中国药理学通报杂志
Chinese Pharmacological Bulletin 중국약리학통보
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国药理学会
- 影响因子： 1.54
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-1978
- 国内刊号： 34-1086/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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阿司匹林与人血清白蛋白的相互作用研究
目的 以光谱技术研究阿司匹林分子与人血清白蛋白(HSA)间结合作用机制.方法 通过荧光光谱法确定阿司匹林对HSA的荧光猝灭机制.由Lineweaver-Burk双倒数作图法确定反应的解离常数.根据热力学方程讨论两者间主要的作用力类型.结合同步荧光技术考察阿司匹林对人血清白蛋白构象的影响.结果 阿司匹林对HSA的荧光猝灭机制为静态猝灭.在37℃和25℃时阿司匹林与HSA的解离常数分别为KD37=1.44×10-3 mol·L-1,KD25=1.96×10-3 mol·L-1.结合反应热力学参数为ΔH=-19.73 kJ·mol-1,△G=-16.21 kJ·mol-1,ΔS=-11.77 kJ·mol-1.结论 两者结合的主要作用力类型是范德华力.阿司匹林与白蛋白结合后使蛋白质构象发生变化.
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龙葵碱对HepG2人肝癌细胞NAT酶动力学常数的影响
目的 探讨龙葵碱对HepG2细胞NAT酶米氏常数Km及大反应速率Vmax的影响.方法 MTT法测定龙葵碱对消化系统SGC-7901人胃癌、HepG2人肝癌、Ls-174人大肠癌3种肿瘤细胞株的细胞毒作用,采用高效液相色谱(HPLC)法,以2-AF为底物,以2-AF的浓度为底物浓度,在以HepG2完整细胞及细胞质内2-AF被NAT酶乙酰化为2-AAF的速度为NAT酶的反应速率,采用双倒数作图法,以底物2-AF浓度的倒数1/S对NAT反应速率的倒数1/V作直线,得出回归方程,计算Km和Vmax.结果 MTT法测定表明龙葵碱对HepG2人肝癌细胞比较敏感,酶动力学研究表明,以2-AF为底物,对于HepG2完整细胞,阴性对照组的Km和Vmax分别为(2.37×10-3±8.37×10-5) mmol·L-1、(9.16×10-4±7.54×10-5) nmol·106 cells-1,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(2.22×10-3±9.05×10-5) mmol·L-1和(5.14×10-4±3.72×10-5) nmol·106 cells-1.对于HepG2细胞质,阴性对照组的Km和Vmax分别为(8.95×10-3±2.61×10-4) mmol·L-1、(2.55×10-6±1.92×10-8) μmol·min-1g-1 Pro,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(9.48×10-3±3.63×10-4) mmol·L-1和(2.43×10-6±1.32×10-8) μmol·min-1 g-1 Pro,统计学表明对于HepG2完整细胞和细胞质,阴性对照组和龙葵碱组的Km没有差异,而Vmax差异有显著性(完整细胞P<0.01,细胞质P<0.05).结论 龙葵碱是HepG2人肝癌细胞NAT酶2-AF底物的非竞争性抑制剂.
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败血症休克大鼠心血管组织中介素分泌和表达的变化及对血流动力学的影响
目的 观察败血症休克大鼠血浆和心血管组织IMD含量和mRNA表达的变化;探讨内源性IMD1-47对感染性休克大鼠血流动力学的影响.方法 盲肠结扎穿孔方法复制大鼠败血症性休克模型;分别用放射免疫法和半定量RT-PCR检测大鼠血浆和心血管组织IMD含量及心血管组织IMD mRNA水平;微渗透泵给予外源性IMD1-47,用四道生理记录仪记录经股动脉和颈总动脉插管测量血流动力学.结果 与假手术组比较,休克早、晚期动物呈现严重低血糖和高乳酸血症;休克晚期呈现严重的心力衰竭表现;给予外源性IMD1-47后,明显改善了休克晚期动物低血糖高乳酸血症和心力衰竭.休克早期血浆中IMD的浓度和心血管IMD蛋白分泌及mRNA表达水平均较假手术组增高;休克晚期血浆IMD水平和主动脉IMD蛋白分泌均较假手术组增高;心室肌分泌IMD蛋白较假手术组和休克早期减少;与假手术组和休克早期比较,主动脉IMD mRNA表达水平降低,心室肌IMD mRNA表达水平却增加.结论 IMD参与了大鼠感染性休克的病理生理过程,是休克发病的内源性保护物质.
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小檗碱对胰岛素抵抗大鼠氧化应激和内质网应激的影响
目的 观察小檗碱对胰岛素抵抗大鼠氧化/抗氧化状态和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress)的影响,并探讨其改善胰岛素抵抗的分子机制.方法 采用高脂高热卡饮食饲养8 wk制备胰岛素抵抗大鼠模型,成模后随机分为小檗碱组(BER组)、Alpha-硫辛酸组(ALA组)和模型组(MOD组),各组以相应的药物干预4 wk.另设正常组(NOR组),予普通饲料喂养,不予药物干预.比较各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素水平(Fins)和胰岛素敏感性(ISI).血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以观察药物对大鼠氧化和抗氧化的影响.Western blot方法测定肝脏组织中的ER应激标志物c-Jun氨基端激酶(c-jun NH2-terminal kinase, JNK)和Phospho-c-Jun (Ser73) (p-c-Jun)的含量变化.RT-PCR方法测定肝脏组织ER应激标志物葡萄糖调节蛋白GRP78 (glucose regulated protein78,GRP78) mRNA表达水平,以观察小檗碱对胰岛素抵抗大鼠ER应激的影响.结果 与NOR组比较,MOD组大鼠血清中MDA含量明显升高,SOD、GSH-Px活性明显降低(P均＜0.05).BER组大鼠SOD、GSH-Px的活性较MOD组明显升高(P＜0.01,P＜0.05),MDA含量较模型组明显下降.比较各组肝组织p-c-Jun/JNK的水平,MOD组较NOR组明显升高(P＜0.01),BER组及ALA组较MOD组均明显下降(P均＜0.01).比较各组肝组织中GRP78 mRNA水平,MOD组较NOR组明显升高(P＜0.05),BER组及ALA组较MOD组均明显下降.结论 小檗碱能提高胰岛素抵抗大鼠的胰岛素敏感性,增加其抗氧化能力,改善其ER应激状态,其作用机制可能与改善ER应激有关.
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Survivin和Bcl-2调节槲皮素诱导的A549细胞凋亡
目的 研究槲皮素诱导肺腺癌细胞A549凋亡,探讨survivin和Bcl-2在槲皮素诱导A549细胞凋亡中的调节作用.方法 分别采用MTT法、荧光染色、流式细胞仪和免疫细胞化学观察了槲皮素对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡、细胞周期和蛋白表达的影响.结果 槲皮素抑制肺腺癌A549细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性.形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,槲皮素能使肺腺癌A549 细胞周期阻滞于G0/G1期,且A549细胞survivin和Bcl-2蛋白表达同时下降,而caspase-3活性升高.结论 槲皮素能诱导A549细胞凋亡,其机制可能是使肺腺癌A549细胞周期阻滞于G0/G1期,并同时下调survivin和Bcl-2蛋白的表达,直接激活caspase-3而诱导A549细胞凋亡.
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mGluR1在自发性癫痫大鼠海马中的表达
目的 检测自发性癫痫大鼠海马中mGluR1的表达情况.方法 RT-PCR技术检测鼠海马中mGluR1基因的表达;利用免疫组化和Western blot方法检测鼠海马中mGluR1总蛋白的表达.结果 自发性癫痫大鼠海马中mGluR1基因总水平下降(P<0.05),免疫组化显示海马DG区和CA3区的mGluR1蛋白表达均下降(P<0.05),CA1区无变化(P>0.05),mGluR1阳性的神经细胞其密度较正常鼠增强;Western blot检测mGluR1蛋白总量下降(P<0.05).结论 自发性癫痫大鼠海马中总mGluR1表达下调,单一细胞表达增强.
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鞘内注射硫酸镁和吗啡对切口痛大鼠脊髓背角p-αCaMK Ⅱ表达的影响
目的 观察鞘内注射(it)硫酸镁(MgSO4)和吗啡对切口痛大鼠脊髓背角磷酸化钙-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(p-αCaMK Ⅱ)表达的影响.方法 所有大鼠术前8 d鞘内置管,用机械缩足反射阈值、热缩足潜伏期和累计疼痛评分来评价大鼠疼痛行为学变化;用免疫组织化学和Western blot法来测定吗啡和硫酸镁对大鼠脊髓背角p-αCaMK Ⅱ表达的影响.结果 术前或术后30 min it吗啡5 μg或MgSO4 188 μg和吗啡2.5 μg使术后2 h的机械性缩爪阈值(MWT)和热刺激缩爪阈值(TWL)明显延长(P<0.01),累积疼痛评分明显降低(P<0.01);术前30 min it MgSO4 375 μg或吗啡5 μg或MgSO4 188 μg和吗啡2.5 μg使大鼠术后2 h脊髓背角p-αCaMK Ⅱ表达明显减少(P<0.05).结论 在大鼠切口痛模型中,it吗啡5 μg或MgSO4 188 μg和吗啡2.5 μg具有确切的抗伤害作用,其抗伤害作用可能与抑制脊髓背角p-αCaMK Ⅱ表达有关.
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吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞脂联素受体表达的影响
目的 探讨吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)脂联素受体(AdipoR1和AdipoR2)表达的影响.方法 将HUVEC在波动性高糖培养液(5.5、20 mmol·L-1每隔8 h轮换1次)中培养5 d后,随机分为阴性对照组、吡格列酮处理组(10、1与0.1 μmol·L-1)和阳性对照组.应用实时定量PCR方法检测脂联素受体mRNA表达的改变.结果 与波动性高糖组比较,吡格列酮处理后 HUVEC AdipoR1表达增高.当吡格列酮浓度增至1 μmol·L-1以上时,AdipoR1 mRNA表达增加呈现差异.各组细胞AdipoR2表达量间差别无显著性.结论 AdipoR1很可能是胰岛素增敏剂吡格列酮改善内皮胰岛素敏感性的作用机制之一.
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急性肺损伤大鼠体内明胶酶的活性变化及大豆胰蛋白酶抑制剂的干预效应
目的 探讨急性肺损伤大鼠体内基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,MMP-9)活性的变化以及大豆胰蛋白酶抑制剂(soybean trypsin protease inhibitor,SBTI)的干预效应.方法 90只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=30)、内毒素组(LPS组,n=30)、大豆胰蛋白酶抑制剂组(SBTI组,n=30).向LPS和STBI组大鼠气管内一次性注入0.3 ml含LPS(6 mg·kg-1)的生理盐水复制ALI模型, 假手术组大鼠则在气管内一次性注入等量生理盐水.SBTI组于造模前1天腹腔注射给予100 mg·kg-1·d-1SBTI(溶于0.5 ml生理盐水),假手术组和LPS组大鼠腹腔注射等量的生理盐水,3组动物同步于气管内LPS灌注后d 1、d 3、d 7分别随机处死10只.收集肺泡灌洗液,冰浴匀浆肺组织制备匀浆液,-80℃冻存.Bradford法测定血浆蛋白含量和肺泡灌洗液中蛋白含量,计算肺通透指数;酶谱法测肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液上清中MMP-2、MMP-9酶活力及免疫组织化学方法检测肺组织MMP-2、MMP-9蛋白表达情况;并进行肺组织形态学观察.结果 酶谱法显示:与LPS组相比,SBTI组大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液中MMP-2、MMP-9活性明显下降,在d 7活性变化明显,但MMP-9变化较MMP-2更明显.免疫组化显示MMP-2、MMP-9在LPS组肺组织细胞高表达.SBTI组大鼠肺组织MMP-2、MMP-9表达明显减弱.肺组织病理提示SBTI治疗组肺损伤病变局限且程度较轻,肺泡内渗出明显小于LPS组,PMN和红细胞渗出较少.结论 MMP-2、MMP-9在LPS诱导大鼠急性肺损伤中发挥重要的作用,SBTI通过抑制MMPs的分泌及激活,降低基底膜的降解,减轻肺水肿及炎症反应,发挥肺保护的作用.
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土槿乙酸衍生物PB-LY体外抗肿瘤作用及其机制研究
目的 通过研究土槿乙酸衍生物PB-LY对肿瘤细胞的影响,探讨PB-LY的抗肿瘤活性及其作用机制.方法 采用MTT法和绘制细胞生长曲线等方法检测PB-LY对多种肿瘤细胞的抑制作用;采用荧光染色、DNA ladder和流式细胞术等方法检测PB-LY诱导肿瘤细胞凋亡的作用;采用RT-PCR法检测PB-LY对肿瘤细胞相关凋亡基因Caspase-3、Bcl-2和 Bax的mRNA表达的影响.结果 PB-LY作用于多种肿瘤细胞的IC50在1.35 μmol·L-1~3.68 μmol·L-1之间,且有明显的量效关系,能够诱发肿瘤细胞产生凋亡小体、DNA ladder和细胞凋亡峰,上调相关促凋亡基因Caspase-3和Bax的表达,同时协同下调抑凋亡基因Bcl-2的表达.结论 PB-LY能抑制肿瘤细胞的生长,同时影响肿瘤细胞内相关促凋亡和抑凋亡基因的表达,从而诱导肿瘤细胞发生凋亡.
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蒙脱石影响尿酸在血管和肠道间的扩散作用
目的 研究蒙脱石促进血管中的尿酸向肠道的扩散作用和阻止肠道尿酸的吸收作用.方法 大鼠肠道、血管分别用含尿酸140 mg·L-1的血管灌流液和肠灌流液循环灌流,尿酸酶及过氧化物酶法测定灌流液中的尿酸含量.结果 血管用含尿酸的血管灌流液循环灌流,肠道用不含尿酸的肠道灌流液循环灌流,同时肠道中加入蒙脱石时,蒙脱石0.25、0.5和1.0 g·kg-1组的血管灌流液和肠道灌流液中的尿酸浓度均明显低于对照组.肠道用含尿酸的肠道灌流液循环灌流,血管用不含尿酸的血管灌流液循环灌流,同时肠道中加入蒙脱石时,蒙脱石0.5和1.0 g·kg-1组肠道灌流液和血管灌流液中尿酸浓度明显低于对照组.结论 蒙脱石能促进尿酸从血管向肠道的扩散,并减少尿酸在肠道的吸收.
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黄芩有效成分SBM对炎症模型及免疫功能的影响
目的 研究通过常温超高压方法得到的黄芩有效成分SBM的抗炎作用,并初步探讨其作用机制.方法 观察SBM体外对淋巴细胞增殖、IL-1β合成的影响;观察给药后对佐剂性关节炎大鼠原发性及继发性病变、免疫功能及对甲醛诱导足肿胀、醋酸诱导腹腔渗出的影响.结果 SBM(31.25～500 mg·L-1)体外可明显抑制ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及LPS诱导的腹腔巨噬细胞合成IL-1β;SBM(20 mg·kg-1)灌胃给药可明显抑制佐剂性关节炎大鼠原发性及继发性足肿胀,并可抑制脾淋巴细胞增殖、IL-1β合成;SBM(20 mg·kg-1)灌胃给药还可明显抑制甲醛诱导的大鼠足肿胀及醋酸诱导的腹腔渗出.结论 SBM可通过抑制免疫细胞的功能及促炎因子的产生发挥抗炎作用.
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在LPS致大鼠发热过程中下丘脑TRPV4对体温及cAMP含量、[Ca2+]i浓度的影响
目的 探讨TRPV4在发热时是否参与体温调节过程.方法 用脂多糖复制大鼠发热模型,结合应用钌红抑制TRPV4的活性,观察发热时的下丘脑组织中TRPV4含量、钙离子浓度变化与cAMP含量的关系.结果 单独给予钌红组体温降低;钌红+LPS组与LPS组相比,△T、cAMP与[Ca2+]i增高幅度均降低;钌红组与钌红+LPS组TRPV4表达明显低于对照组.结论 ① TRPV4通道可能参与正常体温的维持;②通过激活TRPV4通道,使钙离子内流增多,进而中枢发热介质cAMP表达增多,这可能是LPS致大鼠发热的重要途径.
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血红素加氧酶-1在脑缺血/再灌注损伤中的作用研究
目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)表达和活性变化在脑缺血/再灌注(I/R)致脑损伤中的作用.方法 ♂小鼠随机分为4组,每组30只.以40 g·L-1水合氯醛400 mg·kg-1ip麻醉,从颈总静脉抽取并回输约40%总血量加双侧颈总动脉夹闭20 min,建立脑I/R损伤模型.3组小鼠于建模前16 h分别予以脑室内注射150 μmol·L-1氯化正铁血红素(Hemin)、150 μmol·L-1锌原卟啉Ⅸ(ZnPPIX)或人工脑脊液(ACSF) 3 μl/只.假手术组仅麻醉并分离暴露双侧颈总动脉和右侧颈总静脉20 min.采用Western blot法检测海马HO-1蛋白表达;分光光度计法检测海马HO活性和脑黄嘌呤氧化酶(XO)活性及丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量;TUNEL法检测海马细胞凋亡.结果 Hemin组海马HO-1表达明显增强,HO活性升高,脑XO活性、MDA和ROS含量降低,海马神经元凋亡减少(vs ACSF,P<0.05);ZnPPIX组海马HO-1表达无变化(vs ACSF,P>0.05),HO活性降低,脑XO活性升高伴脑MDA、ROS含量增加及海马神经元凋亡增多(vs ACSF,P<0.05).结论 HO-1表达升高对脑I/R致脑损伤具有保护作用,其作用机制与抗脂质过氧化和清除自由基有关.
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蛙皮素对发热大鼠的降温作用及与PGE2的相关性
目的 探讨蛙皮素(BN)参与体温热限调节及其机制.方法 以IL-1β致热大鼠为研究对象,采用放免法对下丘脑及血浆中PGE2含量进行同步检测.结果 (1)侧脑室注射0.1 μg IL-1β诱导发热大鼠的下丘脑及血浆中PGE2含量明赵书芬(1945-),女,教授,硕士生导师,研究方向：体温调节,Tel：024-23256666-5031显增高(P＜0.05);(2)侧脑室注射0.7 μg BN引起的大鼠体温降低时,下丘脑及血浆中PGE2含量明显降低(P＜0.05);(3)给IL-1β之前10 min先侧脑室给0.7μg BN,结果明显翻转第一发热高峰并抑制第一发热高峰后的温度升高,同时大鼠下丘脑和血浆中的PGE2含量也明显低于IL-1β致热组(P<0.05).结论 BN降低大鼠正常体温和抑制IL-1β的致热作用可能通过抑制PGE2的合成与释放实现.
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CCK-8对吗啡成瘾大鼠戒断症状及尾核内c-jun蛋白表达的影响
目的 从行为学、形态学角度,初步研究了八肽胆囊收缩素(CCK-8)对吗啡成瘾大鼠戒断症状及尾核(Cd)内原癌基因c-jun蛋白表达的影响.方法 采用动物行为学评估和免疫组化的方法,观察吗啡成瘾大鼠Cd内注入CCK-8 (10 mg·L-1,1 μl)对c-jun蛋白表达和戒断症状的影响.结果 ①吗啡成瘾组大鼠戒断症状与生理盐水对照组大鼠行为学相比有差异;②吗啡成瘾大鼠在戒断24 h 时,Cd内注入CCK-8可使戒断症状降低,在戒断40 h时戒断症状总分明显;③单纯吗啡成瘾组大鼠Cd内c-jun蛋白表达与生理盐水对照组大鼠相比下降,而注入CCK-8后c-jun蛋白的表达上升.结论 ①成功建立吗啡成瘾大鼠模型;② Cd内注入CCK-8可使吗啡成瘾大鼠的戒断症状明显减少;③ Cd内注射CCK-8可提高c-jun蛋白的表达.提示CCK-8能调控吗啡成瘾大鼠戒断症状的产生及Cd内c-jun蛋白的表达.
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小鼠p27kip1真核表达载体的构建及其对单个核细胞周期的影响
目的 构建小鼠p27kip1真核表达载体,探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响,为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础.方法 将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上,并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中,应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期.结果 经酶切分析和测序鉴定,成功构建了小鼠pcDNA3.0/ p27kip1重组质粒;经pcDNA3.0/ p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多,其生长增殖不仅受到明显抑制,而且处于G1/G0期的细胞明显增加,处于S期的细胞明显减少.结论 构建的pcDNA3.0/ p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达,且高表达的pcDNA3.0/ p27kip1可以通过抑制细胞周期的方式抑制单个核细胞的生长.
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MC002对A-549、HT-1080荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用的研究
目的 MC002是雷公藤内酯醇的半合成衍生物,本实验主要观察和评价MC002对人肺腺癌A-549、人纤维肉瘤HT-1080小鼠模型的肿瘤抑制作用.方法 用Balb/C裸小鼠接种人肺腺癌A-549瘤株和人纤维肉瘤HT-1080瘤株造成小鼠肿瘤模型,以MC002对荷瘤小鼠的相对肿瘤增殖率、瘤重、抑瘤率为指标评价MC002对小鼠的抑瘤作用.结果 对于两种不同瘤株,MC002各剂量组体积明显小于模型对照组,瘤重均降低,在大剂量组1.5(mg·kg-1)时T/C%在给药几次后均小于60%(P＜0.05),且具有量效关系.结论 MC002能有效抑制人肺腺癌A-549、人纤维肉瘤HT-1080荷瘤小鼠体内肿瘤生长.MC002有可能发展成为一种新型抗癌药.
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褪黑素对肝癌细胞系HepG2的增殖抑制作用及其与G蛋白-cAMP信号途径的关系
目的 研究褪黑素(melatonin,MT)对肝癌细胞系HepG2细胞的增殖抑制作用以及其对G蛋白-cAMP通路的影响.方法 采用MTT法检测MT对HepG2细胞生长的影响,放免法检测细胞内cAMP水平,Western blot法检测抑制型G蛋白α1(Gαi1)、抑制型G蛋白α2(Gαi2)、抑制型G蛋白α3(Gαi3)、刺激型G蛋白(Gαs)表达水平.结果 MTT检测结果表明,MT在10-8～10-5 mol·L-1的浓度范围内,72 h共培养后,可有效抑制HepG2细胞增殖,且呈一定的时间浓度依赖关系.为进一步研究MT细胞增殖抑制作用与G蛋白-cAMP信号通路的关系,检测浓度为10-5 mol·L-1的MT作用HepG2细胞后0、15、30、45、60、90、120 min后Gαi1、Gαi2、Gαi3和Gαs和细胞内cAMP水平变化,结果发现MT作用HepG2细胞30 min后可明显下调Gαi1、Gαi2、Gαi3的表达水平,但对Gαs表达无明显影响,同时发现MT处理后cAMP水平有下降的趋势,但是没有统计学意义.结论 MT呈时间浓度依赖性的抑制体外培养的HepG2细胞生长,其机制可能与影响G蛋白-cAMP信号通路有关.
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ERK1/2介导H2O2预处理对抗氧化应激损伤的保护作用
目的 探讨H2O2预处理能否激活ERK1/2及ERK1/2在H2O2预处理引起的适应性细胞保护中的作用.方法 在PC12细胞,建立H2O2预处理对抗高浓度H2O2诱导细胞损伤的实验模型.应用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫印迹法(Western blot)测定ERK1/2蛋白的表达及procaspase-3的表达.结果 100 μmol·L-1 H2O2预处理PC12细胞90 min能明显地保护PC12细胞对抗300 μmol·L-1 H2O2引起的损伤,使细胞存活率增加,细胞凋亡率降低及procaspase-3增多.H2O2预处理对ERK1/2具有明显的激活作用:诱导胞质ERK1/2磷酸化及促进其核转移.在H2O2预处理前30 min应用ERK1/2抑制剂UO126(10 μmol·L-1)可明显地阻断H2O2预处理的抗细胞毒性及抗细胞凋亡作用.结论 H2O2预处理能激活ERK1/2,ERK1/2介导H2O2预处理的适应性细胞保护作用.
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CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响
目的 探讨CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响.方法 分离纯化大鼠PIMs,分别用LPS、CCK、LPS+CCK、PMA、SC-3088、LPS+PMA、LPS+SC-3088、CCK+PMA、CCK+SC-3088、LPS+CCK+PMA、LPS+CCK+SC-3088孵育一定时间,采用125I-cAMP放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,用放射激酶法测定PKA活性.结果 单独应用PMA和SC-3088孵育大鼠PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性与正常对照组相比无明显变化(P>0.05).PMA可升高LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性(P<0.01),SC-3088则可使LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01).分别应用PMA、SC-3088与CCK共同孵育,则CCK+PMA组细胞内cAMP含量和PKA活性高于单独应用CCK组(P<0.01),CCK+SC-3088组则降低(P<0.01).与LPS+CCK组相比,PMA+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性升高(P<0.01),而SC-3088+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01).结论 在LPS诱导的大鼠PIMs,CCK-8可通过激活cAMP-PKA信号通路发挥抗炎作用；DAG-PKC信号通路的活化对cAMP-PKA信号通路有正性调节作用.
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吸烟、硝酸甘油对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞钙浓度的影响
目的 研究吸烟、硝酸甘油对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度([Ca2+]I)的影响,探讨吸烟对动脉粥样硬化形成及硝酸甘油的生物效应的作用.方法 复制家兔动脉粥样硬化模型,分离血管平滑肌细胞.Fluo-3/AM负载细胞,应用流式细胞仪检测血管平滑肌细胞[Ca2+]I,激光扫描共聚焦显微系统测定单个血管平滑肌细胞内Ca2+的时空变化.结果 各组动物主动脉壁均见到程度不同的动脉粥样硬化斑块形成.动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞[Ca2+]I明显升高(48.45±5.31,与生理盐水对照组38.09±2.57比较,P<0.01);吸烟能增加动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞[Ca2+]I(56.48±2.99,与单纯动脉粥样硬化组48.45±5.31比较,P<0.01);硝酸甘油则能明显降低动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞[Ca2+]I(41.91±3.16,与单纯动脉粥样硬化组48.45±5.31比较,P<0.05);吸烟能明显抑制硝酸甘油降低血管平滑肌细胞[Ca2+]I的作用(47.99±5.10,与硝酸甘油组41.91±3.16比较,P<0.05).结论 吸烟能明显增加动脉粥样硬化血管平滑肌细胞[Ca2+]I,硝酸甘油则能明显降低动脉粥样硬化血管平滑肌细胞[Ca2+]I,吸烟能抑制硝酸甘油的生物学效应.
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罗汉果多糖对小鼠免疫功能的影响
目的 研究罗汉果多糖(SGPS1)对小鼠免疫功能的影响.方法 测定小鼠胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素形成和淋巴细胞转化率.结果 SGPS1在高、低剂量下均明显使小鼠胸腺、脾脏等免疫器官重量增加;使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率及吞噬指数增加;提高小鼠血清溶血素水平;增加小鼠淋巴细胞转化率及胸腺、脾脏指数.结论 SGPS1有增强机体免疫功能的作用.
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硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响
目的 观察硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)所致大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)的影响,探讨其对肺脏的作用机制.方法 ♂SD大鼠共64只,随机分为8组,每组8只:Ⅰ:3 h空白对照组;Ⅱ:LPS 3 h组;Ⅲ:6 h空白对照组;Ⅳ:LPS 6 h组;Ⅴ:LPS+NaHS 低剂量组;Ⅵ:LPS+NaHS中剂量组;Ⅶ:LPS+NaHS 高剂量组;Ⅷ:LPS+PPG 组.LPS 3 h和 LPS 6 h 组给予LPS,其相应空白对照组给予生理盐水,分别在3 h或6 h时处死大鼠;LPS+NaHS 低、中、高剂量组和LPS+PPG 组分别在给 LPS 3 h时腹腔注射低、中、高剂量氢硫化钠(NaHS)或炔丙基甘氨酸(PPG),再观察3 h后处死大鼠.光、电镜下观察肺组织形态学改变,检测肺系数、肺湿/干重比(W/D)、血浆中H2S含量、肺组织胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性,以及肺组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化.结果 LPS 3 h和LPS 6 h组与相应的空白对照组比较,光、电镜下肺组织明显受损,超微结构明显改变,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量升高,血浆中H2S的含量、肺组织CSE以及SOD、GSH-Px活性降低.LPS+NaHS 低、中、高剂量组与LPS 6 h组比较,光、电镜下肺组织受损情况均有不同程度改善,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量降低,血浆 H2S含量、肺组织CSE以及SOD、GSH-Px 活性升高.LPS+PPG组与LPS 6 h组比较,光、电镜下肺组织损伤无改善,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量升高,血浆中H2S的含量、肺组织CSE和SOD活性降低,肺组织GSH-Px活性无明显变化.结论 CSE/H2S体系可能参与内毒素性ALI的病理生理过程,外源性补充H2S可减轻内毒素性ALI.
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蜜环菌菌索多糖对四氧嘧啶致胰岛细胞损伤的保护作用
目的 研究蜜环菌菌索多糖(AMP-1)对四氧嘧啶(AXN)致胰岛细胞损伤的影响.方法 培养大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1),以AXN损伤细胞,培养液中加入不同浓度的AMP-1(2、10、50、100、500、1 000 mg·L-1),用MTT法测细胞存活率;使用放免法检测不同浓度AMP-1对INS-1细胞葡萄糖刺激性的胰岛素分泌量的变化;用比色法检测INS-1细胞一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)等指标的变化.结果 AMP-1可减少AXN对INS-1细胞的损伤,AMP-1处理组的INS-1细胞存活率增加；在5.6 mmol·L-1、16.7 mmol·L-1葡萄糖刺激下,AMP-1(50、100、500、1 000 mg·L-1)剂量依赖性地促进了INS-1细胞葡萄糖刺激性的胰岛素分泌；AMP-1能使INS-1细胞NOS活性降低,MDA和NO含量减少,同时增强了SOD的活性,增加了GSH的含量.结论 一定浓度范围的AMP-1对葡萄糖刺激下INS-1细胞的胰岛素分泌的促进作用,可能与AMP-1能够增加细胞清除自由基能力有关.
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紫花前胡苷在大鼠体内的药代动力学研究
目的 研究中药狭叶羌活和宽叶羌活主要化学成分之一的紫花前胡苷(ND)在大鼠体内的药代动力学.方法 ♂SD大鼠(200～220)g随机分组,每组5只,单次尾静脉注射,给药量为80 mg·kg-1,从眼眶静脉丛分时取血、处理.采用反相高效液相色谱法、恒速洗脱,应用外标法测定ND在SD系大鼠血浆中的浓度,应用3P87软件计算主要药代动力学参数.结果 在所建立的方法学下,ND的保留时间为6.7 min;标准曲线为Y=2.0×10-4X+0.4(r=0.9999),在0.2～80 mg·L-1的血浆浓度范围内呈良好的线性关系;血浆中低检测浓度为0.01 mg·L-1(S/N=3),低定量浓度为0.1 mg·L-1(S/N=10);在1.0、10.0和40.0 mg·L-1低、中、高3个浓度下的提取回收率为76.23～83.72;日内和日间RSD均小于5.60%(n=3).在室温和冷冻-解冻试验中,ND具有良好的稳定性.按80 mg·kg-1单剂量单次静脉给药后,ND在大鼠体内的药代动力学过程符合开放二房室模型,主要药代动力学参数t1/2α、t1/2β、AUC、Vc、Vp、Vss和CL分别为7.02 min、219.27 min、1384.34 mg·min·L-1、0.92 L·kg-1、6.04 L·kg-1、6.96 L·kg-1和0.06 L·kg-1·min-1.结论 所建立的方法快速、准确、简便,能够满足ND药代动力学研究要求.按80 mg·kg-1单剂量单次静脉给药后,ND在大鼠体内分布广泛,消除速度中等.
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血红素加氧酶-1重组乳酸乳球菌灌胃对内毒素血症大鼠肠道的保护作用
目的 利用基因工程原理合成携带血红素加氧酶-1(HO-1)基因的乳酸乳球菌,通过对正常大鼠灌胃后, 观察其是否有对内毒素血症大鼠肠道肠粘膜保护效应,及减轻肠道炎症反应.方法 将24只健康清洁级♂SD大鼠随机分为携带HO-1基因的乳酸乳球菌灌胃组(HO-1组,n=8)、乳酸乳球菌灌胃组(LL组,n=8)、谷氨酰胺灌胃组(Glu组,n=8).分别给予携带HO-1基因的乳酸乳球菌、乳酸乳球菌或谷氨酰胺,每日1次,共4次.d 4腹腔内注射内毒素,12 h后取末端回肠.比较各组动物的死亡率,检查肠组织病理学变化,并检测肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α) 、白细胞介素10 (IL-10)含量和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达量.结果 与LL组比较,HO-1组的生存率均明显升高(P<0.05);HO-1组和Glu组chiu′s评分和肠组织MPO活性明显降低(均P<0.01);肠组织TNF-α的含量明显减低(P<0.01),IL-10的含量却明显升高(P<0.01);HO-1的含量明显增加(P<0.01);与Glu组比较,HO-1组的IL-10的含量和HO-1的含量明显增加(P<0.01,P<0.05).结论 携带HO-1基因的乳酸乳球菌对内毒素血症大鼠肠粘膜有较好的保护作用,且能明显减轻肠道炎症反应.
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非甾体抗炎药防治糖尿病视网膜病变的研究进展
糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病严重和常见的微血管慢性并发症之一,其发病机制复杂,至今尚未完全阐明.大量资料表明,炎症参与了糖尿病视网膜病变的发生、发展,非甾体抗炎药(NSAIDs)通过抑制炎症因子或炎症介质的表达,控制视网膜炎症反应,可以减轻DR视网膜的损伤.如今,NSAIDs已经成为研究药物治疗DR的热点之一.
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TRPM8的研究进展
TRP(transient receptor potential)离子通道是一类广泛存在于细胞膜上的跨膜蛋白质,可以辨别酸甜苦辣等各种味觉和温暖、冷、热等各种温度觉.TRP通道亚型TRPM8初作为一种前列腺特异性蛋白被克隆出来,并可在热敏反应中被冷刺激和薄荷醇激活.TRPM8可以感知温度觉和痛觉,并可缓解疼痛,具有重要的研究意义.该文拟就当前TRPM8的生物物理学、门控机制和这类TRP通道的药理及病理生理机制等进行综述.
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内皮素系统与心肌肥厚
心肌肥厚是心脏对神经介质和压力超负荷等应激反应的一种代偿性机制.内皮素(ET)作为一种具有强大血管收缩作用的活性多肽,在心血管系统,特别是血管内皮细胞、平滑肌细胞和心肌细胞,ET对正常功能的调节起着重要的生理作用.局部心肌组织中ET过度生成与心肌肥厚的发生密切相关,心肌组织中的ET-1通过与特异性的受体结合,并与局部组织中其它相关的血管活性物质相互作用,介导了心肌肥厚的发生和发展过程.内皮素通过ETA受体诱导心肌细胞的肥厚和心肌成纤维细胞的增生,ETB受体则在心肌肥厚的发生和发展中均起作用.内皮素受体作为新的药物靶点,已经成为人们研究的热点,相应的受体拮抗剂的研究也取得了很大的进展.
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Toll样受体与心脏疾病
Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是先天性免疫系统的重要受体,可识别不同的病原体,激活快速先天免疫反应.TLRs也可被宿主源性分子激活,不仅在免疫细胞表达,在内皮和心肌细胞也有高表达.大量研究表明,TLRs参与了心肌梗死、心力衰竭、心肌炎等心脏疾病的发生和发展,被认为是先天性免疫和心脏疾病之间的重要联系.TLRs可能是心脏疾病防治的新靶点.
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上皮间质转化的信号转导调控及药物开发
上皮间质转化(epithelial-mesenchymal-transition,EMT)是胚胎形成过程中的关键步骤,研究表明其在原发性肿瘤转移过程中同样发挥了重要作用.参与EMT的信号通路包括Wnt/β-catenin、Notch、Hedgehog、TGFβ和生长因子受体等,针对相应信号通路的药物成为有效的恶性肿瘤治疗手段.
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梓醇对L-谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用
梓醇是地黄中含量较高的活性成分,研究表明其对动物模型及培养细胞有明显神经保护作用[1～3].本室研究发现,梓醇可保护Aβ25～35损伤PC12细胞及脑内注射Aβ25～35拟AD小鼠的胆碱能神经系统功能,改善AD的病理变化,但其作用机制不明,既不是胆碱酯酶抑制剂,也不是M受体激动剂或阻断剂[4].兴奋性神经递质谷氨酸(glutamate,Glu)神经毒性在AD发病过程中起重要作用[5],梓醇的神经保护作用是否与影响L-Glu的毒性作用有关,本文利用PC12细胞对此进行了研究.
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昆明山海棠联合环孢素A防治小鼠急性移植物抗宿主病
移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)是影响异基因造血干细胞移植患者长期生存和生活质量的重要因素之一.临床常用的治疗包括糖皮质激素、环孢素A等免疫抑制剂,副作用大、费用高.昆明山海棠(tripterygium hypoglaucum hutch,THH)是一种中药免疫抑制剂,具有肾上腺皮质激素类疗效但无激素类副作用,停药后无反跳和戒断症状,且价格低廉.本研究拟将其应用于小鼠清髓性异基因骨髓移植模型中,以观察其是否有预防aGVHD的作用,通过测定受鼠血浆INF-γ、IL-4、IL-10浓度来探讨其可能的作用机制,并观察其是否能够减少CsA的用量.
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人PPARγ1LBD融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化
目的 制备高纯度的人PPARγ1LBD融合蛋白,为筛选其配体奠定基础.方法 以人脂肪组织总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增出人PPARγ1LBD基因的cDNA片段,将其插入表达载体pMAL-p2X的麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein,MBP)编码基因malE的下游,转化宿主菌E.coli.TB1.并对重组质粒在大肠杆菌TB1中的表达条件进行了优化.结果 经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,获得分子量为909bpDNA条带;当诱导剂IPTG浓度为0.4 mmol·L-1,30℃振荡诱导培养6 h时,重组菌TB1高效表达MBP-PPARγ1LBD融合蛋白,表达量可达胞质总蛋白的38.54%.结论 成功构建了能在TB1中高效表达人PPARγ1LBD融合蛋白的重组质粒,获得了具有高生物活性的融合蛋白.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 04 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
