的功能。该文就卫星胶质细胞如何影响神经元的功能做一综述。

试论药物非临床生殖毒性试验中的真实性、规范性、科学性和创新性

实验人员、设施、设备、仪器、技术和技巧等要素，是开展药物非临床生殖毒性研究的必要条件，其间的真实性、规范性、科学性和创新性，才是成功开展研究的重要保证。这4个概念彼此独立，交相映衬，互为支撑。真实性是药物非临床生殖毒性研究的根本，科学性是灵魂，规范性是实现真实性和科学性的保障，创新性需要立足于真实性，通过规范性和科学性两方面的验证，才能可靠且具有活力，这也许是创新性的成功之路。

血管紧张素Ⅱ及其1型受体在肿瘤血管生成中的作用研究进展

血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)是肾素-血管紧张素系统中的主要的多功能活性肽,其基本功能是调节血压和水、盐代谢平衡。然而,近年来的研究发现,AngⅡ作为一种潜在的生长因子,通过作用于其1型受体( AT1R)在肿瘤生长及血管生成中发挥着非常重要的作用。该文就近年来 AngⅡ-AT1R系统在肿瘤血管生成中的作用研究作一概述。

B细胞受体信号及其靶向抑制剂在恶性淋巴瘤中的作用

淋巴瘤是来源于成熟淋巴细胞的恶性肿瘤,B细胞受体( B cell receptor,BCR)信号通路在B细胞的发育和维持中起重要作用。恶性B细胞的生长和存活由BCR及其信号通路介导。目前,已相继研发了针对通路的各种靶酶如Syk、Btk及PI3K的抑制剂。该文对BCR信号通路及其靶向抑制剂在恶性淋巴瘤中作用的研究进展做一综述。

α-硫辛酸对2型糖尿病患者尿podocalyxin及MCP-1排泄的影响

α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,ALA)是一种存在于线粒体的酵素,通过清除氧自由基、还原体内抗氧化系统、螯合金属离子等发挥强抗氧化作用[1]。临床上已被广泛用于治疗糖尿病相关并发症,但有关其对糖尿病肾脏足细胞的保护和抗炎作用的研究尚少。糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)发病机制复杂,现研究认为炎症反应及足细胞损伤参与了 DN 发生发展的全过程[2]。足细胞损伤也已被证明[3]与DN 蛋白尿及肾小球硬化密切相关。podocalyxin(PCX)正常表达于足细胞,是足细胞标志蛋白之一,对维持肾小球正常结构及滤过屏障起重要作用。本研究通过观察正常人和2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者PCX 和MCP-1浓度的差异,以及ALA 治疗前后排泄水平的变化,探讨ALA 对T2DM 患者肾小球足细胞的保护作用及其与抗炎之间的可能关系。

黑灵芝多糖对S-180荷瘤小鼠的免疫调节作用

灵芝(Ganoderma lucidum)是我国具有研究价值的著名药用真菌之一，同时也是一种新资源食品[1]。灵芝多糖被认为是灵芝中有效的生物活性成分之一，研究证实具有很强的生物活性[2]。大量研究表明，灵芝的滋补强身、扶正固本之功效与灵芝多糖的免疫增强活性密切相关[3]。

神经肽urocortinⅡ对吗啡成瘾大鼠中脑腹侧被盖区神经元自发放电的影响

吗啡等阿片类药物反复使用可造成耐受、依赖和成瘾,中断给药出现戒断综合征、强迫觅药行为及戒断后焦虑等精神神经系统症状,对患者的身心有严重影响。目前已知,中脑边缘-多巴胺系统与药物成瘾和强化作用形成密切相关,此系统起自中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA),投射到杏仁中央核(nucleus centralis amygdalae,NAC)、内侧前额叶皮层(mPFC)等前脑区域,并涉及多种神经递质的投射。其中VTA 是中脑的重要神经核团,在此系统中发挥非常关键的作用,因此受到人们的关注。神经肽urocortin (UCN)是由40个氨基酸组成的高活性神经肽,属促肾上腺皮质激素释放因子(CRH)家族,与CRF 具有相似的生物学活性,通过下丘脑-腺垂体-肾上腺轴,促进腺垂体分泌肾上腺皮质激素,调节应激、应急反应,抗焦虑,镇静等作用[1]。虽然,UCN 对吗啡成瘾影响有少量报道,但UCN 对吗啡成瘾 VTA 神经元自发放电活动的影响未见报道。

基于氨基酸代谢的抗脑缺血益气解毒配伍中药协同作用研究

目的：首次从氨基酸代谢的角度探讨有前期基础,针对缺血性脑中风确有疗效的新的益气解毒方3个组分人参总皂苷、盐酸小檗碱和栀子苷的协同作用机制,探索中药整合作用研究的新方法。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),通过 RRLC-QQQ同时测定脑缺血12 h后大鼠血清中12种内源性氨基酸的含量,结合神经行为学评分,以及单因素方差分析、偏小二乘判别分析和主成分分析等数据分析方法,对不同给药剂量(5、25 mg · kg-1)下的益气解毒方3组分的不同给药组合对氨基酸水平的调控作用进行综合评价。结果益气解毒方3组分共同给药组(5、25 mg·kg-1)中大鼠的神经行为学评分均明显降低,特别是对于Glu、Asp、Met、Hcy和Phe 5种氨基酸的水平调控明显,与模型组相比差异具有显著性(P<0．05,P<0.01)。通过主成分分析方法对不同给药组合的贡献度进行评价的结果显示,给药量为25 mg·kg-1各组中PC1、PC3、PC4三个主成分和给药量为5 mg · kg-1各组中PC1~PC5及PC7六个主成分中贡献度大的给药组合均为益气解毒方3组分共同给药组。结论益气解毒方3组分配伍对于脑缺血后内源性氨基酸水平调节具有较好协同作用,三者共同给药可明显改善脑缺血后内源性氨基酸的代谢水平异常,其作用优于两两组合或是任意单一组分给药,相比而言,人参总皂苷在总方中可能较栀子苷、盐酸小檗碱发挥更重要的作用。

治疗自身免疫性疾病多肽药物的研究进展

近年来研究发现，靶向于特异表位的多肽药物治疗自身免疫病，可避免传统药物的非特异性免疫抑制，在自身免疫病动物模型及临床试验中显示出较好的治疗效果。该文从抑制自身免疫反应的候选多肽来源及其作用机制等方面，综述了近年来治疗自身免疫病多肽药物的研究进展和趋势，为全面深入了解自身免疫病免疫耐受机制及寻求新的治疗方法提供理论依据。

作者须知

《2013中国科技期刊引证报告》出炉,《中国药理学通报》四项第一

2013年9月26日,中国科技信息研究所在北京发布《2013中国科技期刊引证报告》,《中国药理学通报》核心影响因子1．019,总被引频次3533,基金论文比0．93,综合评价总分74．4,四项指标均列我国药理学类期刊第一名。并第7次被评为“2012中国百种杰出学术期刊”。

2013年中国药理学发展研究：国际论文分析

为了解2013年中国药理学发展的特点,本文对中国学者2013年发表的国际论文进行研究,以期帮助科研人员了解该领域新进展。本研究在2012版期刊引证报告自然科学版药理学期刊中,检索2013年中国学者发文情况。结果显示,2013年中国作者共参与发表文献5090篇,其中,中国作者为第一/通讯作者的文献4812篇,期刊影响因子高为22.345。发文涉及的研究机构大多为大学和高校,科研院所及临床医院较少。从发表文章的数量上看,植物药研究在我国研究人员研究领域中占有重要地位,研究热点比较分散。结果提示,2013年我国药理学研究正处于发展的重要阶段,基础研究需要积累和创新,临床药理学和新药研究亟待加强。