微管抑制剂诱导肿瘤细胞有丝分裂灾难研究进展

微管抑制剂一直是抗肿瘤药物研究的热点。微管抑制剂通过促进或抑制微管的聚合来破坏微管的动态平衡，阻碍肿瘤细胞纺锤体形成，阻滞细胞分裂进程从而发挥抗肿瘤作用。有丝分裂灾难是发生在细胞有丝分裂期，由细胞分裂异常和纺锤体结构的损伤而造成的细胞死亡现象。近年来，微管抑制剂能够诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难已被临床证实，并越来越受到人们关注。现对微管抑制剂的新研究进展进行综述，并探讨其诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难死亡的分子机制。

RAGE 及其配体对 CD4＋T 细胞的作用研究进展

晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glyca-tion end products，RAGE）是免疫球蛋白超家族的成员之一，其与配体结合后可启动多条信号通路，引起氧化应激和炎症反应。表达于初始 CD4＋ T 细胞表面的 RAGE 在 CD4＋ T 细胞增殖、分化和迁移中起着重要的作用；同时，阻断 RAGE 的功能可以抑制多种 CD4＋ T 细胞参与的免疫相关疾病的发展。近年来，对于 RAGE 及其配体在 CD4＋ T 细胞中的重要性越来越受到重视，该文将着眼于 RAGE 及其配体对 CD4＋ T细胞的作用特别是对其增殖、迁移和分化的作用进行总结。

Bcl-2家族对线粒体质量控制的调控研究

线粒体质量控制是维持细胞生存及生存状态的重要机制，通过对线粒体形态、数量与质量的多维调控，维持细胞内稳态。研究发现 Bcl-2家族与线粒体多种功能的调控密切相关，并参与调控线粒体自噬／细胞凋亡互调节及线粒体分裂、融合的动态变化，是线粒体质量控制的关键调控因子。该文主要综述 Bcl-2家族对线粒体质量控制的影响及其主要调控机制。

细胞因子信号转导抑制分子-3在肝纤维化中的作用及研究进展

肝纤维化是继发于各种慢性肝损伤之后组织修复过程中的代偿反应，其发病实质是肝内细胞外基质（extracellular matrix，ECM）合成与降解动态平衡发生紊乱，终导致 ECM过度沉积。肝纤维化的发生与发展受到多种细胞因子及细胞内多种信号转导通路网络的调控，其中很多靶点在肝纤维化中的作用尚没有完全定论。近年来越来越多的研究证实细胞因子信号转导抑制分子-3（suppressor of cytokine signa-ling，SOCS-3）在肝纤维化的发生与发展过程中扮演着重要角色。SOCS-3可通过调控肝脏内炎症反应、细胞增殖活化、胰岛素抵抗、瘦素抵抗等影响肝脏疾病的发展进程。许多学者认为 SOCS-3可作为肝纤维化疾病诊断、预测预后的生物分子指标以及治疗靶标。该文从 SOCS-3系统概述、SOCS-3与肝纤维化关系、SOCS-3在防治肝纤维化中的作用等方面综述了 SOCS-3在防治肝纤维化中的作用及研究进展。

JNK 激酶在细胞凋亡中的作用及其与癌症的关系

JNK 是 MAPK 蛋白激酶三级激活体系下游的关键蛋白质，位于多个信号转导通路节点位置，它在细胞的增殖与分化、细胞凋亡等重要的细胞生物过程中发挥着决定性的作用。对癌症等重大疾病的发生、发展起到重要的调控作用。然而，由于 JNK 激酶3种亚型在不同种类的细胞中对细胞凋亡和肿瘤的发生发展存在较大的差异，使得以 JNK 为靶点的抗癌药物研发遇到巨大的困难。该文对 JNK 介导的细胞凋亡信号通路，JNK 在细胞凋亡中的调控功能以及 JNK 3种亚型对癌细胞的增殖和凋亡作用进行阐述。

精准医学的基础研究与临床转化

20世纪末以来的基因组学、蛋白组学等领域的研究进展，推动现代医学从循证医学时代进入精准医学时代。精准医学借助研究组学信息与临床表型之间的关系，根据病人个体特异性通过药物基因组学等制定和实施个体化的精准医疗，以期提升临床结果并减少非必要的副作用。在中国推进精准医学的研究与转化将有助于改善我国的医疗现状，发挥巨大社会价值。

《中国药理学通报》2015年第31卷总目次索引

敬告读者

本刊免费全文开放存取网址：http：／／www．zgylxtb．cn；http：／／ylx．ahmu．edu．cn；还可查阅 http：／／yaol．china-journal．net．cn（中国知网）；http：／／zgylxtb．periodicals．net．cn（万方数据），及维普数据。从1999年起，本刊连续获中国科学技术协会和国家自然科学基金专项资金资助。2006～2013年获中国科协精品期刊工程示范项目资金资助。

田蓟苷微乳在 Caco-2细胞模型吸收动力学的研究

香青兰（Dracocephalum moldovica L．）为唇形科香青兰属一年生草本植物［1］，是传统的维吾尔民族药之一。田蓟苷为唇形科青兰属植物香青兰中的主要有效成分［2－3］，具有较高的新药研发潜力。前期研究结果表明，田蓟苷水溶性差，口服给药吸收不理想［4］。因此，为增加田蓟苷的溶解度，改善口服吸收利用率，课题组又进行了田蓟苷微乳制备工艺的研究［5－6］，同时开展了田蓟苷微乳在大鼠小肠吸收特性的研究［7］，在此基础上，本实验采用Caco2细胞模型对田蓟苷微乳的吸收机制进行研究，以期从细胞水平阐明田蓟苷微乳的吸收特性，为微乳载带田蓟苷的合理性提供科学依据。

药物－疾病关系预测：一种推荐系统模型

目的：药物重定位是指发掘已有药物新的治疗作用，然而具有潜在治疗作用的药物－疾病往往隐藏在数以百万计的关系对中。该研究基于医疗大数据分析，预测具有潜在治疗关系的药物－疾病关系对。方法将社交网络中推荐系统模型应用于药物重定位研究，并假设具有相似化学结构的药物可能具有相似的适应症。从开源数据库收集已知药物－疾病的治疗关系、副作用关系以及药物和疾病特征描述符，计算得到药物－药物的相似度和疾病－疾病相似度，再构建推荐模型将上述信息融合，并预测具有潜在治疗关系的药物－疾病，终得到预测关系对的排序列表。结果列表排名前500的关系对中，有12．8％得到临床实验支持或综述报道，20％得到模式生物实验或细胞实验支持。结论相比于已有分类模型和随机抽样结果，本模型可明显提高具有潜在治疗作用药物－疾病的富集程度。

丹酚酸A对异丙肾上腺素致小鼠心肌缺血的保护作用及其机制

目的：丹酚酸 A 是我国传统中药丹参中提取的主要水溶性成分之一，本研究探讨了丹酚酸 A 抗异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌缺血的作用及其机制。方法采用皮下注射异丙肾上腺素（isopropranol，ISO）8 mg·kg －1致小鼠心肌缺血模型，从动物死亡率、心电图、心脏指数、血清心肌酶谱以及病理切片评价丹酚酸 A 对小鼠心肌的保护作用，并从抗氧化、炎症以及细胞凋亡通路探讨其作用机制。结果丹酚酸 A 能够剂量依赖性地增强心肌缺血小鼠的心脏功能，减少心肌损伤酶的漏出，改善缺血心肌的病理变化，具有明显的心肌保护作用。丹酚酸 A 能降低心肌炎症因子白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis factor-α，TNF-α）的水平，减少 ISO 损伤引起的心肌细胞凋亡，增加抗凋亡蛋白 Bcl-2表达，降低促凋亡蛋白 Bax 表达，

硫酸化茯苓多糖对 MPTP 诱导帕金森小鼠的神经保护作用研究

目的：本实验通过检测硫酸化茯苓多糖（SP）对 MPTP诱导的帕金森小鼠中抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性、抗超氧阴离子活力、MDA 及过氧化氢含量，探讨 SP 对帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞的保护作用。方法将 ICR小鼠随机分为对照组、MPTP 组和 SP 治疗组（SP 50、100、150 mg·kg －1），腹腔注射给药，取中脑和脑皮层匀浆，利用酶标仪检测小鼠中脑和脑皮层中 SOD、GSH-Px、CAT 活性、抗超氧阴离子活力、MDA 及过氧化氢含量。结果SP 治疗组小鼠中脑和脑皮层3种抗氧化酶活性有不同程度的增强、抗超氧阴离子活力升高、MDA 及过氧化氢含量不同程度下降。结论SP 对 MPTP 诱导的帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞有一定的保护作用。

金银花水提物对小鼠糖尿病视网膜病的改善作用

目的：观察金银花水提物（Lonicerae Japonicae Flos a-queous extract，FL）对糖尿病视网膜病（diabetic retinopathy， DR）的改善作用及其机制。方法采用链脲佐菌素（strep-tozotocin，STZ）腹腔注射制备 C57小鼠糖尿病模型，给药2个月后形成了 DR 早期病程阶段即非增殖性糖尿病视网膜（non-proliferative DR，NPDR）。使用伊文氏蓝实验检测血－视网膜屏障（blood-retinal barrier，BRB）的渗漏情况；运用Western blot 实验检测相关蛋白的表达；酶联免疫实验（En-zyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清中炎性因子的表达。结果伊文氏蓝实验发现 FL 可以剂量依赖性的抑制 STZ 诱导糖尿病小鼠中发生的 BRB 渗漏。Western blot结果显示 FL 可以抑制 STZ 诱导糖尿病小鼠视网膜组织中核因子κB （nuclear factor-κB，NF-κB）p65亚单位的转核激活，FL 还可以抑制视网膜组织中 kappa B 抑制剂（inhibitor of κB，IκB）、抑制性κB 激酶（inhibitor of nuclear factor κB kinase，IKK）、p65的磷酸化激活。进一步研究发现 FL 可以抑制 STZ 诱导糖尿病小鼠视网膜组织中升高的小胶质细胞／巨噬细胞特异性蛋白（ionized calcium binding adapter mole-cule 1，Iba1）的表达，提示 FL 可以抑制神经小胶质细胞的活化。ELISA 实验结果发现 FL 能降低 STZ 诱导糖尿病小鼠血清中升高的炎性细胞因子如白介素（interleukin，IL）-6，-1β。结论FL 可能通过抑制神经小胶质细胞的活化，抑制NF-κB 介导的炎性信号通路，缓解视网膜的炎性损伤和 BRB的渗漏，从而发挥改善 DR 的药效活性。

三叶青黄酮经 p38MAPK 和 NF-κB 途径抑制老年小鼠急性肺损伤

目的：探讨三叶青总黄酮（RTFs）对老年小鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用及可能机制。方法采用老年C57BL／6J 小鼠支气管滴注脂多糖（LPS）诱导 ALI 模型，三叶青黄酮灌胃给药3 d。取支气管肺泡灌洗液（BALF），瑞氏－吉姆萨染色计算白细胞数，ELISA 检测炎症因子水平；ELISA 和 Western blot 分析肺组织 MAPKs、NF-κB 蛋白表达， TransAM检测核蛋白 NF-κB 活性。结果支气管滴注 LPS成功诱导 ALI 模型，三叶青黄酮可明显减少 BALF 中白细胞和中性粒细胞数（P ＜0.01），降低 IL-1β、IL-6、IL-12p40、TNF-α和 sTNF-R1的分泌水平（P ＜0.01），改善肺组织病理损伤。三叶青黄酮明显抑制肺组织 p38MAPK、NF-κB 的磷酸化及 NF-κB 的 DNA 结合活性（P ＜0.01）。结论三叶青黄酮抑制 p38MAPK、NF-κB 炎症通路，保护 LPS 诱导的老年小鼠 ALI。

葎草中黄酮类成分的分离鉴定及对小鼠肺水清除率的影响

目的：对草中主要黄酮类成分进行提取分离，并对其结构进行鉴定；探讨草中黄酮类单体成分对小鼠肺水清除率（AFC）的影响。方法草乙醇提取后，除色素，柱分离得单体成分，利用光谱法对其结构进行鉴定；通过气管给药后，酶标仪测定肺内吸出液的小牛血清白蛋白浓度的方法，计算木犀草苷（LGL）和大波斯菊苷（AGL）影响下的小鼠在体 AFC。结果草中的主要成分为木犀草苷和大波斯菊苷；二者均能促进 AFC。结论草中的主要成分均可降低肺内的积水。

吡拉格雷钠对氧糖剥夺／复氧后星形胶质细胞水肿及 AQP4表达的影响

目的：探讨氧糖剥夺并复氧培养后星形胶质细胞水肿及其水通道蛋白4（AQP4）表达的变化以及吡拉格雷（TSF）对其表达变化的影响。方法体外培养原代星形胶质细胞，建立氧糖剥夺／复氧细胞水肿模型，并随机分为正常组、氧糖剥夺／复氧损伤（OGD／Reox）组、奥扎格雷钠（Ozagrel）阳性对照组和 TSF 治疗组，在氧糖剥夺／复氧损伤后6、12、24和48 h 4个时间点测定细胞体积变化，乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、MTT 法检测细胞损伤及存活情况，Western blot 法检测各组细胞膜 AQP4蛋白的表达水平，RT-PCR 法检测各组细胞AQP4 mRNA 的转录水平。结果星形胶质细胞经缺氧再复氧处理，随着复氧时间的延长细胞损害加重（P ＜0.05，P ＜0.01）；TSF 治疗组的细胞体积明显低于 OGD／Reox 损伤组（P ＜0.05）；给予 TSF 治疗后细胞在氧糖剥夺／复氧后的LDH 漏出率较 OGD／Reox 损伤组明显降低（P ＜0.05）；TSF治疗组与单纯氧糖剥夺／复氧相比较 MTT 检测细胞活力明显升高（P ＜0.05）；给予 TSF 治疗组，AQP4表达明显降低（P＜0.05）；与 Ozagrel 相比较差异无显著性。Western blot 及RT-PCR 检测蛋白及 mRNA 的表达水平，给予 TSF 治疗组的AQP4蛋白及 mRNA 表达均明显降低（P ＜0.05）。结论TSF 治疗能明显减轻体外氧糖剥夺／复氧损伤引起的星形胶质细胞水肿，可能是通过降低氧糖剥夺后 AQP4的表达水平而实现。

佐剂型关节炎大鼠滑膜成纤维细胞模型建立及特征分析

目的：建立佐剂型关节炎大鼠滑膜成纤维细胞（AA-FLS）原代培养方法及其特性分析，探讨 AA-FLS 作为 RA 体外研究细胞模型的可行性。方法采用热杀死结核分枝杆菌 H37Ra（Mtb）免疫 SD 大鼠，建立佐剂型关节炎大鼠模型，取大鼠双侧膝关节滑膜组织进行原代细胞培养，显微镜下观察细胞形态；免疫细胞化学方法鉴定细胞；CCK-8法检测细胞增殖活性；ELISA 方法测定细胞上清中 TNF-α和 IL-1β水平；Hochest 33258法检测细胞凋亡状态；Western bolt 方法检测 AA FLS 细胞线粒体凋亡通路重要调控蛋白 Bcl-2和 Bax及 Pro-caspase-3和 Cleave-caspase-3水平的表达。结果胶原酶法分离获得的滑膜成纤维细胞经传代纯化，呈梭形的细胞占0．95以上，免疫细胞化学鉴定显示滑膜成纤维细胞 vi-mentin 表达呈阳性，CD68表达为阴性；AA 模型大鼠滑膜成纤维细胞增殖活性较正常大鼠滑膜成纤维细胞增殖活性明显提高，细胞凋亡率降低；在培养的细胞上清中 TNF-α和 IL-1β水平明显升高；线粒体凋亡通路调控蛋白 Bcl-2水平明显升高，而 Bax 蛋白表达水平明显降低，同时 AA-FLS 细胞中pro-caspase-3表达量增加。结论AA-FLS 具有增殖活跃、凋亡抑制和分泌高水平促炎性细胞因子的生物特性，可作为体外筛选抗 RA 药物的细胞模型。

补骨脂乙素对 Tca8113细胞迁移及侵袭的抑制作用及其机制

目的：探究补骨脂乙素（Isobavachalcone，IBC）对人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞迁移和侵袭的抑制作用及其可能的作用机制。方法将不同浓度的 IBC 作用于体外培养的Tca8113细胞，通过 MTT 法检测细胞增殖抑制率；划痕实验和 Transwell 实验分别检测细胞迁移和侵袭能力；Western blot 法检测 Akt、p-Akt、MMP-2和 MMP-9蛋白的表达情况。结果IBC 以浓度和时间依赖的方式有效抑制 Tca8113细胞增殖。IBC 降低 Tca8113细胞迁移及侵袭能力。Western blot 法显示 IBC 能够以浓度相关性下调 p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白的表达，而 Akt 蛋白水平不受 IBC 处理剂量的影响。结论IBC 可抑制 Tca8113细胞的增殖，迁移和侵袭，其作用与下调 MMP-2和 MMP-9蛋白及抑制其上游 Akt 的磷酸化有关。

GW0742对高糖损伤大鼠胸主动脉内皮的保护作用

目的：探讨 GW0742对高糖损伤大鼠胸主动脉内皮的作用及可能机制。方法葡萄糖55 mmol ·L －1（high glu-cose，HG）孵育大鼠胸主动脉，以乙酰胆碱（acetylcholine， ACh）诱导的内皮依赖性舒张作用为内皮功能完整性指标， HE 染色观察血管形态结构变化，硝酸还原法测量血管内一氧化氮（nitric oxide，NO）含量，利用 qRT-PCR 和 Western blot方法检测血管中过氧化物酶增殖物激活受体β（peroxisome proliferator-activated receptor β，PPAR β）、核转录因子κB （nuclear transcription factor-κB，NF-κB）及内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）mRNA 和蛋白表达。结果HG 条件下，ACh 的内皮依赖性舒张作用明显减弱（P ＜0.01），内皮功能受损；血管内皮细胞和平滑肌细胞结构完整性也被破坏；同时，PPAR βmRNA 和蛋白表达明显降低（P ＜0.01），而 NF-κB p65的表达则升高（P ＜0.01）， eNOS 的表达下降（P ＜0.01），血管内 NO 含量亦减少（P ＜0.01）；GW0742（0.01、0.1、1μmol·L －1）能剂量依赖性地改善高糖损伤的 ACh 内皮依赖性舒张作用（P ＜0.01），减轻内皮细胞和平滑肌细胞的损伤，上调 PPAR β表达，减少 NF-κB p65的表达，增加 eNOS 表达和 NO 的浓度（P ＜0.01）。结论GW0742对高糖损伤的大鼠胸主动脉内皮有保护作用，该作用可能与其激活 PPAR β，下调 NF-κB，改善 eNOS-NO 系统有关。

西妥昔联合阿霉素对三阴乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨西妥昔联合阿霉素对三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和凋亡的影响。方法MTT 法检测药物对细胞活性的影响；碘化丙啶（propidium iodide，PI）染色法测定药物对细胞凋亡率的影响；JC-1染色法测定线粒体膜电位的变化；Western blot 测定细胞内葡萄糖调节蛋白78（glu-cose regulated protein 78，GRP-78）、Bcl-2及 Caspase-3的表达水平。结果MTT 结果显示，西妥昔对 MDA-MB-231细胞的抑制作用随浓度增加而增强，但作用时间对细胞的抑制作用影响较小。阿霉素对 MDA-MB-231细胞的抑制作用具有浓度与时间依赖性。西妥昔与阿霉素合用能明显增强对MDA-MB-231细胞株的抑制作用，合用组12、24、48 h 的细胞存活率与西妥昔组、阿霉素组相比，差异均具有显著性（P ＜0．05或 P ＜0．01）。PI 结果显示：单用西妥昔、阿霉素均可诱导 MDA-MB-231的凋亡。联合用药可明显提高细胞的凋亡率，合用24 h 的凋亡率达到了（43.86±3.62）％，与西妥昔组（11.0±2.32）％、阿霉素组（17.1±1.37）％相比，差异具有显著性（P ＜0.01）。JC-1染色结果显示西妥昔、阿霉素单用及联合应用均可降低线粒体膜电位，合用组降低更明显。Western blot 显示西妥昔可下调Bcl2、GRP78的表达，激活Caspase3。阿霉素对Bcl2及Caspase3表达无影响，可增加GRP78的表达。合用组的GRP78、Bcl2表达明显降低，Caspase3的激活明显增加。结论西妥昔与阿霉素合用可增强对三阴乳腺癌细胞株MDAMB231的抑制作用，增加细胞凋亡，其机制可能是西妥昔通过下调内质网应激水平，去除内质网应激对细胞的保护作用，进而减少Bcl2表达，降低线粒体膜电位，激活线粒体凋亡通路，促进细胞的凋亡。

氧化苦参碱对高脂诱导胰岛素抵抗ApoE －／－小鼠肝脏脂代谢相关基因的影响

目的：探讨氧化苦参碱对高脂诱导胰岛素抵抗ApoE －／－小鼠肝脂代谢相关基因的影响。方法17只♂C57BL／6J 小鼠作为对照组，给予正常饮食；68只♂ApoE －／－小鼠，给予高脂饮食，饲养16周后，将小鼠分为模型组、氧化苦参碱低、中、高剂量组。给药8周，测定小鼠体重和一般生化指标。荧光定量 PCR 和 Western blot 方法检测肝组织 LPL、FAT／CD36、CPT1、UCP2、SREBP-1 c、FAS、ACC mRNA 和蛋白表达水平。结果氧化苦参碱能不同程度的降低体重、FBG、TC、TG、FFA、FINS、HOMA-IR，升高 GIR，改善胰岛素的抵抗。同时降低了 LPL、FAT／CD36、UCP2、SREBP-1 c、FAS、ACC mRNA 和蛋白的表达水平，升高了CPT1表达水平。结论氧化苦参碱能够通过脂转运、氧化、合成3个环节较全面的调节肝脂质代谢，改善高脂诱导的ApoE －／－小鼠的胰岛素抵抗。

丹参素对糖皮质激素诱导骨丢失大鼠胫骨近端骨密度和骨微结构的影响

目的：探讨丹参素对糖皮质激素诱导骨丢失大鼠胫骨近端骨密度和骨微结构的影响。方法60只7月龄 SPF 级♀ SD 大鼠按体质量随机分为6组，每组10只：空白对照组（生理盐水：5 mL·kg －1·d －1）、糖皮质激素模型组（醋酸泼尼松：6 mg·kg －1·d －1）、糖皮质激素＋丹参素低剂量组（12．5 mg·kg －1·d －1）、糖皮质激素＋丹参素中剂量组（25 mg·kg －1·d －1）、糖皮质激素＋丹参素高剂量组（50 mg· kg －1·d －1），糖皮质激素＋（阳性对照药）骨化三醇组（0.045μg·kg －1·d －1）。采用醋酸泼尼松连续灌胃14周建立大鼠骨丢失模型，同时采用丹参素和骨化三醇灌胃给药进行干预。实验结束后，取左侧胫骨近端进行 Micro-CT 扫描并分别对皮质骨和松质骨进行三维重建，观察骨微结构并检测骨密度等相关参数。结果糖皮质激素可引起大鼠胫

美洛昔康对人结肠癌细胞增殖、迁移和 PTEN 基因表达的影响

目的：研究美洛昔康（meloxicam，Mel）对人结直肠癌LoVo 细胞增殖和迁移能力的抑制作用及其对抑癌基因PTEN 表达水平的影响。方法以人结肠癌细胞株 LoVo 为试验对象，通过集落形成试验分析 Mel 对 LoVo 细胞增殖的影响，Western blot 检测 Mel 对 PCNA 蛋白和 PTEN 蛋白表达水平的影响；细胞迁移试验分析 Mel 对 LoVo 细胞活性的影响；RT-PCR 检测 Mel 对 LoVo 细胞中 PTEN mRNA 表达水平的影响；使用重组腺病毒作为干预手段，Annexin-V 试验验证Mel 是否通过 PTEN 发挥抑癌作用。结果与对照组相比， Mel 能明显抑制 LoVo 细胞的集落形成能力，能抑制 LoVo 细胞的细胞核增殖抗原 PCNA 的蛋白表达水平，80μmol·L －1 Mel 干预48 h，可将 LoVo 细胞中 PCNA 的蛋白表达水平抑制到61.57％±2.81％（T ＝7.086，P ＝0.019）；Mel 能上调LoVo 细胞内抑癌基因 PTEN 的 mRNA 表达水平，80μmol· L －1 Mel 干预48 h 后 PTEN 的 mRNA 表达水平上调至160.43％±4.71％（T ＝24.244，P ＝0.002）；Mel 能上调 LoVo细胞内 PTEN 的蛋白表达水平，80μmol·L －1 Mel 干预48 h后 PTEN 的蛋白表达水平上调至152.63％±3.33％（T ＝27.359，P ＝0.001）；Annexin-V 试验结果说明 Mel 的对 LoVo细胞的抑制作用可能与上调 PTEN 基因表达有关。结论Mel 能抑制LoVo 细胞的增殖和迁移，其机制可能与上调PTEN 的表达水平有关。

心脏干细胞分泌的 exosome对氧化应激下心肌细胞的保护作用研究

目的：探索心脏干细胞分泌的外泌体（exosome）对体外氧化应激所致心肌细胞凋亡的保护作用。方法磁珠分选出 Sca-1＋CPCs 进行培养，流式细胞术鉴定；分离 CPCs 分泌的 exosome，并用 Western blot 进行表型鉴定和用 Nanosight进行粒径分析；免疫荧光法及 PKH26标记技术观察心肌细胞 H9c2对 exosome 的摄取作用；通过 H2 O2处理诱导 H9c2细胞凋亡，用 Western blot 检测对照组与 CPC-exo 处理组凋亡相关蛋白水平，观察 exosome 对心肌细胞凋亡的保护作用。结果①磁珠分选出的细胞用免疫荧光检测发现 Sca-1呈阳性表达，且纯度可达95％以上。②从 Sca-1＋CPCs 细胞培养上清中提取出的 exosome 其表面标记蛋白 CD63呈阳性表达，Nanosight 结果显示大部分粒子都处于（82.33±3.06） nm（n ＝3）。免疫荧光显示 H9c2细胞中可见大量 PKH26标记的 exosome 在胞质聚集。③Western blot 结果显示，与对照组相比，CPC-exo 处理组总的 caspase-3表达不变，而激活型caspase-3表达水平明显降低（P ＜0.05）。结论CPCs 分泌的 exosome 可被 H9C2细胞所摄取，可以保护心肌细胞由于氧化应激引起的凋亡。

玉郎伞查尔酮调控 PI3K/Akt 信号通路抗心肌缺血／再灌注损伤的作用及机制研究

目的：探讨玉郎伞查尔酮（YLSC）调控 PI3K／Akt 信号通路抗心肌缺血／再灌注损伤的作用及机制。方法40只♂ SD 大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、YLSC 组、YLSC＋PI3K 抑制剂 wortmannin 组（YLSC ＋WM组）、PI3K 抑制剂wortmannin 组（WM组），每组8只。除假手术组外，其它各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支制备心肌缺血模型，缺血30 min，再灌注120 min。实验结束后，采用比色法测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶（CKMB）、乳酸脱氢酶（LDH）及一氧化氮（NO）水平，ELISA 法测定血清肿瘤坏死因子（TNFα）的含量，Western blot 法检测心肌组织中总Akt（tAkt）、磷酸化Akt（pAkt）及自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达，FQPCR 法分析内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、凋亡因子caspase3及自噬相关基因Beclin1的表达量变化。结果与I／R 组比较，YLSC 组CKMB、LDH 以及TNFα血清含量明显降低，NO 水平升高，Beclin1、caspase3及LC3Ⅱ的表达量均明显下降，同时Akt 的磷酸化水平与eNOS mRNA 表达增加，上述各项指标差异具有统计学意义（P ＜0.05），而上述变化能够被PI3K／Akt 信号通路的特异性阻断剂wortmannin 所阻断，且其差异具有统计学意义（P ＜0.05）。结论 YLSC 通过激活PI3K／Akt 信号通路抑制缺血／再灌注所致的心肌细胞凋亡和过度自噬，从而发挥对心肌缺血／再灌注损伤的保护作用。

氧化苦参碱对坐骨神经结扎小鼠的镇痛作用及其对 CaMK Ⅱ受体表达的影响

目的：研究氧化苦参碱（OMT）对神经病理性疼痛小鼠的镇痛作用及其机制。方法采用坐骨神经结扎模型（CCI）机械缩足反射法观察 OMT 的镇痛作用，并分析其镇痛作用与 CaMKII 受体的关系。结果①给小鼠腹腔注射160、80 mg·kg －1 OMT 可明显延长小鼠的机械缩足反射期（P ＜0.05）。②给小鼠腹腔注射160、80、40 mg·kg －1 OMT可明显降低小鼠的冷缩足反射次数（P ＜0.05）。③ OMT 能够跟 CaMK Ⅱ拮抗剂 KN-93和 AIP 发挥协同作用。④模型组小鼠的 pCaMK Ⅱ蛋白表达较假手术组明显升高（P ＜0.01）；与模型组比较，OMT（160 mg·kg －1）组可明显降低pCaMK Ⅱ蛋白的表达（P ＜0.01）。结论OMT 对神经病理性疼痛具有镇痛作用，其镇痛作用可能与 CaMK Ⅱ有关。

125I标记聚乙二醇化EILDVP肽的小鼠体内血药浓度

目的：探讨聚乙二醇修饰改善 EILDVP 肽体内过程的效果。方法KM小鼠以 NaI 饱和甲状腺后，按5 mL·kg －1容积，分别尾静脉注射3．441 GBq·L －1浓度的125 I 标记的EILDVP-Tyr-NH2、EILDVP-Cys （mPEG2000-MAL）-Tyr-NH2和EILDVP-Cys （mPEG20000-MAL）-Tyr-NH2肽。给药后不同时间取血，分离血浆，经三氯乙酸处理后测定沉淀部分放射性；测定数据分别代入已制备的相应标准曲线方程，取得血药浓度－时间数据，经3P97药动学统计软件计算主要药代动力学参数。结果在3.75～480μg·L －1浓度范围内，3种125 I标记肽线性关系良好，回收率在88.92％～106.66％之间，日内变异系数（RSD）＜10％；125 I 标记的 mPEG2000和 mPEG20000修饰 EILDVP-Tyr-NH2肽的血浆半衰期（T1／2）分别为0.43 h和1.94 h、较原型肽（0.28 h）延长1.54倍和6.93倍，清除率（Cl）分别降低1.23倍和24.71倍；3种受试化合物表观分布容积（V）值均较小，主要分布在血浆中。结论适宜分子质量 mPEG 修饰有利于延长 EILDVP 肽的体内维持时间，对提高药效具有积极意义；在实验范围内，分子质量较大的mPEG20000对 EILDVP 肽修饰效果较好。

参附汤抗大鼠心肌缺血作用与 apelin 表达的相关性研究

目的：探讨参附汤对异丙肾上腺素（ISO）所致心肌缺血损伤大鼠的作用及 apelin 蛋白表达的变化对心肌缺血的影响。方法采用皮下注射 ISO 方法建立心肌缺血动物模型。灌胃给予大鼠不同剂量的（3、6、12 g·kg －1）参附汤，模型组与空白组灌胃等体积蒸馏水，阳性组灌胃参附注射液6.67 g·kg －1，连续灌胃15 d；从 d 11开始，灌胃1 h 后，皮下多点注射 ISO，连续5 d 造模。造模后考察参附汤对心肌组织形态学、血清中心肌酶含量、心肌组织中 apelin mRNA 含量及血清中 apelin 蛋白含量的影响，并探讨心肌酶与 apelin表达变化的相关性。结果参附汤可以明显减轻心肌组织坏死程度；与模型组相比，参附汤中、高剂量组肌酸激酶（CK）值及各剂量组的乳酸脱氢酶（LDH）值均明显降低（P＜0.05或 P ＜0.01）；参附汤中、高剂量组大鼠血清 apelin 蛋白含量及心肌组织 mRNA 含量与模型组相比，均明显升高（P ＜0.05，P ＜0.01）；此外，血清 apelin 与心肌酶 CK、LDH的表达呈负相关。结论参附汤具有抗 ISO 所致大鼠心肌缺血作用，该作用机制与其促进 apelin mRNA 表达，使 apelin蛋白含量增多，从而抑制心肌酶生成，改善心肌缺血有关。

通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生 HIF-1／VEGF 通路及 miR-210表达的影响

目的：探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植治疗对糖尿病足大鼠血管新生 HIF-1／VEGF 通路及 miR-210表达的影响。方法将70只♂ Sprague-Dawley 大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型，成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型，以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组，造模大鼠随机分成6组：模型组、通心络组、西洛他唑组、干细胞组、通心络联合干细胞组、西洛他唑联合干细胞组，分别给予治疗干预28 d 后麻醉，腹主动脉取血，离心取上清，酶联免疫吸附测定 VEGF-A 和HIF-1α；大鼠缺血肢肌组织分别采用 Western blot 检测VEGF-A 和 VEGF-R2蛋白表达和 RT-PCR 检测 VEGF-A 基因表达。结果检测结果显示：与对照组比较，模型组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和 miR-210表达明显降低（P ＜0.01）。与模型组比较，各用药组 VEGF-A、VEGF-R2和 miR-210表达均明显升高（P ＜0.01），其中通心络联合干细胞组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和 miR-210表达高于通心络组、西洛他唑组及干细胞组（P ＜0.05，P ＜0.01）。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可能通过调节 HIF-1／VEGF通路及 miR-210表达，促进内皮细胞增殖、分化，促进新生血管形成。

栀子柏皮汤及含栀子配伍组对免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的：探讨栀子柏皮汤各及含栀子配伍组对刀豆蛋白（ConA）诱导免疫性损伤小鼠的保护作用及可能作用机制。方法观察栀子柏皮汤及各含栀子配伍组对尾静脉注射刀豆蛋白（ConA，20 mg·kg －1）诱发的免疫性肝损伤小鼠肝脏病理变化及血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性、肝匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的影响。酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血清中干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-6（IL-6）的水平。Western blot 法检测与免疫炎症相关的 NF-κB-p65的蛋白表达情况。结果栀子柏皮汤及各含栀子配伍组均能够降低血清 ALT、AST 及肝组织中 MDA 的含量；提高肝组织中 SOD 活性；降低 NF-κB-p65及 NF-κB-p-p65的表达，其中栀子柏皮汤全方组对免疫性肝损伤小鼠保护作用佳。结论栀子柏皮汤对 ConA 诱导的免疫性肝损伤小鼠具有保护作用，其作用机制可能与调控免疫反应的 NF-κB 通路有关。

越鞠丸石油醚部位潜在的快速抗抑郁作用与BDNF、TrkB 蛋白表达的上调相关

目的：研究越鞠丸石油醚部位是否具有快速抗抑郁潜力，并对其有效剂量及潜在的生物学机制进行了探讨。方法将44只昆明种♂小鼠随机分成空白组（生理盐水组）、越鞠丸石油醚部位（YJ-PE）高、中、低剂量组及氯胺酮组。单次给药后30 min 对昆明小鼠进行小鼠悬尾行为绝望测试。再将24只昆明种♂小鼠分成空白组、筛选出有效的越鞠丸石油醚部位低剂量组和氯胺酮组，单次给药24 h 后进行小鼠悬尾行为绝望测试。利用 Western blot 实验分别检测给药后30 min 及24 h 小鼠海马区 BDNF 和 TrkB 蛋白的表达变化。结果单次给药越鞠丸石油醚部位从30 min 到24 h 均能对其小鼠悬尾的行为绝望行为产生抗抑郁作用。给予越鞠丸石油醚部位30 min 后小鼠海马中的BDNF 及其受体TrkB 的表达明显上调，且这种抗抑郁的作用机制可持续到24 h。结论越鞠丸石油醚部位（低剂量）具有快速抗抑郁的药物潜力，且这种潜在的快速抗抑郁作用与BDNF 及其受体TrkB 的激活相关。