中国药理学通报杂志
Chinese Pharmacological Bulletin 중국약리학통보
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国药理学会
- 影响因子： 1.54
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-1978
- 国内刊号： 34-1086/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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Neu-P11通过抑制氧化应激降低急性高眼压大鼠眼内压
目的 褪黑素(melatonin,Mel)是由松果体分泌的一类吲哚类神经内分泌激素,具有调节昼夜节律和抗氧化等广泛的生物学作用.新型褪黑素非选择性受体激动剂Neu-P11与褪黑素作用相似.该文旨在研究Neu-P11对急性高眼压大鼠眼内压的影响及其相关机制.方法 采用Trendelenburg卧位(头低脚高80°位置)法将30只健康8周龄SD大鼠建立急性高眼压模型,即动物被置于Trendelenburg卧位,用Tonopen XL接触眼压计每5 min测量1次眼内压,取20 min大值.建模后将大鼠随机分为5组:正常眼压+生理盐水组、高眼压+生理盐水组、高眼压+10 mg·kg-1 Mel组、高眼压+20 mg·kg-1 Neu-P11组、高眼压+50 mg·kg-1 Neu-P11组,每组6只.给药后平位休息2 h,再次置于Trendelenburg卧位45 min后,连续监测6 h眼内压(每小时1次).连续给药1周后,注射过量戊巴比妥钠处死SD大鼠,心脏取血,检测急性高眼压大鼠血清中MDA、SOD和GSH-Px的活性;留取各组大鼠眼球进行常规组织学切片,观察SD大鼠视网膜形态学变化.结果 Trendelenburg卧位诱导模型组大鼠眼内压值比正常组升高了约202.9％(P<0.01),且视网膜增厚,层次不清,机体氧化应激水平明显升高.而经Neu-P11和褪黑素治疗后,明显改善了机体氧化应激水平和视网膜水肿,降低大鼠眼内压.结论 Neu-P11可能通过抑制机体氧化应激水平,降低急性高眼压大鼠眼内压.
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胡黄连苷Ⅱ通过抑制cyto C/caspase-9/caspase-3通路发挥神经保护作用
目的 研究胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血/再灌注过程中cyto C/caspase-9/caspase-3信号通路的影响及其神经保护作用机制.方法 环孢素(CsA)和苍术苷(Atr)分别作为cyto C阳性对照和阴性对照,改良Longa法制备缺血2 h再灌注24 h大鼠脑缺血/再灌注(I/R)模型.再灌注24 h后,TTC染色观察脑梗死体积;免疫组织化学和Western blot检测cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平.结果 模型组大鼠脑缺血/再灌注后TTC显示染色脑梗死体积明显增加;免疫组织化学和Western blot显示cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平较假手术组明显增多(P<0.05).治疗组大鼠TTC显示脑梗死体积缩小;免疫组化和Western blot显示cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平与模型组相比明显降低(P<0.05).与Atr组相比,Atr+胡黄连苷Ⅱ组大鼠脑梗死体积缩小,免疫组化和Western blot显示cyto C、caspase-9、caspase-3表达水平减弱(P<0.05).结论 胡黄连苷II抑制缺血/再灌注损伤大脑神经凋亡的机制可能与下调cyto C/caspase-9/caspase-3信号通路蛋白有关.
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丹红注射液7种药效物质基础的人血浆蛋白结合率
目的 建立同时测定丹红注射液中7种主要药效物质基础丹参素、原儿茶醛等体外人血浆蛋白结合率的方法,并将结果与同等浓度条件下每个单体化合物的人血浆蛋白结合率进行比较,以考察两者是否存在显著性差异,由此推测多组分之间是否存在血浆蛋白竞争性结合.为丹红注射液主要药效物质基础的体内药动学,及其在临床联合用药时的体内药动学相互作用研究提供参考依据.方法 采用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,HPLC测定丹红注射液中7种成分,及每种成分单独透析平衡时的血药浓度及游离药物浓度.结果 在3种浓度的丹红注射液中,丹参素、原儿茶醛、p-香豆酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率分别为(11.88±0.58)％、(78.35±1.72)％、(63.48±2.17)％、(87.72±0.78)％、(82.77±2.83)％、(71.59 ± 0.81)％和(70.55±1.34)％;而同等浓度条件下,这7种单体化合物的人血浆蛋白结合率分别为(23.34±1.06)％、(79.32±1.41)％、(78.97±0.08)％、(92.37±0.66)％、(84.95±0.38)％、(79.15±5.47)％和(75.49±0.75)％.与单体化合物的血浆蛋白结合率相比,丹参素、p-香豆酸和紫草酸在丹红注射液样品中的人血浆蛋白结合率差异有显著性;在本实验的药物浓度范围内,只有紫草酸的人血浆蛋白结合率与浓度呈线性;原儿茶醛、丹酚酸D、迷迭香酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率差异没有显著性.结论 该测定方法简便易行,准确度、稳定性均较好.实验条件下,原儿茶醛、p-香豆酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率均>60％,且在样品体系中这7种成分的血浆蛋白结合率均比单独给药的血浆蛋白结合率低,组分之间可能存在竞争性结合,但竞争影响可能较弱.考察血浆蛋白竞争性结合对该药的药物相互作用影响时,其组分间的相互竞争影响较小.
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非T细胞结合肽(FNS007)对小鼠胶原性关节炎的抑制作用及其机制
目的 研究非T细胞结合肽(FNS007,又称NTAP)对小鼠Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的关节炎(CIA)的抑制作用及其机制.方法 牛CⅡ加弗氏佐剂诱导小鼠胶原性关节炎动物模型.发病小鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药(阿巴西普)组、FNS007 低剂量(1.2 mg·kg-1)、中剂量(2.4 mg·kg-1)和高剂量(4.8 mg·kg-1)治疗组,发病入组当天尾静脉注射给药,以后隔天1次,直至治疗结束.给药后d 28处死小鼠.给药期间测量小鼠爪厚度和踝关节宽度;关节评分法检测关节炎发生情况;实验结束后,酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和抗CⅡ抗体水平;X线分析FNS007对CIA小鼠4爪骨损伤的作用;对小鼠踝关节进行组织病理学检查.结果 与模型组比较,FNS007给药后能明显抑制CIA小鼠的爪厚度和踝关节宽度,明显降低小鼠的关节炎症评分,明显降低血清IFN-γ、IL-6及抗CⅡ抗体水平,小鼠X线评分降低,踝关节的病理损伤明显减轻.结论 FNS007对CⅡ诱导的小鼠胶原性关节炎有明显抑制作用,其机制为竞争抑制T细胞活化,抑制CIA小鼠体内致炎性细胞因子的分泌,抑制抗CⅡ抗体的产生,减轻组织损伤和骨破坏,从而对小鼠CIA发挥治疗作用.
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白杨素对高糖损伤血管内皮的影响
目的 探讨急性高糖条件下,白杨素(chrysin,Ch)对血管内皮舒张功能的影响.方法 ① 采用离体血管环实验,设立正常对照组(control)、白杨素处理组(Ch),观察正常糖浓度时,白杨素对大鼠离体主动脉的舒张作用;设立正常糖浓度组(NG,11 mmol·L-1 Glu)、高糖实验组(HG,44 mmol·L-1 Glu)、甘露醇对照组(M,11 mmol·L-1 Glu+33 mmol·L-1 Man)和白杨素急性给药组(HG+Ch,44 mmol·L-1 Glu+chrysin 1.0 μmol·L-1),观察急性高糖孵育后,白杨素对大鼠离体主动脉舒张功能的影响.② 采用HUVEC细胞系,设立正常糖浓度组(NG,5.5 mmol·L-1 Glu)、高糖实验组(HG,33.3 mmol·L-1 Glu)、甘露醇对照组(M,5.5 mmol·L-1 Glu+27.8 mmol·L-1 Man)以及不同浓度白杨素处理组(Ch 25、50 μmol·L-1),观察白杨素对高糖孵育HUVEC细胞存活率的影响,并检测各组NO释放量.结果 ① 正常糖浓度时,白杨素能浓度依赖性地舒张大鼠主动脉环,其Emax和EC50为(58.94±9.61)％、51.9 μmol·L-1(P<0.01);高糖浓度时,HG组ACh诱导的血管舒张反应性明显降低,其Emax与EC50值分别下降至(32.12±3.92)％、78.0 μmol·L-1(P<0.01),但硝普钠(SNP)诱导的血管舒张无变化;白杨素急性干预后,可以明显改善高糖对ACh诱导的血管内皮依赖性舒张功能的损伤,其Emax与EC50值分别为(70.7±3.87)％和0.852 μmol·L-1(P<0.01).② HUVEC高糖处理后,细胞存活率降低至(82.56±3.97)％,白杨素(25、50 μmol·L-1)干预后能浓度依赖地增强HUVEC的细胞存活率,其细胞存活率可分别增至(103.4±4.78)％、(107.6±11.58)％;并且能提高高糖处理后细胞培养液NO的释放量.结论 白杨素可以保护急性高糖损伤的血管内皮舒张功能,并增加内皮NO释放.
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LC-MS/MS法测定人血浆中吡非尼酮及其代谢产物的浓度
目的 建立LC-MS/MS法测定人血浆中吡非尼酮(pirfenidone,BT)及其主要代谢产物5-羧基吡非尼酮(5-carboxy-pirfenidone,SBT)的含量.方法 血浆样品加入氘代同位素内标吡非尼酮-d5(dBT)和5-羧基吡非尼酮-d5(dSBT),经甲醇沉淀蛋白后进样.液相分离采用Agilent ZORBAX SB C18(3.0 mm×100 mm,3.5 μm)色谱柱,流动相为水(含0.5％甲酸)/乙腈(50/50).质谱检测采用ESI离子源,正离子多反应检测模式检测.BT、SBT、dBT和dSBT的检测目标离子对分别为m/z 185.958/77.1、215.944/77.0、190.965/81.1和220.948/99.1.结果 空白溶剂、空白血浆无干扰,分析物及内标间无相互干扰.血浆中BT和SBT分别在0.020 59～25.14 mg·L-1和0.016 73～20.42 mg·L-1范围内线性关系良好.批内、批间精密度和准确度均在可接受范围内.分析物及内标储备液于4 ℃冰箱中放置156 d,血浆样本于室温放置4 h、-70 ℃冰箱中保存并反复冻融3次、-70 ℃冰箱保存10、29、52 d及样品处理后自动进样器(8 ℃)中放置24 h的情况下均稳定.BT和SBT的平均提取回收率和归一化基质因子均在可接受范围内.结论 本研究所建立的测定BT和SBT血浆药物浓度的LC-MS/MS分析方法具有良好的特异性、准确度、精密度、灵敏度、稳定性和耐用性,适用于人血浆中吡非尼酮及其代谢物的浓度测定及其药动学研究.
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多巴胺对大鼠胰岛素分泌的影响及机制研究
目的 研究多巴胺(dopamine,DA)对大鼠胰岛素分泌的影响及可能机制.方法 ♂ SD大鼠的胰腺经过胶原酶P消化、Histopaque 1077梯度离心后得到纯化的胰岛,Dispase Ⅱ将胰岛消化为单个细胞.应用胰岛素分泌实验来验证DA对胰岛素分泌的作用,通过膜片钳技术和钙成像技术记录β细胞内向性钙电流、动作电位时程和细胞内Ca2+浓度,研究DA对大鼠胰岛素分泌的作用机制.结果 在2.8 mmol·L-1的葡萄糖中,DA对胰岛素的分泌没有产生明显的影响;在16.7 mmol·L-1的葡萄糖中,DA呈浓度依赖性抑制胰岛素的分泌.DA干预后,抑制了胰岛β细胞上内向性钙电流,缩短动作电位时程,减少了细胞内Ca2+浓度.结论 DA通过抑制β细胞上内向性钙电流,进而缩短了动作电位的时程,降低细胞内Ca2+浓度,终抑制胰岛素的分泌.
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5-羟色胺转运体基因多态性与慢性阻塞性肺疾病相关性研究
目的 探讨5-羟色胺转运体(SERT)基因多态性与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的相关性.方法 按入选、排除标准,选择COPD患者51例,对照组为同期健康体检者49例.用PCR方法检测SERT基因多态性;用Real-time RT-PCR方法检测SERT基因mRNA表达.对COPD组患者进行肺功能检查,记录第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)和FEV1/FVC％.结果 无论COPD组还是健康对照组,均发现3种SERT基因型L/L(528/528)、L/S(528/484)和S/S(484/484),其中SS基因型为主要基因型;COPD组SERT基因表达明显高于对照组;COPD组伴有肺动脉高压(PAH)患者的L等位基因频率明显高于对照组;COPD组LS基因型患者COPD发病年龄小于SS基因型患者.结论 SERT基因多态性与COPD的遗传易感性相关,对促进COPD形成及诱发PAH有一定作用.
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芍药苷对AGEs刺激下RAW264.7巨噬细胞TLR2/4通路的影响
目的 探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)刺激下RAW264.7巨噬细胞TLR2/4通路的影响.方法 AGEs在不同时间点刺激RAW264.7巨噬细胞,使用不同浓度的PF预先孵育细胞干预刺激,以优化实验条件;后将巨噬细胞随机分为对照组(DMEM培养基)、牛血清白蛋白(BSA)组(200 mg·L-1 BSA)、AGEs组(200 mg·L-1 AGEs)、PF组(200 mg·L-1 AGEs+10-5 mol·L-1 PF)及TLR2/4抑制剂组(200 mg·L-1 AGEs+30 mg·L-1人氧化磷脂).Western blot检测各组TLR2、TLR4、髓样分化因子(MyD88)、p-IRAK1、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、干扰素调节因子3(IRF3)、p-IRF3、NF-κB p-p65、NF-κB p65、iNOS、TNF-α、IL-1β和MCP-1蛋白表达,RT-PCR检测各组TLR2和TLR4 mRNA表达,ELISA法测定各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β及MCP-1水平.结果 与对照组相比,AGEs能明显上调TLR2、TLR4、MyD88、p-IRAK1、TRIF、IRF3、p-IRF3、NF-κB p-p65、NF-κB p65、iNOS、TNF-α、IL-1β、MCP-1蛋白表达(P<0.01)及TLR2、TLR4 mRNA表达(P<0.01),增加细胞上清液中TNF-α、IL-1β、MCP-1水平(P<0.01);PF和TLR2/4抑制剂能明显下调AGEs诱导产生的效应(P<0.01).结论 PF可通过抑制巨噬细胞TLR2/4信号通路而发挥抗炎作用,这可能为糖尿病肾病的治疗提供新的理论基础.
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心肌IK1激动剂zacopride抗左甲状腺素致大鼠心室重构作用的研究
目的 探讨心肌内向整流钾通道(IK1)激动剂zacopride对左甲状腺素致大鼠心室重构的抑制作用及可能的机制.方法 SD大鼠,随机分为对照组,左甲状腺素模型组,zacopride 5、15、50 μg·kg-1干预组,zacopride(15 μg·kg-1)+ 氯喹(7.5 μg·kg-1)组和卡托普利阳性对照组.连续给药10 d.超声测量大鼠左室舒张期内径(LVIDd)、左室收缩期内径(LVIDs)、室间隔厚度(IVS)、左室射血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS);测心肌肥厚指数;Langendorff急性分离成年大鼠单个心室肌细胞,全细胞膜片钳技术测量各组IK1电流、L-型钙通道(ICa-L)电流的变化;Fluo-4 激光共聚焦显微镜观察细胞形态,测胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i).结果 与对照组比,左甲状腺素模型组全心和左心肥厚指数明显增加,LVIDd、LVIDs增大,IVS增厚,EF和FS明显降低(P<0.01);IK1电流减小,ICa-L增加(P<0.01);心室肌细胞增宽、肥大,[Ca2+]i增高(P<0.01).Zacopride干预后,各指标均明显改善,15 μg·kg-1为适效应剂量.氯喹7.5 μg·kg-1作为IK1通道相对特异性阻断剂,可阻断zacopride对IK1通道的激动效应,明显逆转zacopride的减轻钙超载和抗心室重构作用.结论 Zacopride可能通过选择性激动心肌IK1,减轻细胞内钙超载而逆转左甲状腺素诱发的心室重构.
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MicroRNA-155在肝细胞癌对索拉非尼抗药中的作用研究
目的 探讨微小RNA155(microRNA-155,miR-155)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)对索拉非尼(sorafenib)抗药中的作用.方法 将miR-155抑制慢病毒(miR-155 inhibitor)转染miR-155表达相对较高的SMMC-7721细胞,而miR-155过表达慢病毒(miR-155)转染miR-155表达相对较低的HepG2细胞;用荧光定量PCR(qPCR)检测经慢病毒转染的SMMC-7721细胞及HepG2细胞miR-155表达量,以验证慢病毒转染效果;通过CCK-8法及流式细胞术检测各组细胞经索拉非尼作用后的存活率及凋亡情况;用Western blot检测凋亡相关蛋白活性caspase-3表达量,从而进一步探究各组细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,转染miR-155抑制慢病毒的SMMC-7721细胞表达miR-155明显下调(P<0.01),经索拉非尼处理后其存活率明显降低(P<0.05),而索拉非尼诱导其凋亡明显增加(P<0.01),其活性caspase-3表达量明显上调(P<0.01);miR-155过表达慢病毒转染HepG2细胞后,则相反.结论 miR-155 参与肝细胞癌对索拉非尼的抗药,有希望成为一个肝癌治疗的新靶标.
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前扣带回皮层中趋化因子CX3CL1对于大鼠慢性病理性疼痛的影响
目的 观察大鼠在慢性疼痛时,前扣带回皮层(anterior cingulate cortex,ACC)中趋化因子CX3CL1的表达对于胶质细胞活化的影响.方法 本实验采用大鼠左侧眶下神经结扎模型(unilateral infraorbital nerve,CCI-ION).80只♂SD大鼠随机分为4组(n=20),分别为假手术组、疼痛组、PBS治疗对照组、CX3CL1中和抗体治疗组.假手术组仅暴露大鼠左侧眶下神经,不予结扎;疼痛组暴露大鼠左侧眶下神经并结扎.这2组分别于1、3、5、7、14 d早晨9:00进行行为学测试,并且于行为学测试完成之后处死大鼠,取其前扣带回皮层,分别比较趋化因子CX3CL1和CD11b(小胶质细胞标记物)的表达水平.PBS治疗对照组是在眶下神经结扎术后CX3CL1表达水平高的当天10:00进行大鼠前扣带回皮层给药,给予PBS溶液.CX3CL1中和抗体治疗组与PBS治疗对照组同一天、同时间于大鼠前扣带回皮层给予CX3CL1中和抗体.两组于给药后6 h进行行为学测试,并于行为学测试完毕后处死大鼠,取前扣带回皮层组织,Western blot分别检测其中CD11b、CX3CL1、白细胞介素1β(IL-1β)的蛋白表达水平.结果 各组大鼠术前行为学测试差异无统计学意义(P>0.05);假手术组、疼痛组术后两组相同时间行为学测试发现,疼痛组大鼠左侧V2区痛阈明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);两组给药组给药后行为学测试发现给予CX3CL1中和抗体后,大鼠痛阈有明显提高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 前扣带回皮层可能通过胶质细胞和趋化因子参与对慢性神经痛的调节.
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SM-1对人肝微粒体细胞色素P450亚型酶的抑制作用
目的 观察SM-1对人肝细胞色素P450酶系统中7种亚型酶活性的影响.方法 在体外将一定浓度的底物或SM-1与人肝微粒体孵育30 min,分为对照组(底物)和实验组(底物和SM-1),以非那西丁、安非他酮、紫杉醇、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、右美沙芬、睾酮为CYP探针底物,应用HPLC法检测各探针底物代谢量,计算抑制率,评价SM-1对人肝微粒体CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、3A4 酶的抑制活性.结果 SM-1对CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、3A4的抑制率分别是0.05％、3.37％、0.08％、2.07％、4.20％、-0.15％和10.84％.结论 SM-1对CYP3A4可能有抑制作用,临床用药时应注意因CYP酶抑制引起的药物相互作用.
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孕期LPS刺激对子代6周龄大鼠血管结构的影响
目的 研究孕期炎症刺激剂脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激对子代大鼠6周龄时血管结构的影响.方法 12只Sprague dawley(SD)孕鼠随机分为3组:对照组(control,Con)、LPS刺激组、LPS刺激加二硫代氨基四氢呋喃(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)干预组(L+P),分别在孕8～14 d腹腔注射生理盐水、LPS(0.79 mg·kg-1)或LPS加PDTC(100 mg·kg-1),LPS于孕d 8、10、12给药;生理盐水及PDTC于d 8～14每天给药.子代出生6周测体质量;透射电镜观察血管超微结构;实时荧光定量PCR检测仔鼠胸主动脉连接蛋白(connexin,Cx)Cx37、Cx40、Cx43、Cx45的mRNA表达水平;Western blot和免疫荧光检测仔鼠胸主动脉Cx37、Cx40、Cx43、Cx45的蛋白表达水平.结果 与Con组相比,LPS组子代大鼠在6周时♂♀体质量均明显增加(P<0.01);L+P组♂鼠明显低于LPS组(P<0.05),而♀鼠差异无显著性.LPS组内皮受损,内皮细胞间可见明显缝隙连接(gap junction,GJ),相对于Con组较长且多见;L+P组内皮损伤程度较LPS组稍有改善.LPS组Cx43 mRNA及蛋白表达均明显低于Con组(P<0.05),L+P组则明显高于LPS组(P<0.05);Cx37、Cx40和Cx45各组间mRNA及蛋白表达差异无统计学意义.LPS组Cx43荧光强度及荧光点数明显比Con组降低,而L+P组明显比LPS组高,各组间Cx37、Cx40和Cx45荧光强度和荧光点数并无明显差异.结论 孕期LPS刺激可致子代大鼠在6周龄时出现血管结构损伤,这种损伤可能持续于新生儿期,并与其成年发生高血压密切相关.
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丙泊酚对新生大鼠脑皮层星形胶质细胞凋亡的影响
目的 研究丙泊酚对新生大鼠脑皮层星形胶质细胞凋亡的影响及其机制.方法 原代分离和培养AST细胞,用GFAP免疫细胞化学鉴定.不同浓度丙泊酚(0、10、30、90 μmol·L-1)作用AST细胞8 h.MMT法检测细胞生存率;Annexin V/PI 双染检测细胞凋亡;Western blot 法测定线粒体cyt-C漏出;分光光度计法检测caspase-3和caspase-9活性.结果 分离培养出原代AST,不同浓度丙泊酚(0、10、30、90 μmol·L-1)浓度依赖性地降低AST细胞生存率,诱导细胞线粒体cyt-C漏出,上调促凋亡蛋白 caspase-3 和caspase-9,诱发AST凋亡.结论 丙泊酚在体外能诱发新生大鼠脑皮层星形胶质细胞凋亡,其机制可能与丙泊酚诱导线粒体cyt-C释放,激活线粒体凋亡通路有关.
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雷公藤内酯醇减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞活化与抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路相关
目的 通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性.方法 以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模型.MFBs活化状态通过检测小鼠成纤维细胞中α-SMA(RT-PCR、Western blot方法)和Col Ⅰ(RT-PCR、ELISA方法)的表达,通路活性采用Western blot法检测p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平.ERK siRNA及Smad3 siRNA观察ERK、Smad3在MFBs活化中的地位.结果 TGF-β1激活p-ERK/p-Smad3(Ser208)及p-Smad3(Ser423),诱导成纤维细胞表达α-SMA,活化为MFBs,合成Col I明显增多;使用ERK siRNA及Smad3 siRNA确定了ERK及Smad3均参与α-SMA、Col Ⅰ的表达,其中ERK可能通过磷酸化Smad3连接区(Ser208)起相关作用.小鼠胸部照射可致肺组织中p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平上调,α-SMA表达增加,显示多量MFBs活化.TPL对体内和体外实验中ERK、Smad3(Ser208)、Smad3(Ser423)的磷酸化活化均有明显抑制作用,可明显下调α-SMA表达及Col Ⅰ合成,减少MFBs的活化.结论 TPL可通过抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路,减少肺部照射后MFBs活化,从而抑制放射性肺纤维化进展.
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miR-122a对大鼠脊髓缺血/再灌注损伤后血-脊髓屏障的影响
目的 探讨miR-122a对脊髓缺血/再灌注损伤后血-脊髓屏障的影响.方法 SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(S组)、对照组(C组)、miR-122a反义寡核苷酸(miR-122a antagomir)组(M组).S组开胸游离主动脉弓,但不阻断;C组和M组开胸阻断主动脉弓14 min造成脊髓缺血/再灌注损伤.M组和C组脊髓缺血/再灌注损伤后,鞘内注射miR-122a antagomir或空白对照,每日1次,共3次.Real-time PCR测定损伤节段脊髓组织的miR-122a表达,Western blot测定脊髓组织中紧密连接蛋白occludin表达,伊文思蓝测定血-脊髓屏障通透性,Basso Beattie Bresnahan评分法评价神经运动功能.结果 与S组比较,C组miR-122a表达增加,occludin表达减少,血-脊髓屏障通透性增加,神经运动功能评分降低(P<0.05).与C组比较,M组miR-122a表达降低,occludin表达增加,血-脊髓屏障通透性降低,神经运动功能评分增加(P<0.05).结论 miR-122a参与调控脊髓缺血/再灌注损伤后occludin表达,影响血-脊髓屏障通透性.
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DPF2基因RNA干扰对人胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡和细胞周期的作用研究
目的 已知DPF2参与白血病以及肿瘤的发生,但是DPF2是否参与胰腺癌发生和进展还不清楚,因此观察了DPF2基因RNA干扰对胰腺癌细胞系PANC-1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响.方法 采用慢病毒介导的DPF2基因RNA干扰敲低PANC-1细胞的DPF2表达,通过克隆形成实验和MTT实验检测DPF2基因RNA干扰对PANC-1细胞增殖的作用,通过流式细胞术检测DPF2 基因RNA干扰对PANC-1细胞凋亡和细胞周期的作用.结果 慢病毒介导的DPF2基因RNA干扰中剂量和高剂量(2 μL和4 μL)使PANC-1细胞的DPF2表达明显降低.与阴性对照组比较,DPF2基因RNA干扰明显抑制PANC-1细胞活力和克隆形成,还促进PANC-1的凋亡.此外,DPF2基因RNA干扰引起细胞周期的S期阻滞,明显减少G2/M周期的细胞数量.结论 DPF2可能参与胰腺癌细胞PANC-1的增殖、凋亡过程和细胞周期的调控,通过慢病毒介导的DPF2基因RNA干扰敲低DPF2蛋白表达,可能为寻找潜在的抗胰腺癌的新方法提供实验依据.
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VEGF融合蛋白疫苗联合环磷酰胺抗小鼠H22肝癌实验研究
目的 探讨分子佐剂修饰的VEGF融合蛋白疫苗与低剂量环磷酰胺(CTX)能否产生协同抗肝癌作用.方法 建立小鼠H22肝癌模型,将BALB/c小鼠随机分为4组:生理盐水对照组、CTX单药组、VEGF蛋白疫苗单药组(V2组)、V2与CTX联合治疗组(V2+CTX).分别在H22肝癌皮下移植瘤及皮内肿瘤模型中评价联合治疗方案抗肿瘤生长及抗血管生成的能力,并通过Western blot及ELISA方法检测抗-VEGF抗体水平.结果 皮下移植瘤模型结果显示V2+CTX联合治疗组的肿瘤体积、平均瘤重低于各单药治疗组(P<0.05 vs V2,P<0.01 vs CTX);在皮内肿瘤血管模型中,联合治疗对肿瘤新生血管的抑制作用为明显,与单独的V2及CTX组相比,差异均有统计学意义(P<0.05 vs V2,P<0.01 vs CTX);Western blot及ELISA的结果显示,V2+CTX联合治疗诱导小鼠产生了高水平的特异性抗-VEGF抗体.结论 低剂量CTX与重组VEGF融合蛋白疫苗联合治疗有协同抗肝癌作用.
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杜鹃花总黄酮对缺血/再灌注损伤模型大鼠脑基底动脉TRPV4的作用研究
目的 探讨杜鹃花总黄酮(TFR)对缺血/再灌注损伤模型大鼠脑基底动脉(CBA)瞬时感受器电位通道香草酸受体亚型Ⅳ(TRPV4)的作用.方法 以改良四血管阻断法(4-VO)建立大鼠缺血/再灌注模型(IR);运用加压灌注法和细胞膜电位记录法,离体观察TFR对KCl预收缩IR大鼠CBA的舒张作用和超极化反应及TRPV4阻断剂钌红(RR)对其的影响;采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法,在体观察TFR对IR大鼠脑血管内皮细胞TRPV4 mRNA和蛋白表达以及RR对其的影响.结果 递增浓度的TFR可诱导IR大鼠离体CBA产生明显剂量依赖性的舒张效应和超极化反应.去除血管内皮细胞后,TFR仍能介导CBA产生较弱的舒张作用和超极化反应,与血管内皮完整组比较,差异有显著性(P<0.01);去除一氧化氮(NO)和前列环素(PGI2)舒张作用后,TFR仍能诱导IR大鼠CBA产生明显的舒张效应和超极化作用,此作用可被TRPV4通道阻断剂RR抑制;TFR可明显上调IR大鼠脑血管TRPV4 mRNA和蛋白表达,而阻断TRPV4可明显抑制TFR上调的TRPV4基因表达.结论 TFR能介导IR大鼠CBA产生较强的内皮依赖性和较弱的内皮非依赖性血管舒张反应和超极化作用,其内皮依赖性效应推测可能与TFR促使脑血管内皮激活,促进内皮细胞生成和释放内皮衍生性超极化因子(EDHF)增多,继而激活TRPV4,引发Ca2+内流,导致血管平滑肌细胞膜超极化,产生血管舒张效应有关.
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磷酸二酯酶5抑制剂的神经保护作用研究进展
近年来,磷酸二酯酶5(phosphodiesterase 5,PDE5)在神经系统疾病发生及发展过程中的作用备受关注,其抑制剂可发挥神经保护作用,机制与抑制PDE5后产生的抗中风、抗氧化、抗神经炎症及改善认知障碍等作用有关.该文结合国内外研究报道,系统地综述了PDE5抑制剂的神经保护作用及其相关作用机制.
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阿尔茨海默症炎症反应及中药干预研究进展
炎症反应贯穿于阿尔茨海默症病理过程.以Aβ为核心的老年斑周围聚集着大量激活态小胶质细胞.Aβ通过小胶质细胞的Aβ受体产生NO、ROS及促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6等神经毒性分子.该文对小胶质细胞表达的Aβ受体引起慢性炎症机制进行综述,并对以这些Aβ受体为作用靶点的中药有效成分做一总结.
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狂犬病毒糖蛋白中多肽片段作为脑靶向药物载体的研究进展
狂犬病毒糖蛋白(rabies virus glycoprotein,RVG)中的多肽片段因其具有嗜神经性、血脑屏障通透性和生物安全性等优势,目前已成为研究为活跃的脑靶向药物载体.RVG多肽片段与蛋白质或核酸连接后,可直接将其输送到脑内.此外,多肽片段还可与载药多聚物、纳米粒子或脂质体等偶联,引导后者快速进入脑内.RVG多肽片段为化合物、蛋白质、质粒、siRNA、miRNA等生物分子治疗脑部疾病提供了一个安全有效的途径.
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MicroRNA与肿瘤铂类耐药的研究
化疗是目前临床上治疗恶性肿瘤主要手段之一,铂类药物是临床上常用的周期非特异性抗肿瘤药物,在临床治疗实体肿瘤中显示了良好的疗效,然而铂类抗肿瘤药物结构上的相似性使得耐药性或交叉耐药性成为限制该类药物临床应用的主要障碍之一.microRNA是近年来的研究热点之一.miRNA在生物学中起着重要的作用,包括细胞增殖、分化、凋亡、应激耐受及生理新陈代谢.microRNA对靶基因的调控与肿瘤耐药关系密切.该文主要就microRNA 在肿瘤铂类耐药中作用的研究进行了综述.
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TGF-β1通过F-actin聚合促进乳腺癌细胞MCF-7发生上皮-间质转化
上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞失去极性,获得间质形态的一个过程[1].肿瘤细胞中,EMT的激活促进了肿瘤的侵袭转移.转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1) 属于TGF家族,它能够调节细胞增殖、分化、细胞凋亡及细胞外基质的生成等[2].在生理和病理状态下,TGF-β1都是EMT发生的主要诱导因子之一.本文通过TGF-β1诱导乳腺癌细胞MCF-7,检测细胞中EMT相关蛋白vimentin、E-cadherin的表达,F-actin的聚合情况以及LIMK、cofilin的磷酸化水平,进一步阐明TGF-β1促进乳腺癌细胞MCF-7 EMT的分子机制.
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抑制NF-κB的活化对免疫性肝损伤小鼠CYP3A代谢活力的影响
免疫性肝损伤通常由生物因素引起,重要的特征是肝组织内大量的炎症细胞浸润,从而产生免疫-炎症应答[1].因此,现代医学认为免疫性肝损伤的发病机制与免疫应答和免疫调节紊乱有关[2-3].肝脏免疫系统包含众多的固有天然免疫细胞,如巨噬细胞、NK细胞和NKT细胞.这些细胞群体大量聚集在肝脏中,能够为机体提供抵抗外来抗原入侵的免疫监视及保护作用.如果这些免疫细胞功能表现异常,会破坏肝脏内原有的免疫平衡,从而诱发一系列的肝脏病理损伤.目前研究认为,NF-κB、CYP3A与免疫性肝损伤的发生有着密切的关系[4-5].因此,本文通过建立免疫性肝损伤模型,考察肝脏NF-κB表达是否会影响CYP3A的代谢活力,能否通过抑制NF-κB活性降低免疫性肝损伤的程度,以期为寻找治疗免疫性肝损伤的药物提供思路.
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梓葛冻干粉针的安全性药理学实验
梓葛冻干粉针(lyophilized powder of catalpol and puerarin,C-P)为西南大学中药研究所自主研发的用于治疗脑缺血卒中的一种新型中药单体复方制剂,其主要成分为梓醇和葛根素.研究表明[1-2],C-P能通过血脑屏障,可明显减少缺血性脑中风模型小鼠大脑梗死体积百分比[3],还能抑制血小板聚集,促进血凝块溶解[4],保护神经细胞,改善神经细胞损伤后的生长形态[5-6].该课题组已经开展了C-P的质量标准研究[7]和部分安全性评价研究[8].为了更全面地掌握C-P用药后对机体基本生命活动的影响,本文对其安全性药理学进行了研究.
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注射用血栓通(冻干)及三七二醇皂苷、三七三醇皂苷不同配比对体外静脉血栓形成的影响
血栓形成一般是指血液在变流状态下,导致止血机制过度激活的一种病理性的机体反应[1].血栓形成是心、脑血管疾病的病理基础,因此抑制血栓的形成有助于减少心、脑血管病变的发生[2].三七为五加科植物三七[Panax notoginseng (Burk.)F.H.Chen]的干燥根和根茎.其主要功效为化瘀止血、消肿定痛,现代药理研究表明三七具有止血、保护心脑组织、降血脂等作用[3].注射用血栓通(冻干)是由三七主根提取三七总皂苷制成的静脉注射剂,具有活血祛瘀、通脉活络的功效.其主要成份为三七总皂苷,其中二醇三七皂苷(以下简写为二醇苷)有人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd,三醇三七皂苷(以下简写为三醇苷)包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、三七皂苷R1[4-5].本文旨在探讨注射用血栓通对体外血栓形成的影响,并考察其主要成分二醇苷和三醇苷配比对体外血栓形成影响,为血栓通的临床应用、明确作用物质基础提供实验依据.
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基于TLR4-NF-κB的柴胡黄芩水煎液抑制CCl4诱导大鼠肝星状细胞激活作用机制研究
目的 探讨柴胡黄芩水煎液(CQ)对CCl4诱导肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)激活的作用及机制.方法 取对数生长的HSC,在无血清培养基中培养24 h后,以1.5×109·L-1浓度接种到培养板中过夜.实验分组如下:空白对照组(无药物处理),CCl4诱导组(6 mmol·L-1 CCl4作用6 h),给药组(6 mmol·L-1 CCl4作用6 h后,再用400、500、600 mg·L-1的CQ作用24 h),TLR4阻断剂TAK-242、NF-κB阻断剂BAY 11-7082组(6 mmol·L-1 CCl4作用6 h后,再用TAK-242 10 mol·L-1、BAY 11-7082 2 mol·L-1作用24 h).处理之后,应用ELISA法检测培养基中透明质酸酶(hyaluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagen Ⅲ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen type Ⅳ,Ⅳ-C)浓度,RT-PCR方法检测细胞中Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)基因的表达,应用Western blot法检测细胞中TLR4、NF-κB蛋白的表达.结果 研究发现,与CCl4干预组比较,CQ量效相关性降低CCl4诱导的HSC增殖.600 mg·L-1的CQ可以明显降低HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C细胞释放水平及TLR4、NF-κB基因、蛋白的表达.NF-κB抑制剂TAK-242、BAY 11-7082也可降低CCl4造成的HSC增殖,HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C细胞释放水平及NF-κB基因、蛋白表达,不能下调TLR4基因、蛋白表达.结论 CQ可以抑制CCl4诱导的炎症因子基因、蛋白表达,减轻肝纤维化相关指标的含量,其作用机制可能与TLR4-NF-κB转录活性及蛋白活性相关,提示其在抗肝纤维中的作用及机制.
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清气凉营颗粒抗流感病毒药效学研究和分子机制分析
目的 探讨清气凉营颗粒抗流感病毒药效学研究和分子机制分析.方法 体内实验验证清气凉营颗粒抗甲型流感药效,同时利用活性成分筛选、靶点预测技术,结合生物信息学手段,确定清气凉营颗粒治疗流感的特异性靶点,并进行信号通路富集分析,探讨其治疗流感的分子机制.结果 体内实验显示清气凉营颗粒具有抗甲型流感的作用,而其抗流感的分子机制主要参与了Wnt信号通路,调控细菌侵袭性上皮细胞信号通路,同时也影响了致病性大肠杆菌感染信号通路、军团杆菌病信号通路和甲型流感信号等通路.结论 清气凉营颗粒主要从抑制细菌感染、抗病毒感染和抑制病毒复制3个方面抑制流感.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 04 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
