五味子提取物对苯并[ a]芘诱导的早孕期大鼠胚胎损伤的保护作用及凋亡机制研究

目的观察五味子提取物对妊娠前苯并[ a]芘( BaP)暴露致早孕期大鼠胚胎损伤的防治作用,并探讨其内在机制。方法将75只♀SD大鼠随机分为5组：正常对照组、BaP模型组、五味子低、中、高剂量组,每组15只。给药15 d后制备孕鼠模型,于妊娠d9处死孕鼠,记录孕鼠各期体质量、子宫连胚总质量,并计算脏器系数；ELISA试剂盒检测大鼠血清β-CG及PROG水平；荧光定量PCR检测孕鼠胚胎中Bax、Bcl-2和caspase-3 mRNA表达水平；Western blot检测孕鼠胚胎中Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白表达水平。结果①与对照组相比,模型组大鼠体质量、子宫连胚总系数、大鼠血清β-CG及PROG水平均下降,Bax及caspase-3 mRNA水平及蛋白表达上调, Bcl-2 mRNA 水平及蛋白表达下调；②五味子提取物治疗后,孕鼠体质量、子宫连胚总系数、大鼠血清β-CG及PROG水平较模型组上升, Bax及caspase-3 mR-NA水平及蛋白表达下调, Bcl-2 mRNA 水平及蛋白表达上调。结论妊娠前苯并[ a]芘暴露可对早孕期大鼠产生胚胎毒性,而五味子提取物可以抑制BaP造成的生殖损伤,这
　　一保护作用可能是通过调节凋亡相关因子来实现的。

早期糖尿病大鼠心肌Wnt/β-catenin信号通路的变化

目的检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白在早期糖尿病大鼠心肌中的表达变化,明确其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法采用链脲佐菌素(60μg·g-1)一次性腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,喂养2周,HE染色法观察心肌病理结构变化, Western blot和免疫组化法检测心肌Wnt2、β-catenin、c-Myc和 DKK1蛋白的表达变化。结果
　　显微镜下糖尿病组大鼠心肌可见局灶性心肌细胞变性、坏死。糖尿病组大鼠相对于正常对照组心肌 Wnt2、β-catenin和c-Myc的表达明显增加( P<0．01) ,而DKK1的表达与正常对照组相比没有明显差异( P =0．885)。结论 Wnt/β-catenin信号通路的激活参与早期糖尿病心肌损伤,进一步研究其在糖尿病心肌中的变化可能为糖尿病心肌病找到新的治疗靶点。

隐丹参酮对骨髓来源巨噬细胞功能的影响

目的：研究隐丹参酮对骨髓巨噬细胞功能的影响。方法激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能；庆大霉素保护法检测巨噬细胞杀菌能力；q-PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平；Western blot检测 NF-κB通路；LPS ( lipopolysacchar-ides)及IL-4刺激检测巨噬细胞分型。结果隐丹参酮能够增强巨噬细胞吞噬功能及杀菌能力；促进抗炎因子IL-10并抑制促炎因子TNF-α及IL-6的表达；阻断NF-κB信号通路；诱导巨噬细胞向M2型分化。结论隐丹参酮能促进巨噬细胞向M2型分化，并上调骨髓巨噬细胞的免疫功能。

自噬参与神经细胞中过表达tau和异常磷酸化tau蛋白的降解

目的观察自噬对神经细胞内源性tau、过表达tau和异常磷酸化tau蛋白水平的影响,探讨不同形式tau蛋白降解的可能机制。方法体外培养小鼠神经瘤母细胞株N2 a和敲除Atg5基因的小鼠胚胎成纤维细胞株MEF,分别转染GFP-tau 质粒,并用蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸( okadaic acid, OA)诱导tau蛋白过度磷酸化,自噬诱导剂雷帕霉素( rapamycin )和溶酶体抑制剂氯化铵( NH4 Cl )处理细胞, Western blot法检测tau、磷酸化tau以及自噬相关蛋白LC3和p62的表达；放线菌酮( cycloheximide, CHX)示踪法观察tau和磷酸化tau的降解；GFP-tau和RFP-Lamp1质粒共转染N2a细胞,观察tau和溶酶体的定位；免疫荧光染色和DAB染色观察自噬抑制对表达tau细胞形态的影响。结果与溶媒对照组相比,NH4 Cl和rapamycin处理组细胞内源性tau蛋白水平无明显变化；过表达 tau的细胞中, NH4 Cl能增加tau和OA诱导的磷酸化tau蛋白水平,而rapamycin处理组细胞中tau和磷酸化tau水平降低,尤其是高分子量的磷酸化tau寡聚体明显减少；CHX实验证明自噬抑制能减缓tau和磷酸化tau的降解；tau和溶酶体在细胞内存在共定位；过
　　表达tau的N2a细胞经NH4 Cl处理后,胞质中出现大量tau聚集体,细胞核变小、固缩甚至消失。结论自噬参与神经细胞中过表达tau和异常磷酸化tau蛋白的降解,抑制自噬能增加tau的细胞毒作用。

二烯丙基二硫下调DJ-1抑制人白血病HL-60细胞增殖及诱导分化

目的：研究二烯丙基二硫( DADS)通过下调DJ-1对人白血病细胞系HL-60增殖抑制及诱导分化的影响。方法通过细胞形态法观察细胞分化；Western blot及免疫细胞化学检测 DADS 对 HL-60细胞 DJ-1表达的影响；针对 DJ-1 mRNA序列设计合成siRNA转染人白血病细胞HL-60,West-ern blot检测基因干扰效果；利用MTT法及间接免疫荧光检测DADS及DJ-1沉默对HL-60细胞的生长及细胞分化的影响。结果 DADS可以诱导HL-60细胞向成熟粒细胞系样分化。 DADS呈时间依赖性抑制 DJ-1的表达( P <0．05), DJ-1干扰组细胞生长减慢( P<0．05),与DADS 共同作用后可诱导HL-60细胞分化。检测细胞生长情况发现干扰组细胞生长减慢( P<0．05)。结论 DADS通过下调DJ-1抑制细胞增殖并诱导HL-60细胞分化；干扰DJ-1基因可以增强DADS对HL-60细胞的增殖抑制诱导分化作用。

EMAP-Ⅱ通过LKB1/AMPK/mTOR信号通路增加BTB的通透性

目的：研究内皮-单核细胞激活多肽( EMAP-Ⅱ)对体外血肿瘤屏障( BTB)通透性的影响及可能机制。方法建立体外BTB模型, EMAP-Ⅱ处理后, millipore电阻测量系统检测跨内皮细胞阻抗( TEER)值,采用Western blot方法检测pLKB1/LKB1、pAMPK/MAPK 和 p-mTORC1/ mTORC1的蛋白表达水平；分别应用LKB1抑制剂radicicol、AMPK抑制剂compound C和mTORC1激活剂IGF1进行预处理后再给予EMAPⅡ,检测体外BTB模型的TEER值,Western blot方法检测紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的蛋白表达水平。结果与 EMAP-Ⅱ0 h组相比, EMAP-Ⅱ可明显降低体外BTB 模型的 TEER 值,增加 p-LKB1/ LKB1和 p-AMPK/AMPK的表达水平,降低 p-mTORC1/mTORC1的表达水平,以上指标在EMAP-Ⅱ作用1 h时效果明显；radicicol、com-pound C和IGF1预处理能够部分阻断EMAP-Ⅱ的作用,使体外BTB模型的TEER值及紧密连接相关蛋白ZO-1和occlu-din的表达水平明显增加。结论 EMAP-Ⅱ能明显增加体外BTB模型通透性,其机制可能与激活LKB1/AMPK/mTOR信号通路相关。

米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠的神经保护作用

目的：观察米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠海马和皮层损伤的保护作用并探讨其机制。方法实验动物设4组：转基因模型组和药物处理组 APP/PS1转基因小鼠各10只,老年对照组为野生型C57小鼠10只,药物处理组给予米索前列醇,另两组给予羧甲基纤维素钠,均在小鼠24周龄时以200μg·kg-1的量开始灌胃给予,连续给药20周,每周连续5 d,每天1次；在指标测试阶段,另取10只8周龄野生型C57小鼠作为青年对照组。采用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,HE染色观察海马和皮层神经元形态变化,生化法检测海马和皮层SOD活性、MDA含量变化,免疫组织化学法检测海马和皮层Aβ表达情况。结果与老年对照组小鼠相比,转基因模型组小鼠寻台潜伏期明显延长,海马和皮层神经元出现明显核固缩,SOD活性明显下降,MDA含量明显增加, Aβ表达明显增多；给予米索前列醇后, APP/PS1转基因小鼠寻台潜伏期明显缩短,海马和皮层神经元核固缩明显减轻,SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,Aβ表达明显减少。结论米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠海马和皮层的神经损伤有显著保护作用,其机制可能与米索前列醇减轻APP/PS1转基因小鼠脑组织氧化应激有关。

美洛昔康抑制人结肠癌细胞增殖与Wnt/β-catenin信号的关系研究

目的：研究美洛昔康( meloxicam,Mel)对人结肠癌细胞LoVo增殖抑制作用及其机制。方法以人结肠癌细胞株LoVo为研究对象,体外药物敏感试验(结晶紫染色)和流式细胞术( FCM)分析Mel对细胞的增殖抑制作用；流式细胞术和HE染色检测Mel对细胞凋亡的影响；萤光素酶报告质粒检测Mel 对 Wnt/β-catenin 通路信号转导的影响；Western blot检测Mel对细胞内β-catenin蛋白水平的影响。结果与对照组相比,Mel能抑制LoVo细胞增殖,72 h、100μmol· L-1 Mel的细胞抑制率高达(57．635±3．86)%(t=10．044,P=0．001)；Mel能诱导 LoVo 细胞凋亡,24 h、60μmol · L-1 Mel的细胞凋亡率达到(33．6 ± 1．7)%( t =30．166, P =0．001)；Mel能降低TCF/LEF及Myc/Max报告质粒的萤光素酶活性,24 h、60μmol · L-1 Mel 可使 TCF/LEF 和 Myc/Mac报告的荧光素酶活性分别降至(40．05± 2．79)%( t =14．864, P =0．001)和(35．9±2．38)%( t =16．904, P =0．001)；Mel能下调细胞内β-catenin 蛋白水平,40μmol · L-1 Mel在24、48 h时,可将β-catenin蛋白水平分别降至(71±3．78)%( t =7．353, P =0．003)、(52．66±3．57)%( t =11．724,P=0．001)。结论 Mel能抑制LoVo细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与抑制 Wnt /β-catenin 通路信号转导,降低细胞内β-catenin蛋白水平有关。

α-维尼非林经线粒体凋亡途径诱导K562细胞凋亡

目的旨在研究α-维尼非林(α-viniferin)对人慢性髓系白血病细胞K562的作用与相关机制。方法 MTT法评价α-viniferin对K562细胞的细胞毒活性。采用细胞形态学和生物化学方法检测细胞凋亡。通过化学荧光法对细胞内线粒体膜电位、caspase-9、caspase-3活性分析。通过半定量RT-PCR表达分析来确定Bcl-2家族相关基因在α-viniferin诱导K562细胞凋亡中的作用。结果α-viniferin能抑制K562细胞增殖,呈剂量和时间依赖性, IC50为13.61 mg · L-1。
　　α-viniferin引起K562细胞出现死亡并伴随有染色质聚集、核破碎、凋亡小体等典型的凋亡形态学特征；此外还伴随有线粒体膜电位显著降低,caspase-9、caspase-3活性升高等现象；α-viniferin(2~32 mg·L-1)引起K562细胞caspase-3 mRNA表达持续升高,Bax、Bad、Bim、Bid促凋亡基因mRNA表达增加,而Bcl-2、Bcl-xL抗凋亡基因mRNA表达持续下降。结论α-viniferin通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。

黄芪多糖对异丙肾上腺素诱发的SERCA2 a表达及活性降低的影响

目的：探讨黄芪多糖对异丙肾上腺素( isopreterenol, ISO)刺激下心肌细胞 SERCA2a表达的影响。方法采用Real-time PCR法检测SERCA2a mRNA的表达；利用蛋白质免疫印迹法检测SERCA2a蛋白的表达。以4-硝基酚磷酸二钠(p-NPP)法检测 SERCA2a 的活性。结果与对照组相比,ISO组心肌细胞SERCA2a mRNA及蛋白的表达均明显降低,而黄芪多糖剂量依赖性地逆转上述降低。此外,黄芪多糖还可明显提高SERCA2a的活性。结论黄芪多糖可缓解ISO引起的SERCA2a表达及活性的下调。该作用可能是黄芪多糖缓解心肌细胞内Ca2+超载,进而发挥其心血管保护作用的重要机制。

辅酶Q10对环磷酰胺大鼠股骨的显微结构和生物力学的影响

目的：应用骨生物力学和micro-CT技术,探讨CoQ10对环磷酰胺大鼠股骨的显微结构和生物力学的影响,并与阳性药物阿仑磷酸钠对比。方法32只SPF级♂SD大鼠,随机分为正常对照组( CON)、环磷酰胺组( CTX)、阿仑膦酸钠组(ALD)、辅酶Q10组(CoQ10),连续给药15 d。实验结束后,取右侧股骨进行生物力学检测,然后进行Micro-CT扫描及三维重建。结果与CON组比较, CTX组大鼠股骨的骨微观参数：骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度和骨密度明显减少,骨小梁分离度和结构模型指数明显增高；而股骨的骨生物力学参数：大强度、断裂强度、断裂应变及韧性系数明显减少,刚性系数明显增加。与CTX组相比,ALD组大鼠股骨的骨微观参数均得到了良好地修复,但骨生物力学参数中仅断裂应变、韧性系数和刚性系数三个参数得到了明显修复。而CoQ10组大鼠股骨的微观参数仅骨体积分数和骨小梁厚度两个参数得到明显修复,但骨生物力学参数除断裂应变外均得到了明显修复。结论 CoQ10(30 mg · kg-1· d-1)修复CTX大鼠股骨微观结构的能力有限,但修复骨质量、降低股骨骨折风险的能力优于ALD,提示CoQ10的抗骨质疏松作用具有良好的研究前景。

漆黄素通过缝隙连接影响顺铂细胞毒性

目的：体外观察漆黄素对顺铂细胞毒性作用影响及其机制。方法 CCK-8法观察不同浓度漆黄素对人胶质瘤U87细胞的毒性；用细胞接种荧光示踪法测定不同浓度漆黄素对U87细胞缝隙连接( GJ )功能的影响；标准细胞集落形成分析法观察顺铂的毒性及漆黄素对顺铂毒性的影响；用Western blot法研究漆黄素在影响GJIC( GJ intercellular com-munication)功能浓度范围内对 Cx43表达的影响。结果CCK-8法显示漆黄素在小于1μmol·L-1的浓度范围内无细胞毒性；细胞接种荧光示踪法显示漆黄素浓度越高, U87细胞GJ通讯的荧光传递功能越强；标准细胞集落形成分析法显示,20μmol·L-1顺铂能够抑制U87细胞的集落形成,而且在有GJ形成的细胞顺铂对细胞集落形成的抑制作用显著高于无GJ形成的细胞；Western blot结果显示漆黄素对Cx43蛋白表达量无明显影响。结论漆黄素可以增强顺铂的细胞毒性,该作用可能与漆黄素增强U87细胞的GJ通讯功能有关,与Cx43蛋白表达水平变化无关。

罗红霉素对哮喘平滑肌细胞增殖以及微囊蛋白-1及PI3 K/Akt的影响

目的：研究罗红霉素( RXM)能否通过上调微囊蛋白-1(caveolin-1)的表达来调控PI3K/Akt通路,从而抑制TGF-β1刺激引起的哮喘气道平滑肌细胞( ASMCs)增殖。方法30只健康♂ SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,每组15只,以卵白蛋白( OVA)致敏和激发建立大鼠哮喘模型。将培养的ASMCs进行鉴定后,在哮喘组细胞中分别加入 TGF-β1、PI3K/Akt通路抑制剂渥曼宁青霉素( wortmannin)、胆固醇剔除剂β-环糊精(β-CD)以及RXM进行干预,后三组在干预后再用TGF-β1刺激,故分6组：①TGF-β1组、②哮喘组、③正常组、④wortmannin + TGF-β1组、⑤β-CD + TGF-β1组、⑥RXM+TGF-β1组,用 CCK-8法检测哮喘大鼠 ASMCs 的增殖,Western blot检测ASMCs上caveolin-1、Akt、p-Akt的表达情况。结果①TGF-β1组较正常组和哮喘组细胞增殖明显(P<0．01,P<0．05)；RXM 和wortmannin干预组较TGF-β1组细胞增殖减少(均P<0．01)。②与正常组比较,哮喘组、TGF-β1组、β-CD干预组气道平滑肌细胞caveolin-1的表达量明显减少(均P<0．05),TGF-β1组较哮喘组caveolin-1表达量明显减少( P<0．05)；与此同时,哮喘组ASMCs较正常组p-Akt的表达量明显增加(P<0．05),TGF-β1组较哮喘组p-Akt表达量明显增加( P <0．05) , wortmannin 干预组较TGF-β1组p-Akt的表达量明显减少,β-CD干预组较TGF-β1组p-Akt表达量明显增加( P<0．05) , RXM 干预组较 TGF-β1组p-Akt表达量明显减少( P<0．05)。结论罗红霉素可抑制TGF-β1刺激导致的哮喘大鼠ASMCs的增殖,并上调caveolin-1表达,抑制p-Akt活化。

缬沙坦/氨氯地平复方制剂择时用药对非杓型高血压患者血压昼夜节律的影响

目的：考察昼夜不同时间用药,缬沙坦/氨氯地平复方制剂对非杓型高血压患者降压作用的差异及其对血压昼夜节律的影响。方法非杓型高血压住院患者12例,均衡随机分2组。分别于8∶00及20∶00口服缬沙坦/氨氯地平复方制剂。于用药前及用药后d3、d7连续监测患者血压。用药前及用药7 d后取血测定血浆肾素( renin,Ren)、血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平。结果非杓型高血压患者的血压呈“昼高夜低、双峰一谷”现象,两峰值分别见于10∶00及18∶00；谷值见于2∶00。但患者昼夜血压差值缩小,杓型值仅为(4．10±1．74)%,呈明显非杓型特征。两时间点用药,均有良好的降压作用,用药后可使收缩压与舒张压的昼、夜均值、24 h均值明显下降( P<0．01)。但20∶00用药对患者夜间血压降低作用较快也较强,能明显改善患者的非杓型血压节律(P<0．01)；相反8∶00用药则使非杓型血压节律有加重的倾向。用药7 d后患者血浆Ren、AngⅡ及ET-1水平升高。结论昼夜不同时间用药,缬沙坦/氨氯地平复方制剂对非杓型高血压患者的降压作用无明显差异,但对血压的昼夜节律有显著影响。休息期用药,可使高血压患者非杓型血压节律明显改善。

连翘苷元对四氯化碳大鼠急性肝损伤的保护作用

目的：探讨连翘苷元对四氯化碳( CCl4)所致急性肝损伤的保护作用。方法用 CCl4诱导化学性急性肝损伤模型,测定血清中丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天冬氨酸氨基转移酶( AST)、总胆红素( TBIL)水平；肝脏组织切片,苏木精-伊红( HE)染色,光镜观察病理学改变；用试剂盒测定肝组织中SOD、GSH-Px和GSH的活性及脂质过氧化产物MDA含量。 ELISA法检测血清中TNF-α、IL-8含量。结果在CCl4诱导的大鼠急性肝损伤模型中,连翘苷元(0．05、0．15、0．5 mg·kg-1,sc)明显降低血清ALT、AST和TBIL水平；明显改善肝脏病理组织状况；连翘苷元(0．05、0．15、0．5 mg · kg-1, sc)明显降低CCl4诱导的急性肝损伤大鼠的肝组织匀浆中MDA的含量,明显增加SOD、GSH-Px和GSH的活性。连翘苷元(0．15、0．5 mg·kg-1,sc)明显降低 TNF-α、IL-8含量。结论连翘苷元对CCl4诱导大鼠急性肝损伤具有保护作用,该作用与其增加肝组织中抗氧化酶的活性、降低脂质过氧化水平、降低TNF-α、IL-8等促炎因子水平有关。

胡黄连苷Ⅱ对脑缺血损伤后神经细胞凋亡和超微结构的影响

目的探讨胡黄连苷Ⅱ对脑缺血损伤后神经细胞凋亡和超微结构的影响。方法成年健康♂ Wistar大鼠60只,应用线栓法建立大鼠脑缺血模型,经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ(20 mg·kg-1)干预治疗,改良神经功能评分( mNSS)评价动物神经行为功能,氯化三苯基四氮唑染色观察脑梗死体积,HE染色和透射电镜观察脑组织病理和超微结构,原位末
　　端标记法检测细胞凋亡,免疫组织化学和Western blot检测p-ERK1/2表达水平。结果大鼠脑缺血损伤后表现出神经功能障碍和脑梗死病灶,皮质区神经元和血脑屏障结构损伤较重,皮质区凋亡细胞数量和p-ERK1/2蛋白表达较对照组明显增多(P<0．05)。治疗组大鼠mNSS评分和脑梗死体积较模型组明显降低(P<0．05),皮质区神经元和血脑屏障损伤减轻,凋亡细胞与p-ERK1/2表达水平较模型组明显降低(P<0．05)。结论胡黄连苷Ⅱ可能抑制神经细胞凋亡,改善缺血区脑组织的形态结构,促进大鼠神经行为功能恢复。

新型PDE4抑制剂Roflupram改善阿尔茨海默病大鼠的认知障碍及神经炎症

目的：验证新型PDE4抑制剂罗氟普兰( roflupram)能否改善Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病大鼠的学习记忆障碍,及可能的机制是否与缓解小胶质细胞激活引起的炎症相关。方法 SD大鼠双侧海马CA1区微量注射Aβ25-35(10μg)造模。动物分组包括：假手术对照组、Aβ25-35注射组、Aβ25-35注射+盐酸多奈哌齐组、Aβ25-35注射+Rolipram组、Aβ25-35注射+Roflupram低、中、高剂量。连续灌胃给药14 d后,进行Morris水迷宫实验,20 d后进行避暗实验。采用Western blot法检测海马cAMP下游信号分子( p-PKA、p-CREB ),前致炎因子( iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β),胶质细胞激活标记物(GFAP、Iba-1),炎症相关蛋白(p-p38、核内NF-κB p65)的蛋白水平变化,并用PCR的方法分析海马内iNOS、COX-2、TNF-α和IL-1βmRNA水平的变化。结果行为学结果显示,Roflupram能明显改善由Aβ25-35造成大鼠的空间学习记忆能力和被动回避学习记忆能力障碍。分子生物学分析的结果如下：与Aβ25-35注射组比较,各药物处理后均可以使海马内p-CREB、p-PKA蛋白表达水平不同程度的升高,使NF-κB p65(核内)、p-p38、iNOS、 COX-2、TNF-α、IL-1β、GFAP和Iba-1的蛋白水平不同程度的降低, iNOS、COX-2、TNF-α和IL-1β mRNA水平下降。结论 Roflupram能够改善Aβ25-35诱导痴呆大鼠的学习记忆功能障碍,该效应与抑制小胶质细胞的活化、减少炎性因子的表达,从而缓解神经炎症有关。

干细胞样U87胶质瘤细胞向内皮细胞转分化及VEGFR2人源化单克隆抗体的干预作用

目的建立干细胞样U87胶质瘤细胞向内皮细胞的转分化模型,初步评价抗VEGFR2人源化单克隆抗体对转分化的影响。方法体外诱导培养获得干细胞样U87胶质瘤
　　细胞；流式细胞仪检测 CD133+细胞含量；定量 PCR 检测CD133、Nestin以及VEGFR2表达；观察干细胞样U87细胞的致瘤能力、肿瘤生长速度和CD31表达情况；观察干细胞样U87细胞在Matrigel上血管状结构形成和CD31、CD34、vWF表达情况；建立干细胞样U87细胞向内皮细胞的转分化模型,评价抗VEGFR2人源单抗对转分化的抑制作用。结果获得干细胞球样的 U87细胞,其肿瘤生长更快,且血管增多,接种在Matrigel上形成血管状结构,CD31、CD34、vWF表达增加；抗VEGFR2人源单抗使血管状结构和CD31、CD34、vWF表达均减少。结论成功建立干细胞样U8细胞向内皮细胞转分化模型,VEGFR2人源化单抗对转分化有抑制作用。

芝麻素抗哮喘炎症作用研究

目的观察芝麻素抗哮喘作用,并探讨其可能的作用机制。方法40只♂清洁级BALB/c小鼠,随机分为正常组、哮喘组、芝麻素低剂量组、芝麻素高剂量组和地塞米松组。体外卵清蛋白( OVA )诱导建立哮喘模型, ELISA 和Western blot 方法检测芝麻素对支气管炎肺泡灌洗液(BALF)和肺组织白细胞介素-4、5、13(IL-4、5、13)、干扰素-γ( IFN-γ)表达的影响。 HE染色观察肺部炎症变化,Western blot方法检测IκBα磷酸化和NF-κB活化。结果哮喘组与
　　正常组相比,炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平增高,而IFN-γ的表达明显降低(P<0．05),IκBα磷酸化和NF-κB核转位明显增加(P<0．05)；芝麻素高剂量组明显降低炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平,提高 IFN-γ的表达( P <0.05),同时抑制IκBα磷酸化和NF-κB核转位(P<0．05)。结论芝麻素通过抑制NF-κB激活,减轻哮喘炎症反应。

Liguzinediol对普萘洛尔诱导的急性心衰豚鼠心功能的影响

目的：研究Liguzinediol对普萘洛尔所致豚鼠急性心衰模型的治疗作用并评价其效能、效价和治疗指数。方法静脉注射普萘洛尔建立豚鼠急性心力衰竭( AHF)模型后,分组静脉恒速注射给予Liguzinediol (2．85、5．70、11．40、22．80、45．60、91．20 mg·kg-1)及阳性药盐酸肾上腺素(0．31 mg· kg-1) ,用RM6240多道生理信号采集处理系统记录给药0、5、10、20、40、60、90和120 min时左心室内压大上升/下降速率(± dp/dtmax )、左心室内压( LVSP)、动脉收缩压( MSP)、动脉舒张压( MDP)和心率( HR)的变化；计算该药的效能、效价和治疗指数。结果 Liguzinediol (11．40、22．80和45．60 mg · kg-1)能有效升高模型豚鼠+ dp/dtmax、LVSP、MSP、MDP和 HR,降低-dp/dtmax , Liguzinediol (2．85、5．70 mg·kg-1)作用较弱, ED50约为12．93 mg · kg-1,治疗指数(LD50/ED50)为131,45．60 mg·kg-1已达大效能,再加大剂量至91．20 mg · kg-1其效应并不能相应增强。结论Liguzinediol对急性心衰豚鼠的血流动力学指标有明显的改善作用,其安全性比同类药物高。

OATPs家族在肿瘤中的表达及肿瘤治疗中的作用

药物转运体OATPs在一些肿瘤药物体内吸收、分布与排泄过程中有重要的作用,同时近年来较多的研究关注了OATPs在各类型肿瘤细胞及肿瘤组织中的表达,以及OATPs的表达对肿瘤的发生发展、治疗和诊断的影响,OATPs可能成为新的肿瘤治疗靶点。该文综述了OATPs家族在肿瘤中的表达及它们对肿瘤治疗的潜在作用和临床意义。

流感病毒RNA聚合酶PA亚基：潜在抗流感药物靶点

流感是世界范围内的严重传染性疾病，目前抗流感药物面临的主要问题是病毒耐药性和对高致病性流感病毒的效价低。流感病毒RNA聚合酶是病毒在宿主细胞内完成复制和转录过程的关键性酶，其中PA亚基通过内切酶活性为流感病毒的转录过程提供引物，成为潜在抗流感药物靶点。该文对PA亚基的结构、功能及内切酶抑制剂类抗流感药物研究进展进行概述，为PA亚基的深入研究及针对此靶点的抗流感药物发现提供信息指导。

酸敏感离子通道在类风湿关节炎中作用的研究进展

酸敏感离子通道( acid-sensing ion channels, ASICs)是一类胞外H+激活的阳离子通道,属于阿米洛利敏感的上皮钠通道/退变素( epithelial Na+ channels/ degenerin, ENaC/DEG)超家族中的一员,该通道广泛分布在周围和中枢神经系统中,并且具有重要的生物学功能。近来研究表明,ASICs在类风湿关节炎发病过程中发挥着重要作用。该文对ASICs的细胞生物学特点以及ASICs在类风湿关节炎中对炎症、疼痛和软骨损伤等方面的作用进行综述。

薄荷醇及其受体TRPM8与肿瘤关系研究进展

薄荷是一种被广泛使用的植物药和食品添加剂，其发挥功能的主要成分为薄荷醇。研究发现薄荷醇具有抗炎镇痛、抗菌抗病毒及止咳等多种生理功能。近年来，研究发现薄荷醇具有明显的抗肿瘤活性，能抑制多种恶性肿瘤的生长和演进。然而，也有研究发现使用添加薄荷醇的香烟制品其肺癌发病率明显高于一般烟民。该文对薄荷醇的生理功能及其受体TRPM8进行综述，着重对近年来薄荷醇及其受体与肿瘤关系的研究进展进行综述，并探讨薄荷醇在临床应用的局限性和不良反应，为后续的科学研究及指导临床提供参考。

内质网自噬--疾病防治的新靶标

内质网自噬是指内质网功能发生改变时，细胞激活选择性自噬以清除细胞内受损的内质网或内质网片段的过程。其主要的功能是改善细胞内环境，起细胞保护作用。内质网自噬作为选择性自噬研究的新领域，与细胞中其他类型的选择性自噬和细胞凋亡之间关系密切，在疾病发生发展中有重要作用。该文综述了内质网自噬的形成过程，细胞内调控方式，与其他选择性自噬间的相互作用，并阐述了内质网自噬参与糖尿病、神经退行性疾病和肾脏疾病等多种疾病的发生发展，逐步成为疾病防治的新靶标。

神经轴突中信号转导内体运输的研究方法

神经元之间的信息交流及其生长发育与轴突运输密切相关。轴突运输中信号分子通过激活相关受体形成配体-
　　受体复合物，在细胞内吞作用下进入内体，形成神经元轴突中的胞内吞细胞器。胞内吞细胞器从轴突运输至胞体，这种细胞器称为信号转导内体。内体运输受损影响神经元的生存，了解轴突及内体运输这一过程的研究方法将有助于寻找相关疾病的病因和防治方法。该文就神经元轴突及内体运输的研究方法进行综述。

玫瑰花多酚抗小鼠躯体疲劳研究

玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰( rosa rugosa thunb.)的干燥
　　花蕾，是一味传统的维吾尔药材[1]，维吾尔语名：克孜勒古力，维吾尔医习惯用其花瓣，可治疗月经不调、肿毒、宿醉、更年期障碍、便秘等[2]。以玫瑰花为原料的代表性产品有玫瑰花糖膏已收载在中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册中，中国医学百科全书维吾尔医学分卷中记载的含玫瑰花的处方有246个，占所有处方的25．89%。本实验运用现代技术提取分离的玫瑰花有效部位，通过动物实验对其抗疲劳作用进行研究，寻找有效物质，期望为一种疗效显著、工艺合理先进、技术含量高并有独创知识产权的玫瑰花新功能产品提供理论依据。

丹参酮ⅡA对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的保护作用及机制研究

一种简便、可靠的免疫组化双重标记新方法

目的：探索一种简便可靠、清晰的免疫组化双重标记方法,可用普通光学显微镜观察,并能长期保存染色结果。方法免疫组化双标中,均使用辣根过氧化物酶( HRP)连接的二抗,底物分别选用二氨基联苯胺(3,3′-diaminobenzidine, DAB)和镍增强DAB。第一标DAB染色完成后切片煮沸4~5 min以灭活HRP,完全阻断交叉反应,然后进行第二标镍增强DAB染色。结果①切片煮沸5 min,可完全灭活残余的HRP酶活性,防止染色反应交叉；5%的H2 O2灭活HRP酶不完全,易产生交叉反应；短暂高温灭活HRP不损坏之前的特异性DAB染色或造成组织损伤。②第一标DAB的棕黄色与第二标镍增强DAB的紫蓝色反差大、背景低；颠倒底物使用次序将损害双标质量。此外,双标切片可采用传统的中性树胶封片,染色结果能恒久保存。结论采用同一种酶标记系统建立了简便、可靠的免疫组化双标新方法。该方法标记结果清晰、操作简便、试剂易得,有较大应用价值。

津力达联合通心络对高糖诱导胰岛微血管内皮细胞损伤干预作用及机制研究

目的研究津力达联合通心络对高糖诱导胰岛微血管内皮细胞( MS-1)损伤的干预作用,并初步探讨其机制。方法通过MTS法检测细胞存活率筛选药物作用浓度；将细胞分为正常组( Normal)、模型组( Model)、津力达组( JLD)、通心络组(TXL)及津力达+通心络组(JLD+TXL),运用高
　　糖(50 mmol·L-1)培养基建立损伤模型并给予药物干预, MTS法分别检测药物干预48 h、1周、2周后细胞存活率,测定给药48 h细胞上清中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、超氧化物歧化酶( SOD)及丙二醛( MDA)含量,流式细胞仪检测细胞活性氧簇( ROS)水平。结果首先确定 JLD 200 mg·L-1、TXL 100 mg·L-1作为给药浓度。与模型组比较,给药组升高48 h、1周、2周细胞存活率及细胞上清中NO含量(P<0．05,P<0．01),JLD、JLD+TXL组细胞上清液ET-1含量降低(P<0．05,P<0．01),JLD组细胞上清液SOD含量升高(P<0．05),JLD+TXL组细胞上清液MDA含量降低(P<0．05)；给药组细胞内 ROS 水平均降低(P <0．05,P <0．01)。结论津力达联合通心络能够改善高糖诱导MS-1细胞内皮功能损伤,并通过减轻氧化应激损伤发挥细胞保护作用。