中国药理学通报杂志
Chinese Pharmacological Bulletin 중국약리학통보
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国药理学会
- 影响因子： 1.54
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-1978
- 国内刊号： 34-1086/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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哇巴因对心肌细胞钙瞬变及收缩力的作用
目的 检测哇巴因对正常大鼠和阿霉素所致心衰大鼠左心室肌细胞的收缩力、钙瞬变和舒张期钙影响.方法 腹腔注射阿霉素制备大鼠心衰模型,以改良的Langendorff装置分离心肌细胞,负载Fluo-4钙荧光染料后采用IonOptix可视化细胞动缘探测系统检测哇巴因对大鼠心肌细胞收缩功能、舒张期钙及钙瞬变的变化.结果 哇巴因可浓度依赖性增加正常大鼠心肌细胞收缩力和钙瞬变,3×10-7 mol·L-1哇巴因即明显增加收缩力和钙瞬变,但对心衰大鼠心肌细胞,1×10-5 mol·L-1哇巴因才明显增加心肌细胞收缩力和钙瞬变;哇巴因也可增加正常大鼠和心衰大鼠心肌细胞舒张期钙.结论 哇巴因能够增加心肌细胞收缩力、钙瞬变和舒张期钙,阿霉素所致心衰大鼠心肌细胞较正常细胞不敏感.
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全反式维甲酸对HFL-Ⅰ细胞α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、热休克蛋白47表达的影响
目的 研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47) mRNA和蛋白表达的影响.方法 体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF-β1和ATRA分别作用3 d对HFL-Ⅰ细胞增殖能力的影响.随后分为6组:对照组、5 μg·L-1 TGF-β1组、10 μmol·L-1 ATRA组、5 μg·L-1 TGF-β1+0.1 μmol·L-1 ATRA组、5 μg·L-1 TGF-β1+1 μmol·L-1 ATRA组、5 μg·L-1 TGF-β1+10 μmol·L-1 ATRA组,RT-PCR和Western blot方法分别检测各实验组细胞中α-SMA,Collagen-Ⅰ,HSP47 mRNA和蛋白的表达.结果 ① MTT法检测结果显示不同浓度的TGF-β1可刺激HFL-Ⅰ细胞增殖,呈浓度依赖性(P<0.05);不同浓度的ATRA对HFL-Ⅰ细胞增殖能力均有明显抑制作用,并随药物浓度的增加而增强(P<0.05).② 5 μg·L-1 TGF-β1诱导后,HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05).③ ATRA以浓度依赖性方式下调经TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mRNA和蛋白的表达(P<0.05).结论 ATRA能够抑制TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞的分化,其作用机制可能与降低Collagen-I、HSP47表达有关.
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棉花皮苷的抗氧化活性及对肝癌细胞生长的抑制作用研究
目的 探讨棉花皮苷的抗氧化性及对肝癌细胞生长的抑制作用.方法 本研究首次应用化学发光法和分光光度法系统评价了棉花皮苷对超氧阴离子自由基(O·2)、羟基自由基(·OH)、H2O2等活性氧和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)自由基的清除作用.采用MTT 实验评价了棉花皮苷对人肝癌HepG2细胞生长的影响.结果 棉花皮苷对O·2、·OH、H2O2和DPPH·等自由基均有较强的清除能力.与常用的抗氧化剂Vit C相比,其抗氧化效果明显强于Vit C.棉花皮苷可以以剂量及时间依赖方式抑制肝癌细胞生长、增殖.结论 棉花皮苷具有较强的抗氧化和抗肝癌生物活性.
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知母皂苷对Aβ25-35引起的巨噬细胞炎症介质释放的抑制作用及信号转导机制
目的 观察知母皂苷(SAaB)是否能对抗淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)引起的巨噬细胞炎症介质释放并探讨其信号转导通路的影响.方法 小鼠腹腔巨噬细胞培养24 h,加入不同浓度SAaB(10、30和100 μmol·L-1)或加入不同的阻断剂(诱导性一氧化氮合酶阻断剂SMT、MEK1的特异性阻断剂PD98059、p38MAPK特异性阻断剂SB203580和PI3K特异性阻断剂LY294002),之后加入Aβ25-35 (20 μmol·L-1)继续培养.Aβ25-35作用2 h后,采用Western blot观察巨噬细胞磷酸化Akt/PKB蛋白表达水平的改变.Aβ25-35作用48 h后,取巨噬细胞培养上清液分别测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)的含量变化.结果 PD98059和 LY294002均可明显抑制Aβ25-35引起的巨噬细胞TNF-α产生增加和磷酸化Akt/PKB表达明显增加.SMT可完全对抗Aβ25-35引起的NO释放增加.SAaB可明显抑制Aβ25-35引起的TNF-a和NO的产生增加,并呈明显的浓度依赖性.SAaB也可明显抑制Aβ25-35引起磷酸化Akt/PKB表达增加.结论 SAaB能够明显的抑制Aβ25-35引起的巨噬细胞炎症因子释放,这种抑制作用部分通过SAaB抑制Akt/PKB信号转导通路产生.
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海参硫酸软骨素抑制小鼠黑色素瘤肺转移作用的研究
目的 海参硫酸软骨素(sea cucumber chondroitin sulfate,SC-CHS)由美国肉参中分离所得,研究其结构及对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞实验性肺转移模型的抑制作用.方法 采用MTT法检测了SC-CHS对B16-F10细胞生长的影响;细胞黏附实验研究了SC-CHS对B16-F10细胞黏附能力的影响;体内实验,预先腹腔给药5 d后,建立实验性肺转移模型,继续腹腔注射SC-CHS 20d后,检测小鼠肺转移灶形成,血清中唾液酸的含量、γ-谷氨酰转肽酶活力和肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量.结果 实验结果显示SC-CHS体外对B16-F10细胞的生长没有影响,但可以明显降低B16-F10细胞同基质和血管内皮细胞的黏附能力(P<0.05).SC-CHS剂量组小鼠的肺转移灶数量明显减少(P<0.01),平均转移抑制率为62.66%,血清唾液酸含量和γ-谷氨酰转肽酶活力明显降低(P<0.01),肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量明显下降(P<0.01).结论 SC-CHS能抑制肿瘤细胞在小鼠体内的转移和生长,其机制可能与降低肿瘤细胞与基质的黏附能力和细胞的转移能力有关.
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柚皮苷对乳鼠成骨细胞增殖及c-fos、c-jun表达的影响
目的 研究柚皮苷(naringin)对体外培养的小鼠成骨细胞增殖及c-fos和c-jun表达的影响.方法 取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将柚皮苷以0.1、1、10 μmol·L-1 3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT 法观察各组对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线,用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphosphatase,ALP)活性,RT-PCR法检测成骨细胞c-fos和c-jun的转录水平.结果 细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随时间延长而增加,中、高浓度的柚皮苷能提高成骨细胞的ALP活性,促进c-fos mRNA表达(P<0.01),对成骨细胞c-jun mRNA表达增强作用不明显(P>0.05).结论 低浓度柚皮苷(0.1 μmol·L-1)对骨更新作用不明显,而中、高浓度的柚皮苷(1、10 μmol·L-1)能通过上调c-fos mRNA表达,促进成骨细胞的生成功能,增强骨更新.柚皮苷不是通过促进c-jun表达来促进成骨细胞增殖与分化的.
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枇杷叶三萜酸对博来霉素致大鼠肺纤维化的干预作用
目的 观察博来霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型的超微病理过程,肺组织匀浆MDA含量、SOD活性,血清iNOS、eNOS、NO活性的动态变化及枇杷叶三萜酸(TAL)对其的影响.方法 通过气管内一次性滴注博来霉素(5 mg·kg-1)复制大鼠肺纤维化模型.治疗组于造模后d 2开始灌胃给予150 mg·kg-1 TAL.各组大鼠于给药后d 7、14、28随机取样8只.采集血清,留取肺组织制备肺组织匀浆,分别测定匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清中一氧化氮(NO)含量、诱生型及内皮型一氧化氮合酶(iNOS、eNOS)活性.制备电镜标本行电镜观察.结果 电镜可见,模型7 d组大鼠Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮胞质水肿,线粒体肿胀,嵴空化.血管内皮细胞肿胀,肺泡隔胶原增多.肺间质及肺泡腔内炎性细胞增多.14、28 d BLM组Ⅰ型肺泡上皮胞质水肿更明显,Ⅱ型细胞较7 d BLM组减少,巨噬细胞凋亡增加,间质纤维组织增生明显.TAL能明显改善模型组大鼠肺脏组织结构,减轻肺纤维化增生程度.与正常组相比,模型组各时间段血清iNOS活性、肺匀浆MDA含量均升高,而eNOS活性下降(P<0.01 or P<0.05);模型7、14 d血清NO含量增加,肺组织匀浆SOD活性下降(P<0.01 or P<0.05),模型组28 d恢复正常.TAL给药可降低各时段增高的iNOS、NO及MDA含量,同时升高SOD及eNOS活性(P<0.01 or P<0.05).结论 博来霉素诱发大鼠肺纤维化早期以肺泡炎为主,28 d肺纤维化为主要病变.肺内一氧化氮合酶的含量变化,NO的大量生成及过氧化可能是促使肺纤维化形成的重要因素,TAL对肺纤维化的防治作用可能与其调节iNOS、eNOS比例、抗脂质过氧化有关.
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海带多糖对愤怒心理应激大鼠血管舒缩功能影响的实验研究
目的 研究海带多糖对愤怒心理应激大鼠动脉环舒缩功能的影响.方法 将大鼠分为对照组、模型组、海带多糖低剂量组(LP-L)、海带多糖高剂量组(LP-H)及低分子肝素组,造模大鼠通过愤怒心理应激建立内皮损伤模型.造模后各组大鼠进行旷场实验并制备胸主动脉环,分别记录血管在累积浓度乙酰胆碱(ACh)、去甲肾上腺素(NE)诱导后的舒缩反应,以及NO合成酶抑制剂(L-NAME)孵育后累积浓度硝酸甘油及NE对血管舒缩反应的影响.结果 模型组、LP-L、LP-H和肝素组旷场实验得分明显高于对照组.与对照组比较,模型组对ACh诱导的血管舒张反应明显减弱,对NE诱导的血管收缩反应明显增强;与模型组比较,LP-H对ACh诱导的血管舒张反应明显增强,对NE诱导的血管收缩反应明显减弱,LP-L和肝素组血管舒缩反应无明显变化.L-NAME孵育后,模型组、LP-L、LP-H和肝素组对硝酸甘油引起的舒张反应与对照组比较均明显减弱,对NE诱导的血管收缩反应均明显增强.但是与模型组比较,LP-H、LP-L对NE引起的血管收缩反应明显减弱,对硝酸甘油引起的舒张反应无明显变化.肝素组血管舒缩反应与模型组比较无明显变化.结论 海带多糖对愤怒心理应激大鼠的血管舒缩功能具有一定的调节作用.
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甘氨酰谷氨酰胺对缺氧/复氧损伤心肌细胞的保护作用及机制研究
目的 观察甘氨酰谷氨酰胺(Gly-Gln)对缺氧/复氧(H/R)损伤后心肌细胞凋亡、线粒体膜电位及心肌酶释放的影响,探讨Gly-Gln对心肌H/R损伤的防治作用及机制.方法 利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立体外心肌H/R模型,实验分为Control组,H/R组,H/R+Gly-Gln(1,4,16 mmol·L-1)组,Gly-Gln(1,4,16 mmol·L-1)组.采用MTT法测定各组心肌细胞存活率;并检测各组培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量;以Annexin V联合PI染色法检测各组心肌细胞凋亡率;以JC-1为荧光分子探针检测各组心肌细胞线粒体膜电位(△Ψm)变化.结果 H/R组心肌细胞活力低于对照组(P<0.01),而培养液中心肌细胞释出的LDH、CK含量则高于对照组(P<0.01);H/R+Gly-Gln组心肌细胞活力高于H/R组(P<0.01),而培养液中LDH、CK含量则低于H/R组(P<0.05),其效应在一定浓度范围内呈剂量依赖关系.H/R组心肌细胞凋亡率升高,线粒体膜电位明显低于对照组(P<0.01);H/R+Gly-Gln组心肌细胞凋亡率较H/R组降低(P<0.05),且心肌细胞线粒体膜电位升高,与H/R组比较差异有显著性(P<0.01).结论 Gly-Gln可对抗H/R损伤,发挥细胞保护作用,维持心肌细胞活力,减少心肌细胞H/R损伤所致心肌酶(LDH、CK)释放,并可抑制心肌细胞凋亡,具体机制可能与其稳定心肌细胞线粒体膜电位等有关.
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甘遂醋炙前后对脾淋巴细胞活力和腹腔巨噬细胞释放NO的量效关系比较研究
目的 比较甘遂醋炙前后对脾淋巴细胞活力和腹腔巨噬细胞释放NO的量效关系,初步探讨甘遂醋炙减毒机制.方法 采用MTT法分析脾淋巴细胞活力和Griess法分析大鼠腹腔巨噬细胞NO释放情况,比较甘遂生品、清炒品、醋润品和醋炙品的致炎毒性及量效关系比较.结果 在9.5～4 750 mg·L-1浓度范围内,甘遂生品组与阴性对照组比较,能够促进脾淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞NO的释放(P<0.01),药物作用呈现一定的量效关系;甘遂清炒组、醋润组和醋炙组与甘遂生品组比较,均能抑制脾淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞NO释放(P<0.05),其抑制顺序为醋炙品>醋润品>清炒品,且抑制作用呈现一定的量效关系.结论 在9.5～4 750 mg·L-1浓度范围内,甘遂清炒品、醋润品和醋炙品均能降低甘遂的致炎毒性,且降低毒性作用呈现一定的量效关系,并提示在甘遂醋炙过程中加热和醋润两个炮制程序能够起到降低甘遂致炎毒性的协同作用,从而为探讨甘遂醋炙减毒机制提供了一定的依据.
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塞来昔布联合多柔比星对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响
目的 研究COX-2选择性抑制剂塞来昔布与多柔比星(doxorubicin,ADM)联合应用对乳腺癌MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞的抗肿瘤作用,探讨塞来昔布是否对多柔比星具有减毒增效作用.方法 实验分为对照组,塞来昔布组,多柔比星组和联合用药组.用MTT法检测药物对MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞的生长抑制效应;Western blot测定MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞bcl-2的表达;PI染色检测细胞凋亡;克隆形成法测定药物对MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞系的细胞毒作用.结果 MTT结果显示,30 μmol·L-1塞来昔布与0.625 mg·L-1多柔比星联合作用于MCF-7细胞的72 h存活率为68.53%,作用于Sk-Br-3细胞的72 h存活率为32.66%,较多柔比星单用能明显降低乳腺癌细胞的存活率,且具有时间和剂量依赖性.流式细胞仪PI染色结果显示,联合用药诱导的细胞凋亡率分别为MCF-7细胞59.7%,Sk-Br-3细胞65.8%,较单用多柔比星诱导的凋亡率(MCF-7细胞25.9%,Sk-Br-3细胞28.7%)明显提高.Western blot结果显示单用多柔比星可以使蛋白bcl-2表达下调,合用后较单用下调更加明显.两者联合处理乳腺癌细胞后,caspases-3的活性明显增强.结论 塞来昔布和多柔比星对乳腺癌MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞有增殖抑制及促凋亡作用,两药联合表现为协同或相加作用.
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芹菜素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响
目的 探讨黄酮类化合物芹菜素对大鼠实验性心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)时心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响,并分析心肌组织病理学损伤程度.方法 采用结扎左冠状动脉前降支,心肌缺血45 min,再灌注2 h制作缺血/再灌注模型.将大鼠随机分为8组,即正常组(normal group,Normal)、假手术组(sham operation group,Sham)、生理盐水缺血/再灌注组(saline ischemia-reperfusion group,NS)、溶剂对照组(solvent control group,Sol)、美托洛尔对照组(metoprolol control group,Meto)、芹菜素低、中、高剂量(1、2、4 mg·kg-1)用药组(apigenin low,medium and high dose treatment group,Api1,Api2,Api4).再灌注2 h后迅速取出心脏,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞;免疫组化法测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;做病理组织切片检查心肌损伤情况.结果 芹菜素各剂量组心肌细胞凋亡率明显低于NS组(P＜0.05),Api1,Api2,Api4能剂量依赖性地降低大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡率;芹菜素各剂量组剂量依赖性地提高大鼠心肌缺血/再灌注的Bcl-2 蛋白表达量(P＜0.05)、降低大鼠心肌缺血/再灌注的Bax、Caspase-3 蛋白表达量(P＜0.05);芹菜素各剂量组与NS组比较,心肌组织损伤的病理学变化明显减轻(P＜0.05).结论 芹菜素对缺血/再灌注心肌的保护效应可能与其抑制缺血/再灌注心肌细胞凋亡有关;芹菜素抗心肌凋亡作用的机制可能与其上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax、Caspase-3蛋白表达有关;芹菜素能明显减轻心肌组织损伤.
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高效液相色谱法测定兔肌肉组织顺式阿曲库铵浓度
目的 建立兔肌肉组织顺式阿曲库铵浓度的高效液相色谱紫外检测法.方法 取单次静脉注射顺式阿曲库铵后兔膈肌和胫骨前肌,经匀浆、萃取后检测.色谱柱为Sphersorb SCX(4.6 mm×150 mm,5 μm,Phenomenex,USA),流动相为乙腈、硫酸钠和硫酸的混合液,梯度洗脱,流速:1 ml·min-1,柱温为室温;紫外检测波长为280 nm.结果 顺式阿曲库铵线性范围0.1～2.0 μg·g-1,低检测限10 ng·g-1,不受肌肉组织内源性物质干扰,回收率大于90.0%,日内、日间变异率均小于5.0%,冻融稳定性良好.结论 该方法特异性强,检测限低,灵敏度高,适于兔肌肉组织顺式阿曲库铵残留浓度检测.
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硼替佐米对转基因小鼠原代肝细胞HBV的抑制作用
目的 利用HBV转基因小鼠原代肝细胞评价蛋白酶体抑制剂硼替佐米的抗病毒效果.方法 采用改良的两步灌流法分离HBV转基因小鼠原代肝细胞;分别采用ELISA和荧光定量PCR法检测HBsAg和HBV-DNA的水平;采用MTT法观察不同浓度的硼替佐米对HBV转基因小鼠原代肝细胞和HepG2.2.15细胞的毒性,观察其作用24 h后细胞培养上清中病毒学指标的变化.结果 分离的原代肝细胞纯化后活细胞占0.90,HBsAg和HBV-DNA在5 d内均能稳定表达.药物作用24 h后,MTT结果显示260 μmol·L-1及以下浓度的硼替佐米对原代肝细胞无明显毒性,但对HepG2.2.15细胞显示较强的细胞毒性,其大无毒浓度为12.5 nmol·L-1.药物在0.026 μmol·L-1～ 26 μmol·L-1的浓度范围内对转基因小鼠原代肝细胞HBsAg和HBV-DNA有明显抑制作用.结论 硼替佐米在体外对HBV有抑制作用;HBV转基因小鼠原代肝细胞可用于抗肿瘤药物的抗HBV活性研究.
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UPLC-MS/MS同时测定Beagle犬血浆中原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷
目的 建立Beagle犬血浆中同时测定原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的超高效液相色谱-串联质谱分析方法.方法 Beagle犬单次股静脉注射88 mg·kg-1的注射用复方荭草(冻干粉针),分时取血处理.色谱采用Waters BEH C18反相柱,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,质谱采用多反应离子监测(MRM)方式进行检测,用于定量分析的离子对分别为原儿茶酸m/z109.0→m/z152.8、异荭草素m/z449.2→m/z299.1、野黄芩苷m/z463.1→m/z287.1.结果 原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的线性范围分别为0.002～0.569、0.022～5.450和0.024～5.860 mg·L-1,方法 的准确度,日内、日间精密度和稳定性均符合要求.结论 该方法快速、灵敏、专属性强,可用于原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的药代动力学研究.
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靶向hTERT的特异性siRNA抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖机制研究
目的 筛选有效抑制肝癌细胞hTERT表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并检测其对hTERT蛋白表达、细胞凋亡的影响.方法 设计并合成针对hTERT的6条siRNA双链及一条阴性对照siRNA,以LipofectaminTM2000转染至肝癌SMMC-7721细胞.用磺基罗丹明B法(sulforhodamine B法,SRB法)测定干扰后细胞增殖的变化,RT-PCR测定hTERT mRNA的表达,筛选出有效序列.有效序列转染后,进一步采用Western blot法检测hTERT蛋白水平的变化,Annexin V-FITC/PI双染、流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 以SRB和RT-PCR法筛选出的两条有效siRNA:siRNA-2和siRNA-6,能明显抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,对细胞的抑制率分别为45.3%、38.2%,能高度沉默hTERT mRNA的基因,沉默率分别为80%、75%.二者还能明显下调hTERT蛋白表达(P<0.05),明显增加凋亡,凋亡率分别为20.23%、17.94%.结论 siRNA-2和siRNA-6能特异性沉默肝癌SMMC-7721细胞hTERT基因表达,抑制增殖,降低hTERT蛋白水平,诱导凋亡,为肝癌基因治疗提供了有力的实验依据.
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大气细颗粒物有机成分在体染毒对大鼠胸主动脉血管反应的影响及其与NO/NOS的关系
目的 探究大气细颗粒物PM2.5有机成分在体染毒对大鼠胸主动脉血管反应性的影响及其与血管内皮细胞NO/NOS系统的关系.方法 Wistar大鼠随机分为两组:①染毒组:PM2.5染毒溶液1 ml·kg-1·d-1,iv;②对照组:生理盐水1 ml·kg-1·d-1,iv.染毒10 d后,击晕大鼠,主动脉采血,用于检测血清一氧化氮(NO)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性.分离主动脉,用于离体主动脉实验和免疫组织化学染色分析,观察主动脉血管反应性和内皮细胞eNOS和iNOS蛋白表达.结果 PM2.5有机成分在体染毒后,可增强大鼠离体胸主动脉对60 mmol·L-1 KCl及苯肾上腺素(PE,10-5 mol·L-1)的收缩效应,减弱其对乙酰胆碱(ACh,10-9～10-5 mol·L-1)的舒张效应,但主动脉对硝普钠(SNP,10-9～10-5 mol·L-1)的舒张效应则不受影响.PM2.5有机成分在体染毒后,大鼠血清NO含量及iNOS活性增加,但eNOS含量则无明显变化;主动脉血管内皮细胞iNOS表达增加,eNOS表达减少.结论 PM2.5有机成分可影响大鼠胸主动脉环血管反应性,NO/NOS系统功能紊乱可能是其机制之一.
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番石榴叶天然成分抑制3T3-L1细胞成脂分化的研究
目的 观察番石榴叶天然成分槲皮素、槲皮素-3-O-(6″-芥子酸)-β-D-吡喃半乳糖苷(Quercetin-3-O-(6″-erucoyl)-β-D-galactopyranoside,QEG)及槲皮素-3-O-(6″-阿魏酸)-β-D-吡喃半乳糖苷(Quercetin-3-O-(6″-feruloyl)-β-D-galactopyranoside,QFG)对小鼠3T3-L1细胞成脂分化的影响.方法 诱导3T3-L1细胞成脂分化,油红O染色法测定脂滴含量,实时定量PCR(Q-PCR)检测丝氨酸蛋白酶脂肪因子adipsin,CCTTA增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)mRNA表达,Western blot检测C/EBPα和PPARγ的蛋白表达.结果 QFG和槲皮素都能抑制3T3-L1细胞成脂分化,而QEG对此没有作用.QFG能够剂量依赖性地抑制成脂分化,并且降低adipsin、C/EBPα和PPARγ mRNA及后两者蛋白表达,而对ERα和ERβ mRNA的表达没有影响.结论 QFG抑制细胞成脂分化的能力比槲皮素强,其作用主要是通过抑制C/EBPα和PPARγ的表达而实现的,而且可能与雌激素受体途径无关.
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芒柄花素对体外培养成骨细胞缺氧损伤的保护作用
目的 研究芒柄花素在缺氧培养条件下对成骨细胞增殖、细胞周期、凋亡和成骨分化等的影响.方法 采用酶消化法分离培养SD大鼠颅骨成骨细胞,并用三气培养箱建立缺氧模型.将细胞分为常氧对照组、缺氧对照组和缺氧加药组,其中缺氧加药组进一步分为10-6、10-5和10-4 mol·L-1组,分别加入10-6、10-5和10-4 mol·L-1芒柄花素.于缺氧处理36 h后分析各组的细胞存活率、LDH漏出率、细胞凋亡、细胞周期等,并用RT-PCR法检测缺氧诱导因子-1α、Bcl-2及Caspase-3的基因表达情况.缺氧处理48 h后检测ALP活性、钙化结节面积等成骨分化指标.结果 与缺氧对照组比较,芒柄花素可提高细胞存活率,降低LDH漏出率,减少细胞凋亡并提高G1期细胞百分比,提高HIF-1α和Bcl-2 mRNA的表达水平,抑制Caspase-3 mRNA的表达水平,对ALP活性和钙化结节面积等也有提高作用,且均呈现出剂量依赖性特点.结论 芒柄花素对成骨细胞缺氧损伤具有明显保护作用.
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4-苯基丁酸对果糖所致非酒精性脂肪肝的保护效应
目的 探讨4-苯基丁酸(PBA)对饮用果糖所致小鼠非酒精性脂肪肝的保护作用.方法 48只♀ ICR小鼠随机分为4组.对照组给予普通自来水喂养8周;果糖组给予30%果糖水溶液喂养8周;PBA组给予普通自来水喂养8周,后2周经腹腔注射给予PBA(100 mg·kg-1);PBA+果糖组给予富含30%果糖水溶液喂养8周,后2周经腹腔注射给予PBA(100 mg·kg-1).各组小鼠均自由进食标准饲料.实验结束后立即剖杀小鼠,采集血清和肝组织,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和肝脏组织TCH 和TG;HE染色分析肝脏组织病理学改变;油红O染色分析肝脏脂质沉积.RT-PCR测定小鼠肝脏脂肪酸合成酶(fas)、乙酰辅酶A羧化酶(acc)和硬脂酰辅酶A去饱和酶-1 (scd-1)mRNA表达.结果 与对照组相比,果糖组小鼠血清和肝脏TG及肝脏TCH的含量明显升高;HE染色显示,果糖组小鼠肝细胞脂肪变性;油红O染色证实,果糖组小鼠肝脏有明显脂质沉积;进一步研究显示,与对照组相比,果糖组小鼠肝脏fas,acc和scd-1 mRNA水平均明显上调.果糖组与PBA+ 果糖组比较显示,PBA干预可明显降低血清、肝脏TG含量及肝脏TCH含量,减轻果糖引起的肝脏脂质沉积;抑制果糖引起的肝脏fas,acc和scd-1表达上调.结论 PBA对饮用果糖所致的小鼠非酒精性脂肪肝有保护作用.
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海带在四氧嘧啶糖尿病大鼠模型中的降糖作用
目的 探讨海带在四氧嘧啶糖尿病模型大鼠中的降血糖作用及其机制.方法 健康♂ Wistar大鼠60只,随机取10只作为对照组,其余50只腹腔注射四氧嘧啶建立高血糖动物模型,饲料中添加含有海带的饲料喂养干预治疗,分为低(2.5 g·kg-1)、中(10 g·kg-1)和高(25 g·kg-1)3个剂量组.自动血糖仪测大鼠空腹血糖(FBG),酶联免疫吸附法检测血清胰岛素(Insulin)水平,硫代巴比妥酸法检测血清脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量,硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(NO)含量,黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 经海带治疗后,动物血清胰岛素水平较模型组升高(P<0.05),中、高剂量组动物FBG水平较模型组降低(P<0.05);其血清MDA和NO水平低于模型组,而血清SOD和GSH-Px活性高于模型组,其中中、高剂量组与模型组比较差异有显著性(P<0.05).各指标在中剂量与高剂量组之间差异无显著性(P>0.05).结论 海带可通过增强机体的抗氧化作用,促进胰岛细胞分泌功能恢复而发挥降血糖作用,其理想剂量为每日10 g·kg-1.
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氯沙坦抑制转录因子GADDl53/CHOP的激活在糖尿病大鼠肾脏中的保护作用
目的 探讨血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及转录因子GADDl53/CHOP表达的影响.方法 单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病,每日灌胃给予氯沙坦(40 mg·kg-1)共8周.应用免疫组织化学检测细胞增殖核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、GRP78和转录因子GADDl53/CHOP的表达与定位,TUNEL染色检测细胞凋亡部位,流式细胞术检测细胞凋亡程度,并对GRP78、GADDl53/CHOP表达水平进行半定量分析,同时观察尿蛋白、BUN、Scr、Ucr等反应肾功能的相关指标.结果 建模8周,糖尿病组大鼠较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多,GRP78、GADDl53/CHOP表达增强.氯沙坦治疗组较糖尿病组凋亡细胞数减少,GRP78表达减弱,明显抑制GADDl53/CHOP的表达.3组间PCNA阳性细胞数无差异.结论 氯沙坦部分通过影响内质网应激中GADDl53/CHOP凋亡途径减少肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用.
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盐酸二甲双胍对2型糖尿病大鼠波动性高血糖状态下血管内皮功能的影响
目的 观察盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride,MH)对2型糖尿病大鼠波动性高血糖状态下血管内皮功能的影响.方法 采用高脂饲料喂养加链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 35 mg·kg-1腹腔注射建立2型糖尿病(T2DM)大鼠模型,并依照空腹血糖变异系数将造模成功的T2DM大鼠分为波动高糖组和稳定高糖组,并将波动高糖组随机分为3组:MH 150 mg·kg-1·d-1组、300 mg·kg-1·d-1组和波动高糖对照组.药物干预8周,观察盐酸二甲双胍对波动性高血糖大鼠主动脉内皮,血浆肝细胞生长因子(HGF)、血浆糖基化终末产物(AGEs)、氧化型低密度脂蛋白受体-1盐酸二甲双胍组大鼠血浆HGF、AGEs、LOX-1及血清TNF-α、sICAM-1均较波动高糖组降低,血清抗氧化能力改善.结论 二甲双胍具有减轻血糖波动T2DM大鼠血管内皮损伤的作用,其保护作用可能与其减少脂质过氧化产物的产生,增强机体的抗氧化能力,减轻炎症反应,减少细胞黏附因子表达及糖基化终末产物的蓄积有关.
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黄连碱对L-NAME诱导高血压大鼠胸主动脉功能的影响
目的 探讨黄连碱对L-NAME致高血压大鼠胸主动脉舒缩功能的影响.方法 采用NO合酶抑制剂L-NAME制备大鼠高血压模型,然后每天灌胃给予黄连碱低(10 mg·kg-1)、中(30 mg·kg-1)、高(100 mg·kg-1)3个剂量;给药干预6周后采用体外血管环活性评价方法,评价各组大鼠胸主动脉的收缩和舒张功能.结果 L-NAME诱导大鼠高血压模型,其胸主动脉的收缩和舒张功能均受到影响.给予黄连碱6周,黄连碱可明显增强L-NAME诱导高血压大鼠血管平滑肌对细胞内钙释放引起的收缩反应,并降低外钙内流引起的血管收缩能力,但对大鼠血压无影响,对血管的收缩功能和内皮依赖的舒张功能影响不大.结论 L-NAME制备大鼠高血压模型主要与NO的减少有关,而黄连碱可能影响IP3-Ca2+通路,对L-NAME诱导大鼠高血压没有降压作用.
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灯盏细辛注射液多成分血浆蛋白结合率测定
目的 建立同时检测灯盏细辛注射液中6个成分在大鼠血浆中药物浓度的方法,并测定其体外血浆蛋白结合率.方法 采用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,采用HPLC法测定各成分的血药浓度及游离药物浓度,生物样本用乙酸乙酯液提取的方法.结果 在低、中、高3种浓度下,绿原酸、咖啡酸、1,5-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏乙素、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸的平均血浆蛋白结合率分别为(76.94±3.72)%、(91.57±0.96)%、(83.32±3.73)%、(91.66±0.71)%、(95.73±0.67)%、(94.21±0.65)%.结论 采用HPLC法对灯盏细辛注射液中的多个成分进行分离,方法简便、可靠、稳定.6个成分在大鼠体外均有较高的血浆蛋白结合率.
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UPLC法测定大鼠血浆中Liguzinediol浓度以及动力学研究
目的 建立测定大鼠血浆中Liguzinediol浓度的UPLC测定方法,探讨其在大鼠体内的药代动力学.方法 血浆样品经甲醇提取后,上清液经N2吹干流动相复溶后注入UPLC分析,色谱柱为UPLC HSS T3柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),流动相为甲醇-水(28:72,V:V),流速为0.4 ml·min-1,检测波长278 nm.SD大鼠6只,iv给药10 mg·kg-1后,用UPLC法测定给药后大鼠血浆中Liguzinediol的浓度,利用DAS软件拟合并计算其药代动力学参数.结果 Liguzinediol的血药浓度在0.41～52.4 mg·L-1范围内呈线性,提取回收率均>80%,日内、日间精密度<10%,符合生物样品分析要求.大鼠静脉注射10 mg·kg-1的Liguzinediol,其血药浓度(C)-时间(t)曲线呈二室模型,主要药动学参数T12β、AUC(0-∞)、CL分别为1.62 h、18.36 mg·h·L-1、0.71 L·h-1·kg-1.结论 该方法操作简便、快速、专属性强,可用于Liguzinediol的药代动力学及成药性研究.
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水通道蛋白-依赖性细胞迁移的研究进展
水通道蛋白(AQPs)是一类介导跨膜水运输的内在蛋白.近年来,一些研究成果证实,AQP具有介导细胞迁移的功能.该文综述了各种不同类型的AQPs-依赖性细胞迁移(AQPs-dependent cell migration):AQP1促进内皮细胞迁移;AQP4促进星形胶质细胞迁移;AQP3促进角膜上皮细胞、肠上皮细胞、皮肤角质形成细胞的迁移.此外,AQPs还能促进肿瘤细胞的迁移,增加肿瘤细胞的转移潜能.AQPs介导的细胞迁移与许多疾病有着内在联系,调控AQP的表达是一种尚待开发的治疗手段.
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B淋巴细胞刺激因子及其受体介导的免疫细胞信号转导
肿瘤坏死因子家族成员B淋巴细胞刺激因子(BLyS)与其受体BAFF-R、BCMA和TACI特异性结合后,启动下游MAPK和NF-κB等抗凋亡信号通路,是维持免疫细胞生存、分化以及成熟的重要因素.该文就BLyS/BLyS-受体介导信号转导通路调节免疫细胞功能,参与免疫性疾病的发生以及各信号通路间的相互调控予以综述.
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活性氧与内质网应激
内质网(endoplasmic reticulum,ER)是细胞加工蛋白质和贮存Ca2+的主要场所,对应激极为敏感,其功能紊乱时出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca2+平衡紊乱的状态,称为内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS).活性氧( reactive oxygen species,ROS)作为第二信使,在细胞生物学功能的调节中起着重要作用.细胞内氧化还原状态的改变促进了ROS的产生和凋亡诱导因子的激活,致使细胞凋亡的同时又加剧了细胞内氧化还原状态的改变.研究发现细胞内氧化还原水平的改变在ERS介导的细胞凋亡过程中承担重要的角色,推测ROS可能是ERS介导的凋亡通路的上游信号分子,该文就ROS与ERS之间的关系作一综述.
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高效液相法测定松果菊苷在脑缺血大鼠血浆和脑组织中的浓度
松果菊苷(echinacoside, ECH)是从新疆特色植物管花肉苁蓉中分离、纯化的一种苯乙醇苷类有效物质.研究表明[1-3],ECH具有较好的神经保护的作用.一种药物只有通过血脑屏障(blood brain barrier,BBB)并在中枢保持有效的浓度时,才能发挥药理作用.实验检测发现脑内含有原形ECH,推测ECH的中枢作用可能与其能透过BBB有关.用高效液相色谱法测定血液中ECH的质量浓度已有报道[4],但未见测定脑组织中原形ECH的文献报道.为此,本文对测定实验动物血液和脑匀浆中的ECH进行了研究.
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一种快速可靠筛选作用于细胞缝隙连接药物的方法建立
目的 建立一种可以快速有效地筛选能影响细胞缝隙连接(gap junction,GJ)功能药物的方法;为研制以GJ为靶点的新型药物提供技术手段.方法 构建能同时双向表达两种不同连接蛋白(connexins,Cxs)的质粒;用能表达Cx26/Cx32的质粒转染HeLa细胞,建立可以稳定表达Cx26/Cx32并形成异质性GJ的HeLa细胞模型.用荧光传递示踪法测定荧光示踪剂在细胞之间的传递,以此反映GJ的功能.观察公认的GJ激活剂--维甲酸(retinoid acid,RA)和GJ抑制剂--油酸酰胺(oleamide)对GJ功能的影响,检验该方法是否能够准确地检测出GJ功能.结果 Western blot和荧光传递示踪法的结果表明,转染含有Cx26/Cx32 cDNA质粒的HeLa细胞,可以稳定表达Cx26/Cx32;并能够形成可以传递荧光示踪剂在相邻细胞间的GJ.RA和油酸酰胺能分别增强和抑制荧光示踪剂的传递.结论 在转染Cx26/Cx32质粒并稳定表达Cxs的HeLa细胞上,用荧光传递示踪法测定GJ功能,可以快速准确地检测出药物对GJ的作用.该方法的建立为筛选作用于GJ的药物提供了一种有用的技术手段.
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淋巴细胞活性染色质诱导系统性红斑狼疮样小鼠模型
目的 建立活性染色质诱导系统性红斑狼疮(SLE)样小鼠模型.方法 从ConA活化的BALB/c小鼠脾淋巴细胞中提取活性染色质,分别于d 0、d 14、d 21和d 28以染色质100 μg在BALB/c小鼠尾根部及背部皮内注射免疫4次,诱导SLE样小鼠模型.目测半定量尿蛋白试纸法检测动物的尿蛋白变化,HE染色法检查动物的肾脏、脾脏病理改变,计算动物的胸腺和脾脏指数,MTT法检测ConA和LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖反应,全自动生化分析仪检测血清中Crea和BUN水平,ELISA法检测小鼠血清中ANA、抗dsDNA、IgG1、IgG2a、IL-10、IFN-γ水平,流式细胞术检测脾脏T、B淋巴细胞亚群变化.结果 诱导模型小鼠尿蛋白水平升高,出现肾小球肾炎、脾脏增生等病理改变;脾脏指数明显升高,LPS诱导的B淋巴细胞增殖反应增强;血清Crea、BUN、ANA、抗dsDNA、IgG1、IgG2a、IL-10和IFN-γ水平明显升高;脾脏CD19+、CD19+CD21+、CD19+CD23+、CD19+IgD+ B淋巴细胞亚群百分比明显升高,CD4+CD25+ T淋巴细胞百分比明显下降.结论 ConA活化淋巴细胞的染色质免疫同系BALB/c小鼠成功诱导了SLE样小鼠模型,其血清学、组织病理学及免疫学方面特征与人类SLE临床特征表现相似.
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Discovery Studio软件在分析中药成分透过血脑屏障中的应用
血脑屏障是药物能否进入脑组织发挥作用的重要屏障.中药有效成分的结构与其透过血脑屏障的能力有一定的关系.Discovery Studio软件对非糖苷类成分通过血脑屏障的分析结果与文献报道基本吻合,而对糖苷类成分则无法准确预测.
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TLR4、p-Akt在哮喘大鼠气道平滑肌迁移的作用及小青龙汤对其影响
目的 探讨Toll样受体4 (Toll-like receptor 4,TLR4)及p-Akt在哮喘发病中的作用及小青龙汤对气道平滑肌迁移的影响.方法 SPF级♂大鼠40只随机分为:正常对照组(A)、哮喘4周组(B)、哮喘8周组(C)、小青龙汤4周组(D)和小青龙汤8周组(E),每组8只.以卵清白蛋白 (OVA)致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型.测定气道阻力;观察气道壁嗜酸性粒细胞侵润情况;图像分析软件测定支气管管壁面积、平滑肌面积和平滑肌至上皮下基底膜距离;免疫组织化学方法检测TLR4、p-Akt蛋白表达.结果 B组、C组、D组和E组大鼠的WAt/Pi、WAm/Pi较正常对照组均增加(P<0.01),间距/Pi减小(P<0.01);B组和C组大鼠的WAt/Pi高于E组,间距/Pi则较两组明显缩短(P<0.05);TLR4在B组和C组气道平滑肌上呈阳性或强阳性表达,表达量高于A组 (P<0.01),C组亦高于B组(P<0.05),E组的表达量亦低于C组和D组 (P<0.01).p-Akt在B组、C组及D组的表达均高于A组(P<0.01),D组亦高于B组(P<0.05),E组低于B组和D组,与D组相比亦降低(P<0.05).结论 TLR4和p-Akt参与哮喘气道平滑肌的迁移,小青龙汤可能通过抑制TLR4和p-Akt的表达在哮喘气道重塑方面发挥一定的作用.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 04 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
