中国药理学通报杂志
Chinese Pharmacological Bulletin 중국약리학통보
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国药理学会
- 影响因子： 1.54
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-1978
- 国内刊号： 34-1086/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响
目的 观察葛根素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响.方法 分别采用CCK-8法、碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色测定葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、成骨分化、矿化作用的影响.流式细胞术检测葛根素对MC3T3-E1细胞周期及细胞内钙离子浓度的影响.RT-PCR检测葛根素对TRPM3基因mRNA表达的影响.结果 0.1、1、10 μmol·L-1葛根素能明显促进MC3T3-E1细胞增殖,使G1期细胞比例减少,G2+S期细胞比例增加,其中0.1 μmol·L-1浓度效果为明显;与正常对照组相比较,0.1 μmol·L-1葛根素组细胞的ALP活性和矿化结节面积均明显提高;0.1 μmol·L-1葛根素组细胞的TRPM3 mRNA表达水平和细胞内钙离子浓度明显降低.结论 葛根素可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化和矿化,可降低TRPM3 mRNA表达水平和细胞内钙离子浓度.
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miR-124抑制GluR2参与甲基苯丙胺PC12细胞成瘾
目的 探讨miR-124表达在甲基苯丙胺成瘾PC12细胞模型中的变化及其可能参与的调控机制.方法 培养PC12细胞,随机分为6组:① 正常对照组;② 甲基苯丙胺组;③ agomir Negative Control组;④ miR-124 agomir组;⑤ agomir Negative Control+甲基苯丙胺组;⑥ miR-124 agomir+甲基苯丙胺组.处理结束后,提取细胞总RNA和蛋白,Realtime PCR检测miR-124表达,Western blot检测谷氨酸受体2亚单位(ionotropic glutamate receptor AMPA alpha 2,GluR2)蛋白表达.结果 与正常对照组相比,甲基苯丙胺处理组PC12细胞中miR-124表达明显降低,GluR2蛋白表达明显升高;与agomir Negative Control+甲基苯丙胺组相比,miR-124 agomir+甲基苯丙胺组PC12细胞中miR-124表达明显升高,GluR2蛋白表达明显降低.结论 miR-124可能通过抑制GluR2参与了甲基苯丙胺诱导的PC12细胞成瘾.
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黑鱼鱼胆抗炎活性成分研究
目的 研究黑鱼鱼胆的抗炎成分活性.方法 采用萃取、硅胶柱层析等方法进行分离纯化,然后通过氢谱、碳谱对分离出的单体进行结构鉴定,利用小鼠脾淋巴细胞增殖实验和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7释放一氧化氮(nitrogen monoxide,NO)实验评价黑鱼鱼胆抗炎活性成分.结果 利用活性追踪的方法分离得到化合物牛黄胆酸钠(C1)和化合物牛黄鹅去氧胆酸钠(C2),且两个化合物对刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)诱导小鼠脾淋巴细胞增殖实验的细胞相对活力分别为65.9%±11.7%、60.5%±9.4%,与模型组相比差异均具有极显著性(P<0.01);对LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7释放NO的量分别为(16.4±1.9)、(15.5±1.7) μmol·L-1,与模型组相比差异均具有极显著性(P<0.01).结论 黑鱼鱼胆中牛黄胆酸钠和牛黄鹅去氧胆酸钠具有一定的抗炎活性且对正常脾淋巴细胞和巨噬细胞无毒性作用.
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胶原三螺旋重复蛋白-1参与疾病作用研究进展
胶原三螺旋重复蛋白-1(collagen triple helix repeat containing-1, CTHRC1)是一种具有血管损伤修复作用的分泌型蛋白,参与血管重构、成骨细胞形成以及创伤修复.CTHRC1通过促进细胞迁移、血管形成参与肿瘤病理进程,通过促进成纤维样滑膜细胞迁移和血管形成而参与类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)血管翳形成.CTHRC1主要通过Wnt信号通路发挥其作用.Wnt信号通路在RA滑膜细胞活化、骨吸收和关节破坏中起重要作用.该文就CTHRC1近年来研究进展进行综述.
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交叉对话信号的分子绝缘——对创新药物设计的思考
生物信号通路的交叉对话(cross-talk)是指众多信号通路共享同一关键组分,形成一种蝴蝶领结(bow-tie)样的网络拓扑结构.交叉对话对终末基因的调节表现出功能冗余、协同及拮抗,同时又要避免通路之间互相串扰带来的信号噪音或信号溢出,进化出一套维持细胞对不同外界应激产生特异性应答的绝缘(insulation)机制,对维持细胞内稳态有着非常重要的生物学意义.交叉对话及其分子绝缘机制提示:对话分子对细胞命运调控的两重性,要求实现靶向对治疗有利的对话分子而避开对治疗不利的对话分子;对话分子以大分子复合物为功能载体,在信号绝缘中对话分子互作界面构象的高度可塑性,设计开展药物结合与药理活性关联性研究.因此,以信号通路的交叉对话及其分子绝缘机制指导创新药物设计,对解决当前药物研发的瓶颈和临床困境具有重大的指导意义.
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淫羊藿苷对产前应激子代大鼠抗抑郁作用研究
目的 观察淫羊藿苷对产前应激子代抑郁样行为的干预作用,并探究其作用机制.方法 本文采用慢性束缚应激对孕后期母鼠建立抑郁模型,将♂ SD子代大鼠随机分为5组:空白对照组(CON)、产前应激组(PS)、生理盐水组(NS)、淫羊藿苷高剂量组(80 mg·kg-1)、淫羊藿苷低剂量组(40 mg·kg-1).采用强迫游泳实验和旷场实验对各组大鼠的抑郁样行为进行评价,并通过Western blot测定各组大鼠前额叶皮层区mGluR1、mGluR5、EAAT2蛋白的表达.结果 与CON组相比,PS组子代大鼠挣扎时间和穿越中央格次数减少(P<0.01,P<0.05),表现出明显的抑郁样行为.PS组较CON组前额叶皮层区mGluR1、mGluR5蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05),而EAAT2蛋白表达明显降低(P<0.05).与NS组相比,淫羊藿苷高、低剂量组均能明显增加子代大鼠的挣扎时间(P<0.05,P<0.01)和穿越中央格次数(P<0.05).淫羊藿苷干预后(80 、40 mg·kg-1)均能明显改善前额叶皮层区mGluR1、mGluR5及EAAT2蛋白的表达.结论 淫羊藿苷对产前应激子代大鼠具有明显的抗抑郁作用,其作用机制可能与脑内Ⅰ族mGluRs的调制作用相关.
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黄芪多糖对电离辐射骨髓间充质干细胞向神经分化潜能的影响
目的 研究黄芪多糖对X射线照射人骨髓间充质干细胞向神经分化的干预作用.方法 采用CCK-8 法筛选不同浓度的黄芪多糖作用于2GyX射线辐射人骨髓间充质干细胞的增殖能力;细胞形态计数X射线对骨髓间充质干细胞分化为神经细胞数量的影响;甲苯胺蓝染色检测X射线对骨髓间充质干细胞分化为神经细胞中尼氏体的表达量;Western blot检测神经巢蛋白(Nestin)及神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)表达变化.结果 与对照组相比,X射线照射后细胞增殖水平明显降低(P<0.05),与单纯照射组比较,加药照射组骨髓间充质干细胞增殖水平显著增加(P<0.05),其中黄芪多糖浓度为50 mg·L-1时促增殖作用强,设为佳药物浓度;单纯辐射后骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的数量明显降低(P<0.05),当给予黄芪多糖干预后分化为神经细胞的数量明显上升(P<0.05);辐射后骨髓间充质干细胞分化为神经细胞中尼氏体的表达量降低(P<0.05),当给予黄芪多糖干预后,尼氏体的表达量明显增多;单纯辐射后Nestin及NSE表达量降低(P<0.05),而当给予黄芪多糖干预后,Nestin和NSE表达量升高(P<0.05).结论 黄芪多糖对电离辐射人骨髓间充质干细胞向神经分化潜能的影响具有保护作用.
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基质金属蛋白酶-9表达下调在异丙酚麻醉诱发大鼠学习记忆障碍中的作用
目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达下调在异丙酚麻醉诱发大鼠学习记忆障碍中的作用.方法 7 d龄SD大鼠随机分为3组(n=18):对照组(NS组)和多次异丙酚麻醉组(RP组)连续7 d分别腹腔注射生理盐水和异丙酚,单次异丙酚麻醉组(SP组)前6天连续腹腔注射生理盐水,d 7注射异丙酚.各组随机选取6只大鼠进行动脉血气和血糖监测,剩余大鼠行Morris水迷宫测试其学习记忆能力,Western bolt法检测MMP-9、BDNF、caspase-3的表达;TUNEL染色法测定海马神经元的凋亡.结果 与NS组和SP组相比,RP组大鼠逃逸潜伏期明显延长,探索时间和穿越平台次数明显减少(P<0.05),海马MMP-9、mBDNF表达减弱,proBDNF表达、proBDNF/mBDNF比值增加(P<0.05),神经元凋亡细胞数量明显增多,pro-caspase-3表达减低,cleaved-caspase-3表达增高(P<0.05).而SP组与NS组相比,各结果差异均无显著性(P>0.05).结论 多次注射异丙酚导致新生大鼠远期学习记忆能力下降,可能与海马MMP-9表达下调,proBDNF、mBDNF成熟转换障碍以及海马神经元凋亡发生有关;而单次注射异丙酚对此影响不明显.
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针对HER-2的多肽疫苗CKL9与YL20的抗肿瘤活性研究
目的 研究能够诱导激活细胞免疫应答的多肽疫苗CKL9、YL20在细胞水平和整体动物水平的抗HER-2阳性肿瘤作用,为肿瘤新药开发提供依据. 方法 采用CCK-8法检测CKL9、YL20诱导小鼠淋巴细胞的增殖作用,采用LDH法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的活性,采用动物体内实验评价CKL9、YL20的抗肿瘤活性. 结果 CCK-8检测淋巴细胞增殖实验表明体外孵育多肽CKL9、YL20在一定程度上能够促进淋巴细胞增殖,在50 mg·L-1孵育浓度下,CKL9、YL20相对增殖率分别为11.1%、16.7%;LDH法检测细胞毒性实验表明经多肽疫苗CKL9、YL20诱导分化的T淋巴细胞对HER-2阳性的肿瘤细胞有杀伤作用,当效靶比为80 ∶1时,细胞毒性T淋巴细胞对肿瘤细胞抑制率分别可达89.8%和84.3%;动物体内实验表明预免疫多肽CKL9、YL20能对BALC/c小鼠N87移植瘤产生明显抑制作用. 结论 基于HER-2的多肽疫苗CKL9、YL20具有免疫原性,可诱导特异性CD4和CD8 T淋巴细胞免疫,以抑制HER-2阳性肿瘤细胞生长.
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山茱萸总萜的降糖作用途径研究
目的 从胰岛素依赖、α-葡萄糖苷酶抑制、胰岛素增敏3个方面考察山茱萸总萜(TCF)的降血糖作用途径.方法 尾静脉注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ,50 mg·kg-1)建立SD大鼠胰岛素缺乏糖尿病模型,分为正常组、模型组、二甲双胍组0.1 g·kg-1、参芪降糖颗粒组1.0 g·kg-1及TCF高、中、低3个剂量组(0.10、0.05、0.025 g·kg-1)灌胃(ig)给药4周.每周测其体重及血糖,4周后采血测糖化血红蛋白(HbA1c)、糖化血清蛋白(GSP);选择正常ICR小鼠,分为正常组、二甲双胍组0.2 g·kg-1、拜糖苹组0.1 g·kg-1、参芪降糖颗粒组1.5 g·kg-1、TCF高、中、低3个剂量组(0.20、0.10、0.05 g·kg-1).给药10 d后进行腹腔注射葡萄糖(2.5 g·kg-1)或灌胃淀粉(3.0 g·kg-1)小鼠糖耐量实验;选择正常SD大鼠,分为正常组、罗格列酮组0.02 g·kg-1、格列吡嗪组0.02 g·kg-1、TCF高、中、低3个剂量组(0.10、0.05、0.025g·kg-1),给药7 d后进行腹腔注射葡萄糖耐量实验(IPGTT),并测定各时间点胰岛素水平. 结果 (1)TCF高剂量组可明显降低STZ模型大鼠HbA1c(P<0.05)、GSP(P<0.05)水平;(2)TCF对ICR小鼠的葡萄糖耐量和淀粉糖耐量也有明显改善(P<0.05);(3)TCF高剂量组可明显降低1 h内血糖水平和血清胰岛素水平(P<0.05).结论 TCF在抑制葡萄糖体内吸收、促进葡萄糖利用等方面具有较明显的作用,可通过非胰岛素依赖途径发挥降糖作用,是否具有α-葡萄糖苷酶抑制、胰岛素增敏作用有待进一步验证.
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氧氟沙星-绕丹宁衍生物诱导人肝癌细胞凋亡作用
目的 研究氧氟沙星-绕丹宁衍生物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用.方法 用不同浓度的6-(3-苄基-4-氧代-2-硫代-噻唑烷-5-叉甲基)-9-氟-3-甲基-10-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,3-二氢-7-氧代-7-氢-吡啶并[1,2,3-de][1,4]苯并噁嗪(R3)与人肝癌SMMC-7721细胞、食管鳞癌EC-9706细胞、结肠癌CaCO-2细胞和L-02肝转化细胞体外培养.MTT法检测R3对各种细胞的增殖抑制作用;DAPI荧光染色法和TUNEL法检测细胞凋亡变化;PI染色流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot法测定p53和caspase-3蛋白表达量的变化.结果 R3在2~20 μmol·L-1的浓度范围内能明显抑制SMMC-7721细胞、EC-9706细胞和CaCO-2细胞的增殖,作用于细胞24 h 的IC50值分别为3.893、4.181和3.408 μmol·L-1;R3作用于L-02细胞24 h的IC50值为33.959 μmol·L-1;氧氟沙星盐酸盐作用于SMMC-7721细胞24 h的IC50值为240.137 μmol·L-1;舒尼替尼作用于SMMC-7721细胞24 h的IC50值为8.075 μmol·L-1;R3处理SMMC-7721细胞后,细胞周期被阻滞在G1-S期检测点,且细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05).R3明显增加SMMC-7721细胞p53和caspase-3蛋白表达量,其中caspase-3活性裂解片段增加明显.结论 氧氟沙星-绕丹宁衍生物对肿瘤细胞具有较好的选择性抑制作用,能够明显诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡.
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PI3K/Akt/FoxO3a/Bim信号通路介导硫化氢后处理对缺氧H9c2心肌细胞的保护作用
目的 探讨硫氢化钠(NaHS)后处理是否通过PI3K/Akt/FoxO3a/Bim信号通路调节细胞凋亡发挥减轻心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用.方法 H9c2大鼠心肌细胞缺氧3 h/复氧6 h,建立缺氧/复氧损伤模型.将细胞随机分为5组:空白组(Control组)、缺氧/复氧组(H/R组)、硫氢化钠后处理组(H/R+NaHS组)、抑制剂LY294002组(H/R+LY组)、硫氢化钠后处理+LY294002组(H/R+NaHS+LY组).分别在缺氧前、复氧末检测H9c2心肌细胞的存活率以及LDH释放;流式细胞术检测各组的细胞凋亡率;应用Western blot检测Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a、Bim蛋白的表达水平;免疫荧光检测FoxO3a的分布情况.结果 缺氧前各组心肌细胞存活率、LDH释放量差异无统计学意义(P>0.05).复氧末,NaHS组与H/R组相比,心肌细胞存活率明显提高(P<0.05),LDH释放量与细胞凋亡率明显降低(P<0.05);p-Akt、p-FoxO3a蛋白表达水平升高,Bim表达降低,同时FoxO3a在细胞质的表达升高.LY294002 逆转了NaHS后处理产生的心肌细胞保护作用,使得H/R+NaHS+LY组的心肌细胞存活率降低(P<0.05)、LDH释放和细胞凋亡率升高(P<0.05),p-Akt、p-FoxO3a蛋白表达降低(P<0.05),Bim表达升高(P<0.05),FoxO3a在细胞质的表达水平降低.结论 硫氢化钠(NaHS)后处理通过PI3K/Akt/FoxO3a/Bim信号通路调控细胞凋亡,减轻心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤.
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CpG-ODN对新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤的保护作用研究
目的 探讨Toll 样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9) 激动剂——含CpG 基序的寡核苷酸(CpG-ODN)对新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤的保护作用机制.方法 50只健康7日龄新生Wistar大鼠,♀♂不限,随机分为5组,假手术组、缺血/缺氧性脑损伤(HIBD)组、CpG-ODN低剂量组(0.35 mL·kg-1)、CpG-ODN中剂量组(1.40 mL·kg-1)、CpG-ODN高剂量组(5.60 mL·kg-1).术后48 h对大鼠神经功能进行评分,光学显微镜下观察脑组织病理学改变.免疫印迹法检测缺血/缺氧侧脑组织中磷酸化p38 MAPK、TLR9表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α的表达.结果 CpG-ODN低、中剂量组较模型组神经行为学评分降低,病理学损伤减轻,而高剂量组较模型组神经行为学评分升高(P<0.05),病理学损伤加重;Western blot 分析结果表明,缺血/缺氧侧脑组织中磷酸p38 MAPK、TLR9蛋白表达逐渐上调,TNF-α在脑组织中含量逐渐升高(P<0.05).结论 TLR9激动剂CpG-ODN低、中剂量可改善新生大鼠脑缺血/缺氧损伤神经行为学评分及神经系统功能,减轻新生大鼠缺血/缺氧性脑损伤,其机制可能是通过适度激活p38 MAPK信号通路,并分泌适量TNF-α 发挥作用.
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肉苁蓉多糖对D-半乳糖所致急性衰老模型保护作用研究
目的 通过体内及体外研究肉苁蓉多糖(CDPS)对D-半乳糖所致急性衰老模型的保护作用,并探讨其可能作用机制.方法 ① 采用D-半乳糖建立急性衰老小鼠模型,采用Morris 水迷宫实验,观察肉苁蓉多糖(25、50、100 mg·kg-1)对衰老所致小鼠学习记忆能力障碍的影响.② 建立了PC12细胞衰老体外模型,在给予肉苁蓉多糖(150、200 mg·L-1)后,采用Western blot检测核蛋白中p-CREB蛋白的表达水平变化.ELISA试剂盒检测环腺苷酸(cAMP)、cAMP依赖蛋白激酶(PKA)和脑源性神经营养因子(BDNF)的含量.此外,在PKA阻断剂H89存在的情况下,检测以上各项指标的变化.③ 建立基于UPLC/Q Exactive质谱检测神经递质谷氨酸、多巴胺和去甲肾上腺素的方法,检测肉苁蓉多糖对于PC12细胞以上神经递质分泌影响.结果 ① 体内实验Morris水迷宫实验中,肉苁蓉多糖明显改善D-半乳糖所致衰老模型小鼠学习记忆能力;② 体外实验中,CDPS给药组作用24h后,可以剂量依赖性地提高细胞核内p-CREB水平(P<0.05),增加PKA及cAMP活性,提高BDNF水平(P<0.05).阻断剂H-89干预0.5 h后,明显阻断肉苁蓉多糖的这种升高作用.③ 体外实验中,肉苁蓉多糖促进PC12细胞神经递质多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸分泌.结论 肉苁蓉多糖对衰老模型小鼠的学习记忆能力具有明显的改善作用,其机制可能与上调cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路,适度提高兴奋性神经递质有关.
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钠-钙交换体单克隆抗体NCX-3F10对大鼠心室肌主要离子电流的影响及对缺血/再灌注诱发心律失常的抑制作用
目的 观察NCX-3F10抗体对大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响及其对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion , I/R)诱发心律失常的作用.方法 ① 利用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流(INa/Ca)及其他主要离子电流;② 结扎左冠状动脉建立大鼠在体及离体心脏缺血/再灌注心律失常模型,观察抗体对心律失常的影响;③ 利用IonOptix离子影像分析系统观察抗体对单个心室肌细胞钙瞬变的影响.结果 ① 5~40 mg·L-1的NCX-3F10抗体对INa/Ca呈剂量依赖性抑制作用,其抑制外向和内向电流的IC50分别为11.15和11.69 mg·L-1,大抑制率分别达到61%、62%;该抗体对钙电流(ICa-L)也有一定的抑制作用,对内向整流钾电流(IK1)、瞬时外向钾电流(Ito)、钠电流(INa)均无影响;② 在离体大鼠心脏I/R组,100%大鼠发生室速,88.89%大鼠出现室颤;再灌注前5 min给予NCX-3F10抗体(10 mg·L-1)干预后,大鼠的室速发生率下降至44.43%,室速、室颤持续时间明显减少(P<0.05);③ 麻醉大鼠再灌注前5 min给予NCX-3F10抗体(50 μg·kg-1)预处理后,大鼠室早个数、室速发生率及持续时间、室颤的发生率及持续时间均明显降低(P<0.05);④ 5~40 mg·L-1的NCX-3F10抗体对心肌细胞钙瞬变幅度呈剂量依赖性抑制作用.结论 NCX-3F10抗体对大鼠离体和在体心脏缺血/再灌注诱发的心律失常有明显抑制作用,其抗心律失常效应与抑制钠-钙交换电流和L-型钙电流、减轻细胞内钙超载有关.
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雪胆素甲诱导非小细胞肺癌系NCI-H460和A549的凋亡效应及其作用机制初探
目的 雪胆素甲(CuⅡa)诱导肺癌NCI-H460和A549的凋亡效应及其作用机制初探.方法 利用CCK-8检测CuⅡa对肿瘤细胞抑制活性;流式细胞术检测CuⅡa对肿瘤细胞凋亡以及周期的影响;Western blot检测CuⅡa对Aurora A、STAT3以及Cofilin蛋白磷酸化的影响.结果 CuⅡa对肺癌细胞NCI-H460和A549具有明显抑制作用,其IC50分别为224.9和108.3 nmol·L-1;CuⅡa能诱导肿瘤细胞凋亡,并阻滞细胞周期于G2/M期;Western blot实验结果显示CuⅡa对STAT3和Cofilin的磷酸化具有抑制作用,且呈现剂量依赖性,CuⅡa能抑制Aurora A磷酸化,符合Aurora A激酶抑制剂抗肿瘤效应重要特征-阻滞细胞于G2/M期.结论 CuⅡa对非小细胞肺癌细胞系NCI-H460和A549具有明显的抑制作用,CuⅡa可作为抗非小细胞肺癌的先导化合物进行下一步研究.
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Cx43对脑胶质瘤C6细胞增殖的影响及机制
目的 将pCMV-Cx43cDNA重组质粒转染入大鼠脑胶质瘤C6细胞,上调C6细胞Cx43表达,进而探讨C6细胞Cx43过表达对其增殖能力的影响及机制.方法 通过脂质体将pCMV-Cx43cDNA重组质粒转入C6细胞,使C6细胞过表达Cx43,并用G418筛选出稳定过表达Cx43的C6细胞;测定细胞倍增时间和软琼脂集落形成实验,检测各组细胞的增殖程度;分别用ERK1/2特异性阻断剂PD98059(30 μmol·L-1)、p38MAPK特异性阻断剂SB20219(10 μmol·L-1)处理各组细胞,Western blot检测各组细胞Cx43、p-Cx43、p-ERK1/2和p-p38MAPK的表达;MTT比色法检测各组细胞活性.结果 成功将pCMV-Cx43cDNA重组质粒转入C6细胞,并筛选出稳定转染Cx43基因的C6细胞;测定细胞倍增时间和软琼脂集落形成实验表明C6-Cx43组比C6组、C6-pCMV组细胞增殖速度减慢,细胞集落数明显减少(P<0.01);ERK1/2、p38MAPK特异性阻断剂处理细胞后,Western blot检测发现C6-Cx43+PD98059组、C6-Cx43+SB202190组较C6-Cx43组Cx43表达升高(P<0.01)、p-Cx43(P<0.05)表达下调.结论 阻断ERK1/2、p38MAPK通路,导致Cx43 蛋白表达升高,从而抑制C6细胞的增殖.
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黄芪甲苷对甲基乙二醛诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用研究
目的 研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对甲基乙二醛(MGO)诱导的人视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用及分子机制.方法 利用MGO诱导ARPE-19细胞损伤,CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒测定细胞内活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)水平和脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量,JC-1染色法观察线粒体膜电位的变化,Western blot法检测Bcl-2、Bax和PARP蛋白的表达量,荧光酶标法检测caspase家族蛋白caspase-9和caspase-3的活化水平.结果 MGO能剂量依赖性地降低ARPE-19的细胞活力,AS-Ⅳ预处理能够明显逆转MGO引起的细胞活力下降(P<0.05),改善细胞核形态,减少细胞凋亡,减少ROS和MDA的产生(P<0.05),增加SOD活力(P<0.05),抑制线粒体膜电位的下降,提高Bcl-2/Bax蛋白表达率(P<0.05)和PARP的表达水平,降低caspase-9和caspase-3的活化水平(P<0.05).结论 AS-Ⅳ对MGO损伤的ARPE-19细胞有明显的保护作用,其作用机制是提高细胞抗氧化能力,调节线粒体通路蛋白的表达,从而抑制细胞凋亡.
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异相睡眠剥夺对大鼠学习记忆能力及海马基因表达谱的影响
目的 观察96 h异相睡眠剥夺(PSD)对大鼠学习记忆能力及海马基因表达谱的影响.方法 利用改良多平台水环境法制备PSD动物模型,六角迷宫行为学范式评价大鼠学习记忆能力;在此基础上利用基因芯片技术研究PSD对大鼠海马全集因表达谱的影响,对差异基因(上调或者下调倍数变化值≥2.0,且P值≤0.05)进行GO和KEGG富集分析;并对部分差异表达基因进行RT-PCR验证.结果 与大平台对照组(TC)比较,PSD大鼠认知率明显降低(P<0.05);两组大鼠海马差异表达基因共100个:其中25个基因上调,75个基因下调;GO分析结果表明,上调基因主要与细胞生长及分化的负性调节、学习记忆、炎症反应、氧化应激、突触传递等生物学过程有关;下调基因主要与免疫应答、神经系统发育、突触传递、代谢过程、信号转导、递质分泌、细胞凋亡、转录过程等过程有关;利用KEGG数据库对差异基因进行信号通路分析,发现差异基因主要参与cGMP-PKG、代谢、NF-κB、癌症等多条信号通路过程.结论 PSD可引起大鼠记忆能力的下降,并伴随海马多种基因表达异常;PSD 导致的学习记忆能力下降可能与多种基因表达及信号通路的变化有关.
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芒果苷对血管内皮细胞中组织因子的影响及其机制
目的 探讨芒果苷对组织因子(TF)的调节作用及机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs), 给予多种剂量的芒果苷和(或)氧化低密度脂蛋白(oxLDL)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抑制剂处理细胞,利用实时定量PCR、Western blot技术以及相关试剂盒检测TF表达及活性的变化.结果 oxLDL上调TF的表达水平并增强其促凝血活性,而这一作用被芒果苷所逆转.而且,芒果苷呈剂量依赖性抑制TF mRNA与蛋白的表达以及促凝活性.芒果苷可增强过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的转录活性,PPARγ抑制剂——GW9662则可阻断芒果苷对TF的抑制作用.结论 芒果苷通过激活PPARγ而抑制血管内皮细胞中TF的表达及活性.
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内质网应激信号通路在高脂诱导的心肌细胞损伤中的作用
目的 探讨内质网应激信号通路在高脂诱导的心肌细胞损伤中的作用.方法 棕榈酸(0.1~0.4 mmol·L-1)刺激心肌细胞(0~48 h),CCK-8法评估细胞生长状态,免疫印迹法评估细胞内内质网应激信号通路相关蛋白表达水平及细胞凋亡蛋白表达水平.结果 棕榈酸(0.1~0.4 mmol·L-1)刺激H9C2心肌细胞24 h, 0.2、0.4 mmol·L-1组细胞增殖率均出现明显下降.棕榈酸(0.2 mmol·L-1)刺激H9C2心肌细胞时,24、48 h 组细胞增殖率均出现明显下降.棕榈酸(0.2 mmol·L-1)刺激24 h,GRP78、 CHOP、PERKphos、IRE1phos、ATF6等内质网应激相关蛋白及Bax蛋白表达均明显增高(P<0.05),而Bcl-2表达出现明显降低(P<0.05).预处理内质网应激抑制剂普伐他汀(pravastatin,10 mol·L-1)的棕榈酸 (0.2 mmol·L-1) 组与不加pravastatin的棕榈酸 (0.2 mmol·L-1) 组相比,Bcl-2及Bax的表达均恢复至正常水平.结论 内质网应激信号通路对高脂引起的心肌损伤的发病及治疗均起到重要作用.
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丹酚酸B和丹参酮ⅡA对大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞增殖的影响
目的 探讨丹酚酸B(salvianolic acid B, SAB)和丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA, TA)单独用药、二者配伍对Sprague-Dawley (SD)大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞增殖的影响,以及在血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导下,SAB和TA有效成分配伍对大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞增殖的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)方法检测SAB和TA对大鼠胸主动脉成纤维细胞增殖的影响,流式细胞术检测SAB和TA有效成分配伍对细胞周期的影响.结果 MTT检测结果显示,SAB和TA单独用药均可不同程度抑制成纤维细胞增殖,通过一系列浓度筛选,分别获得3个有效浓度,将其两两组合后比较对细胞生长的抑制作用,结果显示TA(10-8 mol·L-1)和SAB(10-5 mol·L-1)组合显示明显的抑制作用(P<0.01).而且,TA(10-8 mol·L-1)和SAB(10-5 mol·L-1)配伍组合亦能对Ang Ⅱ诱导的细胞增殖产生明显的抑制作用,进一步采用流式细胞术观察SAB、TA及二者配伍对细胞周期的影响,结果显示,SAB和TA配伍明显地阻滞细胞在G0/G1期.对Ang Ⅱ预刺激的细胞,SAB和TA组合,也明显阻滞细胞在G0/G1期;而SAB和TA分别给药,细胞主要被阻滞在S期.结论 SAB和TA对成纤维细胞的增殖有明显的抑制作用,对Ang Ⅱ诱导的细胞增殖也有明显的抑制作用,并且这种抑制作用主要是通过将细胞阻滞在G0/G1期而发挥作用的.
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骨形态蛋白9诱导干细胞骨向分化与环氧酶-2及PI3K/Akt的关系研究
目的 研究骨形态蛋白9(BMP9)诱导干细胞成骨分化过程中对PI3K/Akt信号的激活与环氧酶-2(COX-2)的关系.方法 利用组织化学染色法、化学发光法或定量PCR检测碱性磷酸酶(ALP)的水平,Western blot检测骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)、COX-2、Akt1/2和磷酸化Akt1/2(p-Akt1/2)水平,RT-PCR检测COX-2的表达,用免疫组化或免疫荧光分别检测COX-2的表达水平以及Akt1/2的磷酸化水平,用茜素红染色检测钙盐沉积.结果 BMP9在C2C12细胞中明显增加ALP活性,促进OPN和OCN表达以及钙盐沉积;BMP9对Akt1/2总蛋白无明显影响,能明显增加Akt1/2磷酸化水平, PI3K抑制剂呈浓度依赖性减弱BMP9诱导ALP活性增加.BMP9在C2C12细胞中促进COX-2表达,抑制COX-2明显减弱BMP9在C2C12细胞中诱导ALP活性增加和钙盐沉积的作用.外源性过表达COX-2促进BMP9诱导p-Akt1/2水平增加,而抑制COX-2则明显减弱BMP9诱导Akt1/2磷酸化水平增加.结论 BMP9在诱导干细胞成骨化过程中对PI3K/Akt信号的激活可能与其促进COX-2表达有关.
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血小板在静脉血栓形成及诊断中的作用研究进展
静脉血栓是常见的血栓性疾病,容易发展为致死性肺栓塞,现有的治疗手段有限.尽管抗凝药物广泛应用,但是该病容易复发.近年来血小板在静脉血栓的形成及诊断方面已有诸多进展,抗血小板药物可能在静脉血栓的防治方面有一定的作用.这些新进展为我们以血小板为突破口找到更有效的治疗方法提供了新的思路.该文对近年来血小板在静脉血栓的形成和在诊断中的进展进行综述,探讨抗血小板策略在静脉血栓症方面的可能应用,为后续研究提供参考.
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咪唑立宾治疗药物监测在肾移植术后患者中的应用进展
咪唑立宾(mizoribine,MZR)作为口服免疫抑制剂,在临床上用于预防肾移植术后排斥反应的发生.MZR的生物利用度个体差异大,因此需要个体化给药.但相对其他免疫抑制剂,MZR的治疗药物监测(therapeutic drug monitoring,TDM)工作在我国开展相对滞后.目前国内外尚未见针对MZR的TDM的综述报道.该文首先分析MZR的药动学特征,然后针对MZR的检测方法、监测指标与治疗窗选择予以总结和建议,后评价目前的MZR基因多态性与群体药动学研究.该文可为后续在肾移植术后患者中开展MZR的TDM工作提供方案制定参考.
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肠道微生物与阿尔茨海默病的相关性研究进展
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种中枢神经退行性病变,其发病机制十分复杂.肠道菌群作为寄居在人消化道内的大量微生物,是人体健康和疾病转换过程中的重要环境因素.脑-肠轴是联系大脑和胃肠功能的双向信息调节系统,肠道微生物在生理和病理条件下均能参与脑-肠轴活动,影响大脑功能和某些关联行为.新研究显示,肠道微生物与AD关系密切,两者通过免疫、神经内分泌以及迷走神经途径相互作用、相互影响,形成复杂的关系网.许多文献报道,通过益生菌或中药能够调节肠道微生物的状态,改善AD症状.因此,深入研究肠道微生物、中药与AD的相互作用,开发以肠道菌群为靶点的个性化中药制剂,能够为AD的临床预防和治疗提供新的研究思路和方法.
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通心络对糖尿病足大鼠缺血下肢移植外周血间充质干细胞的微环境影响
研究发现[1],通心络联合外周血间充质干细胞移植可通过调节HIF-1/VEGF通路及miR-210表达来促进内皮细胞增殖?分化,进而促进新生血管形成?然而,局部恶劣的微环境,如缺血缺氧?炎症反应?氧化应激等,不利于心肌梗死区干细胞移植后的生存?分化,致使其疗效受限[2].
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化瘀消肿酒急性毒性、长期毒性、皮肤刺激性和过敏性研究
化瘀消肿酒(Huayu xiaozhong jiu,HYXZJ)起源于清朝道光年间“李氏传统中医正骨术”经验方,由桃仁?赤芍?当归尾等17种中药,在白酒中浸泡所得,现为重庆市涪陵李志沧骨科医院的医院制剂.
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金莲花提取物保护H1N1病毒感染模型小鼠肺脏的实验研究
本课题组前期实验发现流感病毒A/FM/1/47 (H1N1)引起小鼠死亡或体重百分数降低,此次实验采用金莲花粗提物灌胃的方法,确定金莲花粗提物的抗病毒作用对小鼠的肺脏的保护作用.
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荞麦花叶发酵提取物对2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的影响
目的 探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的保护作用及其可能的机制.方法 9周龄♂ db/db小鼠随机分为EFBFL高(EFBFL-H, 0.1 g·kg-1)、低(EFBFL-L, 0.05 g·kg-1)剂量组,二甲双胍对照组,模型对照组,每组10只.同时以10只db/m小鼠为正常对照组.各组均每天灌胃给药 1次,连续8周.于给药前及给药后第2、4、6、8周末检测小鼠随机血糖(RBG),8周后处死取血清检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和糖基化终末代谢产物(AGEs)含量;HE染色光镜下观察心肌组织形态学改变,电镜下观察心肌超微结构;免疫组化法和Western blot法检测心肌组织葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达.结果 EFBFL能有效抑制db/db小鼠心肌细胞损伤及心肌纤维化的病理进程,降低小鼠血糖及血清中CK、CK-MB、 AGEs的含量,增加小鼠心肌组织Glut4 蛋白表达水平.结论 EFBFL对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤具有抑制作用,其机制可能与降低小鼠血糖、抑制 AGEs的产生及促进心肌细胞Glut4蛋白的表达有关.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 04 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
